RS56104A

RS56104A - Derivati imidazohinolina

Info

Publication number: RS56104A
Application number: YU56104A
Authority: RS
Inventors: Peter Aranyi; Laszlo Balazs; Maria Balogh; Sandor Batori; Kinga Boer; Katalin Gerber; Zoltan Kapui; Endre Mikus; Geza Timari; T. Lajos Nagy; Katalin Urban-Szabo; Szeredi Judit Vargane
Original assignee: Sanofi-Aventis
Priority date: 2001-12-21
Filing date: 2002-12-17
Publication date: 2006-10-27
Also published as: JP4530663B2; CN1307174C; US20050070566A1; EA007226B1; MXPA04006115A; KR100725298B1; PL370761A1; CN1606555A; HUP0105406A2; IL162443A; AU2002353241B2; EP1456205A1; IS7317A; US7176213B2; JP2005516956A; CA2470067C; UA78745C2; EA200400847A1; KR20040072670A; IL162443A0

Abstract

Predmetni pronalazak odnsoi se na veznike A3 receptora adenozina opšte formule (I), među njima poželjno na antagoniste, kao i na njihove soli, solvate i izomere i farmaceutske preparate koji ih sadrže, na upotrebu jedinjenja opšte formule (I), kao i njihovih soli, solvata i izomera, na pripremanje jedinjenja opšte formule (I) i njihovih soli, solvata i izomera, dalje na nove intermedijere opšte formule (II) i (III) i na njihovo pripremanje.

Description

DERIVATI IMIDAZOKVINOLINA

Oblast pronalaska

Predmetni pronalazak odnosi se na veznike A3receptora adenozina opšte formule (I), među njima poželjno na antagoniste, kao i na njihove soli, solvate i izomere i farmaceutske preparate koji ih sadrže, na upotrebu jedinjenja opšte formule (I), kao i njihovih soli, solvata i izomera, na pripremanje jedinjenja opšte formule (I) i njihovih soli, solvata i izomera, dalje na nove intermedijere opšte formule (II) i (III) i na njihovo pripremanje.

Stanje tehnike

Adenozin je dobro poznata komponenta nekoliko endogenih molekula (ATP, NAD', nukleinskih kiselina). Sem toga on igra važnu regulatornu ulogu u mnogim fiziološkim procesima. Efekat adenozina na funkcionisanje srca je otkriven već 1929. (Drury i Szentgyogyi. J Phvsiol 68: 213, 1929). Identifikacija rastućeg broja fizioloških funkcija posredovanih adenozinom i otkriće novih podtipova receptora adenozina dala je mogućnosti za terapeutsku primenu specifičnih veznika (Poulse, S.A. i Qinin, RJ. Bioorganic and Medicinal Chemistry 6: 619,1998).

Do danas su receptori za adenozin klasifikovani u tri glavne klase: A., A2i A3. A.podtip je delimično odgovoran za inhibiranje adenilat ciklaze putem vezivanja za G, membranski pro-tein, delimično utiče na druge sisteme poruka. A2podtip receptora može se podeliti na dva dodatna podtipa A2ai A2b- receptore koji stimulišu aktivnost adeliat ciklaze. Sekvenca receptora adenozina A3je nedavno identifikovana iz biblioteke cDNK iz testisa pacova. Kasnije je dokazano da ona odgovara novom, funkcionalnom receptoru adenozina. Aktivacija A3receptora je vezana takođe sa nekoliko drugih sistema poruka, npr., inhibiranje adenilat ciklaze i stimulisanje fosfolipaze C i D.

Receptori adenozina nađeni su u nekoliko organa i regulišu njihove funkcije. I A.i A,areceptori igraju važne uloge u centralnom nervnom sistemu i kardiovaskularnom sistemu. U CNS, adenozin inhibira oslobađanje sinaptičkih transmitera čiji je efekat posredovan sa A, receptorima. U srcu, takođe A, receptori deluju na negativne inotropne, hronotropne i dromo-tropne efekte adenozina. A2areceptori adenozina locirani u relativno visokom broju u striatumu, pokazuju funkcionalnu interakciju sa dopaminskim receptorima u regulaciji sinaptičke transmisije. A2areceptori adenozina u endotelijalnim i glatkim mišićnim ćelijama su odgovorni za vazodilataciju indukovanu adenozinom.

Na osnovu identifikacije mRNK, A2breceptori adenozina su široko rasprostranjeni u različitim tkivima. Oni su bili identifikovani u gotovo svakom tipu ćelija, ali je njihova ekspresija najviša u tankom crevu i bešici. Ovaj pod tip verovatno takođe ima važnu regulatronu funkciju u regulaciji vaskularnog tonusa i igra ulogu u funkcionisanju mast ćelija.

Nasuprot A, i A2areceptorima, gde je distirbucija u tkivima detektovana na nivou

proteina, prisustvo A2t)receptora i A3receptora je detektovano na osnovu nivoa njihovih mRNK. Eksperesioni nivoi za A3receptore adenozina su vrlo niski u poređenju sa drugim podtipovima i visoko zavisni od vrste. A3receptori adenozina su primarno ekspnmirani u centralnom nervnom sistemu, testisima, imunom sistemu i izgleda da su uključeni u modulaciji oslobađanja medijatora iz mast ćelija u trenutnoj hipersenzitivnoj reakciji.

A3antagonisti koji su do sada publikovani u literaturi pripadaj grupi flavonoida, derivata t ,4-dihidropiridina. triazolokvinazolina. tiazolonaftiridina i tiazolopirimidina. Predmetni pronalazak odnosi se na novi tip efektivnih A3antagonista, koji imaju imidazokvinolin strukturu.

Za terapeutsku upotrebu neophodno je da se obezbedi da se molekul ne vezuje, ili se vezuje samo u slučaju vrlo visoke koncentracije A,, A23i A20pod-tipova receptora adenozina. Naš predmetni pronalazak odnosi se na jedinjenja opšte formule (I) kao i na njihove soli, solvate i izomere koji imaju veliku selektivnost za A3pod-tip receptora adenozina

Opis pronalaska

Naš cilj je bio da pripremimo A3veznike pre svega sa strukturom imidazokvinolina i među njima poželjno antagoniste, koji imaju jak antagonistički efekat i pokazuju visoku selektivnost za A3receptor, tj.. inhibiraju A3receptor u mnogo nižoj koncentraciji nego što inhibiraju A,. A2ai A,breceptore, Dalji ciljevi bili su da se postigne stabilnost, biodostupnost. terapeutski indeks i podaci o toksičnosti koji omogućuju da se razviju nova jedinjenja u lek supstance i da zahvaljujući pogodnoj enteralnoj apsorpciji jedinjenja mogu da se primene oralno.

Našli smo da jedinjenja opšte formule (I) - gde

R' predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu;

R<2>predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu;

R<3>predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; ili C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, tienil grupu, ili furil grupu, po potrebi suspstituisanu sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravu ili razgranatu C,.. alkoksi grupu, ili atom halogena, ili 5- ili 6 člani heteroaromatični prsten - koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota ili 5 člani heteroaromatični prsten koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili jedan atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,_4 alkil grupa, pravom ili razgranatom C..„ alkoksi grupom ili atomom halogena;

R<4>, R<=>, R° i R<7>predstavljaju nezavisno jedan od drugog atom vodonika, pravu ili razgranatu C,.4

alkil grupu, pravu ili razgranatu C,.4alkoksi grupu, hidroksi grupu ili atom halogena; ili R<a>i R' predstavljaju atom vodonika R<J>i R° formiraju zajedno metilendioksi grupu.

