RS104804A - Derivati n-((3-okso 2,3-dihidro-1h-izoindol-1-il) acetil gvanidina kao inhibitori nhe-1, za lečenje infarkta i angine pektoris - Google Patents

Derivati n-((3-okso 2,3-dihidro-1h-izoindol-1-il) acetil gvanidina kao inhibitori nhe-1, za lečenje infarkta i angine pektoris

Info

Publication number
RS104804A
RS104804A YUP104804A RS104804A RS 104804 A RS104804 A RS 104804A YU P104804 A YUP104804 A YU P104804A RS 104804 A RS104804 A RS 104804A
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
isoindol
dihydro
oxo
guanidine
acetyl
Prior art date
Application number
Other languages
English (en)
Inventor
Heinz Werner Kleemann
Armin Hofmeister
Jean Christophe Carry
Serge Mignani
Antony Bigot
Baptiste Ronan
Original Assignee
Sanofi Aventis Deutschland Gmbh.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi Aventis Deutschland Gmbh. filed Critical Sanofi Aventis Deutschland Gmbh.
Publication of RS104804A publication Critical patent/RS104804A/sr
Publication of RS51636B publication Critical patent/RS51636B/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/44—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles
    • C07D209/46—Iso-indoles; Hydrogenated iso-indoles with an oxygen atom in position 1
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Derivati izoindolona, postupci dobijanja i intermedijari ovih postupaka, njihova upotreba kao lekova, i farmaceutski preparati koji ih sadrže. Ovaj pronalazak se odnosi na nove derivate izoindolona Formule (I). u kojoj R1 do R6 imaju značenja koja su navedena u zahtevima. Jedinjenja pronalaska su pogodna kao antiaritmički lekovi sa kardioprotektivnom komponentom za profilaksu infarkta i lečenje infarkta i za lečenje angine pektoris. Ona takođe na preventivan način inhibiraju patofizoiloške procese koji su povezani sa razvojem oštećenja izazvanih ishemijom, naročito u izazivanju srčanih aritmija izazvanih ishemijom i srčanom insufijencijom.

Description

DERIVATI N-((OKSO-2, 3-DIHIDRO-1H-IZOJNDOL-1-IL)-ACETIL)GVANIDINA KAO INHIBITORI NHE-1 ZA LEČENJE INFARKTA
T ANGINE PEKTORIS
Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja izoindolina formule I.
Jedinjenja pronalaska su pogodna kao antiaritmički medikamenti sa kardioprotcktivmom komponentom za profilaksu infarkta i lečenje infarkta i za lečenje angine pektoris. Ona takođe sprečavaju na preventivan način patofiziološke procese povezane se razvojem oštećenja indukovanih ishemijom, naročito u izazivanju srčanih aritmija izazvanih ishemijom i srčanom insufijencijom.
Pronalazak se odnosi na jedinjenja formule I, u kojoj
Rl iR2
nezavisno jedan od drugog, predstavljaju vodonik, alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, alkenil koji ima 2, 3,4,5 ili 6 ugljenikovih atoma, alkinil koji ima 2, 3,4,5 ili 6 ugljenikovih atoma, aril, heteroaril, F, Cl, Br, J, N02, NH2, alkilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, NRaRb, alkilkarbonil, amino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, S(0)nR7, CO2H, alkoksikarbonil koji ima 1, 2, 3 i.i 4 ugljenikova atoma, alkilkarbonil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, CONH2, C0NRaRb,CN, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkoksi koji ima 1,2 ili 3 ugljenikova atoma ili
S03H; pri čemu su sami Rl i R2 po izboru supstituisani sa linearnom ili razgranatom alkil grupom koja ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma;
n nula, 1 ili 2
R3 je vodonik, aril, heteroaril, grupa Alk-R8 tipa ili cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7
ili 8 ugljenikovih atoma,
u kojoj je cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe F, Cl, Br i J,
Alk je alkil koji ima 1, 2, 3,4 ili 5 ugljenikovih atoma u linearnom ili razgranatom lancu,
R8 je vodonik, cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, aril, heteroaril, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; C02H, CONH2, CONRaRb, NH2, alkilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma ili NRaRb;
R4, R5 i R6
su, nezavisno jedan od drugog, vodonik ili linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma;
R7 je linearni ili razgranati alkil.koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma;
Ra i Rb
su, nezavisno jedan od drugog, linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma ili alternativno Ra i Rb grade, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, 5- ili 6-člani heterociklični prsten koji po izboru sadrži drugi hetero atom izabran od O, S ili N,
i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli
Prednost je data jedinjenjima formule I, u kojoj su značenja sledeća:
Rl iR2
nezavisno jedan od drugog, su vodonik, alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; F, Cl, Br, J NH2, alkilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma. NRaRb, alkilkarbonilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, C02II, alkoksikarbonil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkoksi koji ima 1, 2 ili 3 ugljenikova atoma ili S03H,
Rl i R2 su po izboru supstituisani sa linearnom ili razgranatom alkil grupom
koja ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma;
R3 je grupa Alk-R8 tipa ili cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6. 7 ili 8 ugljenikovih atoma, u kojoj je cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe F, Cl, ili Br,
Alk je alkil koji ima 1, 2, 3, 4 ili 5 ugljenikovih atoma u linearnom ili razgranatom lancu,
R8 je vodonik, cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma,
polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, aril ili heteroaril, R4, R5 i R6
su, nezavisno jedan od drugog, vodonik ili linearni ili razgranati alkil koji ima
1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma;
Ra i Rb
su, nezavisno jedan od drugog, linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, ili Ra i Rb grade, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, 5- ili 6-člani heterociklični prsten koji po izboru sadrži drugi hetero
atom izabran od O, S ili N,
i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli
Naročita prednost je data jedinjenjima formule I, u kojoj su značenja sledeća:
Rl i R2
su, nezavisno jedan od drugog, vodonik, alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; F, Cl, Br, J, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma ili polifluoroalkoksi koji ima 1,2 ili 3 ugljenikova atoma,
Rl i R2 su po izboru supstituisani sa linearnom ili razgranatom alkil grupom
koja ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma;
R3 je grupa Alk-R8 tipa ili cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma,u kojoj je cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe F ili Cl,
Alk je alkil koji ima 1, 2, 3,4 ili 5 ugljenikovih atoma u linearnom ili razgranatom lancu,
R8 je vodonik, cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma ili
polifluoroalkil koji ima 1,2,3 ili 4 ugljenikova atoma,
R4, R5 i R6
su, nezavisno jedan od drugog, vodonik ili linearni ili razgranati alkil koji ima
1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma;
i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli
U jednom pristupu jedinjenja formule I su definisana ka o u prethodnom tekstu i R3 predstavlja atom vodonika, arilnu ili heteroarilnu grupu ili lanac Alk-R8 tipa, gde Alk predstavlja lanac od 1 do 5 ugljenikovih atoma ili linearni ili razgranati lanac i R8 predstavlja atom vodonika, cikloalkil (C3-C8) grupu, polifluoroalkil (C1-C4) grupu, arilnu grupu, heteroarilnu grupu, hidroksil grupu, alkoksi (C1-C4) grupu, karboksilnu grupu, karboksamidnu grupu, amino grupu, alkilamino (C1-C4) grupu ili grupu NRaRb,
U jednom pristupu jedinjenja formule I su definisana kao u prethodnom tekstu i R4 predstavlja atom vodonika. U drugom pristupu R5 predstavlja atom vodonika
Naročita prednost je data jedinjenjima formule I, karakterisana time da su izabrana iz grupe koja se sastoji od: N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)-2-metilpropionil] gvanidin, N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-2-metil-propionil]-gvanidin,
N-[(3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-7-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(7-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(7-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4,7-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4,5-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(7-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-l -metil 3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin,
i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli
Sledeća prednost je data jedinjenjima formule I, karakterisana time da su izabrana iz grupe koja se sastoji od: N-[(2-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)propionil] gvanidin, N-[(2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[2-(2-butil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)propionil] gvanidin, N-[(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)propionil] gvanidin, N-[(2-ciklopropilmetilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acctil] gvanidin, N-[(3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-4-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin, N-[(2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin, N-[(2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin, N-[(5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindoI-1 -il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutiil-5-izopropoksi-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol- l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil] gvanidin, N-[(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-hloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-111-izoindol-1-il)acetil]-gvanidin,
N-[(6-hloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil]-gvanidin,
N-[(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin,
N-[(6-hloro-3-okso—2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin,
N-[(5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin,
N-[(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin,
N-[(5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil] gvanidin, N-[(4.7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin,
N-[(2-izobutil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin,
N-[(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin,
N-[(3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil] gvanidin,
N-[(3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetil] gvanidin,
N-[(3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil] gvanidin,
N-[(3-okso-6-trilfuorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol- 1-il)-acetil] gvanidin,
N-[(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetil] gvanidin,
N-[(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil] gvanidin, [l-(2-gvanidino-l-metil-2-oksoetil)-3-okso-l,3-dihidroizoindol-2-il] sirćetna kiselina, N-{2-[(3-okso-2-(2-pirolidin-l-iletil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -iljpropionil} - gvanidin,
N-[2-(2-hidroksietil)-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)propionil] gvanidin, N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-253-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil} gvanidin,
N-[2-(2-ciklopropilmetil-6-metansulfonil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetiljgvanidinium,
N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil} gvanidin,
N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 acetil} gvanidin,
N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin,
N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin,
N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil} gvanidin,
N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil} gvanidin,
i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
Sledeća prednost je data jedinjenjima formule I, krakterisanim time da su odabrana iz grupe od: (R)-N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]acetil} gvanidin,
(S)-N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 - il]acetil} gvanidin,
(R)-N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol- 1-il)-acetilj-gvanidin,
(S)-N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trilfuorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-®-acetil]-gvanidin,
(R)-N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}gvanidin,
(S)-N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1-il]-acetil}gvanidin,
(R)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1-il]-acetil}gvanidin,
(S)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3,3,3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil} gvanidin,
(R)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin,
(S)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetilj-gvanidin,
(R)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2. 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)-acetil]-gvanidin,
(S)- N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)-acetil]-gvanidin,
(R)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil} gvanidin,
(S)- N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil} gvanidin,
(R)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-triffluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}gvanidin,
(S)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-triffluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}gvanidin,
(R)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-triffluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il]-acetil} gvanidin,
(S)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-triffluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il]-acetil} gvanidin,
(R)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetil] gvanidin,
(S)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil]gvanidin,
(R)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil]gvanidin,
(S)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)-acetil]gvanidin,
(R)-N-{2-[3-okso-6-tnfluorometil-2-(3, 3, 3-tnfluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin,
(S)-N-{2-[3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin,
(R)-N-{2-[3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il] -acetil} -gvanidin,
(S)-N-{2-[3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il]-acetil} -gvanidin,
(R)-N-{2-[6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}-gvanidin,
(S)-N-{2-[6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}-gvanidin,
(R)-N-{2-[5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin,
(S)-N-{2-[5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin,
(R)-N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin,
(S)-N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin,
(R)-N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin,
(S)-N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin,
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i njihovi tautomeri.
Ako jedinjenja pronalaska sadrže jedan ili više centara asimetrije, ona mogu nezavisno jedno od drugog da imaju S i R konfiguraciju. Jedinjenja mogu biti u obliku optičkih izomera, diastereoizomera, racemata ili njihovih smeša u bilo kom odnosu.
Ovaj pronalazak obuhvata sve tautomerne oblike jedinjenja formule I.
Alkil radikali mogu biti pravog ili razgranatog lanca. To takode važi ako oni nose supstituente ili ili se javljaj! kao supstituenti drugih radikala, na primer alkilamino, alkilkarbonilamino, alkoksi, alkoksikarbonil, alkilkarbonil, polifluoroalkil ili polifluoroalkoksi radikala. Primeri alkil radikala su metil, etil, n-propil, izopropil (= 1- metiletil), n-butil, izobutil (= 2-metilpropil), sec-butil (= 1-metilpropil), terc-butil (= 1,1-dimetiletil) ili pentil. Prioritetni alkil radikali su metil, etil, n-propil, izopropil, terc-butil i izobutil. Jedan ili više, na primer 1, 2. 3, 4, 5 , 6 , 7, 8 ili 9 vodonikovih atoma u alkil radikalima mogu biti zamenjeni atomom fluora i stvore polifluroalkil radikale. Primeri takvih radikala su difluorometil, trifluorometil, pentafluoroetil, 2, 2, 2- trifluoroetil, 3, 3, 3-trifluoropropil, 3, 3, 3-trifluorobutil, 4, 4, 4-trifluorobuti. Polifluroalkoksi radikali su alkoksi radikali kojima je 1 do 3 atoma ugljenika supstituisano sa 1, 2, 3, 4, 5, 6, ili 7 atoma fluora, naročito trifluorometoksi.
Primeri cikloalkil radikala su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil ili ciklooktil. Jedan ili više na primer 1 ili 2 atoma vodonika u cikloalkil radikalima može biti zamenjeno atomom fluora, hlora, broma ili joda, naročito atomima fluora. Supstituisani cikloalkil radikali mogu biti supstistuisani u bilo kom položaju.
Alkenil radikali sadrže 2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika i 1, 2 ili 3 konjugovane ili ne-konjugovane dvostruke veze u pravom ili razgranatom lancu. Alkinil radikali sadrže 2, 3, 4, 5 ili 6 ugljenikovih atoma i 1, 2 ili 3 konjugovane ili ne-konjugovane trostruke veze u pravom ili razgranatom lancu.
Aril radikali u odabrani iz grupe koja obuhvata fenil, 1-naftil, 2-naftil i indenil. Supstituisani aril radikali mogu biti supstituisani u bilo kom položaju.
