RU2009123458A - GENETIC ABLATION OF CELLS CARRYING A PRP GENE USING THE STRATEGY OF A DIRECTED PROMOTION TRAPS FOR OBTAINING SERUM-FREE TRANSPORT RECOMBINANT PROTEINS AS A THERAPY - Google Patents

GENETIC ABLATION OF CELLS CARRYING A PRP GENE USING THE STRATEGY OF A DIRECTED PROMOTION TRAPS FOR OBTAINING SERUM-FREE TRANSPORT RECOMBINANT PROTEINS AS A THERAPY Download PDF

Info

Publication number
RU2009123458A
RU2009123458A RU2009123458/10A RU2009123458A RU2009123458A RU 2009123458 A RU2009123458 A RU 2009123458A RU 2009123458/10 A RU2009123458/10 A RU 2009123458/10A RU 2009123458 A RU2009123458 A RU 2009123458A RU 2009123458 A RU2009123458 A RU 2009123458A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
prp
cell line
cells
human
free
Prior art date
Application number
RU2009123458/10A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Карола ШРЕДЕР (DE)
Карола ШРЕДЕР
Элизабет КАЗАДЕМУНД (DE)
Элизабет КАЗАДЕМУНД
Ким БЬЕРНСТРУП (CH)
Ким БЬЕРНСТРУП
Original Assignee
Октагене Гмбх (De)
Октагене Гмбх
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Октагене Гмбх (De), Октагене Гмбх filed Critical Октагене Гмбх (De)
Publication of RU2009123458A publication Critical patent/RU2009123458A/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0684—Cells of the urinary tract or kidneys
    • C12N5/0686—Kidney cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • C12N2500/92—Medium free of human- or animal-derived components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • C12N2500/95—Protein-free medium and culture conditions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C12N2510/02—Cells for production

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Свободная от прионного белка (PrP), бессмертная, соматическая клеточная линия человека, в которой полностью удалены оба аллеля гена PrP. ! 2. Клеточная линия по п.1, ! (i) которую можно трансфицировать или культивировать в бессывороточных условиях, и/или (ii) которая имеет встроенные аденовирусные последовательности в своем геноме, и/или (iii) которая получена из исходной клетки, выбранной из группы клеток почки, мочевого пузыря, печени, легкого, сердечной мышцы, гладкой мускулатуры, яичника и желудочно-кишечного тракта, предпочтительной исходной клеткой является линия клеток почки человека, и/или (iv) которая подходит для получения рекомбинантных белков. ! 3. Клеточная линия по п.2, в которой клетки почки являются клетками почки человеческого эмбриона, предпочтительно клетки почки эмбриона человека выбирают из клеток 293 (ATCC CRL-1573; DSM ACC 305), клеток FreeStyle 293 (клетки 293F; Invitrogen R79007) и клеток 293T (DSM ACC 2494), предпочтительно это клетки 293F (Invitrogen R79007). ! 4. Клеточная линия по любому одному из пп.1-3, в которой аллели гена PrP полностью удалены гомологичной рекомбинацией с нокаутными ловушками, несущими гены селективных или селекционных маркеров, так что экспрессия селективного или селекционного маркера осуществляется с эндогенного PrP-промотора. ! 5. Клеточная линия по п.3, включающая, но не ограниченная этим, бесприонную клеточную линию 293F, pf293F и все промежуточные смешанные популяции и полученные клоны, необходимые для ее получения. ! 6. Способ получения свободной от PrP, бессмертной, соматической клеточной линии человека по любому одному из пп.1-5, который включает последовательную делецию ОРС PrP в соответствующей исходной клетке путем гомологичн 1. Free of prion protein (PrP), immortal, human somatic cell line, in which both alleles of the PrP gene are completely removed. ! 2. The cell line according to claim 1,! (i) which can be transfected or cultured under serum-free conditions, and / or (ii) which has inserted adenoviral sequences in its genome, and / or (iii) which is obtained from a source cell selected from the group of kidney, bladder, liver, lung, cardiac muscle, smooth muscle, ovary and gastrointestinal tract, the preferred starting cell is a human kidney cell line, and / or (iv) which is suitable for the production of recombinant proteins. ! 3. The cell line of claim 2, wherein the kidney cells are human embryonic kidney cells, preferably human embryonic kidney cells are selected from 293 cells (ATCC CRL-1573; DSM ACC 305), FreeStyle 293 cells (293F cells; Invitrogen R79007) and 293T cells (DSM ACC 2494), preferably 293F cells (Invitrogen R79007). ! 4. A cell line according to any one of claims 1 to 3, in which the PrP gene alleles are completely removed by homologous recombination with knockout traps carrying selectable or selectable marker genes, so that the expression of the selectable or selectable marker is carried out from the endogenous PrP promoter. ! 5. The cell line of claim 3, including, but not limited to, the prionless cell line 293F, pf293F, and all intermediate mixed populations and resulting clones necessary to obtain it. ! 6. A method of obtaining a PrP-free, immortal, human somatic cell line according to any one of claims 1-5, which comprises the sequential deletion of the PrP ORF in the corresponding parent cell by homologous

