RU210196U1 - Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала - Google Patents
Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала Download PDFInfo
- Publication number
- RU210196U1 RU210196U1 RU2020125800U RU2020125800U RU210196U1 RU 210196 U1 RU210196 U1 RU 210196U1 RU 2020125800 U RU2020125800 U RU 2020125800U RU 2020125800 U RU2020125800 U RU 2020125800U RU 210196 U1 RU210196 U1 RU 210196U1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- indicator
- disk
- substrate
- nutrient medium
- redox potential
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Полезная модель относится к области микробиологии и может найти применение для приготовления питательной среды, включающей в свой состав индикаторы рН и/или редокс-потенциала. Решается задача расширения арсенала средств, используемых для диагностики. Полезная модель представляет собой диск, состоящий из подложки и сорбированного слоя, отличающийся тем, что подложка выполнена из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги толщиной 150±50 мкм, а сорбированный слой представляет рН-индикатор или индикатор окислительно-восстановительного потенциала.
Description
Полезная модель относится к области микробиологии и может найти применение для приготовления питательной среды, включающей в свой состав индикаторы рН и/или редокс-потенциала.
Наиболее близким и выбранным за прототип изделием является диск, применяемый в диско-диффузионном методе (Bauer, AW; Kirby, WM; Sherris, JC; Turck, M / Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method // American Journal of Clinical Pathology, 1966). Он состоит из подложки и сорбированного слоя. Подложка выполнена из картона фильтровального, изготовленного из беленой сульфатной целлюлозы, а в качестве сорбированного слоя выступает антимикробный препарат в заданной регламентирующими документами концентрации. Данные изделия широко используются для исследования чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам. Однако основа данного диска, выполненная из фильтровальной бумаги, предназначена для диффузии антимикробного препарата из нее в плотную питательную среду, а не для быстрой десорбции нанесенного вещества в жидкую питательную среду. Таким образом, основа данного диска, выполненная из фильтровальной бумаги, не подходит в качестве матрицы для внесения индикатора в жидкую питательную среду.
Предложенное авторами решение позволяет расширить арсенал используемых средств (дисков, использующихся для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам), а также позволяет приготовить питательные среды для культивирования микроорганизмов, содержащей индикаторы рН или редокс-потенциала.
Актуальность применения данной полезной модели обусловлена следующими причинами:
индикаторы рН и редокс-потенциала в концентрациях около 0,01% часто входят в состав различных питательных сред для культивирования микроорганизмов. Применение данных соединений позволяет визуализировать изменения, связанные с метаболической активностью исследуемого штамма микроорганизмов;
в связи с возрастающей частотой использования микрообъемных методов в лабораторной диагностике, возникает задача разработки быстрого и удобного способа приготовления небольшого объема питательной среды, включающей в свой состав индикаторы рН или редокс-потенциала. Кроме того, обеспечен следующий технический результат:
снижено время приготовления окрашенной питательной среды - реализуется внесением точной дозы индикатора, не требующим приготовления навески или стокового раствора;
остается возможность варьирования концентрации индикатора кратно количеству внесенных в питательную среду дисков;
увеличен срок хранения индикатора, что обеспечивается сорбцией вещества на бумажной матрице, что повышает стабильность при хранении;
уменьшена емкость тары, необходимая для хранения индикатора - реализуется за счет того, что наименьший объем занимает вещество в сухом, нерастворенном виде на компактной подложке;
снижены риски при хранении наборов реагентов, содержащих индикаторы, поскольку порча индикатора не приводит к непригодности тех компонентов набора, в которые он мог быть добавлен.
Сущность полезной модели сводится к следующему: полезная модель представляет собой диск, состоящий из подложки и сорбированного слоя, отличающийся тем, что подложка выполнена из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги толщиной 150±50 мкм, а сорбированный слой представляет рН-индикатор или индикатор окислительно-восстановительного потенциала. Данный вид бумаги (150±50 мкм, 70-80 г/м2), с одной стороны, широко используется в типографии, поэтому является доступным и недорогим сырьем для производства дисков, а с другой стороны обладает оптимальными параметрами для процессов сорбции/десорбции индикаторов с ее поверхности в жидкость.
Использование дисков позволяет приготовить окрашенную питательную среду с индикатором (рН или редокс-потенциала) путем внесения индикаторных дисков с меньшей затратой времени, а также увеличить срок хранения индикаторов, благодаря сорбции на бумажной подложке.
Известны следующие способы приготовления питательных сред, содержащих индикатор рН или индикатор редокс-потенциала.
1) Внесение раствора индикатора в питательную среду в ходе ее приготовления непосредственно перед использованием.