Heteroaril radikali su monociklična ili diciklična aromatična jedinjenja koja imaju 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10-ćlani prsten u kome su 1, 2, 3 ili 4 atoma u prstenu atomi kiseonika, atomi sumpora ili atomi azota, na pr., 1, 2 ili 3 atoma azota, 1 ili 2 atoma kiseonika, 1 ili 2 atoma sumpora ili kombinacija raznih heteroatoma. Heteroaril radikali mogu biti vezani u bilo kom položaju, na primer u položaju 1, položaju 2, položaju 3, položaju 4, položaju 5, položaju 6, položaju 7, ilipoložaju 8. Primeri heteroarila su furil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, izpoksazolil, tiazlil, izotiazolil, piridinil, pirazinil, pirimidinil, piradizinil, indolil, indazolil, hinolil, izohinolil, ftalazinil, hinoksalinil, hinazolinil i sinolinil, naročito tiazol, tienil, pirolil, piradizinil, piridinil, pirimidinil, furil, imifazolil, izoksazolil, oksazolil, pirazinil, tetrazolil i triazolil. Supstituisani heteroaril radikali mogu biti supstituisani u bilo kom položaju.
Jedinjenja formule I inhibiraju celularni natrijum-proton "antiporter" (Na<+>/H<+>-izmenjivač, NHE), naročito inhibiraju podtip NHE1. Zbog osobina NHE-inhibicije, jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su pogodne za prevenciju i lečenje oboljenja uzrokovanih aktivacijom ili aktiviranim NHE, ili oboljenja koja su sekundarno prouzrokovana oštećenjima povezanim sa NHE.
Pošto NHE inhibitori prvenstveno deluju preko svog efekta na regulaciju celularnog pH, oni se u opštem slučaju mogu delotvorno kombinovati sa drugim jedinjenjima koja regulišu intracelularni pH, sa pogodnim kombinacionim partnerima koji su inhibitori enzimne grupe karbonat dehidrataze, inhibitori sistema koji transportuje bikarbonatne jone, kao što je natrijum bikarbonat kotransporter (NBC) ili hlorid-bikarbonat izmenjivač koji zavisi od natrijuma (NCBE), i NHE inhibitori koji imaju inhibitorni efekat na druge NHE podtipove, postoje pomoću njih moguće pojačati ili modulirati farmakološki relevantne efekte regulacije pH NHE inhibitora koji su ovde opisani.
Upotreba jedinjenja pronalaska se odnosi na prevenciju i lečenje akutnih i hroničnih bolesti u veterini i humanoj medicini, naročito u humanoj medicini.
Prema tome, NHE inhibitori ovog pronalaska su pogodni za lečenje bolesti koje su prouzrokovane ishemijom i reperfuzijom.
Jedinjenja koja su ovde opisana su korisna zbog svojih farmakoloških osobina kao antiaritmijski medikamenti.
Zbog njihove kardioprotektivne komponente, NHE inhibitori formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su izvanredno pogodni za profilaksu infarkta i lečenje infarkta i za lečenje angine pektoris, u ovim slučajevima oni takođe preventivno inhibiraju ili uveliko redukuju patofiziološke procese koji su povezani sa razvojem oštećenja koji su posledica ishemije, posebno u izazivanju srčanih aritmija nastalih usled ishemije. Zbog svojih zaštitnih efekata protiv patoloških hipoksičnih i ishemičnih stanja, jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli koje se koriste prema pronalasku mogu, zbog inhibicije mehanizma celularne Na+/H+ izmene, da se koriste kao medimamenti za lečenje svih akutnih i hroničnih oštećenja izazvanih ishemijom ili oboljenja koja su ona primarno ili sekundarno indukovala.
Ovo se takođe odnosi i na njihovo korišćenje kao medikamenata za hirurške intervencije. Prema tome, jedinjenja se mogu koristiti tokom transplantacije organa, pri čemu se mogu koristiti kako za zaštitu organa donora pre i tokom odstranjivanja, takoi za zaštitu izvađenih organa na primer tokom tretiranja fiziološkim tečnostima ili čuvanja u njima, i tokom transfera do organizma primaoca.
Jedinjenja pronalaska su na sličan način vredni medikamenti sa zaštitinim efektom kod izvođenja angioplastičnih hirurških intervencija, na primer na srcu, kao i na perifernim organima i sudovima.
Pokazalo se da su jedinjenja pronalaska izuzetno efektivni medikamenti za aritmije koje su opasne po život. Okončana je ventikularna fibrilacija i obnovljen fiziološki sinusni ritam srca.
Pošto NHE1 inhibitori ljudskih tkiva i organa, naročito srca, štite efektivno ne samo protiv oštećenja izazvanih ishemijom i reperfuzijom već takođe i protiv citotoksičnih efekata lekova kao što su oni koji se naročito koriste u terapiji kancera i terapiji autoimunih oboljenja, kombinovana administracija sa jedinjenjima formula I i/ili nihovim farmaceutski prihvatljivim solima je korisna za inhibiciju citotoksičnih, naročito kardiotoksičnih, sporednih efekata pomenutih jedinjenja. Redukcija citotoksičnih efekata, naročito kardiotoksičnosti, koja je rezultat komedikacije sa NHE1 inhibitorima dodatno omogućava da se poveća doza citotoksičnih terapeutskih agenasa i/ili produži lečenje sa takvim lekovima. Terapeutska korist takve citotoksične terapije se može značajno povećati kombinacijom sa NHE inhibitorima.
Osim toga, NHE 1 inhibitori pronalaska koji imaju formulu I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu se koristiti kad postoji prekomerno stvaranje tiroidnih hormona, tirotoksikoza, ili eksterna primena tiroidnih hormona^ koji oštećuju srce. Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su stoga pogodne za poboljšanje terapije sa kardiotoksičnim lekovima. U saglasnosti sa njihovim zaštitnim efektima protiv oštećenja izazvanih ishemijom, jedinjenja pronalaska su takođe pogodna kao lekovi za lečenje ishemija nervnog sistema, naročito centralnog nervnog sistema, pogodni su na primer za lečenje udara ili cerebralnih edema
Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su takođe korisni za terapiju i profilaksu oboljenja i poremećaja izazvanih prekomernom ekscitacijom centralnog nervnog sistema, naročito za lečenje epileptičkih poremećaja, centralno indukovanih kloničnih i toničnih spazama, stanja psihološke depresije, pojava anksioznosti i psihoza. U ovim slučajevima moguće je takođe koristiti NHE inhibitore koji su ovde opisani same, ili u kombinaciji sa drugim supstancama sa antiepileptičkom aktivnošću ili aktivnim antipsihotičkim sastojcima, ili inhibitorima karbonat dehidrataze, na primer sa acetazolamidom, i sa drugim inhibitorima NHE ili hlorid-bikarbonat izmenjivačima koji zavise od natrijuma (NBCE).
Jedinjenja pronalaska formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su dodatno na sličan način pogodna za lečenje nekih tipova šoka, takvih kao što je, na primer, alergijski, kardiogenični, hipovolemični i bakterijski šok.
Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu na sličan način da se koriste za prevenciju i lečenje trombotičnih poremećaja pošto su ona, kao inhibitori NHE, sposobna da inhibiraju samu agregaciju pločica. Ona su dodatno sposobna da inhibiraju ili spreče ekscesivno otpuštanje medijatora inflamacije i koaglacije, koje nastaje posle ishemije i reperfuzije, naročitovon Willebrandfaktora i thrombogeni selektin proteini. Prema tome moguće jr redukovati i eliminisati patogene efekte značajnih trombogenskih faktora. Inhibitori NHE ovog pronalaska mogu prema tome biti kombinovani sa drugim antikoagulantnim i/ili trombolitičkim aktivnim sastojcima kao što su, na primer, plazminogeni aktivator rekombinantnog ili prirodnog tkiva, streptokinaza, urinokinaza, acetilsalicilna kiselina, antagonisti trombina, antagonistia faktora Xa, medicinske supstance sa fibrinolitičkom aktivnošću, antagonisti receptora tromboksana, inhibitori fosfodiesteraze, antagonisti faktora Vila, klopidogrel, tiklopidin i t.d. Kombinovano korišćenje ovih NHE inhibitora sa NCBE inhibitorima i/ili sa inhibitorima karbonat dehidrataze, kao što je, na primer, sa acetoazolamidom, je naročito delotvorno.
Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli koje se koriste prema pronalasku se dodatno odlikuju jakim inhibitorskim efektom na proliferaciju ćelija, na primer proliferaciju fibroblasta i profileraciju glatkih vaskularnih mišićnih ćelija. Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su prema tome korisne kao vredni terapeutski agensi za oboljenja u kojima celularna proliferacija predstavlja primarni ili sekundarni uzrok, i mogu prema tome da se koristi kao antisklerotici, agensi za hroničnu bubrežnu isufijenciju i kancere.
Bilo je moguće pokazati d je migracija ćelija inhibirana inhibitorima NHE. Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su prema tome pogodna kao valjani terapeutski agensi za bolesti u kojima migracija ćelija predstavlja primarni ili sekundarni uzrok, kao što su na primer, kanceri sa izraženom tendencijom ka metastazi.
Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli se dalje odlikuju retardacijom ili prevencijom fibrotičkih poremećaja. Oni su prema tome korisni kao odlični agensi za lečenje srčanih fibroza, i pulmonarnih fibroza, hepatičkih fibroza, bubrežnih fibroza i drugih fibrotičkih poremećaja. Ona se prema tome mogu koristiti za lečenje hipertrofije i hiperplezije organa, na primer, srca i prostate. Ona su dakle pogodna za prevenciju i lečenje srčane ishemije (kongestivne srčane ishemije = CHF) i za lečenje i prevenciju hiperplazije prostate ili hipertrofije prostate.
Pošto postoji značajno povećanje u NHE kod esenvijalnih hipertanzija, jedinjenja formule 1 i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su korisna za lečenje i prevenciju visokog krvnog pritiska i kardiovaskularnih poremećaja. U tim slučajevima, oni se mogu koristiti sami ili sa pogodnim kombinacionim i formulacionim partnerom za lečenje visokog krvnog pritiska i kardiovaskularnih poremećaja. Prema tome, na primer, ona mogu biti kombinovana sa jednim ii više diuretika sa dejstvom sličnim tiazidu, diureticima, antagonistima aldosterona i pseudoaldosterona, kao stoje hidrohlorotiazid, indapamid, politiazid, furosemid, piretanid, torazemid, bumetanid, amilorid, triamteren, spironolakton ili epleron. Inhibitori NHE ovog pronalaska mogu se dalje koristiti u kombinaciji sa blokatorima kalcijumovih kanala kao što je verapamil, diltiazem, amlodipin ili nifedipin, i sa inhibitorima ACE koa stoje , na primer, ramipril, enalapril, lizinopril, fozinopril ili kaptopril. Dalji delotvorni kombinacioni partneri su takiđe beta blokatori kao što je metoprolol, albuterol itd., antagonisti receptora angiotenzina i podtipovi ovih recptora kao što je lozartan, irbezatran, valzatran, omapatrilat, gemopatrilat, antagonisti endotelina, inhibitori renina, antagonisti receptora adenozina, inhibitori i aktivatori kalijumovih kanala kao što je glibenklamid, glimepirid, diazoksid, kromakalim, minoksidil i njihovi derivati, aktivatori mitohondrijalnih kalijumovih kanala koji su osetljivi na ATP (mitoK(ATP)kanali), inhibitori Kvl.5 i t.d.
Pokazano je da inhibitori NHE1 formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli imaju značajno antiinflamatorno deijstvo i mogu prema tome da se koriste kao antiinflamatorski lekovi. U vezi sa ovim, inhibicija otpuštanja medijatora inflamacije je vredna pažnje. Jedinjenja se stoga mogu koristiti sama ili u kombinaciji sa antiinflamatornim lekom za prevenciju ili lečenje hroničnih i akutnih inflamarornih poremećaja. Kao pogodni kombinacioni partneri korišćeni su steroidni i ne-steroidni antiinflamatorski lekovi. Jedinjenja pronalaska mogu se takođe koristiti za lečenje poremećaja izazvanih protozoom, malarije i kokodioze kod živine.
Dodatno je nađeno da jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli pokazuju delotvoran efekat na lipoproteine seruma. Opšte je poznato da nivoi masti u krvi koji su suviše visoki, nazvani hiperlipoproteinemi, predstavljaju bitan faktor rizika za razvoj arteriosklerotičnih vaskularnih lezija, naročito koronarnog oboljenja srca. Redukcija povišenih lipoproteina seruma ima prema tome izuzetnu važnost za profilaksu i regresiju aterosklerotičnih lezija. Osim redukcije u ukupnom serumskom holesterolu, naročito je važno da se redukuje udeo specifičnih aterogeničnih frakcija lipida u ovom ukupnom holesterolu, naročito lipoproteina male gustine (LDL) i lipoproteina vrlo male gustine (VLDL), pošto ove frakcije lipida predstavljaju aterogenični faktor rizika. Suprotno tome, zaštitna funkcija prema koronarnom oboljenju srca je je pripisana lipoproteinima visoke gustine. Prema tome, hipolipidemici treba da budu sposobni da redukuju ne samo ukupni holesterol, već, posebno, VLDL i LDL frakcije serumskog holesterola. Sada je nađeno da inhibitori NHE1 pokazuju vredne terapeutski upotrebljive osobine koje se tiču uticaja na nivo serumskih lipida. Prema tome, oni značajno redukuju povišene koncentracije LDL i VLDL u serumu, kao što su one koje su primećene, na primer, kao posledica korišćenja dijete bogate holesterolom ili lipidima ili u slučajevima patoloških metaboličkih poremaćaja, na primer kod genetskih hiperlipidemija. Oni se prema tome mogu koristiti za profilaksu i regresiju aterosklerptičnih lezija eliminacijom uzročnih faktora rizika. Ovde su uključene ne samo primarne hiperlipidemije već takođe i određene sekundarne hiperlipidemuje koje se javljaju, na primer, kao posledica dijabetisa. Osim toga, jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli vode do značajne redukcije pojave infarkta koji su posledica metaboličkih abnormalija i, naročito, do značajne redukcije veličine infarkta i njegove jačine. Pomenuta jedinjenja su prema tome sa uspehom korišćena za proizvodnju lekova za lečenje hiperholesterolemije; za proizvodnju lekova za prevenciju aterogeneze; za proizvodnju lekova zaprevenciju i lečenje ateroskleroze, za proizvodnju lekova za prevenciju i lečenje oboljenja izazvanih povišenim nivoom holesterola, za proizvodnju lekova za prevenciju i lečenje oboljenja izazvanih endotelijalnom disfunkcijom, za proizvodnju lekova za prevenciju i lečenje hipertenzije uzrokovane aterosklerozom, za proizvodnju lekova za prevenciju i lečenje tromboza koje su posledica ateroskleroze, za proizvodnju lekova za prevenciju i lečenje ishemijskih oštećenja koji se javljaju kao posledica hiperholesterolemije i endotelijalne disfunkcije i post-ishemijskih reperfuzionih oštećenja, za proizvodnju lekova za prevenciju i lečenje srčanih hipertrofija i kardiomiopatija i kongestivne srčane ishemije (CHF) koji se javljaju kao posledica hiperholesterolemije i endotelijalne disfunkcije , za proizvodnju lekova za prevenciju i lečenje koronarnih vazospazama i miokardijalnih infarkta koji se javljaju kao posledica hiperholesterolemije i endotelijalne dusfunkcije, za proizvodnju lekova za lečenje pomenutih poremaćaja u kombinaciji sa hipotenzivnim supstancama, prvenstveno sa inhibitorima enzima koji konvertuju angiotenzin (ACE) i antagonistima receptora angiotenzina. Kombinacija NHE inhibitora formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli sa aktivnim sastojcima koji snižavaju nivo masti u krvi, prvenstveno sa inhibitorima HMG-CoA reduktaze ( na primer lovastati i pravastatin), pri čemu ovi dovode do hipolipidemičkih efekata i stoga povećavaju hipolipidemičke efekte NHE inhibitora jedinjenja formule I i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pokazala se kao pogodna kombinacija sa pojačanim efektom i redukovanom upotrebom aktivnih sastojaka.
