RU2020114699A - Эукариотическая клеточная линия - Google Patents

Эукариотическая клеточная линия Download PDF

Info

Publication number
RU2020114699A
RU2020114699A RU2020114699A RU2020114699A RU2020114699A RU 2020114699 A RU2020114699 A RU 2020114699A RU 2020114699 A RU2020114699 A RU 2020114699A RU 2020114699 A RU2020114699 A RU 2020114699A RU 2020114699 A RU2020114699 A RU 2020114699A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cell line
cells
line according
gene
promoter
Prior art date
Application number
RU2020114699A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2776531C2 (ru
RU2020114699A3 (ru
Inventor
Стефано Коллока
Альфредо НИКОСИА
Original Assignee
Ноуском Аг (Nouscom Ag)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ноуском Аг (Nouscom Ag) filed Critical Ноуском Аг (Nouscom Ag)
Publication of RU2020114699A publication Critical patent/RU2020114699A/ru
Publication of RU2020114699A3 publication Critical patent/RU2020114699A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2776531C2 publication Critical patent/RU2776531C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0603—Embryonic cells ; Embryoid bodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0684—Cells of the urinary tract or kidneys
    • C12N5/0686—Kidney cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
    • C12N2710/10322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
    • C12N2710/10341—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/10343—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/10011—Adenoviridae
    • C12N2710/10311—Mastadenovirus, e.g. human or simian adenoviruses
    • C12N2710/10351—Methods of production or purification of viral material
    • C12N2710/10352—Methods of production or purification of viral material relating to complementing cells and packaging systems for producing virus or viral particles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/001—Vector systems having a special element relevant for transcription controllable enhancer/promoter combination
    • C12N2830/005—Vector systems having a special element relevant for transcription controllable enhancer/promoter combination repressible enhancer/promoter combination, e.g. KRAB
    • C12N2830/006—Vector systems having a special element relevant for transcription controllable enhancer/promoter combination repressible enhancer/promoter combination, e.g. KRAB tet repressible
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Claims (26)

1. Клеточная линия, в которой тетрациклиновый репрессор (Tet-R) экспрессируется под контролем клеточного или частично клеточного промотора.
2. Клеточная линия по п. 1, в которой тетрациклиновый репрессор (Tet-R) экспрессируется по меньшей мере в 90% клеток клеточной линии.
3. Клеточная линия по п. 1 или 2, в которой экспрессия является стабильной во времени.
4. Клеточная линия по любому из пп. 1-3, в которой Tet-R репрессирует транскрипцию генов, содержащих в своих промоторах один или несколько тетрациклиновых операторов (TetO) в присутствии или в отсутствие тетрациклина или аналога тетрациклина.
5. Клеточная линия по любому из пп. 1-4, в которой ген Tet-R находится под контролем конститутивного промотора, предпочтительно конститутивный промотор выбран из группы, состоящей из промотора EF1 альфа, промотора PGK-1, промотора убиквитина В, промотора β-актина, промотора EGR1, промотора CASI и промотора CAG.
6. Клеточная линия по любому из пп. 1-5, в которой ген, кодирующий Tet-R, кодон-оптимизирован для экспрессии в эукариотических клетках, предпочтительно в клетках млекопитающего.
7. Клеточная линия по любому из пп. 1-6, которая дополнительно содержит:
(i) в своем геноме мутацию, делецию или вставку, которая уменьшает или предотвращает экспрессию функционального белка, выбранного из группы, состоящей из одного или нескольких стимуляторов гена IFN, предпочтительно cGas и STING, одной или нескольких сигнальных систем JAK/активатор транскрипции STAT, и одного или нескольких IFN-стимулированных генов (ISG), предпочтительно PKR, МХ1, OAS1, APOBEC3G, TRIM5, ZAP, ISG15, ADAR, IFITM1/2/3, BST2 и/или RSAD2, и/или
(ii) ген, кодирующий маркер селекции, предпочтительно ген устойчивости к G418, гигромицину В, пуромицину, бластицидину или зеоцину в генетической связи с геном, кодирующим Tet-R.
8. Клеточная линия по любому из пп. 1-7, содержащая стабильно интегрированный в ее геном ген, кодирующий тетрациклиновый репрессор (Tet-R).
9. Клеточная линия по любому из пп. 1-8, в которой клетки клеточной линии экспрессируют по меньшей мере один вирусный ген, который требуется для образования инфекционных вирусных частиц, предпочтительно при этом по меньшей мере один вирусный ген выбран из группы, состоящей из Е1, предпочтительно содержащей ген с нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO: 1.
10. Клеточная линия по любому из пп. 1-9, где клетки клеточной линии представляют собой клетки человека, предпочтительно эмбриональные клетки почки человека, или отличающаяся тем, что клетки клеточной линии выбраны из группы, состоящей из клеток HEK293, клеток А549, клеток HeLa, клеток MRC5, клеток VERO, клеток DF-1 или клеток SK-OV-3.
11. Клеточная линия по любому из пп. 1-10, в которой промотор представляет собой промотор CAG.
12. Клеточная линия по любому из пп. 1-11, которая представляет собой клеточную линию, депонированную в ЕСАСС под номером доступа 17080901.
13. Клеточная линия по любому из пп. 1-12, дополнительно содержащая вирусный геном, способный к сборке в инфекционную вирусную частицу, и содержащая по меньшей мере один гетерологичный ген под контролем промотора, содержащего один или несколько тетрациклиновых операторов (TetO), предпочтительно при этом
(i) вирусный геном выбран из группы, состоящей из генома вируса герпеса, генома модифицированного вируса осповакцины Анкара и аденовирусного генома, предпочтительно вирусный геном представляет собой аденовирусный геном, и/или
(ii) гетерологичный ген является токсичным для клетки или нарушает цикл репликации вируса.
14. Клеточная линия по п. 13, отличающаяся тем, что гетерологичный ген выбран из группы, состоящей из аутоантигенов, вирусных генов, генов клеточного происхождения, синтетических цепочек, кодирующих комбинацию опухоль-ассоциированных неоантигенов, и цепочек, кодирующих неоэпитопы, предпочтительно при этом
(i) аутоантиген выбран из группы, состоящей из HER2/neu, СЕА, Нерсат, PSA, PSMA, теломеразы, gplOO, Melan-A/MART-1, Muc-1, NY-ESO-1, сурвивина, стромелизина 3, тирозиназы, MAGE3, CML6S, CML66, OY-TES-1, SSX-2, SART-1, SART-2, SART-3, NYC0-5S, NY-BR-62, hKLP2 и VEGF,
(ii) вирусный ген выбран из группы, состоящей из белка Е1-Е2 HCV, гликопротеина вируса бешенства и GP 160 HIV-1, и/или
iii) ген клеточного происхождения выбран из группы, состоящей из Tim-3, Her2 и Е2 F-1.
15. Применение клеточной линии по любому из пп. 1-14 для продуцирования инфекционных вирусных частиц.
16. Способ получения инфекционных вирусных частиц, включающий следующие стадии:
(i) выращивание клеток клеточной линии по п. 13 или 14 in vitro в присутствии или в отсутствие тетрациклина или аналога тетрациклина; или
(ii) инфицирование клеток клеточной линии по любому из пп. 1-12 вирусным вектором, предпочтительно аденовирусным вектором; и
(iii) извлечение вирусных частиц.
RU2020114699A 2017-10-25 2018-10-25 Эукариотическая клеточная линия RU2776531C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP17198339.8 2017-10-25
EP17198339 2017-10-25
PCT/EP2018/079341 WO2019081673A1 (en) 2017-10-25 2018-10-25 LINE OF EUKARYOTIC CELLS