R<8>predstavlja atom vodonika ili cijano grupu, aminokarbonil grupu, C,.4alkoksikarbonil grupu, ili

karboksi grupu;

R<9>i R'° predstavljaju nezavisno jedno od drugog atom vodonika, ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, ili C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, fenil(C,.4) alkil grupu, tienil(C14) alkil grupu ili furil(C,.4) alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metilendioksi grupom, ili jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom, hidroksi grupom, trifluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili 5 do 6 člani heteroaromatični prsten koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota, ili 5 člani heteroaromatični prsten, koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili jedan atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa jednom ili više pravom ili razgranatiom C,.4alkil grupom, prave ili razgranate C,.4alkoksi grupe, ili atom halogena;

ili za -(CH2)m-OH ili -(CH2)0-NR'<2>R<i3>grupa, ili

R<9>i R'° formiraju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom;

Ri2i R'<3>predstavljaiu nezavisno jedno od drugog atom vodonika ili pravu ili razgranatu C... alkil grupu. C3.5 cikloalkil grupu, ili fenil grupu, fenil(C,.J alkil grupu, tienil(C, ,) alkil grupu ih funl(C.J alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metilendioksi grupom, ili sa jednom ih više pravom ili razgranatom C..4alkil grupom, pravom ili razgranatom C... alkoksi grupom, hidroksi, trifluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili 5 ili 6 članim heteroaromatičnim prstenom, koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota. ili 5 člamm heteroaromatićnim prstenom, koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa jednom ili više pravom ih razgranatom C,.4alkil grupom, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom, ili atom halogena ili za -(CH,)mOH ili -(CH2)0-NR,<2>R'<3>grupa, ili

R<12>iR'<3>predstavljaju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi

supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom

X predstavlja -CH2-grupu, -NH-grupu, -NR"-grupu, ili atom sumpora ili atom kiseonika ili sulfo grupa ili sulfoksi grupa - gde R'1 predstavlja pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu ili C3.scikloalkil grupu-;

n predstavlja nulu, 1 ili 2 -

m predstavlja 1, 2, 3 ili 4, i

0 predstavlja nulu, 1, 2, 3 ili 4

1 njihove soli i njihove optički aktivne izomere i njihove soli, njihove solvate koji ispunjavaju gornje kriterijume.

Detaljna značenja gore ilustrovanih supstituenata su sledeća:

Pod pravom ili razgranatom C,., alkil grupom podrazumevamo metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, izobutil-, sekundarni-butil-, tercijarni-butil-, poželjno etil- ili metil grupu.

Pod pravom ili razgranatom C,.. alkoksi grupom podrazumevamo metoksi-, etoksi-. propoksi-, izopropoksi-, butoksi-, izobutoksi-, sekundarni-butoksi-, tercijarni-butoksi, poželjno etoksi- ili metoksi grupu.

Pod sa C3.6cikloalkil grupom mi podrazumevamo ciklopropil-, ciklobutil-, ciklopentil- ili cikloheksil grupu.

Pod 3-7 članim heterocikličnim prstenom mi podrazumevamo dimetilenimin (aziridin), trimetilenimin, tetrametilenimin, (pirolidin), pentametilenimin (piperidin) ili heksametilen grupu.

Heteroaromatični prsten koji sadrži jedan ili dva ili tri atoma azota označava pirol, imi-dazol, pirazol, 1,2,3-triazol, 1,2,4-triazol, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin i 1,3,4-triazin prsten. Prsten je po potrebi supstituisan sa C,.4alkil, ili alkoksi grupa ili sa atomom halogena.

Heteroaromatični prsten koji sadrži jedan atom azota i jedan kiseonika ili atom sumpora označava oksazol, izoksazol, tiazol, izotiazolski prsten. Prsten je po potrebi supstituisan sa C..4alkil ili alkoksi grupom ili sa atomom halogena.

Soli jedinjenja opšte formule (I) označavaju soli date sa neorganskim i organskim kiselinama i bazama. Poželjne soli su one date sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama kao što je, na primer, hlorovodonična kiselina, sumporna kiselina, etansumporna kiselina, tartarična kiselina, sukcinska kiselina, fumarična kiselina, maleična kiselina, limunska kiselina i baze. kao što je. na primer. natnjum hidroksid, kalijum hidroksid. etanolamm.

Solvati označavaju solvate date sa različitim rastvaračima, kao što je na primer sa vodom ili etanolom

Jedinjenja opšte formule (I) pokazuju geometrijski i optički izomerizam. tako da se pronalazak takođe odnosi na mešavine geometrijskih izomera, na racemske ili optički aktivne geometrijske izomere. kao i njihove soli i solvate.

Povoljna grupa jedinjenja opšte formule (I) je formirana od jedinjenja opšte formule (IA), gde

R' predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.. alkil grupu;

R2 predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu;

R<3>predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; ili C3.5cikloalkil grupu, ili fenil grupu, tienil grupu, ili furil grupu, po potrebi suspstituisanu sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,., alkil grupa, pravu ili razgranatu C,., alkoksi grupu, ili atom halogena, ili 5- ili 6 člani heteroaromatični prsten - koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota ili 5 ćlani

heteroaromatični prsten koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili jedan atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkii gropa, pravom ili razgranatom C... alkoksi grupom ili atomom halogena.

R<J>. R°, R° i R' predstavljaju nezavisno jedan od drugog atom vodonika. pravu ili razgranatu C,4

alkil grupu, pravu ili razgranatu C,., alkoksi grupu ili hidroksi grupu ili atom halogena: ili R<4>i R<7>predstavljaju atom vodonika i R<=>i R<6>formiraju zajedno metilendioksi grupu: R<3>predstavlja atom vodonika ili cijano grupu, aminokarbonii grupu C,.4alkoksikarbonil grupu, ili

karboksi grupu;

R<9>i R'° predstavljaju nezavisno jedno od drugog atom vodonika, ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, ili C36cikloalkil grupu, ili fenil gruou, fenil(C, J alkil grupu, tienil(C,_4) alkil grupu ili furil(C,.J alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metilendioksi grupom, ili jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom, hidroksi grupom, tnfluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili za -(CH2)m-OH ili -

(CH2)0-NR'2Ri3 grupa, ili

R<a>i R<!0>formiraju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi

supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom:

R'<2>i R<13>predstavljaju nezavisno jedno od drugog atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, fenil(C,.4) alkil grupu, t/enil(C, 4) alkil grupu ili funl(C,.4) alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metilendioksi grupom, ili sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravom ili razgranatom C,.„ alkoksi grupom, hidroksi grupom, trifluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili za -(CH2)m-OH ili -(CH2)0-NR,<2>R'<3>grupa, ili

R'<2>i R'<3>formiraju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom

X predstavlja -CH2-grupu, -NH-grupu, -NR"-grupu. ili atom sumpora ili atom kiseonika ili sulfo grupa ili sulfoksi grupa - gde R" predstavlja pravu ili razgranatu C,.., alkil grupu ili C3.5cikloalkil grupu-;

n predstavlja nulu. 1 ili 2 -

m predstavlja 1, 2. 3 Hi 4, i

0 predstavlja nulu. 1, 2, 3 ili 4

1njihove soli. solvate i njihove optički aktivne izomere i njihove soli. njihove solvate.

Povoljna grupa jedinjenja opšte formule (IA) je formirana od jedinjenja, gde

R' predstavlja atom vodonika ili metil grupu;

R<2>predstavlja atom vodonika ili metil grupu;

R<J>predstavlja fenil-, ili tienil - ili furil grupu;

R<J>, R<3>, R° i R' predstavljaju nezavisno atom vodonika, pravu ili razgranatu C,_.alkil grupu,

pravu ili razgranatu C,.dalkoksi grupu, hidroksi grupu ili atom halogena. ili

R" i R<7>predstavljaju atom vodonika R<3>i R° formiraju "zajedno metilendioksi grupu;

R<d>predstavlja atom vodonika ili cijano grupu;

R<=>i R<10>predstavljaju metil grupu, etil grupu ili ciklopropil grupu ili R<9>i R'° formiraju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.. alkil grupom,

X predstavlja -NH grupu ili atom kiseonika i

n predstavlja 1 -

i njihove soli, solvate, optički aktivne izomere i njihove soli, solvate.

