RU2104526C1 - Способ диагностики т-клеточных лимфом кожи - Google Patents
Способ диагностики т-клеточных лимфом кожи Download PDFInfo
- Publication number
- RU2104526C1 RU2104526C1 RU95107348A RU95107348A RU2104526C1 RU 2104526 C1 RU2104526 C1 RU 2104526C1 RU 95107348 A RU95107348 A RU 95107348A RU 95107348 A RU95107348 A RU 95107348A RU 2104526 C1 RU2104526 C1 RU 2104526C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- skin
- patient
- lymphocytes
- diagnosis
- chromatin
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 claims abstract description 23
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 claims abstract description 23
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims abstract 4
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 16
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 12
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 7
- 108010022894 Euchromatin Proteins 0.000 claims description 3
- 108010034791 Heterochromatin Proteins 0.000 claims description 3
- 210000000632 euchromatin Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004458 heterochromatin Anatomy 0.000 claims description 3
- 229940037003 alum Drugs 0.000 claims description 2
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 claims 1
- YBGOLOJQJWLUQP-UHFFFAOYSA-N gallocyanin Chemical compound OC(=O)C1=CC(=O)C(O)=C2OC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 YBGOLOJQJWLUQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000016507 interphase Effects 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 10
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 10
- 206010012455 Dermatitis exfoliative Diseases 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 6
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 6
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 6
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 6
- 201000009053 Neurodermatitis Diseases 0.000 description 5
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 5
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 4
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 4
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 4
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 3
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 3
- 230000000093 cytochemical effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 208000024386 fungal infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000013425 morphometry Methods 0.000 description 2
- 201000005962 mycosis fungoides Diseases 0.000 description 2
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 2
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000007173 Abies balsamea Nutrition 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000004857 Balsam Substances 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011703 Cyanosis Diseases 0.000 description 1
- 206010048768 Dermatosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- 244000018716 Impatiens biflora Species 0.000 description 1
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241001000161 Mago Species 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- 208000009359 Sezary Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000021388 Sezary disease Diseases 0.000 description 1
- 206010040829 Skin discolouration Diseases 0.000 description 1
- 208000007712 Tinea Versicolor Diseases 0.000 description 1
- 206010056131 Tinea versicolour Diseases 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 1
- PMGQWSIVQFOFOQ-YKVZVUFRSA-N clemastine fumarate Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.CN1CCC[C@@H]1CCO[C@@](C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 PMGQWSIVQFOFOQ-YKVZVUFRSA-N 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 201000003445 large cell neuroendocrine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 208000018555 lymphatic system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 201000000508 pityriasis versicolor Diseases 0.000 description 1
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 1
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000037370 skin discoloration Effects 0.000 description 1
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 1
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: изобретение относится к медицине, а именно, к дерматологии и гематологии, предназначено для ранней диагностики и дифференциальной диагностики T-клеточных лимфом кожи. Способ диагностики T-клеточных лимфом кожи (эритродермических вариантов) путем цитологического анализа взятого у больного биологического материала, отличающийся тем, что в качестве биологического материала берут мазок крови, фиксируют, проводят рибонуклеазную обработку, окрашивают галлоцианин-хромовыми квасцами, микроденситометрируют интерфазный хроматин лимфоцитов, на основании полученных параметров (OD4 - оптическая плотность эухроматина; FORM_P - форм-фактор ядра; IOD2 - интегральная оптическая плотность гетерохроматина; AREA - площадь ядра) рассчитывают показатель: DF = -0,14379•OD4 + 0,00003•IOD2 + 10,4952•FORM_P + 0,0001•AREA - 11,1241 и при отрицательном значении этого показателя диагностируют T-клеточную лимфому кожи.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно, к дерматологии и гематологии, предназначено для ранней диагностики и дифференциальной диагностики T-клеточных лимфом кожи.
Наиболее часто приходится дифференцировать эритродермические варианты T-клеточных лимфом кожи и эритродермии, возникающие при доброкачественных воспалительных дерматозах (экземе, псориазе, нейродермите и др.). Кроме того, до настоящего времени не дана оценка изменений в лимфоцитах у больных с эритродермическими состояниями, которые определяются как предлимфомные: эксфолиативный дерматит Вильсона-Брока и красный отрубевидный лишай Гебры. В клинической практике нередко приходится решать вопрос о злокачественной трансформации в лимфому хронических воспалительных дерматозов.
