RU2353651C2 - Рекомбинантные векторы на основе "живого" вируса оспы домашней птицы и их применение в фармацевтических композициях против вируса гепатита с - Google Patents
Рекомбинантные векторы на основе "живого" вируса оспы домашней птицы и их применение в фармацевтических композициях против вируса гепатита с Download PDFInfo
- Publication number
- RU2353651C2 RU2353651C2 RU2007108290/13A RU2007108290A RU2353651C2 RU 2353651 C2 RU2353651 C2 RU 2353651C2 RU 2007108290/13 A RU2007108290/13 A RU 2007108290/13A RU 2007108290 A RU2007108290 A RU 2007108290A RU 2353651 C2 RU2353651 C2 RU 2353651C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- hcv
- immune response
- recombinant
- response against
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title abstract description 51
- 208000000666 Fowlpox Diseases 0.000 title abstract 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 title description 5
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 title description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 title description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 19
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 claims description 65
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 35
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 35
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 30
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 claims description 27
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 20
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 claims description 11
- 208000010710 hepatitis C virus infection Diseases 0.000 claims description 6
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 5
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims description 4
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 claims description 4
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 claims description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 3
- 208000006154 Chronic hepatitis C Diseases 0.000 claims description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 3
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 23
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 23
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 23
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 20
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 15
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 12
- 230000004044 response Effects 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 7
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 5
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 5
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 3
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 206010046865 Vaccinia virus infection Diseases 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 3
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 3
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 2
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 2
- 241000287231 Serinus Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 208000007089 vaccinia Diseases 0.000 description 2
- 241000178270 Canarypox virus Species 0.000 description 1
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 1
- 241001227713 Chiron Species 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- 241000700662 Fowlpox virus Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108700039791 Hepatitis C virus nucleocapsid Proteins 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 101100321817 Human parvovirus B19 (strain HV) 7.5K gene Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108010001267 Protein Subunits Proteins 0.000 description 1
- 102000002067 Protein Subunits Human genes 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 description 1
- 244000156473 Vallaris heynei Species 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- TXWRERCHRDBNLG-UHFFFAOYSA-N cubane Chemical compound C12C3C4C1C1C4C3C12 TXWRERCHRDBNLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/29—Hepatitis virus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/86—Viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/24011—Poxviridae
- C12N2710/24041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
- C12N2710/24043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/24011—Flaviviridae
- C12N2770/24211—Hepacivirus, e.g. hepatitis C virus, hepatitis G virus
- C12N2770/24222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/24011—Flaviviridae
- C12N2770/24211—Hepacivirus, e.g. hepatitis C virus, hepatitis G virus
- C12N2770/24234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к вирусологии и генетической инженерии. Предложен рекомбинантный вирус оспы домашней птицы, индуцирующий иммунный ответ против вируса гепатита С (HCV), содержащий ДНК-фрагмент, полученный из HCV. Указанный ДНК-фрагмент кодирует фрагмент полипротеина сердцевины-Е1 или химерный белок, содержащий эпитопы HCV, специфичные к хелперным и цитотоксическим Т-клеткам. Также предложена фармацевтическая композиция, содержащая такой вирус. Изобретение может быть использовано в медицине. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 5 ил.
Description
Область, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области иммунологии и вирусной вакцинации, а в частности вакцинации рекомбинантным вирусом оспы домашней птицы, экспрессирующим белки вируса гепатита С (HCV), и к фармацевтическим композициям, способным индуцировать клеточный иммунный ответ против HCV.
Предшествующий уровень техники
Вирус HCV впервые был идентифицирован в 1989 г. методами молекулярной биологии как главный этиологический фактор посттрансфузионного не-А, не-В гепатита (Choo Q. L., Kuo G. et al. (1989) Isolation of a cDNA clone derived from a blood-borne non-A, non-B viral hepatitis genome. Science. 244:359-62; EP0318216 Chiron Corp). В настоящее время во всем мире этим вирусом инфицированы более 170 миллионов человек. HCV-инфекция присутствует в организме человека в 85% случаев, и в большинстве случаев она вызывает цирроз и гепатоцеллюлярную карциному (Caselmann W. H., Alt M. (1996) Hepatitis C virus infection as a major risk factor for hepatocellular carcinoma. J. Hepatol. 24:61-66). Фактически в 25% случаев через 25 лет после инфицирования у индивидуумов-носителей хронической HCV-инфекции ежегодно регистрируется развитие цирроза, а в 1-4% случаев - развитие гепатоцеллюлярной карциномы (Prince A. M., Shata M. T. (2001) Immunoprophylaxis of hepatitis C virus infection. Clin. Liver Dis. 5:1091-103). Курс лечения HCV-инфекции основан на проведении интенсивной терапии путем введения комбинации ПЭГилированных интерферонов. Однако такое лечение является инвазивным и дорогостоящим и дает эффект только менее чем в 50% случаев (Prince A. M., Shata M. T. (2001) Immunoprophylaxis of hepatitis C virus infection. Clin. Liver. Dis. 5:1091-103).