Posebno su povoljna sledeća jedinjenja koja ispunjavaju gornje uslove: 1-(9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karbonil)piro!idon; N.N-dimetil-9-benziiamino-lO-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksamid-hemihidrat; N-etil-9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksamid-hemihidrat; 1-(9-furfurilamino-10-cijano-imidazo{1,2-a]kvinolin-2-karbonil)-pirolidin-hemihidrat: 1 -(9-tienilamino-10-cijano-imidazo[l ,2-a]kvinolin-2-karbonil)-pirolidm-hemihidrat;

i njihove soli, solvati, optički aktivni izomeri i njihove soli, solvati.

Prema drugim aspektima predmetni pronalazak takođe se odnosi na farmaceutske preparate koji sadrže aktivne principe jedinjenja opšte formule (I) i njihove izomere, soli i solvate, koji su poželjno oralni preparati, ali inhalabilne, parenteralne i transdermalne formulacije su takođe objekt predmetnog pronalaska. Gornji farmaceutski preparati mogu biti čvrste materije ili tečnosti, kao što su tablete, pilule, kapsule, umetci, rastvori, suspenzije ili emulzije. Čvrsti preparati, pre svega tablete i kapsule, su preferirani farmaceutski oblici,

Gornji farmaceutski preparati pripremljeni su primenom uobičajenih farmaceutskih ekscipijenata koristeći standardne postupke.

Preparati opšte formule (I) mogu se upotrebiti u tretiranju patologija, u čijem razviću A3receptor igra ulogu.

Jedinjenja predmetnog pronalaska koja imaju selektivnu aktivnost na A3receptor mogu se upotrebiti u terapeutskim i/ili preventivnim tretmanima disfunkcije srca, bubrega, respiratornog sistema, centralnog nervnog sistema. Ona inhibiraju zaštitni efekt adenozina u rastućim tumorskim ćelijama, sprečavaju degranulaciju mast ćelija, inhibiraju produkciju citokina, smanjuju intraokularni pritisak, inhibiraju oslobađanje TNFa, inhibiraju migraciju eozinofila, neutrofila i drugih imunih ćelija, inhibiraju bronhokonstikciju i ekstravazaciju plazme.

Na osnovu tih efekata, antagonisti A3receptora predmetnog pronalaska mogu biti terapeutski korisni kao antiinflamatorni, antihistaminički, antiishemiski, antidepresivni, antiaritmički, bubrežno zaštitni, antitumorski, antiparkinsonovi i lekovi koji pojačavaju kognitivnu funkciju. Oni mogu takođe biti korisni u tretmanu ili prevenciji miokardijalnih reperfuzionih povreda, hronične opstruktivne bolesti pluća (COPD) i sindroma respiratornog bola odraslih (ARDS) uključujući hronični bronhitis, plućni enfizem ili dispneu, alergijske reakcije (npr., rinitis, odgovore na trovanje bršljanom, ortikariju, sklerodermu, artritis) druge autoimune bolesti, zapaljenje creva, Addison-ova bolest, Chron-ov sindrom, psoriaza, reumatizam, hipertenzija, poremećaji neurološke funkcije, glaukom i dijabetes (K.N. Klotz, Naunvn-Schmiedberg's Arch. Pharmacol. 362: 382, 2000; P.G. Baraldi es P.A. Borea, TiPS 21; 456, 2000).

Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se preferentno koristiti za tretman bolesti kao što je astma, COPD i ARDS, glaukom, tumor, alergijske i imflamatorne bolesti, ishemija, hipoksija, aritmija i bubrežne bolesti.

Prema drugom od njegovih aspekata, predmetni pronalazak odnosi se na upotrebu jedinjenja opšte formule (I) u tretmanu gornjih patologija. Sugerisane dnevna doza je 0.1-1000 mg aktivnog sastojka u zavisnosti od prirode i jačine bolesti i od pola, težine pacijenta itd..

Dalji predmet pronalaska je pripremanje jedinjenja opšte formule (!) i intermedijera opšte formule (II) i (III).

Intermedijeri opšte formule (II) i (III) koji se koriste u postupku pripremanja u skladu sa pronalaskom su delimično novi. Supstituenti opšte formule (II), (III), (IV) i (V) imaju značenja kao što je definisano gore.

U postupku u skladu sa našim pronalaskom jedinjenje formule (VIII) je acilirano sa kiselinom opšte formule (II), ili njegovim reaktivnim derivatom u skladu sa reakcijama acilacije poznatim u organskoj herniji. Kao acilacioni agensi koriste se kiseli halogenidi ili mešani anhidridi i jedinjenje opšte formule (I) koje je tako dobijeno je, ako je potrebno, transformisano u njegove soli, solvate ili oslobođeno iz soli, solvata i odvojeno u svoje geometrijske ili optičke izomere.

Supstituenti jedinjenja opšte formule (I) mogu se transformisati jedan u drugi poznatim postupcima.

Pripremanje mešanih anhidrida upotrebljenih u reakciji acilacije obavljeno je sa pivaloil-hlondom. poželjno u prisustvu organske baze, poželjno tnetilamina u hloroformu, i ako postupci poznati iz organske hernije mogu takođe biti upotrebljeni. Acilacija se može obaviti u širokom rasponu temperature, poželjno između 0°C -100°C.

Jedinjenja opšte formule (II) - gde je značenje R', R<2>, R<3>, R", R<5>, R<5>, R<7>, R<e>, X i n isto kao što je definisano gore - mogu se dobiti pomoću nekoliko poznatih postupaka, među njima je onaj pokazan u shemi 1., putem selektivne hidrolize jedinjenja formule (III), putem selektivnog postupka hidrolize poznatog u organskoj herniji. Kao poželjni agens hidrolize mogu se primeniti alkalni hiđroksidi, ali se takođe mogu upotrebiti drugi pomoćni agensi za hidrolizu estara.

Jedinjenja opšte formule (III) - gde je značenje R<1>, R<2>, R<3>, R4.R5, R<6>, R<;>, R<5>, X i n isto kao što je definisano gore i RM predstavlja C,... alkil grupu - može se pripremiti iz jedinjenja formule (IV) -koristeći postupke poznate same po sebi (I.R. Ager i R. Wes;wood, J. Med. Chem. 32, 1098, (1988)).

Jedinjenja opšte formule (IV) - gde je značenje R',R<2>,R3,R4,R3,R<5>, R<7>, R<3>, X i n isto kao što je definisano gore - mogu se pripremiti od jedinjenja opšte formule (V), koristeći postupke poznate same po sebi (Nan Zhang, Bioorg and Med. Chem. Lett., 10. 2825, (2000)).

Jedinjenja opšte formule (V) - gde je značenje R', R<2>. R<3>, R<4>.R<5>,R6,R<7>i R<a>. isto kao što je definisano gore - mogu se pripremiti od jedinjenja opšte formule (VI). koristeći postupke poznate same po sebi (D.L. Leysen, J. Heterqcyclic Chem., 24, 161 1, (1987)).

Jedinjenja opšte formule (VI) - gde je značenje R\ R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<5>, R<7>i R<3,>isto kao što je definisano gore - mogu se pripremiti od jedinjenja opšte formule (VI), koristeći postupke poznate same po sebi (Pfizer (ine) USP 4,175,193).

Jedinjenja pronalaska, opšte formule (I), (II), (III), (IV) i (V), njihovo pripremanje i biološka aktivnost prikazani su u primerima koji slede, bez ograničenja obima patentnih zahteva na primere.

