RU2132175C1

RU2132175C1 - Eye tissue storage medium

Info

Publication number: RU2132175C1
Application number: RU97110439A
Authority: RU
Inventors: И.С. Максимова; В.Ю. Максимов; Т.Н. Семенова
Original assignee: Максимова Ирина Сергеевна; Максимов Владимир Юрьевич
Priority date: 1997-06-18
Filing date: 1997-06-18
Publication date: 1999-06-27

Abstract

FIELD: medicine, in particular, ophthalmology. SUBSTANCE: medium includes physiological solution containing 0.9-% solution of NaCl. In addition, it includes 1-% solution of calcium, magnesium and potassium chlorides, 0.001 M phosphate poising solution, 1-% solution of glucose, and 5-% solution of ascorbic acid at the following ratio of components, vol.%: 1-% solution of CaCl₂, 2.5-2.83; 1-% solution of MgCl₂, 0.5-0.6; 1-% solution of KCl, 1-1.2; 0.001 M poising solution, 10.0-10.2; 1-% solution of glucose, 10.0-10.5; 5-% solution of ascorbic acid, 0.5-0.6; 0.9-% solution of NaCl, the balance. EFFECT: longer preservation time of eye optical properties. 1 cl, 2 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для длительного хранения тканей глаза (роговицы, хрусталика) с сохранением их оптических свойств. The invention relates to medicine, namely to ophthalmology, and can be used for long-term storage of eye tissues (cornea, lens) while preserving their optical properties.

В связи с появлением новейших диагностических приборов появилась возможность дополнительного исследования оптических свойств некоторых оболочек глаза, в частности хрусталика и роговицы. Необходимым условием таких исследований для кадаверных глаз (свежеэнуклеированных) является сохранение основных химических компонентов указанных тканей и их оптических свойств. In connection with the advent of the latest diagnostic devices, it became possible to further study the optical properties of some membranes of the eye, in particular the lens and cornea. A necessary condition for such studies for cadaver eyes (freshly enucleated) is the preservation of the main chemical components of these tissues and their optical properties.

Чтобы биоткани глаза не утратили этих свойств применяют растворы: дистиллированную воду, физиологический раствор, раствор Рингера, раствор Тироде и другие. So that the biological tissues of the eye do not lose these properties, solutions are used: distilled water, physiological saline, Ringer's solution, Tyrode's solution and others.

Недостатком использования указанных растворов является то, что они приводят к изменению оптических свойств и осмотического давления тканей, что вызывает их набухание или сморщивание, а также при длительном хранении (от 1 до 15 ч) - к помутнению. The disadvantage of using these solutions is that they lead to a change in the optical properties and osmotic pressure of tissues, which causes them to swell or wrinkle, and also, during long-term storage (from 1 to 15 hours), to turbidity.

В связи с длительностью проводимых исследований (от 1 до 3-х суток) и с редкой возможностью получения кадаверных глаз с прозрачными хрусталиками в первые часы после смерти необходимо более длительное хранение тканей глаза. Due to the duration of the studies (from 1 to 3 days) and the rare possibility of obtaining cadaver eyes with transparent lenses in the first hours after death, longer storage of eye tissues is necessary.

Прототипом является раствор Рингера, который широко применяют в экспериментальной практике. Он содержит растворы солей NaCl, KCl, CaCl₂, NaHCO₃ /Збарский Б.И. Биологическая химия, 1972, с. 456/. Его используют для культивирования хрусталика и роговицы и для хранения кадаверных глаз /А. Пири, Р. ван. Гейнинген Биохимия глаза, 1968/.The prototype is Ringer's solution, which is widely used in experimental practice. It contains solutions of salts of NaCl, KCl, CaCl ₂ , NaHCO ₃ / Zbarsky B.I. Biological chemistry, 1972, p. 456 /. It is used to cultivate the lens and cornea and to store cadaver eyes / A. Peary, R. van. Heiningen Eye Biochemistry, 1968 /.

Однако применение раствора Рингера часто приводит к набуханию, а затем и помутнению хрусталика и роговицы при длительном хранении /5 - 15 ч/. However, the use of Ringer's solution often leads to swelling, and then clouding of the lens and cornea during prolonged storage / 5 - 15 hours /.

Оптические ткани глаза /роговица, хрусталик/, как известно, омываются или находятся в той или иной связи с камерной влагой глаза, которая необходима для метаболизма тканей глаза, да и сама является частью оптического параметра глаза. Поэтому естественно было бы использовать жидкость, близкую по составу к камерной влаге. Optical tissues of the eye / cornea, lens /, as is known, are washed or are in one way or another connected with the chamber moisture of the eye, which is necessary for the metabolism of the tissues of the eye, and it itself is part of the optical parameter of the eye. Therefore, it would be natural to use a liquid close in composition to chamber moisture.

Применяемый раствор Рингера отличается от камерной влаги ионным составом. В нем отсутствуют необходимые компоненты камерной влаги для метаболизма тканей глаза, особенно хрусталика и роговицы. Поэтому для длительного хранения тканей глаза требуются более специфические, сбалансированные растворы, наиболее близкие по своему составу к камерной влаге. The used Ringer's solution differs from chamber moisture in its ionic composition. It lacks the necessary components of chamber moisture for the metabolism of eye tissues, especially the lens and cornea. Therefore, for the long-term storage of eye tissues, more specific, balanced solutions are required that are closest in composition to chamber moisture.

