RU2234326C2 - Способ локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции - Google Patents
Способ локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2234326C2 RU2234326C2 RU2002117632/14A RU2002117632A RU2234326C2 RU 2234326 C2 RU2234326 C2 RU 2234326C2 RU 2002117632/14 A RU2002117632/14 A RU 2002117632/14A RU 2002117632 A RU2002117632 A RU 2002117632A RU 2234326 C2 RU2234326 C2 RU 2234326C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- wound
- supernatants
- neutrophils
- supernatant
- macrophages
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для интенсификации заживления ран при раневой хирургической инфекции. Используют супернатанты активированных адгезией нейтрофилов, которые наносят на рану с 3-4 суток после оперативного вмешательства, пятикратно, с интервалом 24 часа в дозе 0,5-1,0 мл супернатанта, разведенного в 3,0 мл физиологического раствора, а через 12 часов проводят перевязки с антисептиками. Супернатанты получают путем культивирования лейкоцитарной смеси в течение 1 часа при температуре 37°С. Неадгезированные клетки удаляют из супернатантов центрифугированием при 3000 об/мин в течение 10 мин. Способ позволяет повысить эффективность заживления ран при раневой хирургической инфекции.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии.
Цель изобретения - повысить эффективность проводимой терапии, в результате стимуляции местного иммунитета значительно уменьшить локальную воспалительную реакцию, снизить уровень бактериальной обсемененности раны, повысить темпы сокращения раневого дефекта.
Сущность изобретения заключается в местном применении аутологичных секреторных продуктов активированных адгезией нейтрофилов в дополнение к комплексной терапии гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей (карбункулы, абсцессы, флегмоны) у мужчин и женщин. Для этого у больного производят забор 20,0 мл гепаринизированной периферической венозной крови, которую с целью осаждения эритроцитов и получения лейкоцитарной взвеси отстаивают с добавлением 10% раствора желатина в соотношении 10:1 при температуре 37°С в течение 30 минут. Выделенную лейкоцитарную взвесь однократно отмывают в растворе Хенкса центрифугированием при 1500 об/мин в течение 10 минут. Определяют количество нейтрофилов в 1,0 мл лейкоцитарной взвеси, разводят нейтрофилы до концентрации 5 млн кл/мл раствором Хенкса. Разливают по 1,0 мл клеточной суспензии в пластмассовые лабораторные чашки Петри для однократного применения диаметром 40 мм. Культивируют 1 час при температуре 37°С. Адгезированные при таком режиме культивирования клетки состоят на 94-98% из нейтрофилов, 2-6% составляют мононуклеары. Сливают надосадок. Неадгезированные клетки удаляют из супернатанта центрифугированием при 3000 об/мин в течение 10 минут. Полученный бесклеточный супернатант стерилизуют фильтрацией через фильтры с диаметром пор 0,22 мкм ("Millipore", USA). Выделенные аутологичные супернатанты активированных адгезией нейтрофилов наносят на рану больного пятикратно с интервалом 24 часа в дозе 0,5-1,0 мл супернатанта, разведенного в 3,0 мл 0,9% раствора NaCl. Перед использованием супернатанты проверяют на стерильность и иммунотропную активность. Стимулирующая активность супернатантов нейтрофилов больного устанавливается "in vitro" при использовании в качестве клеток-мишеней моноцитов донора, функциональная активность которых увеличивается после культивирования с исследуемым супернатантом. Доза супернатанта нейтрофилов больного определяется уровнем содержания в нем иммуностимулирующих факторов при сравнении его активности на моноцитах донора со стандартными суммарными донорскими супернатантами нейтрофилов с определенным уровнем содержания в них иммуностимулирующих продуктов. Для оценки эффективности местного применения супернатантов аутологичных нейтрофилов всех больных обследуют дважды: на 2-3 и 9-10 сутки после оперативного вмешательства. Определяют клеточный состав раневого отделяемого (Камаев М.Ф., 1970), функциональную активность фагоцитов в ране (лизосомальную, фагоцитарную и НСТ-редуцирующую функции нейтрофилов и макрофагов) (Маянский А.Н., Виксман М.К., 1979; Эберт Л.Я. и соавт., 1983; Власов А.В., 1989; Park B.N. et al., 1968), темпы сокращения раневого дефекта (Песчанский B.C. и соавт., 1977; Шнейдер А.Б., 1983), уровень бактериальной обсемененности раны с подсчетом КОЕ в 1,0 мл раневого отделяемого. Состояние раны (наличие воспалительных явлений вокруг раны, характер отделяемого из раны, сроки начала гранулирования раны) отмечают ежедневно во время перевязок.
