RU2464311C1 - Штамм вируса гриппа для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей - Google Patents

Штамм вируса гриппа для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей Download PDF

Info

Publication number
RU2464311C1
RU2464311C1 RU2011120995/10A RU2011120995A RU2464311C1 RU 2464311 C1 RU2464311 C1 RU 2464311C1 RU 2011120995/10 A RU2011120995/10 A RU 2011120995/10A RU 2011120995 A RU2011120995 A RU 2011120995A RU 2464311 C1 RU2464311 C1 RU 2464311C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
children
adults
influenza
vaccine
Prior art date
Application number
RU2011120995/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Юлия Андреевна Дешева (RU)
Юлия Андреевна Дешева
Лариса Георгиевна Руденко (RU)
Лариса Георгиевна Руденко
Галина Ибрагимовна Александрова (RU)
Галина Ибрагимовна Александрова
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины" СЗО РАМН
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины" СЗО РАМН filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины" СЗО РАМН
Priority to RU2011120995/10A priority Critical patent/RU2464311C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2464311C1 publication Critical patent/RU2464311C1/ru

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицинской вирусологии и касается штамма вируса гриппа. Представленный штамм А/Перт/ 16/2009(Н3N2) получен методом генетической реассортации путем скрещивания современного эпидемического вируса А/Перт/16/2009(Н3N2) с холодоадаптированным температурочувствительным штаммом А/Ленинград/134/17/57(H2N2) - донором аттенуации, безвредным для взрослых и детей. Полученный штамм депонирован в Государственной коллекции вирусов НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН под №2630 и может быть использован для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей. 2 табл., 2 пр.

