RU2017141790A - Способ ферментативного получения модифицированных ДНК для создания реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений - Google Patents
Способ ферментативного получения модифицированных ДНК для создания реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений Download PDFInfo
- Publication number
- RU2017141790A RU2017141790A RU2017141790A RU2017141790A RU2017141790A RU 2017141790 A RU2017141790 A RU 2017141790A RU 2017141790 A RU2017141790 A RU 2017141790A RU 2017141790 A RU2017141790 A RU 2017141790A RU 2017141790 A RU2017141790 A RU 2017141790A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- deoxyuridine
- triphosphate
- aza
- oxo
- dna
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/073—Pyrimidine radicals with 2-deoxyribosyl as the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1096—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA cDNA Synthesis; Subtracted cDNA library construction, e.g. RT, RT-PCR
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
- C12P19/28—N-glycosides
- C12P19/30—Nucleotides
- C12P19/34—Polynucleotides, e.g. nucleic acids, oligoribonucleotides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
Claims (84)
1. Способ ферментативного получения модифицированных ДНК для создания реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений, включающий последовательные стадии:
(а) - органический синтез мономеров - модифицированных трифосфатов дезоксиуридина, содержащих на гетероциклическом основании специальным образом сконструированные функциональные группы, способные специфично связываться с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений;
(б) - органический синтез немодифицированной одноцепочечной ДНК с заданной последовательностью, зависящей от задач исследования;
(в) - органический синтез высокоспецифичных фланкирующих праймеров для ферментативной амплификации немодифицированной одноцепочечной ДНК;
(г) - ферментативную амплификацию синтетической немодифицированной ДНК с целью наработки необходимого ее количества для последующего введения модифицированных нуклеотидов, с применением полимеразной цепной реакции;
(д) - органический синтез высокоспецифичного праймера, содержащего по 5'-концу биотин для последующего разделения цепей двухцепочечной ДНК;
(е) - проведение, в зависимости от задач исследования, полимеразной цепной реакции либо транскрипции либо обратной транскрипции либо реакции удлинения праймера, с применением амплифицированной ДНК, фланкирующих праймеров и модифицированного трифосфата дезоксиуридина;
(ж) - получение одноцепочечной модифицированной ДНК с использованием модифицированного трифосфата дезоксиуридина с целью создания реагента, способного специфично связываться с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений.
2. Способ по п. 1, в котором в качестве реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений, выступают фрагменты ДНК с заранее заданной фиксированной нуклеотидной последовательностью;
3. Способ по п. 1, в котором в качестве реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений, выступают фрагменты ДНК с т.н. «вырожденным» участком последовательности -полным перебором четырех нуклеотидов - аденина, гуанина, цитидина и одного из модифицированных производных дезоксиуридина (а), для создания аптамеров, модифицированных аптамеров, сомамеров;
4. Способ по п. 1, в котором реагенты в соответствии с п.п. 2 и 3 способны связываться с гидрофобными участками белков, полипептидов, пептидогликанов, гликопротеинов, углеводородов, липосом, липидных мембран, двусторонних липидных мембран;
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что химически-модифицированное азотистое основание представляет собой производное трифосфата дезоксиуридина с характерными для белков функциональными группами, связанными с азотистым основанием через транс-алкеновые линкеры различной длины (а).
6. Соединения по п. 5 общей формулы 
где:
n=1-3
М+ представляет собой Н+, Na+, Li+, К+, [CH3(CH2)×](4-y)NHy+ (где х=0-5, у=0-4).
7. Соединения по п. 6, представляющие собой
тетранатриевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-(1Н-индол-3-ил)гекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракалиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-(1Н-индол-3-ил)гекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин- 5'-трифосфата
тетралитиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-(1Н-индол-3-ил)гекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетрааммониевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-(1Н-индол-3-ил)гекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'трифосфата
тетракис(триэтиламмониевую) 5-[4-аза-5-оксо-6-(1Н-индол-3-ил)гекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата соль
тетранатриевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-(1Н-индол-3-ил)гепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракалиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-(1Н-индол-3-ил)гепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетралитиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-(1Н-индол-3-ил)гепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетрааммониевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-(1Н-индол-3-ил)гепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракис(триэтиламмониевую) соль 5-[4-аза-5-оксо-7-(1Н-индол-3-ил)гепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетранатриевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-(1Н-индол-3-ил)окт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракалиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-(1Н-индол-3-ил)окт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетралитиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-(1Н-индол-3-ил)окт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'трифосфата
тетрааммониевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-(1Н-индол-3-ил)окт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракис(триэтиламмониевую) соль 5-[4-аза-5-оксо-8-(1Н-индол-3-ил)окт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'трифосфата
8. Соединения по п. 5 общей формулы 
где:
m=1-3
М+ представляет собой Н+, Na+, Li+, К+, [CH3(CH2)×](4-y)NHy+ (где х=0-5, у=0-4).
