RU2003331C1 - Средство дл регулировани сокращени глазного зрачка - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к области медицины и касаетс  средства дл  регулировани  сокращени  глазного зрачка Вещество представл ет собой холецистокинин, его С-кольцевой октапелтид и их антагонисты дл  предотвращени  миоза в глазу, например, во врем  хирургических операций и в случае воспалени  сосудистой оболочки глазного  блока 13 ил

Description

Изобретение касаетс  использовани  холецистокинина и производных холесци- стокинина в глазу (сужение зрачка) после некоторых типов обследований и операций, а также использовани  антагонистов холе- 5 цистокинина или производных указанных антагонистов дл  предотвращени  миозэ в глазу, например, во врем  хирургических операций и в случае воспалени  сосудистой оболочки глазного  блока, касаетс  офталь- 10 мологических составов, включающих активное количество холецистокинина, его производных или антагонистов.

Размер зрачка глаза регулируетс  двум  мышцами радужной оболочки, протипо- 15 воложными по характеру их действи . Одна из этих мышц, сокраща сь, приводит к ди- латации зрачка (мышца-расширитель); действие этой мышцы контролируетс  нервными волокнами симпатической нервной системы. 20 Друга  мышца (кругова  мышца, расположенна  по кра м радужной оболочки глаза, т.е. р дом со зрачком) вызывает уменьшение размеров зрачка. Эта мышца управл етс  парасимпатическими нервами, использующими 25 ацетилхолин в качестве медиатора.

В течение длительного времени известно , что сокращение зрачка, т.е. миоз, может быть вызвано механизмом, отличным от механизма , св занным с высвобождением 30 ацетилхолина. В частности, оно может происходить в результате реакции глаза на различного рода раздражени . Миоз такой этиологии не может быть предотвращен антагонистами ацетилхолина, например та- 35 кими как атропин. Клинический миоз, вызванный раздражением, зачастую приводит к значительным осложнени м, например, во внутриглазной хирургии. В случае увеитов (воспаление сосудистой оболочки глаза), 40. особенно в случае иритов, 3Tot тип миоза можед- иногда приводить к росту нежелательных последствий типа возникновени  спаек между радужной оболочкой глаза и хрусталиком . Миоз. вызванный механическим 45 раздражением, излучалс  на экспериментальных животных; как известно было обнару- жено, что такое раздражение вызывает по вление пептида, очень похожего на вещество Р, высвобождаемое в глазу. Инъекци  50 вещества Р. полученного синтетическим путем , в переднюю камеру привели к значительной контракции круговой мышцы радужной оболочки, что наводит на мысль о том. что данный случай миоза вызван ука- 55 занным пептидом или близким к нему соединением .

Однако следует отметить, что реакци  зрачка на вещество Р выръируетс  от вида к виду в значительной степени, несмотр  на

то, что этот нейропептид был обнаружен иммуногистохимически в глазах многих видов , включа  приматов. Было установлено, что эта реакци  у приматов полностью отсутствует (Мандей и др.. 1980 г.). Следовательно , у приматов миоз, вызванный раздражением, должен быть св зан с каким-то другим веществом. Таким образом, действие некоторых нейропептидов зависит от присутстви  или отсутстви  рецепторов в ткани, раздражаемой синсорными нервами, и такое присутствие или отсутствие рецепторов и обсловливает очень сильное различие в реакции различных видов животных. По этой причине совершенно невозможно предсказать, какие услови  будут значимы, например радужна  оболочка кролика будет чувствительной в отличие от радужной оболочки обезь ны или человека и/наоборот, хот  тот же самый пептид может быть идентифицирован в сенсорных нервах радужной оболочки различных видов .

У кроликов раздражение будет приводить к высвобождению вещества Р из сенсорной нервной ткани в радужной оболочке. Сенсорные нервы радужной оболочки содержат р д других потенциальных медиаторов , одним из которых  вл етс  холецистокинин (ХЦК) или родственное ему вещество. Обнаружили, что ХЦК не вызывает миоэа у кроликов несмотр  на то. что в сенсорных нервах он присутствует.

Изуча  вещество, вызвающее реакцию миоза у обезь н в ответ на локальное раздражение , неожиданно орбнаружили, что ХЦК обладает весьма значительным действием у обезь н (Масаса fascicularis). Доза, равна  примерно 0,21 пмоль (800 пикограмм ), инъектированна  в переднюю камеру , может оказать действие, равное по величине 1/2 максимального действи ; почти максимальна  величина наблюдалась при дозе, равной 1 пмоль ( «3,9 нанограмм). Фрагменты С-концевого участка пептида также активны.