Различные варианты субъединиц белка, вирусоподобные частицы, синтетические пептиды, рекомбинантные “живые” векторы и ДНК-конструкции для ДНК-иммунизации, основанной на антигенах HCV, оценивали как варианты, которые могут быть использованы в методах вакцинации (US6635257, US6387662, US6235888, US6685944, US2003021805, Lechmann M., Liang T. J. (2000) Vaciine development for hepatitis C. Semin. Liver. Dis. 20:211-26). Было продемонстрировано, что некоторые из этих вариантов обладают способностью вырабатывать специфический иммунный ответ против эпитопов HCV, хотя считается, что этот ответ все же является недостаточным. В настоящее время иммунологические параметры, коррелирующие с защитной функцией против HCV-инфекции, пока еще точно не определены. Тем не менее, несколько проведенных исследований дали основание предположить, что ранний сильный и мультиспецифический цитотоксический Т-клеточный ответ наряду с CD4+-Th1-клеточным ответом благоприятствует развитию иммунитета против вируса и способствует эффективному лечению заболевания. В противоположность этому поздний Т-клеточный ответ ассоциируется с развитием хронической иммунопатологии печени (Cerny A., Chisari F.V. (1999) Pathogenesis of chronic hepatitis C: immunological features of hepatic injury and viral persistente. Hepatology. 30:595-601; Cooper S. et al. (1999) Analysis of a successful immune response against hepatitis C virus. Immunity 10:439-49; Lechner F. et al. (2000) Why do cytotoxic T lymphocytes fail to eliminate hepatitis C virus? Lessons from studies using major histocompatibility complex class I peptide tetramers. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 355:1085-92; Takaki A. et al. (2000). Cellular immune responses persist and humoral responses decrease two decades after recovery from single-source outbreak of hepatitis C. Nat. Med. 6:578-82).
Рекомбинантные “живые” векторы являются привлекательными кандидатами на вырабатывание клеточного иммунного ответа против HCV. В результате иммунизации мышей рекомбинантным аденовирусом, полученным на основе сердцевины HCV и Е1, вырабатывается специфический цитотоксический Т-клеточный ответ против этих антигенов (Bruna-Romero O. et al. (1997) Induction of cytotoxic T-cell response against hepatitis C virus structural antigens using a defective recombinant adenovirus. Hepatology 25:470-7). Хотя эти результаты являются многообещающими, однако возникшие в настоящее время проблемы, связанные с использованием рекомбинантного аденовируса в генотерапии, вызывают сомнение в возможности их использования для лечения человека. Применение рекомбинантных вирусов коровьей оспы и оспы канареек, содержащих различные гены HCV, как показал анализ антигена, приводит к индуцированию цитотоксических Т-клеточных ответов у мышей в том случае, если они были объединены с вакцинами-кандидатами, полученными на основе ДНК-конструкций (Pancholi P. et al. (2000) DNA prime-canarypox boost with polycistronic hepatitis C virus (HCV) genes generates potent immune responses to HCV structural and nonstructural proteins. J. Infect. Dis. 182:18-27; Pancholi P. et al. (2003) DNA immunization with hepatitis C virus (HCV) polycistronic genes or immunization by HCV DNA priming-recombinant canarypox virus boosting induces immune response and protection from recombinant HCV-vaccinia virus infection in HLA-A2.1-transgenic mice. J. Virol. 77:382-90). Фактически нет никаких свидетельств о том, что in vivo индуцирование клеточного иммунного ответа после введения индивидууму рекомбинантных вирусов оспы канареек, полученных на основе структурных антигенов HCV, будет эффективным, например, у модели, инфицированной рекомбинантным вирусом коровьей оспы. К этой группе вирусов также принадлежит вирус оспы домашней птицы, который до настоящего времени не использовался для индуцирования иммунного ответа против антигенов HCV. Вирус оспы домашней птицы не реплицируется в клетках млекопитающих, но он может проникать в цитоплазму клетки-хозяина и эффективно экспрессировать в этой цитоплазме белки, кодируемые своим геномом. Исходя из этих свойств было высказано предположение о том, что риск, ассоциированный с использованием вектора, полученного на основе рекомбинантного вируса оспы домашней птицы, для лечения человека будет снижаться при использовании векторов, полученных на основе других “живых” вирусов.
