RU2000808C1 - Способ лечени и профилактики аллергических заболеваний - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине, а именно к иммунологии и аппергологии Цепь - устранение побочных эффектов, сокращение сроков лечени , возможность применени  при поливалентной аллергии Сущность изобретени  принимают мипро- вит - продукт из высшего мицелиапьного гриба Fusanum culmorum штамма ВСБ-927 по 0.75 г 3 раза в день в течение 4 недель в качестве добавки к питанию 2 табл.

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и представл ет собой новый способ лечени  и профилактики аллергических заболеваний с помощью Мипровита. понижающего или стабилизирующего JgE антителообразова- ние.

Известен способ лечени  аллергических заболеваний с помощью дробного вве- дени  аллергенов, полученных из различных биологических субстатов: пищевых продуктов, эпидермиса животных и человека , растений и микроорганизмов и проч. Механизм действи  этого способа, называемого специфической иммунотерапией (СИТ), основан на достижении эффекта специфической гипосенсибилизации в ответ на введение конкретных аллергенов и преимущественной продукции блокирующих антител класса JgG к ним. Он выбран в качестве прототипа, он же базовый объект. Однако СИТ имеет р д недостатков: сроки лечени  составл ют 4-6 мес с необходимостью повторных курсов, применение ее ограничено р дом медицинских противопоказаний, а также тем, что в некоторых случа х введение коммерческих аллергенов сопровождаетс  обострением процесса, не позвол ющим провести полноценный курс лечени . Одним из основных недостатков СИТ так же  вл етс  ее низка  эффективность при лечении поливалентной аллергии так как при этом оптимальный подбор и введение всех аллергенов дл  достижени  полной гипосенсибилизации практически невозможен. Кроме этого СИТ не примен етс  дл  профилактики аллергических заболеваний

Целью изобретени   вл етс  устранение побочных эффектов, сокращение сроков лечени , возможность применени  при поливалентной аллергии и дл  профилактики аллергических заболеваний

Цель достигаетс  тем. что назначение Ми ровита из высшего мицелиального гриба Fusarium culmorum штамма ВСБ-927 в качестве профилактической оздоровительной добавки к питанию, ведет к снижению активности аллергического процесса путем понижени  или стабилизации JgE антитело- образовани  у больных аллергическими заболевани ми

Мипровит это экологически чистый природный продукт, представл ющий собой грибницу или мицелий высшего гриба Fusarium culmorum штамма ВСБ-927, полученный путем аэробного жидкофазного культивировани  мицелиального гриба в асептических услови х с использованием естественного сырь  мелассы свекловичной , тростниковой или молочной сыворотки. Мипровит разрешен Минздравом СССР дл  пищевого использовани  и дл  опробзции в качестве лечебно-профилактического пита- ни  Медико-биологическа  оценка безвредности Мипровита проведена Институтом питани  АМН СССР

Химический состав Мипровита. % к абсолютно сухому веществу Влажность, не более7

Сырой протеин, не менее40

Углеводы20

Липиды, не более6

Минеральные вещества9

5Белок Мипровита содержит следующие

необходимые дл  организма аминокислоты. % к абсолютному сухому веществу: Лизин3.0

Метионин0,75

0Триптофан0.4

Валин1.8

Аргинин2.2

Гистидин1,0

Треонин1,85

5Глутаминова  к-та4.8

Фенилаланин1,4

Лейцин2.2

Изолейцин1,35

Аспарагинова  к-та3,2

0Серии1,38

Пролин1.0

Глицин1,75

Алании2,6

Цистин0,4

5Тирозин1,85

Содержание витаминов в Мипровите составл ет, мкг/г:

Bi -(тиамин)12,8

В2 (рибофлавин)56,8

0в 12 (цианокабаломин)8,5

Пантотенова  к-та61,0

В4 (холин)следы

РР (никотинова  к-та)380

Вб (пиридоксин)21,8

5Фолиева  к-та18,0

Биотин2,0

Мипровит имеет следующий состав макро- и микроэлементов

Макроэлементы, мг/r на абс. сухое ве- 0 щество:

Фосфор15,0

Кальций4 4

Калий17,37

Натрий1 74

5Микроэлементы мкг/г

Железо64.0 (в легко

усво емой форме) Марганец39 О

Цинк180

Медьin О

13.0

12,0

2,0

8,0

4.0

2.0

0.2.