9. Соединения по п. 8, представляющие собой
тетранатриевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-фенилгекс-1-ен-1-ил)]-2'-
дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракалиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-фенилгекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетралитиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-фенилгекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетрааммониевую соль 5-[4-аза-5-оксо-6-фенилгекс-1-ен-1-ил)]-2'-
дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракис(триэтиламмониевую) соль 5-[4-аза-5-оксо-6-фенилгекс-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетранатриевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-фенилгепт-1-ен-1-ил)]-2'-
дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракалиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-фенилгепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетралитиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-фенилгепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетрааммониевую соль 5-[4-аза-5-оксо-7-фенилгепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракис(триэтиламмониевую) соль 5-[4-аза-5-оксо-7-фенилгепт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетранатриевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-фенилокт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракалиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-фенилокт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетралитиевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-фенилокт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетрааммониевую соль 5-[4-аза-5-оксо-8-фенилокт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата
тетракис(триэтиламмониевую) соль 5-[4-аза-5-оксо-8-фенилокт-1-ен-1-ил)]-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфата.
10. Способ по п. 1, включающий органический синтез немодифицированной ДНК в зависимости от задач исследования (б). В качестве немодифицированной ДНК может выступать i) вырожденная комбинаторная библиотека для получения аптамеров, ii) индивидуальная нуклеотидная последовательность, предварительно охарактеризованная по способности специфично связываться с гидрофобными участками определенного индивидуального высокомолекулярного органического соединения.
11. Соединение по п. 10, представляющее собой фрагмент ДНК с заданной фиксированной последовательностью (i):
5'-GGGTGGTCTGTGTGCAAAACTAAAGAGACGACGAGCGGGAAAAAA-3'.
12. Соединение по п. 10, представляющее собой фрагмент ДНК представленной ниже последовательности (ii), а именно вырожденную «рандомную» комбинаторную ДНК-библиотеку:
CTGTCAGCTCCATACTGGTAGCC-(N)40-GCGTTCGAATCTAGACGGTACGA
, где N - комбинация нуклеотидов А, Т, G, С.
13. Способ по п. 1, включающий синтез высокоспецифичных праймеров для ферментативной амплификации синтетической немодифицированной ДНК (в). Нуклеотидные последовательности праймеров выбираются в зависимости от поставленной задачи и выбранной последовательности синтетической немодифицированной ДНК.
14. Олигонуклеотиды по п. 13, представляющие собой праймеры для ферментативной амплификации фрагмента ДНК, характеризованной в п. 11, которые характеризуются приведенными ниже последовательностями:
5'-TCCCGCTCGTCGTCT-3' (3'-праймер)
5'-GGGTGGTCTGTGTGC-3' (5'-праймер).
15. Олигонуклеотиды по п. 13, представляющие собой праймеры для ферментативной амплификации фрагмента ДНК, характеризованной в п. 12, которые характеризуются приведенными ниже последовательностями:
5'-CTGTCAGCTCCATACTGGTAGCC-3' (3'-праймер)
5'-TCGTACCGTCTAGATTCGAACGC-3' (5'-праймер).
16. Способ по п. 1., отличающийся тем, что необходимое для осуществления модификации количество ДНК получают путем ферментативной амплификации синтетической немодифицированной ДНК (г) методом полимеразной цепной реакции с использованием в качестве матриц ДНК, характеризованных в п. 11 либо в п. 12, с применением праймеров, характеризованных в п. 14 либо в п. 15.
17. Способ по п. 1, в котором производится синтез высокоспецифичного праймера, содержащего биотин для разделения двухцепочечной ДНК, получаемой в процессе проведения реакции удлинения праймера с модифицированными трифосфатами дезоксиуридина (д). Нуклеотидная последовательность праймера выбирается в зависимости от поставленной задачи и выбранной последовательности синтетической немодифицированной ДНК.
