RU2280875C2 - Способ диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом - Google Patents
Способ диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2280875C2 RU2280875C2 RU2003106522/15A RU2003106522A RU2280875C2 RU 2280875 C2 RU2280875 C2 RU 2280875C2 RU 2003106522/15 A RU2003106522/15 A RU 2003106522/15A RU 2003106522 A RU2003106522 A RU 2003106522A RU 2280875 C2 RU2280875 C2 RU 2280875C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- optical density
- antibodies
- autoimmune process
- sample
- patients
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области лабораторной диагностики и может быть использовано для выявления аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом. Сущность изобретения состоит в том, что исследование проводят в образце синовиальной жидкости, в качестве антигена используют хондроитинсульфат, определяют значение оптической критической плотности и оптической плотности образца при 450 нм и при значении оптической плотности образца выше оптической критической плотности диагностируют аутоиммунный процесс в суставах у больных остеоартрозом. Техническим результатом является выявление аутоиммунного процесса в суставах для определения показаний или противопоказаний к внутрисуставному введению хондропротекторов на основе гидролизатов гликозаминогликанов суставного хряща.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедии, в частности к лабораторной диагностике аутоиммунных процессов в суставах при остеоартрозе, и может быть использовано для определения показаний либо противопоказаний к внутрисуставному введению хондропротекторов на основе гидролизатов гликозаминогликанов суставного хряща.
Известен способ определения каталитических аутоантител и способ диагностики системных аутоиммунных заболеваний с их использованием: проводят электрофорез выделенных аутоантител, а диагностику осуществляют по количеству распрямленной плазмидной ДНК (Патент 2173464, РФ. Опубл. 10.09.2001).
Известен способ определения антител к гиалуроновой кислоте и ГАГ-полисульфату, который проводили с помощью оригинальной модификации твердофазного иммуноферментного метода (Бабаева А.Р. Клиническое и патогенетическое значение исследования сыворотчных гликозаминогликанов и антител к ним при заболеваниях внесуставных мягких тканей// Автореф. Дисс. Д.м.н. - С.10).
Однако в известном способе в качестве антигена применяют ГАГ-полисульфат, он не предусматривает использование чистого антигена.
Известен способ определения концентрации антител к гликозаминогликанам в сыворотке крови больных остеоартрозом, где в качестве антигена использовался ГАГ-полисульфат, при этом ретроспективно оценивали эффективность лечения хондропротекторами - артепароном и румалоном (Коваленко Е.А. Взаимосвязь уровня антител к гликозаминогликанам хряща у больных остеоартрозом с эффективностью лечения хондропротекторами. Автореферат дисс. к.м.н., Волгоград, 1997, 23 с.).
Однако известный способ не позволяет определять локализацию аутоиммунного процесса, так как антитела известным способом определяют в сыворотке крови.
Известен способ, в котором выявлена связь уровня антител к гликозаминогликанам хряща у больных с остеоартрозом с эффективностью лечения хондропротекторами, с использованием сыворотки крови методом твердофазного иммуноферментного анализа, где в качестве антигена используют гликозаминогликан-полисульфат (Заводовский Б.В. и др. «Связь уровня антител к гликозаминогликанам хряща у больных с остеоартрозом с эффективностью лечения хондропротекторами», Терапевтический архив, 1999, 71, №5, с.47-50).
Однако известный способ не позволяет определять локализацию аутоиммунного процесса, так как антитела известным способом определяют в сыворотке крови.
Задачей настоящего изобретения является разработка способа диагностики аутоиммунного процесса в суставе и определения показаний к внутрисуставному введению хондропротекторов.
Поставленная задача решается тем, что в способе диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом, включающем иммуноферментный анализ, в качестве антигена используют хондроитинсульфат, иммобилизуют его на плоскодонном иммунологическом планшете, регистрируют результаты с помощью планшетного спектрофотометра при длине волны 450 нм (хромоген-тетраметилбензидин), определяют оптическую плотность образцов синовиальной жидкости и сыворотки крови, значения позитивного и негативного контроля, оптической критической плотности, и по интенсивности окрашивания диагностируют наличие искомых антител в пробах.
Настоящее изобретение поясняют подробным описанием и примерами его выполнения.
