RU2002738C1 - Способ получени производных N-гидроксимочевин в виде R- или S-энантиомерных форм или их смеси, или их фармацевтически приемлемых солей с щелочным металлом - Google Patents

Abstract

Использование: в медицине, так как продукты обладают фармакологической активность.о Сущность: способ получени  новых N-производных мочевинобщейформулы Ar-OAr1-Y-CH(CH bN(OH)(CONHR1). где Ar - 3, 4-галоидфенил; Аг - 1.3-или 1,4-фенилен, Y - /Е/ - СН СН, R - водоро  алкил С -С в виде R- или S-энантиомерных форм, или их смеси, или их фармацевтически приемлемых солей с щелочнымметаноломРеагентV Ar-QAr -Y-CHfCH NHOH, где Ar, Ar1, Y имеют вышеуказанные значени  Реагент 2 цинат щелочного металла Услови  реакции в растворителе при О ° С, в присутствии HCI Зтабл.

Description

32002738 .4Изобретение относитс  к новым произ-(а) 3-(4-Фторфенокси)толуол.

водным N-гидроксимочевин общей форму-Раствор 4-фторфенолэ (112,0 г, Aldrich)

лыв анизоле (250 мл) добавл ли по капл м в

течение 1 ч к перемешиваемой суспензии

И ОН5 NaH (26,4 г) в анизоле (250 мл). Когда добавд д i 1 . /(ление заканчивали, смесь перемешивали

Аг-и-АГ-Y-у рлк ло при комнатной температуре в течение 16 ч.

ЈН-х UJNriKЗатем последовательно, в течение 30 мин,

здобавл ли 3-бромтолуол (188,1 г, Aldrich),

где Аг-галоидфенил;10 хлорид меди (I) (50,0 г) и ТДА-1 (трис(2-(2-меАг - 1,3- или 1,4-фенилен;токсиэтокси(этил)амин в количестве 158 мл.

Y - (EJ-CH CH;Когда добавление заканчивалось, смесь наR1 означает водород или С1-С4-алкил, в гревалась с обратным холодильником в тевиде R- или S-энантиомерных форм, или их чение 22 ч, затем охлаждалась до комнатной

смеси, или их фармацевтически прием л е- 15 температуры, и к ней добавл ли (2000 мл)

мым сол м с щелочным металлом.обладаю- эфира. Смесь фильтровали через Гифло и

щим свойствами ингибитировать фильтрат промывали 2М водным НО. 1М

5-липоксипеназу иантиоксидантнымисвой- водным NaOH и водой, затем сушили и выствами с длительным сроком действи .паривали в вакууме. Остающеес  масло пеУказанные соединени  могут найти 20 регон ли и получали целевой продукт (101,9

применение при профилактике или лечении г) с т.кип. 129-134°С (9 мм рт.ст.).

клинических заболеваний, при которых по-(о) 1-Дибромметил-3-(4-фторфенокказан ингибитор метаболического действи  си)бензол.

арахидоновой кислоты, посредником кото-Раствор продукта из стадии (а) (101,9 г)

рой  вл етс  мигоксигеназа.25 и NBS (206,7 г) в CCU (500 мл) нагревали до

Известны производные гидроксамовой температуры кипени  с обратным холодиль- кислоты - а -алкилированные N-алканоил- ником. Затем добавл ли AIBN (100 мг) и гидроксамовые кислоты (0- которые  вл ют- смесь подвергали облучению лампой сред- с  ингибиторами 5-липоксигеназного него давлени  при 254 нм при нагревании с Фермента. Недостатком  вл етс  неустой- 30 обратным холодильником в течение 7 ч. Спу- чивость R-изомера. Вследствие этого необ- ст  0,5; 1; 2; 4 и 6 ч добавл ли дополнитель- ходимо использовать только чистый ные порции AIBN. Смесь охлаждали до S-изомер, что снижает экономичность ис- комнатной температуры, фильтровали и пользовани .фильтрат выпаривали в вакууме, получа  цеЦелью данного изобретени   вл етс  35 левой продукт в виде оранжевого масла разработка способа получени  произвол- (195,3 г).

ных N-гидроксимочевин общей формулы 1(с) 3-{4-Фторфенокси)бензальдегид.

или их фармацевтически приемлемых солейСмесь продукта из стадии (Ь) (181,8 г)

с щелочным металлом в виде R- или S-эиан- СаСОз (151,7 г) и ЕДТА 2Na -2НгО (37,7 г) в тиомерных форм, или их смеси, заключаю- 40 смеси этанол/вода (1140 мл/284 мл) нагре- щийс  в том, что соединение общей вали с обратным холодильником в течение формулы20 ч. Смесь охлаждали до комнатной темпе ратуры , фильтровали и фильтрат выпариваt 1ли в вакууме. Остающеес  масло брали в

Ar-0-Ar-Y-C-NHOHШ) } 45 эфир (500 мл), промывали 2М водным рас1 ,,твором HCI, насыщенным водным раство3ром NaHCOa и водой, сушили и выпаривали

где Аг, Аг1 имеют вышеуказанные значени , в вакууме, дава  в зкое оранжевое масло, подвергают взаимодействию с циана- которое подвергали хроматографии дважды том щелочного металла в услови х, обеспе- 50 через силикагель с использованием смеси чивающих превращение N-A-группы в эфира (40-60°С) петролейного эфира (1:9), -CONHR -группу с последующим, при необ- получа  целевой продукт (69,6 г), ходимости, превращением соединени  фор-(d) ЦЗ-(4-Фторфенокси)фенил бут-1-енмулы 1 в соль щелочного металла.3-он.