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2020114699A true RU2020114699A (ru) 2021-11-25
RU2020114699A3 RU2020114699A3 (ru) 2021-11-25
RU2776531C2 RU2776531C2 (ru) 2022-07-21

Family

ID=

Also Published As

Publication number Publication date
MX2020004305A (es) 2020-11-11
SG11202003609VA (en) 2020-05-28
WO2019081673A1 (en) 2019-05-02
CA3076026A1 (en) 2019-05-02
KR20200101322A (ko) 2020-08-27
AU2018356538A1 (en) 2020-05-14
CN111386126B (zh) 2024-01-30
AU2018356538B2 (en) 2023-09-28
US20200308601A1 (en) 2020-10-01
US11643666B2 (en) 2023-05-09
BR112020007772A2 (pt) 2020-10-06
CN111386126A (zh) 2020-07-07
RU2020114699A3 (ru) 2021-11-25
IL274191A (en) 2020-06-30
EP3700560A1 (en) 2020-09-02
JP2021500011A (ja) 2021-01-07
JP7274225B2 (ja) 2023-05-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11155595B2 (en) Compositions and methods for use of recombinant T cell receptors for direct recognition of tumor antigen
Salmon et al. Reversible immortalization of human primary cells by lentivector-mediated transfer of specific genes
US11413307B2 (en) Induced dendritic cells and uses thereof
JP7206190B2 (ja) 遺伝的に修飾されたｔリンパ球
EP3270960A1 (en) Vector formulations
EP2746387A1 (en) Differentiated anucleated cells and method for preparing the same
Ben-Dor et al. Lentiviral vectors harboring a dual-gene system allow high and homogeneous transgene expression in selected polyclonal human embryonic stem cells
AU2021207810A1 (en) Modification of blood type antigens
Kuehle et al. Modified Lentiviral LTRs Allow Flp Recombinase–mediated Cassette Exchange and In Vivo Tracing of “Factor-free” Induced Pluripotent Stem Cells
RU2020114699A (ru) Эукариотическая клеточная линия
Daniel-Meshulam et al. How (specific) would you like your T-cells today? Generating T-cell therapeutic function through TCR-gene transfer
Zheng et al. Engineering of human mesenchymal stem cells resistant to multiple natural killer subtypes
Lorenz et al. Codon optimization of the human papillomavirus E7 oncogene induces a CD8+ T cell response to a cryptic epitope not harbored by wild-type E7
Lachmann et al. Tightly regulated ‘all-in-one’lentiviral vectors for protection of human hematopoietic cells from anticancer chemotherapy
Kobayashi et al. Generation of an OCT3/4 reporter cynomolgus monkey ES cell line using CRISPR/Cas9
CA3032418A1 (en) Compositions and methods for rapid cloning of t-cell receptors
Liang et al. Targeted transduction of CD34+ hematopoietic progenitor cells in nonpurified human mobilized peripheral blood mononuclear cells
TW201006927A (en) Method for sustained expression of an exogenous gene
Fischer et al. A retroviral packaging cell line for pseudotype vectors based on glioma‐infiltrating progenitor cells
CN116732099B (zh) 一种干细胞多重CRISPR/Cas基因组编辑方法
Brown et al. Potential of herpesvirus saimiri-based vectors to reprogram a somatic Ewing's sarcoma family tumor cell line
Tencomnao et al. Evaluation of a novel luciferase reporter construct: a positive control plasmid for reporter gene assay
CN112469733B (zh) Mart-1(27-35)表位特异性t细胞受体
Luo et al. A gene silencing pipeline to interrogate human cDC1 and pDC development and functions
Cai et al. 127. Lentiviral Protein Transduction for Tailored Genome Editing and Site-Directed Gene Insertion