RU2110277C1

RU2110277C1 - Штамм а(17)иоганесбург (94)1 (нз n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых

Info

Publication number: RU2110277C1
Application number: RU96110707/13A
Authority: RU
Inventors: Ю.Р. Романова; Г.И. Александрова; Л.Г. Руденко; Н.В. Ларионова
Original assignee: Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН
Priority date: 1996-05-30
Filing date: 1996-05-30
Publication date: 1998-05-10

Abstract

Изобретение относится к медицинской вирусологии и касается получения вакцинного штамма для живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых, соответствует по антигенным свойствам актуальному вирусу А/Иоганесбург/33/94 (Н3N2). Вакцинный штамм А/47/Иоганесбург/94/1 - реассортант. Получен путем скрещивания эпидемического вируса А/Иоганесбург/3//94(Н3N2) с холодоадаптированным температурочувствительным вирусом А/Ленинград/134/17/57 (Н2N2) - донором аттенуации. Безвреден для взрослых и детей. Свойства штамма дают возможность гарантированно получать реассортантные вакцинные штаммы из вновь появляющихся эпидемических вирусов. Штамм А/17-Иоганесбург/94/1 активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32-34^oC. Характеризуется температурочувствительностью и холодоадаптированностью. Реассортант унаследовал от эпидемического вируса два гена, кодирующих поверхностные белки (гемагглютинин и нейраминидазу) от эпидемического вируса и шесть мутантных генов, кодирующих негликозилированные белки от донора аттенуации. Штамм А/17/Иоганесбург/94/1 (Н3N2) ареактогенен для взрослых людей 18 -20 лет при интраназальном введении. Штамм депонирован в ГИСК под N 391. Вакцинный штамм А/17/Иоганесбург/94/1 по биологическим свойствам и показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-299 ВС-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения взрослым людям старше 15 лет. 1 табл.

Description

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики эпидемического гриппа среди взрослых людей живой интраназальной гриппозной вакциной A/17/Иоганесбург/94/1 (H3N2). Штамм вируса гриппа A (H3N2) 17/Ф - прототип, утратил антигенную актуальность и вследствие этого не может вызывать защитную реакцию во время эпидемии гриппа A (H3N2).

Задачей изобретения является получение вакцинного штамма актуальной антигенной разновидности на основе эпидемического вируса A/Иоганесбург/33/94 (H3N2).

Вакцинный штамм A/17/Иоганесбург/94/1 (H3N2) получен методом генетической реассортации эпидемического вируса A/Иоганесбург/33/94 (H3N2) с холодоадаптированным штаммом A/Ленинград/134/17 (H2N2) - донором аттенуации, с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к вирусу A/Ленинград/134/17/57 (H2N2) ГИСК N 391 (ГИСК им. Л.А. Тарасевича).

Методом рестрикционного анализа амплифицированных ДНК копий фрагментов генома родительских и реассортантного вакцинного вирусов установлено, что вакцинный штамм A/17/Иоганесбург/94/1 (H3N2) унаследовал 6 генов, кодирующих внутренние белки PB1, PB2, PA, NP, M, NS от донора аттенуации и 2 гена, кодирующих поверхностные белки HA (гемагглютинин) и NA (нейраминидазу) - от эпидемического вируса. Методом рестрикционного анализа ДНК копий генов вакцинного штамма также подтверждено наличие мутаций в генах, кодирующих негликозилированные белки, соответствующих донору аттенуации A/Ленинград/134/17/57.

Вакцинный штамм A/17/Иоганесбург/94/1 (H3N2) является температурочувствительным (разность титров при 32 и 40^oC - 7.0 lg ЭИД 50/0,2 мл) и холодоадаптированным (разность титров при 32 и 25^oC - 3,5 lg ЭИД 50/0,2 мл).

Таким образом, представленный вакцинный штамм A/17/Иоганесбург/94/1 (H3N2) характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму: антигенной специфичностью поверхностных белков эпидемического вируса A/Иоганесбург/33/94 (H3N2), структурой генома, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека, характерной для донора аттенуации.

Морфология штамма - полиморфная - типичная для вируса гриппа.

Характеристика штамма:
Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 32^oC в течение 48 ч - 8,0 lg ЭИД 50/0,2 мл.

Гемагглютинирующая активность - 1:256 - 1:512.

Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).

Штамм аректогенен при интраназальном введении взрослым людям.

Пример. Группу из 98 людей в возрасте 18 - 20 лет, вакцинировали интраназально в объеме 0,5 мл реассортантным штаммом A/17/Иоганесбург/94/1 (H3N2) с инфекционной активностью 7,0 lg ЭИД 50/0,2 мл. Группа людей того же возраста из 64 человек получила плацебо.

Средние реакции с кратковременным повышением температуры свыше 37,6^oC не наблюдались. Показатель реактогенности составил - 0%. Слабые температурные реакции до 37,5^oC - были зарегистрированы в 1 случае среди привитых вакциной и в 2 случаях среди получивших плацебо (таблица).

Таким образом вакцинный штамм A/17/Иоганесбург/94/1 (H3N2) ГИСК N 391 по показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-298 BC-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения взрослым старше 15 лет.

Claims

Штамм вируса гриппа А(17) Иоганесбург(94)1(Н3 N2) ГИСК N 391, используемый для получения живой интраназальной гриппозной вакцины для взрослых людей.