RU2337953C1 - Strain of bacterium streptococcus thermophilic for milk souring in process of production of cultured milk foods, including yogurts - Google Patents
Strain of bacterium streptococcus thermophilic for milk souring in process of production of cultured milk foods, including yogurts Download PDFInfo
- Publication number
- RU2337953C1 RU2337953C1 RU2007117139/13A RU2007117139A RU2337953C1 RU 2337953 C1 RU2337953 C1 RU 2337953C1 RU 2007117139/13 A RU2007117139/13 A RU 2007117139/13A RU 2007117139 A RU2007117139 A RU 2007117139A RU 2337953 C1 RU2337953 C1 RU 2337953C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- milk
- vkpm
- medium
- conditions
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологической и пищевой промышленности и касается молочнокислых бактерий (МКБ), в частности Streptococcus thennophilus, которые используют в качестве закваски при получении кисломолочных продуктов, в том числе йогуртов, обычно в сочетании с культурами болгарской палочки. При этом предусматривается раздельное производство заквасок термофильного молочнокислого стрептококка и болгарской палочки [1]. Бактерии S. thennophilus традиционно используют как составную часть закваски, в основном действующую на первичных этапах технологического процесса [2]. Максимальная скорость роста клеток S.thennophilus в молоке (или иначе - минимальное время удвоения), тестируемая по скорости его сквашивания, часто является определяющей при выборе штаммов для закваски [3]. Время удвоения штамма характеризует темп деления клеток в благоприятных условиях логарифмической стадии роста. По окончании логарифмической стадии наступает период лимитации роста клеточной популяции в связи с возрастающей плотностью клеточной массы и увеличением кислотности среды. Уровень накопления биомассы в это время определяется как количеством клеток, образовавшихся в течение логарифмической стадии, так и их способностью продолжать делиться в неблагоприятных условиях.The invention relates to the microbiological and food industries, and relates to lactic acid bacteria (LAB), in particular Streptococcus thennophilus, which are used as starter culture for dairy products, including yoghurts, usually in combination with Bulgarian stick cultures. This provides for the separate production of starter cultures of thermophilic lactic streptococcus and Bulgarian bacillus [1]. Bacteria S. thennophilus are traditionally used as an integral part of the starter culture, mainly acting at the initial stages of the technological process [2]. The maximum growth rate of S. tennophilus cells in milk (or in other words, the minimum doubling time), tested by its fermentation rate, is often decisive when choosing strains for starter culture [3]. The doubling time of the strain characterizes the rate of cell division under favorable conditions of the logarithmic growth stage. At the end of the logarithmic stage, a period of limitation of the growth of the cell population begins in connection with the increasing density of the cell mass and an increase in the acidity of the medium. The level of biomass accumulation at this time is determined by both the number of cells formed during the logarithmic stage and their ability to continue to divide under adverse conditions.
Таким образом, можно выделить два различных свойства штамма:Thus, two different properties of the strain can be distinguished:
- скорость и продолжительность роста клеточной популяции на логарифмической стадии, характеризующиеся минимальным временем удвоения клеток;- the speed and duration of growth of the cell population at the logarithmic stage, characterized by a minimum time for doubling the cells;
- способность продолжать делиться на стадии лимитации роста, т.е. в неблагоприятных условиях, отражающаяся в общем количестве накопленной биомассы.- the ability to continue to share at the stage of growth limitation, i.e. in adverse conditions, reflected in the total amount of biomass accumulated.
В зависимости от их генетической природы бактерии S.thennophilus обладают разной устойчивостью к действию неблагоприятных факторов внешней среды. Имеются сведения об использовании при производстве кисломолочных продуктов термоустойчивых (до t=42°C) заквасок, включающих штаммы S. thennophilus [4, 5]. Штамм для производства творога Streptococcus (современное название Lactococcus) lactis subsp.cremoris [6] способен расти при температуре до 47°С. Существенной характеристикой производственного штамма является его кислотоустойчивость, поскольку некоторые используемые в составе поликомпонентных заквасок штаммы обладают высокой кислотообразующей способностью [7]. Наличие в составе закваски бактерий, генетический аппарат которых обеспечивает устойчивость к различным стрессовым воздействиям, позволяет сделать технологический процесс более стабильным.Depending on their genetic nature, S. tennophilus bacteria have different resistance to the action of adverse environmental factors. There is evidence of the use of fermented milk products with heat-resistant (up to t = 42 ° C) starter cultures, including S. thennophilus strains [4, 5]. The strain for the production of cottage cheese Streptococcus (modern name Lactococcus) lactis subsp. cremoris [6] is able to grow at temperatures up to 47 ° C. An essential characteristic of a production strain is its acid resistance, since some strains used in the composition of multicomponent starter cultures have a high acid-forming ability [7]. The presence of bacteria in the starter culture, the genetic apparatus of which provides resistance to various stressful effects, makes the process more stable.
