RU2286169C1 - Семейство пептидов, обладающее анальгетической активностью - Google Patents

Семейство пептидов, обладающее анальгетической активностью Download PDF

Info

Publication number
RU2286169C1
RU2286169C1 RU2005111281/15A RU2005111281A RU2286169C1 RU 2286169 C1 RU2286169 C1 RU 2286169C1 RU 2005111281/15 A RU2005111281/15 A RU 2005111281/15A RU 2005111281 A RU2005111281 A RU 2005111281A RU 2286169 C1 RU2286169 C1 RU 2286169C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
tyr
ser
pro
dpro
och
Prior art date
Application number
RU2005111281/15A
Other languages
English (en)
Inventor
Людмила Юрьевна Алфеева (RU)
Людмила Юрьевна Алфеева
Людмила Александровна Андреева (RU)
Людмила Александровна Андреева
Тать на Александровна Воронина (RU)
Татьяна Александровна Воронина
Людмила Сергеевна Гузеватых (RU)
Людмила Сергеевна Гузеватых
нова Тать на Георгиевна Емель (RU)
Татьяна Георгиевна Емельянова
соедов Николай Федорович М (RU)
Николай Федорович Мясоедов
Сергей Борисович Середенин (RU)
Сергей Борисович Середенин
Original Assignee
Институт Молекулярной Генетики Российской Академии Наук (Имг Ран)
Государственное учреждение научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова Российской академии медицинских наук (ГУ НИИ фармакологии имени В.В. Закусова РАМН)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт Молекулярной Генетики Российской Академии Наук (Имг Ран), Государственное учреждение научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова Российской академии медицинских наук (ГУ НИИ фармакологии имени В.В. Закусова РАМН) filed Critical Институт Молекулярной Генетики Российской Академии Наук (Имг Ран)
Priority to RU2005111281/15A priority Critical patent/RU2286169C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2286169C1 publication Critical patent/RU2286169C1/ru

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается получения и применения пептидов формулы (I), обладающих анальгетической активностью, для создания новых лекарственных препаратов. Пептиды обладают повышенной активностью по сравнению с пентальгином, анальгином, морфином, не токсичны.
Figure 00000001
где
А - О, - Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -He, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
Б - О, - Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -He, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
В - О, - Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -He, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
X - OH, -ОСН3, -NH2. 5 табл.

Description

Настоящее изобретение относится к использованию пептидов общей формулы A-Б-Tyr-Pro(DPro, dHPro, DdHPro, DLdHPro, Hyp)-B-X, приведенных ниже, в качестве обезболивающих анальгетических препаратов.
Известны различные обезболивающие препараты, которые по своей химической природе и механизму действия подразделяются на наркотические (морфин и близкие к нему структуры) и ненаркотические анальгетики (производные салициловой кислоты, пиразолона, анилина и др.). Все вышеперечисленные анальгетики обладают теми или иными недостатками, которые резко сужают возможности их применения в медицине [М.Д.Машковский. Лекарственные средства, Харьков: из-во «Торсинг»,1997, издание 13, с.144-145].
Известны в организме млекопитающих эндогенные лиганды пептидной природы, ответственные за физиологические анальгетические эффекты энкефалины и эндорфины. В последние годы обнаружен и активно исследуется еще один класс эндогенных пептидов - динорфины, в частности дерморфин [Емельянова Т.Г., Незавибатько В.Н., Усенко А.Б., Андреева Л.А. Гептапептид, обладающий анальгетической активностью, сочетающейся с терморегуляторной и/или с сосудодвигательной активностью и/или с влиянием на поведенческую реакцию испытуемого, и способ изменения физиологической активности дерморфина [Патент №2134121, выдан 10 августа 1999 г.], обладающие свойствами эндогенных анальгетиков.
Однако использовать эти пептидные последовательности для создания лекарственных препаратов не удалось. Это связано с тем, что в организме наряду с системой образования эндогенных анальгетиков существует и система быстрого их уничтожения. Поэтому попытки создания новых лекарственных препаратов пептидной природы не увенчались успехом.
С целью устранения отмеченных недостатков предлагается новая группа пептидных последовательностей общей формулы
А-Б-Tyr-Pro(DPro, dHPro, DdHPro, DLdHPro, Hyp)-В-Х.