Липидна  фракци  Мипровита на 70 % состоит из ненасыщенных жирных кислот, 50 % из которых составл ет линолева  кислота . По содержанию и характеру жирных кислот липиды Мипровита близки к облепи- ховому и подсолнечному маслам,

Абсолютна  безвредность Мипровита позвол ла рекомендовать его в качестве добавки к питанию в дозах, составл ющих 1 /3 суточного белкового рациона. Противоаллергический эффект оздоровительной пищевой добавки мипровита. как было установлено эмпирическим путем, достигаетс  его 3-кратным приемом по 0,75 г ежедневно в течение 4 недель. Прием меньших доз не оказывало никакого клинического действи  и не приводило к изменению JgE антителообразовани . Увеличение дозы существенно не вли ло на эффективность противоаллергического лечени  и его продолжительность , следовательно  вл етс  нерациональным.

Таким образом, схема противорецидив- ного лечени  и профилактики аллергических заболеваний с помощью Мипровита представл ет собой ежедневный 3 -кратный его прием по 0,75 г в течение 4 недель. Мипровит выдаетс  больным в виде сухой измельченной биомассы по 20 г в пакетах из металлизированной пленки с ламинированным покрытием и принимаетс  ежедневно по 0,75 г (1 чайна  ложка) 3 раза в день в течение 4 недель в виде добавки к питанию. Учитыва  вкусовые качества предлагаемой пищевой добавки, обладающей характерным привкусом и запасом грибов, одним из более целесообразных способов применени   вл етс  добавление в каши, супы, соусы предваршельно измельченного гриба. Некоторые лица лучше перенос т Мипровит при добавлении его в кисели, фруктовые пюре пли варенье.

Пример. Больна  Н , 38 лет, страдает поллинозом, ринокот.юнктивальный синдром , аллергией к злаковым травам, пищева  перекрестна  аллерги . Больна с 1986 года, получила традиционную противоаллергическую терапию с недостаточным клиническим эффектом Г о л ь н i   принимала Мипровит в ИЮНР 1090 года в виде сухой измельченной . ы в течение 4 недель по 0.75 г 3 раза в ;;снь R качестве пищевой добавки к кзш м -, mopn или соусам.

После приема Мипровита было отмечено исчезновение пищевой аллергии и снижение клинических про влений риноконъюнкти- е пьного синдрома в период цветени  злэ- 5 ковых трав. При этом установлено снижение уровн  общего JgE с 355 МЕ/мл до 65 МЕ/мл. Уровень JgE в сыворотке крови определ ли с помощью иммуноферментных наборов Phadezym IgE PRIST (Швеци ). 0 П р и м е р 2. Больной А., 41 года, страдает поллинозом, риноконъюнктивальный синдром, аллерги  к пыльце сорных трап с 1982 года. Несмотр  на проводимую традиционную терапию: СИТ, введение гистогло5 булина, медикаментозную терапию, заболевание прогрессировало, и в 1988 году , присоединилс  астматический синдром. Проведение СИТ аллергенами сорных трав в 1989 году было прервано из-за обострени 

0 аллергического процесса. По этой же причине не удалось провести курс лечени  гистог- лобулином. В течение 8 лет был вынужден посто нно принимать различные  нтигиста- мчнные препараты а период цветени  трав.

5В июле 1990 г. за неделю до обычного

обострени  поллиноза, обусловленного началом сезона цветени  сорных траз, больной начал принимать Мипровит по описанной схеме. После проведени  4-нс0 дельною курса а период цветени  сорных трав отмечено отсутствие приступов удушь , риноконъюнктивальный синдром про вл лс  в меньшей степени и был менее продолжительным в сравнении с обычным

5 течением болезни. При этом практически отсутствовала необходимость приема анти- гистаминных препаратов. Уровень JgE у больного (100 МЕ/мл) после окончани  цветени  сорных трав был в пределах нормы.