Prema tome, jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli dovode do efektivne zaštite protiv endotelijalnog oštećenja različitog porekla. Ova zaštita sudova od sindroma endotelijalne disfunkcije znači da jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su valjani lekovi za prevenciju i lečenje koronarnih vazospazama, perifernih vaskularnih oboljenja, naročito intermitentne klaudikacije, aterogeneze i ateroskleroze, leve ventrikularne hipertrofije i dilatirane kardiomiopatije i trombotičkih poremećaja.
Osim toga nađeno je da su jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli pogodne u lečenju insulin nezavisnog dijabetesa (NIDDM), pri čemu je zadržana rezistentnost prema insulinu. U vezi sa tim moglo bi da bude delotvorno, da bi se poveća antidijabetska aktivmost i kvalitet efekta jedinjenja pronalaska, kombinovati ih sa bigvanidom kao što je metformin, sa antidijabetskom sulfonilureom kao što je gliburid, glimepirid, tolbutamid, i t. d., sa inhibitorina glukozidaze, sa agonistima PPAR kao što je roziglitazon, pioglitazon i t. d., sa proizvodima insulina različitog oblika administracije, sa DB4 inhibitorima, sa pojačivačem osetljivosti insulina ili sa meglitinidom. Osim akutnih antidijabetskih efekata, jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli deluju nasuprot razvoju kasnijih komlikacija dijabetesa i mogu prema tome da budu korišćnei kao lekovi za prevenciju i lečenje oštećenja od dijabetia, kao što je dijabetična neuropatija, dijabetična retinopatija, dijabetična kardiomiopatija i druga oštećenja koja se javljaju kao posledica dijabetesa. U vezi sa tim ona se mogu povoljno kombinovati sa antidijabetskim lekovima koji su upravo opisani kod lečenja NIDDM. U vezi sa ovim, kombinacija sa delotvornom dozom insulina trebalo da bude naročito značajna.
Inhibitori NHE pronalaska formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli pokazuju, osim zaštitnih efekata protiv akutnih ishemijskih pojava i posledično podjednako akutno stresnih reperfuzionih pojava, takođe i terapeutski upotrebljive efekte protiv oboljenja i poremećaja ukupnog organizma sisara koji su povezani sa manifestacijama hronično progresivnih procesa starenja i koji se javljaju nezavisno od akutnih hipoperfuzionih stanja i pod normalnim, ne-ishemijskim uslovima. Ove patološke manifestacije povezane sa godinama indukovane tokom dugog perioda starenja, kao što je bolest, invalidnost i smrt, koje koje sada mogu biti podložne lečenju sa inhibitorima NHE, su bolesti i stanja koja su u suštini povezana sa promenama u vitalnim organima i njihovih funkcija usled starenja i postaju vrlo važni u organizmu koji stari.
Poremećaji koji su povezani sa smanjenjem funkcija usled starenja ili manifestacije istrošenosti organa povezanih sa godinama su, na primer, neadekvatni odgovor i reaktivnost krvnih sudova na reakcije kontrakcije i relaksacije. Ovo sa godinama povezano smanjenje reaktivnosti sudova na stimulanse konstrikcije i relakasacije, koji predstavljaju esencijalne procese kardiovaskularnog sistema i prema tome života i zdravlja, mogu u znatnoj meri biti eliminisani ili redukovani inhbitorima NHE. Jedna važna funkcija i mera održanja reaktivnosti sudova je blokada ili retardacija progresije endotelijalne disfunkcije povezane sa godinama, koja može biti vrlo značajno eliminisana inhibitorima NHE. Jedinjenja formule I i/ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli je stoga izvanredno pogodn za lečenje i prevenciju progresije u endotelijalnoj disfunkciji koja je povezana sa godinama, naročito interminentne klaudikacije.
Primer druge promenljive veličine koja karakteriše procese starenja je smanjenje mogućnosti kontrakcije srca i smanjenje adaptacije srca zahtevima koje postavlja učinak pumpanja srca. Ovo smanjenje efikasnost srca kao posledica procesa starenja je u najvećem broju slučajeva povezano sa disfunkcijom srca koja je izazvana između ostalog depozicijom vezivnih tkiva u miokardijalnom tkivu. Ova depozicija vezivnih tkiva se karakteriše povećanjem težine srca, uvećanjem srca i ograničenom funkcijom srca. Bilo je iznenađujuće daje bilo moguće skoro potpuno inhibirati takvo starenje organa srca. Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su stoga izvanredno pogodni za lečenje i prevenciju srčane ishemije, kongestivne srčane ishemije CHF)
Dok su prethodni patenti i patentne prijave čija se zaštita traži za lečenje različitih oblika kancera koji se već javio, sada je vrlo iznenađujuće daje moguće ne samo lečiti kancer koji se već javio pomoću inhibicije proliferacije, već postoji prevencija i vrlo značajna retardacija pojave kancera koji se javlja usled starenja pomoću inhibitora NHE. Naročito je vredan pomena nalaz da su poremećaji svih organa, koji se javljaju kao posledica starenja, i ne samo određeni tipovi kancera prigušeni ili se javljaju sa vrlo značajnim odlaganjem. Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su prema tome izvanredno pogodna za lečenje i, naročito, prevenciju tipova kancera koji su povezani sa starenjem.
Sada je nađeno da postoji ne samo odlaganje, značajno pomereno u vremenu i izvan normalnog statističkog opsega, u pojavi poremećaja svih ispitivanih organa usled starenja , uključujući srce, sudove, jetru itd., već i vrlo značajno odlaganje pojave kancera kod starijih. Naprotiv, postoji takođe iznenađujuća produženje života do mere koja do danas nije postignuto nijednim drugom grupom lekova ili prirodnim proizvodima. Jedinstveni efekat inhibitora NHE takođe čini mogućim, osim korišćenja same aktivne komponente kod ljudi i životinja, kombinovanje inhibitora NHR sa drugim aktivnim načelimaa, merama, supstancama i prirodnim proizvodima koji se koriste u gerantologiji i koji su zasnovani na različtim mehanizmina akcije Takve klase aktivnih sastojaka koji se koriste u gerantološkoj terapiji su naročito vitamini i supstance sa antioksidantnim dejstvom. Pošto postoji korelacija između kalorijskog opterećenja ili uzimanja hrane i procesa starenja, kombinacija sa dijetetnim merama može da zauzme mesto sa supresantima apetita.Na sličan način moguće je razmatrati kombinaciju sa hipotenzivnim lekovima kao što je sa inhibitorima ACE, antagonistima receptora angiotenzina, diureticima, antagonistima Ca<2+>i t. d. ili sa lekovima koji normalizuju metabolizam kao što su agensi za smanjenje holesterola.
Jedinjenja formule I i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli su prema tome izvanredno pogodni za prevenciju promene tkiva usled starenja i za produženje života uz zadržavanje visokog kvaliteta života.
Jedinjenja pronalaska su efektivni inhibitori celularnih natrijum-proton "antiportera"
(Na/H izmenjivač) koji su u velikom broju poremećaja (esencijalne hipertenzije,
ateroskleroze, dijabetesa i t. d..) takođepovećani i u ćelijama koje su lako podložne merenju, kao što je na primer, u eritrocitima, pločicama ili leukocitima. Jedinjenja pronalaska su prema tome pogodna kao izvanredna i jednostavna naučna sredstva, na primer u njihovoj upotrebi kao dijagnostučkih agenasa za određivanje i razlikovanje različitih tipova hipertenzije, ali takođe i skleroze, dijabetesa i komplikacija dijabetesa, proliferativnih poremećaja i t.d.
Ovaj pronalazak se takođe odnosi na procese za sintezu derivata izoidolona formule I
Osim toga, jedinjenja formule I mogu biti u obliku tautomera, racemskih smeša, enantiomera i diastereoizomera. Ovi oblici su takođe deo pronalaska.
Jedinjenja formule I, u kojima R4 i R6 predstavljaju vodonik mogu biti dobijena od ftalimida formule (II) prema sledećoj opštoj šemi sinteze:
Opšta šema sinteze je sledeća:
a) kompleksni hidrid je reagovao sa ftalimidom (formule II) u alifatskom alkoholu b) dobijeni poizvod je tada reagovao sa alkoksikarboliletilentrifenilfosforanom u toluenu, ili sa trialkil fosfonacetatom i bazom c) dobijeni proizvod je reagovao sa gvanidinijum hloridom i bazom ili sa gvanidinom u na primer, alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atom.
Reakcija redukcije je prvenstveno izvedena upotrebom hidrida, kao što je kalijum borohidrid ili natrijum borohidrid, u alifatskom alkoholu koji sadrži 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, prvenstveno u metanolu, ili u tetrahidrofuranu, na temperaturi između 0°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Reakcija bje u opštem slučaju izvedena u prisustvu pogodnog alkoksikarbonil-metilentrifenilfosforana u rastvaraču, kao što je toluen, na temperaturi izmešu 20°C i tačke ključanja reakcione smeše, ili u prisustvu pogodnog trialkil fosfonoacetata i baze, kao šro je natrijum hidrid u rastvaraču, kao što je 1,2-dimetoksietan, na temperaturi između 0°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Reakcija c je u opštem slučaju izvedena u prisustvu gvanidinijum hidrohlorida i baze, kao što je kalijum terc-butoksid i inertnom rastvaraču, kao stoje dimetilformamid, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše, ili u prisustvu gvanidina u rastvaraču, kao što je alkohol koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, prvenstveno izopropanol, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Alternativno, neka jedinjenja formule I, u kojoj R4 i R6 predstavljaju vodonik" mogu biti pripremljena iz aldehida formule (III) prema sledećoj opštoj šemi sinteze:
Ošta šema sinteze je sledeća:
a) jedinjenje formule (III) je reagovaloje sa alkoksikarbonilmetilentrifenilfosforanom u toluenu ili sa trialkil fosfonoacetatom i bazom b) dobijeni proizvod je geagovao sa aminom formule R3NH2(R3 ima isto značenje kao u formuli I) i karbodiimidom c) dobijeni proizvod je doveden u kontakt sa gvanidinijum hloridom i bazom ili sa gvanidinom u na primer alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika.
Reakcija a je u opštem slučaju izvedena u prisustvu pogodnog alkoksikarbonil-metilentrifenilfosforana u inertnom rastvaraču, kao što je toluen, na temperaturi izmešu 20°C i tačke ključanja reakcione smeše, ili u prisustvu pogodnog trialkil fosfonoacetata i baze, kao šro je natrijum hidrid u rastvaraču, kao što je 1,2-dimetoksietan, na temperaturi između 0°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Reakcija b je izvedena u prosustvu odgovarajućeg amina R3NH2. Proces je u opštem slučaju izveden u prisustvu agensa za kuplovanje koji se koristi u herniji peptida, kao što jr karbodiimid (na primer, N,N'-dicikloheksilkarbodiimid) ili N,N'-karbonildiimidazol, u inertnom rastaraču, kao stoje etar ( na primer tetrahidrofuran ili dioksan), amid ( na primer dimetilformamid) ili hlorinisani inertni rastvarač (na primer metilen hlorid, 1,2-dihloretan ili hloroform), na temperaturi između 0°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Reakcija c je u opštem slučaju izvedena u prisustvu gvanidinijum hidrohlorida i baze, kao stoje kalijum terc-butoksid i inertnom rastvaraču, kao što je dimetilformamid, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše, ili u prisustvu gvanidina u rastvaraču, kao što je alkohol koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, prvenstveno izopropanol, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Jedinjenje formule I, u kome R4 preedstavlja alkil grupu i R6 predstavlja vodonik, može biti dobijeno od ftalimida formule (II) prema sledećoj opštoj šemi sinteze:
Opšta šema sinteze je sledeća:
a) ftalimid (formule II) je reagovao sa alkilmagnezijum halidom ili sa alkillitijum reagensom, na primer u etru b) dobijeni proizod je tada reagovao sa alkoksikarbonilmetilentrifenilfosforanom u toluenu, ili sa 1-etoksi-l-trimetilsiloksietilenom i Lcvvis-ovom kiselinom c) dobijeni proizvod je reagovao sa gvanidinijum hloridom i bazom ili sa gvanidinom u na primer alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika.
