RU2084229C1 - Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных заболеваний - Google Patents
Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных заболеваний Download PDFInfo
- Publication number
- RU2084229C1 RU2084229C1 RU94025646A RU94025646A RU2084229C1 RU 2084229 C1 RU2084229 C1 RU 2084229C1 RU 94025646 A RU94025646 A RU 94025646A RU 94025646 A RU94025646 A RU 94025646A RU 2084229 C1 RU2084229 C1 RU 2084229C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fraction
- volume
- bacterial
- fold
- immunoglobulin preparation
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для предупреждения и лечения ряда заболеваний бактериальной и вирусной природы. Цель изобретения - повышение чистоты препарата, его специфической активности и выхода. Поставленная цель достигается тем, что экстракцию спиртового осадка Б (III фракции Кона) проводят в десятикратном объеме дистиллированной воды, а для удаления фракции липопротеидов наряду с хлороформом используют хлорид натрия в конечной концентрации 0,9% по объему. Осаждение из экстракта иммуноглобулиновой фракции проводят в присутствии 12% полиэтиленгликоля. При этом повышается чистота препарата по сравнению с прототипом (в заявляемом способе содержание балластных примесей в препарате составляет 0-1% от общего белка, в прототипе - 3-5%). Специфическая активность повышается в 2-3 раза, а выход препарата - в 1,5 раза. Себестоимость конечного продукта снижается по сравнению с прототипом на 25%. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для предупреждения и лечения ряда заболеваний бактериальной и вирусной природы.
Препараты иммуноглобулина человека, применяемые в настоящее время, получили высокую оценку в практике борьбы с рядом заболеваний. Однако препараты иммуноглобулина, получаемые по методу Кона, содержат, в основном, IgG-иммуноглобулины, иммуноглобулины других классов удаляются с балластными фракциями в процессе производства. Как известно, антибактериальные антитела относятся, в основном, к фракциям IgM и удаляются из препаратов в ходе фракционирования.
Применение обычных препаратов гамма-глобулина недостаточно эффективно при ряде инфекций у новорожденных и детей первых месяцев жизни, кровь которых отличается низким содержанием иммуноглобулинов классов М и А.
В настоящее время в мире выпускаются и применяются в клинике препараты, обогащенные IgM и IgA, для профилактики и лечения тяжелых бактериальных инфекций, сепсиса, иммунодефицитных заболеваний.
Известен способ получения комплексного иммуноглобулинового препарата /КИП/ из спиртового осадка Б /III фракции Кона/, являющегося балластной фракцией при спиртовом фракционировании сыворотки /патент СССР N 836831, 1991/.
Наиболее близким к заявляемому является способ получения иммуноглобулинового препарата /Экспериментально-производственный регламент N 338-91. Иммуноглобулин человека сухой для энтерального применения. 1991/, который предусматривает солевую экстракцию осадка Б /III фракции Кона/ в 0,9%-ном растворе хлорида натрия /в десятикратном объеме/, обработку экстракта с целью удаления липопротеидов и последующее осаждение фракции иммуноглобулинов полиэтиленгликолем /конечная концентрация 12% /. Препарат, полученный по этому способу, содержит 50% IgG и по 25% IgM и IgA; в нем обнаружены повышенные титры антител против ряда энтеробактерий, вирусов. Комитет МИБП 27 декабря 1990 г. /протокол N 14/ рекомендовал МЗ РФ внедрение КИП для орального применения в практику здравоохранения для лечения острых кишечных инфекций у детей.
Недостатком способа является то, что он не позволяет в достаточной мере очистить конечный продукт от иммунологически неактивных примесей, снижающих специфическую активность препарата и вызывающих аллергизацию организма. Содержание белковых балластных фракций составляет 3-5% Кроме того, способ предусматривает применение дорогостоящего импортного реагента-декстренсульфата /схема 1/.
Целью настоящего изобретения является увеличение чистоты препарата, повышение его специфической активности и выхода.
Поставленная цель достигается тем, что экстракцию спиртового осадка Б /III фракции Кона/ проводят в десятикратном объеме дистиллированной воды, а для удаления фракции липопротеидов наряду с хлороформом используют хлорид натрия в конечной концентрации 0,9% по объему. При этом повышается чистота препарата по сравнению с прототипом. Специфическая активность повышается в 2-3 раза. Себестоимость конечного продукта снижается на 25% благодаря исключению из технологического цикла импортного реагента декстрансульфата /схема 2/.
Пример. К 1 кг осадка Б /III фракция Кона/ добавляют 10 л дистиллированной воды при постоянном перемешивании. После растворения объем экстракта 11 л, содержание белка 2,2%
К экстракту осадка Б добавляют 1 л хлороформа /10% по объему/. Смесь медленно перемешивают в течение 2 часов, затем добавляют 99 г хлорида натрия /до конечной концентрации 0,9%/, перемешивают в течение 10 минут и центрифугируют до получения прозрачного центрифугата. Осадок удаляют. Объем центрифугата составляет 8 л, содержание белка 1,2%
К 8 л экстракта для выделения фракции иммуноглобулинов добавляют 50%-ный раствор полиэтиленгликоля /м. м. 6 тыс./ до конечной концентрации 12% при постоянном перемешивании.