Штаммы бактерий вида S.thermophilus в современном производстве используют в составе поликомпонентных [8] заквасок. С целью повышения эффективности и надежности производственного процесса сквашивания молока объединяемые в закваске штаммы подбирают таким образом, чтобы их технологически значимые свойства были взаимодополняемыми.The bacterial strains of the S.thermophilus species in modern production are used as part of multicomponent [8] starter cultures. In order to increase the efficiency and reliability of the production process of milk fermentation, strains to be combined in yeast are selected in such a way that their technologically significant properties are complementary.
Вопросы устойчивости клеток бактериальной закваски к неблагоприятным факторам, а именно ингибиторам роста и сезонным изменениям состава молока, были рассмотрены ранее [9]. Устойчивые штаммы традиционно характеризовали по способности образовывать вязкие сгустки.The issues of resistance of bacterial starter cells to adverse factors, namely, growth inhibitors and seasonal changes in milk composition, were considered earlier [9]. Resistant strains have traditionally been characterized by their ability to form viscous clots.
В настоящей работе мы используем другой подход и характеризуем устойчивость штамма к неблагоприятным воздействиям по количеству биомассы, накапливаемой за период времени, включающий стадию лимитации роста.In this work, we use a different approach and characterize the resistance of the strain to adverse effects by the amount of biomass accumulated over a period of time, including the stage of growth limitation.
В качестве ближайшего аналога заявляемого штамма рассмотрим производственный штамм S.thermophilus ST 18 [10]. Он, как другие штаммы МКБ видов S.thermophilus и L.lactis subsp.lactis [10, 11], способен расщеплять бета-казеин и имеет две фазы логарифмической стадии роста в молоке. Уровень накопления биомассы за 5,5-6 часов инкубации в молоке, включая стадию лимитации роста, близок 109 кл/мл и при дальнейшей инкубации не превышает этого значения [10].As the closest analogue of the claimed strain, consider the production strain of S.thermophilus ST 18 [10]. It, like other strains of the ICD of the species S.thermophilus and L. lactis subsp.lactis [10, 11], is capable of cleaving beta casein and has two phases of a logarithmic growth stage in milk. The level of biomass accumulation over 5.5-6 hours of incubation in milk, including the stage of growth restriction, is close to 10 9 cells / ml and does not exceed this value during further incubation [10].
Задача заявляемого изобретения - получить без применения мутагенов и генетических манипуляций бактериальный штамм S.thermophilus, устойчивый к воздействию ряда неблагоприятных факторов, имеющих место при проведении технологического процесса сквашивания молока.The task of the invention is to obtain without the use of mutagens and genetic manipulations a bacterial strain of S.thermophilus that is resistant to a number of adverse factors that occur during the technological process of fermentation of milk.
Задача решена путем получения штамма S.thermophilus, имеющего повышенную жизнеспособность в условиях дефицита питательных компонентов среды, обладающего уровнем накопления биомассы 1,3·109 кл/мл через 24 часа инкубирования в молоке, устойчивого к воздействию температуры до 50°С, а также закислению среды до значения рН 5,0 на стадии логарифмического роста.The problem was solved by obtaining a strain of S.thermophilus, which has increased viability in conditions of deficiency of nutrient components of the medium, with a biomass accumulation level of 1.3 · 10 9 cells / ml after 24 hours of incubation in milk, resistant to temperatures up to 50 ° C, and acidification of the medium to pH 5.0 at the stage of logarithmic growth.
Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов и имеет номер ВКПМ В-9587.The strain is deposited in the All-Russian collection of industrial microorganisms and has a VKPM number V-9587.
Заявляемый штамм получен из штамма S. thermophilus ВС 104 [12] в результате многоступенчатой селекции в условиях повышенной до 50°С температуры.The inventive strain was obtained from a strain of S. thermophilus BC 104 [12] as a result of multistage selection at elevated temperatures up to 50 ° C.
Штамм S.thermophilus ВКПМ В-9587 имеет следующие характеристики:Strain S.thermophilus VKPM B-9587 has the following characteristics:
1. Культурально-морфологические признаки. Факультативный анаэроб. Грамположительные кокки величиной 0,7-1,0 мкм, неподвижные, располагаются преимущественно попарно, встречаются цепочки кокков средней длины. Клетки овальные, неподвижные, эндоспор не образует. На поверхности агаризованных сред МА4, МА6 и МА20 (табл.1) через 24 часа при 37-42°С образует белые, выпуклые, гладкие колонии с ровными краями.1. Cultural and morphological characteristics. Optional anaerobic. Gram-positive cocci with a size of 0.7-1.0 μm, motionless, are located mainly in pairs, there are chains of cocci of medium length. The cells are oval, motionless, does not form endospores. On the surface of agarized media, MA4, MA6 and MA20 (Table 1) after 24 hours at 37-42 ° C form white, convex, smooth colonies with smooth edges.