Сульфированна  концева  последовательность 8 аминокислот обладает значительной активностью, примерно в 10 раз превышающей активность целой молекулы ХЦК (рисунок 1 показывает, как может действовать инъекци  ХЦК-8 в переднюю камеру на размеры зрачка глаз у трех обезь н). Уменьшение размеров зрачка происходит также и в том случае, если этот фрагмент примен ют в форме глазных капель (из данных , приведенных на рисунке 2, видно как нанесение ХЦК-8 на роговицу глаза может

повли ть на размеры зрачка), Последовательность аминокислот холецистокинина, его С-концевой октапептид и С-концевой тетрапептид следующие: ХЦК-33.

Лизин-Алэнин-СеринТлицин-Аргинин- Валин-Серин-Метионин-Изолейцин-Лизин Спэрагин-ЛейцинТлмцин-Серин-Лейцин- Асперагин-Пролин-Серин-Гистзмин- Арги- нин-Йзолейцин-Серин-Аспарагин-Тирозин -(50зН}-Метионин-Глицин- Трипзофан-Ме- тионин-Аспараген-РЬе-МН2.

ХЦК 26-33 октапептид.

Аспарагин-Тирозин-(50зН}-МетионинТли- цин-Триптофан-Метионин-Аспарагин-Рг1е-1МН2.

ХЦК 30-33 тетрапептид.

Триптофан-Метионин-Аспарагин- Phe- NH2.

В других опытах. In vitro, показали, что ХЦК, С-концевой октапептид ХЦК. но не С- концевой тетрапептид ХЦК, могут приводить и контракции круговой мышцы радужной оболочки, выделенной из обезь ны (на рисунке 3 приведены кривые, описывающие зависимость величины реакции от кмул тивной дозы, рис. 3 - действие холецистокинина на радужную оболочку глаза обезь ны, рис. А - действие С-концевого октапептида (26-33), in vivo, на радужную оболочку глаза обезь ны.

Очевидно, что С-концевой октапептид ХЦК  вл етс  более сильнодействующим препаратом. Кроме того, различные антагонисты ХЦК (ХЦК блокаторы), такие, например , как CR-1409, также имеющий название Лорглюмид -D, а -4-(3,4-дихлорбенэила- мино)-5-(дипептиламино)-5-оксопентанова  кислота). Прогюмид - D, а -4-бензамидо- М,Г -дипропил-глутаровой кислоты и N-(4- хлорбензоил)- а -триптофан могут также оказывать эффективное действтие на ход кривых доза-величина реакции как в случае ХЦК, так и в случае С-концевого октапептида ХЦК, сдвига  вправо положение кривых или целиком блокиру  действие ХЦК на круговую мышцу радужной оболочки глаза, выделенной из обезь ны (на рисунке 5-10 приведены кривые, описывающие зависимость величины реакции от суммарной дозы ХЦК и С-концевого октапептида ХЦК о присутствии актагонистов и без них (полученные данные свидетельствуют о том, что рецепторы ХЦК на гладких мышцах сфинктера радужной оболочки подвергаютс  примой конкурентной блокаде. Более того, эксперименты свидетельствуют о том, что Лорглюмид  вл етс  антагонистом ХЦК в отношении реакции миоза также и In vivo. При инъекции 0,75// г Лорглюмида в переднюю камеру крива  зависимости величины реакции от дозы ХЦК сдвигаетс  вправо более чем на пор док (на рисунке 11 приведены кривые, описывающие зависимость 5 величины реакции от дозы ХЦК-8 с предварительной обработкой антагонистов Лорг- люмидом и без нее),

Кроме того, обнаружили, что ХЦК непосредственно действует на рецептор, наход 0 щийс  на мышце сфинклера. Этот вывод может быть сделан на основании того факта, что блокада нерва тетродотоксином и предварительна  обработка индометационом не привадит к уменьшению реакции миоза.