Синтезированы дипептиды формулы Tyr-Pro, Tyr-Pro-ОСН3, Tyr-Pro-NH2, трипептиды Tyr-Pro-Ser-ОСН3, Tyr-Pro-Ser-NH2, Tyr-Hyp-Ser-ОСН3, Tyr-Hyp-Ser-NH2, Tyr-DPro-Ser-ОСН3, Tyr-DPro-Ser-NH2, Tyr-DLdHPro-Ser-ОСН3, Tyr-dHPro-Ser-NH2, Tyr-Pro-Lys-NH2, Tyr-Pro-Ala-NH2, тетрапептиды: Tyr-Pro-Gly-Pro-NH2, Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2, Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2, DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2, Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2, Met-Tyr-DPro-Ser-NH2, отвечающие вышеприведенной общей формуле, обладающие анальгетической активностью.
Приведенные аминокислотные последовательности, обладающие анальгетической активностью, обладают общей закономерностью, а именно наличием в структуре пептидной последовательности Tyr-Pro(DPro, dHPro, DdHPro, DLdHPro, Hyp) в 1,2 или 2,3-положениях вышеприведенных пептидов. Впервые обнаружена закономерность, воздействовать на центральную нервную систему пептидов общей формулы
Figure 00000002
, где
А - О, -Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -Ile, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
Б - О, -Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -Ile, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
В - О, -Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -Ile, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
X - OH, -OCH3, -NH2.
Эта закономерность подтверждена синтезом и анальгетическими тестами, проведенными на животных, самых разнообразных пептидов, отвечающих общей формуле аминокислотной последовательности. Исходя из приведенных исследований, можно заключить, что пептиды, отвечающие общей формуле
Figure 00000002
, могут быть использованы для создания новых лекарственных препаратов с анальгетической активностью.
Изобретение относится к области физиологии и фармакологии для создания новых лекарственных препаратов и может найти применение в медицине.
Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является создание новых пептидов, отвечающих общей формуле (I), выявление их полезных анальгетических свойств и направленная разработка на их основе лекарственных препаратов.
Указанный технический результат достигается тем, что позволяет направленно синтезировать различные пептидные последовательности, отвечающие общей формуле (I) по общей схеме. Проводить направленный скрининг обезболивающих свойств синтезированных пептидов по стандартной программе.
Некоторые пептиды общей формулы (I) представлены в таблице 1 и включают:
Figure 00000003
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008
Figure 00000009
Figure 00000010
Figure 00000011
Figure 00000012
Figure 00000013
Figure 00000014
Figure 00000015
Figure 00000016
Figure 00000017
Figure 00000018
Figure 00000019
Figure 00000020
Figure 00000021
Figure 00000022
Figure 00000023
Figure 00000024
Figure 00000025
Figure 00000026
Figure 00000027
Figure 00000028
Figure 00000029
Figure 00000030
Figure 00000031
Figure 00000032
Figure 00000033
Figure 00000034
Figure 00000035
Figure 00000036
Figure 00000037
Figure 00000038
Figure 00000039
Figure 00000040
Figure 00000041
Figure 00000042
Figure 00000043
Figure 00000044
Figure 00000045
Figure 00000046
Figure 00000047
Figure 00000048
Figure 00000049
Figure 00000050
Figure 00000051
Figure 00000052
Figure 00000053
Figure 00000054
Figure 00000055
Figure 00000056
Figure 00000057
Figure 00000058
Figure 00000059
Figure 00000060
Figure 00000061
Figure 00000062
Figure 00000063
Figure 00000064
Figure 00000065
Figure 00000066
Figure 00000067
Figure 00000068
Figure 00000069
Figure 00000070
Figure 00000071
Figure 00000072
Figure 00000073
Figure 00000074
Figure 00000075
Figure 00000076
Figure 00000077
Figure 00000078
Figure 00000079
Figure 00000080
Figure 00000081
Figure 00000082
Figure 00000083
Figure 00000084
Figure 00000085
Figure 00000086
Figure 00000087
Figure 00000088
Figure 00000089
Figure 00000090
Figure 00000091
Figure 00000092
Figure 00000093
Figure 00000094
Figure 00000095
Figure 00000096
Figure 00000097
Figure 00000098
Figure 00000099
Figure 00000100
Figure 00000101
Figure 00000102
Figure 00000103
Figure 00000104
Figure 00000105
Figure 00000106
Figure 00000107
Figure 00000108
Figure 00000109
Figure 00000110
Figure 00000111
Figure 00000112
Figure 00000113
Figure 00000114
Figure 00000115
Figure 00000116
Figure 00000117
Figure 00000118
Figure 00000119
Figure 00000120
Figure 00000121
Figure 00000122
Figure 00000123
Figure 00000124
Figure 00000125
Figure 00000126
Figure 00000127
Figure 00000128
Figure 00000129
Figure 00000130
Figure 00000131
Figure 00000132
Figure 00000133
Все пептиды этого семейства обладали анальгетической активностью. Ниже приведены примеры, подтверждающие это.
