RU2383021C1 - Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени - Google Patents
Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени Download PDFInfo
- Publication number
- RU2383021C1 RU2383021C1 RU2008147941/15A RU2008147941A RU2383021C1 RU 2383021 C1 RU2383021 C1 RU 2383021C1 RU 2008147941/15 A RU2008147941/15 A RU 2008147941/15A RU 2008147941 A RU2008147941 A RU 2008147941A RU 2383021 C1 RU2383021 C1 RU 2383021C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- viral hepatitis
- chronic viral
- μmol
- cirrhosis
- diagnostics
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике внутренних болезней. Сущность способа: дополнительно у больного в плазме крови определяют общее количество оксида азота, и при значении NO более или равно 17 мкмоль/л диагностируют хронический вирусный гепатит, при количестве NO менее 17 мкмоль/л - цирроз печени. Технический результат: нетравматичная, чувствительная, специфичная и эффективная дифференциальная диагностика хронического вирусного гепатита и цирроза печени вирусного генеза по степени дисфункции эндотелия. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике во внутренних болезнях.
Известный лабораторный способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени заключается в прижизненном морфологическом исследовании биоптатов печени (Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты в клинической практике. СПб, «ТЕЗА», 1996, с.31-32; The role of liver biopsy in chronic hepatitis C. Saadeh S., Cammell G., Corey W.D. et al. Hepatology, 2001, v.33, p.196-200; Nainon O., Xiq G., Vanghan G. Diagnosis of hepatitis a virus infection: a molecular approach. Clin. Microbiol. Rev., 2006, №19 (1), p.63-79).
Недостатки способа диагностики: несмотря на высокую информативность, метод пункционной биопсии печени является трудоемким, достаточно травматичным, имеется техническая сложность получения материала и значительная вероятность развития тяжелых осложнений.
Технический результат: снижение травматичности, повышение доступности исполнения при высокой чувствительности, специфичности и эффективности.
Способ дифференциальной диагностики заключается в следующем. У больных определяют уровень общего оксида азота (NO) в плазме крови с целью оценки наличия и степени дисфункции эндотелия. Общее количество оксида азота (Total Nitric Oxide Assay) в плазме крови определяют методом иммуноферментного анализа набором SYSTEMS (США). Метод основан на ферментном превращении нитрата в нитрит с участием фермента нитрит редуктазы. Реакция регистрирует колориметрически концентрацию нитрита по азокрасителю, образующемуся в реакции Грисса. Реакция Грисса основана на двухстадийной реакции диазотирования, в которой кислый NO2 производит нитрозализирующий агент, реагирующий с сульфаниловой кислотой с образованием иона диазония. Этот ион присоединяется к N-(1-нафнил) этилендиамину с формированием цветного азопроизводного, который поглощает свет на длине волны 540 нм, на изоляции клеток эндотелия вместе с тромбоцитами с последующим осаждением с помощью аденозиндифосфата. При значении NO более или равно 17 мкмоль/л диагностируют хронический вирусный гепатит, при количестве NO менее 17 мкмоль/л - цирроз печени.
Способ осуществляют следующим образом. Для сбора образцов крови из локтевой вены используют вакуумные пробирки объемом 2,7 мл с антикоагулянтом ЭДТА. Плазму отделяют центрифугированием в течение 30 мин при 1000 g. Все образцы разбавляют в 2 раза реакционным буфером, фильтруют через молекулярный фильтр (ультрафильтрация) с массой 10000 для удаления белков. После приготовления реагентов, рабочих разведений стандартов и образцов по инструкции, а также необходимого количества стрипов в ячейку для бланка добавляют 200 мкл реакционного буфера, в ячейку для нулевого стандарта - 50 мкл реакционного буфера. В оставшиеся ячейки вносят по 50 мкл стандарта нитрата и образца, добавляют по 25 мкл NADH и по 25 мкл нитратредуктазы в ячейки для всех стандартов и образцов, перемешивают и инкубируют 30 мин при 37°C под пленкой в термостате. Затем во все ячейки, кроме бланка, вносят по 50 мкл реактива Грисса 1 и по 50 мкл реактива Грисса 11, перемешивают и инкубируют 10 мин при комнатной температуре. Затем определяют оптическую плотность ячеек при 540 нм. Концентрацию общего NO измеряют в мкмоль/л. При значении NO более или равно 17 мкмоль/л диагностируют хронический вирусный гепатит, при количестве NO менее 17 мкмоль/л - цирроз печени.
Примеры конкретного выполнения.
Пример 1. Больной Ж., 44 года, диагноз: хронический гепатит С, фаза реактивации, анти-ВГС - с 2005 г. Жалобы на слабость, снижение аппетита, боли в правом подреберье. Объективно - гепатомегалия +2 см, безболезненная, гладкая. Биохимическое исследование: АЛТ - 114 Ед./л, ACT - 52,5 Ед./л, общий билирубин - 12 мкмоль. По данным УЗИ - диффузные изменения в печени. Уровень NO в плазме крови 17,2 мкмоль/л. Диагноз хронического вирусного гепатита С подтвержден.