Claims (17)

1. Свободная от прионного белка (PrP), бессмертная, соматическая клеточная линия человека, в которой полностью удалены оба аллеля гена PrP.1. Prion protein-free (PrP), an immortal, somatic human cell line in which both alleles of the PrP gene are completely removed. 2. Клеточная линия по п.1,2. The cell line according to claim 1, (i) которую можно трансфицировать или культивировать в бессывороточных условиях, и/или (ii) которая имеет встроенные аденовирусные последовательности в своем геноме, и/или (iii) которая получена из исходной клетки, выбранной из группы клеток почки, мочевого пузыря, печени, легкого, сердечной мышцы, гладкой мускулатуры, яичника и желудочно-кишечного тракта, предпочтительной исходной клеткой является линия клеток почки человека, и/или (iv) которая подходит для получения рекомбинантных белков.(i) which can be transfected or cultured under serum-free conditions, and / or (ii) which has built-in adenovirus sequences in its genome, and / or (iii) which is derived from a parent cell selected from the group of cells of the kidney, bladder, liver, lung, heart muscle, smooth muscle, ovary and gastrointestinal tract, the preferred starting cell is a human kidney cell line, and / or (iv) which is suitable for the production of recombinant proteins. 3. Клеточная линия по п.2, в которой клетки почки являются клетками почки человеческого эмбриона, предпочтительно клетки почки эмбриона человека выбирают из клеток 293 (ATCC CRL-1573; DSM ACC 305), клеток FreeStyle 293 (клетки 293F; Invitrogen R79007) и клеток 293T (DSM ACC 2494), предпочтительно это клетки 293F (Invitrogen R79007).3. The cell line of claim 2, wherein the kidney cells are human embryonic kidney cells, preferably human embryonic kidney cells are selected from 293 cells (ATCC CRL-1573; DSM ACC 305), FreeStyle 293 cells (293F cells; Invitrogen R79007) and 293T cells (DSM ACC 2494), preferably 293F cells (Invitrogen R79007). 4. Клеточная линия по любому одному из пп.1-3, в которой аллели гена PrP полностью удалены гомологичной рекомбинацией с нокаутными ловушками, несущими гены селективных или селекционных маркеров, так что экспрессия селективного или селекционного маркера осуществляется с эндогенного PrP-промотора.4. The cell line according to any one of claims 1 to 3, in which the alleles of the PrP gene are completely removed by homologous recombination with knockout traps carrying the genes of selective or selection markers, so that the expression of the selective or selection marker is carried out from the endogenous PrP promoter. 5. Клеточная линия по п.3, включающая, но не ограниченная этим, бесприонную клеточную линию 293F, pf293F и все промежуточные смешанные популяции и полученные клоны, необходимые для ее получения.5. The cell line according to claim 3, including, but not limited to, the non-prion cell line 293F, pf293F and all intermediate mixed populations and the resulting clones necessary to obtain it. 6. Способ получения свободной от PrP, бессмертной, соматической клеточной линии человека по любому одному из пп.1-5, который включает последовательную делецию ОРС PrP в соответствующей исходной клетке путем гомологичной рекомбинации с несколькими различными конструкциями для нокаута PrP или с одинаковой конструкцией и проведение селекции на антибиотике при постепенно увеличивающихся концентрациях.6. A method of obtaining a PrP-free, immortal, somatic human cell line according to any one of claims 1 to 5, which comprises a consecutive deletion of OPC PrP in the corresponding parent cell by homologous recombination with several different PrP knockout constructs or with the same construct and conducting selection on an antibiotic with gradually increasing concentrations. 