RU2390517C2 - Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода azotobacter - Google Patents
Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода azotobacter Download PDFInfo
- Publication number
- RU2390517C2 RU2390517C2 RU2008129928/13A RU2008129928A RU2390517C2 RU 2390517 C2 RU2390517 C2 RU 2390517C2 RU 2008129928/13 A RU2008129928/13 A RU 2008129928/13A RU 2008129928 A RU2008129928 A RU 2008129928A RU 2390517 C2 RU2390517 C2 RU 2390517C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacteria
- liquid
- medium
- ashby
- cultures
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Fertilizers (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и может быть реализовано в микробиологической промышленности для получения различных бактериальных удобрений. Способ включает культивирование бактерий на плотной среде Эшби, отличающийся тем, что предварительно из жидких элективных культур выделяют свободные аэробные азотофиксаторы с последующим их культивированием в чистые культуры на плотной питательной среде. Из чистых культур отбирают наиболее активно развивающиеся штаммы и переносят их в жидкую питательную среду, не содержащую азот. В полученную устойчивую бактериальную суспензию, стимулирующую рост сельскохозяйственных растений, добавляют микробиологический препарат на основе бактерий рода Псеводомонад и почвенный фильтрат. Все тщательно перемешивают, затем добавляют профильтрованную среду Эшби для азотобактера и олигонитрофилов с раствором микроэлементов по Федорову и осуществляют культивирование в ферментере при температуре 22-28°C при скорости вращения мешалки 180 об/мин в течение 10 суток - 4 раза в сутки по 2 часа. Изобретение позволяет получить устойчивую, хорошо тиражируемую бактериальную суспензию на исключительно синтетических средах. 4 ил., 1 табл.
Description
Изобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и может быть реализовано в микробиологической промышленности для получения различных бактериальных удобрений.
Широко известно использование штаммов азотобактера при производстве удобрений для стимуляции роста и повышения хозяйственной продуктивности сельскохозяйственных растений, произрастающих на обедненных азотом почвах.
Микробная ассоциация обладает определенными морфологическими, биохимическими и физиологическими характеристиками, способна длительное время (в течение периода вегетации) функционировать в песчаной почве, обеспечивая нормальный рост и развитие таких сельскохозяйственных культур, как томат и огурец.
Микробная ассоциация в питательном растворе (далее суспензия) представляет собой бурую, достаточно прозрачную жидкость без опалесценции (рН 6,9-7,2), с едва заметным земляным запахом, без определенного вкуса. Суспензия способна хранится при комнатной температуре без видимых изменений более 1 месяца (затем на ее поверхности начинает нарастать бело-серая пленка, структура которой под микроскопом дает основание предполагать, что она образована ассоциацией аэробных бактерий, которые присутствовали в суспензии), в холодильнике около года. В состав микробной ассоциации входят представители следующих родов Pseudomonas, Acinetobacter, Bacillus, Arthrobacter, Cellnmonas, Clostridium, Azotobacter, Azomonas (Краткий определитель бактерий Берги, 1980) и цианобактерии порядков Chroococcales, Nostocales. Микробная ассоциация хорошо закрепляется в песчаной почве, способна к свободной азотофиксации, быстро размножается, разрастаясь в виде буро-зеленого налета.
Известен штамм Azotobacter chroococum, используемый для получения бактериального удобрения под огурцы (пат. РФ №2074157, кл. C05F 11/08 2002 г. - аналог), включающий штамм бактерий Azotobacter chroococum ВКПМ-6012.
Недостатком данного штамма является относительно низкая конкурентная способность по сравнению с другими микроорганизмами, которые могут его вытеснять, а также и низкая ростовая активность. За счет этого он не может обеспечить необходимым количеством азота в почвах им обедненных такую требовательную к азоту культуру, как огурец.
В качестве прототипа может быть рассмотрен способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода Azotobacter (пат. РФ №2286324, кл. C05F 11/08, 2005 г.), включающий приготовление бактериального удобрения путем предварительного культивирования бактерий на питательной среде.
Недостатком данного прототипа является то, что добавляют к синтетическим средам Берка и Эшби элементы натуральной питательной среды, а именно кормовые дрожжи и не в постоянной концентрации, что не позволяет со 100% гарантией тиражировать один и тот же результат культивирования бактерий.
Техническим результатом данного изобретения является приготовление устойчивой, хорошо тиражируемой бактериальной суспензии на исключительно синтетических средах.
