RU2070054C1

RU2070054C1 - Agent for burn disease treatment

Info

Publication number: RU2070054C1
Application number: RU93028207A
Authority: RU
Inventors: Марина Геннадьевна Маклецова; Виктор Георгиевич Харин; Евгений Григорьевич Кураев; Инесса Ивановна Михалева; Игорь Аркадьевич Прудченко
Original assignee: Марина Геннадьевна Маклецова; Виктор Георгиевич Харин; Евгений Григорьевич Кураев; Инесса Ивановна Михалева; Игорь Аркадьевич Прудченко
Priority date: 1993-05-21
Filing date: 1993-05-21
Publication date: 1996-12-10

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: proposed agent is delta-sleep-inducing peptide. Agent activates protein biosynthesis and improves wound healing. EFFECT: enhanced effectiveness of agent. 5 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к камбустиологии, и может быть использовано для лечения ожогов. The invention relates to medicine, namely to Cambustiology, and can be used to treat burns.

Известны средства для лечения ожогов, основанные на сочетании инфузионной терапии (коррекция гиповолемии) и многокомпонентного медикаментозного лечения, включающего введение дезагрегантов, ингибиторов протеолитических ферментов, салицилатов, антикоагулянтов, антиоксидантов. Known means for the treatment of burns, based on a combination of infusion therapy (correction of hypovolemia) and multicomponent drug treatment, including the introduction of disaggregants, proteolytic enzyme inhibitors, salicylates, anticoagulants, antioxidants.

Недостатками средств является то, что проводимая терапия направлена на ликвидацию изменений в метаболизме, носящих вторичный характер. Несмотря на патогенетическое обоснование применения известных средств коррекции нарушения метаболизма, по сути своей последние являются комплексом симптоматических средств. The disadvantages of the means is that the therapy is aimed at eliminating changes in metabolism that are secondary in nature. Despite the pathogenetic justification for the use of known means of correcting metabolic disorders, in essence the latter are a complex of symptomatic agents.

Известны средства для лечения ожогов, обладающие антиоксидантными свойствами: производные ионола (1), водорастворимые мази, левосин и др. производные облепихового масла. Known means for treating burns with antioxidant properties: ionol derivatives (1), water-soluble ointments, levosin and other derivatives of sea buckthorn oil.

Применение антиоксидантов для лечения ожоговой болезни является важным и ведущим фактором в регуляции процессов репаративной регенерации в ожоговой ране. Однако вышеперечисленные препараты, применяемые местно, не влияют на систему антиоксидантной защиты всего организма в целом. К другим недостаткам данных средств лечения ожогов можно отнести тот факт, что они не влияют на другие стороны метаболизма, нарушение которых характерно для ожоговой болезни и носящих чисто стресс-индуцированный характер (например, язва желудка и детей после ожога). The use of antioxidants for the treatment of burn disease is an important and leading factor in the regulation of reparative regeneration in a burn wound. However, the above drugs used topically do not affect the antioxidant defense system of the whole organism. Other disadvantages of these burn treatment products include the fact that they do not affect other aspects of metabolism, the violation of which is characteristic of a burn disease and is purely stress-induced (for example, stomach ulcer and children after a burn).

Известно средство, которое является аналогом пептидов энкефалинового ряда даларгин, обладающее стресспротекторным действием. A tool is known that is an analogue of the peptides of the enkephalin series dalargin, which has a stress-protective effect.

Однако оно не обладает антиоксидантными свойствами, а также не влияет на биосинтез белка. However, it does not have antioxidant properties, and also does not affect protein biosynthesis.

Целью изобретения является противоожоговое средство, способное положительно модулировать нарушения метаболизма при ожоговой болезни, что проявляется в его стресспротекторных, антиоксидантных а адаптогенных свойствах, а также в способности активировать биосинтез белка и улучшать течение заживления ожоговой раны. The aim of the invention is an anti-burn agent that can positively modulate metabolic disorders in burn disease, which is manifested in its stress-protective, antioxidant and adaptogenic properties, as well as in the ability to activate protein biosynthesis and improve the healing of burn wounds.