Пример 1. Больной Б., 42 года. Госпитализирован с диагнозом: карбункул подлопаточной области. Произведена операция - некрэктомия. У пациента взято 20,0 мл венозной крови, выделено 7,0 мл супернатанта активированных нейтрофилов по вышеописанному способу. В течение трех дней производились перевязки с 0,05% раствором хлоргексидина. Общая антибиотикотерапия с учетом антибиотикочувствительности выделенного возбудителя проводилась в течение 7 суток. На 3 сутки после оперативного вмешательства на фоне воспалительных явлений вокруг раны появились краевые некрозы. Размеры послеоперационной раны составляли: длина - 8,0 см; ширина - 8,0 см; глубина - 2,0 см. В результате бактериологического исследования раневого отделяемого выделен Staphylococcus aureus, 106 КОЕ/мл. В мазках из раневого отделяемого определено процентное содержание лейкоцитов: 74% составляли нейтрофилы, 16% - лимфоциты, 10% - макрофаги. При изучении функциональной активности нейтрофилов и макрофагов в ране у больного отмечалось угнетение функций макрофагов (лизосомальной и фагоцитарной). С четвертых суток после оперативного вмешательства осуществлялись ежедневные пятикратные перевязки с выделенным супернатантом в количестве 1,0 мл, разведенным в 3,0 мл физиологического раствора. Предварительно рана обрабатывалась раствором перекиси водорода с последующим орошением супернатантом нейтрофилов больного. Накладывалась асептическая повязка. Через 12 часов осуществлялись перевязки с ферментами, антисептиками. После местного применения супернатанта нейтрофилов воспалительные явления вокруг раны купировались; отека, инфильтрации в области раны нет, отделяемое из раны скудное, серозного характера. Рана выполнилась яркими грануляциями. Размеры раны: длина - 4,0 см; ширина - 3,0 см; глубина - 0,5 см. При бактериологическом исследовании отделяемого из раны выделен St. aureus, 103 КОЕ/мл. В мазках из раневого отделяемого 50% составляют нейтрофилы, 30% - макрофаги и фибробласты, 20% - лимфоциты. Функциональная активность макрофагов в ране значительно увеличилась. На рану наложены вторичные швы. В удовлетворительном состоянии больной выписан на амбулаторное лечение.
Пример 2. Больная В., 32 года. Поступила с диагнозом: постинъекционная флегмона левой ягодицы. Произведена операция -вскрытие флегмоны. Взята кровь из вены в количестве 20,0 мл для получения супернатанта активированных адгезией нейтрофилов. Выделено 5,0 мл супернатанта нейтрофилов. Больной была назначена общая антибиотикотерапия с учетом антибиотикочувствительности выделенного возбудителя в течение 7 суток. Местно проводились перевязки с 0,05% раствором хлоргексидина. Кожа вокруг раны гиперемирована, отмечается отек, инфильтрация тканей. Размеры послеоперационной раны следующие: длина - 6,0 см; ширина - 3,0 см; глубина - 4,5 см. При бактериологическом исследовании отделяемого из раны выделен St. aureus, 106 КОЕ/мл. В мазках из раневого отделяемого определено процентное содержание лейкоцитов: 76% - нейтрофилы, 15% - макрофаги, 9% - лимфоциты. При изучении функциональной активности нейтрофилов и макрофагов в ране у больной отмечалось угнетение фагоцитарной функции нейтрофилов и макрофагов. С третьих суток после операции осуществлялись ежедневные перевязки с выделенным аутологичным супернатантом нейтрофилов в количестве 0,5 мл, разведенным в 3,0 мл физиологического раствора. Через 12 часов проводились перевязки с 0,05% раствором хлоргексидина. После использования аутологичных супернатантов воспалительные явления вокруг раны купировались, рана выполнилась грануляционной тканью, отделяемое из раны серозное, скудное. Размеры раны: длина - 3,0 см; ширина - 1,5 см; глубина - 2,0 см. При бактериологическом исследовании отделяемого из раны - роста микроорганизмов нет. Клеточный состав раневого отделяемого следующий: 46% составляют нейтрофилы, 35% - макрофаги и фибробласты, 19% - лимфоциты. Сниженная на ранних стадиях течения раневого процесса фагоцитарная активность нейтрофилов и макрофагов увеличилась более чем в 2 раза, а также возросли показатели спонтанного НСТ - теста макрофагов. Больная выписана в удовлетворительном состоянии на амбулаторное лечение.