В настоящее время на фармацевтическом рынке отсутствует вакцина против HCV-инфекции. Действительно, большинство исследований пока еще находятся на предклиническом этапе. Таким образом, разработка профилактических и/или терапевтических средств, эффективных для лечения HCV-инфекции, все еще остается крайне актуальной.
Описание сущности изобретения
Настоящее изобретение несмотря на все ограничения и предшествующий уровень техники позволяет решить вышеупомянутую проблему путем конструирования рекомбинантного вируса оспы домашней птицы, содержащего фрагменты ДНК, происходящие от HCV, в неосновной области генома вируса оспы домашней птицы и способного индуцировать специфический клеточный иммунный ответ против HCV, где указанными областями являются аминокислотные области, соответствующие антигенам HCV, экспрессируемым вирусом оспы домашней птицы.
В соответствии с настоящим изобретением вирус FPCoEl содержит фрагмент ДНК, определенный последовательностью SEQ ID NO:1, кодирующий белок, содержащий аминокислоты 79-338, включая часть корового белка и Е1, а вирус FPBS содержит фрагмент ДНК, определенный последовательностью SEQ ID NO:2, кодирующий химерный белок, включая эпитопы, к которым специфичны CD4+- и CD8+-T-лимфоциты, соответствующие различным антигенам HCV. В этих вирусах последовательность, кодирующая антигены HCV, происходит от кДНК кубинского изолята HCV (Morales J. et al., WO 98/25960).
В другом своем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, индуцирующей специфический клеточный иммунный ответ против HCV и содержащей эффективное количество рекомбинантного вируса оспы домашней птицы и фармацевтически приемлемый наполнитель.
Рекомбинантные вирусы оспы домашней птицы согласно изобретению обладают способностью проникать в человеческие клетки и экспрессировать антигены HCV в цитоплазме. Экспрессия в человеческих клетках регулируется транскрипционной единицей, полученной на основе раннего/позднего синтетического промотора вируса оспы домашней птицы. Эти вирусы также содержат ген ксантин-гуанозин-фосфорибозилтрансферазы, находящийся под контролем промотора 7.5К, происходящего от вируса коровьей оспы. Эти вирусы не способны реплицироваться у человека.
Эта композиция может быть введена внутримышечно, внутрибрюшинно или подкожно. Такое введение может быть осуществлено с помощью шприцов, “дробовика” для выстеливания генов, ингалятора, или с помощью других устройств для иммунизации. Каждому индивидууму вводят дозу, составляющую 2,5×107-1×108 б.о.е./дозу, в определенном объеме. В настоящем изобретении также описаны способы введения рекомбинантных вирусов оспы домашней птицы с применением стратегии первичной иммунизации/бустер-иммунизации ДНК-конструкциями. Рекомбинантные вирусы оспы домашней птицы могут быть также введены с применением стратегий первичной иммунизации/бустер-иммунизации белками или другими вирусами, рекомбинантными по антигенам HCV, или одновременно цитокинами и другими иммуностимулирующими молекулами. Эти комбинации позволяют продуцировать новые специфичные к эпитопам молекулы или усиливать специфический иммунный ответ. Фармацевтические композиции, полученные на основе вирусов оспы домашней птицы, рекомбинантных по антигенам HCV, могут иметь следующие преимущества, а именно:
- они могут индуцировать эффективный специфический клеточный иммунный ответ;
- для достижения нужного эффекта требуется меньшее число процедур иммунизации;
- эти композиции могут быть использованы в качестве основы для получения комбинированных вакцин;
- не требуется введение адъюванта;
- эти композиции могут быть использованы в комбинации с противовирусными средствами.
