RU2019125818A - Модели ретиношизиса на животных, отличных от человека - Google Patents

Модели ретиношизиса на животных, отличных от человека Download PDF

Info

Publication number
RU2019125818A
RU2019125818A RU2019125818A RU2019125818A RU2019125818A RU 2019125818 A RU2019125818 A RU 2019125818A RU 2019125818 A RU2019125818 A RU 2019125818A RU 2019125818 A RU2019125818 A RU 2019125818A RU 2019125818 A RU2019125818 A RU 2019125818A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
rodent
gene
endogenous
substitution
engineered
Prior art date
Application number
RU2019125818A
Other languages
English (en)
Inventor
Сюзанна БРИДЖЕС
Яцзюнь ТАН
Ян Лю
Цзинтай Цао
Кармело Романо
Original Assignee
Регенерон Фармасьютикалс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Регенерон Фармасьютикалс, Инк. filed Critical Регенерон Фармасьютикалс, Инк.
Publication of RU2019125818A publication Critical patent/RU2019125818A/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
    • A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • A01K67/0276—Knock-out vertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
    • A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • A01K67/0278—Knock-in vertebrates, e.g. humanised vertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/0004—Screening or testing of compounds for diagnosis of disorders, assessment of conditions, e.g. renal clearance, gastric emptying, testing for diabetes, allergy, rheuma, pancreas functions
    • A61K49/0008—Screening agents using (non-human) animal models or transgenic animal models or chimeric hosts, e.g. Alzheimer disease animal model, transgenic model for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5082—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms
    • G01N33/5088—Supracellular entities, e.g. tissue, organisms of vertebrates
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
    • A01K2217/054—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic) inducing loss of function
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
    • A01K2217/072—Animals genetically altered by homologous recombination maintaining or altering function, i.e. knock in
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
    • A01K2217/075—Animals genetically altered by homologous recombination inducing loss of function, i.e. knock out
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/15—Animals comprising multiple alterations of the genome, by transgenesis or homologous recombination, e.g. obtained by cross-breeding
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/20—Animal model comprising regulated expression system
    • A01K2217/206—Animal model comprising tissue-specific expression system, e.g. tissue specific expression of transgene, of Cre recombinase
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00—Animals characterised by species
    • A01K2227/10—Mammal
    • A01K2227/105—Murine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00—Animals characterised by purpose
    • A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
    • A01K2267/0306—Animal model for genetic diseases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00—Animals characterised by purpose
    • A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
    • A01K2267/0393—Animal model comprising a reporter system for screening tests
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • C12N2015/8527—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic for producing animal models, e.g. for tests or diseases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • C12N2015/8527—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic for producing animal models, e.g. for tests or diseases
    • C12N2015/8536—Animal models for genetic diseases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/30—Vector systems comprising sequences for excision in presence of a recombinase, e.g. loxP or FRT
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)

Claims (102)