Пример 2. Больной Ш., 31 год, диагноз: хронический гепатит С и B в фазе реактивации, анти-ВГС, HBsAg положительные. Объективно - гепатомегалия +3 см, плотная. Биохимическое исследование: АЛТ - 157 Ед./л, ACT - 88 Ед./л, общий билирубин - 8,9 мкмоль/л, тимоловая проба - 3,2 Ед. По данным инструментальных исследований - диффузные изменения в печени. Уровень NO в плазме крови 20,2 мкмоль/л. Диагноз хронического вирусного гепатита подтвержден.
Пример 3. Больная Т., 60 лет, диагноз: цирроз печени в исходе хронического гепатита С, стадия субкомпенсации, портальная гипертензия, асцит. Анти-ВГС положительные. Жалобы на слабость, периодическое повышение температуры тела, зуд. Объективно - гепатомегалия +2 см, плотная, бугристая; спленомегалия +1 см, телеангиэктазии, асцит. Биохимическое исследование: АЛТ - 121 Ед./л, ACT - 119 Ед./л, общий билирубин - 143 мкмоль/л, прямой билирубин - 69,2 мкмоль/л, тимоловая проба - 3,3 Ед.; тромбоцитопения.
По данным инструментальных исследований - гепатоспленомегалия, асцит, признаки портальной гипертензии. Уровень NO в плазме крови 11,9 мкмоль/л. Диагноз цирроза печени подтвержден.
Пример 4. Больная М., 48 лет, диагноз цирроз печени в исходе хронического гепатита В и Д, стадия декомпенсации, портальная гипертензия, асцит, варикозное расширение вен пищевода 11 ст. HBsAg положительный, 2000 г. - суперинфекция гепатит Д. Жалобы на слабость, тяжесть в правом подреберье, одышку, периодическое повышение температуры тела. Объективно - гепатомегалия +3 см, плотная, бугристая; спленэктомия в 2002 г., телеангиэктазии, асцит. Биохимическое исследование: АЛТ - 25,9 Ед./л, ACT - 47 Ед./л, общий билирубин - 18,3 мкмоль/л, щелочная фосфатаза - 139 Ед., тимоловая проба - 5,7 Ед.; анемия, тромбоцитопения. По данным УЗИ - гепатомегалия, асцит, признаки портальной гипертензии. Уровень NO в плазме крови 9,1 мкмоль/л. Диагноз цирроза печени подтвержден.
Данные статистики определения уровня NO в группах больных хроническим вирусным гепатитом С и циррозом печени в сравнении с группой практически здоровых лиц представлены в таблице.
Таблица | ||||||
Сравнительный анализ NO в группах больных хроническим гепатитом С, циррозом печени и в группе практически здоровых лиц (М±δ) | ||||||
Показатели | Контрольная группа n=20 | Больные ХГС n=4 |
Больные ЦП n=30 |
Р1 | Р2 | Р3 |
NO, мкмоль/л | 29,43±3,34 | 18,6±3,02 | 13,1±4,52 | 0,001 | 0,001 | 0,01 |
Примечание: Р1 - достоверность отличий в группах здоровых и больных хроническим гепатитом С; Р2 - достоверность отличий в группах здоровых и больных циррозом печени; Р3 - достоверность отличий в группе больных хроническим гепатитом С и группе пациентов с циррозом печени.
Операционные характеристики лабораторного теста определения уровня NO в плазме крови у больных хроническим вирусным гепатитом С и циррозом печени с целью их дифференциации по степени дисфункции эндотелия: диагностическая чувствительность (ДЧ) составила 80%, диагностическая специфичность (ДС) - 87%, диагностическая эффективность - 70%. Точка разделения для больных хроническим вирусным гепатитом и циррозом печени по уровню NO при построении кумулятивных кривых зарегистрирована на уровне 17,0 мкмоль/л. Соответственно при значении NO более или равно 17 мкмоль/л диагностируют хронический вирусный гепатит, при количестве NO менее 17 мкмоль/л - цирроз печени.
Положительный эффект от использования предлагаемого способа дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени по уровню оксида азота с целью оценки степени дисфункции эндотелия заключается в его нетравматичности, отсутствии осложнений, информативности, чувствительности и специфичности.