Description

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики гриппа, вызванного эпидемическим штаммом вируса гриппа A(H3N2). Профилактику осуществляют интраназальной живой гриппозной вакциной (ЖГВ) из штамма вируса гриппа A, семейства Orthomyxoviridae, рода Influenzavirus A-A/17/Перт/09/87(H3N2).
Применяемый до настоящего времени для профилактики гриппа среди взрослых и детей в составе тривалентной ЖГВ вакцинный штамм подтипа A/17/Висконсин/05/84(H3N2) [Патент №2340671, опубл. 10.12.2008. - БИ №34] обладает необходимым составом генома 6:2, однако в настоящее время он утратил антигенную актуальность. Вследствие этого штамм не может создавать защиту во время эпидемии, вызванной новой антигенной разновидностью вируса гриппа A(H3N2).
Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение вакцинного штамма новой антигенной разновидности. Этот штамм создавали на основе холодоадаптированного (XA) донора аттенуации A/Ленинград/134/17/57(H2N2), используя в качестве источника поверхностных антигенов гемагглютинина (HA) и нейраминидазы (NA) эпидемического штамма вируса гриппа A/Перт/16/2009(H3N2).
Заявляемый вакцинный штамм A/17/Перт/09/87(H3N2) получен методом классической генетической реассортации в развивающихся куриных эмбрионах (РКЭ) эпидемического вируса A/Перт/16/2009(H3N2) с холодоадаптированным штаммом A/Ленинград/134/17/57(H2N2) с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к донору аттенуации A/Ленинград/134/17/57(H2N2).
Донор аттенуации A/Ленинград/134/17/57(H2N2) - холодоадаптированный температурочувствительный штамм вируса гриппа, разрешенный для получения безвредных интраназальных вакцин для взрослых и детей [Александрова Г.И. Новое в эпидемиологии и профилактике вирусных инфекций. Л., 1986. - С.66-83]. Применяемые в настоящее время вакцинные штаммы ЖГВ получают методом реассортации современных эпидемических вирусов с холодоадаптированными (XA) донорскими штаммами, в результате чего образуются реассортанты, имеющие смешанный геном. Гены, кодирующие гемагглютинин (HA) и нейраминидазу (NA), наследуются от антигенно актуального эпидемического штамма, а шесть генов внутренних и неструктурных белков (PB2, PB1, PA, NP, M, NS) - от безвредного XA донора аттенуации.
Анализ генома созданного вакцинного штамма был выполнен с использованием рестрикционного анализа ДНК-копий сегментов РНК, полученных с помощью обратно-транскриптазной полимеразно-цепной реакции (ОТ-ПЦР) [Klimov A.I. J. Virol. Method. - 1995. - №55. - P.445-446]. Полученные с помощью ОТ-ПЦР ДНК-копии сегментов PB2, PB1, PA, NP, M и NS обрабатывали соответственно эндонуклеазами рестрикции Tru9I, HindIII, BamHI, AsnI, EcoRI, PvuI, NciI соответственно. Дополнительно копии сегментов PB1, PA и M были обработаны рестриктазами BstXI, AsnI и BciVI. Было показано, что сайты рестрикции в положениях нуклеотидной цепи, характерные для донора аттенуации A/Ленинград/134/17/57(H2N2), присутствуют в генах PB2 (1459), PA (107 и 1045), NP (1066) и M (68 и 969). В то же время было установлено, что утрачены сайты рестрикции в генах PB1 (819 и 975) и NS (798), что также характерно для донора аттенуации A/Ленинград/134/17/57(H2N2).
Таким образом установлено, что реассортант унаследовал 6 генов негликозилированных белков от донора аттенуации A/Ленинград/134/17/57(H2N2).
Обработка ДНК-копии сегмента NA рестриктазой SphI показала, что у реассортанта отсутствует сайт рестрикции в положении 78 нуклеотидной цепи, что свидетельствует о наследовании данного гена от эпидемического вируса A/Перт/16/2009(H3N2).