Этот результат достигается тем, что в способе приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода Azotobacter, включающем культивирование бактерий на плотной среде Эшби, предварительно из жидких элективных культур выделяют свободные аэробные азотофиксаторы с последующим их культивированием в чистые культуры на плотной питательной среде, из чистых культур отбирают наиболее активно развивающиеся штаммы и переносят их в жидкую питательную среду, не содержащую азот, в полученную устойчивую бактериальную суспензию, стимулирующую рост сельскохозяйственных растений, добавляют микробиологический препарат на основе бактерий рода Псеводомонад и почвенный фильтрат, представляющий собой жидкость, полученную после фильтрации надосадочной части раствора черноземной почвы в воде, через бумажный фильтр и фильтр Беркефельда, все тщательно перемешивают, затем добавляют профильтрованную среду Эшби для азотобактера и олигонитрофилов с раствором микроэлементов по Федорову и осуществляют культивирование в ферментере при температуре 22-28°С и скорости вращения мешалки 180 об/мин в течение 10 суток - 4 раза в сутки по 2 часа.
Примеры приготовления бактериального удобрения
Пример 1
Способ заключается в получении устойчивой ассоциации почвенных микроорганизмов, обладающих ярко выраженной способностью к свободной азотофиксации и хорошо приживающихся в легких почвенных смесях, обедненных азотом.
Микробную ассоциацию, условно «Стим», получаем за счет создания в ферментере «Биореактор З» сообщества микроорганизмов, а именно суспензии, стимулирующей рост сельскохозяйственных растений.
Из почвенных образцов (черноземы Мичуринского района) в жидких элективных культурах выделили свободные аэробные азотофиксаторы и осуществили пересев их на твердую питательную среду, выделили их в чистую культуру. Затем в чистых культурах на плотной питательной среде их культивировали. Потом бактерии были идентифицированы (без выделения 16S РНК). Из чистых культур были отобраны наиболее активные развивающиеся штаммы, которые были перенесены в жидкую питательную среду (без азота) и через несколько пересевов получена устойчивая бактериальная суспензия, в состав которой входили представители родов Azotobacter и Azomonas, причем бактерии рода Azotobacter составили не менее 70% от общей численности микробов.
Полученная суспензия хорошо пересевается, стабильно растет при комнатной температуре без постоянного встряхивания.
Суспензия представляет собой бурую, достаточно прозрачную жидкость без опалесценции (рН 6,9-7,2) с едва заметным земляным запахом.
Затем в 2 литровую колбу вносим 100 мл полученной суспензии, 15 мл препарата на основе бактерий рода Псеводомонад - Байкал М-1 (ТУ 9291-001-507-10575-00) и 100 мл почвенного фильтрата (1 кг черноземной почвы залили 5 литрами теплой воды, тщательно перемешали, затем дважды профильтровали через двойной фильтр и отобрали нужное количество жидкости), все тщательно перемешали и довели объем жидкости до литра средой Эшби для азотобактера и олигонитрофилов с раствором микроэлементов по Федорову, затем осуществили культивирование в ферментере «Биореактор 3» при температуре 22-28°С, при скорости вращения мешалки 180 об/мин.
Вращение проводили периодически по 2 часа только в дневное время суток в течение 10 суток. Следует отметить, что в опытах с более длительным культивированием в ферментере микробного консорциума после слива культуры на лопастях мешалки образуется рыхлый, обильно циано-бактериальный налет.
Сразу же после культивирования «Стим» профильтровали через двойной бумажный фильтр, затем в фильтрате замачивали на 4 часа семена и проращивали во влажной камере в чашках Петри. В качестве биологических объектов были взяты семена огурца, томата, капусты, укропа. Через 7 дней после замачивания в воде и «Стим» были получены следующие результаты (таблица).
Пример 2
Аналогично примеру 1, но вместо препарата «Байкал М-1» добавляют препарат «Восток» (ТУ 92-91001654-51587-05).
Пример 3
Аналогично примеру 1, но полученную смесь культивируют в ферментере «Биореактор 3» при температуре 28°С.
В качестве биологических объектов были взяты семена огурца, томата, капусты, укропа. Через 7 дней после замачивания семян были получены следующие результаты (таблица).
Культуры | Среднее количество проросших семян, шт | |
По патенту №2286324 | «Стим» | |
Огурец | 11 | 19 |
Томат | 12 | 18 |
Капуста | 15 | 19 |
Укроп | 10 | 19 |
Данные таблицы свидетельствуют о том, что семена разных видов растений положительно реагируют на воздействие «Стим».
Развитие проростков огурца под влиянием препарата проходит намного активнее. Интенсивность роста повышается.
Опыты по влиянию препарата на рост и развитие растений огурца на песке также подтвердили стимулирующее действие препарата (фиг.1-4). Без внесения в песок суспензии растения огурца развивались плохо, не цвели и не плодоносили (фиг.3). Двукратное внесение в почву суспензии дало возможность, требовательной к азоту культуре, активно расти и даже плодоносить (фиг.2).