1. Грызун, содержащий в своем геноме полную или частичную делецию кодирующей последовательности эндогенного гена ретиношизина 1 (Rs1) грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна.
2. Грызун по п. 1, где делеция приводит в результате к отсутствию функционального полипептида RS1, полученного из локуса Rs1.
3. Грызун по п. 1 или 2, где делеция состоит из по меньшей мере экзонов 2–3.
4. Грызун по п. 1 или 2, где делеция состоит из по меньшей мере части экзона 1 и экзонов 2–3.
5. Грызун по любому из пп. 1–4, где локус Rs1 содержит репортерный ген.
6. Грызун по п. 5, где репортерный ген функционально связан с промотором Rs1.
7. Грызун по п. 6, где промотор Rs1 представляет собой эндогенный промотор.
8. Грызун по п. 2, где в локусе Rs1 отсутствует кодирующая часть непосредственно в направлении 3’ от стартового кодона ATG экзона 1, отсутствуют экзоны 2–3 и содержится кодирующая последовательность репортерного гена, которая слита внутри рамки считывания со стартовым кодоном (ATG) гена Rs1.
9. Грызун по любому из пп. 5–8, где репортерный ген представляет собой lacZ или ген, кодирующий белок, выбранный из группы, состоящей из люциферазы, зеленого флуоресцентного белка (GFP), усиленного GFP (eGFP), голубого флуоресцентного белка (CFP), желтого флуоресцентного белка (YFP), усиленного желтого флуоресцентного белка (eYFP), синего флуоресцентного белка (BFP), усиленного синего флуоресцентного белка (eBFP), DsRed и MmGFP.
10. Грызун по любому из пп. 5–9, где паттерн экспрессии репортерного гена схож с паттерном экспрессии гена Rs1 грызуна дикого типа в эндогенном локусе Rs1 грызуна у животного дикого типа, отличного от человека.
11. Грызун по п. 1, где грызун представляет собой самца грызуна.
12. Грызун по п. 1, где грызун представляет собой самку грызуна.
13. Грызун по п. 12, где грызун является гомозиготным по делеции.
14. Грызун по п. 12, где грызун является гетерозиготным по делеции.
15. Грызун, геном которого содержит сконструированный ген Rs1, при этом сконструированный ген Rs1 содержит одну или более точечных мутаций в экзоне и кодирует полипептид RS1, имеющий по меньшей меру одну аминокислотную замену по сравнению с полипептидом RS1 дикого типа.
16. Грызун по п. 15, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену в сигнальной последовательности.
17. Грызун по п. 16, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену гидрофобного остатка пролином или гидрофильным или заряженным остатком.
18. Грызун по п. 15, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену в области RS1 или C-концевом сегменте, фланкирующих дискоидиновый домен.
19. Грызун по п. 18, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену цистеина в положении, выбранном из группы, состоящей из 38, 40, 59 и 223.
20. Грызун по п. 19, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену C59S.
21. Грызун по п. 15, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену в дискоидиновом домене.
22. Грызун по п. 21, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену цистеина в положении, выбранном из группы, состоящей из 63, 83, 110, 142 и 219.
23. Грызун по п. 21, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену остатка, отличного от цистеина, в дискоидиновом домене цистеином.
24. Грызун по п. 23, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену R141C.
25. Грызун по п. 21, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену в дискоидиновом домене заряженного остатка незаряженным остатком, незаряженного остатка заряженным остатком или заряженного остатка остатком с противоположным зарядом.
26. Грызун по п. 21, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену в дискоидиновом домене посредством вставки или удаления пролина.
27. Грызун по п. 21, где по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой замену в дискоидиновом домене посредством вставки или удаления полярного остатка.
28. Грызун по любому из пп. 15–27, где сконструированный ген Rs1 дополнительно содержит один или более маркеров отбора.
29. Грызун по любому из пп. 15–27, где сконструированный ген Rs1 дополнительно содержит один или более сайтов распознавания для сайт-специфической рекомбиназы.
30. Грызун по п. 29, где сконструированный ген Rs1 дополнительно содержит ген рекомбиназы и маркер отбора, фланкированный одним или более сайтами распознавания для сайт-специфической рекомбиназы, при этом сайты распознавания для сайт-специфической рекомбиназы ориентированы для направления вырезания.
31. Грызун по п. 30, где ген рекомбиназы функционально связан c промотором, который управляет экспрессией гена рекомбиназы в дифференцированных клетках и не управляет экспрессией гена рекомбиназы в недифференцированных клетках.
32. Грызун по п. 20 или 21, где промотор представляет собой или содержит SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31 или SEQ ID NO:32.
33. Грызун по любому из пп. 15–32, где сконструированный ген Rs1 находится в эндогенном локусе Rs1 грызуна.