Предложенный способ локальной иммунокоррекции был использован при лечении 15 пациентов с гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей (карбункулы, абсцессы, флегмоны). После местного применения аутологичных супернатантов нейтрофилов у больных достоверно по сравнению с контрольной группой и с исходными данными увеличивалась сниженная на ранних стадиях течения раневого процесса функциональная активность нейтрофилов и макрофагов в ране (лизосомальная, фагоцитарная), появлялась тенденция к росту кислородзависимого киллинга. Достоверно изменялся клеточный состав раневого отделяемого: более интенсивно по сравнению с контрольной группой уменьшалось процентное содержание нейтрофилов и возрастало количество макрофагов и фибробластов в ране, что свидетельствовало о более быстром наступлении регенеративного этапа заживления раны. Это сопровождалось более интенсивной динамикой исчезновения локального воспаления, ранним образованием грануляционной ткани по сравнению с контрольной группой. Так, у всех больных после использования аутологичных супернатантов нейтрофилов объективно выявлено отсутствие гиперемии, отека вокруг раны. В среднем, на пятые сутки после оперативного вмешательства отмечено появление ярких грануляций, тогда как в контрольной группе грануляции появлялись, в среднем, на седьмые сутки после операции. Анализ величины относительного заживления ран показал, что у больных при использовании аутологичных секреторных продуктов нейтрофилов динамика заживления ран была более интенсивной по сравнению с контролем (величина относительного заживления ран у таких больных более чем в 1,5 раза превышала аналогичные показатели у больных в контрольной группе). Кроме того, результаты бактериологического исследования отделяемого из раны выявили, что у больных после местного применения аутологичных супернатантов нейтрофилов содержание микроорганизмов в ране в 20 раз было меньше, чем у больных в контрольной группе в одни и те же сроки наблюдения. Осложнений после использования аутосупернатантов нейтрофилов не наблюдалось. Все больные были выписаны в удовлетворительном состоянии на амбулаторное лечение, в среднем, на 3 - 5 дней раньше, чем пациенты контрольной группы.
Контрольную группу составили 15 больных, которые получали лечение по общепринятой схеме. В качестве плацебо использовали физиологический раствор в аналогичной дозе и кратности применения. Диагноз, возраст, пол больных были идентичны в обеих группах. В контрольной группе у пациентов дольше сохранялись отек, гиперемия, средний срок появления грануляций составлял 7 суток после оперативного вмешательства. Функциональная активность нейтрофилов и макрофагов в ране по некоторым показателям на ранних стадиях течения раневого процесса была сниженной (лизосомальная активность макрофагов, фагоцитарная функция нейтрофилов и макрофагов). При повторном исследовании значения функций нейтрофилов и макрофагов сохранялись на исходном уровне, а по некоторым показателям (лизосомальная, НСТ-редуцирующая активность нейтрофилов и макрофагов) достоверно снижались. Клеточный состав раневого отделяемого характеризовался менее интенсивным ростом процентного содержания макрофагов и фибробластов на фоне более высокого количества нейтрофилов. Больные из этой группы дольше находились на стационарном лечении.
Достоинством предложенного способа локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции с помощью аутологичных секреторных продуктов нейтрофилов является:
- повышает эффективность проводимой терапии;
способ прост и доступен, не требует использования дорогостоящих препаратов;
- возможность получения секреторных продуктов нейтрофилов в достаточно чистом виде;
- возможность получения иммуностимулирующих факторов нейтрофилов, обладающих равнонаправленным спектром действия;
- применение аутологичного супернатанта нейтрофилов исключает возможность заражения больного вирусами гепатита, ВИЧ и т.п.;
- бесклеточный супернатант активированных нейтрофилов больного позволяет избежать развития аллергических и цитотоксических реакций, наблюдаемых при применении чужеродных лейкоцитов, поскольку используемый бесклеточный супернатант состоит из продуктов, секретируемых нейтрофилами самого больного и полностью идентичен организму.
