RU2034924C1 - Штамм streptomyces ornatus - продуцент кератиназы - Google Patents
Штамм streptomyces ornatus - продуцент кератиназы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2034924C1 RU2034924C1 RU93011685/13A RU93011685A RU2034924C1 RU 2034924 C1 RU2034924 C1 RU 2034924C1 RU 93011685/13 A RU93011685/13 A RU 93011685/13A RU 93011685 A RU93011685 A RU 93011685A RU 2034924 C1 RU2034924 C1 RU 2034924C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- brown
- ornatus
- keratinase
- mycelium
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: в биотехнологии, пищеперерабатывающей промышленности для получения полноценных белковых лизатов из отхода переработки птицы. Сущность изобретения: штамм Streptomyces ornatus ВКПМ S-1220 на питательной среде, содержащей, г/л: картофельный крахмал 40; измельченное перо 20; NaCl 2,5; MnCl2 0,5; KH2PO4 1,5; CaCO3 4,0; водопроводная вода до 1 л за 78 ч культивирования проявляет кератиназную активность 7,3 ед/мл. Препарат, полученный из культуры актиномицета Str. ornatus, может быть использован для получения полноценных белковых лизатов с высокой усвояемостью для кормления цыплят-бройлеров в птицеперерабатывающей промышленности.
Description
Изобретение относится к ферментной отрасли микробиологической промышленности и может быть использовано в птицеперерабатывающей промышленности для получения полноценных белковых лизатов из отходов переработки птицы.
Из литературных источников известно, что среди микроорганизмов только патогенные грибы (дерматофиты), отдельные виды бактерий и актиномицетов обладают способностью вырабатывать ферменты, разрушающие кератин [1-4]
По мнению некоторых авторов, эта способность у бактерий и актиномицетов является следствием высокой гетерогенности протеолитических ферментных комплексов.
По мнению некоторых авторов, эта способность у бактерий и актиномицетов является следствием высокой гетерогенности протеолитических ферментных комплексов.
Невозможность целевого использования некоторых вышеупомянутых аналогов патогенность или условная патогенность, недостатком же других является длительность культивирования и низкая кератинрасщепляющая способность.
Наиболее близким решением-прототипом является использование в качестве продуцента кератинрасщепляющего фермента актиномицета Streptomyces fradiaspirales ВКМ-А-157 [5]
Способ культивирования продуцента по прототипу осуществляют следующим образом:
Культуру актиномицета Str.fradiaspirales ВКМ-А-157 выращивают на среде следующего состава, г/л: картофельный крахмал 70; соевая мука 20; KH2PO4 1,5; FeSO4 0,015; ZnSO4 0,01; CaCO3 4,0. Среда готовится на водопроводной воде, рН перед стерилизацией 7,0-7,2. Длительность культивирования 160 ч при температуре 28-30оС. Питательную среду засевали 5% (по объему) посевным материалом, которым служила 48 часовая культура, выращенная глубинно на среде, г/л: картофельный крахмал 20; соевая мука 20; (NH4)2SO4 3,0; CaCO3 3,0; KH2PO4 0,5; NaCl 2,5; водопроводная вода до 1 л, рН 7,4. Посевной материал засевали 5% (по объему) суспензией конидий, выращенной в термостате при 30оС 12 сут. Активность кератиназы в культуральной жидкости соответствовала 1-1,2 ед/мл. (Единицы по методу Yu et al. что соответствует 6,8-8 мг/л измеренной в диссертации).
Способ культивирования продуцента по прототипу осуществляют следующим образом:
Культуру актиномицета Str.fradiaspirales ВКМ-А-157 выращивают на среде следующего состава, г/л: картофельный крахмал 70; соевая мука 20; KH2PO4 1,5; FeSO4 0,015; ZnSO4 0,01; CaCO3 4,0. Среда готовится на водопроводной воде, рН перед стерилизацией 7,0-7,2. Длительность культивирования 160 ч при температуре 28-30оС. Питательную среду засевали 5% (по объему) посевным материалом, которым служила 48 часовая культура, выращенная глубинно на среде, г/л: картофельный крахмал 20; соевая мука 20; (NH4)2SO4 3,0; CaCO3 3,0; KH2PO4 0,5; NaCl 2,5; водопроводная вода до 1 л, рН 7,4. Посевной материал засевали 5% (по объему) суспензией конидий, выращенной в термостате при 30оС 12 сут. Активность кератиназы в культуральной жидкости соответствовала 1-1,2 ед/мл. (Единицы по методу Yu et al. что соответствует 6,8-8 мг/л измеренной в диссертации).