К экстракту осадка Б добавляют 1 л хлороформа /10% по объему/. Смесь медленно перемешивают в течение 2 часов, затем добавляют 99 г хлорида натрия /до конечной концентрации 0,9%/, перемешивают в течение 10 минут и центрифугируют до получения прозрачного центрифугата. Осадок удаляют. Объем центрифугата составляет 8 л, содержание белка 1,2%
К 8 л экстракта для выделения фракции иммуноглобулинов добавляют 50%-ный раствор полиэтиленгликоля /м. м. 6 тыс./ до конечной концентрации 12% при постоянном перемешивании.
Осадок иммуноглобулинов отделяют путем декантации и центрифугирования, промывают дистиллированной водой, подкисленной до pH 5, растворяют в охлажденном 0,9%-ном растворе хлорида натрия до содержания белка 5-8% pH 7,2. После растворения осадка препарат центрифугируют для удаления нерастворимых примесей. К раствору после удаления добавляют глюкозу до конечной концентрации 2% в качестве стабилизатора.
Объем полученного препарата составляет 800 мл. Специфическая активность в препарате увеличивается по сравнению с прототипом в 2-3 раза /табл. 1/.
Содержание иммунологически неактивных фракций, определяемых методом бумажного электрофореза, составляет 0-1% от общего содержания белка /в прототипе -3-5%/, т.е. повышается чистота препарата.
По сравнению с прототипом в 1,5 раза увеличивается выход конечного продукта. Если по способу, описанному в прототипе, выход составил 4 дозы из 1 л донорской сыворотки, то по заявляемому способу 6 доз.
Таким образом, высокоочищенный от иммунологически неактивных примесей комплексный иммуноглобулиновый препарат с повышенной специфической активностью получен экономически эффективным способом. При этом выход препарата увеличивается в 1,5 раза, а себестоимость его снижается по сравнению с прототипом на 25%
Осадок Б /III фракция Кона/
Растворение в дистиллированной воде; pH 5,5; 1 кг осадка Б + 10 л дистиллированной воды. Центрифугат: хлороформ 10% по объему; перемешивание - 2 часа, затем хлорид натрия 0,9% в смеси; осадок удаляют. Центрифугат: полиэтиленгликоль м.м. 6 тыс. конечная концентрация 12% осадок удаляют.
Осадок Б /III фракция Кона/
Растворение в дистиллированной воде; pH 5,5; 1 кг осадка Б + 10 л дистиллированной воды. Центрифугат: хлороформ 10% по объему; перемешивание - 2 часа, затем хлорид натрия 0,9% в смеси; осадок удаляют. Центрифугат: полиэтиленгликоль м.м. 6 тыс. конечная концентрация 12% осадок удаляют.
Осадок
Растворение в 0,15 М NaCl; pH 7,2; глюкоза 2% осветляющая и стерилизующая фильтрация; лиофилизация; центрифугат удаляют.
Растворение в 0,15 М NaCl; pH 7,2; глюкоза 2% осветляющая и стерилизующая фильтрация; лиофилизация; центрифугат удаляют.
КИП
IgG 50% IgM 25% IgA 25%
Схема 1. Получение комплексного иммуноглобулинового препарата /КИП/ - заявляемый способ
Осадок (III фракция Кона)
Растворение в 0,15 М NaCl; pH 5,5; 1 кг осадка Б + 10 л 0,9%-ного раствора натрия. Центрифугат: хлороформ 10% по объему; перемешивание 2 часа; декстрансульфат 0,1% в смеси; осадок удаляют. Центрифугат: полиэтиленгликоль м.м. 6 тыс. конечная концентрация 12% осадок удаляют.
IgG 50% IgM 25% IgA 25%
Схема 1. Получение комплексного иммуноглобулинового препарата /КИП/ - заявляемый способ
Осадок (III фракция Кона)
Растворение в 0,15 М NaCl; pH 5,5; 1 кг осадка Б + 10 л 0,9%-ного раствора натрия. Центрифугат: хлороформ 10% по объему; перемешивание 2 часа; декстрансульфат 0,1% в смеси; осадок удаляют. Центрифугат: полиэтиленгликоль м.м. 6 тыс. конечная концентрация 12% осадок удаляют.
Осадок
Растворение в 0,15 М NaCl; pH 7,2; глюкоза 2% осветляющая и стерилизующая фильтрация; лиофилизация; центрифугат удаляютю
КИП
IgG 50% IgM 25% IgA 25%
Схема 2. Получение комплексного иммуноглобулинового препарата /КИП/ - прототип.