7. Способ по п.6, в котором нокаутная конструкция несет одинаковые или различные лишенные промотора гены селекционных маркеров или селективные маркеры, фланкированные двумя последовательностями, гомологичными сайту встраивания внутри гена PrP исходной клетки.7. The method according to claim 6, in which the knockout construct carries the same or different lacking promoter genes for selection markers or selective markers flanked by two sequences homologous to the insertion site inside the PrP gene of the original cell. 8. Способ по п.7, в котором нокаутные конструкции (i) несут различные гены селекционных маркеров, и/или (ii) дополнительно несут одну из следующих функциональных последовательностей: полиА-последовательность, последовательности, распознаваемые рекомбиназой, IRES (внутренний сайт связывания рибосомы), и/или (iii) гомологичные последовательности имеют длину от 1 до 10 т.п.о., предпочтительно около 6 т.п.о., и/или соответствуют последовательностям выше или ниже ОРС PrP исходной клеточной линии, наиболее предпочтительные гомологичные последовательности показаны в SEQ ID NO: 2 и 3, и/или (iv) селекционные маркеры кодируют положительные маркеры селекции, включающие, но не ограниченные этим: неомицин, зеоцин, гигромицин, а селективные маркеры включают флуоресцентные маркеры, такие как GFP и Dsred, и ферменты, такие как LacZ.8. The method according to claim 7, in which the knockout constructs (i) carry different genes for selection markers, and / or (ii) additionally carry one of the following functional sequences: polyA sequence, sequences recognized by recombinase, IRES (internal ribosome binding site ), and / or (iii) homologous sequences have a length of from 1 to 10 kb, preferably about 6 kb, and / or correspond to sequences above or below the OPC PrP of the original cell line, the most preferred homologous sequences provided in SEQ ID NOs: 2 and 3, and / or (iv) selection markers encode positive selection markers, including but not limited to: neomycin, zeocin, hygromycin, and selective markers include fluorescent markers such as GFP and Dsred, and enzymes such as LacZ. 9. Способ по п.8, в котором нокаутные конструкции имеют одну или несколько последовательностей, показанных в SEQ ID NO: 1 и 16.9. The method of claim 8, in which the knockout structures have one or more sequences shown in SEQ ID NO: 1 and 16. 10. Конструкция для нокаута PrP по любому одному из пп.6-9.10. Design for knockout PrP according to any one of claims 6 to 9. 11. Применение свободной от PrP, бессмертной клеточной линии человека по любому одному из пп.1-5 для свободного от PrP, рекомбинантного получения белка человека или антитела, или их производного или мутанта (белка-мишени).11. Use of a PrP free, immortal human cell line according to any one of claims 1 to 5 for PrP free, recombinant production of a human protein or antibody, or a derivative or mutant thereof (target protein). 12. Способ получения клеточной линии человека для свободного от PrP, рекомбинантного получения белка человека или антитела, или их производного, или мутанта (белка-мишени), который включает в себя трансфекцию свободной от PrP, бессмертной клеточной линии человека по любому одному из пп.1-5 трансфекционным вектором, содержащим точку инициации репликации и ген, кодирующий указанный белок-мишень человека, при этом ген белка-мишени человека соединен на своем 5'-конце с промотором, а на своем 3'-конце с полиА-сигналом.12. A method of obtaining a human cell line for PrP free, recombinant production of a human protein or antibody, or a derivative thereof, or a mutant (target protein), which includes transfection of a PrP free, immortal human cell line according to any one of claims. 