Синтез пептидов формулы (I) осуществляли методами пептидной химии, как в растворе, так и твердофазным методом синтеза с использованием L и D аминокислот, а также L, D и DL дегидро-аминокислот (3,4-дегидро-аминокислота в формуле (I), в таблицах и приведенных примерах обозначена символом dHPro).
Пример 1. Синтез трипептида HCl·H-Tyr-3,4-DLdHPro-Ser-OCH3.
На примере синтеза трипептида показан общий подход при синтезе пептидов формулы (I) в растворе.
В таблице 2 приведены пептиды формулы (I), синтезированные методами пептидной химии в растворе.
Таблица 2
Tyr-Pro-ОСН3 Tyr-Pro-NH2 Tyr-Pro
Tyr-DPro-Ser-ОСН3 Tyr-DPro-Ser-NH2 Tyr-Pro-Gly-Pro
Tyr-Pro-Ser-ОСН3 Tyr-Pro-Ser-NH2  
Tyr-Hyp-Ser-ОСН3 Tyr-Hyp-Ser-NH2  
Tyr-DLdHPro-Ser-ОСН3 Tyr-dHPro-Ser-NH2  
Синтез трипептида HCl·H-Tyr-3,4-DLdHPro-Ser-ОСН3 осуществляли конденсацией дипептида DiBoc-Tyr-3,4-DLdHPro и HCl·H-Ser-ОСН3 с использованием методов пептидной химии в растворе. Фрагменты синтезировали с применением тетрабутиламмонийных солей (ТБА) и методом активированных эфиров. Упаривание растворов проводили на вакуумном испарителе при 40°С. Контроль за синтезом и индивидуальность полученных соединений осуществляли с помощью тонкослойной хроматографии на пластинках с силикагелем фирмы Silufol (ЧСФР) при опрыскивании раствором нингидрина в системах растворителей:
1 - ацетон:бензол:уксусная кислота (2:1:1);
2 - хлороформ:метанол:аммиак (8:1,75:0,25).
Все растворители абсолютировали соответствующим образом. Точки плавления не корректировали. Колоночную хроматографию проводили с использованием носителей Силикагель L-40/100m и Silasorb 600 [LC] фирмы Chemapol (ЧСФР). Проверку гомогенности пептида проводили с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Все растворители соответствующим образом абсолютировали.
Принятые сокращения:
Boc - трет-бутилоксикарбонильная группа;
ДЦГК - дициклогексилкарбодиимид;
OSu - сукцинимидный эфир;
ТБА - тетрабутиламмоний;
ТЭА - триэтиламин;
dHPro - 3,4 дегидро-пролин;
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;
ТСХ - тонкослойная хроматография.
I. Получение дипептида DiBoc-Tyr-3,4-DLdH Pro.
1. К 3,4-DLdHPro 315 мг (2.78 ммоль) добавляли 5.56 мл (2.78 ммоль) 13% ТБА, упаривали 1 раз с этанолом, 1 раз с изо-пропанолом, 1 раз с бензолом, охлаждали до 0°С.
2. К охлажденному раствору ТБА 3,4-DLdHPro в 20 мл абс. этилацетата при охлаждении добавляли в сухом виде DiBoc-Tyr-OSu 1.330 г (2.78 ммоль), перемешивали 1 час при комнатной температуре на магнитной мешалке, за ходом реакции следили по ТСХ в хроматографической системе (1).
По окончании реакции растворитель упаривали, добавляли воду, подкисляли NaHSO4 (5-кратный избыток), до рН 3, экстрагировали 5 раз по 50 мл этилацетатом. Объединенные фракции этилацетата промывали водой, 10% раствором KHSO4, водой, сушили над MgSO4, упаривали, высаживали из эфира гексаном (дважды). Осадок в виде порошка сушили в вакууме.