Способ осуществляют следующим образом:
Для выполнения способа готовят тест-систему, включающую антиген - хондроитин сульфат («Sigma», U.S.A), иммобилизованный на пластиковом иммунологическом плоскодонном планшете, позитивный контроль - сыворотки больных, у которых верифицирован несколькими достоверными методами диагноз аутоиммунного заболевания, негативный контроль - сыворотки, не содержащие антител к гликозаминогликанам, тестированные в промышленных условиях по требуемым стандартам. Система визуализации реакции антиген-антитело - иммуноферментная, то есть содержит античеловеческие антитела, меченые ферментом-пероксидазой (коньюгат), субстратная система предполагает использование ТМБ (тетраметилбензидина).
Под пробой понимают исследуемый материал - сыворотку крови и синовиальную жидкость, - в котором предполагается наличие антител к гликозаминогликанам. Необходимое для анализа количество исследуемого материала составляет 10 мкл.
Подготовленные к исследованию пробы инкубируют в лунках иммунологического планшета в течение 1 часа при 37°С, затем вносят конъюгат, снова инкубируют в том же режиме, визуализируют результат при помощи иммуноферментной реакции и останавливают развитие цветной реакции одновременно с негативным и позитивным контролями. Результаты визуализации документируют на планшетном фотометре. При окраске исследуемой пробы выше значения оптической критической плотности реакция расценивается как положительная, что означает, что данный образец биологического материала содержит антитела к гликозаминогликанам суставного хряща.
Интенсивность желтого окрашивания пропорциональна количеству содержащихся в исследуемом образце антител к ГАГ.
Примеры выполнения способа.
Больной Бодров Ю.С., 65 лет. ист. болезни №20061.
Диагноз: 2-сторонний идиопатический гонартроз II стадии, киста Бейкера, распространенный остеохондроз, коксартроз, полиартроз. Ревмопробы отрицательные.
Способом артроцентеза произвели забор синовиальной жидкости из коленного сустава и из локтевой вены - сыворотки крови. Провели твердофазный иммуноферментный анализ. В качестве антигена использовали хондроитинсульфат, который иммобилизовали на плоскодонном иммунологическом планшете. Затем регистрировали результаты с помощью планшетного спектрофотометра при длине волны 450 нм (хромоген-тетраметилбензидин). Определили оптическую плотность образцов синовиальной жидкости и сыворотки крови, значения позитивного и негативного контроля. Вычислили величину оптической критической плотности: ОПкрит.=0,084+0,2=0,284.
В синовиальной жидкости получили величину оптической плотности:
ОП=(0,996+0,960)/2=0,978 - результат определения титра антител в синовиальной жидкости - положительный.
В сыворотке крови получили величину оптической плотности:
ОП=(0,560+0,247)/2=0,403 - результат определения титра антител в сыворотке крови - положительный.
По получению позитивного результата определения титра антител к гликозаминогликанам был диагносцирован аутоиммунный процесс.
Больная Масленникова В.А., 54 г. амбулаторная карта больного №...
Диагноз: 2-сторонний идиопатический гонартроз II стадии. Киста Бейкера. Ревмопробы отрицательные.
Способом артроцентеза произвели забор синовиальной жидкости из коленного сустава и из локтевой вены - сыворотки крови. Провели твердофазный иммуноферментный анализ. В качестве антигена использовали хондроитинсульфат, который иммобилизовали на плоскодонном иммунологическом планшете. Затем регистрировали результаты с помощью планшетного спектрофотометра при длине волны 450 нм (хромоген-тетраметилбензидин). Определили оптическую плотность образцов синовиальной жидкости и сыворотки крови, значения позитивного и негативного контроля. Вычислили величину оптической критической плотности: ОПкрит.=0,084-0,2=0,284.
В синовиальной жидкости получили величину оптической плотности:
ОП=(0,402-0,205)/2=0,304 - результат определения титра антител в синовиальной жидкости - положительный.
В сыворотке крови получили величину оптической плотности:
ОП=(0,211-0,093)/2=0,152 - результат определения титра антител в сыворотке крови - отрицательный.
По получению позитивного результата определения титра антител к гликозаминогликанам в синовиальной жидкости был диагносцирован локальный аутоиммунный процесс.
Прелагаемый способ используется в клинико-лабораторном отделе ФГУН РНЦ "ВТО" им Г.А.Илизарова. Он может быть использован в специализированных учреждениях соответствующего профиля.
