RU2000129528A - Усовершенствованные иммунодиагностические анализы с использованием восстановителей - Google Patents
Усовершенствованные иммунодиагностические анализы с использованием восстановителейInfo
- Publication number
- RU2000129528A RU2000129528A RU2000129528/14A RU2000129528A RU2000129528A RU 2000129528 A RU2000129528 A RU 2000129528A RU 2000129528/14 A RU2000129528/14 A RU 2000129528/14A RU 2000129528 A RU2000129528 A RU 2000129528A RU 2000129528 A RU2000129528 A RU 2000129528A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- reducing agent
- hcv
- specified
- solid phase
- polypeptide
- Prior art date
Links
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims 3
- 239000003638 reducing agent Substances 0.000 claims 14
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims 13
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims 8
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 claims 8
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 claims 8
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims 6
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 claims 6
- VHJLVAABSRFDPM-UHFFFAOYSA-N 1,4-dimercaptobutane-2,3-diol Chemical group SCC(O)C(O)CS VHJLVAABSRFDPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 5
- 102000007312 Recombinant Proteins Human genes 0.000 claims 5
- 108010033725 Recombinant Proteins Proteins 0.000 claims 5
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims 5
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims 4
- 230000000903 blocking Effects 0.000 claims 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims 4
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims 3
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims 3
- VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N Dithioerythritol Chemical compound SC[C@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-ZXZARUISSA-N 0.000 claims 2
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 2
- 230000003009 desulfurizing Effects 0.000 claims 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 2
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 claims 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 claims 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N Guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 claims 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- 241001489398 Narcissus symptomless virus Species 0.000 claims 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L Sulphite Chemical compound [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 claims 1
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 claims 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims 1
- 238000006477 desulfuration reaction Methods 0.000 claims 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims 1
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 claims 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutic aid Substances 0.000 claims 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 claims 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic Effects 0.000 claims 1
Claims (1)
1. Твердофазный иммуноанализ, включающий в себя антиген на указанной твердой фазе в присутствии восстановителя.
2. Способ производства или осуществления иммуноанализа по п. 1, при котором указанный восстановитель добавляют к указанной твердой фазе в ходе стадий нанесения покрытия, блокирования и/или фиксации указанного антигена на указанной твердой фазе или в ходе предварительной обработки твердой фазы.
3. Способ по п. 2, при котором указанный восстановитель добавляют к указанной твердой фазе в ходе стадии нанесения покрытия из антигена на твердую фазу.
4. Способ по п. 2, при котором указанный восстановитель добавляют к указанной твердой фазе в ходе стадии блокирования указанной твердой фазы, включающей в себя антиген, нанесенный на нее в присутствии или в отсутствие восстановителя.
5. Способ по п. 2, при котором указанный восстановитель добавляют к указанной твердой фазе в ходе стадии фиксации указанной твердой фазы, включающей в себя антиген, нанесенный на нее в присутствии или в отсутствие восстановителя.
6. Способ по п. 2, при котором указанный восстановитель добавляют в ходе предварительной обработки твердой фазы, включающей в себя антиген, нанесенный на нее в присутствии или в отсутствие восстановителя.
7. Способ по любому из пп. 1-6, где указанный восстановитель представляет собой ДТТ (дитиотрейтол), ДТЭ (дитиоэритритол) или ТКЭФ (трис(2-карбоксиэтил)фосфин).
8. Способ по любому из пп. 1-7, при котором указанный восстановитель используют в диапазоне концентраций от 0,1 мМ до 1 М, более конкретно от 0,5 мМ до 500 мМ, еще конкретнее от 1 мМ до 250 мМ, причем для некоторых применений могут требоваться диапазоны от 0,5 до 50 мМ, от 1 до 30 мМ, от 2 до 20 мМ, от 5 до 15 мМ или приблизительно 10 мМ.
9. Способ по любому из пп. 2-8, где указанный антиген представляет собой белок NS3 HCV (вирус гепатита С).
10. Твердофазный иммуноанализ, производимый способом по любому из пп. 2-9.
11. ELISA (иммуноферментный твердофазный анализ), производимый способом по любому из пп. 2-9.
12. ELISA no п. 11, где указанный восстановитель добавляют на стадиях нанесения покрытия и/или фиксации.
13. Тест QUICK, производимый способом по любому из пп. 2-9.
