RU2167424C1

RU2167424C1 - Method for diagnosing chronic liver diseases

Info

Publication number: RU2167424C1
Application number: RU2000118934/14A
Authority: RU
Inventors: В.К. Макаров
Original assignee: Тверская государственная медицинская академия; Макаров Виктор Константинович
Priority date: 2000-07-17
Filing date: 2000-07-17
Publication date: 2001-05-20

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves determining relative lysophosphatidyl choline, sphingomyelin and phosphatidyl choline fractions concentration in phospholipid blood spectrum and calculating coefficient value from a formula PhCh/SM x LPhCh, where LPhCh is the relative lysophosphatidyl choline concentration, SM is the relative sphingomyelin concentration, PhCh is the relative phosphatidyl choline concentration. The coefficient value being equal to 20-35, chronic virus hepatitis including HB_s carriers is to be diagnosed. The value being equal to 36-45, alcohol-induced chronic virus hepatitis is to be diagnosed. The value being equal to 50-95, hepatic cirrhosis is to be diagnosed. EFFECT: enhanced accuracy of diagnosis method.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, гепатологии. The invention relates to medicine, namely to infectious diseases, hepatology.

Наиболее близким по технической сущности к заявленному способу является способ диагностики хронических заболеваний печени, заключающийся в определении концентрации фосфолипидов в мембранах эритроцитов в расчете на гемоглобин, и при значениях 2,38-3,75 ммоль диагностируют хронический персистирующий гепатит, 1,59-1,97 ммоль - хронический активный гепатит, 0,45-1,47 ммоль - цирроз печени (Авторское свидетельство N 1142105, МПК A 61 B 10/00, 1985 (прототип)). The closest in technical essence to the claimed method is a method for the diagnosis of chronic liver diseases, which consists in determining the concentration of phospholipids in the membranes of red blood cells based on hemoglobin, and with values of 2.38-3.75 mmol chronic persistent hepatitis is diagnosed, 1.59-1, 97 mmol - chronic active hepatitis, 0.45-1.47 mmol - cirrhosis (Copyright certificate N 1142105, IPC A 61 B 10/00, 1985 (prototype)).

Недостатком известного способа является то, что определяется концентрация только общих фосфолипидов, а не фракций. Этот метод (будь то определение общих фосфолипидов в крови или форменных элементах ее) улавливает только грубые изменения, так как представляет собой сумму фракций фосфолипидного спектра. Относительное содержание фракций внутри фосфолипидного спектра у разных категорий больных и в разный период болезни может сильно отличаться и имеет важное значение для оценки степени изменения биохимических процессов (Никитин Ю.П., Курилович С.А., Давидик Г.С. Печень и липидный обмен. - Новосибирск. - 1985; Phillips G. В. // J. Clin. Invest. - 1960. - Vol. 39. - P. 1639-1650), а значит, и для диагностики. Кроме того, определение фосфолипидов в эритроцитах, которые не относятся к иммунокомпетентным клеткам крови, малоинформативно, так как у больных хроническими гепатитами развивается инфильтрация печени иммунокомпетентными клетками (Кошиль О.И. Руководство по инфекционным болезням. - С.-Петербург. - 1996, - с. 268), а циррозы печени вообще являются аутоиммунными заболеваниями (Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты в клинической практике. - С.-Петербург. - 1996. - 306 c.). The disadvantage of this method is that it determines the concentration of only the total phospholipids, and not fractions. This method (whether it is the determination of total phospholipids in the blood or its formed elements) captures only gross changes, since it is the sum of fractions of the phospholipid spectrum. The relative content of fractions within the phospholipid spectrum in different categories of patients and at different periods of the disease can be very different and is important for assessing the degree of change in biochemical processes (Nikitin Yu.P., Kurilovich S.A., Davidik G.S. Liver and lipid metabolism . - Novosibirsk. - 1985; Phillips G. B. // J. Clin. Invest. - 1960. - Vol. 39. - P. 1639-1650), and therefore, for diagnosis. In addition, the determination of phospholipids in erythrocytes that are not related to immunocompetent blood cells is uninformative, since patients with chronic hepatitis develop liver infiltration by immunocompetent cells (O. Koshil, Guide to Infectious Diseases. - St. Petersburg. - 1996, - p. 268), and cirrhosis of the liver in general are autoimmune diseases (Sorinson S. N. Viral hepatitis in clinical practice. - St. Petersburg. - 1996. - 306 c.).