Slika 1. prikazuje jedinjenja formule (I),

Slika 2. prikazuje jedinjenja formule (II),

Slika 3. prikazuje jedinjenja formule (III),

Slika 4. prikazuje jedinjenja formule (IV),

Slika 5. prikazuje jedinjenja formule (V),

Slika 6. prikazuje jedinjenja formule (VI),

Slika 7. prikazuje jedinjenja formule (VII),

Slika 8. prikazuje jedinjenja formule (VIII),

Primeri

Primer 1

1 -(9-benzilamino-10-cijano-imidazo[12-a]kvinolin-2-karbonil)pirolidon

U opštoj iormuh (I) F<T>i R2 predstavljaju atome vodonika, R"je fenil grupa. R". R<L>'. R° i R'predstavljaju atom vodonika, R<9>i R<i0>formiraju zajedno 1,3-butandil grupu, R<:>predstavlja cijano grupu, značenje X je -NH grupa, n je 1.

a) 2-amino-3-cijano-4-hlorkvinolin:

Mešavma 10 g 2-amino-3-cijano-4-hidroksikvinolina i 15 ml fosforil hiorida je zagrejana uz

mešanje na 110°C. Reakciona mešavina je ohlađena, izlivena u 100 ml ledene vode i neutralizovana sa 60 mi 10% rastvora natrijum hidroksida. Nastali žuti talog |e filtriran, ispran sa 50 ml vode. Nakon sušenja dobijeno je 7.5 g naslovnog jedinjenja, mp.: 210°C

NMR, 6H(400 MHz, DMSO-d3): 7.21 ppm, (s, 2H, NH2), 7.35-7.40 ppm. (dd. 1H. 6-H), 7.53-7.57 ppm. (d, 1H, 5-H). 7.70-7.75 ppm, (dd, 1H, 7-H), 7.93-7.98 ppm, (d, 1H. 9-H)

b) 2-amino-3-cijano-4-benzilaminokvinolin

5 g 2-amino-3-cijano-4-hlorkvinoiina i 11 ml benzilamina su zagrejani uz mešanje na

130<J>C. Reakciona mešavina je izlivena na 50 ml vode. nastali talog je filtriran, ispran sa 50 ml vode. Bledo žuti talog je rekristalizovan iz dimetilformamida da se dobije 5.2 g naslovnog jedinjenja mp.: 206°C.

NMR, 5H(400 MHz, DMSO-d5): 5.02-5.03 ppm, (d, 2H, N-CH2), 6.22, ppm (s, 2H, NH,), 7.14-7.16 ppm, (dd, 1H, 6-H), 7.24-7.26 ppm, (dd. 1H, 5-H), 7.30 ppm, (s, 5H, Ph), 7.50-7.52 ppm. (dd, 1H, 7-H), 8.16-8.19 ppm, (d, 1H, 8-H). 8.30-8.33 ppm (t. 1H, NH)

Koristeći 2-aminometilpiridin ili 3-aminometilpiridin ili 4-aminometilpiridin umesto benzilamina, može se dobiti odgovarajuće jedinjenje opšte formule IV,

c) etil 9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-aJkvinolin-2-karboksilat monohidrat

Rastvoru 2.74 g 2-amino-3-cijano-4-benzilaminokvinolma u 100 ml apsolutnog etanola,

2.14 ml etil brompiruvata je dodano, uz mešanje na 70°C. reakciona mešavina je ključala tokom 2 časa, zatim je talog filtriran. Nastali beli kristalni materijal je rekristalizovan iz 150 ml acetonitrila da se dobije 1.1 g naslovnog jedinjenja, mp.: 112-114°C.

NMR, 5H(400 MHz, DMSO-d3): 1.32 ppm, (t, 3H, COOCH2CH3), 4.30 ppm (q, 2H. COOCH,CH3), 5.09 ppm (d, 2H, PhCH2), 7.25-7.38 ppm (m, 5H0, 7.64-7.67 ppm (m, 1H), 7.85-7.88 ppm (m, 1H), 8.43-8.53 ppm (m, 3H), 9.04 ppm (s, 1H, 3-H).

d) 9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-aJkvinolin-2-karboksilna kiselina

Mešavina 2.71 g etil 9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilat

monohidrata, 42 ml etanola i 40 ml 10% rastvora natrijum hidroksida je mešano tokom 6 časova na 25°C. Debela suspenzija 100 ml vode su dodati i pH suspenzije je zakišeljeno do zapremine 3 sa 96% rastvora sirćetne kiseline. Bledo žuti kristalni materijal je filtriran, ispran sa 3 x 25 ml vode i osušen. Tako je dobijeno 2.3 g naslovnog jedinjenja, Mp.: 178-182°C.

NMR, 5H(400 MHz, DMSO-d5): 5.09 ppm (d, 2h. pHCH2), 7.22-7.40 ppm (m, 5H), 7.99-7.67 ppm (m, 1H), 7.81-7.89 ppm (m, iH), 8.37-8.54 ppm (m, 3H), 8.90 ppm (s. 1H. 3-H).

e) 1 -(9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinohn-2-karbonil)-pirolidon

Mešavini 1.71 g 9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1.2-a]kvinolin-2-karboksilne kiseline. 15

ml hloroforma i 0.8 g tnetilamm 0.6 g pivaloil hlorida u 10 ml hloroforma su nakapani uz mešanje tokom 15 minuta na 5°C. Reakciona mešavina je mešana tokom 1 časa na 5°C. nakon toga je dodana mešavina 0.4 g pirolidona. 10 ml hloroforma i 0.8 ml trietilamina Mešavina je mešana tokom 7 časova na 25°C, razblažena sa 100 ml hloroforma . ekstrahovana sa 50 ml vode, 50 ml 5% rastvora natrijum hidrogen karbonata, i 50 ml vode. osušena na natri|um sulfatu isparena u vakumu. Bledo žuti kristalni materijal je rekristalizovan iz N.N-dimetilformamida da se dobije 0.7 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 206°C.

NMR, 5H (400 MHz, DMSO-d6): 1.79-1.92 ppm (m, 4H), 3.47-3.50 ppm (m, 2H), 3.95-3.98 ppm (m, 2H), 5.08 ppm (d, 2H, PhCH,), 7.23-7.38 ppm (m, 5H), 7.62-7.65 ppm (m,1H). 7.83-7.87 ppm (m, 1H), 8.36-8.42 ppm (m, 2H), 8.50-8.52 ppm (m, 1H), 8.80 ppm (s,1H, 3-H).

Primer 2

N,N-dimetil-9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksamid-hemihidrat

U opštoj formuli (I) R' i R2 predstavljaju atom vodonika, R<3>je fenil grupa, R<J>. R<D>, R° i R<7>predstavlaju atom vodonika, R<3>predstavlja cijano grupu, R<9>i R<!0>označavaju nezavisno jedan od drugog metil grupu, X je -NH grupa, n je 1.

Mešavina 1.71 g 9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilne kiseline (pripremljene prema primeru 1), 15 ml hloroforma i 0.8 g trietilamina 0.6 g pivaloil hlorida u10ml hloroforma su nakapani uz mešanje tokom 15 minuta na 5°C. Reakciona mešavina je mešana tokom 1 časa na 9°C, nakon toga je dodana mešavina 0.45 g dimetilamonijum hlorida,10 ml hloroforma i 1.6 ml trietilamina. Mešavina je mešana tokom 3 časa na 25"C. zatim je bledo žuti kristalni materijal dobijen prema proceduri opisanoj u primeru 1 i rekristalizovan iz N.N-dimetilformamida da se dobije 0.65 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 262-264°C.

NMR, 5H(400 MHz, DMSO-d6): 2.98 ppm (s, 3H), 3.45 ppm (s, 3H), 5.08 ppm (d. 2H. PhCH?), 7.23-7.38 ppm (m, 5H), 7.62-7.65 ppm (m, 1H), 7.84-7.87 ppm (m, 1H), 8.37-8.39 ppm fm, 2H), 8.50-8.53 ppm (m, 1H), 8.75 ppm (s, 1 H, 3-H).

Primer 3

N-etil-9-benzilamino-10-cijano-imidazo[l ,2-a]kvinolin-2-karboksamid-hemihidrat;

U opštoj formuli (I) R' i R<2>predstavljaju atom vodonika, R<3>je fenil grupa. R<J>. R<3>, R° i R<7>predstavlaju atom vodonika, R<6>predstavlja cijano grupu, R<9>označava vodonik, R<i0>označava etil grupu. X označava -NH grupu, n je 1.

1.71 g 9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilne kiseline pripremljene prema primeru 1. je transformisano sa 0.45 g etilamin hlorovodonika, analogno onome opisanom u primerul, u naslovno jedinjenje. Nakon rekristalizacije bledo žutog materijala iz 80 ml etanola. dobijeno je 0.62 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 275-277°C.