В некоторых случаях указанные фармацевтические композиции для индуцирования иммунного ответа против HCV могут быть введены до проведения другой терапии или вакцинации либо одновременно с их проведением, либо после их проведения. Указанные фармацевтические композиции могут быть введены для индуцирования профилактического иммунного ответа против HCV-инфекции, а также для индуцирования иммунного ответа у пациентов с хроническим гепатитом С, циррозом и раком печени.
Краткое описание графического материала
Фиг.1: Схематически представлены области, соответствующие антигенам HCV в рекомбинантных вирусах оспы домашней птицы.
Фиг.2: Схема иммунизации различными рекомбинантными вирусами оспы домашней птицы. (А): Вырабатывание антител. (В): Вырабатывание секреторного интерферона гамма. (С): Ответ на инфицирование вирусом коровьей оспы, рекомбинантным по структурным антигенам HCV.
Фиг.3: Схема иммунизации вирусами FPCoE1 и FPBS с применением различных методов инокуляции. Ответ на инфицирование вирусом коровьей оспы, рекомбинантным по структурным антигенам HCV.
Фиг.4: Схема иммунизации различными количествами FPCoE1 и FPBS. Ответ на инфицирование вирусом коровьей оспы, рекомбинантным по структурным антигенам HCV.
Фиг.5: Схема иммунизации на основе комбинаций FPCoE1 и препарата ДНК-вакцины. (А): Вырабатывание антител против сердцевины, Е1 и Е2. (В): Ответ на инфицирование вирусом коровьей оспы, рекомбинантным по структурным антигенам HCV.
Примеры осуществления настоящего изобретения
Используемые в настоящем изобретении термины “вирус гепатита С” или “HCV” означают общее родовое название вируса и не ограничиваются конкретной вирусной последовательностью или конкретным изолятом HCV.
Аналогичным образом следует отметить, что термин “кодирующая последовательность” означает молекулу нуклеиновой кислоты, которая транслируется в полипептид обычно посредством мРНК, если она находится под контролем “правильной” регуляторной последовательности. В данном случае термин “кодирующая последовательность” может включать, но не ограничивается ими, кДНК и рекомбинантные нуклеотидные последовательности.
Настоящее изобретение более подробно описано в нижеследующих примерах, которые приводятся лишь в иллюстративных целях и не должны рассматриваться как ограничение изобретения.
Пример 1: Оценка FPCoE1c, FPCoE1 и FPBS
Для оценки способности вирусов оспы домашней птицы, рекомбинантных по антигенам HCV, индуцировали специфическийклеточный иммунный ответ, получали вирусы FPCoE1c, FPCoE1 и FPBS. На фиг.1 схематически представлена последовательность, соответствующая антигенам HCV. Указанные вирусы получали следующим образом: фибробласты куриных эмбрионов инфицировали вирусом оспы домашней птицы и трансфецировали плазмидами pFPCoE1c, pFPCoE1 или pFPBS с использованием липофектамина (Invitrogen, USA). Эти плазмиды происходили от плазмиды pFP67xgpt (Vazquez-Blomquist D., Gonzalez S., Duarte C.A. (2002) Effect of promoters on cellular immune response induced by recombinant fowlpox virus expressing multi-epitope polypeptides from HIV-1. Biotechnol. Appl. Biochem. 36:171-9) и содержали последовательность (SEQ ID NO:1), кодирующую области, включающие аминокислоты 1-338 и 79-338, или последовательность (SEQ ID NO:2), кодирующую химерный белок, сконструированный на основе эпитопов, к которым специфичны Т-лимфоциты (плазмиды pFPCoE1c, pFPCoE1 и pFPBS соответственно). Затем проводили несколько циклов очистки вируса в селективной среде, содержащей ксантин, гипоксантин и микофеноловую кислоту. После этого вирусный продукт, находящийся в планшете для инфицирования, амплифицировали и присутствие вставки, соответствующей последовательности HCV, подтверждали с помощью полимеразной цепной реакции.