Выход 1.32 г (2.76 ммоль) 99,3%
Rf=0.382 (1)
II. DiBoc-Tyr-3,4-DLdHPro-Ser-OCH3
DiBoc-Tyr-3,4-DLdHPro 1,32 г (2.76 ммоль) растворяли в 20 мл ацетонитрила, добавляли избыток (1.3) N-гидроксисукцинимида 412.8 мг (3.59 ммоль), охлаждали до 0°С и добавляли избыток (1.3) ДЦГК 810.88 мг (3.59 ммоль). Перемешивали на магнитной мешалке 1 час, охлаждали до 0°С, добавляли избыток (1.3) HCl·Н-Ser-ОСН3 558.22 мг (3.59 ммоль) и избыток (1.3) ТЭА 0.5 мл (3.59 ммоль), перемешивали 1 час при охлаждении и двое суток при комнатной температуре. Реакционную смесь отфильтровывали, упаривали, добавляли 100 мл этилацетата, экстрагировали водой, 10% раствором KHSO4, водой, 5% раствором NaHCO3, водой, насыщ. раствором NaCI. Раствор этилацетата сушили над MgSO4, отфильтровывали, упаривали. Переосаждали дважды из ацетона гексаном. Полученный осадок сушили в вакууме.
Выход 1.38 г (2.38 ммоль) - 86.56%
Rf=0.238 (1); 0.812 (2)
III. HCl·H-Tyr-3.4-DLdHPro-Ser-OCH3.
К 1.38 г (2.38 ммоль) DiBoc-Tyr-3,4-DLdHPro-Ser-OCH3 добавляли 7.14 мл 1н. HCl/СН3СООН и 2% анизола (0.14 мл анизола). Выдерживали 45 минут при комнатной температуре, упаривали, переосаждали из метанола эфиром.
Выход: 860 мг (1.93 ммоль) - 81%
Rf=0.512 (2).
Результаты ВЭЖХ: Колонка Zorbax SB-AQ С18. 4,6*150 мм; скорость потока 1 мл/мин; элюэнт 5% МеОН-50 mM buff, pH 2.8), линейный градиент, температура 30°C, давление 9.0 МРа, время выхода 7,73 мин.
Пример 2.
В таблице 3 приведены примеры синтеза пептидов автоматическим твердофазным методом.
Таблица 3
1. Tyr-Pro-Ala-NH2
2. Tyr-Pro-Lys-NH2
3. Met-Tyr-DPro-Ser-NH2
4. Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2
5. Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2
6. DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2
Пептиды, приведенные в таблице 3, были синтезированы автоматическим твердофазным методом по Fmoc-схеме на полимере Ринка (4-(2,4-диметоксифенил-флуоренилметокси-аминометил)-фенокси-полистирол, 0.5 ммоль амино-групп на 1 г полимера) с использованием DEPCDI/HOBt метода активации аминокислот. Пептиды отщепляли от полимера и деблокировали смесью TFA:m-crezole (95:5). Очистку пептидов проводили с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (колонка Jupiter Cis (10×250 мм) в следующем градиенте ацетонитрила: 5 мин при 2%, затем линейный градиент от 2 до 60% за 50 мин в 0.1% трифторацетатном буфере при скорости потока 4 мл/мин. Пептиды были охарактеризованы при помощи масс-спектрометрии (MALDI).
Пример 3.
Проведены сравнительные биологические испытания дипептидов Tyr-Pro, Tyr-Pro-ОСН3, Tyr-Pro-NH2, трипептидов Tyr-Pro-Ser-ОСН3, Tyr-Pro-Ser-NH2, Tyr-Hyp-Ser-ОСН3, Tyr-Hyp-Ser-NH2, Tyr-DPro-Ser-ОСН3, Tyr-DPro-Ser-NH2, Tyr-DLdHPro-Ser-ОСН3, Tyr-dHPro-Ser-NH2, Tyr-Pro-Lys-NH2, Tyr-Pro-Ala-NH2, тетрапептидов: Tyr-Pro-Gly-Pro-NH2, Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2, Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2, DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2, Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2, Met-Tyr-DPro-Ser-NH2 в тесте «отдергивания хвоста» для выявления анальгетической активности с гексапептидом Tyr-DPro-Ser-Pro-Gly-Pro, гептапептидом Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 - дерморфином и известными анальгетиками - пенталгином, анальгином и морфином.