34. Грызун по п. 33, где точечные мутации находятся в экзоне эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна.
35. Грызун по любому из пп. 33, 34, где грызун представляет собой самца грызуна.
36. Грызун по любому из пп. 33, 34, где грызун представляет собой самку грызуна.
37. Грызун по п. 36, где грызун является гомозиготным по сконструированному генуRs1.
38. Грызун по п. 36, где грызун является гетерозиготным по сконструированному гену Rs1.
39. Грызун, у которого экспрессируется полипептид RS1, включающий замену C59S или R141C.
40. Грызун по любому из предыдущих пунктов, где у грызуна развиваются один или более симптомов ретиношизиса необязательно к 15, 18, 21 или 24 дням после рождения.
41. Грызун по любому из предыдущих пунктов, где грызун представляет собой крысу или мышь.
42. Выделенная клетка или ткань грызуна, геном которых содержит
(i) полную или частичную делецию кодирующей последовательности эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна или
(ii) сконструированный ген Rs1, содержащий одну или более точечных мутаций в экзоне и кодирующий полипептид RS1, имеющий одну или более аминокислотных замен.
43. Иммортализированная клетка, полученная из выделенной клетки грызуна по п. 42.
44. Эмбриональная стволовая клетка (ES) грызуна, геном которой содержит
(i) полную или частичную делецию кодирующей последовательности эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна или
(ii) сконструированный ген Rs1, содержащий одну или более точечных мутаций в экзоне и кодирующий полипептид RS1, имеющий одну или более аминокислотных замен.
45. Эмбрион грызуна, полученный из эмбриональной стволовой клетки по п. 44.
46. Набор, содержащий грызуна по любому из пп. 1–41, выделенную клетку грызуна по п. 42, иммортализированную клетку по п. 43, эмбриональную стволовую клетку грызуна по п. 44 или эмбрион грызуна по п. 45.
47. Способ получения генетически модифицированного грызуна, предусматривающий
модифицирование генома грызуна таким образом, что модифицированный геном содержит
(i) полную или частичную делецию кодирующей последовательности эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна или
(ii) сконструированный ген Rs1, который кодирует полипептид RS1, имеющий аминокислотную замену; и
получение генетически модифицированного грызуна, содержащего модифицированный геном.
48. Способ по п. 47, где геном грызуна модифицируют посредством способа, предусматривающего
(a) введение последовательности нуклеиновой кислоты в геном ES-клетки грызуна с получением генетически модифицированной ES-клетки грызуна, геном которой содержит делецию согласно (i) или сконструированный ген Rs1 согласно (ii); и
(b) создание грызуна с применением генетически модифицированной ES-клетки грызуна согласно (a).
49. Способ по п. 48, где сконструированный ген Rs1 образуется в результате введения последовательности нуклеиновой кислоты в геном ES-клетки грызуна, при котором создается точечная мутация в экзоне эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна.
50. Способ по п. 49, где третий экзон эндогенного гена Rs1 грызуна подвергают мутации для кодирования полипептида RS1, который включает замену C59S.
51. Способ по п. 49, где пятый экзон эндогенного гена Rs1 грызуна подвергают мутации для кодирования полипептида RS1, который включает замену R141C.
52. Способ по п. 48, где делеция состоит из части экзона 1 и экзонов 2–3 кодирующей последовательности гена Rs1 в локусе Rs1.
53. Способ по любому из пп. 48–52, где последовательность нуклеиновой кислоты дополнительно содержит один или более маркеров отбора.
54. Способ по любому из пп. 48–53, где последовательность нуклеиновой кислоты дополнительно содержит один или более сайтов распознавания для сайт-специфической рекомбиназы.
55. Способ по п. 54, где последовательность нуклеиновой кислоты дополнительно содержит ген рекомбиназы и маркер отбора, фланкированный одним или более сайтами распознавания для сайт-специфической рекомбиназы, при этом сайты распознавания для сайт-специфической рекомбиназы ориентированы для направления вырезания.
56. Способ по п. 55, где последовательность нуклеиновой кислоты дополнительно содержит репортерный ген, который находится ниже маркера отбора.
57. Способ по п. 55 или 56, где ген рекомбиназы функционально связан с промотором, который является регулируемым в процессе развития.
58. Способ по п. 57, где промотор представляет собой или содержит SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:31 или SEQ ID NO:32.
59. Способ по п. 52, где локус Rs1, содержащий делецию, дополнительно содержит репортерный ген.
60. Способ по п. 59, где репортерный ген функционально связан с промотором Rs1 грызуна.
61. Способ по п. 60, где промотор Rs1 грызуна представляет собой эндогенный промотор Rs1 в локусе Rs1.
62. Способ по любому из пп. 59–61, где делеция состоит из нуклеотидов, начинающихся непосредственно после стартового кодона ATG в экзоне 1 до последних шести нуклеотидов экзона 3 гена Rs1, и где кодирующая последовательность репортерного гена слита внутри рамки считывания со стартовым кодоном (ATG) в экзоне 1 гена Rs1.