55 Смесь продукта из стадии (с) (69,6 г),

Данное изобретение иллюстрируетс  диметилацетилметилфосфоната (56,2 г) и

нижеприведенными примерами.безводного КаСОз (88,9 г) в ТГФ (500 мл)

Пример 1. Получение (E)-N-{3- 3-{4- нагревали с обратным холодильником в тефторфенокси )фенил}-1(Й,5)-метилпроп-2-ечение 24 ч. Смесь охлаждали до комнатной

н-1-ил -М-гидроксимочевины. температуры, фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме, Остающеес  масло брали в эфир {500 мл) промывали в вакууме. Остающеес  масло брали в эфир (500 M3i), промывали водой, насыщенным водным раствором МаНСОз и водой, сушили и выпаривали в вакууме, получа  целевой продукт (83,4 г).

(e)М-{1- 3-(4-Фторфенокси)фенил бут-2- ен-3-ил-гидроксиламин.

Пиридин (63,6 г) по капл м добавл ли в течение 1 ч к перемешиваемому раствору продукта из стадии (d)(82,5 г) и хлоргидрата гидроксиламина (33,6 г) в метаноле (1000 мл). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали в течение 1,5 ч. затем охлаждали в смеси лед/вода и добавл лась безводную щавелевую кислоту (289,8 г). Далее добавл ли метанол (750 мл) и к перемешиваемой смеси в течение 3.5 ч добавл ли пи- аноборгидрид натри  (101,2 г). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали в течение 2 ч при 0-5°С и затем в течение 20 ч при комнатной температуре. Смесь фильтровали, фильтрат выпаривали в вакууме и остающеес  масло брали в эфир (1000 мл), промывали водой и охлаждали смесью лед/вода. С помощью добавлени  ЮМ водного раствора NaOH pH смеси доводили примерно до 9 и органическую фазу удал ли . Водную фазу экстрагировали эфиром и органическую фазу и экстракт объедин ли, промывали водой, .сушили и выпаривали в вакууме, получа  целевой продукт в виде рыжевато-коричневого масла (92,7 г), которое кристаллизовалось при сто нии.

(f)(Е)-М-{3- 3-(4-фторфенокси)фенилЗ- 1(Р,5)метилпроп-2-ен-1-ил}-М-гидроксимо

чевина. - 2М водный раствор HCI (645 мл) добавл ли при 0°С в течение 1,5 ч к перемешиваемому раствору продукта из стадии (е) (88,0 г) и цианата кали  (79,2 г) в ТГФ (750 мл). Когда добавление заканчивали, смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, затем давали возможность разделитьс . Органическую фазу удал ли, водную фазу экстрагировали эфиром, и органическую фазу и экстракты объедин ли, промывали наыщенным водным раствором МаНСОз и водой, сушили и выпаривали в вакууме, дава  бесцветное клейкое твердое вещество. Последнее растирали со смесью эфир (40-60 петролейный эфир (3:2), затем перекристал- изовывали из смеси этилацетата (40-60°С) петролейного эфира (2:1), дава  бесцветное вердое вещество (67,8 г) с т.пл. 133,5-135°С разл).

Анализ: С 64.81%; 64,55%; Н 5,43%, ,42%, N8,52%; 8,66%.

Пример 2. Получение (E)-N-{3-{3-{4- фторфенокси)фенил}-1 (Наметил проп-2-ен- 1-ил}-М-гидроксимочевины,

(а) Бут-3-ин-2-(5)-ол.

5Бут-3-ин-2(Я)-ол получали с помощью

разложени  на составные части ( ± )-бут-3- ин-2-ола (Albrich) в соответствии с методикой , описанной в J.Med.Chem. 31,156.1988, (в) М,0-бис(трет-бутоксикарбонил)-М10 бут-3-ин-2(Р)-ил гидроксиламин.

ДЕАД (180.0 г) добавл ли по капл м при (-) 78°С в течение 1 ч к перемешиваемому раствору бут-3-ин-2-(Я}-ола из стадии (а) (55.0 J) трифенилфесфина (258.0 г) и N,015 бифрет-бутоксикарбоксил) гидроксилами- нз (183.0 г, Fluka) в толуоле (1500 мл). Когда добавление заканчивали, смеси давали возможность нагревани  до комнатной температуры и затем ее перемешивали в течение

0 2 ч. К смеси добавл ли (40-60°С) петролейный эфир (1500 мл), смесь фильтровали через фильтр Гифло и фильтрат выпаривали в вакууме, дава  целевой продукт & виде масла , которое кристаллизовалось при сто нии.

5 (с) М,О-бис(трет-бутоксикарбоксид)-М- бут-3-ен-2(Я)-ил гидро1ссиламин.

Перемешиваемую смесь продукта из стадии (Ь) (200,0 г) и 5%-ный раствор масса/масса Pd/8aS04 (8.8 г) в пиридине (1000

0 мл) подвергали гидрированию при атмосферном давлении до тех пор, пока поглощение водорода не прекращалось. Смесь фильтровали.через фильтр Гифло, фильтрат выпаривали в вакууме и остающеес  масло

5 брали в эфир (1000 мл), промывали 20 мае. % водного раствора лимонной кислоты и воды, сушили и выпаривали в вакууме, по целевой продукт (192,0 г).

(d)1-бром-3-{4-фторфенокси)бензол.