Способ непосредственного внесения раствора индикатора в питательную среду позволяет точно внести необходимое количество индикатора, но только при условии правильного приготовления раствора индикатора [Поляк М.С. Питательные среды для медицинской микробиологии, стр. 10]. Следует отметить, что приготовление растворов индикаторов требует точного взвешивания с использованием аналитических весов, а также дополнительных реактивов для растворения (например, гидроксида натрия), не всегда имеющихся в наличии. Таким образом, приготовление раствора индикатора требует значительного количества времени. Также, многие индикаторы нецелесообразно заготавливать заранее, вследствие их нестабильности при хранении.
2) Внесение раствора индикатора в питательную среду в ходе ее приготовления с последующей сублимационной сушкой. Таким способом пользуются производители коммерческих питательных сред. Например, MERCK (Бульонная основа с феноловым красным) [справочник по микробиологии стр. 386], HiMedia (Бульон лактозный с бриллиантовым зеленым и желчью) [http//www.himedialabs.ru/]. Данный способ позволяет максимально снизить трудозатраты потребителя, но обладает следующими недостатками: невозможно добавить другой индикатор или варьировать содержание его в питательной среде; в ходе хранения питательной среды индикатор может потерять свои свойства, что сделает невозможным использование данной питательной среды.
3) Сорбция индикатора на поверхности емкости, в которую далее будет внесен растворитель или питательная среда. Недостатком данного способа является то, что в ходе хранения питательной среды вероятность потери свойств индикатора при использовании данного способа внесения выше, чем в способе №2 [Лабинская А.С. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований, стр. 373].
Полезная модель реализуется следующим образом:
Пример 1. Приготовление растворов индикаторов для нанесения на подложку.
I. Приготовление раствора комбинированного рН-индикатора.
Состав (на 1 литр):
1. Феноловый красный - 0,8% раствор в 0,05 Н натрия гидроксиде - 333 мл.
2. Бриллиантовый синий - 0,6% раствор в 0,05 Н натрия гидроксиде - 333 мл.
3. Бромтимоловый синий - 0,8% раствор в 0,05 Н натрия гидроксиде - 333 мл.
Для приготовления раствора комбинированного рН-индикатора растворы смешивают в пропорции 1:1:1 и доводят дистиллированной водой до 1 л.
Выбор рН-индикатора обусловлен определенным интервалом изменения окраски, необходимым для регистрации жизнедеятельности микроорганизмов (точка перехода фенолового красного около 7,5, а бромтимолового синего - около 6,5).
II. Приготовление раствора окислительно-восстановительного индикатора.
Состав (на 1 литр):
1. Резазурина натриевая соль (резазурин) - 10 г
2. Диметилсульфоксид (ДМСО) - 500 мл
3. Спирт этиловый 70% - 500 мл
Для приготовления раствора окислительно-восстановительного индикатора к 10 г резазурина добавить 500 мл ДМСО, перемешать. Полученную смесь довести 70% этиловым спиртом до объема 1 л и тщательно перемешать. Благодаря сорбции раствора окислительно-восстановительного индикатора на бумажной матрице, повышается стабильность вещества при хранении, а соответственно и срок годности индикатора.
Пример 2. Нанесение раствора индикатора на подложку и изготовление бумажных дисков из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги.
Диски производятся методом штамповки на вырубном штампе из предварительно нарезанных под размер матрицы штампа заготовок высокоплотной каландрированной мелованной бумаги.
Приготовленный раствор окислительно-восстановительного или рН-индикатора наносят на подложку из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги в количестве 10 мкл раствора индикатора на диск. Диски с раствором индикатора помещают в термостат на 18 ч, затем вынимают и герметично укупоривают во флаконы, содержащие влагопоглотитель в количестве 1 г на 100 дисков.
Пример 3. Изготовление бумажных дисков из фильтровальной бумаги.
Был исследован способ изготовления дисков из двух видов бумаги, которые впоследствии пропитывали растворами индикаторов. В четыре пробирки типа «Эппендорф» добавили по 1 мл жидкой питательной среды. В две пробирки добавили по одному диску, изготовленному из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги (с рН-индикатором и индикатором редокс-потенциала), а в оставшиеся - диски, изготовленные из фильтровальной бумаги. Встряхивание пробирок, содержащих индикаторные диски, осуществляли на встряхивателе V-3 plus типа Vortex. Результаты определения времени десорбции индикаторов с дисков, подложка которых выполнена из различных материалов, представлены в таблице 1.
Как видно из вышеприведенной таблицы, при использовании в качестве подложки фильтровальной бумаги, замедляется десорбция нанесенного на диск вещества в питательную среду.
Пример 4. Приготовление питательной среды, включающей в свой состав индикаторы рН или редокс-потенциала.
Для получения окрашенной питательной среды в пробирку внести индикаторные диски из расчета 1 диск на 1 мл среды. Содержимое пробирки тщательно перемешать на Vortex. Диски с индикатором рН следует вносить при анализе ферментирующих бактерий, а диски с индикатором окислительно-восстановительного потенциала - при анализе неферментирующих бактерий.