14. Тест QUICK по п. 13, где указанный восстановитель добавляют на стадии блокирования.
15. Линейный иммуноанализ, производимый способом по любому из пп. 2-9.
16. Линейный иммуноанализ по п. 15, где указанный восстановитель добавляют на стадии блокирования.
17. Применение анализа по пп. 10-16, для диагностики in vitro антител, выработанных к антигену, как он описан в п. 1
18. Белок NS3 HCV, обработанный способом, при котором осуществляют стадии сульфирования и последующего десульфирования.
18. Белок NS3 HCV, обработанный способом, при котором осуществляют стадии сульфирования и последующего десульфирования.
19. Белок NS3 HCV по п. 18, который дополнительно обрабатывают цвиттерионным детергентом, предпочтительно Empigen.
20. Способ очистки очистки рекомбинантно экспрессируемого белка, содержащего цистеин, включающий в себя по меньшей мере 2, предпочтительно 3 или 4 из следующих стадий, и еще предпочтительнее все следующие стадии, на которых: (а) сульфируют лизат рекомбинантных клеток-хозяев или лизируют рекомбинантные клетки-хозяева в присутствии гуанидинийхлорида с последующим сульфированием клеточного лизата, (б) обрабатывают цвиттерионным детергентом, предпочтительно после того, как удаляют дебрис, (в) очищают сульфированный вариант рекомбинантного белка или очищают сульфированный вариант рекомбинантного белка с последующим удалением цвиттерионного детергента, причем указанная очистка предпочтительно представляет собой хроматографию, более предпочтительноNi-IMAC хроматографию, причем указанный рекомбинантный белок представляет собой His-маркированный рекомбинантный белок, (г) десульфируют сульфированный вариант рекомбинантного белка, предпочтительно молярным избытком ДТТ (дитиотрейтола), (д) хранят в присутствии молярного избытка ДТТ или немедленно используют в анализе.
21. Полинуклеиновая кислота HCV, кодирующая полипептид, как он изображен на фиг. 1 (SEQ ID NO 3-18), или уникальная часть полинуклеиновой кислоты HCV, более предпочтительно полинуклеиновая кислота, имеющая последовательность, как она представлена на фиг. 2-1, 3-1, 4-1, 5-1, 6-1, 7-1 или 8-1 (SEQ ID NO 19, 21, 23, 25, 27, 29 и 31).
22. Полинуклеиновая кислота HCV no п. 21, как она изображена на фиг. 2-1, 3-1, 4-1, 5-1, 6-1, 7-1 или 8-1, и которая характеризуется тем фактом, что ее продукт не реагирует с образцами, дающими ложноположительную реакцию в отношении HCV, или ее часть, которая кодирует эпитоп NS3, который не реагируют с образцами, дающими ложноположительную реакцию в отношении HCV.
23. Рекомбинантный вектор, содержащий полинуклеиновую кислоту по п. 21 или 22.
24. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п. 23.
25. Способ обнаружения последовательности нуклеиновой кислоты по п. 21 или 22, при котором указанную нуклеиновую кислоту приводят в контакт с зондом; выявляют комплекс, образованный указанной нуклеиновой кислотой с указанным зондом.
26. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 21 или 22 или ее фрагмент для применения в качестве зонда или праймера для обнаружения нуклеиновой кислоты по п. 21 или 22.
27. Диагностический набор для обнаружения последовательности нуклеиновой кислоты по п. 21 или 22, содержащий по меньшей мере один праймер и/или по меньшей мере один зонд по п. 26.
28. Полипептид HCV, имеющий все аминокислотные последовательности полипептида, кодируемого полинуклеиновой кислотой по п. 21 или 22, или часть из них.
29. Белок геликаза NS3 HCV или его часть, содержащие или S1200, А1218, А1384, Р1407, V1412, Р1424, или F1444, либо комбинацию этих аминокислот с любыми из следующих аминокислот: L1201, S1222, 11274, S1289, Т1321, А1323, Т1369, L1382, V1408, А1409, F1410.
30. Фармацевтическая композиция, содержащая полипептид по п. 28 или 29 или любой его функционально эквивалентный вариант или фрагмент.