2. Физиолого-биохимические свойства. Образование молочного сгустка происходит через 6 часов инкубирования при 37°С, приводя к закислению среды до значения рН 4,5-4,7, а через 24 часа до значения 3,9-4,0. Штамм сбраживает глюкозу и лактозу, растет при 50°С.2. Physiological and biochemical properties. The formation of a milk clot occurs after 6 hours of incubation at 37 ° C, leading to acidification of the medium to a pH of 4.5-4.7, and after 24 hours to a value of 3.9-4.0. The strain ferments glucose and lactose, grows at 50 ° C.
3. Поддержание штамма ведут путем еженедельного пересева на агаризованной среде МА6.3. The maintenance of the strain is carried out by weekly reseeding on agarized medium MA6.
4. Хранение штамма осуществляют в лиофилизированном виде или при -20°С в физиологическом растворе, содержащем 40% глицерина.4. Storage of the strain is carried out in lyophilized form or at -20 ° C in saline containing 40% glycerol.
5. Видовая принадлежность бактерий заявляемого штамма S.thermophilus ВКПМ В-9587 определена путем секвенирования 16S рРНК.5. The species of bacteria of the claimed strain of S.thermophilus VKPM B-9587 was determined by sequencing of 16S rRNA.
6. Среды для оценки технологически значимых свойств штаммов МКБ. Использовали молоко, а также среды МА6, МВ6 и МА20 (табл.1), являющиеся аналогами среды М21 [12, 13], широко применяемой для культивирования МКБ, и приближенные по составу к молоку среды МА4, М4 [14].6. Media for evaluating the technologically significant properties of strains of the ICD. We used milk, as well as MA6, MV6, and MA20 media (Table 1), which are analogues of the M21 medium [12, 13], which is widely used for the cultivation of MKB, and are similar in composition to the medium of MA4, M4 [14].
Состав питательных сред (мас.%)Table 1
The composition of the nutrient media (wt.%)
7. Отбор контрольных штаммов. Для более объективной характеристики свойств заявляемого штамма использованы контроли. Из группы штаммов S. thermophilus АТСС19258 [15], St 47 [16], ВС 103, ВС 113, ВС 128, ВС 130, ВС 131 [12] в качестве контрольных выбраны штаммы ВС 103 и ВС 113, далее обозначаемые ВКПМ В-9588 и ВКПМ В-9589 соответственно, из которых первый отличается минимальным временем удвоения, а второй - наиболее коротким временем сквашивания молока.7. The selection of control strains. For a more objective characterization of the properties of the claimed strain used controls. From the group of strains of S. thermophilus ATCC19258 [15], St 47 [16], BC 103, BC 113, BC 128, BC 130, BC 131 [12], the BC 103 and BC 113 strains were selected as control, hereinafter designated VKPM B- 9588 and VKPM B-9589, respectively, of which the first is characterized by a minimum doubling time, and the second by the shortest milk fermentation time.