Иммуногенность вирусов FPCoEic, FPCoEl и FPBS исследовали на 8-недельных самках мышей BALB/c после двух внутрибрюшинных введений (с интервалами в 3 недели) 2,5×107 б.о.е. Каждая группа иммунизации включала десять животных. На фиг.2А показано, что только FPCoE1-иммунизация способна индуцировать детектируемые уровни антител против сердцевины и Е1. Однако на фиг.2В показано, что позитивный ответ, заключающийся в секреции IFN-гамма лимфоцитами животных, иммунизованных вирусами FPCoE1 и FPBS соответственно, является статистически значимым по сравнению с ответом, детектируемым у животных, иммунизованных вирусом, используемым в качестве негативного контроля, FP9 (т-критерий Стьюдента, р<0,05). Иммунизация вирусом FPCoE1c не индуцировала позитивного ответа, заключающегося в секреции лимфоцитами IFN-гамма. Кроме того, как показано на фиг.2С, у группы животных, иммунизованных вирусами FPCoE1 и FPBS, наблюдалось значимое снижение (т-критерий Стьюдента, р<0,05) вирусной нагрузки в яичниках после их инфицирования 106 б.о.е. вируса коровьей оспы (vvRE), рекомбинантного по структурным антигенам HCV (аминокислоты 1-650 полипротеина HCV) по сравнению с вирусной нагрузкой, наблюдаемой после инфицирования контрольным вирусом коровьей оспы (WR), не являющимся рекомбинантным по антигенам HCV. Кроме того, vvRE-вирусная нагрузка у животных, иммунизованных вирусами FPCoE1 и FPBS, была статистически ниже по сравнению с вирусной нагрузкой, детектируемой у животных, иммунизованных вирусом оспы домашней птицы FP9, используемым в качестве негативного контроля (т-критерий Стьюдента, р<0,05). Иммунизация вирусом FPCoE1c не приводила к значимому снижению вирусной нагрузки в яичниках. Инфицирование вирусом коровьей оспы осуществляли путем его внутрибрюшинного введения через 2 недели после последней иммунизации вирусами оспы домашней птицы. Через 5 дней после инокуляции вирусом коровьей оспы извлекали яичники. Инфицирование рекомбинантными вирусами коровьей оспы широко применяется в целях иллюстрации способности вакцины-кандидата вырабатывать сильный клеточный иммунный ответ in vivo. В частности, снижение клеточного титра в яичниках ассоциируется, главным образом, с индуцированием сильного CD8+-Т-лимфоцитарного ответа.
Пример 2: Способы введения вирусов оспы домашней птицы (внутрибрюшинное, подкожное и внутримышечное)
Для оценки влияния способа инокуляции на иммунный ответ, продуцируемый рекомбинантными вирусами оспы домашней птицы, была проведена иммунизация 8-недельных самок мышей BALB/c. Каждая группа иммунизации включала десять животных. Вирусы (2,5×107 б.о.е.) вводили внутрибрюшинно, внутримышечно или подкожно за две стадии иммунизации с интервалами в 3 недели. На фиг.3 показано, что между этими способами иммунизации не существует какого-либо значимого различия с точки зрения способности рекомбинантных вирусов оспы домашней птицы FPCoE1 и FPBS снижать вирусную нагрузку в яичниках после инфицирования вирусом коровьей оспы vvRE. Эти 2 рекомбинантных вируса индуцировали позитивный ответ, заключающийся в снижении вирусной нагрузки, по сравнению с вирусом оспы домашней птицы, FP9, используемым в качестве негативного контроля (т-критерий Стьюдента, р<0,05). Инфицирование вирусом коровьей оспы осуществляли путем внутрибрюшинного введения 106 б.о.е. вируса коровьей оспы vvRE через 2 недели после последней иммунизации вирусами оспы домашней птицы. Через 5 дней после инфицирования вирусом коровьей оспы извлекали яичники.
Пример 3: Сравнение доз (0,9×107, 2,5×107, 5×107 и 1×108 б.о.е.)
Самок мышей BALB/C иммунизовали путем внутримышечного введения различных количеств рекомбинантных вирусов оспы домашней птицы на недели 0 и 3. Каждая группа иммунизации включала 10 животных. На фиг.4 показано, что у мышей, иммунизованных 0,9×107 б.о.е., не наблюдалось каких-либо значимых различий в отношении вирусной нагрузки, детектируемой в яичниках после инфицирования 106 б.о.е. vvRE, через 2 недели после последней иммунизации вирусами оспы домашней птицы. В противоположность этому введение 2,5×107, 5×107 и 1×108 б.о.е. FPCoE1 и FPBS приводило к значимому снижению vvRE-вирусной нагрузки в яичниках по сравнению с вирусной нагрузкой, детектируемой у животных, инокулированных аналогичными количествами вируса оспы домашней птицы, FP9, используемого в качестве негативного контроля (т-критерий Стьюдента, р<0,05). Во всех случаях через 5 дней после инокуляции vvRE извлекали яичники.
