RU2017496C1 - Способ выделения натриевой соли днк - Google Patents
Способ выделения натриевой соли днк Download PDFInfo
- Publication number
- RU2017496C1 RU2017496C1 SU4910247A RU2017496C1 RU 2017496 C1 RU2017496 C1 RU 2017496C1 SU 4910247 A SU4910247 A SU 4910247A RU 2017496 C1 RU2017496 C1 RU 2017496C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sodium salt
- isolation
- purification
- dna
- target product
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Изобретение относится к получению биологически активных веществ, а именно к способу получения натриевой соли нативной ДНК, которая может найти применение в химико-фармацевтической промышленности. Целью изобретения является увеличение выхода целевого продукта и сокращение потерь в процессе получения натриевой соли нативной ДНК, сокращение количества этилового спирта, используемого при получении целевого продукта. Сущность способа заключается в том, что в процессе получения натриевой соли ДНК путем обработки гомогената исходного сырья детергентом и высококонцентрированным раствором хлористого натрия, отделения в образовавшейся реакционной массе жидкой фазы и последующих очистки и выделения целевого продукта используют обработку реакционной массы ультразвуком с последующим выделением и очисткой нативной ДНК с помощью баромембранных методов - ультрафильтрации и диафильтрации. Преимуществами предлагаемого способа являются отсутствие стадий пересаждения натриевой соли нативной ДНК, связанное с этим уменьшение потерь и увеличение выхода целевого продукта, значительно меньшее количество используемого при получении натриевой соли нативной ДНК этилового спирта. 1 табл.
Description
Изобретение относится к получению биологически активных веществ, а именно к способу получения натриевой соли нативной ДНК из молок осетровых рыб, эритроцитов крови цыплят селезенки свиньи и др., которая может найти применение в химико-фармацевтической промышленности.
Известен способ получения натриевой соли нативной ДНК, в котором гомогенат исходного сырья обрабатывают детергентом (например, додецилсульфатом натрия) и высококонцентрированным раствором NaCl, отделяют жидкую фазу реакционной смеси от осадка фильтрацией или центрифугированием. Из фильтрата или супернатанта, содержащих натриевую соль ДНК, избыточное количество хлористого натрия, цитрата натрия и балластных органических веществ, двойным переосаждением этиловым спиртом выделяют очищенную соль нативной ДНК [1].
Недостатками указанного способа являются: длительность и усложненность процесса, большой расход этанола, низкий выход основного продукта.
Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ получения нативной ДНК [2].
Недостатками известного способа является медленное растворение ДНК, при осуществлении стадий переосаждения, заметно ухудшающее производительность процесса, увеличивающее потери целевого продукта (до 25%), использование больших количеств этилового спирта на очистку и выделение целевого продукта (на 1 кг натриевой соли нативной ДНК расходуется около 3,5 тонн этилового спирта).
Целью изобретения является увеличение выхода целевого продукта за счет обработки ультразвуком реакционной массы, концентрирования ультрафильтрацией и отмыванием целевого продукта диафильтрацией.
Это достигается тем, что в предлагаемом способе выделения натриевой соли ДНК путем обработки гомогената сырья детергентом и высококонцентрированным раствором хлористого натрия, отделения в образовавшейся реакционной массе жидкой фазы и последующих очистки и выделения целевого продукта используют обработку реакционной массы ультразвуком с последующим выделением и очисткой нативной ДНК с помощью баромембранных методов - ультрафильтрации и диафильтрации.
Отличительными особенностями предлагаемого изобретения от способа прототипа являются использование ультразвуковой обработки реакционной массы и осуществление очистки целевого продукта от избытка солей и балластных веществ диафильтрацией, концентрирование целевого продукта методом ультрафильтрации.
П р и м е р 1. 1 кг замороженных молок осетровых рыб измельчают, гомогенизируют в цитратно-солевом растворе (ССЦ), состоящем из 0,15 М хлористого натрия и 0,015 М цитрата натрия, промывают трижды ядерный материал ССЦ. Отмытый ядерный материал помещают в реактор, куда добавляют ССЦ, 6% раствор додецилсульфата натрия в 45% -ном этиловом спирте, нагревают до 60оС, добавляют равный объем 5 М раствора хлористого натрия, перемешивают, охлаждают до 12-16оС, реакционную массу обрабатывают ультразвуком, отделяют выпавший осадок балластных веществ от раствора ДНК фильтрацией реакционной массы через кизельгур на нутч-фильтре. Фильтрат концентрируют на мембране с размером пор 0,45 мкм (потери ДНК при этом до 3%) и затем отмывают концентрат диафильтрацией на той же мембране до отрицательной реакции на белок в пермеате.
Полученная натриевая соль ДНК имеет следующее характеристики: - содержание белка не более 1,5% - молекулярная масса 450 кДальтон - молекулярный эффект 44% - содержание РНК не более 2% - содержание полисахаридов не более 2%.
П р и м е р 2. 1 кг охлажденной крови цыплят гомогенизируют в ССЦ, промывают трижды ядерный материал раствором ССЦ. Далее как в примере 1.
Полученная натриевая соль ДНК имеет следующие характеристики: - содержание белка не более 1,5% - молекулярная масса 420 кДальтон - гиперхромный эффект 44% - содержание РНК не более 2% - содержание полисахаридов не более 2%.