8. Пример 1. Ростовые характеристики заявляемого штамма8. Example 1. Growth characteristics of the claimed strain
Время удвоения штамма ВКПМ В-9587 в сравнении с контрольными штаммами ВКПМ В-9588 и ВКПМ В-9589 определяли на второй фазе логарифмической стадии роста, которая начинается с 3,5 час инкубирования в молоке [10]. Посевной материал (10 мкл), представляющий собой ночную культуру бактерий, выращенную при 37°С в 3 мл 0,5% молока «Домик в деревне», засевали в пробирки, содержащие 3 мл того же молока до конечной концентрации 106 кл/мл и инкубировали при температуре 37°С. Замеры титра клеток делали через 3,5 и 4,5 часами инкубирования (табл.2). Титр клеток определяли путем подсчета числа колоний, выросших через 24 часа после высева бактериальной суспензии на чашки Петри со средой МА6. Время удвоения на логарифмической стадии роста заявляемого штамма ВКПМ В-9587 (36 мин) больше, чем у контрольных (ВКПМ В-9588-17 мин, ВКПМ В-9589-30 мин) и у ближайшего аналога (ST 18-27,3 мин).The doubling time of the VKPM B-9587 strain in comparison with the control VKPM B-9588 and VKPM B-9589 strains was determined in the second phase of the logarithmic growth stage, which begins with 3.5 hours of incubation in milk [10]. Inoculum (10 μl), which is an overnight culture of bacteria grown at 37 ° C in 3 ml of 0.5% milk "Village House", was seeded in tubes containing 3 ml of the same milk to a final concentration of 10 6 cells / ml and incubated at 37 ° C. Cell titer measurements were taken after 3.5 and 4.5 hours of incubation (Table 2). The cell titer was determined by counting the number of colonies grown 24 hours after plating the bacterial suspension on Petri dishes with MA6 medium. The doubling time at the logarithmic growth stage of the inventive strain VKPM B-9587 (36 min) is longer than that of the control (VKPM B-9588-17 min, VKPM B-9589-30 min) and the closest analogue (ST 18-27.3 min )
Уровень накопления биомассы штаммом ВКПМ В-9587 через 24 часа инкубирования в молоке в тех же условиях составляет 1,3·109 кл/мл, что превышает значение этого параметра у ближайшего аналога [5] и контрольного штамма ВКПМ В-9588.The level of biomass accumulation by the VKPM B-9587 strain after 24 hours of incubation in milk under the same conditions is 1.3 · 10 9 cells / ml, which exceeds the value of this parameter for the closest analogue [5] and the control VKPM B-9588 strain.
Уровень накопления биомассы штаммов S.thermophilus в молокеtable 2
The level of biomass accumulation of S.thermophilus strains in milk
В условиях нашего эксперимента между 4,5 часами (время, близкое к началу стадии лимитации роста) и 24 часами (время, заведомо превышающее переход клеточной популяции в стационарную стадию) титр бактерий заявляемого штамма увеличился в 3,5 раза, штамма ВКПМ В-9589 - в 1,8 раза, а штамма ВКПМ В-9588 упал в 0,7 раза (табл.2). Из этого следует, что в неблагоприятных условиях роста при высокой плотности популяции заявляемый штамм имеет преимущество перед обоими контрольными, так как не только продолжает делиться после 4,5 часов, но и накапливает за время лимитации роста большее количество клеток, чем контрольный штамм ВКПМ В-9589.In the conditions of our experiment, between 4.5 hours (time close to the beginning of the stage of growth limitation) and 24 hours (time obviously exceeding the transition of the cell population to the stationary stage), the bacterium titer of the claimed strain increased by 3.5 times, strain VKPM B-9589 - 1.8 times, and the VKPM B-9588 strain fell 0.7 times (Table 2). It follows that under adverse growth conditions with a high population density, the claimed strain has an advantage over both control ones, since it not only continues to divide after 4.5 hours, but also accumulates a larger number of cells during growth limitation than the control VKPM B-strain 9589.
Пример 2. Двухфазный рост модельного объекта МКБ Lactococcus lactis subsp.lactis на приближенной по составу к молоку минимальной питательной среде М4Example 2. Two-phase growth of the model object of the ICD of Lactococcus lactis subsp.lactis on the minimum nutrient medium M4 similar in composition to milk
В молоке стадия логарифмического роста S. thermophilus [10] и L. lactis [11] состоит из двух фаз. В среде МВВР [13], содержащей, как и молоко, в качестве источника азота свободные олигопептиды (пептон из казеина), наличие аналогичных двух фаз показано на бактериях L. lactis (штамм ТВ2). В связи с тем, что штамм ТВ2 не является типичным для бактерий L. lactis [13], в настоящей работе в качестве модельного использован штамм L. lactis subsp. lactis ВКПМ В-9590 [18]. В этом примере бактерии выращивали в минимальной питательной среде М4 (табл.1), которая в качестве источника азота содержит свободные олигопептиды, а в качестве источника углерода, как и молоко, - лактозу (в отличие от среды МВВР, содержащей глюкозу). Для получения посевного материала культуру штамма ВКПМ В 9590 инкубировали в течение 19 часов на среде МА4, представляющей собой агаризованный вариант среды М4. Затем собирали микробиологической петлей в 1 мл физиологического раствора, концентрировали при помощи центрифугирования в 15 мкл такого же раствора и добавляли в количестве 10 мкл в 5 мл среды М4 до конечной концентрации 6,4·106 кл/мл. Через 1 час инкубирования при 37°С титр клеток вырос в среднем (на основании 4 независимых опытов) в 2,6 раза, что соответствует времени удвоения 46 мин. При дальнейшем инкубировании в течение второго часа темп деления бактерий замедлился, титр клеток в среднем вырос в 1,95 раз, время удвоения составило 62 мин. На этом закончилась первая фаза роста, не требующая включения генов протеолитической активности. Далее наблюдали рост клеточной популяции, соответствующий логарифмической стадии (время удвоения от 60 до 40 мин, что соответствует известным данным о скорости репликации ДНК [19] в условиях логарифмической стадии роста бактерий). Таким образом, среда М4 так же, как и молоко, обеспечивает двухфазный рост МКБ. Ее агаризованный вариант - среда МА4 (табл.1), имеющая ту же концентрацию питательных веществ, в дальнейшем (пример 4) использована