Claims (1)
- Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени путем иммуноферментного исследования крови, отличающийся тем, что дополнительно у больного в плазме крови определяют общее количество оксида азота, и при значении NO более или равно 17 мкмоль/л диагностируют хронический вирусный гепатит, при количестве NO менее 17 мкмоль/л - цирроз печени.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2008147941/15A RU2383021C1 (ru) | 2008-12-04 | 2008-12-04 | Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2008147941/15A RU2383021C1 (ru) | 2008-12-04 | 2008-12-04 | Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2383021C1 true RU2383021C1 (ru) | 2010-02-27 |
Family
ID=42127931
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2008147941/15A RU2383021C1 (ru) | 2008-12-04 | 2008-12-04 | Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2383021C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2444997C1 (ru) * | 2010-12-13 | 2012-03-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии Сибирского отделения РАМН | Способ дифференциальной диагностики hbv- и hcv-инфекции у пациентов с циррозом печени |
RU2516970C1 (ru) * | 2012-12-18 | 2014-05-20 | Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Кубанский государственный медицинский университет" (ГОУ ВПО КубГМУ Минздрава России) | Способ дифференциальной диагностики гепатита и цирроза печени |
RU2528911C1 (ru) * | 2013-06-27 | 2014-09-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИМПС" СО РАМН) | Способ дифференциальной диагностики стадий хронизации вирусного гепатита с у подростков |
RU2661105C2 (ru) * | 2016-01-21 | 2018-07-11 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-технический центр "БиоКлиникум" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СФЕРОИДОВ КЛЕТОК HepaRG В СРЕДЕ БЕЗ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА |
-
2008
- 2008-12-04 RU RU2008147941/15A patent/RU2383021C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
СОРИНСОН С.Н. Вирусные гепатиты в клинической практике. - СПб.: Теза, 1996, с.31, 32. * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2444997C1 (ru) * | 2010-12-13 | 2012-03-20 | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии Сибирского отделения РАМН | Способ дифференциальной диагностики hbv- и hcv-инфекции у пациентов с циррозом печени |
RU2516970C1 (ru) * | 2012-12-18 | 2014-05-20 | Государственное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Кубанский государственный медицинский университет" (ГОУ ВПО КубГМУ Минздрава России) | Способ дифференциальной диагностики гепатита и цирроза печени |
RU2528911C1 (ru) * | 2013-06-27 | 2014-09-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИМПС" СО РАМН) | Способ дифференциальной диагностики стадий хронизации вирусного гепатита с у подростков |
RU2661105C2 (ru) * | 2016-01-21 | 2018-07-11 | Общество с ограниченной ответственностью Научно-технический центр "БиоКлиникум" | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СФЕРОИДОВ КЛЕТОК HepaRG В СРЕДЕ БЕЗ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN111398583A (zh) | 一种检测新型冠状病毒n蛋白的试剂盒及其应用 | |
RU2383021C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита и цирроза печени | |
WO2022095731A1 (zh) | 用于检测新型冠状病毒的试剂盒及方法 | |
CN111751527A (zh) | 新型冠状病毒IgG和IgM抗体检测试剂盒及其制备方法和应用 | |
US10808287B2 (en) | Methods and devices for accurate diagnosis of infections | |
US8232046B2 (en) | Distinction between bacterial meningitis and viral meningitis | |
WO2022100240A1 (zh) | 一种抗链球菌溶血素o检测试剂盒 | |
CN115629212A (zh) | 一种猴痘病毒抗原检测试剂、试剂盒及制备方法 | |
CN115993451A (zh) | 一种甲型流感病毒和腺病毒抗原定量检测试剂盒、制备方法及定量检测方法 | |
Liu et al. | Procalcitonin as a diagnostic and prognostic marker for sepsis caused by intestinal infection: a case report | |
CN117031027A (zh) | 一种壳多糖酶3样蛋白1测定试剂盒及其制备方法 | |
CN106802345B (zh) | 一种幽门螺旋杆菌IgG抗体酶联免疫诊断试剂盒 | |
El-Adly et al. | Biochemical changes in Egyptian patients infected with COVID-19 | |
Zenchenkova et al. | Prevalence, haematological, biochemical abnormalities and clinical syndromes of FeLV and FeLV/FIV co-infection among cat population in Moscow and the Moscow region, Russia. | |
RU2285263C1 (ru) | Способ диагностики туберкулеза | |
Moriguchi et al. | The diagnosis of Legionella pneumophila Serogroup 5 Bacteremic pneumonia during severe neutropenia using loop-mediated isothermal amplification | |
US20140065601A1 (en) | Method and kit for estimating human immunodeficiency virus (hiv) incidence | |
Ribeiro et al. | Evaluation of reagent strips for ascitic fluid leukocyte determination: is it a possible alternative for spontaneous bacterial peritonitis rapid diagnosis? | |
Meazzi | The interplay between host defenses and systemic pathogens in promoting diseases of companion animals | |
RU2546541C1 (ru) | Способ прогнозирования развития полипозного риносинусита у больных бронхиальной астмой | |
RU2291440C1 (ru) | Способ диагностики стадии хронизации гепатита | |
Yatoo et al. | Diagnostic Techniques in Goats | |
Liua et al. | The value of urine biochemical parameters in the prediction of the severity of coronavirus | |
Zerbib et al. | Pathology Assessments of Multiple Organs in Fatal COVID-19 in ICU vs. Non-ICU Patients | |
Ahmed et al. | Evaluation of The Diagnostic Performance of Nucleocapsid Antigen for Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 Infection |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20101205 |