Другим недостатком данного способа является то, что проводилась диагностика хронических заболеваний печени, название которых строилось по морфологическому принципу (хронического персистирующего, хронического активного гепатитов, цирроза печени) без учета вирусной этиологии заболеваний, что не соответствует современной классификации МКБ - 10 (Международная статистическая классификация болезней и проблем, связанных со здоровьем. Десятый пересмотр. - T. 1, часть 1. - ВОЗ, Женева. - 1995. - с. 147-149, с. 600). С учетом вирусной этиологии заболеваний диагнозы звучат, например, так: хронический вирусный гепатит B, C, B+C. Another disadvantage of this method is that the diagnosis of chronic liver diseases was carried out, the name of which was built according to the morphological principle (chronic persistent, chronic active hepatitis, cirrhosis) without taking into account the viral etiology of diseases, which does not correspond to the modern classification of ICD - 10 (International Statistical Classification of Diseases and health problems. Tenth revision. - T. 1, part 1. - WHO, Geneva. - 1995. - p. 147-149, p. 600). Given the viral etiology of diseases, the diagnoses are, for example, as follows: chronic viral hepatitis B, C, B + C.

При создании изобретения решалась задача разработки способа, который позволил бы врачу диагностировать хронические заболевания печени с более высокой точностью независимо от уровня общих фосфолипидов в соответствии с положениями современной Международной классификации болезней. When creating the invention, the problem was solved of developing a method that would allow a doctor to diagnose chronic liver diseases with higher accuracy regardless of the level of total phospholipids in accordance with the provisions of the modern International classification of diseases.

Технический результат - упрощение разграничения при диагностике нозологических форм при диагностике хронических заболеваний печени. The technical result is to simplify the distinction in the diagnosis of nosological forms in the diagnosis of chronic liver diseases.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе диагностики хронических заболеваний печени согласно изобретению диагностику хронических заболеваний печени проводят путем определения относительного содержания фракций лизофосфатидилхолина, сфингомиелина и фосфатидилхолина фосфолипидного спектра крови и расчета коэффициента, определяемого по формуле ФХ²/СМ • ЛФХ, где ФХ - относительное содержание фосфатидилхолина, СМ - относительное содержание сфингомиелина, ЛФХ - относительное содержание лизофосфатидилхолина, и при его значениях 20-35 диагностируют хронический вирусный гепатит, в том числе у носителей HB_sAg, 36-45 - хронический вирусный гепатит у лиц, злоупотреблявших алкоголем, и 50-96 - цирроз печени.The specified technical result is achieved by the fact that in the method of diagnosing chronic liver diseases according to the invention, the diagnosis of chronic liver diseases is carried out by determining the relative content of fractions of lysophosphatidylcholine, sphingomyelin and phosphatidylcholine of the phospholipid spectrum of the blood and calculating the coefficient determined by the formula ФХ ² / СМ • ЛФХ, where ФХ - the relative content of phosphatidylcholine, CM - the relative content of sphingomyelin, LFH - the relative content of lysophosphatidylcholine, and when its values of 20-35 are diagnosed with chronic viral hepatitis, including in carriers of HB _s Ag, 36-45 - chronic viral hepatitis in people who abuse alcohol, and 50-96 - cirrhosis of the liver.

Новыми, ранее неизвестными признаками заявленного способа диагностики хронических заболеваний печени являются:
1. отработка диагностики хронических заболеваний печени в соответствии с современной классификацией МКБ - 10;
2. определение фракций фосфолипидного спектра крови и расчет коэффициента ФХ²/СМ • ЛФХ;
3. определение пределов значений коэффициента ФХ²/СМ • ЛФХ для разных категорий больных хроническими заболеваниями печени.New, previously unknown signs of the claimed method for the diagnosis of chronic liver diseases are:
1. development of the diagnosis of chronic liver diseases in accordance with the modern classification of ICD - 10;
2. determination of fractions of the phospholipid spectrum of the blood and the calculation of the coefficient PF ² / CM • LFH;
3. determination of the limits of the values of the coefficient PF ² / CM • LFH for different categories of patients with chronic liver diseases.