Существующие методы диагностики T-клеточных лимфом кожи не могут полностью удовлетворить клиницистов, так как позволяют установить диагноз только при наличии выраженной клинической картины, трудоемки в исполнении (иммунологические, цитохимические, цитогенетические и др.) и достоверно не отражают изменения в популяции лимфоцитов, характеризующие злокачественность процесса.
Одним из наиболее известных диагностических методов является обнаружение атипичных форм лимфоцитов у больных эритродермиями при злокачественных T-клеточных лимфомах. К этим эритродермиям относят эритродермическую форму грибовидного микоза и синдром Сезари, который в настоящее время рассматривается как лейкемический вариант эритродермической формы грибовидного микоза.
Ранее предпринимались попытки описания атипичных Т-лимфоцитов (клеток Сезари) у больных эритродермиями. Однако, каждый из ниже перечисленных методов имеет свои недостатки.
Гистологическая картина эритродермических состояний далеко не всегда отражает нозологическую специфичность процесса, ввиду выраженного воспалительного компонента биопсийного материала. Нередко для постановки диагноза требуется несколько биопсий, что травматично для больного.
Световая микроскопия позволяет обнаруживать атипичные лимфоциты в периферической крови лишь в запущенных стадиях заболевания, кроме того, так как анализ проводится визуально, то результатом является качественное описание морфологии, что не позволяет объективизировать и количественно оценить полученные результаты [1].
Электронно-микроскопические исследования позволяют получить общие представления о распределении хроматина в лимфоцитах, но методика не позволяет оценить функциональное состояние генома, достаточно трудоемка, особенно в подготовке материала для исследования [2],
Сканирующая электронная микроскопия не может применяться в диагностике эритрoдермий, поскольку не позволяет получить информацию об изменениях ядер лимфоцитов, специфичных для диагностики [3].
Сканирующая электронная микроскопия не может применяться в диагностике эритрoдермий, поскольку не позволяет получить информацию об изменениях ядер лимфоцитов, специфичных для диагностики [3].
Цитохимические исследования не дают четкой разницы в содержании ферментов в реактивных Т-лимфоцитах при доброкачественных воспалительных дерматозах и злокачественных T-лимфомах, т.е. нет специфических цитохимических маркеров клеток Сезари [4].
Цитофотометрия лимфоцитов отражает их пролиферативную активность на основании определения клеток, включающих тимидин только в S-фазу и не отражает качественное перераспределение хроматина в каждой клетке [5].
Цитогенетические исследования не имеют строгой специфичности и не всегда выявляют патологические изменения даже при далеко зашедших процессах [6].
Морфометрия лимфоцитов показывает, что степень изрезанности ядра, определенная по соотношению окружности ядра, составляет индекс ядерного контура, который был наибольшим у клеток Сезари и наименьшим у лимфоцитов больных хроническим лимфолейкозом. Но применение только метода классической морфометрии не позволяет оценить тонкую структуру надмолекулярной организации хроматина в ядре [7].
Иммуно-фенотипическая характеристика с применением моноклональных антител, выявляющих специфические опухолевые маркеры на мембранах лимфоцитов, является наиболее информативной для диагностики проявлений T-клеточных лимфом и дифференциальной диагностики их с доброкачественными воспалительными заболеваниями кожи. Однако, данная методика требует наличие дорогостоящих реактивов, позволяет диагностировать T-клеточные лимфомы на более поздних стадиях заболевания, когда выражены инфильтрация кожи и лимфоаденопатия, чем метод, предлагаемый в данной заявке, а также имеются сложности в подготовке материала для исследования, т.к. кровь берется из вены, что более травматично для больного с поражением кожи [8].
Этот метод можно рассматривать в качестве прототипа, поскольку он является наиболее информативным для диагностики T-клеточных лимфом и дифференциальной диагностики их с доброкачественными воспалительными заболеваниями кожи.
Постановка реакции осуществляется в 3 этапа.
I. Выделение и подготовка лимфоцитов для постановки реакции.
Забор крови из локтевой вены и выделение лимфоцитов по обычному способу на градиенте плотности феко-верографина центрифугированием. Подсчет клеток осуществляется в камере Горяева.