5 Эти эксперименты свидетельствуют о тем, что рецепторы не располагаютс  на других нервах, и о том, что циклооксигеназы - продукты метаболизма арахидоновой кислоты не вли югна реакцию миоза, вызываемого

0 ХЦК, Дополнительно также обнаружено, что действие на изолированную круговую мышцу зрачка человека сравнимо с действием на обезь н (на рисунке 6 приведены кривые, описывающие зависимость величины реак5 ции от суммарной дозы С-концевого октапептида ХЦК на круговой мышце радужной оболочки глаза человека In vitro), что свидетельствует отом, что аналогичный механизм существует в глазу человека: Капсаицин (80 метил-М-ваналил-б-ноненамид)  вл етс  высокоэффективным раздражителем, вызывающим сужение зрачка глаза кролика вследствие высвобождени  вещества Р из сенсорных нервов радужной оболочки гла5 за. Эксперименты показали наличие мистической реакции на капсации у обезь н, хот  у обезь н эта реакци  не столь последовательна и не так  рко выражена, как у кроликов . Весьма веро тно, что зга реакци  у

0 обезь н вторична  по отношению к аысово- бождению вещества из сенсорных нервов радужной оболочки.

Природа этого вещества еще неизвестна , но есть хорошее основание продпола5 гать, что этим веществом  вл етс  холецистокинин или родственнее ему вещество с концевым участком, подобным С-кон- цевому участку ХЦК. Это предпопожепие подтверждаетс  опытами на животных, про0  вивших чувствительность к капсаицину. После предварительной обработки Лорглю- мидом, антагонистом ХЦК, воздействие на зрачок почти полностью было устранено (рисунок 13 демонстрирует действие кэпса5 ицина на размер зрачка без предварительной обработки и с предварительной оОоаботкой Лорглюмидом (7,5/г г).

В насто щее врем  кажетс  весм-и веро тным , что сужение зрачка (миоз) человека при наличии раздражителей, т ч,- ьак

ирит (воспаление радужки), увеит (воспаление сосудистой оболочки глаза) и в случае хирургического вмешательства в передней камере, вызываетс  высвобождением вещества , подобного ХЦК или состо щего из ХЦК. Следовательно, может оказатьс  возможным предовращение такого сужени  с. помощью антагонистов ХЦК. Антагонисты холецистокинина разделены на р д различных классов, например такие антагонисты ХЦК, как производные циклических нуклео- тидов, или такие, как производные аминокислот и С-концевых и М-концевых фрагментов ХЦК, 3,5-монофосфат Ы2 Э2-ди- бутирилциклического гуаназина был описан как пример производного циклического нуклиотида, действующего как антагонист ХЦК, Было установлено, что проглюмид и (О, а -4)(3,4-дихлорбензоиламино)-5-(М-3- метоксипропилпентиламин-)-5-оксопента нова  кислота), также известна  под названием Локсиглюмид или CR-1505, так же как и другие производные полиамида глутаро- вой кислоты, действуют как очень сильные ингибиторы на ХЦК рецепторы. Очень эффективными антагонистами ХЦК  вл ютс  также Лорглюмид(D, а -4Х4,4-дихлорбензо- иламин)-5-оксолентанова  кислота), известный также под названием CR-1409, так же как и другие производные 5-(дипентилами- но)-5-оксопента новой кислоты. Далее было установлено, что блокаторами ХЦК  вл ютс  различные синтетические белковые производные ХЦК и фрагментов ХЦК, например, тр8тбутилоксмкарбонил-Тирозин{ЗОзН)-Метио- нин-Глицмн-Д-Трмлтофам-Изолейцин- Ас- парагмн-2-фенилэтиловый эфир, ХЦК 27-33, и даже белковые производные вещества Р, созданные дл  блокировани  рецепторов вещества Р, например {Д-ПрО4, Д-Трпудю)- вещестао Р 4-11. Кроме того, известно, что эфиры бета-карболинов, такие как метил или этил бета-карболины-3-карбокеилат, могут оказывать ингибирующве действие на ХЦК. Весьма интересным  вл етс  факт, до- казывающий ингибирующ е действие на ХЦК различных производных бенздиазепи- на, таких, например, как 3-замвщенные 1,4- бенздиазепин-2-амины и 4-замещенные 4Н-(1,2,4)-триазол(4,3-аХ1-4)- бенздиэзепи- ны. Активными могут быть также такие бен- здиазепины. как хлордиазепоксид, диазепам. медазепам. Недавно по вилось сообщение о том, что вещества, выделенные из Asperhillus alllaceus. которые называют Асперлицинами,  вл ютс  ингибиторами ХЦК рецептора. Начина  с этой группы веществ, были получены дополнительно сильнодействующие производные.