NMR, 8H(400 MHz, DMSO-d6): 1.11 ppm (t, 3H, NHCH,CH3), 3.30 ppm (q, 2H, NHCH2CH3), 5.09 ppm (d, 2H, PhCH2), 7.22-7.40 ppm (m, 5H), 7.60-7.67 ppm (m, 1H), 7.82-7.94 ppm (m, 2H), 8.38-8.42 ppm (m. 2H), 8.50-8.54 ppm (m, 1H), 8.82 ppm (s. 1H, 3-H).

Primer 4

1 -(9-furfurilammo-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karbonil)-pirolidin-hemihidrat

U opštoj formuli (I) Fl' i R<2>predstavljaju atom vodonika. R<3>je 2-funl grupa, R"\R". R<D>i R' predstavlaju vodonik. R- i R 0 označavaju zajedno 1,4-butandil grupu. R<d>predstavlja cijano grupu. X označava -MH grupu, n je 1.

a) 2-amino-3-cijano-furfurilammokvinolin

10 g 2-amino-3-cijano-4-hlorokvinolina i 19 ml furfurilamina je zagrejano uz mešANJE NA

120°c. tokom 3 časa. Reakciona mešavina je ohlađena do 25°C, i šest puta je uzastopno mešana sa 50 ml vode. nastali talog je filtriran i osušen. Tako dobijeni materijal je rekristalizovan iz 60 ml dimetilformamida da se dobije 5.8 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 206°C.

NMR, 5H (200 MHz, DMSO-d3): 4.98 ppm (d, 2H. funl-CH2), 6.29 ppm (s, 2H), 6.35-6.42 ppm (m, 2H), 7.10-7.18 ppm (m, 1H), 7.31-7.35 ppm (m, 1H), 7.47-.7.60 ppm (m. 2H). 8.13-8.20 ppm (m. 2H).

b) etil 9-furfurilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilat monohidrat

Rastvoru 2.64 g 2-amino-3-cijano-4-furfurilaminokvinolina u 100 ml apsolutnog etanola

dodano |e 2.14 ml etil piruvata, uz mešanje na 70°C. reakciona mešavina je ključala tokom 2 časa, zatim je talog filtriran, materijal je rekristalizovani dobijeno je 1.1 g naslovnog jedinjenja, mp.: 242-245°C.

NMR, dH (200 MHz. DMSO-d5): 1.33 ppm (t. 3H, COOCH2CH3), 4.31 ppm (q, 2H. COOCH,CH3), 5.05 ppm (d. 2H, furil-CH2), 6.40-6.43 ppm (m. 2H), 7.58-7.66 ppm (m, 2H), 7.80-7.88 ppm (m, 1H), 8.31 ppm (t, 1H), 8.41-8.45 ppm (m, 2H0, 9.04 ppm (s, 1H, 3-H).

c) 9-furfunlamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilična kiselina

Mešavina 2.52 g etil 9-furfurilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilat

monohidrata, 40 ml etanola i 33 ml 10% rastvora natrijum hidroksida je mešano tokom 3 časa na 25°C. Debeloj suspenziji 80 ml vode dodati su i pH suspenzije je zakišeljen do vrednosti 3 sa 96% rastvora sirćetne kiseline. Bledo žuti kristalni materijal je filtiran. ispran sa 3 x 25 ml vode i osušen. Tako je dobijeno 2.32 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 180-185°C (dekompenzacija).

NMR, 5H(200 MHz, DMSO-d3): 5.05 ppm (d, 2H, furil-CH2), 6.39-6.42 ppm (m, 2H), 7.56-7.64 ppm (m, 2H), 7.79-7.87 ppm (m, 1H), 8.27 ppm (t, 1H), 8.36-8.46 ppm (m, 2H), 8 93 ppm (s, 1H. 3-H).

d) 1 -(9-furfurilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karbonil)-pirolidon hemihidrat

Mešavini 1.79 g 9-furfurilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilične kiseline, 15

ml hloroforma i 0.8 g trietilamina, 0.6 g pivaloil hlorida u 10 ml hloroforma je nakapano uz mešanje tokom 15 minuta na 5°C. Reakciona mešavina je mešana tokom 1 časa na 5oC, nakon toga je mešavina 0.36 g pirolidona, 10 ml hloroforma i 0.8 ml trietilamina dodana tome. Mešavina je mešana tokom 3 časa na 25oC, razbažena sa 100 ml hloroforma. ekstrahovana sa 50 ml vode, 50 ml 5% rastvora natrijum hidrogen karbonata i 50 ml vode, osušeno na natrijum sulfatu i ispareno u vakumu. Žuti kristalni materijal je rekristalizovan iz 50 ml etanola da se dobije 0.15 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 276-279°C.

NMR. 5H (200 MHz, DMSO-d6): 1.79-1.95 ppm (m, 4H), 3.47-3.54 ppm (m, 2H), 3.98-4.04 ppm (m, 2H), 5.05 ppm (d, 2H, funl-CH2), 6.40-6.44 ppm (m, 2H0, 7.57-7.65 ppm (m, 2H). 7.80-7.88 ppm (m, 1H), 8.23 ppm (t, 1H), 8.39-8.46 ppm (m, 2H), 8.81 ppm (s, 1 H, 3H).

Primer 5

1 -(9-tenilamino-10-cijano-imidazo(1,2-a]kvinolin-2-karbonil)-pirolidin-hemihidrat

U opštoj formuli (I) R' i R<2>predstavljaju atom vodonika, R<3>je 2-tienil grupa, R"1. R<D>, R° i R<7>predstavlaju vodonik, R"i R<10>označavaju zajedno 1,4-butandil grupu, R<3>predstavlja cijano grupu, X označava -NH grupu, n je 1.

a) 2-amino-3-cijano-tenilaminokvinolin

10 g 2-amino-3-cijano-4-hlorokvmolina ? 19 ml tienilamina su zagrevani uz mešanje na

115°C, tokom 4 časa Reakciona mešavina je ohlađena do 25°C, i šest puta uzastopno mešana sa 50 ml vode, nastali talog je filtriran, ispran dva puta sa 50 ml vode i osušen. Tako dobijem materijal je rekristalizovan iz 60 ml N.N-dimetilformamida da se dobije 6.8 g bledo žutog naslovnog jedinjenja. Mp.: 208-209°C.

NMR. 5H (200 MHz DMSO-d5): 5.18 ppm (d. 2H, tienil-CH2), 6.28 ppm (s. 2H), 6.96-7.00 ppm (m. 1H). 7.07-7.19 ppm (m. 2H), 7.31-7.42 ppm (m, 2H), 7.48-7.56 ppm (m. 1H), 8.09-8 13 ppm (m, 1H), 8.30 ppm (t, 1H).

b) 9-tenilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilat karbohidrat

Rastvoru 5.61 g 2-amino-3-cijano-4-tenilaminokvinolina u 200 ml apsolutnog etanola

dodato je 4.29 g etil brompiruvata, uz mešanje na 70°C. Reakciona mešavina je ključala tokom 2 časa, zatim je talog filtriran. Dobijeno je 2.54 g svetio bež naslovnog jedinjenja mp.: 255-266°C

NMR, 5H (200 MHz, DMSO-d6): 1.33 ppm (t, 3H, COOCH2CH3), 4.31 (q, 2H, COOCH2CH3), 5.24 ppm (d, 2H, tienil-CH2), 6.96-7.00 ppm (m, 1H), 7.14 ppm (m. 1H). 7.40-7.43 ppm (m, 1H), 7.61-7.68 ppm (m, 1H), 7.82-7.90 ppm (m, 1H), 8.42-8.46 ppm (m. 3H). 9.05 ppm (s, 1H, 3-H).

c) 9-tenilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilična kiselina

Mešavina 2.54 g etil 9-tenilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilata, 40 ml

etanola i 33 ml 10% rastvora natrijum hidroksida je mešano tokom 6 časova na 25°C. Debela suspenzija 80 ml vode je dodata i pH suspenzije je zakišeljen do vrednosti 3 sa 96% rastvorom sirćetne kiseline.