Пример 4: Первичная иммунизация/бустер-иммунизация ДНК и вирусами оспы домашней птицы
Для оценки иммунного ответа, индуцированного первичной иммунизацией/бустер-иммунизацией, включающей введение комбинации из полученной на основе ДНК вакцины-кандидата и вируса оспы домашней птицы, рекомбинантного по антигенам HCV, проводили иммунизацию 8-недельных самок мышей BALB/c. Каждая группа иммунизации включала 10 животных. Животных одной группы (Со-pIDKE2) иммунизовали на недели 0, 3, 7 и 12 путем внутримышечного введения смеси 100 мкг плазмиды, экспрессирующей первые 650 аминокислот полипротеина HCV, pIDKE2 (Duenas-Carrera S. et al. (2004). Immunization with a DNA vaccine encoding the hepatitis C virus structural antigens elicits a specific immune response against the capsid and envelope proteins in rabbits and Macaca irus (crab-eating macaque monkeys). Biotechnol. Appl. Biochem. 39:249-55) и 10 мкг рекомбинантного белка сердцевины HCV, Со.120 (Alvarez-Obregon J.C. et al. (2001). A truncated HCV core protein elicits a potent immune response with a strong participation of cellular immunity components in mice. Vaccine 19:3940-46). Животных другой группы (pAEC-K6) иммунизовали в аналогичных условиях плазмидой рАЕС-К6, используемой в качестве негативного контроля (Herrera A.M. et al. (2000) A family of compact plasmid vectors for DNA immunization in human. Biochem. Biophys. Res. Commun. 279:548-51). Животных другой группы иммунизовали на недели 0 и 3 путем внутримышечного введения 2,5×107 б.о.е. вируса FPCoE1. Кроме того, животных этой группы иммунизовали в тех же самых условиях вирусом оспы домашней птицы, FP9, используемым в качестве негативного контроля. Затем животных одной из групп (Co-pIDKE2/FPCoE1) иммунизовали на недели 0 и 3 путем внутримышечного введения смеси Co-pIDKE2, а на недели 9 и 12, их иммунизовали вирусом FPCoE1. Животных другой группы (Co-pIDKE2/FP9) иммунизовали аналогичным образом за исключением того, что этим животным на 6-ю и на 9-ю недели вводили FP9. На фиг.5 показано, что самые высокие уровни антител индуцировались у группы, которой вводили Co-pIDKE2 (т-критерий Стьюдента, р<0,05). Кроме того, в результате первичной иммунизации/бустер-иммунизации, предусматривающей введение комбинации Co-pIDKE2 и FPCoE1, индуцировались более высокие уровни антител по сравнению с уровнями, наблюдаемыми у группы, которой вводили только FPCoE1 (т-критерий Стьюдента, р<0,05). На фиг.5В можно видеть, что у животных обеих групп, иммунизованных вирусами FPCoE1 или Co-pIDKE2, а также у группы, иммунизованной вирусом Co-pIDKE2 в первых 2 дозах и вирусом FPCoE1 в других 2 дозах, наблюдалось значимое снижение (т-критерий Стьюдента, р<0,05) vvRE-вирусной нагрузки после их инфицирования по сравнению с вирусной нагрузкой у животных, иммунизованных вирусами, используемыми в качестве негативного контроля. Самая низкая вирусная нагрузка наблюдалась у животных, иммунизованных вирусом Co-pIDKE2 в первых 2 дозах и вирусом FPCoE1 в других 2 дозах. Инфицирование вирусом коровьей оспы осуществляли путем внутрибрюшинного введения 106 б.о.е. вируса коровьей оспы vvRE через 2 недели после последней иммунизации. Через 5 дней после инокуляции вирусом коровьей оспы vvRE извлекали яичники.