К недостаткам продуцента можно отнести низкую активность кератиназы, длительность культивирования.
Цель настоящего изобретения получение более активного по сравнению с прототипом штамма кератинрасщепляющего фермента. В СНГ до настоящего времени из-за отсутствия продуцента нет промышленного производства этого фермента.
Штамм был выделен из горных районов Армении. Штамм Streptomyces ornatus депонирован в музее ВКПМ под номером S-1220.
От известных продуцентов штамм Str.ornatus отличается высокой продуктивностью кератиназы, меньшими сроками культивирования и биосинтеза фермента. Штамм культивируют в глубинных условиях на жидкой питательной среде.
Температурный оптимум культивирования продуцента 30оС, рН 7,0-7,2; длительность культивирования составляет 72-90 ч. При этом кератиназная активность продуцируемого фермента составляет 7,2-7,8 ед/мл.
Активность кератиназы определяют по методу Yu et. al. (Yu, RY. Harmon, S.R. and Blank F. I Solation and purification of an extracellular keratinase of Prichophyton mentagraphytes. //J. of Bacterial. 1968. vol.96, No.4. p. 1435).
За единицу активности фермента принято изменение показания спектрофотометра при 280 нм при определенных условиях гидролиза (30оС, рН 7,0) на 0,1 единицу за единицу времени по сравнению с контролем.
Культурально-морфологические признаки культуры актиномицета Streptomyces ornatus
Культура Str.ornatus образует прямые спороносцы. По данным электронно-микроскопического излучения споры прямоугольные, с гладкой поверхностью. Воздушный мицелий на синтетических средах от светло-серого (А6), кремового (Б6) до палево-желтеющего (О4+Ж6). Субстратный мицелий от желтовато-бурого (Б5), золотисто-желтого (М7) до желтого (П5). На среде Гаузе 1 отдельные участки окрашены в красно-буроватый цвет (В1). Растворимый пигмент на основных диагностических средах от бурого (К1+Б5), песочно-бурого (З6+Б5) и до желто-бурого (Д4).
Культура Str.ornatus образует прямые спороносцы. По данным электронно-микроскопического излучения споры прямоугольные, с гладкой поверхностью. Воздушный мицелий на синтетических средах от светло-серого (А6), кремового (Б6) до палево-желтеющего (О4+Ж6). Субстратный мицелий от желтовато-бурого (Б5), золотисто-желтого (М7) до желтого (П5). На среде Гаузе 1 отдельные участки окрашены в красно-буроватый цвет (В1). Растворимый пигмент на основных диагностических средах от бурого (К1+Б5), песочно-бурого (З6+Б5) и до желто-бурого (Д4).
На органических средах воздушный мицелий от светло-серого (А6), желтовато-серого (В3), палевого (О4) до желтеющего (Ж6). Субстратный мицелий от песочно-буроватого (36+Б4), золотисто-желтого (М7) до желтовато-буроватого (Б4+Б5). Растворимый пигмент от песочного (З6) до буровато-желтого (Б5+Б4).
Меланоидный пигмент не образует.
Рост продуцента Str. ornatus на различных диагностических средах (температура роста 30оС в течение 7 сут).
Минеральный агар Гаузе 1. Рост хороший. Воздушный мицелий палево-желтеющий (О4+Ж6). Субстратный мицелий красновато-бурый до желто-бурого (В1+В5). Растворимый пигмент бурый (К1).
Среда Чапека. Рост хороший. Воздушный мицелий темно-кремовый до желтеющего (О6+Ж6). Субстратный мицелий от золотисто-желтого до буро-желтого (М7-Б4+Б5). Растворимый пигмент светло-буро-коричневатый (К7+Д1).
Ср. 1 с глюкозой. Рост хороший. Воздушный мицелий палево-желтеющий (О4+Ж6). Субстратный мицелий желтовато-буроватый до бурого (Б4+Б5). Растворимый пигмент нет или буроватый (К1).
Крахмальный агар. Рост обильный. Воздушный мицелий от серно-желтого до соломенно-желтого (И1+Л2). Субстратный мицелий от желтого до буро-желтого (П5-Б4+Б5). Растворимый пигмент песочный (З6).
Крахмально-аммиачная среда. Рост умеренный. Воздушный мицелий кремовый (Б6). Субстратный мицелий желтый (П5). Растворимый пигмент восково-желтый (З3).
Среда Линденбайна. Рост слабый. Воздушный мицелий палево-желтеющий (О4+Ж6). Субстратный мицелий золотисто-желтый до буро-желтого (М7-Б4+Б5). Растворимый пигмент желтовато-рыжевато-бурый (Ж2+Д4).
