RU2216022C2

RU2216022C2 - Method for noninvasive diagnostics of active gastritis

Info

Publication number: RU2216022C2
Application number: RU2001132508/14A
Authority: RU
Inventors: Е.С. Дублина; Ю.А. Боженов
Original assignee: Дальневосточный государственный медицинский университет
Priority date: 2001-11-29
Filing date: 2001-11-29
Publication date: 2003-11-10

Abstract

FIELD: medicine, gastroenterology. SUBSTANCE: one should carry out immunological blood testing in patients due to quantitative evaluation of lymphocytic sensitization to tissue gastric antigen in reaction of leukocytic migration inhibition. At migration percentage to be above 80% one should diagnose inactive gastritis, within 70-80% - gastritis of minimal activity, and below 70% - gastritis of moderate and pronounced activities. EFFECT: higher efficiency of noninvasive diagnostics. 3 ex, 1 tbl

Description

Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для неинвазивной диагностики активного гастрита. The invention relates to clinical immunology and can be used for non-invasive diagnosis of active gastritis.

В условиях современной медицины все большее значение приобретает морфологическая верификация заболеваний. Это в полной мере относится к гастроэнтерологическим заболеваниям и, в частности, к хроническому гастриту. Необходимость морфологической диагностики диктуется наличием дифференцированного патогенетического подхода к терапии данной патологии. In modern medicine, morphological verification of diseases is becoming increasingly important. This fully applies to gastroenterological diseases and, in particular, to chronic gastritis. The need for morphological diagnosis is dictated by the presence of a differentiated pathogenetic approach to the treatment of this pathology.

Морфологический метод широко используют в целях диагностики активности гастрита. Этот метод наиболее точен, но обладает рядом отрицательных свойств, к которым относятся инвазивность, достаточно высокая стоимость, трудоемкость и длительность исследования. Инвазивность метода определяется необходимостью проведения эндоскопического исследования с взятием биоптата слизистой оболочки желудка, что особенно затруднительно, например, в педиатрической практике в связи с малыми размерами желудка, тонкостью и обильным кровоснабжением его слизистой оболочки, нередко беспокойным поведением детей во время манипуляции. Высокая стоимость и трудоемкость морфологического метода обусловлены необходимостью обработки биоптатов (заливка, нарезка, фиксация, окраска) с привлечением лаборантов, использованием сложного оборудования, дорогостоящих реактивов. Естественно, что столь сложная технология подготовки препаратов с последующей консультацией врача-патологоанатома занимает определенное количество времени, обычно в пределах нескольких суток, что отсрочивает начало патогенетической терапии больных хроническим гастритом. The morphological method is widely used to diagnose the activity of gastritis. This method is most accurate, but has a number of negative properties, which include invasiveness, a fairly high cost, the complexity and duration of the study. The invasiveness of the method is determined by the need for an endoscopic examination with a biopsy of the gastric mucosa, which is especially difficult, for example, in pediatric practice due to the small size of the stomach, thinness and abundant blood supply to its mucous membrane, and often disturbing behavior of children during the manipulation. The high cost and laboriousness of the morphological method is due to the need for processing biopsy samples (filling, cutting, fixing, painting) with the use of laboratory assistants, the use of sophisticated equipment, and expensive reagents. Naturally, such a complex technology of preparation of drugs with the subsequent consultation of a pathologist takes a certain amount of time, usually within a few days, which delays the onset of pathogenetic therapy for patients with chronic gastritis.

Задача изобретения - упрощение диагностики активного гастрита, сокращение сроков исследования, снижение его стоимости путем изучения сенсибилизации лимфоцитов. Заявляемое изобретение направлено на решение задач, заключающихся в обеспечении диагностики и патогенетической терапии хронического гастрита в наиболее ранние сроки. The objective of the invention is to simplify the diagnosis of active gastritis, reducing the duration of the study, reducing its cost by studying the sensitization of lymphocytes. The claimed invention is aimed at solving the problems of providing diagnosis and pathogenetic therapy of chronic gastritis in the earliest possible time.