для характеристики морфогенеза колоний заявляемого штамма.In milk, the stage of logarithmic growth of S. thermophilus [10] and L. lactis [11] consists of two phases. In MVVR medium [13], which contains, like milk, free oligopeptides (peptone from casein) as a nitrogen source, the presence of similar two phases is shown in bacteria L. lactis (strain TB2). Due to the fact that the TB2 strain is not typical for bacteria L. lactis [13], in this work, the strain L. lactis subsp was used as a model. lactis VKPM B-9590 [18]. In this example, the bacteria were grown in M4 minimal nutrient medium (Table 1), which contains free oligopeptides as a nitrogen source, and lactose as a carbon source, like milk (in contrast to the MVBR medium containing glucose). To obtain seed, the culture of strain VKPM B 9590 was incubated for 19 hours on MA4 medium, which is an agarized version of M4 medium. Then, a microbiological loop was collected in 1 ml of physiological solution, concentrated by centrifugation in 15 μl of the same solution, and 10 μl in 5 ml of M4 medium was added to a final concentration of 6.4 · 10 6 cells / ml. After 1 hour of incubation at 37 ° C, the cell titer increased on average (based on 4 independent experiments) 2.6 times, which corresponds to a doubling time of 46 minutes. With further incubation during the second hour, the rate of bacterial division slowed down, the cell titer increased on average 1.95 times, the doubling time was 62 minutes. This ended the first phase of growth, which does not require the inclusion of genes for proteolytic activity. Then, the growth of the cell population corresponding to the logarithmic stage was observed (doubling time from 60 to 40 min, which corresponds to the known data on the rate of DNA replication [19] under the conditions of the logarithmic stage of bacterial growth). Thus, M4 medium, as well as milk, provides two-phase growth of MKD. Its agarized version, MA4 medium (Table 1), which has the same concentration of nutrients, is further used (Example 4) to characterize the morphogenesis of the colonies of the claimed strain.
Пример 3. Устойчивость заявляемого штамма к повышению кислотности средыExample 3. The resistance of the claimed strain to increase the acidity of the medium
Процесс сквашивания молока сопряжен с повышением кислотности среды, то есть понижением значения рН. В связи с этим, устойчивость к понижению значения рН используемых в составе закваски бактерий в период их логарифмического роста является важной технологической характеристикой. Условия, близкие к начальной стадии кислотной коагуляции казеина [20] в процессе сквашивания, смоделированы путем добавления 100 мкл желудочного сока («ЭКВИН» ГУП «Иммунопрепарат») в 1 мл среды МВ6 (табл.1), что приводило к понижению рН до значения, близкого к 5,0. В пробах без добавления желудочного сока титр бактерий заявляемого ВКПМ В-9587 и контрольных ВКПМ В-9588 и ВКПМ В-9589 штаммов определяли сразу после добавления посевного материала в 5 мл среды МВ6, а также после 3,5 и 4,5 часов инкубирования при 37°С. Для определения влияния желудочного сока к пробам бактериальной суспензии объемом 1 мл после 3,5 часов их роста в среде МВ6 добавляли 100 мкл желудочного сока (Ж/С) и продолжали инкубировать еще в течение 1 часа. Из результатов, представленных в таблице 3, следует, что в присутствии желудочного сока титр контрольных штаммов в течение анализируемого периода времени упал в два раза, а заявляемого - увеличился в 1,9 раза. Время удвоения заявляемого штамма в неблагоприятных условиях повышенной кислотности составило 63 мин и соответствовало нормальному темпу клеточного деления. В соответствующих пробах без добавления желудочного сока клетки всех трех штаммов на том же временном отрезке инкубирования интенсивно делились (время удвоения у заявляемого штамма - 24 мин, а у контрольных - 21 мин). Выявленная устойчивость клеток заявляемого штамма к повышенной кислотности среды в процессе активного роста дает ему технологическое преимущество по сравнению с контрольными, позволяя осуществлять процесс сквашивания молока в условиях, являющихся критическими для других штаммов.The process of fermentation of milk is associated with an increase in the acidity of the medium, that is, a decrease in the pH value. In this regard, the resistance to lowering the pH value used in the composition of the starter bacteria during their logarithmic growth is an important technological characteristic. Conditions close to the initial stage of acid coagulation of casein [20] during the fermentation process were simulated by adding 100 μl of gastric juice (EQUIN GUP Immunopreparat) in 1 ml of MV6 medium (Table 1), which led to a decrease in pH to close to 5.0. In samples without the addition of gastric juice, the bacterium titer of the inventive VKPM B-9587 and the control VKPM B-9588 and VKPM B-9589 strains were determined immediately after the addition of seed in 5 ml of MV6 medium, as well as after 3.5 and 4.5 hours of incubation at 37 ° C. To determine the effect of gastric juice, 100 μl of gastric juice (W / C) was added to samples of a 1 ml bacterial suspension after 3.5 hours of growth in MB6 medium and continued to incubate for another 1 hour. From the results presented in table 3, it follows that in the presence of gastric juice, the titer of control strains during the analyzed period of time fell twice, and the claimed - increased 1.9 times. The doubling time of the claimed strain in adverse conditions of high acidity was 63 minutes and corresponded to the normal rate of cell division. In the corresponding samples without the addition of gastric juice, the cells of all three strains were intensively divided at the same incubation time interval (the doubling time for the claimed strain was 24 minutes, and for the control 21 minutes). The revealed resistance of the cells of the claimed strain to increased acidity of the medium during active growth gives it a technological advantage compared to the control, allowing the process of fermentation of milk to be carried out under conditions that are critical for other strains.