Глюкозо-аспарагиновая среда. Рост слабый. Воздушный мицелий от белесого до кремового (Д1-Б6). Субстратный мицелий бледно-желтовато-бурый (Д1+Д4). Растворимый пигмент отсутствует.
Глицерин-аспарагиновая среда. Рост от умеренного до хорошего. Воздушный мицелий светло-серый (А6). Субстратный мицелий желтовато-бурый (Б4+Б5). Растворимый пигмент бледно-песочный (З6+Д1).
Среда Ваксмана. Рост умеренный. Воздушный мицелий желтеющий (Ж6). Субстратный мицелий от золотисто-желтого до желто-бурого (М7-Д4+Б5). Растворимый пигмент желтовато-буроватый (Б5+Д4).
Овсяная среда. Рост обильный. Воздушный мицелий желтеющий (Ж6). Субстратный мицелий от песочно-бурого до оливково-серого (З6+Б4+Н1). Растворимый пигмент песочно-буроватый (З6+Б5).
Солодовая среда. Рост умеренный. Воздушный мицелий желтеющий (Ж6). Субстратный мицелий от золотисто-желтого до желто-бурого (М7-Б5). Растворимый пигмент желтовато-рыжевато-бурый (Ж2-Б5).
Гаузе 2. Рост от умеренного до хорошего. Воздушный мицелий от белесого до светло-серого и кремового (А6+Б6+Д1). Субстратный мицелий желтовато-буроватый (Б5). Растворимый пигмент отсутствует.
МПА. Рост очень слабый. Воздушный мицелий отсутствует. Субстратный мицелий кремовый (Б6). Растворимый пигмент отсутствует.
Физиолого-биохимические признаки
Культура Streptomyces ornatus аэроб, оптимум роста 30оС. Молоко коагулирует и пептонизирует, желатину разжижает, крахмал гидролизует, на клетчатке не растет. На ломтиках картофеля рост хороший. Меланоидные пигменты не образует.
Культура Streptomyces ornatus аэроб, оптимум роста 30оС. Молоко коагулирует и пептонизирует, желатину разжижает, крахмал гидролизует, на клетчатке не растет. На ломтиках картофеля рост хороший. Меланоидные пигменты не образует.
Использование источников углерода
Хорошо растет на D-ксилозе, DL-сахарозе, L-арабинозе, D-мальтозе, D-фруктозе, L-рамнозе, D-манните. Умеренно растет на D-глюкозе, D-галактозе, слабо растет на D-лактозе, L-инозите и не растет на D-раффинозе и D-сорбите.
Хорошо растет на D-ксилозе, DL-сахарозе, L-арабинозе, D-мальтозе, D-фруктозе, L-рамнозе, D-манните. Умеренно растет на D-глюкозе, D-галактозе, слабо растет на D-лактозе, L-инозите и не растет на D-раффинозе и D-сорбите.
П р и м е р. Штамм Streptomyces ornatus выращивают в пробирках со скошенной средой Гаузе в течение 7 сут в термостате при температуре 30оС. Полученный споровый материал засевают на жидкую среду следующего состава, г/л: картофельный крахмал 20; соевая мука 20; (NH4)2SO4 3,0; NaCl 2,5; KH2PO4 0,5; CaCO3 3,0; вода водопроводная до 1 л, рН среды 7,0. Культивирование микроорганизмов проводят в колбах емкостью 750 мл (100 мл среды) на круговой качалке (220 об/мин) при температуре 30оС в течение 24 ч. Полученный вегетативный посевной материал в количестве 5% по объему к среде засевают на питательную среду следующего состава, г/л: картофельный крахмал 40; измельченное перо 20; NaCl 2,5; MnCl2 0,5; KH2PO4 1,5; CaCO3 4,0; водопроводная вода до 1 л, рН среды 7,0 и выращивают в колбах емкостью 750 мл (100 мл среды) на круговой качалке при температуре 30оС в течение 78 ч.
Ферментативная активность кератиназы составляет 7,3 ед/мл.
Установлено, что штамм Streptomyces ornatus обладает большей кератиназной активностью по сравнению с прототипом и его использование рентабельно в промышленности.