Reakcija a je prvenstveno izvedena korišćenjem alkilmagnezijum halida ili alkillitijum reagensa, u rastvaraču, kao stoje etar, prvenstveno tetrahidrofuran, na temperaturi između 0°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Reakcija b može biti izvedena u prisustvu pogodnog alkoksikarbonilmetilen-trifenilfosforana u rastvaraču, kao što je toluen, na temperaturi izmešu 20°C i tačke ključanja reakcione smeše, ili u prisustvu 1-etoksi-l-trimetilsloksietilen i Levvis-ovakiselina, kao stoje titanijum(IV) hlorid ili trimetilsili triftalat, u inertnom rastvaraču, kao što je dihlorometan, na temperaturi između -78°C i 20°C. Priprema derivata, kao što je 1-etoksi-l-trimetilsiloksietilen je opisna u Synth. Commun. 1987, 17, 1.
Reakcija c je u opštem slučaju izvedena u prisustvu gvanidinijum hidrohlorida i baze, kao što je kalijum terc-butoksid i inertnom rastvaraču, kao stoje dimetilformamid, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše, ili u prisustvu gvanidina u rastvaraču, kao što je alkohol koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, prvenstveno izopropanol, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Jedinjenja formule I, i kojima R6 predstavlja alkil grupu mogu biti dobijeni iz estra formule (IV) prema sledećoj opštoj šemi sinteze:
Opšte šema sunteze je kako sledi:
a) jedinjenjc formule IV je reagovalo, u prieusrtvu litijum diizopropilamida, sa R6-Hal, gde je Hal F, Cl, Br ili J. b) dobijeni proizvod je teagovalo sa takvim kao što je gvanidinijum hlorid i baza ili sa gvanidinom, na primer, u alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika.
Reakcija a može bitit izvedena u prisustvu litijum diizopropilamida u inertnom rastvaraču, kao što je etar (prvenstveno tetrahidrofuran) i u prisustvu pogodnog alkil halida R6-Hal, na temperaturi između -78°C i 0°C.
Reakcija bje u opštem slučaju izvedena u prisustvu gvanidinijum hidrohlorida i baze, kao što je kalijum terc-butoksid i inertnom rastvaraču, kao što je dimetilformamid, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše, ili u prisustvu gvanidina u rastvaraču, kao stoje alkohol koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, prvenstveno izopropanol, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Ako jedinjenja frmule (II) nisu komercijalno dostupna, ona mogu biti pripremljena, na primer, (način a), od odgovarajućeg anhidrida formule (V) u prisustvu odgovarajućeg amina R3NFL: i koseline, kao što je para-toluensulfonska kiselina, u rastvarači, kao što je toluen, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše; ili (način b) Gabrielovom metodom, počev od odgovarajućeg kalijum ftalimida formule (VI) u prisustvu pogodnog alkil halida formule RJHal i u rastvaraču, kao što je dimetilformamid, na temperaturi između 0°C i tačke ključanja reakcione smeše, primenom ili adaptacijom metode koja je opisana u Tetrahedron, 1998, 54, 14437.
Ukoliko jedinjenja formule (V) nisu komercijalno dostupna, oba mogu biti pripremljena, na primer, od odgovarajuće ftalnih kiselina u acetat anhidridu, na temperaturi između 20°C i tačke ključanja reakcione smeše.
Gde je potrebno, korišćene su zaštite za aminsku, alkoholnu ili kiselinsku funkcionalnu grupu i metode deprotekcijc, kao one koje su opisane u T: W: Greene, Protective Groups in Organic Svnthesis, J. Wiley-Interscience Publication (1991).
Jedinjenja formule I mogu po želji biti prevedena u adicione soli sa neorganskom ili organskom kiselinom reagovanjem takve kiseline u rastvaraču, na primer, u organskom rastvaraču kao što je alkohol, keton, etar ili hlorinisani rastvarač. Ove soli su takođe deo pronalaska. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli koje se mogu pomenuti obuhvataju sledeće soli: benzensulfonat, hidobromid, hidrohlorid, acetat, citrat, etansulfonat, fumarat, glukonat, jodat, maleat, isotionat, metansulfonat, metilenbis(B-oksinaftoat), nitrat, oksalat, pamoat, fosfat, salicilat, sukcinat, sulfat, tartarat, teofilinacetat i p-toluensulfonat.
Ako jedinjenja sadrže kiselinsku grupu, ona su sposobna za stvaranje soli sa bazama, na primer kao alkalne metalne soli, prvenstveno natrijum i kalijum soli, ili kao amonijumove soli, na primer kao soli sa amonijumom ili organskim aminima ili amino kiselinama. Ona tekođe mogu da budu prisutna kao zviterjoni.
Spisak skraćenica:
ACN acetonitril
CDI di-imidazol-l-il-metanon
DCI desorpciona hemijska jonizacija
DEA dietilamin
DIP 2-izopropoksi-propan
DME 1,2-dimetoksietan
DMF N,N-dimetilformamid
EA etil acetat
EI impakt elektrona
ES elektron sprej ionizacija
EtOH etanol
Hep n-heptan
HOAc sitćetna kiselina
HPLC tečna hromatografija pod visokim pritiskom KO/Bu kalijum terc-butilat
MeOH metanol
m.p. tačka topljenja
MTB 2-metoksi-2-metil-propan NMP l-metil-pirolidin-2-on
/'-PrOH izopropanol
RT vreme zadržavanja
TFA trifluorosirćetna kiselina
Sledeći primeri ilustruju pronalazak.
Primer 1:
a) N-[2-(2-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin 4.3 g gvanidinijum hloridaje dodano suspenziji 5.2 g kalijum terc-butoksida u 100 cm<3>dimmetilformamida. Reakciona smeša je mešana u inertnoj atmosferi na temeraturi u oblasti of 20°C tokom 1 sata, praćeno dodatkom rastvora 2 g etil (2-metil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata u 20 cm<3>dimetilformamida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati, praćeno dodatkom 100 cm<3>vode. Vrednost pH je podešena na 8 dodatkom 50 cm<J>1N hlorovodonične kiseline, i smeša koncentrovana pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) na temperaturi u oblasti 30°C. Ostatak posle isparavanja je stavljen u vodu i zatim filtriran. 0.35 g N-[(2-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina je dobijeno u obliku beličaste čvrste faze koja se topi na 214°C. Maseni spektar EI: m/e 246 (M<+>), m/e 159 (bazni pik), m/e 146. b) Etil (2-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat 11,5 g etoksikarbonilmetilentrifenilfosforana dodato je suspenziji od 4.5 g 3-hidroksi-2-metil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u 110 cm<3>toluena. Reakciona smeša je refluksovana sa mešanjem tokom 16 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblsati 20°C. Smeša je tada koncentrisana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturu u oblasti 40°C. Zaostalo ulje je sakupljeno u 50 cm<3>dietil etra. Stvoreni precipitat je filtriran i zatim ispran dva puta sa 10 cm<3>dietil etra. Filtrat je koncentrovan do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturu u oblasti 40°C da bi se dobilo ulje narandžaste boje, koje je prečišćeno hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 20 - 45 um), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (70/30, 65/35, 60/40 zapreminski). Frakcije koje su sadržale očekivani proizvod su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi u oblasti 30°C. 4.1 g etil (2-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetata je tako dobijeno u obliku žutog ulja. (Rf= 0.25, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)).
c) 3-Hidroksi-2-metil-2, 3-dihidroizoindol-l-on
3.4 g kalijum-borohidrida je polako dodano suspenziji od 10 g N-metilftalimida u 220
cm<3>metanola u inertnoj atmosferi. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati, praćeno dodavanjem u kapima 200 cm<3>destilovane vode. Rastvarač je tada delimično otparen ( oko 120 cm<1>) pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti od 35°C, i ostatak razblažen sa 400 cm<3>destilovane vode. Smeša je ekstrahovana sa 400 cm<3>etil acetata. Organska faza je sušena u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirana i tada koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi u oblasti od 30°C. Tako je dobijeno 4.5 g 3-hidroksi-2-metil-2, 3-dihidroizoindol-l-onau obliku belog praha koji se topi na 130°C.
Primer 2:
a) N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin
N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao
što je opisano u Primeru l, počev od 5 g kalijum terc-butoksida, 5.2 g gvanidinijum hlorida i 2.5 g etil (2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je tada mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 24 sata i tada filtrirana. Filtrat je stavljen u 150 cm<3>vode i 200 cm<3>etil acetata. Posle razdvajanja faza stajanjem, organska faza je izdvojena a vodena faza ekstahovana dva puta sa po 200 cm<3>etil acetata. Organski ekstrati su spojeni, sušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) na temperaturi u oblasti od 45°C. Ostatak posle isparavanja je stavljen u dietil etar i dobijeni precipitat filtriran i zatim ispran više puta sa dietil etrom. Čvrsta faza je sušena pod sniženim
pritiskom (10 kPa) na temperaturi u oblasti od 45°C. Tako je dobijeno 1.5 gN-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol- l-il)acetil]gvanidina u obliku bele čvrste faze koja se topi na 250°C. Maseni spektar EI: m/e 288 (M<+>), m/e 201 (bazni pik)
b) Etil (2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat Suspenziji od 1.6 g 60% natrijum hidrida u 60 cm<3>1,2-dimetoksietana u inertnoj
atmosferi dodano je u kapima 7.7 cm3 trietilfosfonoacetata, uz održavanje temperature ispod 10°C, i onda ohlađeno do 0°C, uz mešanje. Ostavljeno je da se reakciona smeša zagreje do temperature u oblasti od 20°C i onda mešana 45 min. Tada je dodano 5.3 g 3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona i smeša refluksovana tokom 3.5 sati a zatim ohlađena do temperature u oblasti 20°C. Reakciona smeša je tretirana sa 40 cm<3>destilovane vode i potom sa 100 cm<3>dietil etra. Posle razdvajanja faza taloženjem,
vodena faza je dva puta ekstrahovana sa 100 cm<3>dietletra. Organski ekstrakti su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti od 18°C, da bi se dobilo bledo žuto ulje, koje je prečišćeno hromatografski pod sniženim pritiskom (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 15-45 um), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (60/40 pa potom 50/50 zapreminskih). Frakcije koje su sadržale očekivani proizvod su kombinovane i koncentrisane pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi u oblasti 30°C. Tako je dobijeno 6.3 g etil (2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u obliku bledo žutog ulja. (Rf = 0.56, hromatografija u tankom sloju n silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)).
c) 3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on
3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-onje dobijen kao što je opisano u
Primeru 1, počev od 6.5 g N-izobutilftalimida u 60 cm metanola i 1.7 g kalijum borohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 20 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblati 0°C, praćeno dodavanjem ukapima 50 cm<3>destilovane vode. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C, i ostatak ekstrahovan tri puta sa 60 cm<3>cikloheksana. Organski ekstrakti su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani .do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 25°C da bi se dobilo bledo žuto ulje, koje je prečišćeno hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 40 -63 um), eluiranjem smešom cikloheksan/etil acetat (60/40 zapreminski). Frakcije koje su sadržale očekivani proizvod su spojene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 5.8 g 3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku bele čvrste faze koja se topi na 82°C.
d) N-izobutilftalimid
Rastvor 3.2 cm 3 izobutilamina u 3 cm 3 toluena je dodat suspenziji od 5.2 g ftalnog
anhidrida u 50 cm<J>toluena, uz mešanje. Reakciona smeša je zagrejana na temperaturu od oko 60°C tokom 1 sata, i zatim na temperaturu od oko 100°C tokom 2 sata. Dean-Stark-ov aparat je tada instaliran na reaktoru i reakciona smeša zagrevana na temperatursku oblast od 130°C tokom 2 sata, posle čega je ohlađena na temperaturu od oko 20°C. Reakciona smeša je koncentrisana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperatursku oblast od 40°C. Ostatak je stavljen u 50 cm<J>zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i ekstrahovan dva puta sa 75 cm dihlorometana. Organski ekstrati su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 6.5 g N-izobutilftalimida u obliku bele čvrste faze koja se topi na 92°C.
Primer 3:
a) (-)-N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
(-)-N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen
kao što je opisano u Primeru 1, počev od 2.6 g kalijum terc-butoksida, 2.6 g
gvanidinijum hlorida i 1.25 g etil (-)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il jacetata. Reakciona smeša je tada mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 40 sati i tada filtrirana. Filtrat je stavljen u 80 cm<3>vode i 120 cm<3>etil acetata. Posle razdvajanja faza stajanjem, organska faza je izdvojena a vodena faza ekstahovana dva puta sa po 120 cm<3>etil acetata. Organski ekstrati su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak posle isparavanja je stavljen u 30 cm<3>dietil etra i dobijeni precipitat filtriran i zatim ispran više puta sa 5 cm<3>dietil etra. Čvrsta faza je osušena pod sniženim pritiskom (10 kPa) na temperaturi u oblasti od 45°C. Tako je dobijeno 0.75 g (-)-N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina u obliku bele čvrste faze koja se topi na 264°C. (aD<20=->10.2°
±0.6 u metanolu na 0.5%). Maseni spektar EI: m/e 288 (M<+>), m/e 245, m/e 132.
b) Etil (-)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat i etil (+)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetat
Etil (-)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat i etil (+)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat su dobijeni razdvajanjem 3.0 g etil (2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata pomoći HPLC hromatografije na 10 um WHELK-01SS hiralnoj koloni, eluiranjem sukcesivno sa smešom heptan/izopropanol (90/10) po zapremini) i zatim smešom heptan/etanol (90/10 pa zatim 50/50 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale prvi enantiomer su sakupljene i koncentrovane pod sniženim pritiskom (1 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je osušen pod sniženim pritiskom (3 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C.Tako je dobijeno 1.3 g etil (-)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetata u obliku viskoznog ulja svetio oker boje (eto20 — - 16.2°+0.6 u DMSO na 0. 5%). Frakcije koje su sadržale drugi emantiomer su sakupljene i koncentrovane pod sniženim pritiskom (1 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je osušen pod sniženim pritiskom (3 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 1.0 g etil (+)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata u obliku viskoznog ulja svetio žute boje (aD<20=->- 15.T+0.7 u DMSO na 0.5%). Etil (2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat je opisan u Primeru 2.