Claims (1)
- Способ диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом, включающий иммуноферментный анализ, отличающийся тем, что исследование проводят в образце синовиальной жидкости, в качестве антигена используют хондроитинсульфат, определяют значение оптической критической плотности и оптической плотности образца при 450 нм и при значении оптической плотности образца выше оптической критической плотности диагностируют аутоиммунный процесс в суставах у больных остеоартрозом
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003106522/15A RU2280875C2 (ru) | 2003-03-07 | 2003-03-07 | Способ диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003106522/15A RU2280875C2 (ru) | 2003-03-07 | 2003-03-07 | Способ диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2003106522A RU2003106522A (ru) | 2004-09-10 |
RU2280875C2 true RU2280875C2 (ru) | 2006-07-27 |
Family
ID=37057942
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003106522/15A RU2280875C2 (ru) | 2003-03-07 | 2003-03-07 | Способ диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2280875C2 (ru) |
-
2003
- 2003-03-07 RU RU2003106522/15A patent/RU2280875C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ЗАВОДОВСКИЙ Б.В. и др. Связь уровня антител к гликозаминокликанам хряща у больных с остеоартрозом с эффективностью лечения хондропротекторами. Терапевтический архив, 1999, 71, №5, с.47-50. HARDINGHAM T. Chondroitin sulfate and joint disease. Osteoarthritis Cartilage. 1998 May; 6 Suppl A:3-5. RATCLIFFE A et al. Biochemical markers in synovial fluid identify early osteoarthritis of the glenohumeral joint, Clin Orthop Relat Res. 1996 Sep; (330):45-53. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10126312B2 (en) | Diagnostic method for urinary tract infection | |
CN102680698A (zh) | 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(ngal)测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法) | |
WO2011014349A1 (en) | Serum markers predicting clinical response to anti-tnfalpha antibodies in patients with psoriatic arthritis | |
ES2281363T3 (es) | Ensayo de diagnostico para el accidente cerebrovascular. | |
EP1069432B1 (en) | METHOD FOR EXAMINING IgA NEPHROPATHY | |
JP7454945B2 (ja) | 血液中のユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼl1レベルを測定するための、改善された方法 | |
JPWO1999050663A6 (ja) | IgA腎症の検査法 | |
WO2021209732A1 (en) | D-dimer, glial fibrillary acidic protein (gfap), osteoprotegerin (opg) and osteopontin (opn) as biomarkers for stroke caused by large vessel occlusion | |
TW202415952A (zh) | 用於子癇前症風險預測、評估或診斷的設備、生物標誌物群組及其在製備用於評估子癇前症風險的設備中的用途 | |
RU2280875C2 (ru) | Способ диагностики аутоиммунного процесса в суставах у больных остеоартрозом | |
KR20150140657A (ko) | 자간전증의 진단을 위한 방법 및 조성물 | |
CN108948154A (zh) | 一种瓜氨酸修饰肽及其应用 | |
EP4193151A1 (en) | Assays for detecting sars-cov-2 | |
RU2523413C1 (ru) | СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РЕВМАТОИДНОГО АРТИРИТА ПО НАЛИЧИЮ АНТИТЕЛ К МОДИФИЦИРОВАННОМУ ЦИНТРУЛЛИНИРОВАННОМУ ВИМЕНТИНУ (Anti-MCV) В РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ | |
JP5456056B2 (ja) | 体液中のifi16の検出 | |
CN107484423A (zh) | 通过测量抗ccp和抗pik3cd来评估类风湿性关节炎的方法 | |
RU2415439C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики увеита при ревматоидном артрите и болезни бехтерева | |
Pisetsky | Lupus Biomarkers | |
RU2706733C1 (ru) | Способ диагностики молекулярных фенотипов остеоартрита | |
CN108948174A (zh) | 一种瓜氨酸修饰肽及其应用 | |
AU2021105747A4 (en) | Application of diagnostic kit and MAK16 in preparation of reagent for early diagnosis of systemic lupus erythematosus | |
CN113817025B (zh) | Sle抗原表位多肽在鉴别sle和其他自身免疫疾病中的作用 | |
RU2413467C1 (ru) | Способ диагностики увеита при ревматоидном артрите и болезни бехтерева | |
RU2415430C1 (ru) | Способ определения циркулирующих иммунных комплексов | |
CN102590530B (zh) | Krt84自我免疫抗体作为诊断、检测类风湿性关节炎的诊断标记物的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20060308 |