RU2314040C1 - Способ диагностики острого пиелонефрита у детей - Google Patents
Способ диагностики острого пиелонефрита у детей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2314040C1 RU2314040C1 RU2006133434/14A RU2006133434A RU2314040C1 RU 2314040 C1 RU2314040 C1 RU 2314040C1 RU 2006133434/14 A RU2006133434/14 A RU 2006133434/14A RU 2006133434 A RU2006133434 A RU 2006133434A RU 2314040 C1 RU2314040 C1 RU 2314040C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- molecules
- cd11β
- acute pyelonephritis
- children
- lymphocytes
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии и иммунологии. В периферической крови больных определяют методом непрямой иммунофлюоресценции с применением моноклональных антител уровень экспрессии молекул адгезии CD11β и CD54 лимфоцитов и при содержании молекул CD11β более 26,34% и молекул CD54 более 33,26% определяют активную стадию острого пиелонефрита. Способ прост и информативен. Он позволяет быстро и объективно в течение 2,5 часов после взятия крови оценить показатели адгезии лейкоцитов и их трансэндотелиальной миграции, отличается высокой информативностью для подтверждения активности микробно-воспалительного процесса при остром пиелонефрите, обеспечивает своевременное и рациональное проведение комплекса терапевтических мероприятий. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, иммунологии. Оно может быть использовано в клинике для диагностики острого пиелонефрита (ОП) у детей.
Известен способ диагностики ОП по клиническим признакам, согласно которому ОП дифференцируют от цистита, гломерулонефрита, интерстициального нефрита, наследственного нефрита и других заболеваний (Возианов А.Ф., Майданник В.Г., Бидный В.Г., Багдасарова И.В. Основы нефрологии детского возраста. - К.: Книга плюс, 2002. - С.22-91).
Известен способ диагностики пиелонефрита по определению уровня цитокинов, который выбран в качестве ближайшего аналога. Этот способ включает выявление повышения уровня цитокинов (фактора некроза опухоли-альфа, трансформирующего фактора роста-бета1) в плазме крови иммуноферментным методом (Хворостов И.Н., Смирнов И.Е., Зоркин С.Н., Кучеренко А.Г. Цитокины при обструктивных уропатиях у детей. // Вопросы современной педиатрии. - Приложение № 1: Сборник материалов Х Съезда педиатров России «Пути повышения эффективности медицинской помощи детям». - 2005. - Т.4. - С.572). Недостатком данного способа является его высокая стоимость.
Целью изобретения является повышение точности, эффективности и объективизация диагностики острого пиелонефрита, что обеспечит быстроту постановки диагноза, экономичность, а также своевременное и рациональное проведение комплекса терапевтических мероприятий.
Сущность предложенного способа диагностики состоит в том, что наряду с клиническими данными и исследованием мочи определяют уровень молекул адгезии CD11β и CD54 лимфоцитов в периферической крови ребенка методом непрямой иммунофлюоресценции с применением моноклональных антител и при содержании молекул CD11β более 26,34% и молекул CD54 более 33,26% диагностируют активную стадию ОП.
Выход клеток иммунной системы из сосудистого русла и миграция их в очаг проникновения инфекционных агентов являются ключевым этапом в системе защиты организма. Взаимодействие CD11β (Mac-1, интегрин, рецептор iC3b) с CD54 (ICAM-1, лиганд для LFA-1 и Мас-1) имеет важное значение в регуляции отдельного этапа адгезии лейкоцитов и их трансэндотелиальной миграции. ICAM-1 и его рецептор LFA-1 являются дополнительными факторами активации Т-лимфоцитов. Молекулы адгезии CD11β и CD54 индуцируются медиаторами воспаления, такими как IL-1, TNFα и IFNγ. Этим можно объяснить повышение уровня экспрессии молекул адгезии при микробно-воспалительном процессе в почках.
Способ осуществляется следующим образом: из пробы (4-5 мл) гепаринизированной крови, взятой натощак у больных детей, выделяют лимфоциты на градиенте фиколл-верографина, затем 1-0,1 млн лимфоцитов в объеме 50 мкл вносят в лунки 96-луночного круглодонного планшета. К клеткам добавляют 5 мкл тестируемых моноклональных антител (CD11β, CD54) и инкубируют 30-45 мин при +4°С. Затем добавляют 150 мкл раствора Хенкса и центрифугируют 5 мин при 200 g. После удаления супернатанта вносят 50 мкл раствора Хенкса, клетки суспендируют, добавляют 150 мкл раствора Хенкса и центрифугируют 5 мин при 200 g. К осадку отмытых клеток добавляют 50 мкл F(ab~)2-фрагментов овечьих антител к Ig мыши, меченных ФИТЦ и разведенных 1:100 (для разведения используют раствор Хенкса, содержащий 0,5% желатины и 0,1% азида натрия). Клетки суспендируют и инкубируют 30 мин при +4°С, затем клетки 2 раза отмывают как указано выше. Окрашенные клетки анализируют с помощью люминесцентного микроскопа. Клетки суспендируют, переносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и препарат просматривают под иммерсией с увеличением (×3; объектив ×90). Количество антигенпозитивных клеток определяют как % флюоресцирующих клеток при просматривании 200 лимфоцитов за вычетом % флюоресцирующих клеток, наблюдаемых в препарате отрицательного контроля. В качестве отрицательного контроля используют препараты, подготовленные аналогичным образом, но без обработки моноклональными антителами. При содержании молекул адгезии CD11β более 26,34% и молекул адгезии CD54 более 33,26% устанавливают активную стадию ОП.