Титр бактерий штамма ВКПМ В-1111 в присутствии желудочного сокаTable 3
The titer of bacteria strain VKPM B-1111 in the presence of gastric juice
Пример 4. Определение жизнеспособности заявляемого штамма в процессе длительного культивированияExample 4. Determination of the viability of the inventive strain during long-term cultivation
Бактерии заявляемого ВКПМ В-9587 и контрольного ВКПМ В-9588 штаммов выращивали в течение 24 часов при 37°С после посева штрихом на чашки Петри с обогащенной агаризованной средой МА20. Из выросшей биомассы каждого штамма готовили бактериальную суспензию и разводили ее таким образом, чтобы при высеве на поверхность минимальной агаризованной среды МА4 можно было наблюдать сопоставимое количество отдельных колоний сравниваемых штаммов на одной чашке.Bacteria of the inventive VKPM B-9587 and control VKPM B-9588 strains were grown for 24 hours at 37 ° C after plating on Petri dishes with enriched agar medium MA20. A bacterial suspension was prepared from the grown biomass of each strain and diluted in such a way that when plating on the surface of a minimal agarized medium MA4, a comparable number of individual colonies of the compared strains on one plate could be observed.
После длительного (в течение 96 часов) инкубирования при 37°С средняя площадь колоний заявляемого штамма превосходила таковую у контрольного штамма (2 и 0,5 мм2 соответственно). Это подтверждает способность заявляемого штамма ВКПМ В-9587 накапливать большее количество биомассы в условиях минимального состава питательной среды и длительного инкубирования.After a long (for 96 hours) incubation at 37 ° C, the average colony area of the claimed strain exceeded that of the control strain (2 and 0.5 mm 2, respectively). This confirms the ability of the inventive strain VKPM B-9587 to accumulate a greater amount of biomass under conditions of a minimum composition of the nutrient medium and prolonged incubation.
Свойства заявляемого штамма свидетельствуют о целесообразности его использования в составе поликомпонентной закваски, так как при неблагоприятных условиях (понижении рН среды, повышении температуры, а также постепенного обеднения состава питательной среды по мере протекания технологического процесса) он способен осуществлять сквашивание молока. Повышенная жизнеспособность бактерий позволяет повысить содержание живых клеток в получаемом кисломолочном продукте [21].The properties of the claimed strain indicate the feasibility of its use as part of a multicomponent sourdough, since under unfavorable conditions (lowering the pH of the medium, increasing temperature, as well as the gradual depletion of the composition of the nutrient medium as the process proceeds), it is capable of fermenting milk. Increased bacterial viability allows to increase the content of living cells in the resulting fermented milk product [21].
Источники информацииInformation sources
1. SU 1750592.1. SU 1750592.
2. Степаненко П.П. Микробиология молока и молочных продуктов. 1999. - 415 с.2. Stepanenko P.P. Microbiology of milk and dairy products. 1999 .-- 415 p.