0 Веро тно некоторый клинические про влени  поллиноза в первую неделю начала цвете н и   трав св заны с тем что противорецидивное лечение было начато всего лишь за неделю до обычного обостре5 ни  болезни. Рекомендовано возобновить курс профилактического приема Мипровита за 3 недели до начала сезона цветени  сорных траа.

П р и м е р 3. Больна  Д., 34 года,

0 стрлдэет гюллинозом, риноконьюнктиваль- мый синдром, аллерги  к пыльце горных трап с 1984 года. На учете у аллерголога находитс  с 1986 года, Почти посто нно принимает антигистэминные препараты.

5 Два курса гистоглобулина прошли бел эффекта . Небольшой положительный эффект был отмечен в 1986 и 1987 гг. пост-1 проведени  СИТ с аллергенами из сорт к трап. СИТ в 1983 и 1989 гг. без клинически, о улучшени . После профилактического -i пнлчени  Мипровита в июне 1990 г.. за мес ц до предлагаемого начала сезона цветени  сорных трав, отмечен положительный клинический эффект. У больной не наблюдалось обычного обострени  заболевани  и только в конце августа в течение нескольких дней были незначительные про влени  ринита. Антигистаминных препаратов не принимала . Уровень JgE, определ емый в фазе ремиссии до назначени  Мипровита, после курса профилактики и после окончани  сезона цветени  сорных трав не превышал нормы и даже имел тенденцию к снижению (64; 43; 27 МЕ/мл), что свидетельствует о стабилизации JgE антителообразовани .

Мипровит в качестве противорецидив- ного лечени  был применен в группе больных поллинозом. С этой целью было отобрано 13 человек, страдающих поллинозом , риноконьюнктивальный синдром с по- сто нно рецидивирующим течением не менее 5 лет, с отсутствием эффекта на специфическую иммунотерапию и на лечение гистоглобулином. Обычно в сезон цветени  им проводилась посто нно симптоматиче- ека  лекарственна  терапи : антигистамин- ные препараты, интал, зодитен, перитол и

Др.

Мипровит был назначен по 0,75 г 3 раза в день во врем  еды в течение 4 недель. Лицам с аллергией к пыльце деревьев и злаковых трав лечение проводили в апреле- мае. У лиц с аллергией к сорным травам Мипровит назначалс  в июне. У лиц с поливалентной аллергией - к пыльце деревьев. злаковых и сорных трав после первого курса лечени  делали 2-недельный перерыв и повторный курс лечени  проводилс  перед началом сезона цветени  сорных трав.

Таким образом все больные начинали принимать Мипровит в состо нии ремиссии за 2 недели до предполагаемого сезонного обострени  заболевани ,

Иммунологические исследовани  проводились в динамике: перед началом проти- ворецидивного лечени , в период цветени  растений и после окончани  сезона цветени . В сыворотке крови исследовали уровень иммуноглобулинов класса А, М, G по методу Манчини и уровень JgE с помощью иммуноферментных наборов. Соответственно оценивалс  кпинический эффект проводимого лечени .

У всех обследованных больных поллинозом было отмечено улучшение клиниче- ской симптомии. котора  выражалась в укорочении периода обострени  заболевани , более легкого его течени  без симптомов удушь  и более позднего его начала. Ни в одном случае уровень общего JgT в сыноротках крови.этих больных не превышал нормы в динамике статистически достоверно не измен лс  (см. табл.1).

Уровень иммуноглобулинов у больных, получавших Мипровит (1 группа) и антиги- стаминные препараты (2 группа).

В табл.1 также приведены результаты, исследовани  группы сравнени , в которую вошли больные (10 человек) поллинозом в начальной стадии обострени , принимавшие антигистаминные препараты в качестве симптоматической терапии. При сравнении этих групп следует отметить, что у больных, получавших антигистаминные препараты, уровень JgE в отличие от больных, получивших Мипровит был выше нормы. Особый интерес представл ет статистически достоверное снижение уровн  JgE в группе лиц, принимавших антигистаминные препараты, в то врем  как в группе лиц, принимавших Мипровит, этого не наблюдалось. Последнее свидетельствует в пользу применени  Мипровита больными аллергией, заключаетс  в том. что блокирующие антитела относ тс  в JgG классу.