Claims (9)
1. Рекомбинантный вирус оспы домашней птицы, индуцирующий иммунный ответ против вируса гепатита С (HCV), содержащий ДНК-фрагмент, полученный из HCV, где указанный ДНК-фрагмент, определенный последовательностью SEQ ID NO:1, кодирует фрагмент полипротеина сердцевины-El, состоящего из аминокислотной (а.к.) последовательности, соответствующей а.к. 79-338 указанного полипептида.
2. Вирус оспы домашней птицы по п.1, происходящий от pFP67xgpt.
3. Рекомбинантный вирус оспы домашней птицы, индуцирующий иммунный ответ против HCV, где указанный фрагмент ДНК определен последовательностью SEQ ID NO:2, кодирующей химерный белок, содержащий эпитопы HCV, специфичные к хелперным и цитотоксическим Т-клеткам.
4. Вирус оспы домашней птицы по п.3, происходящий от pFP67xgpt.
5. Фармацевтическая композиция, индуцирующая специфический клеточный иммунный ответ против HCV, содержащая эффективное иммуногенное количество рекомбинантного вируса оспы домашней птицы по пп.1-4, и фармацевтически приемлемый наполнитель.
6. Фармацевтическая композиция по п.5, где указанная эффективная для иммунизации доза составляет от 2,5·107 до 1·108 б.о.е/дозу.
7. Фармацевтическая композиция по пп.5 и 6, индуцирующая профилактический иммунный ответ против HCV-инфекции.
8. Фармацевтическая композиция по пп.5 и 6, индуцирующая иммунный ответ против HCV у пациентов с хроническим гепатитом С, циррозом и раком печени.
9. Фармацевтическая композиция по пп.5 и 6, индуцирующая иммунный ответ против HCV до проведения другой терапии или вакцинации, либо одновременно с ее проведением, либо после ее проведения.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CU20040174A CU23470A1 (es) | 2004-08-11 | 2004-08-11 | Vectores vivos recombinantes y su uso en composiciones farmacéuticas contra el virus de la hepatitis c |
| CUCU2004-0174 | 2004-08-11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007108290A RU2007108290A (ru) | 2008-09-20 |
| RU2353651C2 true RU2353651C2 (ru) | 2009-04-27 |
Family
ID=40262893
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007108290/13A RU2353651C2 (ru) | 2004-08-11 | 2005-08-10 | Рекомбинантные векторы на основе "живого" вируса оспы домашней птицы и их применение в фармацевтических композициях против вируса гепатита с |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1787656A1 (ru) |
| JP (1) | JP2008508890A (ru) |
| KR (1) | KR20070040814A (ru) |
| CN (1) | CN101035560A (ru) |
| AR (1) | AR050451A1 (ru) |
| AU (1) | AU2005270612A1 (ru) |
| BR (1) | BRPI0514274A (ru) |
| CA (1) | CA2575293A1 (ru) |
| CU (1) | CU23470A1 (ru) |
| MX (1) | MX2007001749A (ru) |
| MY (1) | MY170516A (ru) |
| RU (1) | RU2353651C2 (ru) |
| WO (1) | WO2006015557A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200701079B (ru) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100242671B1 (ko) * | 1991-03-07 | 2000-03-02 | 고돈 에릭 | 유전학적으로 처리한 백신 균주 |
| ATE290592T1 (de) * | 1993-11-04 | 2005-03-15 | Innogenetics Nv | Von menschlichen t-zellen immunodominante epitopen des virus der c-hepatitis |
| CU22642A1 (es) | 1996-12-12 | 2000-12-22 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Secuencia de adnc derivadas del genoma del virus de la hepatitis c y su uso |
| EP1200109A4 (en) * | 1999-07-19 | 2005-06-15 | Epimmune Inc | USE OF PEPTIDE NUCLEIC ACID COMPOUNDS TO TRIGGER CELLULAR IMMUNE RESPONSES TO HEPATITIS C |
| ES2399386T3 (es) * | 2001-04-05 | 2013-04-01 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Aumento de la inmunidad de las mucosas tras sensibilización parenteral |
-
2004
- 2004-08-11 CU CU20040174A patent/CU23470A1/es unknown
-
2005
- 2005-08-09 AR ARP050103317A patent/AR050451A1/es unknown
- 2005-08-09 MY MYPI20053696A patent/MY170516A/en unknown