II. Подготовка и проведение реакции непрямой иммунофлюоресценции.
На чистые обезжиренные стекла наносят лунки из парафильма, по 4 на каждого больного. В каждую лунку наносят поли-L-лизин для фиксации клеток. Препарат инкубируют в термостате 40 мин при 37oC. Постановка реакции состоит из последовательных инкубаций. Сначала - с суспензией клеток, затем препараты отмывают и в лунки наносятся моноклональные антитела. После промывания для удаления антител, препараты инкубируют с антисывороткой против Ig G мыши, леченой флюоресцеином изотиоцианатом. Затем после отмывания препараты заливают глицерином, смешанным с физиологическим раствором (1 : 1) и накрывают покровными стеклами.
III. Подсчет субпопуляций Т-лимфоцитов в люминесцентном микроскопе, оснащенном фазово-контрастным устройством.
Определяют отношение клеток, имеющих кольцевое свечение, к общему количеству клеток, подсчитанному в фазово-контрастном устройстве, выраженное в процентах, что отражает содержание определенных фенотипических популяций и позволяет отнести исследуемый материал к определенной нозологической форме (T-лимфопролиферирующий процесс). Диффузно-окрашенные (погибшие) клетки не учитываются.
Целью настоящего изобретения является разработка способа более ранней диагностики и дифференциальной диагностики T-клеточных лимфом кожи (эритродермических вариантов) и снижение травматизации больного.
Способ осуществляется следующим образом.
Готовят мазок периферической крови, взятой из пальца руки, фиксируют (например, смесью Никифорова: этанол и эфир в соотношении 1 : 1) в течение 15 - 20 мин, высушивают на воздухе. Проводят рибонуклеазную обработку, рибонуклеаза (Reanal, BHP) разводится в осмолярном растворе сахарозы в концентрации 200 ME/100 мл. Обработка длится 50 - 60 мин при температуре 37oC, после чего мазок промывают в 3-х сменах дистиллированной воды. Окраску производят в растворе галлоцианин-хромовых квасцов (ГХК), приготовленном по стандартной методике [9] в течение 3 - 4 ч при 37oC. Препарат промывают 4 - 5 мин отстоявшейся водопроводной водой.
После окраски препарат накрывают покровным стеклом и проводится микроденситометрическое исследование на системе анализа изображений. Результатом микроденситометрии являются оптические, топологические и геометрические характеристики интерфазного хроматина по компонентам (эухроматин и гетерохроматин) и ядра в целом.
Предварительно на обучающих выборках были установлены наиболее информативные для данной патологии показатели структуры интерфазного хроматина:
OD4 - оптическая плотность эухроматина;
FORM_P - форм-фактор ядра;
IOD2 - интегральная оптическая плотность гетерохроматина;
AREA - площадь ядра.
OD4 - оптическая плотность эухроматина;
FORM_P - форм-фактор ядра;
IOD2 - интегральная оптическая плотность гетерохроматина;
AREA - площадь ядра.
Для комплексной оценки этих показателей рассчитывается параметр: DF = -0,14379•OD4 + 0,00003•IOD2 + 10,4952•FORM_P + 0,0001•AREA - 11,1241.
Формула для расчета параметра DF получена применением линейного дискриминантного анализа [10] при помощи стандартного пакета статистических программ. При отрицательном значении показателя DF диагностируют T-клеточную лимфому кожи.
Подобную связь между численными значениями установили при обследовании групп больных, находящихся на лечении в кожной клинике МОНИКИ по поводу T-клеточной лимфомой кожи (11 человек) и доброкачественных воспалительных дерматозов (псориаз и нейродермит - 10 человек). В результате проведенного анализа выявили наиболее значимые показатели структуры интерфазного хроматина лимфоцитов периферической крови, рассчитали производный параметр DF для выявления T-клеточной лимфомы кожи.
Пример 1. Больной Б,, 63 лет, N истории болезни - 7646, МОНИКИ.
Поступил в клинику с жалобами на покраснение кожи, зуд, жжение, озноб.
Клинический диагноз: T-клеточная лимфома кожи, эритродермическая стадия.