Тест «отдергивания хвоста» - tail flick (D'Amor. 1941). Животное помещали в индивидуальную пластиковую камеру, хвост погружали на 5 см в сосуд с водой с температурой 55±1°С. Рефлекс отдергивания хвоста замыкается на уровне спинного мозга. В тесте фиксировали латентный период избавления от болевого раздражителя - период времени (сек), в течение которого животное выдергивало хвост из воды полностью. Максимальное время предъявления болевого раздражителя - 30 сек. Исходную болевую чувствительность определяли как среднее арифметическое из показателей, зафиксированных на 60, 40 и 20 минут до инъекции. Латентный период избавления от болевого раздражителя фиксировали через 20, 40 и 60, 120 минут после введения. Анальгетическую активность оценивали по изменению латентного периода реакции по формуле А=ЛПоп-ЛПисх, где ЛПоп - латентный период избавления после введения вещества, ЛПисх - среднее арифметическое латентных периодов избавления до введения вещества.
Исследуемые пептиды в дозе 1 мг/кг вводили внутрибрюшинно в водном растворе самцам нелинейных белых крыс весом 200-300 г. Контрольным животным вводили внутрибрюшинно дистиллированную воду. Полученные результаты приведены в таблице 4.
Таблица 4
  20 мин 40 мин 60 мин 90 мин 120 мин Площадь под кривой
Дипептиды в дозе 1 мг/кг            
Tyr-Pro 1,4 8,2* 6,4* 4,3* 2,0* 511
Tyr-Pro-ОМе 1,4 7,8* 5,7* 4,9* 1,5 496
Tyr-Pro-NH2 1,3 8,4* 4,7* 3,8* 0,8 438
Трипептиды в дозе 1 мг/кг            
Tyr-Pro-Ser-OMe 3,1* 2,6* 3,0* 1,5 1,4 255
Tyr-Pro-Ser-NH2 4,1* 5,1* 4,7* 3,6* 1,8 437
Tyr-Hyp-Ser-OMe -1,8 -1,5 2,0* 1,0 0,3 18,5
Tyr-Hyp-Ser-NH2 2,3* 1,7 1,1 0,6 0,2 129
Tyr-DPro-Ser-OMe 4,1* 2,3* 0,1 0 0 131
Tyr-DPro-Ser-NH2 5,7* 4,1* 3,0* 2,0* 1,0 346
Tyr-DLΔPro-Ser-OMe 1,9 2,2* 2,6* 1,3 0,5 194
Tyr-ΔРго-Ser-NH2 1,8 2,3* 6,0* 3,0* 1,1 339
Tyr-Pro-Lys-NH2 3,4* 3,1* 8,0* 1,4 -0,2 369
Tyr-Pro-Ala-NH2 4,8* 4,2* 2,5* 2,4* 1,0 330
Тетрапептиды в дозе 1 мг/кг            
Tyr-Pro-Glv-Pro-NH2 3,6* 2,0* 2,9* 1,2 0,4 227
Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2 2,5* 2,2* 2,2* 1,5 0,3 199
Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2 1,7 4,8* 3,0* 1,9 0,2 253
DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2 1,8 2,2* 3,8* 2,1* 0,7 249
Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2 2,4* 6,1* 6,6* 4,3* 0,9 478
Met-Tyr-DPro-Ser-NH2 0,9 1,8 0,4 0,2 0,1 72
Гексапептид Tyr-DPro-Ser-Pro-Gly-Pro            
в дозе 1 мг/кг 10,3* 1,7 1,1 0,5 -0,1 290
Гептапептид Tyr-DAla-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2-дерморфин            
в дозе 1 мг/кг 3,4 1,9 0,7 0,3 0,1 100
в дозе 10 мг/кг 2,4 3,5 6,2 7,8 8 733
Пенталгин в дозе 750 мг/кг 3,9 7,9 7,5 7,5 7,5 802
Анальгин в дозе 2500 мг/кг -0,1 0 0,1 0,2 0,1 16
Морфин            
в дозе 1 мг/кг 1,4 0,7 0,9 0,9 0,5 89
в дозе 10 мг/кг 7,5 7,5 7,5 7,5 7,5 750
Контроль 0,5 0,4 0 0,2 -0,4 18
* - р<0,05 - достоверные отличия от контрольной группы
Из таблицы 4 видно, что внутрибрюшинное введение дипептидов формулы (I) Tyr-Pro, Tyr-Pro-ОСН3, Tyr-Pro-NH2 вызывает достоверное увеличение латентного периода реакции отдергивания хвоста в ответ на болевое раздражение через 40 минут после введения. Эффект сохраняется на протяжении 90 минут.