63. Способ по любому из пп. 56 или 59–62, где репортерный ген представляет собой lacZ или ген, кодирующий белок, выбранный из группы, состоящей из люциферазы, GFP, eGFP, CFP, YFP, eYFP, BFP, eBFP, DsRed и MmGFP.
64. Способ по любому из пп. 56 или 59–63, где паттерн экспрессии репортерного гена схож с паттерном экспрессии гена Rs1 грызуна дикого типа в эндогенном локусе Rs1 грызуна.
65. Способ по любому из пп. 47–64, где грызун представляет собой самца грызуна.
66. Способ по любому из пп. 47–64, где грызун представляет собой самку грызуна.
67. Способ по п. 66, где грызун является гомозиготным по делеции или сконструированному гену Rs1.
68. Грызун, получаемый способом по любому из пп. 47–67.
69. Способ идентификации терапевтического средства для лечения ретиношизиса у грызуна, при этом способ предусматривает
(a) введение одного или более средств грызуну, геном которого содержит
(i) полную или частичную делецию кодирующей последовательности эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна или
(ii) сконструированный ген Rs1, который кодирует полипептид RS1, имеющий аминокислотную замену;
(b) проведение одного или более анализов для определения того, имеют ли одно или более средств эффект в отношении одного или более признаков, симптомов и/или состояний, ассоциированных с ретиношизисом; и
(c) идентификацию одного или более средств, которые имеют эффект в отношении одного или более признаков, симптомов и/или состояний, ассоциированных с ретиношизисом, в качестве терапевтического средства.
70. Способ идентификации терапевтического средства для лечения заболевания, нарушения или состояния, ассоциированных с глазом, у грызуна, при этом способ предусматривает
(a) введение одного или более средств грызуну, геном которого содержит
(i) полную или частичную делецию кодирующей последовательности эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна или
(ii) сконструированный ген Rs1, который кодирует полипептид RS1, имеющий аминокислотную замену;
(b) проведение одного или более анализов для определения того, имеют ли одно или более средств эффект в отношении одного или более признаков, симптомов и/или состояний, ассоциированных с заболеванием, нарушением или состоянием, ассоциированными с глазом; и
(c) идентификацию одного или более средств, которые имеют эффект в отношении одного или более признаков, симптомов и/или состояний, ассоциированных с заболеванием, нарушением или состоянием, ассоциированными с глазом, в качестве терапевтического средства.
71. Способ по п. 69 или 70, где геном грызуна содержит сконструированный ген Rs1, который кодирует полипептид RS1, имеющий замену C59S.
72. Способ по п. 69 или 70, где геном грызуна содержит сконструированный ген Rs1, который кодирует полипептид RS1, имеющий замену R141C.
73. Способ по п. 69 или 70, где геном грызуна содержит делецию по меньшей мере части экзона 1 и экзонов 2–3 кодирующей последовательности эндогенного гена Rs1 грызуна в эндогенном локусе Rs1 грызуна.
74. Способ по п. 69 или 70, где одно или более средств вводят грызуну при рождении или вскоре после него.
75. Способ по п. 74, где один или более анализов проводят через 15–24 дня после рождения.
76. Способ по любому из пп. 47-67 и 69-75, где грызун представляет собой крысу или мышь.
77. Конструкция на основе нуклеиновой кислоты, содержащая
последовательность нуклеиновой кислоты, подлежащую интеграции в ген Rs1 грызуна в локусе Rs1 грызуна, фланкированную 5’-нуклеотидной последовательностью и 3’-нуклеотидной последовательностью, которые гомологичны нуклеотидным последовательностям в локусе Rs1 грызуна, где интеграция последовательности нуклеиновой кислоты в ген Rs1 грызуна приводит в результате к
(i) полной или частичной делеции кодирующей последовательности гена Rs1 грызуна или
(ii) образованию сконструированного гена Rs1, который кодирует полипептид RS1, имеющий аминокислотную замену.
78. Конструкция на основе нуклеиновой кислоты по п. 77, где последовательность нуклеиновой кислоты содержит репортерный ген, и интеграция последовательности нуклеиновой кислоты приводит в результате к делеции части экзона 1 и экзонов 2–3.
79. Конструкция на основе нуклеиновой кислоты по п. 77, где последовательность нуклеиновой кислоты содержит мутантный экзон Rs1 таким образом, что интеграция последовательности нуклеиновой кислоты в ген Rs1 грызуна приводит в результате к образованию сконструированного гена Rs1, который кодирует полипептид RS1, имеющий аминокислотную замену.
RU2019125818A 2017-02-27 2018-02-26 Модели ретиношизиса на животных, отличных от человека RU2019125818A (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762463872P 2017-02-27 2017-02-27
US62/463,872 2017-02-27
US201762576256P 2017-10-24 2017-10-24
US62/576,256 2017-10-24
PCT/US2018/019721 WO2018157058A1 (en) 2017-02-27 2018-02-26 Non-human animal models of retinoschisis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2019125818A true RU2019125818A (ru) 2021-03-29