Primer 4
(+)-N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin
(+)-N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin je dobijen kao što je opisano u Primeru 1, počev od 2.0 g kalijum terc-butoksida, 2.1 g gvanidinijum hlorida i 1.0 g etil (+)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je tada mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 40 sati i tada filtrirana. Filtrat je stavljen u 70 cm<3>vode i 100 cm<J>etil acetata. Posle razdvajanja faza stajanjem, organska faza je izdvojena a vodena faza ekstahovana dva puta sa po 100 cm3 etil acetata. Organski ekstrati su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak posle isparavanja je stavljen u 30 cm<J>dietil etar i dobijeni precipitat filtriran i zatim ispran tri puta sa 5 cm3 dietil etra. Čvrsta faza je osušena pod sniženim pritiskom (10 kPa) na temperaturi u oblasti od 45°C. Tako je dobijeno 0.56 g (+)-N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku narandžasto-žute čvrste faze koja se topi na 264°C.
(aD<20=>+13.9°<+>0.6 u metanolu na 0.5%). Etil(+)-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetaqt je opisan u Primeru 3. Maseni spektar DCI: m/e 289 (M<+>H<+>)
Primer 5 .
a) N-[2-(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
N-[2-(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao što
je opisano u Primeru 1, počev od 3.9 g kalijum terc-butoksida, 3.3 g gvanidinijum hlorida i 1.8 g etil (3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je tada mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 1 sata, što je praćeno dodatkom 50 cm 3 vode. Vodena faza ekstahovana tri * puta sa po 50 cm 3 etil acetata i tada koncentrisana do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) u temperaturskoj oblasti od 45°C. Ostatak je stavljen u vodu, usitnjen i filtriran. Čvrsta faza je stavljena u metanol, i rastvarač isparen do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) na temperaturi u oblasti od 45°C. Tako je dobijeno 0.6 g N-[2-(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil] gvanidina u obliku svetio žute pamučaste čvrste faze koja se topi na 229°C. Maseni spektar EI: m/e 274 (M<+>), m/e 187, m/e 86 (bazni pik)
b) Etil (3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat
Etil (3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što je opisano
u Primeru 2, počevši sa 0.8 g 60% natrijum hidrida u 20 cm<3>1,2-dimetoksietana, 4.0 cm3 trietilfosfonoacetata i 1.9 g 3-hidroksi-2-propil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od
silika gela (veličina čestica 15-40 um), eluiranjem sa smešom cikolheksan/atil acetat (50/50 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 30°C. Tako je dobijeno 1.9 g etil (3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetata u obliku žutog ulj. (Rf = 0.7, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (30/70 po zapremini))
c) 3-Hidroksi-2-propil-2, 3-dihidroizoindol-l-on
3-Hidroksi-2-propil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je je dobijen kao što je opisano u
Primeru 1, počev od 1.5 g N-propilftalimida u 25 cm<3>metanola i 0.48 g kalijum borohidrida.. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblasti 0°C pa je u kapima dodana destilovana voda. Metanol je tada delimično uparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi od oko 35°C i ostatak je ohlađen na 0°C. Dobijeni precipitat je filtriran i ispran hladnom vodom. Čvrsta faza je stavljena u dihloroetan i rastvarač otparen do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C. Tako je dobijeno 1.0 g 3-hidroksi-2-propil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku praha bež boje.
(Rf = 0.6, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (30/70 po zapremini)).
Primer 6
a) N-[2-(2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
N-[2-(2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao što je
opisano u Primeru 1, počev od 4.3 g kalijum terc-butoksida, 3.7 g gvanidinijum hlorida i 1.9 g etil (2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetata. Reakciona smeša je tada mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati, praćeno dodatkom 60 cm vode. Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa po 50 cm etil acetata. i tada koncentrisana do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) u temperaturskoj oblasti od 45°C. Ostatak je stavljen u vodu, usitnjen i filtriran. Čvrsta faza je stavljena u metanol i rastvarač je otparen do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) na temperaturi u oblasti od 45°C. Tako je dobijeno 0.56 g N-[2-(2-etil-3-okso-2, 3-
dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku beličaste čvrste faze koja se topi na 223°C.Maseni spektar EI: m/e 260 (M<+>), m/e 173, m/e 160, m/e 132.
b) Etil (2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat
Etil (2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što je opisano u
Primeru 2, počevši sa 0.6 g 60% natrijum hidrida u 20 cm<J>1,2-dimetoksietana, 3.2 cm<3>trietilfosfonoacetata i 1.8 g 3-hidroksi-2-etil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 15-40 (im), eluiranjem sa smešom cikolheksan/atil acetat (50/50 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 30°C. Tako je dobijeno 2.0 g etil (2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u obliku svetio žutog ulja. (Rf = 0.7, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (90/10 po zapremini))
c) 3-Hidroksi-2-etil-2, 3-dihidroizoindol-l-on
3-Hidroksi-2-etil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je je dobijen kao što je opisano u Primeru
1, počev od 4.0 g etilftalimida u 20 cm<3>metanola i 1.2 g kalijum borohidrida.. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblasti 0°C pa je u kapima dodana destilovana voda. Dobijeni precipitat je filtriran i ispran hladnom vodom. Metanol je tada delimično isparen iz filtrata pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C, i ostatak ohlađen do 0°C. Drugi precipitat tako dobijen je filtriran i zatim ispran hladnom vodom Dve frakcije čvrste faze su sušene pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C. Tako je dobijeno 1.9 g 3-hidroksi-2-etil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku ljuskastog belog praha. (Rf = 0.5, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (30/70 po zapremini))
Primer 7
N-[2-(2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
N-[2-(2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao stoje opisano u Primeru 1, počev od 1.5 g kalijum terc-butoksida, 1.3 g gvanidinijum hlorida i 0.7 g etil (2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetata. Reakciona smeša je tada mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati, praćeno dodatkom 30 cm vode. Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa po 50 cm<3>etil acetata. i tada koncentrisana do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) u temperaturskoj oblasti od 45°C. Ostatak je stavljen u vodu, usitnjen i filtriran. Čvrsta faza je stavljena u smešu dihlorometan/metanol (90/10 po zapremini) i profiltriran, a filtrat je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 15-40 um), eluiranjem sa smešom dihlorometan/metanol (90/10 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 0.05 g N-[2-(2-izpropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina u obliku bele čvrste faze. Maseni spektar EP. m/e 274 (M<+>), m/e 187, m/e 132. Infracrveni spektar (KBr): 3412; 1974; 1667; 1603; 1531; 1367 i 698
<->i
cm .
b) Etil (2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat Etil (2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što je
opisano u Primeru 2, počevši sa 0.63 g 60% natrijum hidrida u 20 cm<3>1,2-dimetoksietana, 3.1 cm<3>trietilfosfonoacetata i 2.0 g 3-hidroksi-2-izopropil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 15-40 m), eluiranjem sa
smešom cikolheksan/atil acetat (60/40 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proizvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 30°C. Tako je dobijeno 0.84 g etil (2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetata u obliku svetio žutog ulja. (Rf = 0.7, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: dihlorometan/metanol (90/10 po zapremini))
c) 3-Hidroksi-2-etil-2, 3-dihidroizoindol-l-on
3-Hidroksi-2-etil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je je dobijen kao što je opisano u Primeru
1, počev od 4.0 g izopropilftalimida u 20 cm<J>metanola i 1.1 g kalijum borohidrida.. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblasti 0°C, pa je u kapima dodana destilovana voda. Rastvarač je tada isparen do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C. Tako je dobijeno 6.1 g 3-hidroksi-2-etil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku belog voska. (Rf = 0.65, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (30/70 po zapremini))
Primer 8
a) N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
N-[2-(2-izopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen
kao što je opisano u Primeru 1, počev od 2.9 g kalijum terc-butoksida, 2.5 g gvanidinijum hlorida i 1.5 g etil (2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati, praćeno dodatkom 20 cm<3>vode Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa po 100
cm<3>etil acetata. Organski esktrakri su sakupljeni i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C. Ostatak je stavljen u vodu, usitnjen, filtriran i zatim sušen u eksikatoru. Tako je dobijeno 1.2 g N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidina u obliku beličastog praha koja se topi na 229°C.Maseni spektar DCI: m/e 287 (MH<+>)<+>.
b) Etil (2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat
Etil (2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što
je opisano u Primeru 2, počevši sa 0.61 g 60% natrijum hidrida u 20 cm<3>1,2-dimetoksietana, 3. cm<J>trietilfosfonoacetata i 1.55 g 3-hidroksi-2-izopropilmetil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 15-40 (im), eluiranjem sa smešom cikolheksan/atil acetat (70/30 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 30°C. Tako je dobijeno 1.45 g etil (2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetata u obliku bezbojnog ulja. (Rf = 0.52, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
c) 3-Hidroksi-2-ciklopropilmetil-2, 3-dihidroizoindol-l-on 3-Hidroksi-2-cklopropilmetil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je je dobijen kao što je
opisano u Primeru 1, počev od 4.3 g N-ciklopropilmetilftalimida u 40 cm<3>metanola i 1.2 g kalijum borohidrida.. Reakciona smeša je tada mešana na temperaturi u oblasti od 20°C tokom 20 sati i ohlađena na temperaturu u oblasti 0°C pa je u kapima dodana destilovana voda. Dobijeni precipitat je filtriran i dobijena čvrsta faza stavljena u dihlorometan i koncentrisana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 4.1 g 3-Hidroksi-2-cklopropilmetil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku belog praha (Rf = 0.38, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
d) N-ciklopropilmetilftalimid
N-ciklopropilmetilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa 4 g
ftalnog anhidrida, 2.3 cm<3>ciklopropilmetilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 40 cm toluena. Reakciona smeša je grejana u
temperaturskoj oblasti od 140°C tokom 2 sata. posle čega je ohlađena na temperatursku oblast od 20°C i mešana tokom 16 sati.. Reakciona smeša je koncentrisana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperatursku oblast od 40°C. Ostatak je stavljen u dihlorometan i ispran dva puta sa zasićenim rastvorom
natrijum bikarbonata. Organski faze su izdvojene stajanjem, osušene u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2
kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 4.3 g N-ciklopropilmetilftalimida u obliku pamučaste bele faze. (Rf = 0.46, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (40/60 po zapremini))
Primer 9.
a) N-[2-(2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
0.22 g natrij uma je dodano u 20 cm<J>apsolutnog etanola u inertnoj atmosferi. Pošto je
natrijum potpuno nestao, dodano je 0.94 g gvanidinijum hlorida. Reakciona smeša je mešana u inertnoj atmosferi na temperaturi u oblasti 20°C tokom 1 sata, praćeno dodatkom rastvora 2 g etil(2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata u 5 cm<J>apsolutnog etra. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 18 sati i onda koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u
oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u smešu od 10 cm 3 vode i 30 cm 3 dietil etra i zatim mešan na temperaturi u oblasti 0°C tokom 15 min. Dobijeni precipitat je filtriran,
ispran dva puta sa po 10 cm<3>ledeno hladne vode i tada sušen u desikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 1.2 g N-[2-(2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku belog praha koji se topi na 222 - 225°C. Infracrveni spektar (KBr): 3488; 3410; 3344; 1662, 1621; 1521; 1382 i 704 cm"'.
b) Etil (2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat Etil (2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetatje dobijen kao stoje
opisano u Primeru 2, počevši sa 3.2 g 60% natrijum hidrida u 200 cm<3>1,2-dimetoksietana,
16.4 cm trietil fosfonoacetata i 9.5 g 3-hidroksi-2-benzil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Smeša je refluksovana tokom 3 8 sati i zatim ohlađena na temperaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je tretirana sa 100 cm vode pa potom sa 100 cm etilacetata. Posle izdvajanja faza stajanjem, vodena faza je ekstrahovana dva puta sa 100 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 50 cm<3>slane vode, sušeni u prisustvu magnezijumsulfata i zatim koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 15-40 m), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (75/25 i zatim 67/33 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 8.7 g etil (2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetata u obliku viskoznog žutog ulja. (Rf = 0.35, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
c) 3-hidroksi-2-benzil-2, 3-dihidroizoindol-l-on
3-hidroksi-2-benzil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je dobijen kao stoje opisano u Primeru
1, počev od 10.2 g N-benzilftalimida u 100 cm<3>metanola i 2.6 g kalijumborohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 20 sati i tada ohlađena na temperaturu od oko 0°C, praćeno dodavanjem u kapima 50 cm<3>destilovane vode. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C, praćeno dodatkom daljih 50 cm3 destilovane vode. Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa 50 cm<3>etilacetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 9.5 g 3-hidroksi-2-benzil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku belog praha. (Rf = 0.20, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
d) N-benzilmetilftalimid
N-benzilmetilftalimid je dobijen kao stoje opisano u Primeru 2, počevši sa
10 g ftalnog anhidrida, 7.3 cm<J>benzilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 100 cm<3>toluena. Reakciona smeša je grejana u temperaturskoj oblasti od 140°C tokom 3 sata, posle čega je ohlađena na temperatursku oblast od 20°C. Reakciona smeša je je stavljena u 100 cm<3>zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i vodena faza ekstrahovana dva puta sa 100 cm<3>etil acetata. Organske faze su sakupljene, isprane sa 50 cm -i slane vode, osušene u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 20°C. Tako je dobijeno 10.3 g N-benzilmetil-ftalimida u obliku belog praha. (Rf = 0.44, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
Primer 10
a) N-[2-(6-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin
N-[2-(6-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin je dobijen kao što je opisano u Primeru 9., počev od 20 cm apsolutnog etanola, 0.37 g natrijuma, 1.56 g gvanidinijum hlorida i 3.53 g etil (6-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u 10 cm apsolutnog etanola. Reakciona smešaje mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati i onda koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u smešu od 15 cm<3>vode i 45 cm<3>dietil etra i zatim mešan na temperaturi u oblasti 0°C tokom 2 sata. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran dva puta sa po 10 cm<J>ledeno hladne vode i tada sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 2.5 g N-[2-(6-terc-butil-2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku braon praha koji se topi na 214 - 215°C. Maseni spektar DCI: m/e 345 (MH<+>)<+>.