Claims (1)
- Штамм Streptomyces ornatus ВКПМ S-1220 продуцент кератиназы.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93011685/13A RU2034924C1 (ru) | 1993-03-03 | 1993-03-03 | Штамм streptomyces ornatus - продуцент кератиназы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU93011685/13A RU2034924C1 (ru) | 1993-03-03 | 1993-03-03 | Штамм streptomyces ornatus - продуцент кератиназы |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2034924C1 true RU2034924C1 (ru) | 1995-05-10 |
| RU93011685A RU93011685A (ru) | 1997-03-20 |
Family
ID=20138193
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU93011685/13A RU2034924C1 (ru) | 1993-03-03 | 1993-03-03 | Штамм streptomyces ornatus - продуцент кератиназы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2034924C1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2774366C1 (ru) * | 2021-11-19 | 2022-06-17 | Светлана Наильевна Тиморшина | Штамм aspergillus clavatus - продуцент протеолитических ферментов с кератинолитической активностью |
-
1993
- 1993-03-03 RU RU93011685/13A patent/RU2034924C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 1. Filipello Marchisio, V.D. Curitti, C.Cassinelli and C.Bordese.Keratinolytic and Keratinophylic fungi in the soils of Rapua new guihea. Mycopathologia, 1991, v.115, N 2, p.113-120. * |
| 2. Ko, Jk Jun and non Howk. Actioity of Keratinolytic proteinase of Phricophyton mentagraphytes. J.Chathol. Med. Coll. 1990, v.43, N 4, p.1391-1398. * |
| 3. Авторское свидетельство СССР N 1565888, кл. C 12N 9/50, оп. 1990. * |
| 4. Жеребцов Н.А., Насонова Л.В. Влияние источников углеродного и азотного питания на биосинтез протеаз с кератинрасщепляющим действием. Прикл.биохимия и микробиол. 1989. т.25, N 4, с.508-512. * |
| 5. Шахманов Ч.Ю. Оптимизация условий биосинтеза кератинрасщепляющих протеаз, Str. fradiaspirales ВКМА - 157 и изучение их физико - химических свойств. Диссер. на соиск. уч.ст. к.т.н. 1989 - Воронеж. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2774366C1 (ru) * | 2021-11-19 | 2022-06-17 | Светлана Наильевна Тиморшина | Штамм aspergillus clavatus - продуцент протеолитических ферментов с кератинолитической активностью |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20090197305A1 (en) | Process for the preparation of polymyxin b employing (paeni) bacillus polymyxa | |
| IL104111A (en) | A microbial process for the production of trans-4-hydroxy-L-proline | |
| RU2034924C1 (ru) | Штамм streptomyces ornatus - продуцент кератиназы | |
| US5294552A (en) | Strain mass-producing ε-poly-L-lysine | |
| HU181488B (en) | Process for the hydrolysis of racemic hydantoins into optically active n-carbamoyl-aminoacid derivatives and for preparing the hydrolyzing enzymatic complex | |
| FI110518B (fi) | Levaanisakkaraasientsyymi, menetelmä sen tuottamiseksi, sitä tuottavia mikro-organismeja ja sitä sisältävä koostumus | |
| HU176399B (en) | Processs for producing cell-mateiral of bacteria | |
| JPH0866179A (ja) | 新菌種バチルス・カーボフィラス | |
| KR100373510B1 (ko) | 테이코플라닌을 생산하는 미생물 | |
| RU2013448C1 (ru) | Штамм streptomyces bambergiensis - продуцент моеномицина а | |
| SI9600120A (en) | New and improved fermentative procedure for the production of clavulanic acid and its salts | |
| US3901880A (en) | (s)-alanyl-3-(+60 -(s)-chloro-3-(s)-hydroxy-2-oxo-azetidinylmethyl)-(s)-alanine | |
| RU2084520C1 (ru) | Штамм бактерий brevibacterium flavum - продуцент l-глутамина (варианты) | |
| CA1253099A (en) | Difficol, intermediate in antibiotic preparation | |
| KR100446110B1 (ko) | 세팔로스포린 c 생산 미생물 | |
| RU2152432C1 (ru) | Штамм streptomyces hygroscopicus 7 - продуцент протеолитического фермента гигролитина | |
| RU2064499C1 (ru) | Штамм гриба fusarium sambicinum-продуцент убихинона q 10 | |
| RU2098483C1 (ru) | Способ получения авермектинов, штамм streptomyces avermitilis - продуцент авермектина | |
| JP4268857B2 (ja) | 微生物によるｄ−グルコサミンの製造法 | |
| SU283950A1 (ru) | ||
| SU1509402A1 (ru) | Штамм гриба @ продуцент @ -галактозидазы | |
| KR880001680B1 (ko) | 발효에 의한 시소마이신의 제조방법 | |
| RU2126831C1 (ru) | Штамм гриба pleurotus ostreatus - продуцент белковой биомассы | |
| KR930008970B1 (ko) | 반코마이신을 생산하는 미생물 | |
| RU2110577C1 (ru) | Штамм streptomyces cremeus 1979 - продуцент апрамицина |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050314 |