0 Водный раствор КОН (49,0 г в 100 мл воды) добавл ли в перемешиваемый раствор 4-фторфенола (84,0 г в метаноле (250 мл). Когда добавление заканчивали, смесь выпаривали в вакууме и оставшеес  твердое

5 вещество растирали и брали в 1-метил-2- пирролидинон (300 мл). К смеси добавл ли 3-фтсрбромбензол (131,3 г, Albrtch) и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 24 ч, затем охлаждали до комнатной

0 температуры, вливали в воду (1500 мл) и экстрагировали эфиром. Объединенные экстракты промывали 2ТИ водным раствором NaOH, 2M водным раствором HCI и водой, сушили и выпаривали в вакууме. Остающее5 с  масло перегон ли, получа  целевой продукт (103,0 г) с т.кип. 85-100°С (0,25 мм рт.ст.).

(e)(Е)-М-{3- 3-(4-фторфенокси)фенил - 1(Й)-метилпроп-2-ен-1-ил}гидроксиламин.

Смесь продукта из стадии (с) (100,7 г), продукта из стадии (d) (103,0 г) три(о-то- лил)фосфина (10,0 г) и ацетата паллади  (II) (4,0 г) в три (н-бутил)амине (300 мл) перемешивали при 115°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали примерно до 90°С, выпаривали в вакууме и остаток брали в эфир (1000 мл), промывали 33 мас.% водного раствора лимонной кислоты и фильтровали через фильтр Гифло. Фильтрат промывали 10 мас.% водного раствора лимонной кислоты и водой сушили и выпаривали в вакууме, получа  в зкое рыжевато-коричневое мас- ло. Последнее брали в метанол (1000 мл) и конц. НС (100 мл) и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч. затем охлаждали до комнатной температуры и выпаривали в вакууме. Остаток брали в воду (1000 мл) и ЮМ водный раствор NaOH (125 мл), экстрагировали эфиром и объединенные экстракты промывали водой, сушили и выпаривали в вакууме. Остающеес  рыжевато-коричневое масло подвергали хроматографии через силикагель с использованием смеси эфира (40-60°С) петролейного эфира (9:1) с последующим использованием эфира, дава  целевой продукт в виде желтого масла (21,9 г).

(f) (Е)-М-{3-{3-{4-фторфенокси)фенил - 1{р{)-метилпроп-2-ен-1-ил}-М-гидроксимоче вина.

2М водный раствор HCI (160 мл) добавл ли по капл м при 0°С в течение 1 ч к перемешиваемому раствору продукта из стадии (е) (21,9 г) и цианата кали  (19,7 г) в ТГФ (190 мл). Когда добавление зака нчива- ли, смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч, затем к смеси добавл ли насыщенный водный раствор NaCI и органическую фазу удал ли. Водную фазу экстрагировали эфиром и органическую фазу и экстракты объедин ли , промывали 2М водным раствором НС, насыщенным водным раствором МаНСОз, водой и насыщенным водным раствором NaCI сушили и выпаривали в вакууме , получа  кремневое твердое вещество, которое перекристаллизовывали из смеси этилацетата (40-60°С) петролейного эфира (2:1), получа  бесцветные пластины (17,7 г) с т.пл. 133-135°С(разл.}200 МГц Н ЯМР и ИК согласовывались с целевым продуктом.

Анализ: С 64,10%; 64,54%; Н 5,47%;

5,42: N8,78%, 8,86%.С а Ь3 ± 40.81°(с-1,0, ЕЮН).

Пример 3. Получение (Е}-М-{3-{3-{4- фторфенокси)фенил -1(5)-метилпроп-2-ен- 1 -и n}-N-r идроксимочевина.

(А) Бут-3-ин-2(к;)-ол.

Бут-3-ин-2(Р)-ол получали с .помощью разложени  на составные части ( ±) бут-3- ин-2-ола (Aldrlch) в соответствии с методикой , описанной в J.Med.Chem. 31,156, 1988.

(6) М,0-бис(трет-бутоксикарбонил)-Ы (бут-3-ин-2{5)-ил)гидроксиламин.

ДЕАД (81,8 г) добавл ли по капл м при (-) 70°С в течение 1 ч к перемешиваемому раствору бут-3-ин-2(Я)-ола из стадии (а) (25,0

0 г), трифенилфосфина (117,0 г) и М,0-(бис)- трет-(бутоксикарбонил)гидроксиламина (83,2 г Fluka) в толуоле (760 мл). Когда добавление заканчивали, смеси давали возможность нагревани  до комнатной

5 температуры, затем фильтровали и Фильтрат выпаривали в вакууме. Остающеес  масло очищали с помощью хроматографии дважды через силикагель с использованием ДСМ и смеси эфир (40-60°С) петролейный

0 эфир (1:4) соответственно, получа  целевой продукт в виде бледно-желтого масла (98,6

г).

(c)М,О-бис(трет-бутоксикарбонил)-М- (бут-3-ен-2(5)-ил)гидроксиламин.

5 Перемешиваемую смесь продукта из стадии (Ь) (98,6 г) и 10%-ного раствора масса/масса Pd/BaS04 в пиридине (500 мл) подвергали гидрированию при атмосферном давлении до тех пор, пока водород не

0 переставал поглощатьс . Смесь фильтровали через фильтр Гифло, фильтрат выпаривали в вакууме и остающеес  масло брали в эфир (500 мл), промывали 20 мае. % водного раствора лимонной кислоты и водой, суши5 ли и упаривали в вакууме, получа  желаемый продукт в виде светло-оранжевого .масла (90,0 г).

(d)1-Бром-3-(4-фторфенокси)бензол. 1-Бром-3-(4-фторфенокси)бензол приго0 тавливали по способу, описанному в стадии (d) примера синтеза 2.