1-5 transfection vector containing the origin of replication and the gene encoding the specified target protein of a person, while the gene of the target protein of the person is connected at its 5'-end with a promoter, and at its 3'-end with a polyA signal. 13. Способ по п.12, в котором (i) трансфекцию проводят в бессывороточных условиях, и/или (ii) трансфекционный вектор получен из вектора pcDNA3.1 от Invitrogen, и/или (iii) белком-мишенью человека является фактор свертывания крови, такой как фактор VIII (включая фактор VIII дикого типа или фактор VIII с удаленным В-доменом), фактор свертывания крови IX, фактор VII/VIIa, фактор роста человека, такой как G-CSF или GM-CSF, vWF или альфа-1-антитрипсин (А1АТ), или антитело человека.13. The method of claim 12, wherein (i) the transfection is performed under serum-free conditions, and / or (ii) the transfection vector is derived from pcDNA3.1 from Invitrogen, and / or (iii) the human target protein is blood coagulation factor such as factor VIII (including wild-type factor VIII or factor VIII with a deleted B domain), coagulation factor IX, factor VII / VIIa, human growth factor, such as G-CSF or GM-CSF, vWF or alpha-1 α-antitrypsin (A1AT), or a human antibody. 14. Свободная от PrP, бессмертная клеточная линия-продуцент человека, стабильно трансфицированная, предпочтительно в бессывороточных условиях трансфекционным вектором, описанным в п.12 или 13.14. Free of PrP, an immortal human producer cell line stably transfected, preferably under serum-free conditions, with the transfection vector described in clauses 12 or 13. 15. Способ свободного от PrP, рекомбинантного получения белка-мишени человека, который включает культивирование, предпочтительно, в бессывороточных условиях, свободной от PrP, бессмертной клеточной линии-продуцента человека по п.14.15. A method of PrP-free, recombinant production of a human target protein, which comprises culturing, preferably under serum-free conditions, a PrP-free, immortal human producer cell line according to claim 14. 16. Свободная от PrP, бессмертная клеточная линия, в которой полностью удалены оба аллеля гена PrP, выбранная из клеток НЕК 293F и Per.C6 (бессмертные клетки сетчатки эмбриона), клеток СНО (клетки яичников китайского хомячка) и клеток ВНК (клетки почки детеныша хомячка).16. PrP-free, an immortal cell line in which both alleles of the PrP gene, selected from HEK 293F and Per.C6 cells (immortal embryonic retinal cells), CHO cells (Chinese hamster ovary cells) and BHK cells (baby kidney cells) are completely removed hamster). 17. Применение свободной от PrP, бессмертной клеточной линии по п.16 для свободного от PrP, рекомбинантного получения белка человека, или антитела, или их производного, или мутанта (белка-мишени). 17. The use of PrP free, immortal cell line according to clause 16 for PrP free, recombinant production of a human protein, or an antibody, or a derivative thereof, or a mutant (target protein).
RU2009123458/10A 2006-11-20 2007-11-20 GENETIC ABLATION OF CELLS CARRYING A PRP GENE USING THE STRATEGY OF A DIRECTED PROMOTION TRAPS FOR OBTAINING SERUM-FREE TRANSPORT RECOMBINANT PROTEINS AS A THERAPY RU2009123458A (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06124427 2006-11-20
EP06124427.3 2006-11-20