Во время лечения в клинике предлагаемым в данной заявке способом был исследован хроматин интерфазных ядер лимфоцитов периферической крови больного, при этом использовалась стандартная методика приготовления мазка цельной крови, взятой из пальца руки. Полученный мазок высушивали на воздухе, фиксировали смесью Никифорова. Далее для устранения влияния рибонуклеиновой кислоты на результаты сканирования проводили рибонуклеазную обработку. Рибонуклеазу разводили в осмолярном растворе сахарозы в концентрации 2000 E на 100 мл раствора. Препараты обрабатывали в этом растворе в течение 1 ч при 37oC, после чего их промывали в 3-х сменах дистиллированной воды. Далее проводили окрашивание препаратов в растворе ГХК. Раствор ГХК готовится по стандартной методике [9]. Окрашивание проводится в течение 3 ч в термостате при 37oC, после чего препараты промывали 5 мин отстоявшейся водопроводной водой.
Окрашенные препараты заключали в канадский бальзам и после высушивания исследовали на системе анализа изображений.
Показатели структуры хроматина для обследованного больного:
OD4 - 3,02207; FORM_P - 0,82145; IOD2 - 39080,8; AREA - 7938,7.
OD4 - 3,02207; FORM_P - 0,82145; IOD2 - 39080,8; AREA - 7938,7.
Далее для комплексной оценки был рассчитан показатель DF = -0,9710674,
Значение показателя DF < 0; следовательно, у больного выявлены изменения структуры интерфазного хроматина соответствующие T-клеточной лимфоме кожи, что полностью совпадает с данными клинических и лабораторных исследований.
Значение показателя DF < 0; следовательно, у больного выявлены изменения структуры интерфазного хроматина соответствующие T-клеточной лимфоме кожи, что полностью совпадает с данными клинических и лабораторных исследований.
Пример 2. Больной В., 40 лет, N истории болезни 14762, МОНИКИ.
Поступил в кожную клинику МОНИКИ с жалобами на покраснение кожи, больше на нижних конечностях, зуд.
Клинический диагноз: Нейродермит.
С помощью предложенного способа исследуется структура хроматина лимфоцитов периферической крови больного (см. пример 1.).
Показатели структуры хроматина для обследованного больного:
OD4 - 4,48286; FORM_P - 0,938331; IOD2 - 74411,4; AREA - 13686.
OD4 - 4,48286; FORM_P - 0,938331; IOD2 - 74411,4; AREA - 13686.
Далее для комплексной оценки был рассчитан показатель DF = 1,6802235.
Значение показателя DF > 0, следовательно, выявленные изменения структуры хроматина соответствуют изменениям при доброкачественных воспалительных дерматозах.
Пример 3. Больной Г., 56 лет, N истории болезни - 1497; МОНИКИ.
Поступил в клинику с жалобами на покраснение кожи, озноб.
Клинический диагноз: псориаз.
С помощью предложенного способа исследуется структура хроматина лимфоцитов периферической крови больного (см. пример 1.).
Показатели структуры хроматина для обследованного больного:
OD4 - 3,26156; FORM_P - 0,933456; IOD2 - 79238,4; AREA - 14092,6.
OD4 - 3,26156; FORM_P - 0,933456; IOD2 - 79238,4; AREA - 14092,6.
Далее для комплексной оценки был рассчитан показатель DF = 1,9901397.
Значение показателя DF > 0, следовательно, выявленные изменения структуры хроматина соответствуют изменениям при доброкачественных воспалительных дерматозах.
Пример 4. Больная Д., 48 лет, N истории болезни - 16105, МОНИКИ.
Поступила в клинику с жалобами на изменение цвета кожи (покраснение), зуд, озноб, жжение, покалывание. Больна с детства, отмечает сезонные рецидивы каждую весну и осень, последние 3 года без ремиссии. Ранее лечилась антигистаминными препаратами по поводу атонического дерматита.
Клинический диагноз на момент поступления: T-клеточная лимфома кожи.
Клинические данные при поступлении: кожные покровы застойно-синюшного цвета, 100% эритродермия, выраженная инфильтрация, увеличены все группы периферических лимфоузлов, особенно бедренные и паховые (до 4 - 5 см).
С помощью предложенного способа исследуется структура хроматина лимфоцитов периферической крови больной (см. пример 1.).
Показатели структуры хроматина для обследованной больной:
OD4 - 4,78724; FORM_P - 0,944441; IOD2 - 66646,9; AREA - 11071,9.