П р и м е р 3. До стадии концентрирования фильтрата обработка сырья как в примере 1, 2. Концентрирование фильтрата производят на мембранах с размером пор 0,8 мкм. Потери ДНК составляют при этом 23%.
П р и м е р 4. До стадии концентрирования фильтрата - как в примерах 1, 2. Концентрирование фильтрата проводят на мембранах с размером пор 0,05 мкм. Скорость процесса фильтрования уменьшилась в 10 раз.
Ниже приводится сводная таблица с результатами примеров.
Таким образом, предложенный способ выделения натриевой соли ДНК из тканей животного происхождения позволяет получить повышенный выход целевого продукта высокой степени очистки с повышением производительности процесса и уменьшением расхода этанола.
Claims (1)
- СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ НАТРИЕВОЙ СОЛИ ДНК из тканей животного происхождения путем гомогенизации исходного сырья в цитратно-солевом растворе, обработки гомогенета додецил-сульфатом и высококонцентрированным раствором хлористого натрия, прогревания реакционной массы при 60oС, ее охлаждения с последующим выделением и очисткой целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, реакционную смесь обрабатывают ультразвуком, жидкую фазу отделяют, концентрируют ультрафильтрацией на мембранах с диаметром пор 0,05 - 1 мкм и концентрат, содержащий целевой продукт, отмывают диафильтрацией.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4910247 RU2017496C1 (ru) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | Способ выделения натриевой соли днк |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4910247 RU2017496C1 (ru) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | Способ выделения натриевой соли днк |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2017496C1 true RU2017496C1 (ru) | 1994-08-15 |
Family
ID=21559976
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU4910247 RU2017496C1 (ru) | 1990-12-28 | 1990-12-28 | Способ выделения натриевой соли днк |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2017496C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0818202A4 (en) * | 1994-09-29 | 2000-05-10 | Npp Farmek | DNA-RNA HYBRID AND DNA PREPARATION, PROCESSES FOR OBTAINING THE SAME AND PREPARATION THEREOF FROM STURGEON MILK, AND PHARMACEUTICAL COMPOUND BASED ON THE DNA-RNA HYBRID |
WO2008054247A1 (fr) * | 2006-11-03 | 2008-05-08 | Elli Nikolaevna Kaplina | Procédé de production d'un immunomodulateur apyrogénique |
-
1990
- 1990-12-28 RU SU4910247 patent/RU2017496C1/ru active
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
1. Авторское свидетельство СССР N 780444, кл. C 07D 13/06, 1985. * |
2. Авторское свидетельство СССР N 487897, кл. C 07D 7/026, 1975. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0818202A4 (en) * | 1994-09-29 | 2000-05-10 | Npp Farmek | DNA-RNA HYBRID AND DNA PREPARATION, PROCESSES FOR OBTAINING THE SAME AND PREPARATION THEREOF FROM STURGEON MILK, AND PHARMACEUTICAL COMPOUND BASED ON THE DNA-RNA HYBRID |
WO2008054247A1 (fr) * | 2006-11-03 | 2008-05-08 | Elli Nikolaevna Kaplina | Procédé de production d'un immunomodulateur apyrogénique |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5210186A (en) | Method for recovery and separation of chitin, proteins and astaxanthin and esters thereof | |
JP2000273102A (ja) | コンドロイチン硫酸の分離精製方法 | |
RU2409291C1 (ru) | Способ получения водорастворимого полипептидного комплекса из печени рыб лососевых пород | |
CN108203566A (zh) | 一种碱法制备药用明胶的工艺 | |
RU2017496C1 (ru) | Способ выделения натриевой соли днк | |
FR2625412A1 (fr) | Procede continu d'obtention de gelatine a partir de poudre d'os et gelatine obtenue | |
RU2415125C1 (ru) | Способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров | |
JPH1149972A (ja) | 殻廃棄物からアスタキサンチン及びキトーサンを同時に生成する方法 | |
KR20190065935A (ko) | 마린 콜라겐의 대량생산을 위한 고순도 정제방법 | |
RU2005724C1 (ru) | Способ производства натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты из животного сырья и установка для его осуществления | |
RU2041885C1 (ru) | Способ получения порошка натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты из молок рыб | |
RU2488634C1 (ru) | Способ получения днк из молок лососевых рыб | |
RU2305548C1 (ru) | Способ комплексной переработки плоских морских ежей | |
RU2055837C1 (ru) | Способ получения стерильного раствора натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты | |
RU2457229C1 (ru) | Способ производства желатина | |
RU2298939C2 (ru) | Способ выделения белков из клеток костного мозга | |
RU2049472C1 (ru) | Способ получения гидролизата мозговой ткани "церебролизат" | |
CN111926050A (zh) | 河豚精囊胶原蛋白肽的提纯工艺 | |
RU2189990C1 (ru) | Способ получения высокоочищенного агара и агарозы из красной водоросли анфельции тобучинской | |
RU2352634C1 (ru) | Способ получения ферментного препарата из рыбного сырья | |
RU2467068C1 (ru) | Способ производства молокосвертывающего ферментного препарата | |
RU2034028C1 (ru) | Способ получения протеолитического комплекса | |
DK166504B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af et heparinholdigt raamateriale ud fra heparinholdige animalske organer | |
RU2726615C1 (ru) | Способ выделения белков из костного мозга животных | |
RU2139068C1 (ru) | Способ выделения натриевой соли днк из тканей животного происхождения |