b) Etil (5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat i etil(6-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat
Etil (5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat i etil(6-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l"H-izoindol-l-il)acetat su dobijeni kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa 2.9 g 60% natrijum hidrida u 200 cm<J>1,2-dimetoksietana, 15.2 cmJ trietilfosfonoacetata i 9.6 g smeše 5-terc-butil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona i 6-terc-butil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Smeša je refluksovana tokom 18 sati i zatim ohlađena na temperaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je tretirana sa 110 cm vode pa potom sa 100 cm<3>etilacetata. Posle izdvajanja faza stajanjem , vodena faza je ekstrahovana dva puta sa po 100 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 100 cm<J>slane vode, sušeni u prisustvu magnezijumsulfata, filtrirani i zatim koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je je razdvojen HPLC hromatografijom na 10 um WHELK-01SS hiralnoj koloni, eluiranjem sukciesivno smešama heptan/izopropanol (90/10, pa 50/50 po zapremini). Frakcije koje su sadržale prvi regioizomer su sakupljene i koncentrovane pod sniženim pritiskom (1 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je osušen pod sniženim pritiskom (3 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C I ako je dobijeno 1.81 g etil (5-terc-butil-2-izoputil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)-acetata u obliku viskoznog sivog ulja. (Rf = 0.43, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini)). Frakcije koje su sadržale drugi regioizomer su sakupljene koncentrovane pod sniženim pritiskom (1 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je osušen pod sniženim pritiskom (3 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C Tako je dobijeno 3.53 g etil (6-terc-butil-2-izoputil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetata u obliku viskoznog sivog ulja. (Rf = 0.38, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini)).
c) 5-terc-butil-3-hidroksi -2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 6-terc-butil—3-hidroksi-2-izobutil -2, 3-dihidroizoindol-l-on
5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-on i 6-terc-butil-2-izobutil-3- okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-on su dobijeni kao što je opisano u Primeru 1. počev od 10.4 g 4-terc-butil-N-izobutilftalimida u 60 cm<J>metanola i 2.3 g kalijumborohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 19 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblati 0°C, praćeno dodavanjem u kapima 50 cm destilovane vode. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C, praćeno dodatkom daljih 50 cm<3>destilovane vode. Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa 100 cm<3>etilacetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 50 cm slane vode, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 9.9 g smeše (5-5-terc-butil-3-hidroksi -2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona i 6-terc-butil—3-hidroksi-2-izobutil -2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku žute pene. (Rf = 0.20,6 i 0.30 neodređen, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat ( 75/25 po zapremini))
d) 4-terc-butil-N-izobutilftalimid
4- terc-butil-N-izobutilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa
10 g 4-terc-buril ftalnog anhidrida, 4.9 cm<3>izobutilamina u 100 cm<3>toluena. Reakciona smeša je grejana na temperaturi u oblasti 75°C tokom 10 min, praćeno dodatkom katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline i smeša je grejana u temperaturskoj oblasti od 140°C tokom 3 sata. Posle hlađenja na temperatursku oblast od 60°C, reakciona smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa). Ostatak je stavljen u smešu 50 cm 3 vode i 30 cm 3 zasi• ć'enog rastvora natrijum bikarbonata i vodena faza ekstrahovana dva puta sa 200 cm<3>dihlorometana. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 50 cm<3>slane vode, osušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 20°CTako je dobijeno 10.4 g 4-terc-butil-N-izobutil-ftalimida u obliku viskoznog žutog ulja. (Rf = 0.75, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
Primer 11
N-[2-(5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
N-[2-(5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-i l)acetil] gvanidin je dobijen kao stoje opisano u Primeru 9., počev od 10 cm<3>apsolutnog etanola, 0.19 g natrijuma, 0.80 g gvanidinijum hlorida i 1.81 g etil (5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u 10 cm<3>apsolutnog etra. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 18 sati i onda koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u smešu od 10 cm 3 vode i 30 cm 3 dietil etra i zatim mešan na temperaturi u oblasti 0°C tokom 1 sata. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran dva puta sa po 10 cm<3>ledeno hladne vode i tada sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 1.1 g N-[2-(5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidina u obliku belog praha koji se topi na 262 - 263°C. Etil (5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetat je opisan u Primeru 10. (Analiza: C]9H28N402; izračunato % C: 66.25, H: 8.19, N: 16.27, 0:9.29; nađeno% C: 66.13; H: 8.50; N: 16.12).
Primer 12
a) N-[2-(5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[(6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
-N-[(5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[(6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin su dobijeni kao stoje opisano u Primeru 9, počev od 20 cm apsolutnog etanola, 0.35 g natrijuma i I. 46 g gvanidinijum hlorida i 3.1 g etil (5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata i etil (6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetata u 15 cm<3>apsolutnog etanola. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 18 sati i onda koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u smešu od 15 cm<3>vode i 45 cm dietil etra i zatim mešan na temperaturi u oblasti 0°C tokom 4 sata. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran dva puta sa po 20 cm<3>ledeno hladne vode i tada sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 1.1 g N-[(5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina i N-[(6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina u obliku belog praha. (Analiza: Cl5 Hl9 C14 N4 02; izračunato % C: 55.81, H: 5.93, Cl: 10.98; N: 17.36, O: 9.91; nađeno% C: 55.67; H: 6.18; Cl: II. 32; N: 17.05). Maseni spektar DCI: m/e 323 (MH<+>)<+>.
b) Etil (5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat i etil (6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat
Etil (5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat i etil (6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat su dobijeni kao stoje opisano u Primeru 2, počevši sa 4 g 60% natrijum hidrida u 200 cm 1,2-dimetoksietana, 20.3 cm<3>trietil fosfo no acetata i 12 g 5-hloro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona i 6-hloro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Smešaje refluksovana tokom 18 sati i zatim ohlađena na temperaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je tretirana sa 200 cm<3>vode pa potom sa 100 cm<3>etilacetata. Posle izdvajanja faza stajanjem, vodena faza je ekstrahovana dva puta sa 100 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 100 cm<3>slane vode, sušeni u prisustvu magnezijumsulfata, filtrirani i zatim koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je prečišćen hromatografski pod - pritiskom argona (60 kPa)~na nosaču od silika gela (veličina čestica 32 - 63 pm), eluiranjem ssukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (90/10 pa zatim 80/20 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 3.1 g etil (5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1- il)acetata i etil(6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u obliku viskoznog žutog ulja (Rf = 0.34, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini)).
c) 5-hloro-3-hidroksi- 2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 6-hloro-3-hidroksi-2- izobutil- -2, 3-dihidro-lH-izoindol-1-on
5-hloro-3-hidroksi- 2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 6-hloro-3-hidroksi-2-izobutil- -2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-on su dobijeni kao što je opisano u Primeru 1, počev od 12 g 4-hloro-N-izobutilftalimida u 100 cm<3>metanola i 3 g kalijumborohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 20 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblati 0°C, praćeno dodavanjem u kapima 100 cm<3>destilovane vode. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim
pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa 150 cm<J>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 50 cm<3>slane vode, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 12 g 5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-ona i 6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-ona u obliku belog prah. (Rf = 0.15 hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
d) 4-hloro-N-izobutilftalimid
4-hloro-N-izobutilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa
10 g 4-hloroftalnog anhidrida, 5.4 cm<3>izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 100 cm<3>toluena. Reakciona smeša je grejana na temperaturi u oblasti 140°C tokom 16 sati i tada o hlađena na temperatursku oblast od 20°C. Reakciona smeša je stavljena u 100 cm3 zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i vodena faza ekstrahovana dva puta sa 100 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 50 cm<3>slane vode, osušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 20°C.Tako je dobijeno 12 g 4-hloro-N-izobutil-ftalimida u obliku belog praha . (Rf = 0.85, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
Primer 13
a) N-[2-(5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[(6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
N-[(5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[(6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin su dobijeni kao što je opisano u Primeru 9., počev od 30 cm apsolutnog etanola, 0.36 g natrijuma, 1.5 g gvanidinijum hlorida i 3.7 g etil (5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetata i etil (6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetata u 20 cm<3>apsolutnog etanola. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati i onda koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u smešu od 1 OOcm "1 vode i 200 cm T etil acetata. Organske faze su isprane sa 100 cm T vode i zatim sa 150 cm<3>zasićenog natrijum hlorida. Organska faza je sušena u pisustvu magnezijum sulfata i koncetrisana pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Dobijena je bela čvrsta faza koja je opet stavljena i mešana u smeši od 15 cm 3 vode i • 50 cm 3 dietil etra tokom 1.5 sata na tmperaturi od oko 20°C. Tako dobijena bela čvrsta faza je filtrirana , isprana dva puta sa po 50 cm<3>dietil etra i tada sušena u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C. Tako je dobijeno 0.92 g N-[(5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina i N-[(6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina u obliku belog praha. (Analiza: Cl5 Hl9 Br N4 02; izračunato % C: 49.06, H: 5.21, 21.76; N: 15.26, O: 8.71; nađeno% C: 48.87; H: 5.34; Cl: 14.72; N: 21.52). Maseni spektar EI: m/e 366 (M<+>)<+>, m/e 279, m/e 86 (bazni pik).
b) Etil (5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat i etil (6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat
Etil (5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat i etil (6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat su dobijeni kao stoje opisano u Primeru 2, počevši sa 5.0 g 60% natrijum hidrida u 250 cm<J>1,2-dimetoksietana, 24.8 cm3 trietil fosfonoacetata i 23.7 g 5-bromo-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona i 6-bromo-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Smeša je refluksovana tokom 4 sata i zatim ohlađena na temperaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je tretirana sa 300 cm<3>vode i potom ekstrahovana tri puta sa po 250 cm<3>dietil etra. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 300 cm<3>slane vode, sušeni u prisustvu magnezijumsulfata, filtrirani i zatim koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (80 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 32 - 63 um), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (95/5 po zapremini), cikloheksan/metanol (90/10) i cikloheksan/etil acetat (80/20). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 3.72 g etil (5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata i etil(6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u obliku bezbojnog ulja (Rf = 0.70, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)).
c) 5-bromo-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 6-bromo-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-1 -on
5-bromo-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 6-bromo-3-hidroksi-2-izobutil -2, 3-dihidroizoindol-l-on su dobijeni kao što je opisano u Primeru 1, počev od 23.6 g 4-bromo-N-izobutilftalimida u 200 cm<J>metanola i 4.5 g kalijumborohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblati 0°C, praćeno dodavanjem u kapima 175 cm destilovane vode. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa 200 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 23.7 g 5-bromo-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona i 6-bromo-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku belog praha. (Rf = 0.79 hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
d) 4-bromo-N-izobutilftalimid
4-bromo-N-izobutilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa
20 g 4-bromoftalnog anhidrida, 9.2 cm<J>izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 200 cm<3>toluena. Reakciona smeša je grejana na temperaturi u oblasti 140°C tokom 6 sati i tada ohlađena na temperaturu od oko 20°C. Reakciona smeša je koncetrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C, i ostatak stavljen u 350 cm etil acetata i 300 cm zasićenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je razdvojena stajanjem i ekstrahovana dva puta sa 350 cm etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 300 cm3 slane vode, osušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 23.6 g 4-bromo-N-izobutil-ftalimida u obliku belog praha. (Rf = 0.91, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
Primer 14
N-[2-(2-izobutil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin
N-[2-(2-izobutil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao što je opisano u Primeru 9., počev od 10 cm<3>apsolutnog etanola, 0.19 g natrijuma, 0.78 g gvanidinijum hlorida i 1.86 g etil (5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u 10 cm<3>apsolutnog etanola. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati i onda koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u smešu od 5 cm<3>vode i 15 cm<3>dietil etra i zatim koncentrovane do suvog pod istim uslovima. Ostatak je stavljen u 100 cm<3>etil acetata i organska faza isprana dva puta sa po 60 cm<3>vodenog rastvora 1 N natrijum hidroksida i zatim dva puta sa po 60 cm 4N rastvora hlorovodonične kiseline. Kiseli vodeni ekstrakti su sakupljeni, tretirani sa vodenim 30% rastvotom natrijum hidroksida do pIT 14, i zatim ekstrahovani tri puta sa po 50 cm etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 100 cm<3>zasićenog rastvora natrijum hlorida, sušeni u pisustvu magnezijum sulfata i koncetrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Tako dobijena žuta čvrsta faza je stavljena u 20 cm<3>dietil etra, mešana tokom 1 sata na temperaturi u oblasti od 20°C i zatim filtrirana. Čvrsta faza je isprana dva puta sa po 50 cm<3>dietil etra i tada sušena u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 35°C. Tako je dobijeno 0.34 g N-[(5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku belog praha, koji se topi na 224°C. (Analiza: Cl6 Hl9 F3 N4 02; izračunato % C: 53.93, H: 5.37,F: 15.99, N: 15.72,0: 8.98; nađeno % C: 53.95; H: 5.15; F: 15.00; N: 15.59)
Primer 15
a) N-[2-(2-izobutil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
N-[2-(2-izobutil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao stoje opisano u Primeru 9., počev od 10 cm<3>apsolutnog etanola, 0.13 g natrijuma, 0.52 g gvanidinijum hlorida i 1.25 g etil (6-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u 10 cm<3>apsolutnog etanola. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati i onda koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u smešu od 5 cm<J>vode i 15 cm<3>dietil etra i zatim koncentrovan do suvog pod istim uslovima. Ostatak je stavljen u 100 cm<3>etil acetata i organske faza isprana dva puta sa po 50 cm vodenog rastvora 1 N natrijum hidroksida i zatim sa 30 cm 4N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Kisela vodena faza je tretirana, tretirana vodenim 30% rastvorom natrijum hidroksida do pH 14, i zatim ekstrahovani tri puta sa po 50 cm etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa zasićenim rastvorom natrijum hlorida, sušeni u pisustvu magnezijum sulfata i koncetrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi od oko 40°C. Tako dobijena žuta čvrsta faza je stavljena u 20 cm dietil etra, mešana na temperaturi u oblasri od 20°C i zatim filtrirana. Čvrsta faza je sušena u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 0.099 g N-[(2-izobutil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku bledo žutog praha, koji se topi na 154°C. Maseni spektar EI: m/e 356 (M<+>), m/e 269, m/e 200, m/e 86 (bazni pik).