Принадлежность гемагглютинина родительскому эпидемическому вирусу A/Перт/16/2009(H3N2) была подтверждена путем постановки реакции торможения гемагглютинации (РТГА). Для этого в 96-луночные планшеты для иммунологических реакций вносили последовательные падающие разведения иммунных антисывороток с шагом 2, соответствующие антигены в стандартной дозе (4 агглютинирующих единицы) и 1% взвесь эритроцитов кур. Титр антигемагглютинирующих антител выражали как величину, обратную наибольшему разведению сыворотки, при котором наблюдалось торможение агглютинации. Установлено, что вакцинный кандидат A/17/Перт/09/87(H3N2) антигенно идентичен родительскому эпидемическому штамму. Таким образом было подтверждено, что реассортант A/17/Перт/09/87(H3N2) имеет формулу генома 6:2.
Определение инфекционной активности проводили в РКЭ, для чего делали ряд падающих десятикратных разведений исследуемого вирусного материала. Зараженные РКЭ инкубировали при следующих температурах: оптимальной (34°C), пониженной до 25°C или повышенной до 40°C. К числу температурочувствительных (имеющих ts фенотип) относили вирусы, которые репродуцировались при повышенной температуре по сравнению с оптимальной с разностью в 5,0-6,0 lg ЭИД50 и более. Если разница титров при оптимальной и пониженной до 25°C температуре не превышала 3,0-3,5 lg EID50, вирусы относили к XA группе. Было показано, что штамм A/17/Перт/09/87(H3N2) является температурочувствительным (разность титров при 33°C и 39°C составляет 8,3 lg ЭИД50/мл) и холодоадаптированным (разность титров при 33°C и 25°C составляет 3,0 lg ЭИД50/мл).
Результат исследований нового штамма вируса гриппа: представленный вакцинный штамм A/17/Перт/09/87(H3N2) характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму - антигенной специфичностью гемагглютинина эпидемического вируса A/17/Перт/09/87(H3N2), структурой генома, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов (6:2), температурочувствительностью, холодоадаптированностью, что коррелирует с безвредностью для человека, характерной для донора аттенуации.
Штамм депонирован в Государственной коллекции вирусов НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН под №2630.
Морфология штамма - полиморфная, типичная для вируса гриппа.
ХАРАКТЕРИСТИКА ПОЛУЧЕННОГО ШТАММА.
Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 33°C в течение 48 часов - 7,5 lg ЭИД50/0,2 мл.
Гемагглютинирующая активность - 1:256
Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз). Характеристики штамма отражены в паспорте на вакцинный штамм A/17/Перт/09/87(H3N2).
ПАСПОРТ ШТАММА
1. Название штамма - A/17/Перт/09/87(H3N2)
2. Серия - серия 2.
3. Метод получения - реассортация; характеристика родительских вирусов:
а) эпидемический вирус - A/Перт/16/2009(H3N2)
б) донор аттенуации A/Ленинград/134/17/57(H2N2)
4. Количество пассажей - 7 в процессе рекомбинации+1 накопительный
5. Характеристика штамма до лиофилизации:
а) оптимальные условия репродукции - 33°, 48 часов;
б) гемагглютинирующая активность 1:512;
в) инфекционная активность 7,8 lg ЭИД50/0,2 мл;
г) чувствительность к ингибиторам: ингибиторорезистентный;
д) разность в показателях инфекционной активности при 33°C и 39°C - 7,8 lg ЭИД50/0,2 мл;
е) разность в показателях инфекционной активности при 33°C и 25°С - 2,8 lg ЭИД50/0,2 мл;
ж) структура генома реассортанта:
- гены от эпидемического вируса НА, NA
- гены от донора аттенуации - РВ2, РВ1, PA, NP, M, NS
6. Характеристика штамма после лиофилизации:
а) дата лиофилизации: 18.01.2010;
б) объем материала в ампуле: 1 мл;
в) количество доз в ампуле: 2;
г) инфекционная активность - 7,5 lg ЭИД50/0,2 мл
д) гемагглютинируюшая активность - 1:256
7. Рекомендуемое разведение при вакцинации 1:1
8. Антигенная специфичность:
а) гемагглютинина - идентичен вирусу A/Перт/16/2009(H3N2) по данным РТГА с крысиной антисывороткой.