Claims (1)
- Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерии рода Azotobacter, включающий культивирование бактерий на плотной среде Эшби, отличающийся тем, что предварительно из жидких элективных культур выделяют свободные аэробные азотофиксаторы с последующим их культивированием в чистые культуры на плотной питательной среде, из чистых культур отбирают наиболее активно развивающиеся штаммы и переносят их в жидкую питательную среду, не содержащую азот, в полученную устойчивую бактериальную суспензию, стимулирующую рост сельскохозяйственных растений, добавляют микробиологический препарат на основе бактерий рода Псеводомонад и почвенный фильтрат представляющий собой жидкость, полученную после фильтрации надосадочной части раствора черноземной почвы в воде, через бумажный фильтр и фильтр Беркефельда, все тщательно перемешивают, затем добавляют профильтрованную среду Эшби для азотобактера и олигонитрофилов с раствором микроэлементов по Федорову и осуществляют культивирование в ферментере при температуре 22-28°С при скорости вращения мешалки 180 об/мин в течение 10 сут - 4 раза в сутки по 2 ч.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2008129928/13A RU2390517C2 (ru) | 2008-07-23 | 2008-07-23 | Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода azotobacter |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2008129928/13A RU2390517C2 (ru) | 2008-07-23 | 2008-07-23 | Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода azotobacter |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2008129928A RU2008129928A (ru) | 2010-01-27 |
RU2390517C2 true RU2390517C2 (ru) | 2010-05-27 |
Family
ID=42121616
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2008129928/13A RU2390517C2 (ru) | 2008-07-23 | 2008-07-23 | Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода azotobacter |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2390517C2 (ru) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3892716A1 (en) | 2020-04-07 | 2021-10-13 | Biofor System d.o.o. | Novel plant growth promoting bacterial strains, an improved method for encapsulation of bacteria and a biofertilizer comprising encapsulated bacteria prepared by the said method |
-
2008
- 2008-07-23 RU RU2008129928/13A patent/RU2390517C2/ru not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2008129928A (ru) | 2010-01-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP1248754B1 (en) | Biological addition to organic-mineral fertilizers | |
CN104818233B (zh) | 一株含死谷芽孢杆菌及其制备的功能型蔬菜育苗生物基质 | |
CN106011022B (zh) | 一种玫瑰黄链霉菌固体发酵培养基及其制备和发酵方法 | |
CN115340968B (zh) | 微刺假单胞菌的新用途及其方法、微刺假单胞菌21 4.1 9.2-14及其产品 | |
CN109055274B (zh) | 一株锦鸡儿根瘤菌及其发酵培养方法与应用 | |
WO2011099019A1 (en) | Composition and method of preparation of bacterial based product that fix atmospheric nitrogen from air and makes available to plant | |
KR100965631B1 (ko) | 바실러스 속 미생물 함유 상토 조성물 및 이의 제조방법 | |
CN108409411B (zh) | 一种增强水稻抗逆性的生物壮秧剂及其制备方法 | |
CN110229757B (zh) | 一株有效促进作物生长的桔绿木霉js84及其研制的生物有机肥 | |
CN109956835A (zh) | 一种有机复合肥及其制备方法和应用 | |
CN112753533A (zh) | 一种促生抗逆水稻育秧基础基质、育秧基质及其制备方法和育秧方法 | |
RU2413762C2 (ru) | ШТАММ КЛУБЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЙ Bradyrhizobium japonicum ВКМ В-2456D ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО УДОБРЕНИЯ ПОД СОЮ | |
RU2390517C2 (ru) | Способ приготовления бактериального удобрения на основе бактерий рода azotobacter | |
CN110622825A (zh) | 一种烟草育苗基质及其制备方法和应用 | |
CN102763685B (zh) | 一种抗香蕉枯萎病发酵液及其制备方法和应用 | |
CN108863461A (zh) | 一种以泡叶藻为基质的微生物菌肥 | |
CN113817637A (zh) | 色球藻在修复酸化硝酸盐污染耕作土壤中的应用 | |
CN106810399A (zh) | 规模化生产鲜蚯蚓全营养发酵液体肥的制备方法 | |
CN108949635B (zh) | 胶冻样芽孢杆菌、微生物菌肥、其制备方法及其应用 | |
CN108504586B (zh) | 软化类芽孢杆菌及秸秆腐熟剂 | |
RU2186847C2 (ru) | Штамм микромицета тrichoderma viride, шт.23, обладающий фунгицидными свойствами для получения комплексного биопрепарата со свойствами фунгицида и бактериального удобрения, способ получения комплексного биопрепарата, комплексный биопрепарат со свойствами фунгицида и бактериального удобрения | |
CN104860733A (zh) | 一种具有改善土壤酸性的微生物菌有机肥 | |
CN111778197A (zh) | 高效促生的甲基杆菌菌株及其应用 | |
CN112056176A (zh) | 一种促进辣椒对磷素吸收的育苗基质及其制备方法 | |
RU2286324C1 (ru) | СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО УДОБРЕНИЯ НА ОСНОВЕ БАКТЕРИЙ РОДА Azotobacter |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110724 |