(e)(Е)-М-{3- 3-(4-фторфенокси)фенил - 1(5)-метилпроп-2-ен-1-ил}-гидроксиламин,

Смесь продукта из стадии (с)(57,4 г) про- 5 дукта из стадии (d) (58,7 г), три (О-толил)фос- фина (5,0 г) и паллади  (И) ацетата (2,0 г) в три (н-бутил) амине (150 мл) перемешивали при 110-120°С в течение 3,5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, упаривали 0 в вакууме и остаток брали в простой эфир (500 мл) и фильтровали через фильтр Гифто. Фильтрат промывали 10 мас.% объем водного раствора лимонной кислоты и водой, сушили и упаривали в вакууме, дава  рыже- 5 вато-коричневое масло. Последнее брали в метанол (500 мл) и HCI (50 мл) и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и упаривали в вакууме. Остаток брали в воду (500 мл) и 10 М водный раствор NaOH

(60 мл), экстрагировали простым эфиром и объединенные экстракты промывали до нейтральной реакции водой, сушили и упаривали в вакууме. Остаток подвергали мгновенной хроматографии через силикагель с использованием смеси простого эфира (40- 60°С) петролейного эфира (1-1). отбрасыва- ли, затем использовали смесь в соотношении 9:1), в результате чего получали желаемый продукт в виде в зкого светло- желтого масла (32,5 г).

(f) {Е)-М-{3-{4-фторфенокси(фенил}-1(5}- метилпроп-2-ен-1-ил}-Г -гидроксимочевина.

2М водный раствор сол ной кислоты (71,1 мл) добавл ли по капл м при 0°С в течение 45 мин к перемешиваемому раствору продукта из стадии (е) (32.5 г) и циа- нату кали  (29,3 г) в тетрагидрофуране (282 мл). По завершении добавлени  смесь перемешивали при 0°С в течение 45 мин, затем добавл ли насыщенный водный раствор NaCI и органическую фазу удал ли. Водную фазу экстрагировали простым эфиром и органическую фазу и экстракт объедин ли, промывали 2М водным раствором НС1 и во- дои, сушили и упаривали в вакууме, дава  клейкое твердое вещество, которое пере- кристаллизовывали из этилацетата, дава  бесцветные пластинки (25,8 г) с т.пл. 131- 132,. 200 МГц. 1Н, ЯМР и ИК идентифи- цированы с желаемым продуктом.

Анализ: С 64,7%; 64,54%; Н 5,42%, 5,52%; N8,79%; 8,86%.

.61°(с-1,0; ЕЮН).

Пример 4. Приготовление (E)-N-{3-{3-

(4-хлорфеноксил)фенил -1($)метилпроп- 2-ен-1-ил}-М-гидроксимочевины.

(а) (4Е)(4-хлорфенокси)фенил бу- тен-3-он 10 н. водный раствор МаОН (2 мл) добавл ли к раствору 3-(4-хлорфенокси)бен- зальдегида (23,3 r)Aldrich в ацетоне (150 мл), и смесь энергично перемешивали. После нескольких минут перемешивани  температуру повышали до 32°С. Смесь оставл ли сто ть в течение 5 мин и затем выливали R 2М водный раствор сол ной кислоты (600 мл) и экстрагировали смесью простого эфира и петролейного зфира (1:1, 400 мл). Экстракт промывалс  водой и насыщенным водным раствором МаОН сушили над суль- фатом магни  и десорбировали, получа  альдольный продукт. Последний брали в толуол (300 мл), добавл ли п-толуолсульфоно- вую кислоту (1 г) и смесь нагревали в течение 1 ч. Смесь затем охлаждали, промывали на- сыщенным водным раствором бикарбоната натри  и насыщенным водным раствором NaCI, сушили над сульфатом магни  и де- сорбировали. Остаток элюировали через силикагельную колонку с использов нием смеси метилен хлорида (40-60°С) петролейного эфира (1:1, с последующим изменением соотношени  на 3:1), и элюат десорбировалс , дава  желаемый продукт (19.0 г).

(о) (Е}-1-(3-(4-хлорфенокси)фенилбутен- 3-оноксим.

Продукт стадии (а) (19,0 г) и хлоргидрат гидроксиламина(6,9 г) брали в метанол (100 мл), добавл ли пиридин (200 мл) и смесь перемешивали в течение 1 ч. Смесь затем Абсорбировалась, вновь раствор лась в простом зфире (200 мл), ее промывали 2М водным раствором сол ной кислоты и насыщенным водным раствором NaCI. сушили над сульфатом магни  и десорбировали, да- ча  желаемый продукт (20,3 г),

(c)(Е)-М-{1-метил 3- 3-(4-хлорфенок- си)фенил}проп-2-енил}гидроксиламин.

Продукт из стадии (Ь) (20 г) брали в метанол (100 мл) и добавл ли щавелевую кислоту (31,3 г). Смесь охлаждали в лед ной бане и добавл ли порци ми цианборгидрид натри  (22 г) в атмосфере азота в течение 3 ч. Смесь перемешивали в течение 1,5 ч, затем добавл ли дополнительное количество цианборгидрида натри  (2 г) и перемешивание продолжали еще в течение 0,5 ч. Затем смесь десорбировалась, и остаток распредел лс  между этилацетатом (300 мл) и водой (300 мл). Органический слой отдел ли, промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натри  и насыщенным водным раствором NaD, затем подвергали десорбции , дава  желаемый продукт в виде неочищенного гидроксилзмина.

(d)(Е)гЫ-{1-метил-3- 3-(4-хлорфенок- си)фенил проп-2-ен-Т-ил}- гидроксимоче вина.