OD4 - 4,78724; FORM_P - 0,944441; IOD2 - 66646,9; AREA - 11071,9.
Далее для комплексной оценки был рассчитан показатель DF = 1,206237183.
Значение показателя DF > 0, следовательно, выявленные изменения структуры хроматина соответствуют изменениям при доброкачественных воспалительных дерматозах.
При обследовании в клинике в мазках периферической крови у больной обнаружены единичные клетки Сезари (бласты, подобные крупноклеточному варианту), но по заключению биопсийного исследования - нейродермит (типичный).
На фоне лечения тавегилом, активированным углем, гемодезом, клеритином у больной отмечено улучшение самочувствия, уменьшение эритемы и инфильтрации кожи.
Таким образом, проведенные клинические обследования больной и эффективность терапии подтвердили наличие у больной доброкачественного воспалительного дерматоза (нейродермита).
Пример 5. Больная П., 80 лет, N истории болезни - 9743, МОНИКИ.
Поступила в клинику с жалобами на зуд, покраснение кожи, озноб, покалывание, жжение. Больна с 1970 года, ранее лечилась преднизолоном по поводу аллергического дерматита.
За 4 мес до настоящего поступления в клинику больная обследовалась в кожной клинике МОНИКИ с предполагаемым диагнозом: эксфолиативный дерматит Вильсона-Брока.
Результат гистологического исследования кожного биоптата: изменения более соответствуют генерализованной эритродерме.
Клинический диагноз на момент поступления: аллергический дерматит.
Клинические данные при поступлении: кожные покровы ярко красного цвета; выраженная инфильтрация, 100% эритродермия, поредение волос, выраженный гиперкератоз на ладонях и подошвах, умеренно увеличены подмышечные, паховые и бедренные лимфоузлы.
С помощью предложенного способа исследуется структура хроматина лимфоцитов периферической крови больной (см. пример 1.).
Показатели структуры хроматина для обследованной больной:
OD4 - 4,10798; FORM_P - 0,820714; IOD2 - 42548,7; AREA - 8391,45.
OD4 - 4,10798; FORM_P - 0,820714; IOD2 - 42548,7; AREA - 8391,45.
Далее для комплексной оценки был рассчитан показатель DF = -0,9856234.
Значение показателя DF < 0; следовательно, выявленные изменения структуры хроматина соответствуют изменениям при T-клеточной лимфоме кожи.
При обследовании в клинике выявлены изменения в периферической крови (лимфоцитов - 72%, клетки Сезари - 15%); при биопсии подтвержден диагноз T-клеточной лимфомы: cиндром Сезари, диффузный инфильтрат с полиморфизмом, микроабсцессы, в инфильтрате крупные многоядерные клетки.
Совпадение результатов проведенных тестов с помощью предложенного способа и клинической картины заболевания говорит о специфичности способа диагностики T-клеточных лимфом кожи (эритродермических вариантов).
Таким образом, по сравнению с прототипом предложенный способ ранней диагностики и дифференциальной диагностики T-клеточных лимфом кожи позволяет:
а) выявлять злокачественные формы лимфоцитов на более ранних стадиях, когда еще не обнаруживаются клетки Сезари и устанавливать диагноз до развития выраженных клинических проявлений;
б) проводить дифференциальную диагностику эритродермических состояний при T-клеточных лимфомах кожи и доброкачественных воспалительных дерматозах;
в) снизить травматизацию больного с заболеванием кожи, так как кровь для исследования берется не из вены, а из пальца.
а) выявлять злокачественные формы лимфоцитов на более ранних стадиях, когда еще не обнаруживаются клетки Сезари и устанавливать диагноз до развития выраженных клинических проявлений;
б) проводить дифференциальную диагностику эритродермических состояний при T-клеточных лимфомах кожи и доброкачественных воспалительных дерматозах;
в) снизить травматизацию больного с заболеванием кожи, так как кровь для исследования берется не из вены, а из пальца.
Литература
1. Orbaneja J.G., Vus E.S, Diar-Flores L., Huarte P.S., Cytology of the micosis fungoides and Sezary syndrome. - Brit. J. Derm. 1972, 87, 2, 96 - 105.