Предлагается среда для хранения тканей глаза, содержащая хлористые соли K, Ca, Mg, фосфатный буфер, глюкозу и аскорбиновую кислоту, и физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, об. %:
1%-ный раствор CaCl₂ - 2,5 - 2,8
1%-ный раствор MgCl₂ - 0,5 - 0,6
1%-ный раствор KCl - 1,0 - 1,2
0,001 М фосфатный буфер - 10,0 - 10,2
1%-ный раствор глюкозы - 10,0 - 10,5
5%-ный раствор аскорбиновой кислоты - 0,5 - 0,6
0,9%-ный раствор NaCl - Остальное
pH 7,4 - 7,5
Смесь готовят следующим образом.An environment for storing eye tissues containing chloride salts of K, Ca, Mg, phosphate buffer, glucose and ascorbic acid, and physiological saline in the following ratio of components, vol. %:
1% solution of CaCl ₂ - 2.5 - 2.8
1% MgCl ₂ - 0.5 - 0.6
1% KCl - 1.0 - 1.2
0.001 M phosphate buffer - 10.0 - 10.2
1% glucose solution - 10.0 - 10.5
5% solution of ascorbic acid - 0.5 - 0.6
0.9% NaCl - Rest
pH 7.4 - 7.5
The mixture is prepared as follows.

Примерно к 70 мл 0,9% NaCl добавляют 2,5 - 2,8 мл 1% CaCl₂, 0,5 - 0,6 мл 1% MgCl₂, 1,0 - 1,2 мл 1% KCl, 10,0 - 10,2 мл 0,001 М фосфатного буфера, 10,0 - 10,5 мл 1% раствора глюкозы. Смесь стерилизуют до внесения в нее аскорбиновой кислоты /она подвержена разложению при стерилизации/ при 132^oC и давлении 2 атм в течение 30 мин. В таком виде раствор можно хранить при 4^oC в течение месяца. Перед непосредственным применением в указанную смесь добавляют 0,5 - 0,6 мл стерильного 5%-ного раствора аскорбиновой кислоты промышленного производства /в ампулах/ и доводят до 100 мл стерильным физиологическим раствором /0,9% NaCl/.To about 70 ml of 0.9% NaCl, add 2.5 - 2.8 ml of 1% CaCl ₂ , 0.5 - 0.6 ml of 1% MgCl ₂ , 1.0 - 1.2 ml of 1% KCl, 10, 0 - 10.2 ml of 0.001 M phosphate buffer, 10.0 - 10.5 ml of a 1% glucose solution. The mixture is sterilized before adding ascorbic acid to it (it decomposes upon sterilization) at 132 ^° C and a pressure of 2 atm for 30 minutes. In this form, the solution can be stored at 4 ^o C for a month. Before direct use, 0.5 to 0.6 ml of a sterile 5% solution of industrial production of ascorbic acid / in ampoules / is added to the mixture and adjusted to 100 ml with sterile physiological saline / 0.9% NaCl /.

В табл. 1 представлены результаты хранения тканей глаза /19 роговиц и 19 хрусталиков/ в течение 3-х суток при содержании в предлагаемом растворе ингредиентов в количестве нижнего и верхнего пределов интервала значений, указанного в формуле. In the table. 1 presents the results of storage of eye tissue / 19 corneas and 19 lenses / for 3 days when the content in the proposed solution of the ingredients in the amount of the lower and upper limits of the range of values specified in the formula.

В экспериментальных исследованиях было установлено, что в предложенной среде при 0 - 4^oC ткани глаза сохраняют свои оптические свойства в течение 3-х суток.In experimental studies, it was found that in the proposed environment at 0 - 4 ^o C the eye tissues retain their optical properties for 3 days.

В табл. 2 представлены сравнительные результаты хранения хрусталиков и роговиц по прототипу и с использованием предложенной среды. In the table. 2 presents the comparative storage results of the lenses and corneas of the prototype and using the proposed environment.

Как видно из табл. 2, при хранении глаза по прототипу отмечено большое количество в них изменений. В предложенной среде изменений не наблюдалось. As can be seen from the table. 2, when storing the eyes of the prototype noted a large number of changes in them. No changes were observed in the proposed environment.

В табл. 3 представлены результаты хранения тканей в предложенной среде в течение 6 суток. In the table. 3 presents the results of tissue storage in the proposed environment for 6 days.

Как видно из табл. 2, при использовании предлагаемой среды в течение 3-х суток не было обнаружено ни одного изменения в тканях глаза. As can be seen from the table. 2, when using the proposed environment for 3 days, no changes in the tissues of the eye were detected.

Отсутствие изменений оптических свойств роговиц и хрусталиков при хранении их в течение 3-х суток доказывает возможность применения предлагаемой среды в длительных экспериментальных исследованиях тканей глаза. The absence of changes in the optical properties of corneas and lenses during their storage for 3 days proves the possibility of using the proposed medium in long-term experimental studies of eye tissues.

Claims

An eye tissue storage medium containing a 0.9% NaCl solution, characterized in that it additionally contains 1% solutions of calcium, magnesium, potassium chlorides, 0.001 M phosphate buffer solution, 1% glucose solution, 5% - a solution of ascorbic acid and having a pH of 7.4 - 7.5 in the following ratio of components, vol.%:
1% solution of CaCl ₂ - 2.5 - 2.8
1% MgCl ₂ - 0.5 - 0.6
1% KCl solution - 1.0 - 1.2
0.001 M phosphate buffer - 10.0 - 10.2
1% glucose solution - 10.0 - 10.5
5% solution of ascorbic acid - 0.5 - 0.6
0.9% NaCl - Rest