Порцию продукта из стадии (с) (6,0 г) брали в ТГФ (60 мл) и при 0°С добавл ли цианат кали  (4,9 г). Через 15 мин, по капл м добавл ли 5М водный раствор HCI (20 мл) и смесь перемешивали в течение 10 мин. Затем к смеси добавл ли насыщенный водный раствор NaCI (100 мл) и эфир (100 мл) и органический слой отдел ли, промывали 2М водным раствором НС1(100 мл) и насыщенным водным раствором NaCI (100 мл), сушили над MgS04 и подвергали десорбции, дава  целевой продукт, который перекри- сталлизоеывалс  из-смеси этилацетат/пет- ролейныйэфир. Выход4,4 г;т.пл. 132-135°С.

Пример 5. Получение (E)-N-{3- 3-(4- хлорфенокси)фенил -1-{5}-метилпроп-2-ен- 1 -ил} -гидроксимочевины.

(а) ((4-хлорфенокси}фенил бут-1- ен-3-он.

Смесь 3-{4-хлорфенокси)бензальдегида (50,0 г, Aid rich) диметилацетилфосфоната (35,7 г, Lancaster) и безводного К2СОз (59,4 г) вТГФ (300 мл) перемешивали в атмосфере Й2 при 55-55°С в течение 20 ч. Охлаждаемую смесь фильтровали, остаток промывали ТГФ, и объединенные фильтраты выпаривали в вакууме, дава  оранжевое масло, которое подвергали м ;овенной хроматографии на силикагельной /о лонке с использовани- ем смеси эфир (40-60°С, петролейный эфир) 1:1 по объему в качестве элюента, дава  целевой продукт в виде в зкого бледно-желтого масла (52,8 г).

(b)(Е)-1(К)метил-3- 3-(4-хлорфенокси)фе- нмл проп-2-ен-1-ол.

ВНз ТГФ (1,0 М, 96 мл) и раствор продукта из стадии (а) (52,7 г) в ТГФ (общий объем 96 мл) одновременно добавл ли в атмосфере азота к перемешиваемому раствоу (8)-3,3-дифенил-пирроло(1,2-сХ1,3,2)оксазаб орилидина в ТГФ (0,3 М, 33 мл, приготовленного по методу, описанному в ЖОХ 53,2861 (1988)). Когда добавление закончили, смесь перемешивали при комнатной температуре а течение 15 мин, затем вливали в смесь лед (2 М водный раствор НС1 300 г/300 мл), перемешивали в течение 30 мин и экстрагировалась эфиром (3x300 мл). Объединенные экстракты промывали 2 М водным раство- ром НС (200 мл), насыщенным водным рас- TSOPOM МаНСОз (200 мл) и водой (200 мл), сушили над N82S04 и выпаривали в вакууме, дава  целевой продукт в виде в зкого желтого масла (55,3 г), которое частично кри- сталлизовалось из смеси эфир (40-60°С, петролейный эфир (1:1) по объему). Маточную жидкость декантировали и подвергали мгновенной хроматографии на силмкагель- ной колонке, дава  целевой продукт в виде

бледно-желтого масла (25,7 г), а &3 5 + 8.7° (,0, ЕЮН). 200 МГц 1Н, ЯМР и Ж согласуютс  с предлагаемой структурой.

(c)(Е)-МО-бис(трет-бутоксикарбонил)- N -{1 (3)-мети л-3- 3-{4-хло рфе н о кси)фен и л J- проп-2-ен-1-ил}гидроксиламин.

Раствор ДЕАД {24,5 г) в толуоле (50 мл) добавл ли к перемешиваемой смеси продукта из стадии (Ь) (25,7 г) М,0-бис{трет-бу- токсикарбонил)гидроксиламина (22,9 г, Fiuka) и трифенилфосфина {36,8 г) в толуоле (375 мл) при (-)65-{-)700С., Когда добавление закончили, смесь перемешивалась з течение 4 ч при (-)65-(-}700С. затем дополнительно добавл ли трифенилфосфин (5,0 г) с последующим дополнительным добавлением ДЕАД (3,3 г) и смесь перемешивали в течение еще 1 ч при (-)65-{-}700С. Подогретую смесь выпаривали в вакууме, получа  коричневое масло, которое последоватеьл

0

5

0 5 0 5 0

5

5

но подвергали мгновенной хроматографии через две силикагельные колонки с использованием ДСМ и смеси ДСМ ( петролейный эфир) эфир (3:6:0,25 объем/объем/объем) соответственно в качестве элюентов. дава  целевой продукт в виде в зкого жел того масла (20,3 г).

(d)(Е)-М-1(5)-метил-3- 3-{4-хлорфенок- си)фенил проп-2-ен-1-ил}гидроксиламин.

Три торуксус а  кислота (28 мл) добавл ли в атмосфере N2 при 0°С к перемешиваемому раствору продукта из стадии (с) 20,3 г в ДСМ (112 мл). Когда добавление заканчивали , смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем к смеси добавл ли эфир(100 мл) и воду (100 млк При 0°С к энергично перемешиваемой смеси добавл ли ЮМ водный раствор NaOH {32 мл). Смесь подщелачивали избытком насыщенного водного раствора NaHCOa, экстрагировали эфиром (200 мл) и экстракт промывали насыщенным водным раствором МаНСОЗ (100 мл и водой (2x100 мл), сушили над N32S04 и выпаривали в вакууме, получа  в зкое желтое масло, которое подвергали мгновенной хроматографии на силикагель- ной колонке с использованием смеси эфир/петролейный эфир (4:1), после чего получили целевой продукт, т.пл. 83-84°С ( а)25- 31,1°(с±1,2;СНС1з).