Bledo žuti kristalni materijal je filtriran, ispran sa 5 x 10 ml vode i osušen. Tako je dobijeno 2.18 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 209-217°C. (razlaganje).

NMR, 5H (400 MHz, DMSO-d6): 5.24 ppm (d, 2H, tienil-CH2), 8.88 ppm (s, 1H, 3-H)

d) 1-(9-tenilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karbonil)-pirolidon hemihidrata

Mešavmi 1.80 g 9-tenilamino-l 0-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksilične kiseline, 10

ml hloroforma i 1.1 ml trietilamina, 0.87 g pivaloil hlorida u 10 ml hloroforma je nakapano, uz mešanje tokom 15 minuta na 5°C. Reakciona mešavina je mešana tokom 1 časa na 5°C, nakon toga dodata je mešavina 0.51 g pirolidina, 10 ml hloroforma i 1.1 ml tietilamina. Mešavina je mešana tokom 3 časa na 25°C, razblažena sa 100 ml hloroforma. ekstrahovana sa 50 ml vode, 50 ml 5% rastvora natrijum hidrogen karbonata i 50 ml vode, osušena na natrijum sulfatu i isparena u vakumu. Žuti kristalni materijal je rekristalizovan iz 200 ml etanola da se dobije 0.29 g naslovnog jedinjenja. Mp.: 267-269°C.

NMR, 6H (400 MHz, DMSO-d6): 1.79-1.94 ppm (m. 4H), 3.48-3.51 ppm (m. 2H). 3.98-4.01 ppm (m. 2H). 5.24 ppm (d, 2H, tienil-CH,). 6.97-7.00 ppm (m. 1H), 7.14 ppm fm. 1H). 7.41 ppm (m. IH). 7.61-7.65 ppm (m, IH), 7.83-7.87 ppm (m, 1H). 8 37-8 45 ppm (m. 3H). 3.82 ppm (s. 1H. 3-H).

Struktura i fizičke karakteristike daljih jedinjenja opšte formule (I) pripremljnih postupkom opisanim u primeru 1 prikazane su u tabeli I.

Struktura i fizičke karakteristike mtermedijera opšte formule (III) pripremljnih postupkom opisanim u primeru 1 prikazane su u tabeli (II).

Struktura i fizičke karakteristike intermedijera opšte formule (IV) pripremljnih postupkom opisanim u primeru 1 prikazane su u tabeli (III).

Struktura i fizičke karakteristike intermećijera opšte formule (V) pripremljnih postupkom opisanim u primeru 1 prikazane su u tabeli (IV).

Primer 72.

Tablete od sledećih preparata napravljene su poznatim postupcima koji se koriste u farmaceutskoj industriji

Biologija

Postupci

Vezivanje humanog adenozin A3receptora

Pripremanje suspenzije membrane:sakupi CHO ćelije koje eksprimiraju hA3receptore putem ispiranja tri puta sa ledeno hladnim PBS, centrifugiraj na 1000 x g 10 min., homogenizuj tokom 15 sekundi u puferu (50 mM Tris, 10 mM MgCL,, 1mM EDTA. pH 8.0), centrifugiraj na 43.000 x g tokom 10 min (Sigma 3K30), suspenduj preparat membrane u puferu spomenutom gore, čuvaj alikvote na -80°C.

Protokol vezivanja: inkubiraj CHO-hA3preparacije membrane (2 ug sadržaja proteina) u inkubacionom puteru (50 mM Tris. 10 mM MgCI,. 1 mM EDTA, 3 U/ml adenozin diaminaze. pH 8.0) u prisustvu 0.5 nm [,<25>I]AB-MECA (p-amino-benzil-metilkarboksamido-adenozin)( 100. 000cpm) i 100 uM R-PIA (N°-[L-2fenilizopropil]adenozin) da se definiše ne specifično vezivanje ili test ]edmjen|e u ukupnoj zapremini od 50 uL tokom 1 časa na sobnoj temperaturi. Filtriraj preko VVhatman GF/B filtera sa staklenim vlaknima (prethodno namočenog u 0.5% polietiiamm tokom 3 časa), isperi 4 x sa 1 ml_ ledeno hladnog 50 mM Tris, 10 mM MgCI2, 1 mM EDTA (pH 8.0) u Brandel Cell Harvester-u sa 96 bunarćića. Detekcija aktivnosti: u gama brojaču (1470 VVizard. VVallac) Inhibicija [%]=100-((aktivnost u prisustvu test jedinjenja - ne specifična aktivnost)/(ukupna aktivnost - ne specifična aktivnost)) " 100

Vezivanje humanog adenozin A, receptora

Pripremanje suspenzije membrane: sakupi CHO ćelije koje eksprimiraju hA.receptore putem ispiranja tri puta sa ledeno hladnim PBS, centrifugiraj na 1000 x g 10 min., homogenizuj tokom 15 sekundi u puferu (50 mM Tris, pH 7.4), centrifugiraj na 43.000 x g tokom 10 min (Sigma 3K30), suspenduj preparat membrane u puferu spomenutom gore. čuvaj alikvote na -80°C.

Protokol vezivanja: inkubiraj CHO-hA, preparacije membrane (50 ug sadržaja proteina) u inkubacionom puferu (50 mM Tris, 3 U/ml adenozin diaminaze, pH 7.4) 10 nM [<3>H]CCPA (2-hloro-N<6->ciklopentil-adenozm) (80.000 dpm) .i 10 uM R-PIA (N<5->[L-2fenilizopropil]adenozm) da se definiše ne specifično vezivanje ili test jedinjenje u ukupnoj zapremini od 100 uL tokom 3 časa na sobnoj temperaturi. Filtriraj preko VVhatman GF/B filtera sa staklenim vlaknima (prethodno namočenog u 0 5% polietilenimina tokom 3 časa), isperi 4 x sa 1 mL ledeno hladnog 50 mM Tris, (pH 7.4) u Brandel Cell Harvester-u sa 96 bunarćića. Detekcija aktivnosti: na ploči sa 96-bunarčića u pneustvu HiSafe-3 koktela u beta brojaču (1450 Microbeta, VVallac). Inhibicija [%] = 100-((aktivnost u prisustvu test jedinjenja - ne specifična aktivnost)/(ukupna aktivnost - ne specifična aktivnost))<*>100.

Vezivanje humanog adenozin A2areceptora

Protokol vezivanja: inkubiraj 7 ug membrana (humani receptori A-, adenozina transfektovani u HEK-293 ćelije, izvor: Receptor Biologv, Ine), pufer (50 mM tris, 10 mM MgCI2. 1 mM EDTA, 2 U/ml adenozin diaminaze, pH 7.4) 20 nM [<3>H]CGS-21680 (2-[p-(2-karbo-niletil)fenetilamino]-5'-N-etilkarboksamido-adenozin) (200.000 dpm) i 50 uM NECA (5'-N-etilkarbo-ksamido-adenozin) da se definiše ne specifično vezivanje ili test jedinjenje u ukupnoj zapremini od 100 uL tokom 90 minuta na sobnoj temperaturi. Filtriraj preko VVhatman GF/B filtera sa staklenim vlaknima (prethodno namočenog u 0.5% polietilenimintokom3 časa), isperi 4 x sa 1 mL ledeno hladnog 50 mM Tris, 10 mM MgCI2. 1 mM EDTA, 0.9% NaCI, pH 7.4) u Brandel Cell Harvester-u sa 96 bunarćića. Detekcija aktivnesti: na ploči sa 96-bunarčića u pneustvu HiSafe-3 koktela u beta brojaču (1450 Microbeta, VVallac). Inhibicija [%] = 100-((aktivnost u prisustvu test jedinjenja - ne specifična aktivnost)/(ukupna aktivnost - ne specifična aktivnost))'100.

