RU211251U1 - Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикатор рН - Google Patents
Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикатор рН Download PDFInfo
- Publication number
- RU211251U1 RU211251U1 RU2021135560U RU2021135560U RU211251U1 RU 211251 U1 RU211251 U1 RU 211251U1 RU 2021135560 U RU2021135560 U RU 2021135560U RU 2021135560 U RU2021135560 U RU 2021135560U RU 211251 U1 RU211251 U1 RU 211251U1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- indicator
- disk
- substrate
- nutrient medium
- preparation
- Prior art date
Links
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 10
- 239000001963 growth media Substances 0.000 title description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 title 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000003490 calendering Methods 0.000 claims abstract description 7
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960003531 Phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- SGHZXLIDFTYFHQ-UHFFFAOYSA-L Brilliant Blue FCF Chemical compound [Na+].[Na+].C=1C=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C(=CC=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=CC=1N(CC)CC1=CC=CC(S([O-])(=O)=O)=C1 SGHZXLIDFTYFHQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- NUHCTOLBWMJMLX-UHFFFAOYSA-N Bromothymol blue Chemical compound BrC1=C(O)C(C(C)C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C(=C(Br)C(O)=C(C(C)C)C=2)C)=C1C NUHCTOLBWMJMLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000007374 clinical diagnostic method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000002609 media Substances 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- CJBMVMMYECULNQ-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-4-[3-(3-bromo-4-hydroxy-5-methyl-2-propan-2-ylphenyl)-1,1-dioxo-2,1$l^{6}-benzoxathiol-3-yl]-6-methyl-3-propan-2-ylphenol Chemical compound CC(C)C1=C(Br)C(O)=C(C)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(C)C=2)C(C)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 CJBMVMMYECULNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 210000000941 Bile Anatomy 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 1
- 230000036091 Metabolic activity Effects 0.000 description 1
- NNBFNNNWANBMTI-UHFFFAOYSA-M [4-[[4-(diethylamino)phenyl]-phenylmethylidene]cyclohexa-2,5-dien-1-ylidene]-diethylazanium;hydrogen sulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O.C1=CC(N(CC)CC)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)=C1C=CC(=[N+](CC)CC)C=C1 NNBFNNNWANBMTI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial Effects 0.000 description 1
- 238000009635 antibiotic susceptibility testing Methods 0.000 description 1
- 229960001506 brilliant green Drugs 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory Effects 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000001340 slower Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002336 sorption--desorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Abstract
Полезная модель относится к области микробиологии и может найти применение для приготовления питательной среды, включающей в свой состав индикатор рН.
Решается задача расширения арсенала средств, используемых для диагностики.
Полезная модель представляет собой диск, состоящий из подложки и сорбированного слоя, отличающийся тем, что подложка выполнена из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги толщиной 150±50 мкм, а сорбированный слой представляет рН-индикатор.
Description
Полезная модель относится к области микробиологии и может найти применение для приготовления питательной среды, включающей в свой состав индикатор рН.
Наиболее близким и выбранным за прототип изделием является диск, применяемый в диско-диффузионном методе (Bauer, AW; Kirby, WM; Sherris, JC; Turck, M / Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method // American Journal of Clinical Pathology, 1966). Он состоит из подложки и сорбированного слоя. Подложка выполнена из картона фильтровального, изготовленного из беленой сульфатной целлюлозы, а в качестве сорбированного слоя выступает антимикробный препарат в заданной регламентирующими документами концентрации. Данные изделия широко используются для исследования чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам. Однако, основа данного диска, выполненная из фильтровальной бумаги, предназначена для диффузии антимикробного препарата из нее в плотную питательную среду, а не для быстрой десорбции нанесенного вещества в жидкую питательную среду. Таким образом, основа данного диска, выполненная из фильтровальной бумаги, не подходит в качестве матрицы для внесения индикатора в жидкую питательную среду.
Предложенное авторами решение позволяет расширить арсенал используемых средств (дисков, использующихся для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам), а также позволяет приготовить питательные среды для культивирования микроорганизмов, содержащие индикаторы рН.
Актуальность применения данной полезной модели обусловлена следующими причинами:
- индикаторы рН в концентрациях около 0,01% часто входят в состав различных питательных сред для культивирования микроорганизмов.
Применение данных соединений позволяет визуализировать изменения, связанные с метаболической активностью исследуемого штамма микроорганизмов;
- в связи с возрастающей частотой использования микрообъемных методов в лабораторной диагностике, возникает задача разработки быстрого и удобного способа приготовления небольшого объема питательной среды, включающей в свой состав индикатор pH.
Кроме того, обеспечен следующий технический результат:
- снижено время приготовления окрашенной питательной среды - реализуется внесением точной дозы индикатора, не требующим приготовления навески или стокового раствора;
- остается возможность варьирования концентрации индикатора кратно количеству внесенных в питательную среду дисков;
- увеличен срок хранения индикатора, что обеспечивается сорбцией вещества на бумажной матрице, что повышает стабильность при хранении;
- уменьшена емкость тары, необходимая для хранения индикатора - реализуется за счет того, что наименьший объем занимает вещество в сухом, нерастворенном виде на компактной подложке;
- снижены риски при хранении наборов реагентов, содержащих индикаторы, поскольку порча индикатора не приводит к непригодности тех компонентов набора, в которые он мог быть добавлен.