Растворение в 0,15 М NaCl; pH 7,2; глюкоза 2% осветляющая и стерилизующая фильтрация; лиофилизация; центрифугат удаляютю
КИП
IgG 50% IgM 25% IgA 25%
Схема 2. Получение комплексного иммуноглобулинового препарата /КИП/ - прототип.
Claims (1)
- Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных заболеваний путем экстракции спиртового осадка Б (III фракции Кона), очистки его от липопротеидов с последующим выделением целевого продукта осаждением в присутствии 12% полиэтиленгликоля, отличающийся тем, что экстракцию спиртового осадка Б (III фракции Кона) проводят в десятикратном объеме дистиллированной воды, а для удаления фракции липопротеидов наряду с хлороформом используют хлорид натрия в конечной концентрации 0,9 об.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU94025646A RU2084229C1 (ru) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных заболеваний |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU94025646A RU2084229C1 (ru) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных заболеваний |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU94025646A RU94025646A (ru) | 1997-03-10 |
RU2084229C1 true RU2084229C1 (ru) | 1997-07-20 |
Family
ID=20158248
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU94025646A RU2084229C1 (ru) | 1994-07-08 | 1994-07-08 | Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных заболеваний |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2084229C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2453336C1 (ru) * | 2010-12-29 | 2012-06-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Средство, содержащее иммуноглобулины и обладающее антибактериальной и антивирусной активностью |
RU2457861C2 (ru) * | 2008-08-05 | 2012-08-10 | Виктор Владимирович Чалов | Композиция, обладающая противовирусным и антимикробным действием, содержащая консорциум иммуноглобулинов |
-
1994
- 1994-07-08 RU RU94025646A patent/RU2084229C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Экспериментально-производственный регламент N 338-91. Иммуноглобулин человека, сухой для энтерального применения. - 1991. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2457861C2 (ru) * | 2008-08-05 | 2012-08-10 | Виктор Владимирович Чалов | Композиция, обладающая противовирусным и антимикробным действием, содержащая консорциум иммуноглобулинов |
RU2453336C1 (ru) * | 2010-12-29 | 2012-06-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Средство, содержащее иммуноглобулины и обладающее антибактериальной и антивирусной активностью |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU94025646A (ru) | 1997-03-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4216205A (en) | Process of preparing a serum protein composition for intravenous application | |
JP3195631B2 (ja) | 特異的鶏卵抗体の製造方法 | |
US3984539A (en) | Bovine immunoglobulin isolation process | |
JPS6147187A (ja) | 狂犬病ウイルスの精製方法 | |
RU2084229C1 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных заболеваний | |
WO2008086621A1 (en) | A method for commercial isolation of egg yolk igy, its product, and uses of the product | |
KR20150081789A (ko) | 난백 단백질 연속분리공정 방법 | |
US20110015374A1 (en) | Method for Commercial Isolation of Egg Yolk IgY, Its Product, and Uses of the Product | |
Hirst | THE NATURE OF THE VIRUS RECEPTORS OF RED CELLS: III. Partial Purification of the Virus Agglutination Inhibitor in Human Plasma | |
Dewey et al. | Studies on suramin (Antrypol: Bayer 205): 5. The combination of the drug with the plasma and other proteins | |
RU2060034C1 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата | |
RU2073525C1 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата | |
JP2000503644A (ja) | IgGおよびIgAを単離する方法 | |
US4169139A (en) | Glyco/proteinaceous materials derivable from beef liver and other tissues useful for the treatment of toxic and allergic conditions | |
RU2261112C1 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата | |
RU2051054C1 (ru) | Способ получения препарата противогерпетического иммуноглобулина человека | |
RU2189833C2 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата | |
RU2222337C1 (ru) | Способ получения иммуностимулятора | |
RU2089204C1 (ru) | Способ получения пептидов, восстанавливающих функцию предстательной железы | |
RU2033796C1 (ru) | Пептидсодержащая фракция из селезенки млекопитающих, обладающая иммуностимулирующей активностью и способ ее получения | |
RU2158137C1 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата | |
SU623556A1 (ru) | Способ получени гиалуронидазы | |
RU2050858C1 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата, содержащего иммуноглобулины классов g, m и a | |
RU2089217C1 (ru) | Способ получения гетерологических иммуноглобулинов против вирусных инфекций марбург и эбола | |
RU2255766C2 (ru) | Способ получения иммуноглобулинового препарата для профилактики и терапии бактериальных и вирусных инфекций, иммуноглобулиновый препарат для профилактики и терапии бактериальных и вирусных инфекций (варианты) и суппозитории на основе иммуноглобулинового препарата |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
QZ4A | Changes in the licence of a patent |
Effective date: 19990728 |
|
QC41 | Official registration of the termination of the licence agreement or other agreements on the disposal of an exclusive right |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 19990728 Effective date: 20120409 |