Как видно из представленных материалов , у больных поллинозом с упорно рецидивирующим .течением заболевани  и недостаточным клиническим эффектом традиционного противоаллергического лечени : СИТ, гистоглобулин и друга  медикаментозна  терапи . Применение Мипровита в качестве противорецидивиру- ющего лечени  сопровождалось достаточно выраженным положительным клиническим эффектом и снижением или стабилизацией JgE антителообразовани . При этом следует отметить, что нормальный уровень JgE сохран лс  и после отмены препарата в период всего цветени . Следовательно имелись основани  предположить патогенетический механизм действи  Мипровита на течение аллергического процесса. Это и было подтверждено экспериментальными исследовани ми.

Модулирующие свойства Мипровита изучали на модели сенсибилизации мышей (СВА х C57BL/6) FI модельным аллергеном овальбумином (ОА), вызывающим повышенный синтез антител класса Е. Животным дважды с интервалом 21 д внутрибрюшинно (в/б) вводили 10 мкг ОА. Мипровит вводили в/б п тикратно с интервалом в сутки в дозах 30, 300 и 3000 мкг в одном случае до первичной иммунизации, а во втором - до вторичной иммунизации ОА. Последн   иньекци  Мипровита осуществл лась в день иммунизации . Другой вариант опытов состо л из однократного в/б введени  Мипровита в тех же дозах одновременно кэк с первичной . так и со вторичной иммунизацией. В каждую группу опытов брали по 10 животных .

Дл  определени  уровней JgE и JgG антител к ОА методом пассивной кожной анафилаксии (ПКА) на морских свинках и иммуноферментным анализом (ИФА) соответственно , на 10-й день первичной и в первую и третью недели вторичной иммунизации у мышей забирали кровь из ретроорбитального пространства. Полученные индивидуальные образцы сывороток использовали в ИФА и пулы сывороток от каждой группы в ПКА. ПКА и ИФА с полученными сыворотками проводили по стандартным методикам.

Способ иллюстрируетс  фиг. 1-5.

П тикратное введение Мипровита в дозах 3000 и 300 мкг до первичной иммунизации полностью тормозило развитие вторичного JgE антителообразовани  (см, фиг.1). Мипровит в дозе 30 мкг не оказывал вли ни  на уровень JgE ответа к ОА, который был в этом случае таким же как в группе контрольных животных, которым вместо Мипровита вводили физиологический раствор . Така  же манипул ци  (патикратное введение Мипровита), проведенна  до вторичной иммунизации ОА, показала значимое снижение уровн  JgE антител к ОА при дозах 3000 и 300 мкг через 1 неделю после вторичной иммунизации (см. фиг.2). При дозе 30 мкг так же не отмечено отличи  в. уровн х JgE по сравнению с контролем. Что касаетс  JgG антителообразовани  к ОА,то п тикратное введение мипровита до вторичной иммунизации не оказывало во всех дозах статистически достоверного его снижени  по сравнению с контролем (см. фиг.З).

При однократном введении Мипровита одновременно с первичной иммунизацией наблюдалось торможение вторичного JgE ответа к ОА только при максимальной дозе 3000 мкг (см. фиг.4).

Особенно следует отметить, что введение Мипровита в дозе 3000 мкг одновременно с вторичной иммунизацией приводило к статически значимому усилению JgG ответа к ОА(см. фиг.5), который приводит к блокированию взаимодействи  этого аллергена с JgE антителами и таким образом предотвращает развитие аллергических процессов.

В этих же опытах в тесте ПКА изучали сенсибилизирующие свойства Мипровита, т.е. возможность индуцировани  JgE антител к самому себе При разведении от 1:4 до 1:256 сывороток экспериментальных мышей , получивши в /б однократно или п тикратно МипрОЕнп о дозах 30, 300 и 3000 мкг до первичной или ыоричнпп иммунизации

ОЛ, ни в коем случае не Было получено положительной реакции на Мипровит у морских свинок. Это свидетельствует об отсутствии аллергизирующих свойств у 5 Мипровита, даже при многократном его ппе- дении.