По данным патентного поиска предлагаемый способ локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции обладает новизной и соответствует критерию "новизна", а по совокупности отличительных действий (дополнительное применение аутологичных супернатантов нейтрофилов в лечении в определенной дозе и по разработанной схеме) обладает критерием "существенные отличия".
Claims (1)
- Способ интенсификации заживления ран при раневой хирургической инфекции, включающий местное применение супернатанта, отличающийся тем, что используют супернатанты активированных адгезией нейтрофилов, которые наносят на рану с 3-4 суток после оперативного вмешательства, пятикратно, с интервалом 24 ч в дозе 0,5-1,0 мл супернатанта, разведенного в 3,0 мл физиологического раствора, а через 12 ч проводят перевязки с антисептиками, причем супернатанты получают путем культивирования лейкоцитарной смеси в течение 1 ч при температуре 37°С, а неадгезированные клетки удаляют из супернатантов центрифугированием при 3000 об/мин, в течение 10 мин.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002117632/14A RU2234326C2 (ru) | 2002-07-01 | 2002-07-01 | Способ локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2002117632/14A RU2234326C2 (ru) | 2002-07-01 | 2002-07-01 | Способ локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2002117632A RU2002117632A (ru) | 2004-02-10 |
RU2234326C2 true RU2234326C2 (ru) | 2004-08-20 |
Family
ID=33412602
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2002117632/14A RU2234326C2 (ru) | 2002-07-01 | 2002-07-01 | Способ локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2234326C2 (ru) |
-
2002
- 2002-07-01 RU RU2002117632/14A patent/RU2234326C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
БУЛЫНИН В.И. с соавт. Лечение ран. Воронеж, 1998, с. 123-149. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2002117632A (ru) | 2004-02-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Molan | Re-introducing honey in the management of wounds and ulcers-theory and practice | |
Zbuchea | Up-to-date use of honey for burns treatment | |
Nigam et al. | 10. Maggot-assisted Wound Healing | |
Bandyk et al. | Treatment of bacteria-biofilm graft infection by in situ replacement in normal and immune-deficient states | |
RU2512681C2 (ru) | Способ лечения длительно незаживающей раны и/или раневой полости | |
CN109550076B (zh) | 医用聚硅酮臭氧油凡士林敷料及基于该敷料的创面护理贴 | |
RU2234326C2 (ru) | Способ локальной иммунокоррекции при раневой хирургической инфекции | |
RU2309744C1 (ru) | Способ лечения послеродового эндометрита | |
RU2522214C1 (ru) | Способ стимуляции заживления ран различного генеза природным антиоксидантом дигидрокверцетином | |
Eldad, A., Stark, M., Anais, D., Golan, J. & Ben-Hur | Amniotic membranes as a biological dressing | |
RU2460553C1 (ru) | Способ лечения инфицированных ран в эксперименте | |
RU2209074C2 (ru) | Состав для лечения ожогов | |
RU2286800C1 (ru) | Антибактериальный наполнитель для женской гигиенической прокладки или тампона, способ его получения и использования | |
RU2192266C2 (ru) | Способ подготовки дефекта кожного покрова к аутодермопластике | |
RU2414228C1 (ru) | Способ персонифицированной иммунотерапии | |
Корпусенко et al. | Clinical and immunological aspects of the treatment of chronic wounds using VAC-therapy | |
Marinova | THE EFFECT OF TOPICAL APPLICATION WITH OZOILE® AS A NOVEL METHOD IN THE COMPLEX TREATMENT OF SOFT TISSUE INFECTIONS AND CHRONIC WOUNDS. | |
Norman | The use of povidone-iodine in superficial partial-thickness burns | |
Bashir et al. | Comparison of normal saline and honey dressing in wound preparation for skin grafting | |
Foutsizoglou | A practical guide to the most commonly used dressings in wound care | |
CN114983991B (zh) | 一种兼具抗炎及抗氧化作用的药物 | |
Rusdy et al. | The effectivity of ozone water application on tampon in post posterior tooth extraction in Department of Oral Surgery and Maxillofacial Faculty of Dentistry, University of North Sumatera (USU) | |
RU2455997C2 (ru) | Способ лечения инфицированных ожоговых ран iiia степени | |
RU2805189C1 (ru) | Способ аутодермопластики | |
RU2421160C1 (ru) | Способ лечения гнойных ран мягких тканей |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20040702 |