(e)(Е)-М-{1-(5)-метил-3- 3-{4-хлорфенок- си)фенил лроп-2-ен-1-ил}-М-гидроксимоче вина.

Порци  продукта из стадии (d) (0,29 г) брали в ТГФ (10 мл) и при 0°С добавл ли цианат кали  (0,25 г). Через К мин, по капл м добавл ли 2М водный раствор HCI и смесь перемешивали в течение 2 ч. Затем к смеси добавл ли насыщенный водный раствор NaCI (50 мл) и эфир (50 мл) и органический слой отдел ли, промывали насыщенным водным раствором NaHCOs (50 мл), сушили над MgS04 и десорбировали, дава  целевой продукт, который перекри- сталлизовывалс  из смеси этилацетат/пет- ролейный эфир. Выход 0,26 г: т.пл. 119-120°С, ар3 -40,0°(,0; ЕЮН).

Пример 6, Получение натриевой соли (Е)-г4-{3- 3-(4-фторфенокси)фен ил 1 -(R, 5}-м етилпроп-2-ен-1-ил}-М-гидроксимочевины.

Соединени  примера синтеза 1 (1,0 г) раствор ли а смеси водного гидроксида натри  (0,11 г в 25 мл воды) и метанола (30 мл). Метанол выпаривали в вакууме и оставшийс  раствор подвергали сушке вымораживанием , дава  желаемый продукт в виде кремового твердого вещества.

200 МГц ТН ЯМР (ДМСО-de, млн.дол.): 1,10-1,21 (ЗИ, д.,-СНз), 4,75-4.92(14, м.,СН-/,

5,27-6,14 (2Н, шир.с. NH2), 6.22-6,51 (2Н, с., НОСИ) и 6,69-7,37) (9Н, м.. ароматика), отсутствие -ОН сигнала.

Примеры фармацевтических препаративных форм.

Активным ингредиентом в следующих препаративных формах  вл етс  любое соединение изобретени  (как определено выше , например, любое из соединений примеров синтеза от 1 до 5).

Пример А. Состав таблетки, мг:

Активный

ингредиент5,0

Лактоза82,0

Крахмал10,0

Повидон2,0

Стеарат магни 1,0

Смешивают имеете активный ингредиент , лактозу и крахмал. Гранулируют порошки с использованием раствора повидона в очищенной воде. Сушат гранулы, добавл ют стеарат магни  и прессуют дл  получени  таблеток (100 мг на таблетку).

Пример В: Состав мази:

Активный

ингредиент, мг1,0

Белый м гкий

парафин, гдо 100,0

Диспергируют активный ингредиент в небольшом объеме носител . Постепенно ввод т его в массу дл  получени  гладкого, гомогенного продукта. Наполн ют сминаемые металлические тюбики.

Пример С. Крем дл  местного использовани , г:

Активный

ингредиент1.0

Полавакс20,0

Безводный

ланолин2,0

Белый пчелиный

воск2,5

Метилгидроксибензоат0 ,1

Дистиллированна 

водаДо 100,0

Нагревают полавакс, пчелиный воск и ланолин вместе при 60°С. Добавл ют раствор метилгидроксибензоата. Гомогенизируют с использованием высокоскоростного перемешивани . Температуре даетс  возможность понизитьс  до 50°С. Добавл ют и диспергируют активный ингредиент. Даетс  возможность охладитьс  при перемешивании при медленной скорости.

Пример Д. Лосьон дл  местного использовани , г:

Активный ингредиент1,0

Сорбитан монолаурат0,6

Полисорбзт 200,6

Кетостеариловый

спирт1.2

Глицерин6,0

Метилгидрокси- 5бензоат0,2

Очищенна  вода

В.Р., млДо 100,0

Метилгидроксибензоат и глицерин раствор ли в 70 мл воды при 75°С. Сорбитан 10 монолэурат, Полисорбат20икетостеарило- вый спирт расплавл ли вместе при 75°С и добавл ли в водный раствор. Получающуюс  в результате эмульсию гомогенизировали , давали возможность охладитьс  при 15 непрерывном перемешивании и добавл ли активный ингредиент в виде суспензии и оставшейс  воде. Смесь перемешивали до тех пор, пока она не становилась гомогенной . 0 П р и м е р Е. Глазные капли, г:

Активный

ингредиент0,5

Метилгидроксибензоат0 ,01 5 Пропилгидроксибензоат0 ,04

Очищенна  вода

В.Р., млДо 100,0

Метил- и пропилгидроксибензоаты рас- 0 твор ли в 70 мл очищенной воды при 75°С и получающемус  раствору давали возможность охладитьс . Затем добавл ли активный ингредиент и раствор доводили до 100 мл очищенной водой. Раствор стерилизова- 5 ли путем фильтрации через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм и асептически заполн ли в подход щие стерильные контейнеры.

Пример Г. Иньецирусмый раствор: О Активный

ингредиент, мг10,0 мг

Вода дл  инъекций

В.Р., млДо 1,0

Активный ингредиент раствор лс  в по- 5 ловине количества воды дл  инъекций и затем раствор доводили до объема и стерилизовали с помощью фильтрации, Получающийс  роствор распредел й по ампулам в асептических услови х. 0 ПримерС. Капсулы с порошком дл  ингал ций, мг:

Активный ингредиент

(порошок 0.5-7,0-мш)4,0

Лактоза (порошок 5 30-90 мкм)46,0

Порошки перемешивали до тех пор, пока не становились гомогенными и заполн лс  в капсулы подход щих размеров из твердого желатина (50 мг на капсулу).