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2009123458A true RU2009123458A (en) 2010-12-27

Family

ID=37685785

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009123458/10A RU2009123458A (en) 2006-11-20 2007-11-20 GENETIC ABLATION OF CELLS CARRYING A PRP GENE USING THE STRATEGY OF A DIRECTED PROMOTION TRAPS FOR OBTAINING SERUM-FREE TRANSPORT RECOMBINANT PROTEINS AS A THERAPY

Country Status (12)

Country Link
EP (1) EP2084269A2 (en)
KR (1) KR20090106474A (en)
CN (1) CN101605891A (en)
AU (1) AU2007324530A1 (en)
BR (1) BRPI0718989A2 (en)
CA (1) CA2670003A1 (en)
IL (1) IL198770A0 (en)
MX (1) MX2009005277A (en)
NO (1) NO20091875L (en)
RU (1) RU2009123458A (en)
WO (1) WO2008061995A2 (en)
ZA (1) ZA200903429B (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2587634C2 (en) * 2010-05-12 2016-06-20 Янссен Байотек, Инк. Differentiation of human embryo stem cells

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102277379B (en) * 2011-08-18 2013-07-24 中国科学院遗传与发育生物学研究所 Expression vector for expressing coagulation factor VIII and application thereof

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5464764A (en) * 1989-08-22 1995-11-07 University Of Utah Research Foundation Positive-negative selection methods and vectors
ES2237747T3 (en) * 1991-11-14 2005-08-01 Prionics Ag NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS THAT LACK OF PRION PROTEINS.
NZ512309A (en) * 1998-12-22 2003-05-30 Univ California Prion-free therapeutic formulations produced from somatic cells with an artificially altered prion protein (PrP) gene
BR0109521A (en) * 2000-03-24 2003-06-10 Univ Massachusetts Public Inst Transgenic ungulates without prions
EP1370132A2 (en) * 2001-03-21 2003-12-17 Geron Corporation Use of telomerase reverse transcriptase to create homozygous knockout animals

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2587634C2 (en) * 2010-05-12 2016-06-20 Янссен Байотек, Инк. Differentiation of human embryo stem cells

Also Published As

Publication number Publication date
EP2084269A2 (en) 2009-08-05
CN101605891A (en) 2009-12-16
CA2670003A1 (en) 2008-05-29
ZA200903429B (en) 2010-04-28
IL198770A0 (en) 2011-08-01
WO2008061995A2 (en) 2008-05-29
MX2009005277A (en) 2009-05-28
AU2007324530A1 (en) 2008-05-29
BRPI0718989A2 (en) 2014-02-11
WO2008061995A3 (en) 2008-07-10
NO20091875L (en) 2009-07-28
KR20090106474A (en) 2009-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2020286186B2 (en) Humanized il-15 animals
ES2090297T5 (en) PRODUCTION OF PROTEINS THAT USE HOMOLOGICAL RECOMBINATION.
CN111304248B (en) Construction method and application of humanized cytokine IL15 gene modified non-human animal
CN111118019B (en) Construction method and application of humanized cytokine IL3 gene modified non-human animal
WO2005080598A1 (en) Method of screening somatic cell nucleus initializer
AU2014223243A1 (en) Talen-based gene correction
RU2009123458A (en) GENETIC ABLATION OF CELLS CARRYING A PRP GENE USING THE STRATEGY OF A DIRECTED PROMOTION TRAPS FOR OBTAINING SERUM-FREE TRANSPORT RECOMBINANT PROTEINS AS A THERAPY
BR112014013597A2 (en) expression cassette, expression vector, host cell, in vitro method for expressing a polypeptide, and use of an expression cassette or expression vector
CN106978416B (en) Gene positioning integration expression system and application thereof
CN111718956A (en) Preparation method and application of chicken-derived TRIM25 gene recombinant fluorescent expression plasmid
ES2275346T3 (en) METHOD FOR THE PRODUCTION OF RECOMBINANT PROTEIN IN MAMMARY CELLS THAT INCLUDES CO-EXPRESSION WITH FETUINE.
WO1996006933A1 (en) Gene therapy for transplantation and inflammatory or thrombotic conditions
KR20140052093A (en) Knock-in vector and process for preparing transgenic animal for transplantation employing the same
KR101945877B1 (en) Gene constructs for expression of hMCP and hTBM and vector comprising the same
US10717991B2 (en) Transgenic pig which simultaneously expresses HO-1 gene and TNFR1-Fc gene, and comprises knocked-out GGTA1 gene, and use thereof
CN111321169A (en) Genetically modified NK cell and preparation method and application thereof
CN101864419B (en) Mouse Miwi promoter as well as carrier and application thereof
CN114908097B (en) Pedigree tracing technology for recording pig tissue differentiation and organogenesis under Dox regulation
CN112501200A (en) Construction, identification and expression method of chicken ACE2 eukaryotic expression recombinant plasmid vector
CN117701606A (en) mApple protein mutant and application thereof in double-marker chimeric analysis
ES2338971B1 (en) ANIMAL MODEL FOR THE STUDY OF LIVING ANGIOGENESIS AND LYMPHANGIOGENESIS.
CN115322993A (en) Safety locus for site-specific integration of exogenous gene in pig genome and method for constructing pig breeding group by using safety locus
CN111040028A (en) Bcl2 mutant capable of promoting larger gene expression and application
NZ711254B2 (en) Talen-based gene correction

Legal Events

Date Code Title Description
FA93 Acknowledgement of application withdrawn (no request for examination)

Effective date: 20110111