RU2024851C1

RU2024851C1 - Method for determination of sodium 6-(d-aminophenylacetamido)-penicillanate

Info

Publication number: RU2024851C1
Authority: RU
Inventors: В.К. Шорманов; Е.П. Дурицын
Original assignee: Шорманов Владимир Камбулатович
Priority date: 1992-07-22
Filing date: 1992-07-22
Publication date: 1994-12-15

Abstract

FIELD: analytical chemistry. SUBSTANCE: method consists in treatment of analyzed sample with 65% solution of nitric acids. Added to reaction mixture is solution of sodium hydroxide up to pH 9-14, and forming colored solution is subjected to photometry. EFFECT: higher efficiency. 1 tbl

Description

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)- пенициллановой кислоты натриевой соли, и может быть применено в практике центральных заводских лабораторий, контрольно-аналитических лабораторий химических предприятий. The invention relates to analytical chemistry, and in particular to methods for the determination of 6- (D-α-aminophenylacetamido) - penicillanic acid sodium salt, and can be used in the practice of central factory laboratories, analytical laboratories of chemical enterprises.

Известен способ определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты тригидрата, заключающийся в растворении анализируемой пробы в диметилформамиде (ДМФА), обработке раствором аллоксана тригидрата в ДМФА в условиях нагревания при температуре 99-100^оС на водяной бане с последующим охлаждением реакционной смеси, разбавлением ДМФА и фотометрированием образующегося окрашенного раствора (1).Known method for determining 6- (D-α-aminophenylacetamido) -penitsillanovoy acid trihydrate, comprising dissolving the sample analyzed in dimethylformamide (DMF), a solution of alloxan treated trihydrate in DMF under heating conditions at a temperature of 99-100 ^{° C} in water bath followed by cooling reaction mixture, dilution of DMF and photometry of the resulting colored solution (1).

Способ характеризуется трудоемкостью (нагревание при определенных условиях, охлаждение), применением токсичного растворителя, сложностью приготовления реактива и трудностью его стандартизации. The method is characterized by the complexity (heating under certain conditions, cooling), the use of a toxic solvent, the complexity of the preparation of the reagent and the difficulty of standardizing it.

Известен способ определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты, состоящий в обработке анализируемой пробы сульфатом меди при рН 5,2 в условиях нагревания при 75^оС в течение 30 мин с последующим фотометрированием образующегося окрашенного продукта.A known method for the determination of 6- (D-α-aminophenylacetamido) -penicillanic acid, which consists in processing the analyzed sample with copper sulfate at pH 5.2 under heating at 75 ^about C for 30 minutes, followed by photometry of the resulting colored product.

Способ трудоемок (нагревание при 75^оС в течение 30 мин), длителен, недостаточно селективен.The method is time-consuming (heating at 75 ^about C for 30 minutes), long, insufficiently selective.

Наиболее близким к изобретению является способ определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли, заключающийся в обработке анализируемого объекта молибдатом аммония в среде серной кислоты в условиях нагревания при 95^оС в течение 10 мин (3).The closest to the invention is a method for determining the 6- (D-α-aminophenylacetamido) -penitsillanovoy acid sodium salt, consisting in processing the analyzed object ammonium molybdate in a sulfuric acid medium in the heating conditions at ⁹⁵ ° C for 10 min (3).

Способ характеризуется трудоемкостью (нагревание в течение 10 мин при 95^оС, охлаждение) и недостаточно высокой селективностью (подобным образом определяются практически все пенициллины).The method is characterized by complexity (heating for 10 min at 95 ^C., cooling) and under a high selectivity (defined in this way virtually all penicillins).

Целью изобретения является упрощение способа и повышение селективности определения. The aim of the invention is to simplify the method and increase the selectivity of determination.

Поставленная цель достигается тем, что в способе определения 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли, заключающийся в обработке анализируемой пробы неорганическим реагентом с последующим фотометрированием образующегося окрашенного раствора, в качестве неорганического реагента используют 65%-ный раствор азотной кислоты, а перед фотометрированием к реакционной смеси прибавляют раствор гидроксида натрия до рН 9-14. The goal is achieved in that in the method for determining 6- (D-α-aminophenylacetamido) -penicillanic acid sodium salt, which consists in processing the analyzed sample with an inorganic reagent, followed by photometry of the resulting colored solution, a 65% nitric acid solution is used as an inorganic reagent and before photometry, a solution of sodium hydroxide is added to the reaction mixture to a pH of 9-14.

Способ осуществляется следующим образом: анализируемую пробу обрабатывают 65%-ным раствором азотной кислоты, к реакционной смеси прибавляют 20% -ный раствор гидроксида натрия, до рН 9-14, а образующийся окрашенный раствор фотометрируют. The method is as follows: the analyzed sample is treated with a 65% solution of nitric acid, a 20% solution of sodium hydroxide is added to the reaction mixture to a pH of 9-14, and the resulting colored solution is photographed.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами. The invention is illustrated by the following examples.