b) Etil (5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat i etil (6-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat
Etil (5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat i etil (6-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat su dobijeni kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa 1.32 g 60% natrijum hidrida u 120 cm<3>1,2-dimetoksietana, 6.57 cm trietil fosfonoacetata i 12.07 g 5-trufluorometil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona i 6-trifluorometil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Smeša je refluksovana tokom 24 sata i zatim ohlađena na temperaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je zatim tretirana sa 150 cm<3>vode i smeša potom ekstrahovana tri puta sa po 250 cm<3>dietil etra. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 150 cm<J>slane vode, sušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i zatim koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Smeša od 2.3 g ostatka je injektirana na kolonu prečnika 8 cm koja sadrži 1.2 kg Whelk OI,SS hiralnu stacionarnu fazu. Eluiranje je izvedeno mobilnom fazom sastavljenom od smeše dihlorometana, etanola i heptana u odnosu 14.5/0.5/85 v/v. Dva dodatna injektiranja od 2.7 i 3 7 su stavljene pod istim uslovima. Frakcije koje su sadržale prvi regioizomer su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 1.86 g etil (5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetata u obliku bele čvrste faze (Rf = 0.64, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)). Frakcije koje su sadržale drugi regioizomer su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C da bi se dobilo 2.72 g bele čvrste faze. Proizvod je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (80 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 32 - 63 um), eluiranjem smešom cikloheksan/etil acetat (90/10 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proizvod su sakupljene i zatim koncentrovane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 1.25 g etil (6-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetata u obliku bezbojog visloznog ulja. (Rf = 0.46, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
c) 5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-on i 6-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1-on
5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-on i 6-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-on su dobijeni kao što je opisano u
Primeru 1, počev od 14.9 g 4-trifluorometil-N-izobutilftalimida u 300 cm<3>metanola i 2.96 g kalijumborohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati i tada ohlađena na temperaturu od oko 0°C, praćeno dodavanjem u kapima 100 cm<3>destilovane vode. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa 200 cm 3 etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 300 cm<3>zasićenog rastvora natrijum hlorida, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 12.07 g 5-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-ona i 6-trifluorometil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-ona u obliku belog praha. (Rf = 0.64 hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
d) 4-trifluorometil-N-izobutilftalimid
4-trifluorometil-N-izobutilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši
sa 14.8 g 4-trifluorometilftalnog anhidrida, 7.2 cm izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 160 cm toluena. Reakciona smeša je grejana na temperaturi u oblasti 140°C tokom 5 sati i tada o hlađena na temperatursku oblast od 20°C. Reakciona smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C, i ostatak stavljen u 250 cm<3>etil acetata i 200 cm<3>zasićenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je razdvojena posle stajanja i zatim ekstrahovana dva puta sa 250 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani zasićenom slanom vodom, osušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 14.9 g 4-trifluorometil-N-izobutil-ftalimida u obliku žutog praha. (Rf = 0.59, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
4-trifluorometilftalni anhidrid može biti pripremljen adaptacijom ili primenom metode opisane u Cavalleri et al., J. Med. Chem., 13(1), 148-149, (1970).
Primer 16
a) N-[2-(2-izobutil-3-okso-5-izopropoksi-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil]-gvanidin
N-[2-(2-izobutil-3-okso-5-izopropoksi-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao stoje opisano u Primeru 9., počev od 20 cm<3>apsolutnog etanola, 0.086 g natrijuma, 0.36 g gvanidinijum hlorida i 0.42 g etil (5-izopropiloksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 18 sati i onda koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u 50 cm<J>etil acetata i organske faza isprana dva puta sa 30 cm<3>1N vodenog rastvora natrijum hidroksida i zatim dva puta sa 50 cm<J>1N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Kiseli vodeni ekstrakri su tretirani sa vodenim 30% rastvorom natrijum hidroksida do pH 14, i zatim ekstrahovani tri puta sa po 30 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 50 cm<3>zasićenog rastvora natrijum hlorida, sušeni u pisustvu magnezijum sulfata i koncetrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je izmrvljen u prisustvu dietil etra i zatim filtriran i sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C tokom dva sata. Tako je dobijeno 0.0175 g N-[(2-izobutil-5-izopropoksi-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku belog praha, koji se topi na 208°C.
'H NMR (300 MHz, d6-(CD3)2SO, 5 u ppm): 0.75 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 0.90 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 1.30 (mt: 6H); 2.01 (mt: IH): 2.40 (dd, J = 15 i 6.5 Hz: IH); 2.65 (dd, J = 15 i 6.5 Hz: IH); 3.00 (dd, J = 13.5 i 5.5 Hz: IH); 3.53 (dd, J = 13.5 i 10 Hz: 1H)4.68 (mt.lH); 4.96 široka t, J = 6.5 Hz:IH) od 6.40 do 7.10 (široki multiplet; 2H); 6.98 (dd, J = 8.5 i 2 Hz: IH); 7.09 (d, J = 2 Hz: IH): 7.54 (d, J = 8.5 Hz: IH); od 7.60 do 8.20
(široki multiplet: 2H)
b) Etil (5-izopropiloksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat
Etil (5-izopropiloksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen
kao stoje opisano u Primeru 2, počevši sa 0.149 g 60% natrijum hidrida u 20 cm<3>1,2-dimetoksietana, 1-23 cm<3>trietil fosfonoacetata i 1.08 g 5-izopropiloksi-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Smeša je refluksovana tokom 5 sati i zatim ohlađena na temperaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je tretirana sa 100
cm<J>vode pa potom je ekstrahovana tri puta sa po 100 cm<3>dietil etra. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 100 cm<3>zasićene slane vode, sušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i zatim kpncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (80 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 32 - 63 um), eluiranjem smešom cikloheksan/etil acetat (90/10) pa zatim smešom cikloheksan/etil acetat 80/20 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 0.42 g etil (5-izopropiloksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetata u obliku bezbojnog ulja, (Rf = 0.57, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)).
c) 5-izopropiloksi-3-hidroksi-2-izobutil-2,3-dihidroizoindol-l-on 5-izopropiloksi-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je dobijen kao što je
opisano u Primeru 1, počev od 1.16 g N-izobutil-4-izopropiloksitfalimida u 20 cm<3>metanola i 0.24 g kalijum borohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 17 sati i tada ohlađena na temperaturu od 0°C, praćeno dodavanjem u kapima 30 cm<3>destilovane vode. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C i dodano 50 cm<3>
vode. Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa po 75 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 100 cm zasićenog rastvora natrijum hlorida,
osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 1.08 g 5-izopropiloksi-3-hidroksi-2-izobtil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku viskoznog bezbojnog ulja. (Rf = 0.50, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
d) N-izobutil-4-izopropiloksiftalimid
Smeša od 1 g 4-hidroksi-N-izobutilfalimida, 0.85 sm<3>2-bromopropana i 1.38 g
kalijum karbonata u 5 cm<3>dimetilformamida je mešana na temperaturi u oblasti 60°C tokom 17 sati. Reaksiona smeša je zatim ohlađena na temperatursku oblast od 20°C. Reakciona smeša je zatim koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak stavljen u 70 cm<3>vode i zatim ekstrahovan tri puta sa 75 cm<3>etil acetata Organske faze su sakupljene, isprane "zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 1.16 g N-izobutil-4-izopropiloksiftalimida u obliku bele čvrste faze. (Rf ^ 0.50, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
e) 4-hidroksi-N-izobutilftalimid
4-hidroksi-N-izobutilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa
7.26 g 4-acetoksiftalnog anhidrida, 7.35 cm izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 75 cm<3>toluena. Reakciona smeša je grejana na temperaturi u oblasti 140°C tokom 4 sata i tada ohlađena na temperaturu od oko 40°C i koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi. Ostatak stavljen u 175 cm<3>etil acetata i 150 cm<J>zasićenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata. Vodena faza je razdvojena posle stajanja i zatim ekstrahovana dva puta sa 150 cm 3 etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 200 cm<3>zasićene slane vode, osušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani
do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je stavljen i mešan u 100 cm cikloheksana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 1.5 sata i potom filtriran. Čvrsta faza je sušena u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 20°c.Tako je dobijeno 4.0 g 4-hidroksi-N-izobutil-ftalimida u
obliku belog čvrstog ostatka. (Rf = 0.25, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
4-Acetoksiftalni anhidrid može biti pripremljen adaptacijom ili primenom metode opisane u J. Sah, J. Med. Chem., 42 (16), 3014-3017 i N. J. Hinde, J. Chem. Soc, Perkin Trans 2, 5, 1259-125, (1998).
Primer 17
a) N-[2-(7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
N-[2-(7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin je dobijen kao što je opisano u Primeru 1, počev od 1.29 g kalijum terc-butoksida, 1.32 g gvanidinijum hlorida i 0.67 g etil (7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 20 sati i onda filtrirana. Filtrat je stavljen u 40 cm vode i 60 cm etil acetata . Posle razdvajanja faza stajanjem, organske faza je odvojena, a vodena faza ekstrahovana dva puta sa po 60 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, sušeni u pisustvu natrijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) na temperaturi u oblasti 55°C. Ostatak posle isparavanja je stavljen u dietil etar i opet koncentrovan do suvog pod istim uslovima, a zatim savijen u vodu i ponovo koncentrisan pod istim uslovima. Ostatak je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (50 kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 32 - 63 um), eluiranjem smešom cikloheksan/metanol (90/10 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Ostatak je stavljen u izopropil etar, izmrvljen, filtriran i potom sušen. Tako je dobijeno 0.15 g N-[(7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina u obliku bledo žute faze koja se topi na 205°C. 'H NMR (300 MHz, d6-(CD3)2SO, 5 u ppm): 0.74 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 0.89 (d, J = 6.5 Hz: 3H); 2.06 (mt: IH); 2.38 (dd, J = 15 i 7.5 Hz: IH); 2.90 (dd, J = 15 i 4.5 Hz: IH); 3.04 (dd, J = 13.5 i 4.5 Hz: IH); 3.56 (dd, J = 13.5 i 10 Hz: IH) 5.23 (dd:J=7.5 i 4.5Hz: IH); od 6.20 do 7.00 (širok multiplet: 2H); od 7.35 do 7.60 (mt, 3H), od 7.50 do 8.20 (širok multiplet: 2H).
b) etil (7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat Etil(7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što
je opisano u Primeru 2, počev od 0.2g 60% natrijum hidrida u 15 cm<3>1,2-dimetoksietana, 1.1 cm3 trietil fosfonoacetata i 0.8 g 4-fluoro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3- dihidroizoindol-l-ona. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom pod pritiskom argona (50kPa) na koloni od silika gela (veličina čestica 40-63 um), uz eluiranje smešom ciklohkesan/etil acetat (80/20 po zapremini). Frakcije koje sadrže očekivani proizvod su kombinovane i koncentrovane do suva pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi od 20°C. Tako je dobijeno 0.44g etil (7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetata u vidu žutog ulja. (Rf= 0.59, hromatografija na tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)).
c) 4-fluoro-3-hidroksi-2-izobutil—2, 3-dihidroizoindol-l-on
4- fluoro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidrozoindol-l-on je dobijen kao što je opisano
u Primeru 1, polazeći od 3.9g 3-fluoro-N-izobutilftalimida u 20 cm<3>metanola i 0.95g kalijum borhidrida. Reakciona smeša je mešana 19 sati na temperaturi od 20°C, pa zatim ohlađena do 0°C i u kapima je dodata destolovana voda. Dobijeni talog je profiltriran, ispran hladnom vodom i osušen u desikatoru pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi od 20°C. Tako je dobijeno 3.5g 4-fluoro-3-hidroksi-2-izobutil— 2, 3-dihidroizoindol-l-ona u vidu lepljivog belog praha. (Rf=0.36, hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent: cikloheksan/etil acetat (60/40 po zapremini)).
d) 3-fluoro-N-izobutilftalimid
3-fluoro-N-izobutilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počev od 3.4 g
anhidrida 3-fluoroftalne kiseline, 2.0cm<3>izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 20 cm toluena. Reakciona smeša je zagrevana 3 sata na temperaturi od 140°C. Posle hlađenja do temperature od 20°C, reakciona smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom (2kPa). Ostatku je dodat dihlormetan i ispran je zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Posle razdvajanja slojeva organski sloj je odvojen, osušen iznad magnezijum sulfata, profiltriran i zatim koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi od 40°C. Ostatak je osušen u desikatoru pod snuženim pritiskom (2kPa) na temperaturi od 20°C.
Dobijeno je 4.0g 3-fluoro-N-izobutilftalimida kao beličasti prah. (Rf=0.73, hromatografijan na tankom sloju silika gela, eluent: dihlormetan).