Claims (2)
1. Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикатор редокс-потенциала, состоящий из подложки и сорбированного слоя, отличающийся тем, что подложка выполнена из высокоплотной каландрированной мелованной бумаги толщиной 150±50 мкм, а сорбированный слой представляет собой индикатор, обеспечивающий визуальную оценку изменения значения редокс-потенциала.
2. Диск по п. 1, отличающийся тем, что сорбированный слой представляет собой индикатор редокс-потенциала - резазурин.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2020125800U RU210196U1 (ru) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2020125800U RU210196U1 (ru) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2021135560U Division RU211251U1 (ru) | 2021-11-16 | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикатор рН |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU210196U1 true RU210196U1 (ru) | 2022-03-31 |
Family
ID=81076275
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020125800U RU210196U1 (ru) | 2020-07-27 | 2020-07-27 | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU210196U1 (ru) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2006065350A2 (en) * | 2004-12-16 | 2006-06-22 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Microbial detection and quantification |
US20070264680A1 (en) * | 2004-03-22 | 2007-11-15 | Proteus S.A. | Method and Test-Kit for the Detection and Quantification of Organisms |
RU2388827C1 (ru) * | 2008-10-09 | 2010-05-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии) | Способ определения чувствительности микроорганизмов с множественной лекарственной устойчивостью к сочетаниям антибактериальных препаратов |
EA024907B1 (ru) * | 2009-05-07 | 2016-11-30 | Универсидад Де Сарагоса | Интеллектуальная упаковка для выявления микроорганизмов |
-
2020
- 2020-07-27 RU RU2020125800U patent/RU210196U1/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070264680A1 (en) * | 2004-03-22 | 2007-11-15 | Proteus S.A. | Method and Test-Kit for the Detection and Quantification of Organisms |
WO2006065350A2 (en) * | 2004-12-16 | 2006-06-22 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Microbial detection and quantification |
RU2388827C1 (ru) * | 2008-10-09 | 2010-05-10 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИВИПФиТ Россельхозакадемии) | Способ определения чувствительности микроорганизмов с множественной лекарственной устойчивостью к сочетаниям антибактериальных препаратов |
EA024907B1 (ru) * | 2009-05-07 | 2016-11-30 | Универсидад Де Сарагоса | Интеллектуальная упаковка для выявления микроорганизмов |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Bauer, AW; Kirby, WM; Sherris, JC; Turck, M / Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method // American Journal of Clinical Pathology, 1966. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0093116B1 (en) | Method of quantitatively assaying microorganisms or substances affecting the growth thereof | |
US5501959A (en) | Antibiotic and cytotoxic drug susceptibility assays using resazurin and poising agents | |
JPH07509120A (ja) | 生物学的物質の分析方法およびその装置 | |
Hewitt | Microbiological assay for pharmaceutical analysis: a rational approach | |
US6989246B2 (en) | Sensor formulation for simultaneously monitoring at least two components of a gas composition | |
Sheree Lin et al. | Conventional and rapid methods for yeast identification | |
US4728607A (en) | Miniaturized yeast identification system | |
EP0101398A1 (en) | Method of concentrating and measuring unicellular organisms | |
FI57128B (fi) | Saett att identifiera mikroorganismer | |
RU210196U1 (ru) | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикаторы pH или редокс-потенциала | |
RU211251U1 (ru) | Диск для приготовления жидких питательных сред, содержащих индикатор рН | |
US20100136608A1 (en) | Multiple Filter Array Assay | |
DE69737718T2 (de) | Nachweis von mikroorganismen | |
WO2005005655A1 (en) | Improved test system for the determination of the presence of an antibiotic in a fluid | |
CA2494033A1 (en) | Novel procedure for growth, imaging, and enumeration of microbial colonies for serological or screening assays | |
US8067154B2 (en) | Method and device for rapid detection of microorganisms by changing the shape of micro-colonies in micro-channels | |
US4532206A (en) | β-Streptococcus selective medium | |
CN100375788C (zh) | 用于测定流体中是否存在抗生素的经过改进的检验系统 | |
Eigenfeld et al. | Quantification methods of determining brewer’s and pharmaceutical yeast cell viability: accuracy and impact of nanoparticles | |
Hildemann et al. | Techniques for studies of hemoglobin synthesis in Daphnia | |
US5081033A (en) | Miniaturized yeast identification system | |
RU2409679C1 (ru) | Способ определения устойчивости бактерий к дезинфектантам | |
CN115855911B (zh) | 粉末载体生物亲和性的测定方法及应用 | |
Ceccato-Antonini | Microbiological Techniques and Methods for the Assessment of Microbial Contamination | |
EP0141647A2 (en) | Reflective particle-containing analysis composition and device |