Цель достигается использованием химического соединения дельта-сон индуцирующего пептида (ДСИП), имеющего следующую последовательность аминокислот: Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu, где Тrp триптофан, Ala - аланин, Gly глицин, Asp аспарагиновая кислота, Ser серин, Glu - глутаминовая кислота (2). The goal is achieved using the chemical compound delta-sleep inducing peptide (DSIP) having the following amino acid sequence: Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu, where Trp tryptophan, Ala is alanine, Gly glycine, Asp aspartic acid, Ser serine, Glu - glutamic acid (2).

ДСИП впервые был выделен и описан как фактор гуморальной регуляции цикла бодрствование-сон. В дальнейших исследованиях был показан адаптогенный эффект ДСИП при холодовом воздействии (6), стресспротекторное действие пептида при психоэмоциональном и гиподинамическом стрессах, а также при действии гипоксии и гипероксии. ДСИП нашел практическое применение для лечения алкоголизма, а именно для облегчения алкогольной абстиненции. DSIP was first isolated and described as a factor in the humoral regulation of the wake-sleep cycle. Further studies have shown the adaptogenic effect of DSIP upon cold exposure (6), the stress-protective effect of the peptide under psychoemotional and hypodynamic stresses, as well as under the action of hypoxia and hyperoxia. DSIP has found practical application for the treatment of alcoholism, namely to alleviate alcohol withdrawal.

В предлагаемом случае используются его ранее неизвестные действия при ожогах: стpесспротекторное, антиоксидантное и адаптогенное, а также неизвестные ранее свойства ДСИП активировать биосинтез белка и улучшить заживление раны. In the proposed case, its previously unknown actions for burns are used: stress-protective, antioxidant and adaptogenic, as well as previously unknown properties of DSIP to activate protein biosynthesis and improve wound healing.

Способ получения ДСИП описан ранее и осуществлялся классическим методом пептидного синтеза. The method of obtaining DSIP described earlier and was carried out by the classical method of peptide synthesis.

ДСИП опробован в опытах на 550 белых беспородистых крысах-самцах массой тела 150 200 г. Термический ожог кожи получали следующим образом: под эфирным наркозом на предварительно эппилированные участки кожи спины наносили ожог паром, площадью повреждения 400 мм² (температура 100^oC, 10 с). При соблюдении этих условий у большинства подопытных животных ожог кожи соответствовал 3 А 3 Б степени клинической классификации ожогов. Для сравнения были взяты два биологически активных вещества ДСИП и даларгии. Все испытываемые вещества вводили внутрибрюшинно. Курс лечения подопытных животных даларгином начинали через 1 ч после ожога и продолжали каждый день в течение 14 дней. Каждодневно вводили дозу даларгина pавную 0,5 мг/кг массы животного. ДСИП в дозе 120 мкг/кг массы животного вводили однократно через 1 ч после нанесения ожоговой травмы. В качестве контроля использовали животных, содержащихся в тех же условиях вивария, у которых изучали "естественное" заживление ран. Наблюдения процессов заживления экспериментальной раны проводили на 1, 3, 5, 7, 14, 21 и 50 сутки и в более поздние сроки, т. е. до полного заживления ран.DSIP was tested in experiments on 550 white mongrel male rats weighing 150,200 g. A thermal skin burn was obtained as follows: under ether anesthesia, steam was burned on previously epilated back skin areas with a damage area of 400 mm ² (temperature 100 ^o C, 10 s ) Under these conditions, in most experimental animals, a skin burn corresponded to 3 A 3 B degree of clinical classification of burns. For comparison, two biologically active substances DSIP and dalargia were taken. All test substances were administered intraperitoneally. The treatment of experimental animals with dalargin was started 1 hour after the burn and continued every day for 14 days. A daily dose of dalargin equal to 0.5 mg / kg of animal weight was administered. DSIP at a dose of 120 μg / kg of animal weight was administered once 1 hour after the application of a burn injury. As a control, we used animals kept in the same vivarium conditions, from which we studied the “natural” healing of wounds. Observations of the healing processes of the experimental wound were carried out on days 1, 3, 5, 7, 14, 21, and 50 and at a later date, i.e., until complete healing of the wounds.

