RU2017116800A

RU2017116800A - Инсектицидные полипептиды с широким спектром активности и их применения

Info

Publication number: RU2017116800A
Application number: RU2017116800A
Authority: RU
Inventors: Лань Чжоу; Томас Чэд УОЛФ; Цзимэй ВАН; Сяомэй Ши; Сью Б. Ло; Деидре М. КАПКА-КИТЦМАН; Хуа Дун; Андре Р. Абад
Original assignee: Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк.
Priority date: 2014-10-16
Filing date: 2015-10-09
Publication date: 2018-11-19
Also published as: CA2963608A1; US20170233439A1; WO2016060948A1; BR112017007930A2; CN106793783A

Claims

1. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, выбранная из группы, состоящей из:

(a) молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 3 или комплементарной ей последовательности полной длины;

(b) молекулы нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4;

(c) молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4; и

(d) молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4.

2. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п. 1, где указанная нуклеотидная последовательность представляет собой синтетическую последовательность, которая была сконструирована для экспрессии в растении.

3. ДНК-конструкция, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по п. 1, функционально связанную с гетерологичным регуляторным элементом.

4. ДНК-конструкция по п. 3, которая дополнительно содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую гетерологичный полипептид.

5. Клетка-хозяин, которая содержит ДНК-конструкцию по п. 3.

6. Клетка-хозяин по п. 5, которая представляет собой бактериальную клетку.

7. Клетка-хозяин по п. 5, которая представляет собой растительную клетку.

8. Трансгенное растение, содержащее клетку-хозяина по п. 7.

9. Трансгенное растение по п. 8, где указанное растение выбрано из группы, состоящей из маиса, сорго, пшеницы, капусты, подсолнечника, томата, крестоцветных, разновидностей перца, картофеля, хлопчатника, риса, сои, сахарной свеклы, сахарного тростника, табака, ячменя и масличного рапса.

10. Трансформированное семя растения по п. 9, где семя содержит указанную ДНК-конструкцию.

11. Выделенный полипептид, выбранный из группы, состоящей из:

(a) полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4;

(b) полипептида, кодируемого нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 3;

(c) полипептидной последовательности, по меньшей мере на 90% идентичной полипептидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4, где полипептид обладает инсектицидной активностью, и

(d) полипептидной последовательности, по меньшей мере на 95% идентичной полипептидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4, где полипептид обладает инсектицидной активностью.

12. Композиция, содержащая полипептид по п. 11.

13. Композиция по п. 12, где указанная композиция выбрана из группы, состоящей из порошка, дуста, пеллеты, гранулы, распыляемого раствора, эмульсии, коллоидного вещества и раствора.

14. Композиция по п. 13, где указанная композиция получена путем высушивания, лиофилизации, гомогенизации, экстракции, фильтрации, центрифугирования, осаждения или концентрирования культуры клеток Bacillus thuringiensis.

15. Композиция по п. 13, содержащая от 1% до 99% по весу указанного полипептида.

16. Способ контроля популяции чешуекрылого или жесткокрылого вредителя, предусматривающий контакт указанной популяции с пестицидно эффективным количеством полипептида по п. 11.

17. Способ уничтожения чешуекрылого вредителя, предусматривающий контакт указанного вредителя с пестицидно эффективным количеством полипептида по п. 11 или питание указанного вредителя им.

18. Способ получения полипептида с пестицидной активностью, предусматривающий культивирование клетки-хозяина по п. 5 в условиях, при которых экспрессируется молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид, причем указанный полипептид выбран из группы, состоящей из:

(c) полипептидной последовательности, по меньшей мере на 90% идентичной полипептидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4; и

(d) полипептидной последовательности, по меньшей мере на 95% идентичной полипептидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4.

19. Растение со стабильно встроенной в его геном ДНК-конструкцией, содержащей нуклеотидную последовательность, которая кодирует белок, обладающий пестицидной активностью, где указанная нуклеотидная последовательность выбрана из группы, состоящей из:

(a) молекулы нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 3, или ee комплемента полной длины;

(c) нуклеотидной последовательности, кодирующей полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4, где полипептид обладает инсектицидной активностью, и

(d) нуклеотидной последовательности, кодирующей полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4, где полипептид обладает инсектицидной активностью,

где указанная нуклеотидная последовательность функционально связана с промотором, который управляет экспрессией кодирующей последовательности в растительной клетке.

20. Растение по п. 19, где указанное растение представляет собой растительную клетку.

21. Способ защиты растения от вредителя, предусматривающий введение в указанное растение или его клетку по меньшей мере одного вектора экспрессии, содержащего нуклеотидную последовательность, которая кодирует пестицидный полипептид, где указанная нуклеотидная последовательность выбрана из группы, состоящей из:

(d) нуклеотидной последовательности, кодирующей полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 4, где полипептид обладает инсектицидной активностью.

22. Способ по п. 21, где указанное растение продуцирует пестицидный полипептид, обладающий инсектицидной активностью в отношении чешуекрылого вредителя.