ПРИМЕР.
Девочка Д., 5 лет. Больна 2 суток. Заболевание началось после переохлаждения с повышения температуры тела до 39,0°С, появления болей в животе, в поясничной области. При поступлении в стационар состояние средней тяжести, температура 39,0°С. Кожные покровы бледные, отеков и пастозности тканей нет. В легких везикулярное дыхание. ЧДД 20 в 1 мин. Тоны сердца удовлетворительной звучности. Пульс 120 в 1 мин, АД 100/60 мм рт.ст. Живот мягкий, болезненный при пальпации в области правого фланка. Область почек не изменена, почки не пальпируются, симптом Пастернацкого справа положительный. Стул оформленный. Мочеиспускания учащены до 10 раз в сутки, безболезненные.
В общем анализе крови нейтрофильный лейкоцитоз, увеличение СОЭ. Биохимический анализ крови: уровень общего белка, мочевины, креатинина в пределах нормы, С-реактивный белок - отриц. В общем анализе мочи - лейкоцитурия, оксалурия. Анализ мочи по Нечипоренко: лейкоциты - 15.750 в 1 мл (нейтрофилы 80%, лимфоциты 20%), эритроциты - 1000 в 1 мл. Бактериологическое исследование мочи: Е. coli 100000 КОЕ в 1 мл, чувствительна к ампициллину, цефтриаксону, цефтазидиму, гентамицину, нитрофурантоину. Снижена антикристаллобразующая способность мочи к оксалатам кальция. По результатам исследования клиренса по эндогенному креатинину, анализа мочи по Зимницкому - функция почек сохранена. УЗИ почек и мочевого пузыря: неоднородность центрального эхокомплекса за счет гиперэхогенных сигналов, эхопризнаки воспалительного процесса правой почки. Консультация гинеколога: признаков воспаления наружных половых органов не выявлено.
Уровень экспрессии молекул адгезии CD11β лимфоцитами периферической крови 36,00%, молекул CD54 - 46,00%.
Диагноз. Острый вторичный (дисметаболический) пиелонефрит, активная стадия. Функция почек сохранена.
Данные показывают, что молекулы CD11β и CD54 могут служить маркером активности микробно-воспалительного процесса при ОП.
Способ диагностики острого пиелонефрита у детей по уровню экспрессии молекул адгезии CD11β и CD54 лимфоцитами периферической крови был апробирован на 14 детях с предварительным диагнозом острый пиелонефрит, поставленным на основании клинических признаков (основная группа).
Контрольную группу составили 30 детей с первой группой здоровья, с нормальными анализами крови и мочи. Всем обследованным производился забор крови и определение уровня экспрессии молекул CD11β и CD54 лимфоцитами периферической крови перечисленным выше способом.
Результаты проведенного исследования представлены в таблице. Для обработки полученного материала и проведения статистического анализа в исследованных группах была использована программа статистической обработки информации «STATGRAPHICS PLUS». Вычисляли среднюю и ошибку средней (М±m). Сравнение в исследованных группах проводили попарно при помощи параметрических методов, так как изучаемые выборки могли быть аппроксимированы нормальным законом распределения. Сравнение осуществляли с помощью критериев Стьюдента (t) (сравнение средних) и Фишера (сравнение средних квадратических отклонений). Уровень достоверности оценивали значением р. Различия при сравнении считали достоверными с вероятностью более 95% при Р<0,05.
У здоровых детей молекулы адгезии CD11β экспрессируют не более 18,34% лимфоцитов периферической крови, молекулы CD54 - 22,41%.
Полученные данные показали, что при ОП уровень экспрессии молекул адгезии CD11β и CD54 лимфоцитами периферической крови достоверно увеличивался, следовательно, молекулы CD11β и CD54 можно считать высокочувствительным маркером активности микробно-воспалительного процесса при ОП.
Использование предложенного способа диагностики имеет следующие преимущества:
1) высокую информативность для подтверждения активности микробно-воспалительного процесса при остром пиелонефрите;
2) быструю диагностику;
Таблица 1 СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО ПИЕЛОНЕФРИТА У ДЕТЕЙ |
|||
Острый пиелонефрит (n=14) | Здоровые (n=30) | ||
М±m (min, max) | М±m (min, max) | ||
CD11β (%) | CD54 (%) | CD11β (%) | CD54 (%) |
30,10±1,88* | 37,00±1,87* | 18,00±0,17* | 22,00±0,21* |
(26,34-33,86) | (33,26-40,74) | (17,66-18,34) | (21,79-22,41) |
Примечание: * - p<0,05 - достоверность различия в группах при сравнении |
3) обеспечивает своевременное и рациональное проведение комплекса терапевтических мероприятий.