18. Олигонуклеотид по п. 17, представляющий собой праймеры, содержащий по 5'-концу биотин, характеризующийся приведенной ниже последовательностью:
5'-биотин-TCCCGCTCGTCGTCT-3' (3'-праймер)
19. Олигонуклеотид по п. 17, представляющий собой праймеры, содержащий по
5'-концу биотин, характеризующийся приведенной ниже последовательностью:
5'-биотин-CTGTCAGCTCCATACTGGTAGCC-3' (3'-праймер)
20. Способ по п. 1, отличающийся тем, что модификация в ДНК вводится посредством полимеразной цепной реакции либо транскрипции либо обратной транскрипции либо реакции удлинения праймера, с использованием каждого индивидуального модифицированного трифосфата дезоксиуридина, из характеризованных в п.п. 5-9, в каждой отдельной ферментативной реакции (е). В результате получают индивидуальные модифицированные продукты, при этом выбор трифосфата дезоксиуридина для модификации производят в зависимости от поставленных задач.
21. Способ по п. 20, включающий применение специальных ДНК-полимераз, способных встраивать модифицированные трифосфаты дезоксиуридина. Выбор индивидуальной полимеразы зависит от характеристик и субстратной эффективности индивидуального модифицированного трифосфата дезоксиуридина.
22. Способ по п. 20, отличающийся тем, что в качестве полимеразы нуклеиновой кислоты используют Taq ДНК-полимеразу.
23. Способ по п. 20, отличающийся тем, что в качестве полимеразы нуклеиновой кислоты используют Deep Vent ДНК-полимеразу.
24 Способ по п. 20, отличающийся тем, что в качестве полимеразы нуклеиновой кислоты используют KOD XL ДНК-полимеразу.
25. Способ по п. 1, отличающийся тем, что получение одноцепочечной модифицированной ДНК с использованием модифицированного трифосфата дезоксиуридина с целью создания реагента, способного специфично связываться с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений, производят на магнитных микрочастицах, способных взаимодействовать с праймером, содержащим биотин (ж).
26. Способ по п.п. 20 и 25, характеризующийся тем, что получаемая ДНК содержит индивидуальный модифицированный трифосфат дезоксиуридина лишь на цепи, полученной посредством удлинения праймера, содержащего биотин.
27. Способ по п.п. 25 и 26, отличающийся тем, что для выделения одноцепочечной ДНК с высокой степенью модификации используются магнитные частицы с ковалентно-пришитыми к их поверхности молекулами стрептавидина.
28. Способ по п.п. 1 и 26, в котором для взаимодействия с гидрофобными группами высокомолекулярных соединений предназначена только цепь ДНК, содержащая индивидуальный модифицированный нуклеотид. Немодифицированная цепь ДНК не предназначена для дальнейшего использования и исключается из последующего специфического взаимодействия с высокомолекулярным органическим соединением. Получаемая в результате применения способа одноцепочечная модифицированная ДНК предназначена в зависимости от задач исследования для дальнейшего получения ДНК-зондов, аптамеров и сомамеров, использующихся в молекулярно-биологических исследованиях и в медицинской диагностике.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017141790A RU2699522C2 (ru) | 2017-11-30 | 2017-11-30 | Способ ферментативного получения модифицированных ДНК для создания реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017141790A RU2699522C2 (ru) | 2017-11-30 | 2017-11-30 | Способ ферментативного получения модифицированных ДНК для создания реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017141790A3 RU2017141790A3 (ru) | 2019-05-31 |
| RU2017141790A true RU2017141790A (ru) | 2019-05-31 |
| RU2699522C2 RU2699522C2 (ru) | 2019-09-05 |
Family
ID=66792943