Family

ID=61627173

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019125818A RU2019125818A (ru) 2017-02-27 2018-02-26 Модели ретиношизиса на животных, отличных от человека

Country Status (12)

Country Link
US (2) US11064685B2 (ru)
EP (1) EP3585158B1 (ru)
JP (1) JP2020508073A (ru)
KR (1) KR20190122232A (ru)
CN (1) CN110461146A (ru)
AU (1) AU2018224227A1 (ru)
CA (1) CA3053386A1 (ru)
ES (1) ES2953875T3 (ru)
IL (1) IL268621A (ru)
RU (1) RU2019125818A (ru)
SG (1) SG11201907490XA (ru)
WO (1) WO2018157058A1 (ru)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2018224227A1 (en) 2017-02-27 2019-08-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animal models of Retinoschisis
CN111621502B (zh) * 2019-02-28 2023-05-02 武汉纽福斯生物科技有限公司 视网膜劈裂蛋白的编码序列、其表达载体构建及其应用
US20200288683A1 (en) * 2019-03-15 2020-09-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Loss of function rodent model of solute carrier 39 member 5
CN114761563A (zh) * 2019-05-15 2022-07-15 鹿园益生菌和酵素有限公司 诱导型质粒自毁辅助重组
CN112899311B (zh) * 2019-11-19 2023-04-28 上海朗昇生物科技有限公司 一种rs1-ko小鼠模型的构建方法及其应用
US20220331241A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Treatment of x-linked juvenile retinoschisis
CN115851745B (zh) * 2022-10-19 2023-10-27 河南省人民医院 调控Esrrb活性的物质在制备用于干预视网膜劈裂症的产品中的应用
CN115968834A (zh) * 2023-01-20 2023-04-18 北京因诺惟康医药科技有限公司 一种rs1点突变小鼠模型的制备方法及其用途
CN117683779B (zh) * 2024-01-26 2024-04-30 广州嘉检医学检测有限公司 视网膜劈裂症相关的基因突变体及其应用