которые оказывают сильное антагонистическое действие на рецептор ХЦК. Одним из этих веществ  вл етс  35(-)-М-{2,3-дигидро- 1-метил-2-оксо-5-фенил-1Н-1,4- бензидиазепин-3-ил )-1 Н-индол-2-карбоксамид, известное также под названием а-364,718. Это вещество  вл етс  одним из наиболее эффективных ингибиротов холецистокинина, известных до насто щего времени. Другими

ингибиторами ХЦК, также упом нутыми в литературе ,  вл ютс  бензотрипт и CR-1392 и А-64718.

Среди перечисленных веществ следую- ет особенно обратить внимание на ел еду ющие антагонисты: Лорглюмид (CR-1409); а-364,718; Проглюмид-Локсиглюмид (CR- 1505) и М-{4-хлорбензоил)-а-триптофан. Некоторые антагонисты хлорцистокинина по имеющимс  данным отличаютс  низкой токсичностью и хорошей биопригодностью. Можно ожидать еще большего числа таких соединений с дополнительными полезными свойствами.

Вещества, используемые согласно изобретению , ранее известны как фармацевтически активные. Так, например, было известно, что октапептид ХЦК использовалс  дл  опорожнени  желчного пузыр . Первоначально антагонисты холецистокинина

использовались при гастроэнетерологиче- ских заболевани х, например дл  лечени  панкреатитов и дл  предотвращени  контракции желчного пузыр , а также при рассто- ройствах центральной нервной системы,

как средство, способствующие улучшению аппетита.

Возможность предовращени  нежелательного нехолинэргического миоза с помощью антагонистов ХЦК в насто щий

момент уже сама по себе представл ет большой интерес, создает новое направление в потенциальной терапии, в первую очередь , в той области, котора  св зана с удалением хрусталика и последующей его

заменой на искусственный, а также и в других област х, св занных с внутриглазными хирургическими операци ми, например с хирургической операцией на заднем сегменте. Блокирование здесь может быть достигнуто

путем локального и/или факультативно общего введени  антагониста. Бывают также случаи , когда сокращение зрачка желательно: например, если после имплантации хрусталика ширина зрачка слишком велика или после

обследовани  глазного дна, проводимого при холинзргической блокаде. Возможность с помощью холециостонинина или его фрагментов получить миоз представл етс  весьма привлекательной идеей. Локальное

введение непосредственно во внутриглазную жидкость во врем  проведени  операции наиболее актуально - в роговицу или под конъюнктиву, возможно и приведет к желаемому эффекту.

Важным фактором в этих услови х, по- видимому,  вл етс  высвобождение нервами пептида, имеющего такую же концевую последовательность, как и ХЦК или ХЦУК-8, или продукта белкового распада, включающего такую же последовательность. В таком случае обработки антагонистами ХЦК представл ет-собой высоко привлекательную возможность предотвращени  миоза.

Изобретение, таким образом, относитс  к холецистокинину и его производным и аналогам этого пептида, особенно к его Су- концевому участку, с возможностью их использовани  дл  того, чтобы вызвать сокращение глазного зрачка после некоторых типов обследовани  и внутриглазных операций. Изобретение также относитс  к антагонистам холецистокинина. производных и аналогов этого пептида, используемым дл  предотвращени  такого сокращени  глазного зрачка, которое соз- никает в результате внутриглазной операции ,травмы илиувеита, илиирита. Согласно изобретению, только фармацевтически ак- тивные и физиологически приемлемые производные и аналоги ХЦК, равно как и их антагонислы, намереваютс  использовать.

Кроме того, изобретение включает составы , содержащие эффективное количество холецистокинина или его производных, или аналогов этого пептида в офтальмологически совместимом наполнителе, способные вызвать сокращение зрачка после некоторых типов обследовани  и внутриглазных операций. Термин эффективное количество означает здесь, что состав содержит от 10 пикограмм до 100 микограмм, в зависимости оттого, вводитс  ли он непосредственно в переднюю камеру в св зи с операционной процедурой или он вноситс  под конъюнктиву. Это изобретение также относитс  к составам, которые содержа г эффективное количество антагонистов холо- цистокинина или производных, или аналогов этого пептида в офтальмологически приемлемом наполнителе, способным предотвращать сокращение зрачка во врем  внутриглазной хирургической операции или в результате травмы, или в результате увеита или ирита. Термин хирургическа  операци  включает также лечение глаза лз- зерными лучами различного рода. Термин эффективное количество означает, что состав содержит от 10 нанограмм до 10 миллиграмм одного или более антагонистов, в

зависимости от того, вводитс  ли состав непосредственно в переднюю камеру :лаза, например, после операции, или он вноситс  непосредственно в роговицу, или он нано- 5 ситс  под конъюнктиву. Если антагонист вводитс  систематически, то предпочтительный интервал находитс  примерно в следующих пределах от 0,01-50 мг/кг массы тела.