3. SU 1461759.3. SU 1461759.
4. RU 2218793.4. RU 2218793.
5. RU 2109455.5. RU 2109455.
6. SU 1705340.6. SU 1705340.
7. SU 1731141.7. SU 1731141.
8. RU 2218793.8. RU 2218793.
9. SU 1730142.9. SU 1730142.
10. Appl. Environ. Microbiol. 2002. V.68. P.3162-3165.10. Appl. Environ. Microbiol. 2002. V.68. P.3162-3165.
11. Appl. Environ. Microbiol. 1995. V.61. P.3024-3030.11. Appl. Environ. Microbiol. 1995. V. 61. P.3024-3030.
12. Биохимия. 2007. №6 (в печати).12. Biochemistry. 2007. No.6 (in press).
13. Микробиология. 2006. Т.75. №1. С.1-9.13. Microbiology. 2006.V. 75. No. 1. S.1-9.
14. Тезисы конференции: Генетика микроорганизмов и биотехнология. Москва - Пущине. 2006. С.65.14. Conference abstracts: Genetics of microorganisms and biotechnology. Moscow - Pushchino. 2006. P.65.
15. International Journal of Systematic Bacteriology. 1999. V.49. P.759-767.15. International Journal of Systematic Bacteriology. 1999. V.49. P.759-767.
16. App. Environ. Microbiol. V.63. N.8. P.3246-3253.16. App. Environ. Microbiol. V.63. N.8. P.3246-3253.
17. RU 2244002.17. RU 2244002.
18. Антибиотики и химиотерапия, 1988. №3. С.203-210.18. Antibiotics and chemotherapy, 1988. No. 3. S.203-210.
19. BioEssays. 1994. V.16. P.13-22.19. BioEssays. 1994. V.16. P.13-22.
20. SU 404459.20. SU 404459.
21. RU 2088660.21. RU 2088660.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007117139/13A RU2337953C1 (en) | 2007-05-08 | 2007-05-08 | Strain of bacterium streptococcus thermophilic for milk souring in process of production of cultured milk foods, including yogurts |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007117139/13A RU2337953C1 (en) | 2007-05-08 | 2007-05-08 | Strain of bacterium streptococcus thermophilic for milk souring in process of production of cultured milk foods, including yogurts |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2337953C1 true RU2337953C1 (en) | 2008-11-10 |
Family
ID=40230290
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007117139/13A RU2337953C1 (en) | 2007-05-08 | 2007-05-08 | Strain of bacterium streptococcus thermophilic for milk souring in process of production of cultured milk foods, including yogurts |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2337953C1 (en) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2567150C1 (en) * | 2014-12-24 | 2015-11-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" | Streptococcus thermophilus STRAIN USED FOR PRODUCTION OF FERMENTED MILK PRODUCTS |
| RU2590716C1 (en) * | 2015-05-26 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пензенский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "Пензенский государственный университет") | Strain of bacteria streptococcus thermophilus strain used for preparation of cultured milk product |
| RU2590713C1 (en) * | 2015-06-09 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук | STRAIN OF Staphylococcus xylosus USED AS TEST CULTURE FOR DETERMINING ANTI-INTERCIDAL ACTIVITY OF MICROORGANISMS |
| RU2724529C2 (en) * | 2018-11-08 | 2020-06-23 | Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" (ООО "Инбиотех") | Strain of bacteria streptococcus thermophilus t-3693 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products |
| RU2726113C2 (en) * | 2018-11-08 | 2020-07-09 | Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" | Strain of bacteria streptococcus thermophiles t-5367 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products |
| RU2733895C2 (en) * | 2015-12-18 | 2020-10-09 | Кхр. Хансен А/С | Lactic acid bacteria for producing fermented food products with intensified natural sweet taste and good texture |
| RU2737198C2 (en) * | 2018-11-08 | 2020-11-25 | Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" (ООО "Инбиотех") | Strain of bacteria streptococcus thermophilus used as a component of a direct starter for preparation of fermented milk products |
-
2007
- 2007-05-08 RU RU2007117139/13A patent/RU2337953C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| CATHERINE LETORT, MICHELE NARDI, PEGGY GARAULT et al. Casein Utilization by Streptococcus thermophilus Results in a Diauxic Growth in Milk. Appl. Environ. Microbial. June 2002. p.3162-3165. EI-ZAHAR K., CHOBERT JM, SITOHY M et al. Proteolytic degradation of ewe milk proteins fermentation of yoghurts and storage. Nahrung, 2003 Jun; 47(3), p.199-206. * |
| Голландцы на российском рынке молочных продуктов. Разнообразие заквасок DSM. Молочная промышленность, 2007, №5, 2007, с.71,72. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2567150C1 (en) * | 2014-12-24 | 2015-11-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" | Streptococcus thermophilus STRAIN USED FOR PRODUCTION OF FERMENTED MILK PRODUCTS |