Способ разработан на основе анализа фосфолипидного спектра крови 30 больных хроническим вирусным гепатитом, 30 больных хроническим вирусным гепатитом, злоупотреблявших алкоголем, 20 больных циррозом печени и 30 носителей HB_sAg, расчета коэффициента ФХ²/СМ • ЛФХ. Данный коэффициент является результатом произведения, то есть интегрального объединения, двух показателей: 1. СМ/ФХ - показывает уменьшение липидной "жидкостности" мембран, то есть увеличение ее проницаемости (Гурин В.И., 1986, с. 32), и 2. ФХ/ЛФХ - показывает снижение активности эндогенных фосфолипаз, нарушение процессов реацилирования, накопления лизофосфатидилхолина (ЛФХ) на мембранах и их деструкции (Кучаренко Н.Е., Васильев А.Н. Липиды. - 1985, с. 163), то есть объединяет 2 направления биохимических процессов, направленных на разрушение печеночных клеток.The method was developed based on the analysis of the phospholipid blood spectrum of 30 patients with chronic viral hepatitis, 30 patients with chronic viral hepatitis, alcohol abuse, 20 patients with cirrhosis of the liver and 30 carriers of HB _s Ag, calculation of the coefficient PF ² / CM • LFH. This coefficient is the result of a product, that is, an integrated combination of two indicators: 1. SM / PF - shows a decrease in the lipid "liquidity" of the membranes, that is, an increase in its permeability (Gurin V.I., 1986, p. 32), and 2. PF / LFH - shows a decrease in the activity of endogenous phospholipases, disruption of reacylation processes, accumulation of lysophosphatidylcholine (LPC) on the membranes and their destruction (Kucharenko N.E., Vasiliev A.N. Lipids. - 1985, p. 163), that is, combines 2 directions of biochemical processes aimed at the destruction of hepatic cells etc.

Выбор показателей фосфолипидных фракций крови был продиктован тем, что фосфолипиды входят в состав мембран клеток печени и соответственно всякое изменение содержания их на мембране приводит к изменению содержания их в крови. Изменение их на уровне мембран происходит максимально рано по всей печени, как органу, что и позволяет упростить разграничение хронических заболеваний печени как нозологических форм друг от друга, так как они требуют различных подходов к лечению. The choice of indicators of phospholipid blood fractions was dictated by the fact that phospholipids are part of the membranes of liver cells and, accordingly, any change in their content on the membrane leads to a change in their content in the blood. Their change at the membrane level occurs as early as possible throughout the liver, as an organ, which allows us to simplify the distinction between chronic liver diseases as nosological forms from each other, since they require different approaches to treatment.

Фосфолипидный спектр имеет в своем составе лизофосфатидилхолин (ЛФХ), лизофосфатидилэтаноламин (ЛФЭА), сфингомиелин (СМ), фосфатидилхолин (ФХ), фосфатидилэтаноламин (ФЭА). The phospholipid spectrum includes lysophosphatidylcholine (LPC), lysophosphatidylethanolamine (LFEA), sphingomyelin (SM), phosphatidylcholine (PX), phosphatidylethanolamine (PEA).

Предлагаемый способ диагностики хронических заболеваний печени осуществляют в следующей последовательности. The proposed method for the diagnosis of chronic liver diseases is carried out in the following sequence.

Кровь для исследования берут утром натощак из вены в количестве 5 мл, центрифугируют, отбирают 0,8 мл сыворотки и экстрагируют липиды добавлением смеси хлороформ-метанола (1:2), фильтруют, выпаривают и разгоняют в камерах в парах смеси гептан-эфир-этилацетат (12:3:1) на специальных пластинках с силикагелем и затем денситометрируют. Получают относительное содержание фракций фосфолипидов в сыворотке крови, рассчитывают коэффициент ФХ²/СМ • ЛФХ и при его значениях 20-35 диагностируют хронический вирусный гепатит, в том числе у носителей HB_sAg, 36-45 - хронический вирусный гепатит у лиц, злоупотреблявших алкоголем, 50-96 - цирроз печени.Blood samples were taken in the morning on an empty stomach in the amount of 5 ml in the morning, centrifuged, 0.8 ml of serum was taken and lipids were extracted by adding a mixture of chloroform-methanol (1: 2), filtered, evaporated and dispersed in chambers in heptane-ether-ethyl acetate pairs (12: 3: 1) on special silica gel plates and then densitometric. The relative content of serum phospholipids fractions is obtained, the PF ² / CM • LF coefficient is calculated, and at its values of 20-35, chronic viral hepatitis is diagnosed, including HB _s Ag carriers, 36-45 chronic viral hepatitis in alcohol abusers , 50-96 - cirrhosis of the liver.

Пример 1. Больной Новиков Л.Н., 47 лет, история болезни N 101, носитель HB_sAg. По результатам исследования фосфолипидного спектра коэффициент ФХ²/СМ • ЛФХ - 29,4. Цифровое значение коэффициента ФХ²/СМ • ЛФХ находится в интервале от 20 до 28, что позволяет диагностировать хронический гепатит.Example 1. Patient Novikov LN, 47 years old, medical history N 101, carrier HB _s Ag. According to the results of the study of the phospholipid spectrum, the coefficient PF ² / SM • LFH - 29.4. The digital value of the coefficient PF ² / SM • LFH is in the range from 20 to 28, which allows the diagnosis of chronic hepatitis.

