RU2021122287A - Способ очистки фикоцианинов - Google Patents

Claims (39)

1. Способ очистки фикоцианинов из раствора, содержащего фикоцианин(ы) и гликоген, отличающийся тем, что он включает (i) стадию ферментативного разложения гликогена с помощью фермента, подходящего для разложения гликогена при рН ниже 6 и температуре реакции ниже 40°С и (ii) стадию отделения фикоцианинов от продуктов разложения гликогена.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что температура составляет ниже 30°С и/или рН меньше или равен 5.

3. Способ по любому из п. 1 или 2, отличающийся тем, что фермент имеет активность αl-4-глюкозидазы или полигалактуроназы.

4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что фермент представляет собой пектиназу.

5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что фермент представляет собой смесь ферментов, которая включает фермент с активностью αl-6-глюкозидазы в дополнение к ферменту с активностью αl-4-глюкозидазы или полигалактуроназы.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что фермент с активностью αl-6-глюкозидазы представляет собой пуллуланазу.

7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что смесь ферментов включает пектиназу и пуллуланазу.

8. Способ по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что фермент имеет активность αl-4-глюкозидазы или полигалактуроназы и активность αl-6-глюкозидазы.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что фермент представляет собой глюкоамилазу.

10. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что раствор, содержащий фикоцианин(ы) и гликоген, представляет собой неочищенную суспензию, полученную после лизиса клеток биомассы микроорганизмов, продуцирующих фикоцианин.

11. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что раствор, содержащий фикоцианин(ы) и гликоген, представляет собой неочищенный раствор, полученный после фильтрации неочищенной суспензии как таковой, полученной после лизиса клеток биомассы микроорганизмов, продуцирующих фикоцианин.

12. Способ получения фикоцианина микробного происхождения, который включает стадии:

(a) культивирования микроорганизмов, продуцирующих фикоцианин, как описано выше, в условиях культивирования для получения ферментационного сусла, содержащего более 30 г/л сухого вещества и по меньшей мере 4% фикоцианина в пересчете на сухое вещество;

(b) лизиса клеток для высвобождения продуцируемого фикоцианина и гликогена с получением неочищенной суспензии, как определено выше;

(c) разделения неочищенной суспензии для извлечения неочищенного раствора, содержащего фикоцианин и гликоген, а затем, возможно,

(d) выделения фикоцианина из неочищенного раствора, затем, возможно,

(e) очистки выделенного фикоцианина,

отличающийся тем, что проводят стадию ферментативного лизиса гликогена с ферментом, подходящим для разложения гликогена при рН ниже 6 и температуре реакции ниже 40°С, причем указанный ферментативный лизис проводят с неочищенной суспензией, полученной на стадии (b), и/или с неочищенным раствором, полученным на стадии (с).

13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что температура составляет ниже 30°С и/или рН меньше или равен 5.

14. Способ по любому из п. 12 или 13, отличающийся тем, что фермент имеет активность αl-4-глюкозидазы или полигалактуроназы.

15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что фермент представляет собой пектиназу.

16. Способ по любому из пп. 12-15, отличающийся тем, что фермент представляет собой смесь ферментов, которая включает фермент с активностью αl-6-глюкозидазы в дополнение к ферменту с активностью αl-4-глюкозидазы или полигалактуроназы.

17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что фермент с активностью αl-6-глюкозидазы представляет собой пуллуланазу.

18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что смесь ферментов включает пектиназу и пуллуланазу.

19. Способ по любому из пп. 12-14, отличающийся тем, что фермент имеет активность αl-4-глюкозидазы или полигалактуроназы и активность αl-6-глюкозидазы.

20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что фермент представляет собой глюкоамилазу.

21. Способ по любому из пп. 12-20, отличающийся тем, что раствор, содержащий фикоцианин(ы) и гликоген, представляет собой неочищенную суспензию, полученную на стадии (b).

22. Способ по любому из пп. 12-20, отличающийся тем, что ферментативный лизис проводят с неочищенным раствором, полученным на стадии (с).

23. Способ по любому из пп. 12-22, отличающийся тем, что фикоцианин представляет собой фикоцианин микробного происхождения, продуцируемый микроорганизмом, выбранным из видов родов Arthrospira, Spirulina, Synechococcus, Cyanidioschyzon, Cyanidium и Galdieria, в частности, Galdieria sulphuraria.

24. Выделенный фикоцианин, полученный способом по любому из пп. 1-23.

25. Выделенный фикоцианин по п. 24, отличающийся тем, что он включает следы ферментов с активностью альфа 1-4-глюкозидазы и/или 1-6-глюкозидазы.

26. Выделенный фикоцианин по любому из п. 24 или 25, отличающийся тем, что он содержит олигомеры глюкозы, продукты ферментативного лизиса гликогена.

27. Экстракт фикоцианина, включающий фикоцианин и гликоген, отличающийся тем, что отношение гликогена к фикоцианину по сухой массе составляет менее 6, и отличающийся тем, что он включает следы ферментов с активностью альфа 1-4-глюкозидазы и/или 1-6-глюкозидазы и/или олигомеры глюкозы, продукты ферментативного лизиса гликогена.

28. Экстракт по п. 27, отличающийся тем, что отношение гликогена к фикоцианину по сухой массе составляет менее 4.

29. Экстракт по п. 27, отличающийся тем, что отношение гликогена к фикоцианину по сухой массе составляет менее 3.

30. Экстракт по п. 27, отличающийся тем, что отношение гликогена к фикоцианину по сухой массе составляет менее 2,5.

31. Экстракт по п. 27, отличающийся тем, что отношение гликогена к фикоцианину по сухой массе составляет менее 1.

32. Применение выделенного фикоцианина по любому из пп. 24-26 или экстракта по любому из пп. 27-31 в качестве пищевого красителя.

33. Пищевой продукт, отличающийся тем, что он включает выделенный фикоцианин по любому из пп. 24-26 или экстракт по любому из пп. 27-31.