Сущность полезной модели сводится к следующему: полезная модель представляет собой диск, состоящий из подложки и сорбированного слоя, отличающийся тем, что подложка выполнена из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги, толщиной 150±50 мкм, а сорбированный слой представляет собой комбинированный рН-индикатор, который позволяет обеспечить визуальную оценку изменения pH.
Данный вид бумаги (150±50 мкм, 70-80 г/м), с одной стороны, широко используется в типографии, поэтому является доступным и недорогим сырьем для производства дисков, а с другой стороны обладает оптимальными параметрами для процессов сорбции/десорбции индикаторов с ее поверхности в жидкость.
Комбинированный pH-индикатор может представлять смесь рН- индикаторов из фенолового красного и бромтимолового синего и бриллиантового синего.
Использование дисков позволяет приготовить окрашенную питательную среду с индикатором pH путем внесения индикаторных дисков с меньшей затратой времени, а также увеличить срок хранения индикаторов, благодаря сорбции на бумажной подложке.
Известны следующие способы приготовления питательных сред, содержащих индикатор pH:
1) Внесение раствора индикатора в питательную среду в ходе ее приготовления непосредственно перед использованием.
Способ непосредственного внесения раствора индикатора в питательную среду позволяет точно внести необходимое количество индикатора, но только при условии правильного приготовления раствора индикатора [Поляк, М.С.Питательные среды для медицинской микробиологии, стр. 10]. Следует отметить, что приготовление растворов индикаторов требует точного взвешивания с использованием аналитических весов, а также дополнительных реактивов для растворения (например, гидроксида натрия), не всегда имеющихся в наличии. Таким образом, приготовление раствора индикатора требует значительного количества времени. Также, многие индикаторы нецелесообразно заготавливать заранее, вследствие их нестабильности при хранении.
2) Внесение раствора индикатора в питательную среду в ходе ее приготовления с последующей сублимационной сушкой. Таким способом пользуются производители коммерческих питательных сред. Например, MERCK (Бульонная основа с феноловым красным) [справочник по микробиологии стр. 386], HiMedia (Бульон лактозный с бриллиантовым зеленым и желчью) [http//www.himedialabs.ru/]. Данный способ позволяет максимально снизить трудозатраты потребителя, но обладает следующими недостатками: невозможно добавить другой индикатор или варьировать содержание его в питательной среде; в ходе хранения питательной среды индикатор может потерять свои свойства, что сделает невозможным использование данной питательной среды.
3) Сорбция индикатора на поверхности емкости, в которую далее будет внесен растворитель или питательная среда. Недостатком данного способа является то, что в ходе хранения питательной среды вероятность потери свойств индикатора при использовании данного способа внесения выше, чем в способе №2 [Лабинская, А.С.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований, стр. 373].
Полезная модель реализуется следующим образом:
Пример 1. Приготовление растворов индикаторов для нанесения на подложку.
Приготовление раствора комбинированного рН-индикатора.
Состав (на 1 литр)
1. Феноловый красный - 0,8% раствор в 0,05 Н натрия гидрооксиде- 333 мл.
2. Бриллиантовый синий - 0,6% раствор в 0,05 Н натрия гидрооксиде - 333 мл.
3. Бромтимоловый синий - 0,8% раствор в 0,05 Н натрия гидрооксиде - 333 мл.
Для приготовления раствора комбинированного рН-индикатора растворы смешивают в пропорции 1:1:1 и доводят дистиллированной водой до 1 л.
Выбор рН-индикатора обусловлен определенным интервалом изменения окраски, необходимым для регистрации жизнедеятельности микроорганизмов (точка перехода фенолового красного около 7,5, а бромтимолового синего - около 6,5).
Пример 2. Нанесение раствора индикатора на подложку и изготовление бумажных дисков из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги.
Диски производятся методом штамповки на вырубном штампе из предварительно нарезанных под размер матрицы штампа заготовок высокоплотной каландрированной мелованной бумаги.
Приготовленный раствор pH-индикатора наносят на подложку из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги в количестве 10 мкл раствора индикатора на диск. Диски с раствором индикатора помещают в термостат на 18 ч, затем вынимают и герметично укупоривают во флаконы, содержащие влагопоглотитель в количестве 1 г. на 100 дисков.
Пример 3. Изготовление бумажных дисков из фильтровальной бумаги.
Был исследован способ изготовления дисков из двух видов бумаги, которые впоследствии пропитывали растворами индикаторов. В четыре пробирки типа «Эппендорф» добавили по 1 мл жидкой питательной среды. В две пробирки добавили по одному диску, изготовленному из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги (с pH-индикатором), а в оставшиеся - диски, изготовленные из фильтровальной бумаги. Встряхивание пробирок, содержащих индикаторные диски, осуществляли на встряхивателе V-3 plus типа Vortex. Результаты определения времени десорбции индикаторов с дисков, подложка которых выполнена из различных материалов, представлены в таблице 1.