Поставленная задача достигается тем, что при исследовании сенсибилизации лимфоцитов в реакции торможения миграции лейкоцитов крови с тканевым антигеном желудка у больных хроническим гастритом индекс торможения миграции прямо пропорционален выраженности гистологических критериев активности гастрита. The task is achieved by the fact that when studying the sensitization of lymphocytes in the inhibition of migration of blood leukocytes with tissue antigen of the stomach in patients with chronic gastritis, the inhibition index of migration is directly proportional to the severity of histological criteria for the activity of gastritis.

Способ выполняется следующим образом. The method is as follows.

Берут 3 образца по 0,2 мл венозной гепаринизированной крови, смешивают: 1-й образец - с 0,05 мл физиологического раствора (контрольный), 2-й - с 0,05 мл ФГА (фитогемагглютинина), 3-й - с 0,05 мл желудочного антигена. Тканевый антиген готовят предварительно по общепринятой методике ("Иммунологические методы" под ред. Г. Фримеля, М., 1987). 3 капилляра для РТМЛ с одинаковыми диаметрами заполняют соответствующими образцами на 2/3 длины. Нижние концы капилляров запаивают, фиксируют в вертикальном положении в пластилин, центрифугируют при 1500 об./мин в течение 5 мин, помещают в инкубатор. После инкубации при 37^oС в течение 18-24 ч при помощи окуляра-микрометра измеряют зону миграции лейкоцитов, вычисляют индекс миграции в капиллярах с ФГА и желудочным антигеном (зона миграции (опыт)/ зона миграции (контроль)), процент миграции (индекс миграции* 100%). При проценте миграции менее 80% делают вывод о наличии фактора ингибиции лимфоцитов, т.е. о специфичности антигена в данной ситуации.Take 3 samples of 0.2 ml of venous heparinized blood, mix: the 1st sample with 0.05 ml of physiological saline (control), the second with 0.05 ml of PHA (phytohemagglutinin), the third with 0 , 05 ml of gastric antigen. Tissue antigen is preliminarily prepared according to the generally accepted technique ("Immunological methods" under the editorship of G. Frimel, M., 1987). 3 capillaries for RTML with the same diameters are filled with the corresponding samples for 2/3 of the length. The lower ends of the capillaries are sealed, fixed upright in plasticine, centrifuged at 1500 rpm for 5 minutes, placed in an incubator. After incubation at 37 ^° C for 18-24 hours, the leukocyte migration zone is measured using an eyepiece micrometer, the migration index in capillaries with PHA and gastric antigen is calculated (migration zone (experiment) / migration zone (control)), percentage of migration (index migration * 100%). With a migration percentage of less than 80%, a conclusion is made about the presence of a factor of inhibition of lymphocytes, i.e. about the specificity of the antigen in this situation.

Вышеизложенный способ апробирован у 40 детей, больных хроническим гастритом. Всем этим детям также было выполнено эндоскопическое исследование с взятием биоптата слизистой оболочки антрального отдела желудка (этот отдел наиболее часто поражается при хроническом гастрите у детей) и последующим морфологическим исследованием. Выявлено, что величина торможения миграции лейкоцитов с тканевым антигеном желудка пропорциональна гистологическим критериям активности гастрита. Неактивный гастрит сопровождается отсутствием торможения миграции или минимальными ее величинами (процент миграции >80%). При поверхностном гастрите с минимальной активностью процент миграции колеблется в пределах 80-71%, при гастрите с поражением желез без атрофии с умеренной и выраженной активностью процент миграции лейкоцитов, как правило, 70% и менее. В контрольной группе (6 детей без клинико-инструментальных признаков поражения желудочно-кишечного тракта) торможения реакции миграции лимфоцитов с тканевыми антигенами желудка и двенадцатиперстной кишки не наблюдалось (таблица). The above method has been tested in 40 children with chronic gastritis. All these children also underwent an endoscopic examination with a biopsy of the mucous membrane of the antrum (this section is most often affected in chronic gastritis in children) and a subsequent morphological examination. It was revealed that the magnitude of the inhibition of leukocyte migration with tissue antigen of the stomach is proportional to the histological criteria for the activity of gastritis. Inactive gastritis is accompanied by a lack of inhibition of migration or its minimum values (percentage of migration> 80%). With superficial gastritis with minimal activity, the percentage of migration ranges from 80-71%, with gastritis with gland damage without atrophy with moderate and pronounced activity, the percentage of leukocyte migration is usually 70% or less. In the control group (6 children without clinical and instrumental signs of damage to the gastrointestinal tract), inhibition of the reaction of migration of lymphocytes with tissue antigens of the stomach and duodenum was not observed (table).