Таким образом на данной экспериментальной модели была вы влена способность Мипровита при введении до или одновре0 менно с вторичной иммунизацией тормозить вторичный JgE ответ кОА, не вли   при этом или даже частично усилира  JgG анти- телообразование и не стимулиру  JgE антител к самому себе.

5 Стабилизирующий эффект Мипровита на JgE антителообразование был вы влен в группе лиц часто длительно болеющих ОРЗ, получивших профилактическую оздоровительную добавку к питанию с целью повы0 шени  естественной резистионости организма. Мипровит назначалс  по традиционной схеме: по 0,75 г 3 раза в день в течение 4 недель.

Дл  сравнени  в табл.2 приведены дан5 ные по уровню JgE в сыворотке крови больных , получивших витаминотерапию

Как видно из табл.2 у лиц, принимавших Мипровит, по сравнению с контрольной группой отмечалось статистически досто0 верное снижение уровн  JgE до нормы Особенно заметное снижение уровн  JgE до нормы (около 100 МЕ/мл) после приема Мгпровита наблюдалось у больных с сопутствующими аллергическими заболеоани 5 ми.

Приведенные экспериментальные и клинические данные свидетельструют об эффективности использовани  Мипровита с целью снижени  активности лллорги «еского

0 процесса.

Считают, что в основе прошвоаллерш- ческого действи  Мипровита лемит ог о способность снижать или стабилизирогать Jgb

5 антителообразование, не вли   при этом на продукцию антител классов A.M.G, о чем свидетельствует снижение вторичного JrF у больных поллинозом D период цветени . Полагают, что противоаллергическое- цейст0 вне Мипровита обусловлено инпюпци1 и JgE антител ообразовани , та к как изг :стю. что период распада JgE составл ет около 2 сут. Был получен пролонгированный зффс г у больных поллинозом, который со ртн г1: i

5 в течение сезона цветени  и после OIMPHM Мипровита. Таким образом можно F-г од по ложить, что Мнпровит воздействует гипспецифическую регул цию JgE 01 -TJ

Не были обнаружены данные г дрп стнии веществ биологической npiv - иJgE антителообразование. Данный феномен описан при проведении СИТ у больных аллергическими заболевани ми с использованием различных коммерческих препаратов аллергено в. Однако при СИТ гипосенсибилизации строго специфичен и возникает в ответ на введение определенного антигена. В случае поливалентной аллергии далеко не всегда удаетс  провести исчерпывающую диагностику из-за широты спектра аллергенов. В процессе лечени  возникают дополнительные проблемы, Оптимальна  гипосенсибилизаци  затруднена , во-первых, из-за количественных ограничений введени  аллергенов с лечебной целью (не более 10 аллергенов на курс), с необходимостью повторных курсов, во- вторых, эффект лечени  существенно зависит от степени чистоты и антигенной активности каждого аллергена. При отсутствии или недостаточной активности одного из многих аллергенов. СИТ практически неэффективна .

В этом отношении Мипровит, обладающий способностью снижать или стабилизировать JgE антителообразование одновременно к всему спектру аллергенов, имеет большое преимущество.

Кроме того известны р д побочных эффектов СИТ, в первую очередь общие и местные аллергические реакции на введение аллергенов, преп тствующие проведению полноценного курса лечени , индукци  аллергического процесса, обусловленна  недостаточной степенью очистки коммерческих аллергенов, что сопр жено иногда с ухудшением течени  заболевани . Известны также случаи активации аутоиммунных процессов, которые приводили к развитию т желых заболеваний.

Мипровит, как показали экспериментальные и клинические исследовани , практически не обладает сенсибилизирующей активностью, в чем также имеет преимущество в сравнении с коммерческими аллергенами .