Внутрибрюшинное введение трипептидов формулы (I) Tyr-Pro-Ser-ОСН3, Tyr-Pro-Ser-NH2, Tyr-Hyp-Ser-ОСН3, Tyr-Hyp-Ser-NH2, Tyr-DPro-Ser-ОСН3, Tyr-DPro-Ser-NH2, Tyr-DLdHPro-Ser-OCH3, Tyr-dHPro-Ser-NH2, Tyr-Pro-Lys-NH2, Tyr-Pro-Ala-NH2 также приводило к увеличению латентного периода реакции отдергивания хвоста. Введение Tyr-Pro-Ser-NH2, Tyr-DPro-Ser-NH2 или Tyr-Pro-Ala-NH2 вызывало достоверное удлинение времени реакции на протяжении 90 минут после инъекции. Tyr-Pro-Ser-ОСН3 и Tyr-Pro-Lys-NH2 вызывали обезболивающее действие в течение часа. Эффект Tyr-DLdHPro-Ser-ОСН3, Tyr-dHPro-Ser-NH2 развивался на 40 минуте после введения и длился до 60 минуты у Tyr-DLdHPro-Ser-ОСН3 и до 90 минуты у Tyr-dHPro-Ser-NH2, Tyr-DPro-Ser-ОСН3 вызывал анальгетическую реакцию на 20 и 40 минуте после введения. Обезболивающее действие Tyr-Hyp-Ser-ОСН3, Tyr-Нур-Ser-NH2 было слабым. Таким образом, было остановлено, что амидирование С-концевого аминокислотною остатка приводит к удлинению и усилению апальгетического эффекта трипептидов общей формулы (I). Модификации Pro остатка также изменяют анальгетическую активность.
Внутрибрюшинное введение тетрапептидов формулы (I) Tyr-Pro-Gly-Pro-NH2, Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2, Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2, DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2, Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2, Met-Tyr-DPro-Ser-NH2 изменяло латентный период реакции отдергивания хвоста. Наибольшей анальгетической активностью обладал Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2. Увеличение латентного периода реакции наблюдалось в течение 90 минут наблюдения. Tyr-Pro-Gly-Pro-NH2 и Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2 удлиняли латентный период отдергивания хвоста па протяжении 60 минут наблюдения. Эффект Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2 и DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2 начинался на 40 минуте после введения и длился у Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2 до 60 минуты, a DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2 - до 90 минуты. Met-Tyr-DPro-Ser-NH2 достоверно не изменял латентный период реакции отдергивания хвоста. Таким образом, изменение аминокислотных остатков вокруг последовательности Tyr-Pro влияет на анальгетическую активность.
Пример 4.
Проведены биологические испытания дипептидов Tyr-Pro, Tyr-Pro-ОСН3, Tyr-Pro-NH2, трипептидов Tyr-Pro-Ser-ОСН3, Tyr-Pro-Ser-NH2, Tyr-Hyp-Ser-ОСН3, Tyr-Hyp-Ser-NH2, Tyr-DPro-Ser-ОСН3, Tyr-DPro-Ser-NH2 Tyr-DLdHPro-Ser-ОСН3, Tyr-dHPro-Ser-NH2, Tyr-Pro-Lys-NH2, Tyr-Pro-Ala-NH2, тетрапептидов Tyr-Pro-Gly-Pro-NH2, Tyr-Tyr-Pro-Ser-NH2, Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2, DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2, Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2, Met-Tyr-DPro-Ser-NH2, в тесте корчей, вызванных уксусной кислотой.