1. Orbaneja J.G., Vus E.S, Diar-Flores L., Huarte P.S., Cytology of the micosis fungoides and Sezary syndrome. - Brit. J. Derm. 1972, 87, 2, 96 - 105.
2. Персина И. С. Клиническая морфология злокачественных лимфом кожи. - Автореф. дисс, докт. мед. наук.: - М. 1989.
3. Polliak A., Dialdettim, Reyes F. Surface Features of Sezary cells: a scanning Electron microscopy Study of 5 cases. - Scand, J, Haemat, 1977, 18, 3, 207 - 213.
4. Lennert К. S., Raiserbing E. Cytological and functional criteria for the classication of malignant lymphomata. - Br. J. Cancer 1975, 31, Suppl II, 29 - 49.
5. Vloten W. A. , Schaberg A., van der Ploegm. Cytometric studies on mycosis fungoides and other cutaneous retieulosis. - Bull. cancer 1977, 64,2, 249 - 258.
6. Dewald G., Spurbeck J. L., Viteic M. A. Chromosomes in a patient with Sezary Syndrome. - Mago clin. Proc. 1974, 49, 8, 553 - 557.
7. Willemze R., Van. Vloten W.A., Hermans J., Damstug M.J.M., Meifer C. J. L.M. Diagnostic criteria in Sezary syndrome: a multiparameter lymphosytes in 32 patients with erytroderma. - J. Invest. Derm. 1989, 81, 5, 392 - 397.
8. Hastrup N. , Pallesen G., Ralfkiaer E. Use of monoclonal antibodies for the diagnosis of T-cell malignansies. Application and limitations. Leukemia / lymphoma 1990, 2, 35 - 45.
9. Пирс Э. Гистохимия. - М., 1962, с. 190 - 192, 746.
10. Афифи А. , Эйзен С. Статистический анализ: подход с использованием ЭВМ. Пер. с англ. - М.: Мир, 1982. - 488 с.
Claims (1)
- Способ диагностики Т-клеточных лимфом кожи (эритродермических вариантов) путем цитологического анализа, взятого у больного биологического материала, отличающийся тем, что в качестве биологического материала берут мазок крови, фиксируют, проводят рибонуклеазную обработку, окрашивают галлоцианин хромовыми квасцами, микроденситометрируют интерфазный хроматин лимфоцитов, на основании полученных параметров (OD4) оптическая плотность эухроматина, FORM_ P форм-фактор ядра; IOD2 интегральная оптическая плотность гетерохроматина; AREA площадь ядра), рассчитывают показатель DF -0,14379 • OD4 + 0,00003 • 1OD2 + 10,4952 • FORM_P + 0,001 • AREP 11,1241 и при отрицательном значении этого показателя диагностируют Т-клеточную лимфому кожи.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95107348A RU2104526C1 (ru) | 1995-05-05 | 1995-05-05 | Способ диагностики т-клеточных лимфом кожи |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU95107348A RU2104526C1 (ru) | 1995-05-05 | 1995-05-05 | Способ диагностики т-клеточных лимфом кожи |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU95107348A RU95107348A (ru) | 1996-12-20 |
| RU2104526C1 true RU2104526C1 (ru) | 1998-02-10 |
Family
ID=20167516
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU95107348A RU2104526C1 (ru) | 1995-05-05 | 1995-05-05 | Способ диагностики т-клеточных лимфом кожи |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2104526C1 (ru) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002050122A3 (en) * | 2000-12-18 | 2003-04-10 | Inst Nat Sante Rech Med | Means for the diagnosis and therapy of ctcl |
| EP1563093A1 (en) * | 2002-11-13 | 2005-08-17 | G6 Science Corp. | Method of identifying and assessing dna euchromatin for detecting disease |
| RU2286570C2 (ru) * | 2004-08-30 | 2006-10-27 | Николай Васильевич Кунгуров | Способ дифференциальной диагностики эритродермической формы т-клеточной злокачественной лимфомы кожи и других эритродермий |
| RU2466398C2 (ru) * | 2010-10-22 | 2012-11-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "УрНИИДВиИ" Минздравсоцразвития России) | Способ дифференциальной диагностики заболеваний кожи |
