RU2021124655A - Аbc-транспортеры для высокоэффективного производства ребаудиозидов - Google Patents
Аbc-транспортеры для высокоэффективного производства ребаудиозидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2021124655A RU2021124655A RU2021124655A RU2021124655A RU2021124655A RU 2021124655 A RU2021124655 A RU 2021124655A RU 2021124655 A RU2021124655 A RU 2021124655A RU 2021124655 A RU2021124655 A RU 2021124655A RU 2021124655 A RU2021124655 A RU 2021124655A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- amino acid
- host cell
- genetically modified
- acid sequence
- Prior art date
Links
Claims (58)
1. Генетически модифицированная клетка-хозяин, способная продуцировать один или несколько стевиоловых гликозидов, содержащих гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую АВС-транспортер, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из последовательностей со следующими идентификаторами: SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29 и SEQ ID NO: 30.
2. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 1, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей со следующими идентификаторами: SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 и SEQ ID NO: 8.
3. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержащая нуклеиновую кислоту, кодирующую геранилгеранилпирофосфатсинтазу (GGPPS), энт-копалилпирофосфатсинтазу (CPS), энт-кауренсинтазу (KS), энт-каурен-19-оксидазу (KO), 13-гидроксилазу энт-кауреновой кислоты (KAH), цитохром р450 редуктазу (CPR) и одну или несколько УДФ-глюкозилтрансфераз (UGT).
4. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 3, отличающаяся тем, что одна или несколько УДФ-глюкозилтрансфераз (UGT) выбраны из группы, состоящей из UGT85C2, UGT74G1, UGT91D_like3, UGT76G1, EUGT11 и UGT40087.
5. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 4, отличающаяся тем, что геранилгеранилпирофосфатсинтаза (GGPPS) содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичность последовательности с идентификатором SEQ ID NO: 9, энт-копалилпирофосфатсинтаза (CPS) содержит аминокислотную последовательность, имеющая по меньшей мере 80%) идентичности последовательности с идентификатором SEQ ID NO: 10, энт-кауренсинтаза (KS) включает аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичность последовательности с идентификатором SEQIDNO: 11, энт-каурен-19-оксидаза (КО) содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80%) идентичность последовательности с идентификатором SEQ ID NO: 12, 13-гидроксилаза энт-кауреновой кислоты (KAH) содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичность последовательности с идентификатором SEQ ID NO: 13, редуктаза цитохрома р450 (CPR) содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичность последовательности с идентификатором SEQ ID NO: 14, и одна или несколько УДФ-глюкозилтрансфераз (UGT) содержат аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80%) идентичности последовательности аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из последовательностей со следующими идентификаторами: SEQIDNO: 15, SEQIDNO: 16, SEQIDNO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQIDNO: 19.
6. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 5, отличающаяся тем, что геранилгеранилпирофосфатсинтаза (GGPPS) содержит аминокислотную последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 9, энт-копалилпирофосфатсинтаза (CPS) содержит аминокислотную последовательность с идентификатором SEQIDNO: 10, энт-каурен-синтаза (KS) содержит аминокислотную последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 11, энт-каурен-19-оксидаза (KO) включает аминокислотную последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 12, 13-гидроксилаза энт-кауреновой кислоты (KAH) содержит аминокислотную последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 13, редуктаза цитохрома р450 (CPR) содержит аминокислотную последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 14, а одна или несколько УДФ-глюкозилтрансфераз (UGT) содержат аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей со следующими идентификаторами: SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19.
7. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что клетка-хозяин выбрана из бактериальной клетки, грибковой клетки, водорослевой клетки, клетки насекомого и клетки растения.
8. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 7, отличающаяся тем, что клетка-хозяин представляет собой клетку Saccharomyces cerevisiae.
9. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 1.
10. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 2.
11. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 3.
12. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 4.
13. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 5.
14. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 6.
15. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 7.
16. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 15, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит одну или несколько аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности с идентификатором SEQ ID NO: 7.
17. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 16, отличающаяся тем, что одна или несколько аминокислотных замен выбраны из V666A, Y942N, L956P HE1320V.
18. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 8.
19. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 28.
20. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 29.
21. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 30.
22. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, отличающаяся тем, что один или несколько стевиоловых гликозидов выбраны из группы, состоящей из Reb A, Reb В, Reb D, Reb Е и Reb М.
23. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 22, отличающаяся тем, что один или несколько стевиоловых гликозидов содержат Reb М.
24. Полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность гетерологичной нуклеиновой кислоты по любому из предшествующих пунктов.
25. Полинуклеотид по п. 24, отличающийся тем, что нуклеотидная последовательность гетерологичной нуклеиновой кислоты включает кодирующую последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей с идентификаторами SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID. NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26 и SEQ ID NO: 27, где кодирующая последовательность функционально связана с гетерологичным промотором.
26. Способ получения стевиола или одного или нескольких стевиоловых гликозидов, включающий стадии:
(a) культивирование популяции клеток-хозяев по любому из пп. 1-23 в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения стевиола или одного или нескольких стевиоловых гликозидов с получением культурального бульона; а также
(b) выделение указанного стевиола или одного или нескольких стевиоловых гликозидов из культуральной жидкости.
27. Способ получения Reb D, включающий стадии:
(a) культивирование популяции клеток-хозяев по любому из пп. 1-23 в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения Reb D с получением культурального бульона; а также
(b) выделение указанного соединения Reb D из культурального бульона.