В качестве показателей, на основании которых оценивали влияния введения ДСИП на состояние животных при ожоге, были взяты следующие параметры:
степень заживления ожоговой раны, показателем которой являетcя размер раневой поверхности кожи в области ожога;
cмертность;
антиоксидантное действие, показателями которого являются суммарная пероксидазная активность и хемилюминесценция сыворотки крови;
адаптогенное и стресспротекторное действие, показателями которого выбран вес селезенки;
регуляция биосинтеза белка, показателями которого являются содержание полиаминов спермина и спермида.The following parameters were taken as indicators, on the basis of which the effects of DSIP administration on the condition of animals during a burn were evaluated:
the degree of healing of the burn wound, an indicator of which is the size of the wound surface of the skin in the burn area;
mortality;
antioxidant effect, the indicators of which are total peroxidase activity and serum chemiluminescence;
adaptogenic and stress-protective action, the indicators of which the spleen weight is selected;
regulation of protein biosynthesis, the indicators of which are the content of spermine and spermid polyamines.

Влияние ДСИП на заживление ожоговой раны. The effect of DSIP on the healing of a burn wound.

Как видно из табл. N 1, до момента отторжения струпа размеры раневой поверхности в сериях "ожог" и "ожог + ДСИП" не различались. Отторжение струпа в группе животных, которые однократно получали после ожоговой травмы инъекцию ДСИП, наступало раньше, чем в контрольной группе. В сериях опытов с временными интервалами после ожоговой травмы 14 суток, 21 сутки и 30 суток отчетливо видно влияние ДСИП на процесс заживления раны. As can be seen from the table. N 1, until the scab was rejected, the size of the wound surface in the “burn” and “burn + DSIP” series did not differ. Scab rejection in the group of animals that received an injection of DSIP once after a burn injury occurred earlier than in the control group. In a series of experiments at time intervals after a burn injury of 14 days, 21 days and 30 days, the influence of DSIP on the wound healing process is clearly visible.

Таким образом, введение ДСИП после ожога обладает выраженным положительным влиянием на процессе репаративной регенерации, о чем свидетельствует размеры раневой поверхности. Thus, the introduction of DSIP after a burn has a pronounced positive effect on the process of reparative regeneration, as evidenced by the size of the wound surface.

Влияние введения ДСИП и даларгина на смертность животных при ожоге. The effect of the introduction of DSIP and dalargin on animal mortality during a burn.

Важно отметить, что в контрольной группе "ожог" в первые 7 дней смертность составляла 60% при введении ДСИП 20% В группе "ожог + даларгин" смертность составила 75%
Изучение антиоксидантной системы сыворотки крови крыс при ожоге и введении ДСИП и даларгина.It is important to note that in the control group "burn" in the first 7 days the mortality rate was 60% with the introduction of DSIP 20% In the group "burn + dalargin" mortality was 75%
The study of the antioxidant system of rat serum with a burn and the introduction of DSIP and dalargin.

Изучено влияние введения ДСИП и даларгина на антиоксидантную систему крови, показателями которой является суммарная пероксидазная активность (СПА) и хемилюминесценция (ХЛ) сыворотки крови крыс. Результаты проведенного исследования представлены в табл. N 2 и 3. Через 2 ч после ожоговой травмы наблюдалась резкая активация СПА и ХЛ, что составляло 141% и 328% по сравнению с контролем (интактное состояние животного). Введение ДСИП после ожоговой травмы нормализовало данные показатели. Введение даларгина не предотвращало резкой активации антиоксидатных систем крови и даже увеличивало процент активации ХЛ в сыворотке крови по сравнению с контролем. The effect of administration of DSIP and dalargin on the antioxidant blood system was studied, the indicators of which are total peroxidase activity (SPA) and chemiluminescence (CL) of rat blood serum. The results of the study are presented in table. N 2 and 3. 2 hours after the burn injury, a sharp activation of SPA and CL was observed, which was 141% and 328% compared with the control (intact state of the animal). The introduction of DSIP after a burn injury normalized these indicators. The administration of dalargin did not prevent a sharp activation of antioxidant blood systems and even increased the percentage of CL activation in blood serum compared to the control.

Через 1 сутки после ожога наступало истощение антиоксидантных систем крови, которые не устранялось через 3 суток. 1 day after the burn, depletion of antioxidant blood systems occurred, which was not eliminated after 3 days.

Таким образом ДСИП в отличие от даларгина обладает выраженными антиоксидантными свойствами. Thus, DSIP, in contrast to dalargin, has pronounced antioxidant properties.