31. Фармацевтическая композиция, содержащая полипептид по п. 28 или 29 или любой его функционально эквивалентный вариант или фрагмент для применения в качестве лекарства для профилактики или лечения инфекции HCV.
32. Способ обнаружения полипептида по п. 28 или 29, при котором указанный полипептид приводят в контакт с лигандом, связывающимся с указанным полипептидом; выявляют комплекс, образованный указанным полипептидом с указанным лигандом.
33. Лиганд, связывающийся с полипептидом по п. 28 или 29.
34. Композиция, содержащая по меньшей мере лиганд по п. 33 в фармацевтически приемлемом эксципиенте, для применения в качестве лекарства.
35. Способ получения полипептида по п. 28 или 29 для диагностических или лечебных целей.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP98870087.8 | 1998-04-17 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2000129528A true RU2000129528A (ru) | 2002-10-10 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2007101725A (ru) | Идентификация инфицированных вирусом и вакцинированных вирусом организмов | |
| KR930004055B1 (ko) | 펩티드 및 그의 용도 | |
| Boehm et al. | Systemic lupus erythematosus is associated with increased auto‐antibody titers against calreticulin and grp94, but calreticulin is not the Ro/SS‐A antigen | |
| JPH08337597A (ja) | ペプチド | |
| TR200003024T2 (tr) | İndirgeme ajanlarını kullanarak geliştirilen immünodiagnostik tahliller. | |
| JPS62120399A (ja) | 抗原決定ペプチド及びそれらの製造方法 | |
| KR950008537A (ko) | 엡스타인 바 비루스(ebv)에 대한 항체의 검출용 진단제 | |
| CA2803234A1 (en) | Histone citrullinated peptides and uses thereof | |
| KR940005666A (ko) | C형 간염 바이러스를 분류하기 위한 항원성 펩티드 ,이 펩티드를 포함하는 키트 및 이 펩티드를 사용하여 c형 간염 바이러스를 분류하는 방법 | |
| RU2004106618A (ru) | Изолированные полипептиды на основе нейтрализующего эпитопа белка р17 вируса вич, используемые в качестве вакцин, а также нейтрализующие анти-р17-антитела, специфически распознающие указанный нейтрализующий эпитоп | |
| RU2000129528A (ru) | Усовершенствованные иммунодиагностические анализы с использованием восстановителей | |
| CN113621034A (zh) | 具有免疫反应性的新冠状病毒b-细胞抗原 | |
| JPH05301889A (ja) | 非ａ非ｂ型ペプチド | |
| JPH05271277A (ja) | 非−ａ、非−ｂ肝炎ウイルスに対する抗体と免疫化学的に反応するペプチド | |
| KR960034420A (ko) | 적어도 2개의 c형간염바이러스관련펩티드로 이루어진 다량체항원펩티드 | |
| JPH04164097A (ja) | ペプチドおよびその用途 | |
| EP0620231A1 (en) | Human parvovirus B19 epitope-related peptide | |
| Kato et al. | Studies on the structure of bovine kininogen: cleavages of disulfide bonds and of methionyl bonds in kininogen-II | |
| RU2104284C1 (ru) | Синтетические олигопептиды, специфически взаимодействующие с антителами к вирусу гепатита с, способы диагностики hcv-инфекции (варианты) | |
| Endo et al. | A Novel Epitope (Pentapeptide) in the Human Hemoglobin β Chain | |
| WO1991015584A1 (en) | Trypanosoma cruzi recombinant antigens and synthetic peptides for utilization in the immunological diagnosis of chagas disease | |
| RU98106385A (ru) | Пептиды tlp комплекса мочеполовой карциномы и их антитела | |
| KR950704354A (ko) | 씨(c)형 간염 바이러스(hcv)씨(c)33 영역 유래의 펩티드, 이에 대한 항체 및 씨(c)형 간염 바이러스를 검출하는 방법(peptides from the c33 region of hcv, antibodies thereto and methods for the detection of hcv) | |
| RU2137138C1 (ru) | Диагностическая композиция для определения сифилиса и тест-система "аквасиф" на ее основе | |
| EP1310512A2 (en) | Hcv core protein sequences |