- 2005-08-10 JP JP2007525153A patent/JP2008508890A/ja active Pending
- 2005-08-10 KR KR1020077003636A patent/KR20070040814A/ko not_active Application Discontinuation
- 2005-08-10 AU AU2005270612A patent/AU2005270612A1/en not_active Abandoned
- 2005-08-10 CA CA002575293A patent/CA2575293A1/en not_active Abandoned
- 2005-08-10 WO PCT/CU2005/000004 patent/WO2006015557A1/es active Application Filing
- 2005-08-10 MX MX2007001749A patent/MX2007001749A/es unknown
- 2005-08-10 CN CNA2005800342987A patent/CN101035560A/zh active Pending
- 2005-08-10 RU RU2007108290/13A patent/RU2353651C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2005-08-10 EP EP05773842A patent/EP1787656A1/en not_active Withdrawn
- 2005-08-10 BR BRPI0514274-1A patent/BRPI0514274A/pt not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-02-06 ZA ZA200701079A patent/ZA200701079B/en unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| YAP C.C. et al., "Expression of target genes by coinfection with replication-deficient viral vectors", J Gen Virol. 1998 Aug; 79 (Pt 8): 1879-88. PANCHOLI P. et al., "DNA immunization with hepatitis С virus (HCV) polycistronic genes or immunization by HCV DNA priming-recombinant canarypox virus boosting induces immune responses and protection from recombinant HCV-vaccinia virus infection in HLA-A2.1-transgenic mice", J Virol. 2003 Jan;77(l):382-90. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BRPI0514274A (pt) | 2008-06-10 |
| KR20070040814A (ko) | 2007-04-17 |
| MY170516A (en) | 2019-08-08 |
| RU2007108290A (ru) | 2008-09-20 |
| WO2006015557A1 (es) | 2006-02-16 |
| AU2005270612A1 (en) | 2006-02-16 |
| AR050451A1 (es) | 2006-10-25 |
| ZA200701079B (en) | 2008-07-30 |
| CN101035560A (zh) | 2007-09-12 |
| CU23470A1 (es) | 2009-12-17 |
| EP1787656A1 (en) | 2007-05-23 |
| JP2008508890A (ja) | 2008-03-27 |
| MX2007001749A (es) | 2007-04-20 |
| CA2575293A1 (en) | 2006-02-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Schirmbeck et al. | Nucleic acid vaccination primes hepatitis B virus surface antigen-specific cytotoxic T lymphocytes in nonresponder mice | |
| EP2391383B1 (en) | Codon-optimized hepatitis b virus core antigen (hbcag) | |
| US20160000904A1 (en) | Improved poxviral vaccines | |
| CA2481521A1 (en) | Intergenic regions as insertion sites in the genome of modified vaccinia virus ankara (mva) | |
| JPWO2012053646A1 (ja) | ワクシニアウイルスベクターおよびセンダイウイルスベクターからなるプライム／ブーストワクチン用ウイルスベクター | |
| WO2014093602A1 (en) | Compositions and methods for treating and preventing hepatitis c virus infection | |
| Yu et al. | A novel dendritic-cell-targeting DNA vaccine for hepatitis B induces T cell and humoral immune responses and potentiates the antivirus activity in HBV transgenic mice | |
| EP2915544B1 (en) | Chimeric vaccine antigens against hepatitis c virus | |
| KR101723900B1 (ko) | 면역화 요법용 발현 벡터로서의 수포성 구내염 바이러스의 상이한 혈청형 | |
| JP5584407B2 (ja) | Ｃ型肝炎ウイルス遺伝子を有する組換えワクシニアウイルス | |
| RU2353651C2 (ru) | Рекомбинантные векторы на основе "живого" вируса оспы домашней птицы и их применение в фармацевтических композициях против вируса гепатита с | |
| US10160979B2 (en) | Pharmaceutical composition for treatment and/or prevention of hepatitis C | |
| JP2008508890A6 (ja) | 組換え生鶏痘ウィルスベクター及びｃ型肝炎ウィルスに対する薬剤組成物中でのそれらの使用 | |
| Qu et al. | Localization of CD8+ cells specific for hepatitis B virus surface protein in the liver of immunized mice | |
| EP2233575A1 (en) | An anti-hcv vaccine and preparation methods and uses thereof | |
| US20160215023A1 (en) | Simple vaccines from dna launched suicidal flaviviruses | |
| WO2003035010A2 (en) | Thymosin augmentation of genetic immunization |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100811 |