б) нейраминидазы - идентична вирусу A/Перт/16/2009(H3N2) по данным ПЦР-рестрикционного анализа ДНК-копий генов.
9. Безвредность для мышей при подкожном и внутрибрюшинном введении -безвреден.
10. Бактериологический контроль лиофилизированного материала - дата проведения - 2.04.2010 - стерилен.
11. Контроль на отсутствие посторонних вирусов - посторонние вирусы отсутствуют 2.04.2010.
Штамм A/17/Перт/09/87(H3N2) ареактогенен при интраназальном введении для взрослых и детей 6-12 лет, что проверено на волонтерах.
Пример 1. При вакцинации 48 взрослых лиц интраназально рекомбинантным вакцинным штаммом A/17/Перт/09/87(H3N2) с инфекционной активностью 8,3 lg ЭИД50/мл в разведении 1:2 в объеме 0,5 мл сильных температурных реакций с повышением температуры свыше 38,5°C и средних реакций с кратковременным повышением температуры в диапазоне 37,6-38,5°C не наблюдалось. Слабые температурные реакции (до 37,5°C) наблюдались у трех привитых (6,3%) и у одного человека из группы плацебо (4,6%) (Табл.1).
Таблица 1
Препарат Число лиц Температурные реакции Головная Общее
37,0-37,5 37,6-38,5 ≥38,6 боль недомогание
ЖГВ 48 3 (6,3%) 0 0 0 0
Плацебо 22 1 (4,6%) 0 0 2 (9,1) 1 (4,6)
Общие реакции без повышения температуры тела (головная боль, общее недомогание) наблюдались среди получивших препарат плацебо. Из таблицы 1 видно, что вакцинный штамм A/17/Перт/09/87(H3N2) удовлетворяет требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам ЖГВ Приказом Минздрава РФ №156/29.
Пример 2. Для вакцинации детей использовали гриппозную аллантоисную интраназальную живую сухую вакцину «Ультравак», в которую входили производственные штаммы A/17/Калифорния/2009/38 (H1N1), A/17/Перт/09/87 (H3N2), B/60/Брисбен/08/83. В качестве растворителя использовалась вода для инъекций (серия 010110, 020110, 030110). В качестве препарата «плацебо» применяли стерильный 0,9% раствор хлорида натрия. Вакцину и плацебо вводили однократно, интраназально с помощью одноразового распылителя-дозатора по 0,25 мл в каждый носовой ход. Всего живой гриппозной вакциной было привито 47 школьников в возрасте 7-16 лет и 4 ребенка в возрасте 3-6 лет, «плацебо» получили 32 школьника в возрасте 7-16 лет.
При вакцинации 47 детей 7-16 лет тривалентной ЖГВ, включающей рекомбинантный вакцинный штамм A/17/Перт/09/87(H3N2) с инфекционной активностью 107,1 ЭИД50/мл, сильных температурных реакций - с повышением температуры свыше 38,5°C - не наблюдалось. В одном случае отмечено развитие средней реакции в виде кратковременного повышения температуры до 37,5°C. У трех детей отмечалась кратковременная головная боль без температурной реакции; у одного ребенка отмечалась слабость без температурной реакции; у двух детей отмечались катаральные явления в виде умеренной гиперемии зева без температурной реакции. В группе из 32 детей 7-16 лет, получивших плацебо, у одного ребенка отмечалась головная боль без температурной реакции. У четырех детей в возрасте 3-6 лет, привитых тривалентной ЖГВ, никаких реакций не отмечалось. Результаты испытаний приведены в таблице 2.
Результаты исследований показывают, что вакцинный штамм A/17/Перт/09/87(H3N2) удовлетворяет требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам ЖГВ фармакопейной статьей ФСП 42-0417, позволяющей использовать штамм для приготовления вакцины для взрослых и детей.
Таблица 2
Препарат Число наблюдений Из них с повышенной температурой тела (t, °C) Интоксикация, головная боль Катаральные явления
37 37,1-37,5 37,6-38,5 38,6
ЖГВ 7-16 лет 51 Абс. 0 1 0 0 5 4
% 0 2,1 0 0 10,6 8,5
Плацебо 32 Абс. 0 0 0 0 1 0
% 0 0 0 0 3,1 0
ЖГВ 3-6 лет 4 Абс. 0 0 0 0 0 0
% 0 0 0 0 0 0