| RU2476879C1 (ru) * | 2012-03-05 | 2013-02-27 | Зарема Римовна Хисматуллина | Способ дифференциальной диагностики лимфопролиферативных заболеваний кожи по морфометрическому профилю базальных кератиноцитов |
-
1995
- 1995-05-05 RU RU95107348A patent/RU2104526C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Hastrup N.et al Use of monoclonal antibodies for the diagnosis of T - cell malignansies. Application and limitations. Leukemia/ lymphoma. - 1990, N 2, p. 35 - 45. * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002050122A3 (en) * | 2000-12-18 | 2003-04-10 | Inst Nat Sante Rech Med | Means for the diagnosis and therapy of ctcl |
| EP1563093A1 (en) * | 2002-11-13 | 2005-08-17 | G6 Science Corp. | Method of identifying and assessing dna euchromatin for detecting disease |
| RU2286570C2 (ru) * | 2004-08-30 | 2006-10-27 | Николай Васильевич Кунгуров | Способ дифференциальной диагностики эритродермической формы т-клеточной злокачественной лимфомы кожи и других эритродермий |
| RU2466398C2 (ru) * | 2010-10-22 | 2012-11-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунопатологии" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "УрНИИДВиИ" Минздравсоцразвития России) | Способ дифференциальной диагностики заболеваний кожи |
| RU2476879C1 (ru) * | 2012-03-05 | 2013-02-27 | Зарема Римовна Хисматуллина | Способ дифференциальной диагностики лимфопролиферативных заболеваний кожи по морфометрическому профилю базальных кератиноцитов |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU95107348A (ru) | 1996-12-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lenaerts et al. | Genomewide copy number alteration screening of circulating plasma DNA: potential for the detection of incipient tumors | |
| JP2015503348A (ja) | 前立腺癌の治療／予防処置の診断、予測及び評価のための材料及び方法 | |
| CN111004850A (zh) | circRNAs分子在制备肝癌诊断试剂盒中的应用及应用该分子的试剂盒 | |
| Pennacchia et al. | Morphological and molecular characteristics of nested melanoma of the elderly (evolved lentiginous melanoma) | |
| RU2104526C1 (ru) | Способ диагностики т-клеточных лимфом кожи | |
| CN114921546B (zh) | circHIPK2作为乳腺癌生物标志物的应用 | |
| RU2127429C1 (ru) | Способ диагностики гиперпластических процессов и рака эндометрия | |
| CN113046438B (zh) | 一种纳入分子分型和免疫评分的子宫内膜癌预后评价系统 | |
| CN116516008B (zh) | 胃粘膜肠上皮化生标志物jun及其应用 | |
| CN117269510A (zh) | 一种诊断乳腺癌的分子标志物及其试剂盒与应用 | |
| CN112229998B (zh) | 一种卵巢癌的预后诊断标志物Claudin22及其应用 | |
| CN110890128B (zh) | 一种用于检测皮肤肿瘤良恶性程度的分级模型及其应用 | |
| CN112961921A (zh) | 一种用于判断早期子宫内膜癌预后的制剂及复发风险模型 | |
| CN112229997A (zh) | 一种卵巢癌的预后诊断标志物Claudin23及其应用 | |
| CN112698033A (zh) | 一种血源性外泌体her2的检测方法及其应用 | |
| RU2137420C1 (ru) | Способ выявления "группы опухолевого риска" и скрининга ранних стадий опухолевых заболеваний | |
| CN112904006A (zh) | 一种乳腺癌预后预测分子标志物及其应用 | |
| RU2681533C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики грибовидного микоза | |
| CN117467771B (zh) | 一种与宫颈鳞状细胞癌的淋巴结转移、远端转移和生存预后相关的标志物及其应用 | |
| CN113416704B (zh) | 一种人肾血管平滑肌脂肪瘤原代细胞、子代细胞及其应用 | |
| RU2530557C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики злокачественной и доброкачественной патологии молочной железы | |
| CN111100930A (zh) | 一种用于检测胰腺肿瘤良恶性程度的分级模型及其应用 | |
| Kajabwangu et al. | Late stage at diagnosis of cervical cancer and its correlates at a large regional referral hospital in Uganda: a cross-sectional study | |
| RU2743223C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики глиальных опухолей головного мозга | |
| Takai et al. | Application of fluorescence in situ hybridization in distinguishing acral melanoma in situ from acral junctional melanocytic nevus on the volar skin in Japanese patients |