0 Офтальмологически совместимый наполнитель , который может быть использован дл  приготовлени  составов согласно изобретению, состоит из водных растворов, такихгнапример, как физиологический рас5 твор дл  составов, которые ввод т в глаз, например, непосредственно в переднюю камеру или подконъюктиву.

Офтальмологически совместимый наполнитель , который может быть использо0 ван дл  приготовлени  составов дл  местного применени , состоит из водных растворов, таких, например, как физиологический раствор, масл ных растворов или мазей . Кроме того, наполнитель может

5 содержать, особенно в тех случа х, когда Состав предназначаетс  дл  местного применени , офтальмологически совместимые предохран ющие консерванты средства, такие, например, как бензалкониум хлорид,

0 поверхностно-активные вещества, липосомы или полимерны, например, метилцеллюлоза, поливиниловый спирт, поливинилпирроли- дон, гиалуроноеа  кислота, которые могут использоватьс  дл  повышени  в зкости. Могут

5 быть также включены в состав наполнител  растворимые и нерастворимые лекарственные добавки, когда холеш- стошнин, его производные ипи аналоги, лли антагонисты предназначаютс  дл  местного введени .

0

Кроме того, изобретен1 также касаетс  способа, вызывающего сокращение зрачка после некоторых типов обследовани  или внутриглазных хирургических операций, и

5 способа, предотвращающего сокращение глазного зрачка, вызываемого хирургическим вмешательством, включав лазерную обработку, травмами, увеитом или притом. Способ состоит во введении терапевтиче0 счи активного количества состава, содержащего , по крайней мере, о,счо из указанных веществ. В предпостительном варианте состав , как указано, входит в соприкосновение с глазом так, чтобы либо вызвать, либо

5 предотвратить сокращение зрачка Состав содержит холецистоюинин или производные , или аналоги этого вехцествз, дл  того, чтобы вызывать сокращение зрачка и содержит антагонисты холецистокинина или производных или аналогов этого всщест ва в

тех случа х, когда используетс  дл  предотвращени  сокращени  зрачка.

Изобретение проиллюстрировано серией примеров, которые не ограничивают область его применени ; результаты представлены на фиг. 1-7.

Рисунок 2: вли ние ХЦК-8, вводимого в роговицу глаза, на размер зрачка.

Рисунок 1: вли ние инъекции ХЦК-8 на размер глазных зрачков у трех обезь н.

Рисунок 3: зависимость величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны от суммарной дозы холецистокинина In vitro.

Рисунок 4: зависимость от величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны от суммарной дозы С-концевого октапептида (26-33) холецистокинина, In vitro.

Рисунок 5: зависимость величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны In vitro от суммарной дозы холецистокинина в присутствии и без проглюмида-антагониста ХЦК рецептора.

Рисунок 6: зависимость величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны In vitro от суммарной дозы холецистокинина в присутствии и без М(4-хлорбензоил}- а - триптофана-антагониста ХЦК рецептора.

Рисунок 7: зависимость величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны In vitro от суммарной дозы холецистокинина в присутствии и без Лорглюмида-антагониста ХЦК рецептора.

Рисунок 8: зависимость величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны In vitro от суммарной дозы С-концевого окта- цептида (26-33) холецистокинина в присутствии и без Проглюмида.

Рисунок 9: зависимость величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны In vitro от суммарной дозы С-концевого октапептида (26-33) холецистокинина в присутствии и без М(-хлорбензоил)- а -триптофана.

Рисунок 10: зависимость величины реакции радужной оболочки глаза обезь ны In vitro от суммарной дозы С-концевого октапептида (26-33) холецистокинина в присутствии и без Лорглюмида.

Рисунок 11: зависимость величины реакции от дозы ХЦК-8 в глазу с предварительной обработкой Лорглюмидом и без нее. Опыты проведены на обезь не In vivo.