Специфическа  иммунотерапи  примен етс  только дл  лечени  аллергических заболеваний. Экспериментальные данные о воздействии Мипровитэ при его введении

до первичной или до вторичной иммунизации ОА на вторичный иммунный ответ, изби- рательный стабилизирующий эффект воздействи  на JgE антителообразование в случае назначени  до развити  аллергического процесса, отсутствие сенсибилизирующих свойств и воздействи  на антителообразование других классов иммуноглобулинов , абсолютна  нетоксичность, дают предпосылки к возможности использовани  его в качестве профилактического средства, например дл  профилактики профессиональных аллергозов.

Таким образом в сравнении с наиболее распространенным традиционным методом

иммунотерапии с использованием дробных введений коммерческих аллергенов применение данного средства имеет следующие преимущества:

противоаллергическое действие Мипровита достигаетс  путем перорального приема в течение 3-4 нед: СИТ провод т 4-6 мес; отсутствие обострени  заболеваний и других побочных реакций;

более широкие возможности применени  при поливалентной аллергии по сравнению с СИТ, возможность применени  дл  профилактики аллергических заболеваний.

(56)Адо А.Д. Частна  аллергологи . М.: 1976.

Г.Р,Морозова, Н.В.Сафонова, Т.В.Кинаревска , Д.Н.Спицина, М.А.Макарова и

В.П.Зобнина, Авт. свидетельство №

1272695, выд. 09.08.84г.

Ovary Z., Caiarae S., Kojima S. - Int. Arch. Allergy Appl. Immunol., 1975, 48, p. 16-21,

И.С.Гущин и др. Патологическа  физиологическа  и экспериментальна  терапи , 1986. 4. с. 18-23.

Wagner G., Klinge H., Lubach D.

Allerqologie, 1986, 9, N 9, p. 458-460.

Таблица 1

Таблица 2

Изменение уровн  JgE в сыворотке лиц, часто и длительно болеющих ОРЗ, после

приема курса Миировита

Claims (1)

1. Формула избретени 

   СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ путем введени  веществ биологического происхождени , отличающийс  тем, что, с целью устранени  побочных эффектов, сокращени  сроков

   1од21Т

   Дозы PS-64

   / - 15мг

   2-0,,5мг

   3 -0, 0,15мг

   Ј - контроль

   сенсибилизации

   5

   t J

   У-0,5 мл

   Фиг. /

   лечени , возможности применени  при поливалентной аллергии, в качестве биологически активного вещества ввод т мицелий высшего гриба Fusarium culmorum штамма ВСБ - 927 по 0,75 г 3 раза в день в виде добавки к питанию в течение четырех недель.

   Ј.uyri4/(J

   4 ЮмкгОпЛ/Ъ Дни иммунизации V-0,6 МЛ

   9л

   Юмкг ОП д/б У 0,5 мл

   Юдн

    а  °21дН28 дн

   ЮмкгОЯЫб Дм иммунизации V 0t5мл

   Фиг 2

   л 0.60 .7- 0,6 Q5ол

   Q3

   Дозы PS-64

   ; МГ

   2 -0, 1.5мг

   3-0,03мг 5 0,15мг

   Ц - контр оль

   фЈ.,ул /л ,.j |,уч

   Of

   о

   АЮдн

   Wiva-OflB/t 0.3 мл

   7 т 21дн28 дн42дн

   11ОмкгОЙК16 дни иммутэац(л/

   Фиг 5

   Дозы РЗ-б 1 - з мг

   г- 2 - 0,3 мг

   -3 - 0,03

   4 - контроль

   сенсибилизации

   Ou

   PSwijt )LQЈw

   ЮьшОЯЫ6 ЮдН

   V - 0,5мл

   0.

   ,01Ы

   P4-W

   --- L-

   2 - ofif,r

   - -3-о,озцг

   t/ - KOHTfO b

   сенси илимцмн

   Л f«

   | V/r/ /Г

   I/ - 0 ,7

   f 1ймкг-ОЛЈ/Г пин

   и пи у ни

   ,5Mt Фиг. 5

   Составитель Н.Докшина Редактор Г.Мельникова Техред М.МоргенталКорректор М.Самборска 

   21 дн33 дн& дн

   ЮмкгОДв 6 Дни иммуниво 4ии Фиг. 4 ,5мл

   /

   f 1ймкг-ОЛЈ/Г пин

   ,5Mt