28. Способ получения Reb М, включающий стадии:
(a) культивирование популяции клеток-хозяев по любому из пп. 1-23 в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения Reb М с получением культурального бульона; а также
(b) выделение указанного соединения Reb М из культурального бульона.
29. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что по меньшей мере 50% одного или нескольких стевиоловых гликозидов накапливаются в просвете органеллы.
30. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что по меньшей мере 50% одного или нескольких стевиоловых гликозидов накапливаются внеклеточно.
31. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 1-23, дополнительно содержащая УДФ-глюкозилтрансферазу (UGT), имеющую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью с идентификатором SEQ ID NO: 18.
32. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 1-23, дополнительно содержащая УДФ-глюкозилтрансферазу (UGT), имеющую аминокислотную последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 18.
33. Генетически модифицированная клетка-хозяин, способная продуцировать изопреноидное соединение, содержащее гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую АВС-транспортер, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 80% идентичности последовательности с аминокислотной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из последовательностей с идентификаторами SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30.
34. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 33, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей с идентификаторами SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO:.
35. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 33 или 34, дополнительно содержащая нуклеиновую кислоту, кодирующую аморфа-4,11-диенеинтазу, и нуклеиновую кислоту, кодирующую аморфа-4,11-диеноксидазу.
36. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 35, отличающаяся тем, что изопреноидное соединение выбрано из артемизинового спирта, артемизинового альдегида и артемизиновой кислоты.
37. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 36, отличающаяся тем, что клетка-хозяин выбрана из бактериальной клетки, грибковой клетки, водорослевой клетки, клетки насекомого и клетки растения.
38. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 37, отличающаяся тем, что клетка-хозяин представляет собой клетку Saccharomyces cerevisiae.
39. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 1.
40. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 2.
41. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 3.
42. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 4.
43. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 5.
44. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 6.
45. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 7.
46. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 33-38, отличающаяся тем, что АВС-транспортер содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность с идентификатором SEQ ID NO: 8.
47. Способ получения артемизиловой кислоты, включающий стадии:
(a) культивирование популяции клеток-хозяев по любому из пп. 33-46 в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения артемизиновой кислоты с получением культурального бульона; а также
(b) выделение артемизиновой кислоты из культурального бульона.
48. Способ получения изопреноидного соединения, включающий стадии:
(a) культивирование популяции клеток-хозяев по п. 33 в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения изопреноидного соединения с получением культурального бульона; а также
(b) выделение изопреноидного соединения из культурального бульона.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/796,228 | 2019-01-24 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021124655A true RU2021124655A (ru) | 2023-02-27 |
| RU2795855C2 RU2795855C2 (ru) | 2023-05-12 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107586794B (zh) | 异源代谢途径生产酪醇及羟基酪醇的方法 | |
| JP7130284B2 (ja) | チロソール及びヒドロキシチロソールを生産する酵母及びその作製方法 | |
| JP2019524134A5 (ru) | ||
| RU2006129295A (ru) | Эволюционирующие микроорганизмы для получения 1,2-пропандиола | |
| US9617570B2 (en) | Acid resistant yeast cell and use thereof | |
| TW200741007A (en) | Recombinant host cells and media for ethanol production | |
| CN115029257B (zh) | 产β-胡萝卜素的重组解脂耶氏酵母及其构建方法和应用 | |
| TW200914610A (en) | Isopropyl alcohol-producing bacteria and method for producing isopropyl alcohol using the same | |
| CN101432429B (zh) | 产生芳香分子的酵母表达系统 | |
| EP3000888B1 (en) | Process for converting ferulic acid into vanillin | |
| US10612007B2 (en) | Method for increasing citric acid production by Aspergillus niger fermentation | |
| US10208326B2 (en) | Methods and materials for biosynthesis of manoyl oxide | |
| RU2021124655A (ru) | Аbc-транспортеры для высокоэффективного производства ребаудиозидов | |
| Kim et al. | Cellulose degrading basidiomycetes yeast isolated from the gut of grasshopper in Korea | |
| CN114806991B (zh) | 一种提高岩藻糖基乳糖产量的工程大肠杆菌及生产方法 | |
| CN102911962B (zh) | 改造微生物获得改进表型的方法 | |
| RU2021134677A (ru) | Варианты и применение 13-гидроксилазы кауреновой кислоты (гкк) | |
| TWI752396B (zh) | 用於提升衣康酸表現量之經基因改質的微生物與生產衣康酸的方法 | |
| RU2021112544A (ru) | Гидроксилаза кауреновой кислоты stevia rebaudiana для высокоэффективного производства ребаудиозидов | |
| CN117965334B (zh) | 表达虾青素的重组毕赤酵母菌株及其构建方法和应用 | |
| JPWO2020154549A5 (ru) | ||
| RU2020109765A (ru) | Применение кауреноксидазы pisum sativum для высокоэффективного производства ребаудиозидов | |
| Cho et al. | A report of 17 unrecorded bacterial species of Korea belonging to the phylum Bacteroidetes | |
| Li et al. | Inactivation of MrPigH in Monascus ruber M7 results in its Monascus pigments increase and citrinin decrease with mrpyrG selection marker | |
| Kim et al. | 한국의 메뚜기의 장에서 분리된 Cellulose 를 분해하는 담자균 효모 |