RU2002132655A

RU2002132655A - Нуклеотидные последовательности, участвующие в увеличении или уменьшении скорости овуляции у млекопитающих

Info

Publication number: RU2002132655A
Application number: RU2002132655/13A
Authority: RU
Inventors: Олли Виса-Пекка РИТВОС; Джордж Генри ДЭВИС; Сьюзан Мэй ГЭЛЛОУЭЙ; Кеннет Паттрик МАКНЭТТИ
Original assignee: Агрисерч Лимитед; Олли Виса-Пекка РИТВОС
Priority date: 2000-05-05
Filing date: 2001-05-04
Publication date: 2004-08-20

Claims

1. Выделенная мутантная молекула нуклеиновой кислоты GDF-9B, содержащая нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из

a) SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:5 или SEQ ID NO:7;

b) последовательности, способной гибридизоваться в жестких условиях с молекулой определенной в (а);

c) последовательности, которая является функциональным вариантом или фрагментом молекулы, определенной в (а);

d) последовательности, комплементарной молекуле, определенной в (а), (b) или (с);

e) антисмысловой последовательности, соответствующей любой из молекул, определенной в (а)–(d);

f) последовательности, кодирующей полипептид, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6 или SEQ ID NO:8;

g) SEQ ID NO:9;

h) SEQ ID NO:12 или SEQ ID NO:14, и

i) SEQ ID NO:16; и

j) последовательности, которая является функциональным вариантом или фрагментом молекулы, определенной в (f)-(i)

2. Молекула нуклеиновой кислоты по п.1, используемая для идентификации вариантов последовательности у отдельного млекопитающего, связанной с повышенной овуляцией, пониженной овуляцией или стерильностью данного млекопитающего.

3. Генетический маркер для связанной с ДНК селекцией в отношении усиленной овуляции или стерильности у млекопитающего, включающий молекулу нуклеиновой кислоты, которая специфически гибридизуется с нуклеотидной последовательностью по п.1, или с геномной ДНК, кодирующей или связанной с мутантным геном GDF-9B.

4. Генетический маркер по п.3, отличающийся тем, что млекопитающее выбрано из группы, состоящей из людей, овец, крупного рогатого скота, коз, оленей, лошадей, верблюдов, опоссумов, свиней, мышей, крыс, кроликов, зайцев, ласок, хорьков, кошек и собак.

5. Зонд, способный специфически гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью по п.1.

6. Праймер, способный специфически гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью по п.1.

7. Вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.

8. Вектор по п.7, используемый для трансформации клетки-хозяина.

9. Конструкция, включающая молекулу нуклеиновой кислоты по п.1.

10. Конструкция по п.9, используемая для трансформации клетки-хозяина.

11. Выделенный полипептид, включающий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из

а) SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:10, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:15, SEQ ID NO:17, или

b) функционального варианта или фрагмента последовательности, определенной в (а).

12. Способ идентификации млекопитающего, который несет мутантную молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей GDF-9B, включающий следующие стадии: (i) получение образца ткани или крови млекопитающего; (ii) выделение ДНК из образца; и необязательно (iii) выделение ДНК GDF-9B из ДНК, полученной на стадии (i); (iv) зондирование указанной ДНК зондом, комплементарным мутантной ДНК GDF-9B по п.1; (v) амплификация количества мутантной ДНК GDF-9B; и/или (vi) определение того, несет ли последовательность ДНК GDF-9B, полученная на стадии (ii), мутацию, связанную со стерильностью или с повышенной или пониженной овуляцией.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что млекопитающее представляет собой млекопитающее женского пола, и несет единственную копию мутантной молекулы нуклеиновой кислоты GDF-9B.

14. Способ по п.13, отличающийся тем, что млекопитающее представляет собой млекопитающее мужского или женского пола, и несет две копии мутантной молекулы нуклеиновой кислоты GDF-9B.

15. Способ по любому из пп.12-14, отличающийся тем, что млекопитающее выбрано из группы, состоящей из людей, овец, крупного рогатого скота, коз, оленей, лошадей, верблюдов, опоссумов, свиней, мышей, крыс, кроликов, зайцев, ласок, хорьков, кошек и собак.

16. Способ модулирования скорости овуляции у млекопитающего женского пола, включающий стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества агента, представляющего собой полипептид по п.11.

17. Способ по п.16, используемый для увеличения скорости овуляции у млекопитающего женского пола, который не несет мутантной молекулы нуклеиновой кислоты GDF-9B, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества полипептида, выбранного из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:8 или функционального варианта или фрагмента данной последовательности.

18. Способ по п.16, используемый для увеличения скорости овуляции у стерильного млекопитающего женского пола, который несет две копии мутантной молекулы нуклеиновой кислоты GDF-9B, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества полипептида, включающего аминокислотную последовательность SEQ ID NO:10 или функциональный вариант или фрагмент данной последовательности.

19. Способ по п.16, используемый для увеличения или снижения скорости овуляции или индуцирования стерильности у млекопитающего женского пола, включающий введение эффективного количества агента, выбранного из группы, состоящей из а) эффективного иммунизирующего количества полипептида GDF-9B дикого или мутантного типа, включающего аминокислотную последовательность по п.11; b) антисмысловой молекулы нуклеиновой кислоты, направленной против нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид GDF-9B дикого или мутантного типа, включающий аминокислотную последовательность по п.11; с) лиганда, который связывается с или является антигеном к полипептиду GDF-9B дикого или мутантного типа, включающему аминокислотную последовательность по п.11, тем самым ингибируя биологическую активность полипептида GDF-9B мутантного или дикого типа.

20. Способ по п.18 или 19, отличающийся тем, что млекопитающее женского пола выбрано из группы, состоящей из людей, овец, крупного рогатого скота, коз, оленей, лошадей, верблюдов, опоссумов, свиней, мышей, крыс, кроликов, зайцев, ласок, хорьков, кошек и собак.

21. Композиция, включающая эффективное количество агента, выбранного из группы, состоящей из a) полипептида, включающего аминокислотную последовательность, выбранного из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:8 или функционального варианта или фрагмента данной последовательности; b) полипептида GDF-9B дикого или мутантного типа, включающего аминокислотную последовательность по п.11; c) антисмысловой молекулы нуклеиновой кислоты, направленной против полипептида, определенного в (b); d) лиганда, который связывается с или является антигеном к полипептиду, определенному в (b), в сочетании с фармацевтически или ветеринарно приемлемым носителем или разбавителем.

22. Лиганд, который связывается с полипептидом, включающим аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:8 или функционального варианта или фрагмента данной последовательности.

23. Лиганд по п.22, отличающийся тем, что представляет собой антитело или фрагмент антитела, включающий антиген-связывающий домен.

24. Лиганд по п.23, отличающийся тем, что является моноклональным антителом.

25. Лиганд по п.23, отличающийся тем, что является молекулой фагового дисплея.

26. Набор для идентификации млекопитающих, которые несут мутантную молекулу нуклеиновой кислоты GDF-9B, включающий а) пару праймеров для амплификации соответствующего участка GDF-9B; и необязательно один или более из следующих компонентов: b) буферный раствор для амплификации ДНК; c) смесь дезоксинуклеотидов; d) средства для амплификации ДНК; e) контрольная ДНК тестируемого вида; f) соответствующие стандарты; и g) система детектирования.

27. Способ снижения скорости овуляции или индуцирования стерильности у опоссумов, включающий стадию введения эффективного количества полипептида, имеющего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:17 или функционального варианта или фрагмента данной последовательности.