Изучение стресспротекторного и адаптогенного действия ДСИП и даларгина при ожоге. The study of stress-protective and adaptogenic effects of DSIP and dalargin in case of a burn.

Изучено влияние введения ДСИП и даларгина на вес селезенки при ожоге. Как видно из табл. N 4, введение ДСИП после ожога практически нормализует данный показатель через 2 ч и через 1 и 3 суток, что свидетельствует о стресспротектоpном и адаптогенном действии ДСИП. Введение даларгина также нормализовало вес селезенки через 2 ч после ожога, однако через 3 суток данный показатель снижался, что свидетельствует о наличии стресспротекторного, но отсутствии адаптогенного эффекта. The effect of the administration of DSIP and dalargin on the weight of the spleen during a burn was studied. As can be seen from the table. N 4, the administration of DSIP after a burn practically normalizes this indicator after 2 hours and after 1 and 3 days, which indicates the stress-protective and adaptogenic effect of DSIP. The administration of dalargin also normalized the weight of the spleen 2 hours after the burn, but after 3 days this indicator decreased, which indicates the presence of stress-protective, but the absence of adaptogenic effect.

Изучение влияния ДСИП на биосинтез белка при ожоге. Studying the effect of DSIP on protein biosynthesis in burns.

Многочисленными исследования показана точная зависимость полиаминов (14). Изучено влияние введения ДСИП после ожога на содержание спермина и спермидина в коре больших полушарий головного мозга крыс (табл. N 5). На 5 7 сутки после ожога наблюдалось 50% снижение содержания спермидина по сравнению с контролем, а у животных, которым через 1 ч после ожога вводили ДСИП, отмечалось 6-ти кратное увеличение содержания спермидина на эти же сроки. Полученные данные свидетельствуют об интенсификации синтеза белка в мозге под действием ДСИП при ожоге. Numerous studies have shown the exact dependence of polyamines (14). The effect of administration of DSIP after a burn on the content of spermine and spermidine in the cortex of rat cerebral hemispheres was studied (Table N 5). On the 5th 7th day after the burn, a 50% decrease in spermidine content was observed in comparison with the control, and in animals that received DSIP 1 hour after the burn, a 6-fold increase in spermidine content was observed for the same periods. The data obtained indicate an intensification of protein synthesis in the brain under the influence of DSIP during a burn.

Содержание спермина в коре мозга в серии опытов "ожог" не изменялось ни в один из исследованных сроков. В серии опытов "ожог + ДСИП" на 5 7 сутки отмечалось 60% увеличение содержания спермина. Учитывая тот факт, что спермин ассоциирован с клеточными ядрами, в частности с хромосомами, что свидетельствует о его связи с метаболизмом ДНК, можно отметить модулирующее действие ДСИП на метаболизм ДНК. The spermine content in the cerebral cortex in a series of “burn” experiments did not change in any of the studied periods. In a series of experiments "burn + DSIP" on the 5th 7th day there was a 60% increase in spermine content. Considering the fact that spermine is associated with cell nuclei, in particular with chromosomes, which indicates its connection with DNA metabolism, we can note the modulating effect of DSIP on DNA metabolism.

Как видно из приведенных исследований, ДСИП положительно влияет на процесс заживления ожоговой раны и обладает антиоксидантным свойством в отличие от даларгина, а также ДСИП проявляет более выраженное стресспротекторное и адаптогенное действие по сравнению с даларгином при ожоге и способен положительно регулировать биосинтез белка через систему полиаминов при ожоговой болезни. As can be seen from the above studies, DSIP positively affects the healing process of the burn wound and has an antioxidant property in contrast to dalargin, and DSIP has a more pronounced stress-protective and adaptogenic effect compared to dalargin in case of burn and is able to positively regulate protein biosynthesis through the polyamine system in case of burn illnesses.

Таким образом, ДСИП может быть использован после клинических испытаний в медицинской практике для лечения ожоговой болезни. Thus, DSIP can be used after clinical trials in medical practice for the treatment of burn disease.

Claims

The use of delta-sleep inducing peptide (DSIP) having the following amino acid sequence:
Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Gly,
where Trp tryptophan, Ala alanine, Gly glycine, Asp aspartic acid, Ser serine, Glu glutamic acid,
as a treatment for burn disease.