| RU2590716C1 (en) * | 2015-05-26 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пензенский государственный университет" (ФГБОУ ВПО "Пензенский государственный университет") | Strain of bacteria streptococcus thermophilus strain used for preparation of cultured milk product |
| RU2590713C1 (en) * | 2015-06-09 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук | STRAIN OF Staphylococcus xylosus USED AS TEST CULTURE FOR DETERMINING ANTI-INTERCIDAL ACTIVITY OF MICROORGANISMS |
| RU2733895C2 (en) * | 2015-12-18 | 2020-10-09 | Кхр. Хансен А/С | Lactic acid bacteria for producing fermented food products with intensified natural sweet taste and good texture |
| RU2724529C2 (en) * | 2018-11-08 | 2020-06-23 | Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" (ООО "Инбиотех") | Strain of bacteria streptococcus thermophilus t-3693 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products |
| RU2726113C2 (en) * | 2018-11-08 | 2020-07-09 | Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" | Strain of bacteria streptococcus thermophiles t-5367 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products |
| RU2737198C2 (en) * | 2018-11-08 | 2020-11-25 | Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" (ООО "Инбиотех") | Strain of bacteria streptococcus thermophilus used as a component of a direct starter for preparation of fermented milk products |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2337953C1 (en) | Strain of bacterium streptococcus thermophilic for milk souring in process of production of cultured milk foods, including yogurts | |
| RU2751166C2 (en) | Method for obtaining a dairy product fermented with lactic acid bacteria and bacillus bacteria, bacterial composition and its application in this method | |
| Tserovska et al. | Identification of lactic acid bacteria isolated from katyk, goat’s milk and cheese | |
| CN102695420A (en) | Lactic bacterium with modified galactokinase expression for texturizing food products by overexpression of exopolysaccharide | |
| ITMI20061841A1 (en) | MICROBIAL LIQUID CULTIVATIONS WITH HIGH STABILITY AND FERMENTATIVE ACTIVITY | |
| Aponte et al. | Lactic acid bacteria occurring during manufacture and ripening of Provolone del Monaco cheese: Detection by different analytical approaches | |
| WO2019095274A1 (en) | Lactobacillus plantarum with high butanedione yield and use thereof | |
| CN110272846A (en) | Lactobacillus plantarum and its application with ABTS free radical and PTIO free radical scavenging activity | |
| Cueto et al. | Preliminary studies on the microbiological characterization of lactic acid bacteria in suero costeño, a Colombian traditional fermented milk product | |
| RU2567150C1 (en) | Streptococcus thermophilus STRAIN USED FOR PRODUCTION OF FERMENTED MILK PRODUCTS | |
| RU2590716C1 (en) | Strain of bacteria streptococcus thermophilus strain used for preparation of cultured milk product | |
| KR101156161B1 (en) | Bacillus subtilis hj18-4 oligotrophic strain isolated from memil soksungjang and method for making fermentation food by using same | |
| CN1793325A (en) | Aromatic type direct putting type ferment agent for sour milk | |
| Andeta et al. | Development and validation of lactic acid starter cultures for enset (Ensete ventricosum) fermentation | |
| RU2698032C1 (en) | Strain of lactobacilli streptococcus salivarius - producer of lactic acid and antibiotic substances | |
| KR100590913B1 (en) | A method for preparation of chungkukgang with soybean curd residue by using bacillus sp. and lactic acid bacteria | |
| KR101227816B1 (en) | Composition for promoting growth of lactic acid bacteria containing hydrolyzed whey concentrate fermented by yeast | |
| RU2786437C1 (en) | Lactobacillus strain lacticaseibacillus paracasei 14-2020 vkpm - b-13841 used for the production of fermented milk products | |
| Samet-Bali et al. | Enumeration and identification of microflora in “Leben”, a traditional Tunisian dairy beverage | |
| CN112512325A (en) | Method for producing improved dairy products using spore-forming negative bacillus strains | |
| RU2704857C1 (en) | Strain of lactobacilli lactobacillus plantarum - producer of lactic acid, antibiotic substances and starter component for production of fermented milk products | |
| RU2567148C1 (en) | Streptococcus salivarius VKPM V-11177 STRAIN USED FOR PRODUCTION OF FERMENTED MILK PRODUCTS AND PRO-BIOTIC PREPARATIONS | |
| RU2567814C1 (en) | Streptococcus salivarius STRAIN VKPM V-11174, OBTAINED ON AVAILABLE MEDIUM | |
| RU2689716C1 (en) | Lactobacillus delbrueckii bp 1-2018 vkpm b-13108 lactobacillus strain - producer of lactic acid and antibiotic substances | |
| RU2780155C1 (en) | Strain of bacteria lactococcus lactis subsp. cremoris 36 rcam 05396 used in the production of dietary fermented milk products |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150509 |