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5670356A (en) 1994-12-12 1997-09-23 Promega Corporation Modified luciferase
US5874304A (en) 1996-01-18 1999-02-23 University Of Florida Research Foundation, Inc. Humanized green fluorescent protein genes and methods
WO1999005266A2 (en) 1997-07-26 1999-02-04 Wisconsin Alumni Research Foundation Trans-species nuclear transfer
US6586251B2 (en) 2000-10-31 2003-07-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
AUPR451401A0 (en) 2001-04-20 2001-05-24 Monash University A method of nuclear transfer
US7612250B2 (en) 2002-07-29 2009-11-03 Trustees Of Tufts College Nuclear transfer embryo formation method
US20040261141A1 (en) * 2003-04-30 2004-12-23 Weber Bernhard Heinrich Friedrich Animal model for therapy of diseases of the eye
EP2767161B1 (en) 2004-10-19 2018-02-07 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method for generating an non-human animal homozygous for a genetic modification
JP2009502954A (ja) * 2005-07-27 2009-01-29 ユニバーシティ オブ フロリダ リサーチ ファウンデーション，インコーポレイティド タンパク質のミスフォールディングを修正する小分子及びその使用
CN101117633B (zh) 2006-08-03 2011-07-20 上海交通大学附属儿童医院 一种细胞核移植方法
US8354389B2 (en) 2009-08-14 2013-01-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. miRNA-regulated differentiation-dependent self-deleting cassette
ES2655442T3 (es) * 2012-11-05 2018-02-20 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Animales no humanos modificados genéticamente y métodos de uso de los mismos
WO2014130706A1 (en) 2013-02-20 2014-08-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Genetic modification of rats
SI3456831T1 (sl) 2013-04-16 2021-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Ciljna modifikacija podganjega genoma
CN104250656A (zh) * 2013-06-28 2014-12-31 上海人类基因组研究中心 Irtks基因剔除的小鼠模型及其构建方法与应用
KR102138723B1 (ko) * 2013-08-07 2020-07-29 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 Lincrna-결핍 비인간 동물
RU2016133980A (ru) * 2014-01-23 2018-03-01 Экебиа Терапьютикс, Инк. Композиции и способы для лечения заболеваний глаз
AU2018224227A1 (en) 2017-02-27 2019-08-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Non-human animal models of Retinoschisis
CN107287243A (zh) * 2017-06-20 2017-10-24 温州医科大学 一种人源性视网膜劈裂症转基因小鼠模型及其构建方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110461146A (zh) 2019-11-15
US11064685B2 (en) 2021-07-20
IL268621A (en) 2019-10-31
EP3585158B1 (en) 2023-07-05
US12082565B2 (en) 2024-09-10
JP2020508073A (ja) 2020-03-19
ES2953875T3 (es) 2023-11-16
US20180255754A1 (en) 2018-09-13
CA3053386A1 (en) 2018-08-30
EP3585158A1 (en) 2020-01-01
AU2018224227A1 (en) 2019-08-29
WO2018157058A1 (en) 2018-08-30
KR20190122232A (ko) 2019-10-29
SG11201907490XA (en) 2019-09-27
US20210307304A1 (en) 2021-10-07
EP3585158C0 (en) 2023-07-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2019125818A (ru) Модели ретиношизиса на животных, отличных от человека
ES2537239T3 (es) Modelos de animales y moléculas terapéuticas
Borgius et al. A transgenic mouse line for molecular genetic analysis of excitatory glutamatergic neurons
JP4901471B2 (ja) 体細胞核初期化物質のスクリーニング方法
JP2022125255A (ja) ｌｉｎｃＲＮＡ欠失非ヒト動物
RU2676961C2 (ru) Грызуны с условными мутантными аллелями acvr1
JP2001346480A (ja) 透明メダカ
US10412939B2 (en) Rodent model of prostate cancer
JP7203367B2 (ja) 哺乳動物細胞用遺伝子導入ベクター
RU2006114692A (ru) Трансгенные животные, имеющие основные расстройства, связанные с болезнью альцгеймера
Bohic et al. Developmentally determined intersectional genetic strategies to dissect adult sensorimotor function
JP2008220174A (ja) 変異型βシヌクレインとαシヌクレインとを共発現する形質転換細胞及びトランスジェニック非ヒト動物
JP2024539928A (ja) 改変ｃａｃｎｇ１遺伝子座を含む非ヒト動物
US8980627B2 (en) Method for enabling stable expression of transgene
US20220095597A1 (en) Transgenic models for stem cell therapies
KR102100509B1 (ko) 109번째 아미노산이 아이소류신인 제방 들쥐의 프리온 단백질 유전자로 상동재조합된 녹인 생쥐 및 이의 응용
CA3231899A1 (en) Non-human animals comprising a modified cacng1 locus
JPWO2004024911A1 (ja) 運動神経細胞・感覚神経細胞特異的エンハンサー
WO2024026488A2 (en) Non-human animals comprising a modified transferrin receptor locus
Meredith Genetic Models and Transgenics
RU2021126802A (ru) Модель потери функции представителя 5 семейства переносчиков растворенных веществ 39 на грызунах
JP2018057341A (ja) マウス細胞
JP2006325452A (ja) Ｔｚｆ／ｔｚｆ−ｌ遺伝子ノックアウト非ヒト哺乳動物、その作製方法、およびその利用方法
JP2007159473A (ja) 内因性オピオイドペプチド産生ニューロンの可視化に利用可能なトランスジェニック非ヒト動物およびその利用
JP2007151552A (ja) Ｔａａｒ１トランスジェニック動物

Legal Events

Date Code Title Description
FA93 Acknowledgement of application withdrawn (no request for examination)

Effective date: 20210301