Тест корчей, вызванных уксусной кислотой (Chernov et. al., 1967). Исследования проводились на самцах нелинейных белых мышей весом 20-30 г. Животных случайным образом разделяли на две группы по 10 мышей. Исследуемые пептиды в дозе 1 мг/кг вводили внутрибрюшинно за 20 минут до внутрибрюшинного введения 0,6% раствора уксусной кислоты. Контрольным животным вводили внутрибрюшинно дистиллированную воду также за 20 минут до внутрибрюшинного введения 0,6% раствора уксусной кислоты. Животные помещались в индивидуальные боксы. Регистрировалось число корчей на протяжении 30 минут после внутрибрюшинного введения 0,6% раствора уксусной кислоты (из расчета 10 мл на 1 кг веса). Число корчей в контрольной группе принималось за 100%. Полученные результаты приведены в таблице 5.
Таблица 5
  Число корчей %
Контроль 26,1 100
Дипептиды    
Tyr-Pro-ОСН3 4 15,3*
Трипептиды    
Tyr-Pro-Ser-ОСН3 7,5 28,7*
Tvr-Pro-Ser-NH2 3,3 12,6*
Tyr-Hyp-Ser-ОСН3 3,6 13,8*
Tyr-Hyp-Ser-NH2 2,8 10,7*
Tyr-DPro-Ser-ОСН3 5,0 19,1*
Tyr-DPro-Ser-NH2 7,0 26,8*
Tyr-DLdHPro-Ser-OCH3 3,6 13,8*
Tyr-dHPro-Ser-NH2 1,3 5,0*
Tyr-Pro-Lys-NH2 3,6 13,8*
Tyr-Pro-Ala-NH2 5,1 19,5*
Тетрапептиды    
Tyr-Pro-Gly-Pro-NH2 3,6 13,8*
Met-Tyr-DPro-Ser-NH2 1,8 7,0*
Контроль 16,8 100
Тетрапептиды    
Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2 3,6 21,4*
DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2 1,0 5,9*
Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2 2,1 12,5*
* - p<0.05 - достоверные отличия от контрольной группы.
Из таблицы 5 видно, что внутрибрюшинное введение дипептида формулы (I) Tyr-Pro-ОСН3, трипептидов формулы (I) Tyr-Pro-Ser-ОСН3, Tyr-Pro-Ser-NH2, Tyr-Hvp-Ser-ОСН3, Tyr-Hyp-Ser-NH2, Tyr-DPro-Ser-ОСН3, Tyr-DPro-Ser-NH2, Tyr-DLdHPro-Ser-ОСН3, Tyr-dHPro-Ser-NH2, Tyr-Pro-Lys-NH2, Tyr-Pro-Ala-NH2 тетрапептидов формулы (I) Tyr-Pro-Gly-Pro-NH2, Ala-Tyr-DPro-Ser-NH2, DAla-Tyr-DPro-Ser-NH2, Glu-Tyr-DPro-Ser-NH2, Met-Tyr-DPro-Ser-NH2, вызывает достоверное уменьшение числа корчей после введения уксусной кислоты по сравнению с контрольной группой.
Таким образом, дипептид, трипептиды, тетрапептиды формулы (I) обладают выраженным анальгетическнм эффектом в тесте корчей, вызванных уксусной кислотой.

Claims (1)

  1. Пептиды общей формулы
    A-Б-Tyr-Pro(DPro, dHPro, DdHPro, DLdHPro, Hyp)-B-X,
    где А - О, -Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -He, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
    Б - О, -Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -He, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
    В - О, - Ala, -Asp, -Glu, -Phe, -Gly, -His, -He, -Lys, -Leu, -Met, -Pro, -Arg, -Ser, -Thr, -Val, -Trp, -Tyr;
    X - OH, -ОСН3, -NH2,
    обладающие анальгетической активностью (О - обозначает отсутствие аминокислоты).