Таблица 1
Результаты определения времени десорбции индикатора с дисков, подложка которых выполнена из различных материалов
Как видно из вышеприведенной таблицы, при использовании в качестве подложки фильтровальной бумаги, замедляется десорбция нанесенного на диск вещества в питательную среду.
Пример 4. Приготовление питательной среды, включающей в свой состав индикатор pH.
Для получения окрашенной питательной среды в пробирку внести индикаторные диски из расчета 1 диск на 1 мл среды. Содержимое пробирки тщательно перемешать на Vortex. Диски с индикатором pH следует вносить при изучении ферментирующих бактерий.
Claims (2)
1. Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикатор рН, состоящий из подложки и сорбированного слоя, характеризующийся тем, что подложка выполнена из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги, толщиной 150±50 мкм, а сорбированный слой представляет собой комбинированный рН-индикатор, обеспечивающий визуальную оценку изменения значения рН.
2. Диск по п. 1, отличающийся тем, что комбинированный рН-индикатор представляет собой смесь рН-индикаторов, содержащую феноловый красный и бромтимоловый синий, и бриллиантовый синий.
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020125800U Division RU210196U1 (ru) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU211251U1 true RU211251U1 (ru) | 2022-05-26 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1406180A (en) * | 1972-04-26 | 1975-09-17 | Miles Lab | Test article for use in microbiology |
| RU151101U1 (ru) * | 2014-08-13 | 2015-03-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "ВИНАР" | Устройство для инкубации и контроля биологических индикаторов, предназначенных для контроля воздушной стерилизации |
| RU2715405C1 (ru) * | 2018-12-24 | 2020-02-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Ассоциация Медицины и Аналитики" (ООО "АМА") | Тест-система для определения ферментативной активности бактерий по аммиаку |
| RU2758898C1 (ru) * | 2021-03-03 | 2021-11-02 | Федеральное автономное учреждение "25 Государственный научно-исследовательский институт химмотологии Министерства обороны Российской Федерации" | Реагентная индикаторная бумага для определения хлорида в водных объектах |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1406180A (en) * | 1972-04-26 | 1975-09-17 | Miles Lab | Test article for use in microbiology |
| RU151101U1 (ru) * | 2014-08-13 | 2015-03-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "ВИНАР" | Устройство для инкубации и контроля биологических индикаторов, предназначенных для контроля воздушной стерилизации |
| RU2715405C1 (ru) * | 2018-12-24 | 2020-02-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Ассоциация Медицины и Аналитики" (ООО "АМА") | Тест-система для определения ферментативной активности бактерий по аммиаку |
| RU2758898C1 (ru) * | 2021-03-03 | 2021-11-02 | Федеральное автономное учреждение "25 Государственный научно-исследовательский институт химмотологии Министерства обороны Российской Федерации" | Реагентная индикаторная бумага для определения хлорида в водных объектах |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| BAUER, AW; KIRBY, WM; SHERRIS, JC; TURCK, M "Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method", American Journal of Clinical Pathology, 1966, p.493-496. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0093116B1 (en) | Method of quantitatively assaying microorganisms or substances affecting the growth thereof | |
| AU756412B2 (en) | Device and methods for determination of analyte in a solution | |
| JPH07509120A (ja) | 生物学的物質の分析方法およびその装置 | |
| AU2004268618B2 (en) | Apparatus and method for liquid sample partitioning | |
| EP0861430A1 (en) | Method for quantification of biological material in a sample | |
| Sheree Lin et al. | Conventional and rapid methods for yeast identification | |
| US4728607A (en) | Miniaturized yeast identification system | |
| EP0101398A1 (en) | Method of concentrating and measuring unicellular organisms | |
| FI57128B (fi) | Saett att identifiera mikroorganismer | |
| JPS62257400A (ja) | クレアチニン又はクレアチンの測定要素及び測定方法 | |
| RU211251U1 (ru) | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикатор рН | |
| US20100136608A1 (en) | Multiple Filter Array Assay | |
| RU210196U1 (ru) | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала | |
| US6051394A (en) | Detection of microorganisms | |
| US20040018585A1 (en) | Method for quantification of biological material in a sample | |
| US8067154B2 (en) | Method and device for rapid detection of microorganisms by changing the shape of micro-colonies in micro-channels | |
| Shen et al. | In situ sampling of small volumes of soil solution using modified micro-suction cups | |
| Hildemann et al. | Techniques for studies of hemoglobin synthesis in Daphnia | |
| US5081033A (en) | Miniaturized yeast identification system | |
| JPH02501349A (ja) | 試験器 | |
| Ceccato-Antonini | Microbiological Techniques and Methods for the Assessment of Microbial Contamination | |
| EP0141647A2 (en) | Reflective particle-containing analysis composition and device | |
| RU2409679C1 (ru) | Способ определения устойчивости бактерий к дезинфектантам | |
| ITAGAKI et al. | Microbiological assay of vitamin B6 by thin-layer cup-plate method with saccharomyces carlsbergensis | |
| JPH11242027A (ja) | 免疫学的便潜血試験の精度管理方法 |