Пример И. Аэрозоль дл  ингал ции, Mr- Активный ингредиент (0,5-7,0 мкм)

порошок200

Сорбитан

триолеат100

Сахарин натрий

(порошок 0,5-7,0 мкм)5

Метанол2

Трихлорфторметан , г4,2

Дихлордифторметан , млДо 100

Сорбитан триолеат и ментол раствор ли в трихлорфторметане. Сахарин натрий и активный ингредиент диспергировали в смеси, которую затем помещали в подход щие аэрозольные канистры и через систему клапанов пропускали дихлорфторметан. Данна  композици  содержала 2 мг активного ингредиента на каждые 100 мкл дозы.

Биологические данные.

Экс виво ингибирование 5-липоксиге- назы.

Предварительное изучение на крысах и кроликах показало, что рацемат примера 1 синтеза и соответствующие энантиомеры примеров 2 и 3 синтеза эффективно ингиби- руют стимулируемый синтез лейкотриена B4(LTB4), соединени , образуемого мз ара- хидоновой кислоты через 5-липоксигеназу.

После назначени  испытываемого соединени  в плазме периодически измер ли концентрацию LTB4 и выражали как процент среднего контрольного значени . Используема  процедура описана в J.Pharmaa 94,528 (1988) и может быть кратко охарактеризована следующим образом.

За 2 мин сбора повторные образцы (0,5 мл) крови стимулировались кальциевым ионофором А23187 (конечна  концентраци  15 мкг/мл) на прот жении 30 мин при 37°С. Когда инкубирование завершалось, образцы центрифугировали (12 тыс,/°С в течение 2 мин) и свободную от клеток плазму удал лась . Затем с помощью специального радио- иммуноанализа определ ли концентрацию LTB4 в плазме.

Соединени  по примерам синтеза 1-3 все ингибмровали стимулированный экс виво синтез LJB4 в течение нескольких часов после их назначени . Соединение по примеру синтеза 1, например, когда оно вводилось кроликам орально в дозе 2 мг/кг, ингибировало синтез LTB4 более, чем на 50%. в течение периода более, чем 16 ч. То же самое соединение, когда оно назначалось орально крысам в дозе 10 мг/кг ингибировало синтез LTB4 более, чем на 50%, в течение более, чем 10 ч. Энантиомеры примеров синтеза 2 и 3 давали аналогичные результаты.

Ингибирование 5-липоксигеназы ин витро.

Кровь от обычных свободных от аспирина добровольцев центрифугировали дл  отделени  лейкоцитов от эритроцитов и тромбоцитов. Раствор испытываемого соединени  в ДМСО (10 мкл, конечна  концен0 траци  в интервале 0,01-100 мкМ) добавл ли к гомогенату клето (470 мкл), и смесь инкубировалась при 37°С в течение 5 мин. Затем добавл ли одновременно растворы арахидоновой кислоты в метаноле

5 (250 мкМ, 10 мкМ, конечна  концентраци  5 мкМ) и хлористый кальций в воде (100 мМ, 10 мкл, конечна - концентраци  2 мМ), и смесь инкубировалась при 37°С еще в течение 5 мин. Реакцию прекращали с помощью

0 кип чени . Проводили радиоиммуноанализ на лейкотриен В4.

Эксперимент повтор ли с использованием цельной человеческой крови, стимулированной ионофором.

5 Дл  соединений примеров синтеза 1-5 результаты представлены в табл.1 (ICso, мкМ).

Антиоксидантна  активность.

В качестве меры антиоксидантной ак0 тивности определ ли способности предлагаемых соединений захватывать пероксильный радикал с помощью испытани  способности каждого соединени  ингибировать перокси- лениелиноленовой кислоты с использовани5 ем метода, описанного в Blochem. Pharm. 38, 1465(1989).

Соединение по примеру синтеза 1 имело константу кажущейс  скорости (Кдн) захвата пероксильных радикалов 0,408.

0 Эффекты сочетани  с МЗАДД.

Самцы новозеландских белых кроликов (2,5-3 кг) иммунизировали с помощью интра- дермальных инъекций 4 мг овалбуминз в 1 мл полного адьюванта Freunda. Спуст  14

5 дней животных повторно иммунизировали таким же образом, Через 5 дней после второй иммунизации индуцировали артрит в правом коленном суставе с помощью инъецировани  1 мл стерильного раствора овал0 бумина (5 мг/мл) в полость сустава.

а

Измер ли диаметры сустава (на рандомизированной слепой основе) циркулем с частыми интервалами после провокацион- 5 ного введени  антигена. Спуст  14 дней жи- вотных умерщвл ли и суставное пространство промывалось 1 мл физиологического раствора и получающуюс  в результате жидкость брали дл  общего и дифференциального подсчета лейкоцитов.

Сенсилизированных животных беспор дочно распредел ли на группы 5-8. Соединение по примера синтеза °1: (Е)-М-{1-метил-3-{3-(4-фторфенокси)фенил п роп-2-ен-1-ил}-М-гидроксимочевина (соединение А), вводили в суспензии после 18 ч измельчени  на шаровой мельнице в 0,25%- ном целаколе, а в качестве носител  нестероидный противовоспалительный индометацин раствор ли в небольшом объеме 1М Трис буфера с рН 8. а затем доводи- ли до нужного объема 0,25%-ным целаколом. Контрольные животные получали 0,25%-ный целакол. Каждое животное получало оральную дозу (приблизительно 5 мл) носител  или лекарства 3 раза каждые 24 ч. Дозы веществ назначали в 8,0 ч утра, 4,0ч вечера и 12ч ночи в течение 16-17 дней, начина  с момента за 1 ч до введени  антигена в нулевой день. Все дозы давали орально с помощью желудочного зонда. Группы были следующими:

1-7: контрольные (5 мл 0,2&%-ного цела- кола, х 3/24 ч)

8-14: 1 мг/кгиндометацина, растворенного в 0,25%-ном целаколе х 3/24 ч

15-21:2 мг/кг соединени  А, суспендированного в 0,25%-ном целаколе х 3/24 ч

22-28: 2 мг/кг соединени  А, суспендированного в 0,25%-ном целаколе плюс 1 мг/кг индометацина, растворенного в 0,25%-ном целаколе.