Пример 1. Девочка К., 9 лет. Длительность заболевания - полгода. С помощью клинико-инструментальных методов установлен диагноз: Гастрит хронический поверхностный, период обострения. Морфологический диагноз: Гастрит поверхностный, 0 степени активности. РТМЛ: процент миграции с ФГА - 92%, с антигеном желудка - 83,3%. Example 1. Girl K., 9 years old. The duration of the disease is six months. Using clinical and instrumental methods, the diagnosis was established: Gastritis is chronic superficial, period of exacerbation. Morphological diagnosis: Superficial gastritis, 0 degree of activity. RTML: the percentage of migration with PHA is 92%, with stomach antigen is 83.3%.

Пример 2. Мальчик Д., 10 лет. Длительность заболевания - 3 года. Клинико-инструментальный диагноз: Гастрит хронический поверхностный, период обострения. Морфологический диагноз: Гастрит поверхностный, 1 степени активности. РТМЛ: процент миграции с ФГА -105,3%, с антигеном желудка - 75%. Example 2. Boy D., 10 years old. The duration of the disease is 3 years. Clinical and instrumental diagnosis: Gastritis, chronic superficial, period of exacerbation. Morphological diagnosis: Superficial gastritis, 1 degree of activity. RTML: the percentage of migration with PHA is -105.3%, with stomach antigen - 75%.

Пример 3. Девочка Н., 14 лет. Длительность заболевания - 7 лет. На основании клиники заболевания и эндоскопического исследования установлен диагноз: Гастродуоденит хронический: антральный поверхностный гастрит, поверхностный бульбит, период обострения. Морфологический диагноз: Гастрит с поражением желез без атрофии, 2 степени активности. РТМЛ: процент миграции с ФГА - 90%, с антигеном желудка - 60%. Example 3. Girl N., 14 years old. The duration of the disease is 7 years. Based on the clinic of the disease and endoscopic examination, the diagnosis was established: chronic gastroduodenitis: antral superficial gastritis, superficial bulbitis, exacerbation period. Morphological diagnosis: Gastritis with lesions of the glands without atrophy, 2 degrees of activity. RTML: the percentage of migration with PHA is 90%, with gastric antigen - 60%.

Таким образом, определение выраженности торможения миграции лейкоцитов крови с тканевыми антигеном желудка дает возможность судить об активности хронического гастрита у детей. Разработанный способ не имеет аналогов, неинвазивен, прост и быстр в исполнении, позволяет в ряде случаев обойтись без морфологического исследования. Thus, the determination of the severity of inhibition of migration of blood leukocytes with tissue antigen of the stomach makes it possible to judge the activity of chronic gastritis in children. The developed method has no analogues, non-invasive, simple and quick to perform, in some cases it can do without a morphological study.

Claims

A method for the non-invasive diagnosis of active gastritis, including an immunological study of the blood of patients, characterized in that the immunological study is carried out by quantifying the sensitization of lymphocytes to the tissue antigen of the stomach in the inhibition of leukocyte migration and diagnosing inactive gastritis with a migration percentage of more than 80%, in the range of 70-80 % - gastritis with minimal activity, less than 70% - gastritis with moderate and pronounced activity.