RU2005111281/15A 2005-04-18 2005-04-18 Семейство пептидов, обладающее анальгетической активностью RU2286169C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005111281/15A RU2286169C1 (ru) 2005-04-18 2005-04-18 Семейство пептидов, обладающее анальгетической активностью

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2005111281/15A RU2286169C1 (ru) 2005-04-18 2005-04-18 Семейство пептидов, обладающее анальгетической активностью

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2286169C1 true RU2286169C1 (ru) 2006-10-27

Family

ID=37438596

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2005111281/15A RU2286169C1 (ru) 2005-04-18 2005-04-18 Семейство пептидов, обладающее анальгетической активностью

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2286169C1 (ru)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008020778A1 (fr) * 2006-07-31 2008-02-21 Institut Molekulyarnoi Genetiki Rossiiskoi Akademii Nauk (Img Ran) Famille de peptides dotés d'une activité analgésique
RU2541127C1 (ru) * 2013-11-15 2015-02-10 Закрытое акционерное общество "Институт экспериментальной фармакологии" Анальгетическое средство пептидной структуры на основе ундекапептида, содержащего d-октааргининовый вектор
RU2656188C1 (ru) * 2017-05-03 2018-06-04 Общество с ограниченной ответственностью "Анкрим" (ООО "Анкрим") Синтетическое анальгетическое средство пептидной природы и способ его применения
CN109320586A (zh) * 2018-09-04 2019-02-12 庆云堂生物科技（北京）有限公司 一种新型四肽—苏酪脯精肽及其抗肿瘤应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Ashmarin I.P. et al., "Happy marriage of the members of two peptide families", Abstr. 2nd Europ. Congr. Biogerontol.: from Molecules to Humans, Saint Petersburg, Aug. 25-28, 2000. Успехи геронтологии, №5, с.33, 2000. *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008020778A1 (fr) * 2006-07-31 2008-02-21 Institut Molekulyarnoi Genetiki Rossiiskoi Akademii Nauk (Img Ran) Famille de peptides dotés d'une activité analgésique
RU2541127C1 (ru) * 2013-11-15 2015-02-10 Закрытое акционерное общество "Институт экспериментальной фармакологии" Анальгетическое средство пептидной структуры на основе ундекапептида, содержащего d-октааргининовый вектор
RU2656188C1 (ru) * 2017-05-03 2018-06-04 Общество с ограниченной ответственностью "Анкрим" (ООО "Анкрим") Синтетическое анальгетическое средство пептидной природы и способ его применения
CN109320586A (zh) * 2018-09-04 2019-02-12 庆云堂生物科技（北京）有限公司 一种新型四肽—苏酪脯精肽及其抗肿瘤应用
CN109320586B (zh) * 2018-09-04 2021-07-09 庆云堂生物科技（北京）有限公司 一种新型四肽—苏酪脯精肽及其抗肿瘤应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7071168B2 (en) Anti-cancer compounds and methods related thereto
JP2000501382A (ja) 新規アミノ酸誘導体、それらの調製方法及びこれらの化合物を含む医薬組成物
HRP960257A2 (en) New compounds, their preparation and use
JPH08508299A (ja) サイトカイン抑制剤
US20110160147A1 (en) Novel dual targeting antitumoral conjugates
JP2002533299A (ja) 環状ペプチドの合成
KR100360639B1 (ko) N-치환글리신함유브라디키닌길항제펩티드
JP2010209088A (ja) Ｐ−セレクチンに対する結合性化合物
RU2286169C1 (ru) Семейство пептидов, обладающее анальгетической активностью
RU2559880C1 (ru) Замещенный бисдипептид с нейропротективным и антидепрессивным эффектом
RU2538727C1 (ru) Анальгетическое средство пептидной структуры на основе тридекапептида, содержащего d-октааргининовый вектор
AU685292B2 (en) Tri-, tetra-, penta-, and polypeptides and their therapeutic use as a n antidepressant agent
HRP20000265A2 (en) Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis
WO2008020778A1 (fr) Famille de peptides dotés d&#39;une activité analgésique
US7183430B2 (en) Compounds which can block the response to chemical substances or thermal stimuli or mediators of inflammation of nociceptors, production method thereof and compositions containing same
WO2002096934A1 (en) Non-natural galanin receptor ligands
PL167322B1 (pl) Sposób wytwarzania zwiazków polipeptydowych PL PL
AU2017290096A1 (en) Novel cyclic peptides and uses thereof
US10167326B2 (en) Alpha-fetoprotein “ring and tail” peptides
WO1997010261A1 (fr) Derives peptidiques
US20030055000A1 (en) Non-natural galanin receptor ligands
JPH04312599A (ja) ポリペプチド骨格筋弛緩薬
RU2411248C2 (ru) Средство, обладающее антипсихотической активностью
RU2506269C1 (ru) Фармацевтическая композиция, содержащая физиологически активные гептапептиды, обладающие противосудорожным, анксиолитическим, центральным противовоспалительным и анальгетическим, а также антиалкогольным действием
HU196226B (en) Process for producing new tripeptide derivatives of antiamnesic activity and pharmaceutical compositions containing them as active components