Опухание сустава

У контрольных животных введение антигена вызывало увеличение диаметра сустава на 6-7 мм, которое достигало пика через 2 дн  после введени  провокационной дозы антигена. Припухлость сустава сохран лась в контрольной группе в течение периода эксперимента (14 дней) и к тому времени, когда животных убивали, диаметры артритных суставов были приблизительно на 5 мм больше. Лечение ни одним из лекарстве не снижали опухоль суставов в течение первых двух дней после выделени  провокационной дозы вещества, но, начина  с третьего дн  и далее, соединение А снижало припухлость на величину до 26%, а индометацин на 53%, по сравнению с контрольными животными, обработанными носителем . Самое большое и наиболее посто нное уменьшение припухлости (до 72%) наблюдалось в группе, получающей сочетание соединени  А и индометацина. Результаты приведены в табл.2.

Исследование синовиальной жидкости.

Синовиальна  и выстилочна  ткани удал ли из сустава, фиксировали, обрабатывали, разрезали и окрашивали дл  исследовани  под микроскопом. Гистологические показатели выводили дл  общей массы воспаленной синовиальной выстипки, инфильтрации лимфоцитов и полиморфного содержимого. Микроскопические препараты на предмет- 5 ных стеклах исследовали на рандомизированной слепой основе.

Синовиальные жидкости из артритных суставов контрольных животных содержали приблизительно 106 лейкоцитов, из которых 0 примерно 80% были полиморфами. Соединение А или один индометацин оба слегка уменьшали средний показатель лейкоцит- ного инфильтрата в синовиальной жидкости , но наибольшее уменьшение получалось 5 в результате применени  соединени  А с индометацином. Количество лейкоцитов (число клеток хЮ6) представлено ниже.

Соединение А Индометацин А+Индо- метацин Контроль

0 6,17,30,97.9

Анализ хр щевого протеогликана Соединительный хр щ вскрывалс  с концов бедренных костей, и вываривалс  с попаином перед измерением концентрации 5 сульфированных гликозаминогликанов (Са- Сов). Содержание протеогликана выражали в мкг САС/мг влажной массы хр ща и сравнивали с величинами, полученными в случае хр ща из противоположного контрольного 0 сустава.

Соединительный хр щ, иссеченный из артритных суставов животных, обработанных носителем, через 14 дней после введени  провокационной дозы антигена, 5 содержал на 43% меньше протеогликана, чем хр щ из противоположных суставов тех же животных.

Соединение А или один индометацин оба уменьшали потери протеогликана из 0 хр ща, но наибольшее уменьшение было в группе, получающей как соединение А. так и индометацин. Результаты показаны ниже, Потер  протеогликана. % Соединение А Индометацин А+Индоме- 5 тацин Контроль

34382643

Гистологическа  оценка синовиальной выстилки

В синовиальной выстилке группы живо0 тных, получающей как соединение А, так и

индометацин, число как лимфоцитов, так и

общих клеток, значительно уменьшалось.

Результаты показаны в табл.3.

5 Приведенные выше данные демонстрируют цитозащитный эффект соединени  А при артрите, особенно, в присутствии несте- роидного противовоспалительного лекарства индометацина.

Данные токсичности

Соединение по примеру синтеза 1 назначали мышам перорально в дозах до 300 Иг/кг и интраперитонально в дозах вплоть до 100 мг/кг. Не наблюдалось ни случаев гибели, ни серьезных вредных эффектов.

Преимущество полученных соединений состоит в том, что (КНюрма энантиомера известных гидроксаматов разлагаетс  быстрее , чем (3)-форма, в то врем  как в случае энантиомеров производных N-оксимочевин формулы 1 данного изобретени  и (R)- и {$)- форма обладает увеличенным сроком жизни .

Увеличение устойчивости (Я)-энантио- мера приводит к экономическому эффекту, вытекающему из возможности получать не индивидуальный энантиомер, и использовать не индивидуальный энантиомер, а рацемат , который содержит 50% реактивного энантиомера.

Соединение формулы I относитс  к группе соединенуй с низкой токсичностью.

(56) ЕР № 0299761, кл. С 07 С 259/06, 1979.

Опухание сустава / мм /

Та б л и ч а 1

Таблица 2

Таблица 3

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ получени  производных М-гид- роксимочевин общей формулы I

   Н5

   | ОН

   Ar-OAr -Y-C-N7

   СНз CONHR где Аг - 4-галоидфенил;W

   Аг - 1,3-или 1,4-фенилен;

   Y-(E)-CH-CH;

   R - водород или Ct - О-алкил: в виде R- или S-энантиомерных форм или

   15

   их смеси, или их фармацевтически прием

   лемых солей с щелочным металлом, отличающийс  тем, что соединение общей

   Н

   формулы II Ar-O-Ar -Y-C-NHOH

   I

   СНз

   где Аг, Аг, Y имеют указанные значени , подвергают взаимодействию с цианатом щелочного металла в услови х, обеспечивающих образование группы CONHR1. где R имеет указанные значени , с последующим . JIOH необходимости, превращением соедийени  формулы I в соль щелочного металла.