Claims (1)
- Способ диагностики острого пиелонефрита, включающий исследование периферической крови, отличающийся тем, что определяют степень экспрессии лимфоцитами молекул адгезии CD11β и CD54 методом непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител и при содержании молекул CD11β более 26,34% и молекул CD54 более 33,26% считают наличие активности микробно-воспалительного процесса при остром пиелонефрите подтвержденным.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006133434/14A RU2314040C1 (ru) | 2006-09-18 | 2006-09-18 | Способ диагностики острого пиелонефрита у детей |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006133434/14A RU2314040C1 (ru) | 2006-09-18 | 2006-09-18 | Способ диагностики острого пиелонефрита у детей |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2314040C1 true RU2314040C1 (ru) | 2008-01-10 |
Family
ID=39020046
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2006133434/14A RU2314040C1 (ru) | 2006-09-18 | 2006-09-18 | Способ диагностики острого пиелонефрита у детей |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2314040C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2697722C1 (ru) * | 2018-12-06 | 2019-08-19 | Ирина Сергеевна Шатохина | Способ диагностики активности воспалительного процесса при латентном течении хронического пиелонефрита |
-
2006
- 2006-09-18 RU RU2006133434/14A patent/RU2314040C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
ПОЛОСУХИНА Е.Р. Прогностическое значение экспрессии антигена CD95 (Fas/APO-1) у больных с трансплантацией почки. - Медицинская иммунология, 2001, т.2, №2, с.151-152. NACCASHA N.P. et al. Phenotypic and metabolic characteristics of monocytes and granulocytes in normal pregnancy and maternal infection. Am J Obstet Gynecol. 2001 Nov; 185(5): 1118-23. * |
ХВОРОСТОВ И.Н. и др. Цитокины при обструктивных уропатиях у детей. Вопросы современной педиатрии. Приложение №1. Сборник материалов Х Съезда педиатров России "Пути повышения эффективности медицинской помощи детям", 2005, т.4, с.572. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2697722C1 (ru) * | 2018-12-06 | 2019-08-19 | Ирина Сергеевна Шатохина | Способ диагностики активности воспалительного процесса при латентном течении хронического пиелонефрита |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2314040C1 (ru) | Способ диагностики острого пиелонефрита у детей | |
RU2318447C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики хронического пиелонефрита у детей | |
RU2303995C1 (ru) | Средство, обладающее иммунорегуляторным свойством и его применение для лечения аутоиммунных заболеваний | |
RU2487357C1 (ru) | Способ диагностики недифференцированной дисплазии соединительной ткани у лиц молодого возраста (17-29 лет) без фоновых заболеваний и интоксикаций | |
Ferguson et al. | Correlation of cutaneous hypersensitivity with lymphocytic response to Candida albicans | |
RU2314039C1 (ru) | Способ диагностики хронического пиелонефрита у детей | |
RU2402768C1 (ru) | Способ диагностики абактериального простатита с помощью иммунофенотипирования лимфоцитов | |
RU2256916C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза органов дыхания | |
RU2341803C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики инфекционных заболеваний на догоспитальном этапе | |
RU2476881C2 (ru) | Способ дифференциальной диагностики тяжести течения язвенной болезни | |
Casey III et al. | Mitral valve endocarditis secondary to nasal irrigation use in chronic allergic rhinitis | |
RU2414706C1 (ru) | Способ раннего прогнозирования септических осложнений у новорожденных с респираторной патологией | |
Finlayson et al. | Hydatid disease in Toronto | |
Azim et al. | Autologous serum skin test in chronic idiopathic urticaria: Comparative study in patients with positive versus negative test | |
Vaishnavi et al. | Systemic Melioidosis Presenting as Septic Arthritis | |
RU2657586C1 (ru) | Способ прогнозирования течения хронического гепатита С 1 генотипа у нелеченных больных с высокой вирусной нагрузкой | |
RU2187811C1 (ru) | Способ прогнозирования течения дизентерии | |
CN108241054B (zh) | 检测g蛋白偶联受体18的试剂在制备败血症诊断及病程监测和预后判断试剂中表达的应用 | |
RU2322677C1 (ru) | Способ прогнозирования характера течения реактивного артрита у детей дошкольного возраста | |
RU2253868C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики деструктивного панкреатита | |
RU2166757C2 (ru) | Способ диагностики латентного вторичного хронического пиелонефрита у больных с камнями почек | |
Blazer et al. | Abstracts from the Fourteenth Rambam Research Day, December 7, 2017 | |
RU2639480C1 (ru) | Способ диагностики выраженного фиброза печени у больных хроническим гепатитом С с 1 генотипом | |
RU2649745C2 (ru) | Способ диагностики интерстициального цистита у кошек | |
SU1343358A1 (ru) | Способ диагностики целиакии |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080919 |