Рисунок 12: зависимость величины реакции круговой мышцы радужной оболочки глаза человека in vivo от суммарной дозы С-концевого октапептида холецистокинина.

Рисунок 13: действие капсаицина на размер зрачка предварительной обработкой и без обработки 7,6 fi г Лорглюмида. Экспериментальна  часть:

Пример 1. Обезь ны,использованные в этих опытах, были анестезированы пенто- барбиталом. В переднюю камеру глаз были введены по две специальные иглы в каждый.

Вещество можно было иньектировать через одну из этих игл, кажда  из которых соединена полиэтиленовой трубкой со шприцем малого объема (100/4 л). Соответствующий объем внутриглазной жидкости следовало

удалить через вторую иглу, устранив таким образом изменение глазного давлени , вызываемого внутри камерной инъекцией тестируемого вещества. Тестируемое вещество, холецистокинин или ХЦК-8 раствор ли в изотоническом физиологическом растворе. Предварительно животные были обработаны атропином дл  того, чтобы вызвать максимальное расширение зрачка. Затем устанавливали зависимость - величина реакции

- доза дл  одного глаза. Размер зрачка определ ли , измер   горизонтальный диаметр зрачка с помощью градуированной рулетки. Эти измерени  проводились через регул рный интервалы при стандартном освещении.

Полученные значени  записывались. Типичные примеры этих экспериментов приведены на рисунке 1.

П р и м е р 2. Каждые 10 мин в роговицу левого глаза обезь ны, обработанного атропином , после анестезии пентабарбиталом, закапывали 6-12/г л раствора, содержащего 250 нанограмм//г л ХЦК-8. Эта процедура проводилась в течение 100 мин с момента старта; за это врем  закапано 100 fi n, по

10,ал каждые последующие 10 мин. Через 60 мин после старта наблюдали уменьшение размеров зрачка в обработанном глазу. Затем размер зрачка продолжал уменьшатьс  в течение всего эксперимента (рисумок 2). 8 необработанном контрольном глазу никаких изменений не наблюдалось. ПримерЗ. Ткань радужной оболочки глаза обезь н (Масаса fascicularis) выдел ли сразу после принесени  животного в

жертву. Ткань переносили в физиологический раствор, хран щийс  во льду, и заключали в стандартную ванночку. Рост напр жени  в ткани, котора  поддерживалась в фиксированном положении в каждом

конце вырезанной мышцы, измер ли изометрически , использу  дл  этой цели датчики Grass, соединенные с полиграфом 7Д Grass и выражали в мм записи на полиграфе . Кусочки такни погружались в ванночку,

состо щую из стандартного раствора Ringer дл  мышечных ванночек, через которую непрерывно пропускали кислород и в которой поддерживалась посто нна  температура 35° С. Дл  устранени  вли ни  простолюдинов, бета-адренергических рецепторов и мускари- нических рецепторов к раствору добавл ли индометацин, пропинолол и атропин.

Варьируемые количества ХЦК, ХЦК-8, растворенных в изотоническом физиологи- ческом растворе, добавл ли в ванночку и на основании полученных измерений строили кривые в координатах: величина реакции - суммарна  доза. Эти кривые представлены на рисунке 3-4. В случае тетрапептида С- концевого участка ХЦК, 30-38, сокращение мышц не наблюдалось даже при общей дозе 86 мг, диспергированных в 10 мл ванночке дл  ткани.

П р и м е р 4, После получени  зависи- мостей величины реакции от суммарной дозы препараты были тщательно промыты и в ванночки был добавлен один из трех антагонистов: либо Лоргюмид, либо проглюмид или М(4-хлор-бензил}- а -триптофан. При- мерно через 10-20 мин были сн ты соответствующие зависимости величина реакции - суммарна  доза ХЦК, суммарна  доза ХЦК-8 в присутствии антагониста, ванночки с препаратами вновь очень тщательно промыли; после чего вновь было проверено в отсутствие антагониста действие определенного количества ХЦК или ХЦК-8 дл  того, чтобы таким образом исследовать обратимость свойств. На рисунке 5-10 приведены ре- зультаты, полученные в экспериментах с трем  названными антагонистами ХЦК м ХЦК-8 In vitro на радужной оболочке глаза обезь ны. Объем ванночки дл  ткани равен 10мл.