Claims (1)

  1. Штамм вируса гриппа, депонированный в Государственной коллекции вирусов НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН под №2630, используемый для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей.
RU2011120995/10A 2011-05-24 2011-05-24 Штамм вируса гриппа для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей RU2464311C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011120995/10A RU2464311C1 (ru) 2011-05-24 2011-05-24 Штамм вируса гриппа для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011120995/10A RU2464311C1 (ru) 2011-05-24 2011-05-24 Штамм вируса гриппа для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2464311C1 true RU2464311C1 (ru) 2012-10-20

Family

ID=47145395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011120995/10A RU2464311C1 (ru) 2011-05-24 2011-05-24 Штамм вируса гриппа для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2464311C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2563352C2 (ru) * 2013-11-05 2015-09-20 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ" ) ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Техас/2012/30 (H3N2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2033424C1 (ru) * 1991-03-19 1995-04-20 Научно-исследовательский институт гриппа РАМН Штамм вируса гриппа а (нзn2) для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей
RU2159812C1 (ru) * 1999-06-15 2000-11-27 Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН Штамм вируса гриппа а/17/сидней/97/76(н3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых
RU2340671C1 (ru) * 2007-06-13 2008-12-10 Государственное учреждение Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Российской Академии медицинских наук (ГУ НИИЭМ РАМН) Штамм вируса гриппа а/17/висконсин/05/84(н3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2033424C1 (ru) * 1991-03-19 1995-04-20 Научно-исследовательский институт гриппа РАМН Штамм вируса гриппа а (нзn2) для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей
RU2159812C1 (ru) * 1999-06-15 2000-11-27 Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН Штамм вируса гриппа а/17/сидней/97/76(н3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых
RU2340671C1 (ru) * 2007-06-13 2008-12-10 Государственное учреждение Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Российской Академии медицинских наук (ГУ НИИЭМ РАМН) Штамм вируса гриппа а/17/висконсин/05/84(н3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2563352C2 (ru) * 2013-11-05 2015-09-20 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Институт экспериментальной медицины" (ФГБНУ "ИЭМ" ) ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Техас/2012/30 (H3N2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10793834B2 (en) Live-attenuated virus and methods of production and use
RU2318871C1 (ru) Штамм вируса гриппа гкв 2389 для получения живой интраназальной и инактивированной гриппозной вакцины
US11065326B2 (en) Live-attenuated vaccine having mutations in viral polymerase for the treatment and prevention of canine influenza virus
Harris et al. Intramuscular immunization of mice with live influenza virus is more immunogenic and offers greater protection than immunization with inactivated virus
US7758867B2 (en) Attenuated influenza virus and a live vaccine comprising the same
RU2315101C2 (ru) Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/калифорния/ 04/6 (н3n2) и донор аттенуации а/ленинград/134/17/к7/57 (н2n2) для его получения
Nurpeisova et al. Analysis of the efficacy of an adjuvant-based inactivated pandemic H5N1 influenza virus vaccine
RU2416640C1 (ru) Вакцинный штамм вируса гриппа а/17/брисбен/07/1 (h3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
RU2464311C1 (ru) Штамм вируса гриппа для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей
Zhao et al. Cross clade prophylactic and therapeutic efficacy of polyvalent equine immunoglobulin F (ab′) 2 against highly pathogenic avian influenza H5N1 in mice
RU2563351C2 (ru) ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Ануи/2013/61 (H7N9) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ГРИППОЗНОЙ ВАКЦИНЫ
RU2507256C2 (ru) Штамм вируса гриппа а/17/mallard/нидерланды/00/95(h7n3) для производства живой и производства инактивированной гриппозных вакцин
US20130122045A1 (en) Cross-Protective Influenza Vaccine
RU2563352C2 (ru) ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Техас/2012/30 (H3N2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЛЯ ДЕТЕЙ
RU2340671C1 (ru) Штамм вируса гриппа а/17/висконсин/05/84(н3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей
Morozova et al. Antiviral properties and toxicity of Ag-cystine complex
RU2307162C1 (ru) ШТАММ ВИРУСА ГРИППА А/17/Калифорния/04/71 (H3N2) ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЕТЕЙ
RU2464309C1 (ru) Штамм вируса гриппа для производства живой и инактивированной гриппозной вакцины
RU2159812C1 (ru) Штамм вируса гриппа а/17/сидней/97/76(н3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых
RU2285723C2 (ru) Штамм вируса гриппа а/17/ вайоминг/03/8(h3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
RU2783887C1 (ru) Реассортантный штамм вируса гриппа А/17/Ньюкасл/2018/22 (H3N2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
RU2793387C1 (ru) Реассортантный штамм вируса гриппа А/17/Гуандун-Маонань/2019/211 (H1N1)pdm09 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и для детей
US11576963B2 (en) Multivalent live-attenuated influenza vaccine for prevention and control of equine influenza virus (EIV) in horses
RU2183672C1 (ru) Штамм вируса гриппа a/17/новая каледония/99/145(h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых
US20220133877A1 (en) Multivalent Live-attenuated Influenza Vaccine for Prevention and Control of Equine Influenza Virus (EIV) in Horses

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140525