Пример 2. Больной Садовский С.В., 20 лет, история болезни N 1072, проходил обследование по подозрению на острый вирусный гепатит. По результатам исследования фосфолипидного спектра коэффициент ФХ²/СМ • ЛФХ - 32,4. Цифровое значение коэффициента ФХ²/СМ • ЛФХ находится в интервале от 22 до 36, что позволяет диагностировать хронический гепатит.Example 2. Patient Sadovsky SV, 20 years old, medical history N 1072, was examined on suspicion of acute viral hepatitis. According to the results of the study of the phospholipid spectrum, the coefficient PF ² / CM • LFH - 32.4. The digital value of the coefficient PF ² / CM • LFH is in the range from 22 to 36, which allows the diagnosis of chronic hepatitis.

Пример 3. Больной Иванов Н.К, 55 лет, история болезни N 7672, поступил в клинику инфекционных болезней с диагнозом острый алкогольный гепатит. По результатам исследования фосфолипидного спектра коэффициент ФХ²/СМ • ЛФХ - 39,1. Цифровое значение коэффициента ФХ²/СМ • ЛФХ находится в интервале от 36 до 45, что позволяет диагностировать хронический вирусный гепатит у лиц, злоупотреблявших алкоголем.Example 3. Patient Ivanov N.K., 55 years old, medical history N 7672, was admitted to the clinic of infectious diseases with a diagnosis of acute alcoholic hepatitis. According to the results of the study of the phospholipid spectrum, the coefficient PF ² / CM • LFH - 39.1. The digital value of the coefficient PF ² / CM • LFH is in the range from 36 to 45, which makes it possible to diagnose chronic viral hepatitis in people who abuse alcohol.

Пример 4. Больной Золан К.А., 57 лет, история болезни N 1810, поступил в клинику инфекционных болезней с диагнозом обострение хронического гепатита. По результатам исследования фосфолипидного спектра коэффициент ФХ²/СМ • ЛФХ - 73,5. Цифровое значение коэффициента ФХ²/СМ • ЛФХ находится в интервале от 50 до 96, что позволяет диагностировать цирроз печени.Example 4. Patient Zolan K.A., 57 years old, medical history N 1810, was admitted to the clinic of infectious diseases with a diagnosis of exacerbation of chronic hepatitis. According to the results of the study of the phospholipid spectrum, the coefficient PF ² / CM • LFH - 73.5. The digital value of the coefficient PF ² / CM • LFH is in the range from 50 to 96, which allows the diagnosis of cirrhosis.

Возможность упрощения разграничения нозологических форм хронических заболеваний печени приводит к повышению качества диагностики, позволяет врачу своевременно и в соответствии с учетом вирусной этиологии заболевания определить диету, назначить лечение, добиться стабилизации процесса и продлить жизнь больного. Выявление хронического вирусного гепатита у "здоровых" носителей HB_sAg при отсутствии у них изменений обычных "рутинных" биохимических тестов позволяет врачу своевременно принять меры по недопущению развития манифестной формы заболевания, сохранению трудоспособности, обычного ритма жизни, предотвратить прогрессирование заболевания в конечную стадию вирусного поражения печени - цирроз. Приведенные примеры показывают, что ни в одном из случаев диагноз при поступлении в клинику не соответствовал истинному.The possibility of simplifying the differentiation of nosological forms of chronic liver diseases leads to an improvement in the quality of diagnosis, allows the doctor to determine the diet in a timely manner and in accordance with the viral etiology of the disease, prescribe treatment, achieve stabilization of the process and extend the patient's life. Detection of chronic viral hepatitis in “healthy” HB _s Ag carriers in the absence of changes in their usual “routine” biochemical tests allows the doctor to take timely measures to prevent the development of the manifest form of the disease, maintain working capacity, normal rhythm of life, and prevent the disease from progressing to the final stage of viral damage liver - cirrhosis. The given examples show that in none of the cases the diagnosis upon admission to the clinic did not correspond to the true one.

Claims

A method for the diagnosis of chronic liver diseases by determining phospholipids, characterized in that the diagnosis of chronic liver diseases is carried out by determining the relative content of fractions of lysophosphatidylcholine, sphingomyelin and phosphatidylcholine of the phospholipid spectrum of the blood and calculating the coefficient determined by the formula FH ² / CM X LF, where LF is the relative content lysophosphatidylcholine, SM - the relative content of sphingomyelin, FC - the relative content of phosphatidylcholine and with its values of 20 - 35 diagn styryl chronic viral hepatitis including carriers of HB _s Ag, 36 - 45 - chronic viral hepatitis in individuals who abuse alcohol, 50 - 95 - cirrhosis.