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017141790A RU2699522C2 (ru) | 2017-11-30 | 2017-11-30 | Способ ферментативного получения модифицированных ДНК для создания реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2699522C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2734941C2 (ru) * | 2018-12-19 | 2020-10-26 | Общество с ограниченной ответственностью "ИБМХ-ЭкоБиоФарм" (ООО "ИБМХ-ЭкоБиоФарм") | Способ получения модифицированных комбинаторных ДНК библиотек методом твердофазной реакции удлинения праймера на ПЭТ-микрочастицах |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5998142A (en) * | 1993-09-08 | 1999-12-07 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: chemi-SELEX |
| US6458539B1 (en) * | 1993-09-17 | 2002-10-01 | Somalogic, Inc. | Photoselection of nucleic acid ligands |
| AU2001278783B2 (en) * | 2000-08-23 | 2006-04-27 | Takara Bio Inc. | Method of amplifying nucleic acid |
| US7947447B2 (en) * | 2007-01-16 | 2011-05-24 | Somalogic, Inc. | Method for generating aptamers with improved off-rates |
| RU2410432C1 (ru) * | 2009-11-23 | 2011-01-27 | Государственное учреждение Научно-исследовательский институт физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова | Модифицированные днк аптамеры, ингибирующие активность тромбина |
| RU2604198C1 (ru) * | 2015-06-22 | 2016-12-10 | Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) | Способ получения гетерогенного набора одноцепочечных фрагментов днк для мультиплексного генетического анализа |
-
2017
- 2017-11-30 RU RU2017141790A patent/RU2699522C2/ru active
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2734941C2 (ru) * | 2018-12-19 | 2020-10-26 | Общество с ограниченной ответственностью "ИБМХ-ЭкоБиоФарм" (ООО "ИБМХ-ЭкоБиоФарм") | Способ получения модифицированных комбинаторных ДНК библиотек методом твердофазной реакции удлинения праймера на ПЭТ-микрочастицах |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2699522C2 (ru) | 2019-09-05 |
| RU2017141790A3 (ru) | 2019-05-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3085409B2 (ja) | 標的核酸配列の検出方法およびそのための試薬キット | |
| EP0618966B1 (fr) | Procede de preparation d'arn double-brin, et ses applications | |
| JP2017527313A5 (ru) | ||
| CN102753707A (zh) | 用随机引物和特异性引物的混合物等温扩增核酸 | |
| CN110050067A (zh) | 产生经扩增的双链脱氧核糖核酸的方法以及用于所述方法的组合物和试剂盒 | |
| JP2010537643A (ja) | 代替的な核酸配列決定法 | |
| JP2014057599A (ja) | ライゲーション増幅 | |
| KR890701764A (ko) | 표적 뉴클레오티드 서열의 선택적 증식 | |
| CN103328654A (zh) | 立足点引物双链体的组合物及其使用方法 | |
| JPH048293A (ja) | ライゲーシヨン可能なヘアピンプローブ及びその転写を用いた核酸の増巾方法 | |
| JP2021094038A (ja) | 核酸を調製するための等温方法および関連組成物 | |
| Del Río et al. | Electrochemical detection of Piscirickettsia salmonis genomic DNA from salmon samples using solid-phase recombinase polymerase amplification | |
| EP2733221B1 (en) | "Dual-hybridization" polynucleotides and uses thereof | |
| EP2867366A2 (en) | Kit for isothermal dna amplification starting from an rna template | |
| JP6971276B2 (ja) | クランプオリゴヌクレオチドを利用する核酸増幅方法 | |
| Mei et al. | Synthesis and polymerase activity of a fluorescent cytidine TNA triphosphate analogue | |
| JP5735213B2 (ja) | 核酸分子の作製法 | |
| TW201840855A (zh) | 用於無模板酶促核酸合成的組成物及方法 | |
| WO2017096492A1 (en) | Nucleic acid catenane with a linking duplex biosensor for detection of a microorganism target | |
| RU2017141790A (ru) | Способ ферментативного получения модифицированных ДНК для создания реагентов, специфично связывающихся с гидрофобными участками высокомолекулярных органических соединений | |
| Lapa et al. | Preparation of modified combinatorial DNA libraries via emulsion PCR with subsequent strand separation | |
| KR20140027814A (ko) | 시료 중 ｒｎａ로부터 ｄｎａ를 증폭하는 방법 | |
| US11072822B2 (en) | RNA amplification method, RNA detection method and assay kit | |
| Lapa et al. | Enzymatic preparation of modified DNA: study of the kinetics by real-time PCR | |
| RU2736969C1 (ru) | Способ определения субстратной совместимости модифицированных трифосфатов дезоксиуридина и днк-полимераз сочетанием методов количественной пцр и электрофореза |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20200318 Effective date: 20200318 |