Vezivanje humanog adenozin A2breceptora

Protokol vezivanja: inkubiraj 20.8 ug membrana (humani receptori A2badenozina transfektovani u HEK-293 ćelije, izvor: Receptor Biologv, Ine), pufer (50 mM tris, 10 mM MgCI2. 1 mM EDTA. 0.1 mM benzamidina, 2 U/ml adenozin diaminaze. pH 6.5) 32.4 nM [<3>H]DPCPX f8-ciklopentil-1,3-dipropilksantin) (800.000 dpm) i 100 uM NECA (5<r->N-etilkarboksamido-adenozm) da se definiše ne specifično vezivanje ili test jedinjenje u ukupnoj zapremini od 100 uL tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi. Filtriraj preko VVhatman GF/B filtera sa staklenim vlaknima (prethodno namočenog u 0.5% p<p>lietilenimin tokom 3 časa), isperi 4 x sa 1 mL ledeno hladnog 50 mM Tris-HCI (pH 6.5) u Brandel Cell Harvester-u sa 96 bunarćića. Detekcija aktivnosti: na ploči sa 96-bunarčića u pneustvu HiSafe-3 koktela u beta brojaču (1450 Microbeta, VVallac). Inhibicija [%] = 100-((aktivnost u prisustvu test jedinjenja - ne specifična aktivnost)/(ukupna aktivnost - ne specifična aktivnost)) ' 100.

Rezultati

Mi smo smatrali da su jedinjenja biološki aktivna ako su inhibirala vezivanje radioveznika na humanim edenozm A3receptorima sa aktivnošću iznad 80% pri 1 uM u našim eksperimentalnim uslovima.

Konstanta disocijacije (Kd) [,<25>I]AB-MECA u CHO-hA3membranskim preparacijama je određena ispitivanjim zasićenja izotopa uz pomoć Seatchard analize (G. Scatchard, Ann. N. Y. Acad. Sci. 51: 660, 1949). IC50 je pretvoren u konstantu afiniteta (KJ pute pnmene Cheng-Prusoff jednačine (Y.J. Cheng i W.H Prusoff, Bochem. Pharmacol. 22: 3099,1973).

■Nekoliko jedinjenja opšte formule (I), (II), (III) i (IV) pokazuju značajne biološke efekte. Jedinjea opšte formule (IA), definisana u zahtevu 2, kao podrgrupa opšte formule (I), definisane u zahtevu (I), pokazuju najvažnije aktivnosti. Sem 9 jedinjenja, njihove K, vrednosti nisu više od 150 nM. Jedinjenja data kao primeri su posebno p<p>godna. Njihove K, vrednosti u ispitivanjima vezivanja u humanom adenozin A3receptoru su između 1.6 i 0.38 nM. K, vrednosti većine pogodnih jedinjenja su 0.52 i 0.38 nM.

Jedinjenja poseduju odgovarajuće biodostupnosti i pokazuju najmanje 1,000 puta selektivnost u odnosu na humane adenozin A,, A2ai A2bp<p>dtipove receptora.

Dalje, trajanje njihove akcije pri intravenskom i oralnom davanju je dovoljno dugo, njihove ED50vrednosti su niže, njihovi toksikološki i profili sporednih efekata su pogodni.

Gornji podaci čine jedinjenja opšte formule (I) mogućim za terapeutske pnmene.

Claims

1. Jedinjenja opšte formule (I), naznačena time što R' predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; R<2>predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; R<3>predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; ili C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, tienil grupu, ili furil grupu, po potrebi suspstituisanu sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravu ili razgranatu C,.4alkoksi grupu, ili atom halogena, ili 5- ili 6 člani heteroaromatični prsten - koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota ili 5 člani heteroaromatični prsten koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili jedan atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravom ili razgranatom C,.„ alkoksi grupom ili atomom halogena; R<4>,R<5>,R<5>iR<7>predstavljaju nezavisno jedan od drugog atom vodonika, pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, pravu ili razgranatu C,.4alkoksi grupu, hidroksi grupu ili atom halogena; iliR<4>iR<7>predstavljaju atom vodonika iR<5>iR<6>formiraju zajedno metilendioksi grupu. R<8>predstavlja atom vodonika ili cijano grupu, aminokarbonil grupu, C,.4alkoksikarbonil grupu, ili karboksi grupu; R<9>i R'° predstavljaju nezavisno jedno od drugog atom vodonika, ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, ili C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, fenil(C,.4) alkil grupu, tienil(C,.4) alkil grupu ili furil(C,.4) alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metilendioksi grupom, ili jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom, hidroksi grupom, trifluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili 5 do 6 člani heteroaromatični prsten koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota, ili 5 člani heteroaromatični prsten, koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili jedan atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa jednom ili više pravom ili razgranatiom C,.4alkil grupom, prave ili razgranate C,.4 alkoksi grupe, ili atom halogena; ili za -(CH2)m-OH ili -(CH2)0-NR,<2>R'<3>grupa, ili R<9>i R'° formiraju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom CM alkil grupom; R<12>i R<13>predstavljaju nezavisno jedno od drugog atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, fenil(C,.4) alkil grupu, tienil(C,.4) alkil grupu ili furil(C,.4) alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metilendioksi grupom, ili sa jednom ili više pravom ili razgranatom C? alkil grupom, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom, hidroksi, trifluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili 5 ili 6 članim heteroaromatičnim prstenom, koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota, ili 5 članim heteroaromatičnim prstenom, koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa jednom ili više pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom, pravom ili razgranatom C,.4 alkoksi grupom, ili atom halogena ili za -(CH2)mOH ili -(CH2)0-NR'<2>R'<3>grupa, ili R<12>iR'<3>predstavljaju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom X predstavlja -CH2-grupu, -NH-grupu, -NR"-grupu, ili atom sumpora ili atom kiseonika ili sulfo grupa ili suifoksi grupa - gde R" predstavlja pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu ili C3.6cikloalkil grupu-; n predstavlja nulu, 1 ili 2 - m predstavlja 1, 2, 3 ili 4, i 0 predstavlja nulu, 1, 2, 3 ili 4 1 njihove soli, solvate i optički aktivne izomere i njihove soli, solvate.

2. Jedinjenja opšte formule (I) prema zahtevu 1, naznačena time što R' predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; R<2>predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; R<3>predstavlja atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu; ili C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, tienil grupu, ili furil grupu, po potrebi suspstituisanu sa jednom ili više pravih ili razgranatih CM alkil grupa, pravu ili razgranatu C,.4alkoksi grupu, ili atom halogena, ili 5- ili 6 člani heteroaromatični prsten - koji sadrži jedan, dva ili tri atoma azota ili 5 člani heteroaromatični prsten koji sadrži jedan atom azota i jedan atom kiseonika ili jedan atom azota i jedan atom sumpora, po potrebi supstituisan sa jednom ili više pravih ili razgranatih C,.4alkil grupa, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom ili atomom halogena; R<4>,R<5>,R<6>iR<7>predstavljaju nezavisno jedan od drugog atom vodonika, pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, pravu ili razgranatu C,.4alkoksi grupu, ili hidroksi grupu ili atom halogena; ili R<4>iR<7>predstavljaju atom vodonika iR<5>i R<6>formiraju zajedno metilendioksi grupu; R<8>predstavlja atom vodonika ili cijano grupu, aminokarbonil grupu C,_4alkoksikarbonil grupu, ili karboksi grupu; R<9>i R<10>predstavljaju nezavisno jedno od drugog atom vodonika, ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, ili C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, fenil(C,.4) alkil grupu, tienil(C,.4) alkil grupu ili furil(C,.4) alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metiledioksi grupom, jednom ili više pravih ili razgranatih C,.„ alkil grupa, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom, hidroksi grupom, trifluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili za -(CH2)m-OH ili -(CH2)0-NR<12>R<13>grupom, ili R<9>i R'° formiraju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom; R<12>iR<13>predstavljaju nezavisno jedno od drugog atom vodonika ili pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu, ili C3.6cikloalkil grupu, ili fenil grupu, fenil(C,.4) alkil grupu, tienil(C,.4) alkil grupu ili furil(C,.4) alkil grupu, po potrebi supstituisanu sa metilendioksi grupom, ili sa jednom ili više pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom, pravom ili razgranatom C,.4alkoksi grupom, hidroksi grupom, trifluorometil grupom, cijano grupom ili atomom halogena, ili za -(CH2)m-OH ili -(CH2)0-N<R>'<2>R13grupom, ili R'<z>i R'<3>formiraju zajedno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom C,.4alkil grupom X predstavlja -CH2-grupu, -NH-grupu, -NR<l1->grupu, ili atom sumpora ili atom kiseonika ili », sulfo grupa ili sulfoksi grupa - gde R1' predstavlja pravu ili razgranatu C,.4alkil grupu ili C3.6cikloalkil grupu; n predstavlja nulu, 1 ili 2 - m predstavlja 1, 2, 3 ili 4, i 0 predstavlja nulu, 1, 2, 3 ili 4 1 njihove soli, solvate i optički aktivne izomere i njihove soli, solvate.