П р и м е р 1. Качественное определение 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пеницилла- новой кислоты, натриевой соли. Около 2 мг 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пеницилла- новой кислоты натриевой соли помещают в пробирку и обрабатывают 1 мл 65% раствора азотной кислоты. Через 3 мин к реакционной смеси прибавляют 4 мл 20%-ного раствора гидроксида натрия. Появляется желтое окрашивание. Чувствительность реакции - 3 мкг/мл. PRI me R 1. Qualitative determination of 6- (D-α-aminophenylacetamido) -penicillanic acid, sodium salt. About 2 mg of 6- (D-α-aminophenylacetamido) penicillanic acid sodium salt is placed in a test tube and treated with 1 ml of 65% nitric acid solution. After 3 minutes, 4 ml of a 20% sodium hydroxide solution were added to the reaction mixture. A yellow stain appears. The sensitivity of the reaction is 3 μg / ml.

П р и м е р 2. Количественное определение 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли. В шесть выпарительных чашек помещали 0,05, 0,10, 0,20, 0,30, 0,40, 0,50 мл 0,1% раствора 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли в этаноле и испаряли растворитель в токе воздуха. К сухим остаткам прибавляли по 1 мл 65%-ного раствора азотной кислоты и перемешивали содержимое чашек в течение 5 мин. По истечении указанного времени в каждый реакционный раствор вносили 4 мл 20% -ного раствора гидроксида натрия и фотометрировали образующиеся окрашенные растворы на приборе КФК-2 при длине волны 400 нм (светофильтр N 3) в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. Измерения проводили на фоне раствора, полученного в контрольном опыте. По результатам измерений строили калибровочный график и рассчитывали его уравнение методом наименьших квадратов, которое в данном случае имеет вид
D=0,004932 С-0,04019,
где D - оптическая плотность, С - концентрация анализируемого соединения в фотометрируемом растворе, мкг/мл.PRI me R 2. Quantitative determination of 6- (D-α-aminophenylacetamido) -penicillanic acid sodium salt. 0.05, 0.10, 0.20, 0.30, 0.40, 0.50 ml of a 0.1% solution of 6- (D-α-aminophenylacetamido) -penicillanic acid sodium salt in ethanol was placed in six evaporation dishes and the solvent was evaporated in a stream of air. 1 ml of a 65% nitric acid solution was added to the dry residue, and the contents of the cups were mixed for 5 minutes. After this time, 4 ml of a 20% sodium hydroxide solution was added to each reaction solution, and the resulting colored solutions were photographed on a KFK-2 device at a wavelength of 400 nm (filter No. 3) in a cuvette with a working layer thickness of 10 mm. The measurements were carried out against the background of the solution obtained in the control experiment. Based on the measurement results, a calibration graph was constructed and its equation was calculated using the least squares method, which in this case has the form
D = 0.004932 C-0.04019,
where D is the optical density, C is the concentration of the analyte in the photometric solution, μg / ml.

Подчинение основному закону светопоглощения наблюдается в интервале концентраций 5-100 мкг/мл. Submission to the basic law of light absorption is observed in the concentration range of 5-100 μg / ml.

Методика количественного определения
Около 0,05 г (точная навеска) 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевой соли растворяют в этаноле в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят до метки этанолом. В выпарительную чашку вносят 0,4 мл полученного раствора, испаряют растворитель в токе воздуха и дальнейшие операции осуществляют по схеме, описанной для построения калибровочного графика. Результаты определения и метрологические характеристики представлены в таблице.Quantification Method
About 0.05 g (accurately weighed) of 6- (D-α-aminophenylacetamido) penicillanic acid sodium salt is dissolved in ethanol in a 50 ml volumetric flask and made up to the mark with ethanol. 0.4 ml of the resulting solution is added to the evaporator cup, the solvent is evaporated in a stream of air, and further operations are carried out according to the scheme described for constructing a calibration graph. The results of determination and metrological characteristics are presented in the table.

Изобретение позволяет определять 6-(D-α-аминофенилацетамидо)-пенициллановой кислоты натриевую соль в присутствии близких по строению структур: 6-(α-карбоксифенилацетамидо)-пенициллановой кислоты динатриевой соли, бензилпенициллина натриевой соли, 3-фенил-5-метил-4-изоксазолилпенициллина натриевой соли моногидрата, 6-(феноксиацетамидо)-пенициллановой кислоты. Продолжительность определения 8-10 мин. The invention allows the determination of 6- (D-α-aminophenylacetamido) penicillanic acid sodium salt in the presence of structurally similar structures: 6- (α-carboxyphenylacetamido) penicillanic acid disodium salt, benzylpenicillin sodium salt, 3-phenyl-5-methyl-4 -isoxazolylpenicillin sodium salt of monohydrate, 6- (phenoxyacetamido) -penicillanic acid. Duration of determination is 8-10 minutes.

Claims

METHOD FOR DETERMINING 6- (D-α-AMINOPHENYLACETAMIDO) -PENYCYLANIC ACID OF SODIUM SALT by treating the analyzed sample with an inorganic reagent followed by photometric analysis of the resulting colored solution, characterized in that 65% acid is used as the inorganic reagent before nitric acid sodium hydroxide solution is added to the reaction mixture to a pH of 9-14.