П р и м е р 5. Определение зависимости величины реакции от дозы ХЦК-8 было проведено на одном обработанном атропином глазу анестизированных пентабарбиталом обезь н в соответствии с описанием, приве- денном в примере 1. После этого в переднюю камеру другого глаза инъектировэли 0,75,ы г лорглюмида в 15 /г л изотонического физиологического раствора. Затем, как и дл  первого глаза, установили зависимость величины реакции от дозы ХЦК-8. Как видно из рисунка 11, антагонист сдвигает кривую вправо более чем на пор док.

П р и м е р 6. Ткань радужной оболочки из энуклеированного глаза человека получа- ли сразу же после операции. Круговую мышцу изолировали и помещали в ванночку как описано в примере 3. Так же, как это описано в примере 3, строили зависимости в ко

ординатах величина . - доза ХЦК-8. Результаты преде NIP ML -: рисунке 12.

П р и М е р 7. Обезь н i, г 1 с cv 1а5с1си1аг1з)анестезировзлн о5рг i , ч ропином и ввели канюли ак же, ч - ло сделано в примере 1. Затем n uervr i камеру иньектировалм 10 мл 1%-ного твора Копсаицина, через 15 мин мзморити размер зрачка. Уменьшение размеров зр 11 ка, полученное при это дозе капсгицимз варьировалось от 0 до 1,5 мм. Жиготсыг, у которых была обнаружена чувствительное ь к капсаицину одного глаза, позднее ш-л ох тировали такую же дозу капсаицкнг в д,гд- гой глаз, предварительно обработанный Лорглюмидом - 7,5 j.i г в 15 и л Как следует из данных, представленчых на рисунке )3 антагонист Х11К уменьшил реакцию н °п- саицин.

Таким образом, наши эксперт-em и доказывают , что холецистокини « Ч -и егосшэ- пептид и, возможно, нстотирь е бли; i производные, вызывают сужение зргчк1 приматов (включа  человека) Зс сче- л ции рецепторов радужной оболочки гпсзг холецистокинином. Селективна  Gnok-vv указанных рецепторов любым its ГПОАОГ : за антагонистов может нейтрализовать это т- кращение. (Возможно также, что биею-ч-рн- ка рецептбров ХЦК до сгиг улр м раздражителем будет приводить к ,- ньше- нию сокращени , вызываемого раодпахп- нием). Следоватетыю, созмо,нп механ зм, ответственный за возбужд-к.о ь- ю т- г-р матов, состоит в высвоб эждешп; XI К близкого ему вещества, вызыоЗ Сч ..с ; за счет стимул ции рецэг-тсоов ч i Ik с-. ках гладкой мышцы сфинчтсрч , оболочки глаза. Этот миоз не jcnci ст ацетилхолинз.

Примеры свидетельстсу1гг ° то , леистокинин или близкие er.y , с: - ствующие на рецептору XI1К, /о ут б - использованы дл  ин у П оое 1-1 г с j тх рапевтических цел х, напрьмеп г-сстс i - ни  катаракты с последу ОшеГ4 и- чт 11 i . искусственного хрусталик 1 и нес i , гонисты ХЦК или близчих ему ес-цсе , л - вующие на те же самые i- , быть использованы ичг/5 , .  ,, миоз, который может возникнуть г свчсм иритами, увеитами, травмами

Claims (1)

1. i i

t i t I I t t t t t t t

fe

ЧЭ J-Osj

(/ sj #/ 6s/0&a 0#л#/ 4&#

X## 0#rdfAff#-JW0pfa#j 0&0) -4 -4yp&/9 r00ewfЈsf

o

9

е

7

f

3

/ 0

xq#-ff#rd w ffp/rt/ Ј//r/&. - xq/f - 0#rd

fa

fffff/000/0G00

(#&#0&/0G /wS)

&ts&& Mf/f &/fTd f w / &-0WЈS f0.)

;

Xy/f-0#r,A -4 xqtf 0/frA,

ii

fff

Ф&&/0

/00fOffff70000

0Ьз&/ //0А 0г/00 )

0ff0J

fcf r aba#&vjz eq0 ff&

Ј/Г40& АСН&А0

W0+/ 0eq0 // eyf«z5

00000/ 0ff0&

J/frX +ЈЯм юааАцг+

9-J/J7X

icccooz

0t

:r

-)

J

0

-Л

J -1

. I

,

I f

. /HSp /7/w xs#+#&/rc0& VW . /fly/rctre/eft/ /

I

фел. /ar

, S+M