3. Jedinjenja opšte formule (I) prema zahtevima 1-2, naznačena time što R<1>predstavlja atom vodonika ili metil grupu; R<2>predstavlja atom vodonika ili metil grupu; R<3>predstavlja fenil-, ili tienil- ili furil grupu; R<4>,R<s>,R<8>iR<7>predstavljaju nezavisno atom vodonika, pravu ili razgranatu C,4alkil grupu, ili pravu ili razgranatu C,.4alkoksi grupu, ili hidroksi grupu ili atom halogena, ili R<4>iR<7>predstavljaju atom vodonika i R<5>i R<6>formiraju zajedno metilendioksi grupu; R<8>predstavlja atom vodonika ili cijano grupu; R<9>i R'° predstavljaju metil grupu, etil grupu ili ciklopropil grupu ili R<9>i R<10>formiraju zaje dno sa atomom azota 3-7 članu heterocikličnu grupu, po potrebi supstituisanu sa pravom ili razgranatom C?? alkil grupom, X predstavlja -NH grupu ili atom kiseonika i n predstavlja 1 - i njihove soli, solvate i optički aktivne izomere i njihove soli, solvate.

4. Jedinjenja prema zahtevima 1-3, naznačena time što su sledeća: 1-(9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karbonil)pirolidon; N,N-dimetil-9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksamid-hemihidrat; N-etil-9-benzilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karboksamid-hemihidrat; 1 -(9-furfurilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karbonil)-pirolidin-hemihidrat; 1 -(9-tienilamino-10-cijano-imidazo[1,2-a]kvinolin-2-karbonil)-piroiidin-hemihidrat; i njihove soli, solvati i optički aktivni izomeri i njihove soli, solvati.

5. Postupak za pripremanje jedinjenja opšte formule (I), njegovih soli, solvata, optički aktivnih izomera i njihovih soli i solavata, koji u formuli R\ R<2>, R<3>,R4,R<5>,R°, R\ R<8>, R<9>, R<10>, R'1,R12,R<13>, X, n, m i o imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, okarakterisan acilacijom jedinjenja opšte formule (VIII), gde R<9>i R'° imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, sa kiselinom opšte formule (II), - gde R\ R2,R3,R4,R<5>, R<s>,R<7>iR<8>, X i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, ili njegov reaktivni derivat i ako je potrebno transformisanje supstituenata jedinjenja ošte formule (I) dobijajući tako u svakom postupcima poznatim samim po sebi i/ili transformišući jedinjenje opšte formule (I) dobijenog tako u njegovim solima, iii solvatima, ili oslobađajući ih iz njihovih soli ili solvata i/ili razdvajajući ih u njihove optički aktivne izomerne oblike ili transformišući optički aktivne oblike u racemski oblik.

6. Postupak prema zahtevu 5, naznačen time što se obavlja acilacijom u organskom ra-stvaraču, u prisustvu baze.

7. Postupak prema zahtevima 5-6, naznačen time što koristi kiseli halid ili anhidrid kao reaktivni derivat kiseline.

8. Postupak prema zahtevima 5-6, naznačen time što koristi kao organski rastvarač halo-genizovane ugljovodonike, poželjno hloroform.

9. Postupak prema zahtevima 5-8, naznačen time što koristi kao bazu organsku bazu, poželjno trietilamin.

10. Farmaceutski preparati, naznačeni time što sadrže kao aktivni sastojak jedno ili više jedinjenja opšte formule (I) - gde R\ R<2>, R<?>, R4,R5,R6,R7,Ra,R<9>, R<10>, X, i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, - ili njihove soli, solvate ili optički aktivne izomere i njihove soli, solvate u mešavini sa jednim ili više ekscipijenata koji se koriste u farmaceutskoj industriji.

11. Farmaceutski preparati prema zahtevu 10, naznačeni time " što sadrže kao aktivni sastojak jedno ili više jedinjenja prema zahtevu 3.

12. Farmaceutski preparat prema zahtevu 10, naznačen time što sadrži kao aktivni sastojak jedno iii više jedinjenja prema zahtevu 4.

13. Upotreba jedinjenja opšte formule (I) - gde R\ R2,R3,R4,Rs,R6,R<7>,R<8>,R<9>, R'°, X, i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, naznačena time što je za tretman bolesti u čijem razvitku igra ulogu receptor A3.

14. Upotreba jedinjenja opšte formule (I) - gde R\ R2,R3,R4,R5,R6, R7,R<8>,R<9>, R'°, X, i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, - prema zahtevu 13, naznačena time što je za upotrebu kao A3veznika u slučaju bolesti srca, bubrega, respiratornih organa i centralnog nervnog sistema, za inhibiciju i zaštitu adenozina u rastućim ćelijama tumora, prevenciju degranulacije mast ćelija, inhibiciju proizvodnje citokina, redukciju intraokularnog pritiska, inhibiciju oslobađanja TNFct, inhibiciju eozinofilnih, neutrofilnih i drugih migracija imunih ćelija, inhibiciju bronhokonstrikcije i plazma ekstravazije.

15. Upotreba jedinjenja opšte formule (I) - gde R\ R2,R3,R4,R5,R6, R<7>,R<8>,R<9>, R'°, X, i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, - prema zahtevima 13 i 14, naznačena time što je za upotrebu antagonista A3receptora, kao aktivnog sastojka, u antiinflamatornim, antiasmatičnim, antiishemičnim, antidepresantnim, antiaritmičnim, bubre-žno zaštitnim, antitumorskim, antiparkinsonovim i kognitivno pojačavajućim farmaceutskim preparatima i u preparatima za tretman ili prevenciju referfuzije ozlede miokarda, hronične opstruktivne plućne bolesti (COPD) i sindroma respiratornog bola kod odraslih (ARDS) uključujući hronični bronhitis, plućni enfizem ili dispneu, alergijske reakcije (npr., rinitis, odgovore na trovanje bršljanom, ortikariju, sklerodermu, artritis) druge autoimune bolesti, upalu creva, Addison-ovu bolest, Crohn-ovu bolest, psoriazu, reumatizam, hipertenziju, funkcionalne neurološke poremećaje, glaukom i dijabetes.

16. Upotreba jedinjenja opšte formule (I) - gde R\ R2,R3,R4,R5,R6, R<7>,R<8>,R<9>, R'°, X, i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, - prema zahtevima 13, 14 i 15, naznačena time što je za upotrebu antagonista A3receptora, kao aktivnopg sastojka, za tretman bolesti kao što je astma, COPD i ARDS, glaukom, tumor, alergijske i infla-matorne bolesti, ishemija, hipoksija, aritmija i bubrežne bolesti.

17. Jedinjenja opšte formule (II), naznačena time što R\ R2,R3,R4,R5,R6, R<7>,R<8>, X, i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1, sa uslo.vom da ako -X-(CR'R<2>)n- R<3>zajedno formiraju alkoksi ili alkiltio, alkilsulfo ili alkilsulfoksi grupu R<8>nije hidrogen.

18. Jedinjenja opšte formule (III), naznačena time što R\ R<2>, R<3>, R<4>,R5,R<6>, R<7>,R<8>, X, i n imaju isto značenje kao što je definisano u zahtevu 1 i R<14>predstavlja C,.,, alkil grupu, sa uslovom da ako -X-(CR'R<2>)n-R<3>zajedno formiraju alkoksi ili alkiltio grupu R<8>nije hidrogen.