Primer 18:
a) N-[2-(5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin 0.04 g natrijuma je dodato u 4 cm<3>apsolutnog etanola u inertnoj atmosferi. Nakon što je natrijum potpuno nestao, dodato je 0.16g gvanidinijum hlorida. Reakciona smeša je mešana 45 minuta u inertnoj atmosferi na temperaturi od 20°C, pa zatim profil tri rana. Filtrat je koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi od 40°C. Ostatak je rastvoren u 10cm<3>tetrahidrofurana, pa je dodat rastvor (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil hlorida rastvorenog u 5cm<J>tetrahidrofurana. Reakcioan smeša je mešana 16 sati na temperaturi od 20°C, pa zatim koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom (2kPa) na temperaturi od 40°C. Ostatku je dodato 50cm etil acetata, pa je zatim ispran sa 50cm 1N rastvora hlorovodonične kiseline. Vodeni ekstrakti su kombinovani i pH podešeno na 14, dodato 30% rastvora natrijum hidroksida i smeša je ekstrahovana 3 puta sa 50 cm<3>etil acetata. Organske faze su sakupljene, isprane sa 100 cm<3>zasićenog rastvora natrijum hlorida, osušene u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40° Ostatak je stavljen u etil acetat i tada ponovo koncentrovan do suvog pod istim uslovima. Ostatak je stavljen u 20 cm<3>dietil etra, izmrvljen i potom filtriran. Čvrsta faza je sušena u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblast 35°C. Tako je dobijeno 0.04 g N-[2-(5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)acetil]gvanidina u obliku beličastog praha koji setopi na 154°C. Maseni spektar DCI: m/e 357 (M+H)+. b) (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil hlorid 0.72 g oksalil hlorida je dodano u kapima rastvoru 0.36 g (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)sirćetne kiseline u 10 cm<3>dihlorometana u inertnoj atmoferi. Reakciona smeša je mešana u inertnoj atmosferi na temperaturi u oblasti 20°C tokom 3 sata i tada koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom(2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Tako je dobijen sirovi (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil hlorid u obliku viskoznog sivog ulja koji je gore direktno korišćen. c) (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il) sirćetna kiselina 0.09 g natrijuma je dodano u 5 cm<3>apsolutnog etanola u inertnoj atmosferi. Postoje
natrijum potpuno nestao, dodano je 0.04 g gvanidinijum hlorida. Reakciona smeša je mešana u inertnoj atmosferi na temperaturi u oblasti 20°C tokom 1.5 sata, praćeno dodatkom rastvora etil (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetata u 10 cm<3>apsolutnog etanola. Reakciona smeša je mešana u inertnoj atmosferi na temperaturi u oblasti 20C tokom 18 sati i tada koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen smešu od 5 cm<3>vode i 15cm<3>dietil etra, i zatim mešan na temperaturi u oblasti 20°C tokom 1 sata. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak jestavljen u smešu dihlorometana i etil acetat i zatim filtriran. Filtrat je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (80 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 32 - 63 um), eluiranjem smešom dihlorometan/metanol (95/5 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proizvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je stvljen u dietil etar, izmrvljen i potom filtriran. Čvrsta faza je sušena u eksikatoru pod sniženim pritiskom(2 kPa) na temperaturi u oblasti 35°C i ponovo rastvorena u 70 cm etil acetata i tretirana sa 50 cm<3>1N vodenog rastvora natrijum hidroksida. Posla razdvajanja faza stajanjem, organska faza je isprana sa 50 cm<3>1N rastvora natrijum hidroksida. Vodeni ekstrakti su sakupljeni i tretirani sa 5N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline do pH 1. Posle ekstrakcije tri puta sa po 50 cm<3>etil acetata, organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 100 cm<3>zasićenog slanog rastvora, sušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i zatim koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na
temperaturi u oblasti 40°C. Tako je dobijeno 0.36 g (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)sirćetne kiseline u obliku žute čvrste faze. (Rf=0.33, hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent: dihlorometan/metanol (90/10 po zapremini)).
d) Etil (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat Etil (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao
što je opisano u Primeru 2, počevši sa 0.75 g 60% natrijum hidrida u 45 cm<3>1,2-dimetoksietana, 3.71 cm 3 trietil fosfonoacetata i 3.42 g 5,6-dihloro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Smeša je refluksovana tokom 5.5 sati i zatim ohlađena na temperaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je tretirana sa 75 cm<3>vode i potom sa 100 cm<3>dietil etra. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 100 cm<3>zasićene slane vode, sušeni u prisustvu magnezijumsulfata, filtrirani i zatim koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (80 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 32 - 63 um), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (90/10 pa zatim 80/20 po zapremini). Frakcije koje su
sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 0.93 g etil (5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u obliku belog čvrstog ostatka (Rf = 0.74, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)).
e) 5,6-dihloro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on 5,6-dihloro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je dobijen kao što je
opisano u Primeru 1, počev od 3.78 g 4,5-dihloro-N-izobutilftalimida u 75 cm<3>metanola i 0.75 g kalijum borohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati i tada ohlađena na temperaturu od 0°C, praćeno dodavanjem destilovane vode u kapima. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C, pa je zatim dodano 100 cm<3>etil acetata Posle razdvajanja faza stajanjem, vodena faza je ekstrahovana dva puta sa 75 cm 3 etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 150 cm<3>zasićenog rastvora natrijum hlorida, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti
od 40°C. Tako je dobijeno 3.42 g 5,6-dihloro-3-hidroksi-2-izobtil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku beličastog čvrstog ostatka. (Rf = 0.69, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
f) 4,5-dihloro-N-izobutilftalimid
4,5-dihloro-N-izobutilftalimid može biti dobijen kao stoje opisano u Primeru 2,
počevši sa 10 g 4,5-dihloroftalnog anhidrida, 4.6 cm<3>izobutilamina u 100 cm<3>toluena. Reakciona smeša je grejana na temperaturi u oblasti 140°C tokom 10 min, uz dodatak katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u kapima, pa je zatim smeša mešana na temperaturi od 140°C tokom 4 sata. Posle hlađenja na temperaturu od 40°C, reakciona smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa). Ostatak stavljen u 250 cm<J>zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i ekstrahovana tri puta sa 200 cm etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani sa 200 cm zasićene slane vode, osušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi od 20°C. Tako je dobijeno 2.8 g 4,5-dihkoro-N-izobutil-ftalimida u obliku čvrste faze bež boje. (Rf = 0.80, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (75/25 po zapremini))
Primer 19
a) N-[2-(4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
N-[2-(4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin je dobijen kao što je opisano u Primeru 1, počev od .2.68 g kalijum terc-butoksida, 2.74 g gvanidinijum hlorida i 1.49 g etil (4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 20 sati i onda filtrirana. Filtrat je stavljen u 80 cm<3>vode i 120 cm<3>etil acetata . Posle razdvajanja faza stajanjem , organske faza je odvojena, a vodena faza ekstrahovana dva puta sa 120 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, sušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (0.6 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak posle isparavanja je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (50 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 15-40 um), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/metanol (95/5 pa zatim 90/10 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je stavljen u dietil etar, izmrvljen i sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi od 20°C. Tako je dobijeno 0.16 g N-[(4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku bledo žute čvrste faze koja se topi na 212°C. Maseni spektar DCI: m/e 325 (M<+>H)<+>, m/e 263 (bazni pik).
b) Etil (4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat Etil (4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat je dobijen
kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa 0.6 g 60% natrijum hidrida u 35 cm<3>1,2-dimetoksietana, 3.1 cm<3>trietil fosfonoacetata i 2.5 g 4,7-difluoro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (60 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 40 - 63 pm), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (80/20 pa zatim 70/30 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 20°C. Tako je dobijeno 1.49 g nečistog etil (4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetata u obliku tamno žutog ulja, koje je direktno korišćeno u sledećem koraku (Rf = 0.27, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (70/30 po zapremini)).
c) 4,7-difluoro-3-hidroksi-2-izobutil-2,3-dihidroizoindol-l-on 4,7-difluoro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on je dobijen kao što je
opisano u Primeru 1, počev od 6.41 g 3,6-dinuoro-N-izobutilftalimida u 70 cm<3>
metanola i 1.44 g kalijum borohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 3 sata i tada ohlađena na temperaturu od 0°C, praćeno dodavanjem 45 cm<3>destilovane vode u kapima. Metanol je tada delimično otparen pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 30°C, pa je zatim dodano 80 cm<3>dihlorometana. Posle razdvajanja faza stajanem, vodena faza je ekstrahovana dva puta sa 80 cm<3>dihlorometana. Organski ekstrakti su sakupljeni, osušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i tada koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 30°C.Ostatak je sušen u eksikatoru pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi od 20°C. Tako je dobijeno 5.68 g 4,7-difluoro-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizpindol-l-ona u obliku žute čvrste faze koja se topi na 129.5°C. (Rf = 0.48, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
d) 3,6-difluoro-N-izobutilftalimid
3,6-difluoro-N-izobutilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa
5.0 g 3,6-difluoroftalnog anhidrida, 2.7 cm izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 50 cm<3>toluena. Reakciona smeša je refluksovana tokom 3 sata. Posle hlađenja na temperaturu od 20°C, reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa). Ostatak je stavljen u 50 cm<3>zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i ispran tri puta sa 80 cm dihlotometana. Organski ekstrakti su sakupljeni, osušeni u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrisani do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 6.41 g 3,6-difluoro-N-izobutil-ftalimida u obliku bledo žute čvrste faze. (Rf = 0.74, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
Primer 20
a) N-[2-(2-izobutil-4-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)acetil]-gvanidin
N-[2-(2-izobutil-4-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin je
dobijen kao stoje opisano u Primeru 1, počev od .0.68 g kalijum terc-butoksida, 0.58 g gvanidinijum hlorida i 0.36 g etil (4-metil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetata. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 20 sati, a zatim dodano 20 cm vode. Vodena faza ekstrahovana tri puta sa po 100 cm etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni i koncentrisani do suvog pod sniženim
pritiskom (0.5 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u dihlorometan i opet koncentrovan do suvog pod istim uslovima. Ostatak je stavljen u vodu, izmrvljen i filtriran, pa zatim stavljen u dihlorometan, izmrvljen i filtriran. Čvrsta faza je tada sušena u eksikatoru. Tako je dobijeno 0.21 g N-[2-(2-izobutil-4-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku belog praha koji se topi na 270-272°C (raspadanje). 'HNMR (300 MHz, d6-(CD3)2SO, 5 u ppm): 0.76 (d, J = 7 Hz: 3H); 0.91 (d, J = 7 Hz: 3H); 2.03 (mt: IH); 2.42 (dd, J = 15.5 i 6.5 Hz: IH); 2.60 (dd, J = 15.5 i 6.5 Hz: IH); 2.62 (s: 3H); 3.00 (dd, J = 14 i 5.5 Hz: IH); 3.56 (dd, J = 14 i 10 Hz: IH); 4.98 (t, J = 6.5 Hz: IH); od 6.40 do 7.10 (širok multiplet: 2H); od 7.21 (široki d, J = 7.5 Hz: 1H); 7.36 (široki d, J = 7.5 Hz: 1H); 7.42 (t, J = 7.5 hZ: 1H); od 7.50 do 8.30 (širok multiplet: 2H).
b) Etil (4-metil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat Etil (4-metil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što
je opisano u Primeru 2, počevši sa 0.23 g 60% natrijum hidrida u 15 cm 1,2-dimetoksietana, 1.1 cm<3>trietil fosfonoacetata i 0.63 g 7-metil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski pod pritiskom
argona (50 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 15-40 m), eluiranjem smešom cikloheksan/etil acetat (70/30 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proiuzvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 0.36 g etil (4-metil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetata u obliku bezbojnog ulja.
c) 4-Metil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 7-metiI-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-1 -on
4-Metil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 7-metil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-on su dobijeni kao što je opisano u Primeru 1, počev od 5.4 g N-izobutil-3-metilftalimida u 20 cm<3>metanola i 1.4 g kalijumborohihidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 65 sati i tada ohlađena na temperaturu u oblati 0°C, praćeno dodavanjem u kapima 10 cm<3>destilovane vode. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C i ostatak stavljan sukcesivno u dietil etar pa u dihlorometan. Precipitat je filtriran i filtrat koncentrovan do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (50 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 15-40 um), eluiranjem smešom cikloheksan/etil acetat (70/30 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale svaki od očekivanih proizvoda su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Frakcije koje su sadržavale smešu dva očekivana proizvoda su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Ostatak je ponovo prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (50 kPa) na nosaču od silika gela (veličina čestica 15-40 um), eluiranjem smešom cikloheksan/etil acetat (80/20 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale svaki od očekivanih proizvoda su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Dobijeno je 0.74 g 7:metil-3-hiđroksi-2-izobutil -2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku belog praha (Rf = 0.54, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini))
i 0.89 g 4-metil-3-hidroksi-2-izobutil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u obliku pamučaste bele čvrste faze (Rf = 0.40, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)).
d) N-izobutil-3-metilftalimid
N-izobutil-3-metilftalimid je dobijen kao što je opisano u Primeru 2, počevši sa 5.0 g
3-metilftalnog anhidrida, 3.0 cm<3>izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 50 cm<3>toluena. Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 140°C tokom 2.5 sata i tada mešana na tempeaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi uoblasti 40°C. Ostatak je stavljen u dihlorometan i ispran dva puta sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organske faze su razdvojene posle stajanja, osušene u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 6.0 g N-izobutil-3-metilftalimida u obliku ulja boje karamela. (Rf = 0.76, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: dihlorometan).
Primer 21
a) N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -iljacetil} -gvanidin
Suspenzija 1.24 g gvanidinijum hidrohlorida i 1.21 g KOtBu u 30 ml anhidrovanog DMU je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Zatim, dodan je rastvor 0.8 g etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-sirćetne kiseline u 5 ml anhidrovanog DMF i smeša mešana tokom 17 sati na sobnoj temperaturi. Smeša je tada sipana u 100 ml vode i vrednost pH podešena na 8 pomoću vodenog rastvora HC1. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta koristeći po 100 ml EA. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu. Hromatografija na silika gelu korišćenjcm RA/MeOH 3:1 dala je 0.56 g amorfne čvrste faze (Rf (EA/MeOH 3:1) = 0.45, MS (ES+) : 383 (M+l)<+>)
b) Etil estar [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline
0.84 g NaH je suspendovano korišćenjem 60 ml anhidrovanog DME i 4.5 ml etil estra (dietoksi-fosforil)-sirćetne kiseline dodanih na temperaturi između 10°C i 25°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta pa je zatim dodan rastvor 4.2 g 3-hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona u 20"ml
anhidrovanog DME. Reakciona smeša je refluksovana tokom 1 sata, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Tada je dodano 100 ml EA i smeša isprana dva puta sa 200 ml poluzasićenog vodenog rastvora NaHC03. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu. Hromatografija je izvedena na Merck Lichrospher RP18, 10 (im, 50x250 mm. Uslovi su sledeći:
Protok 150 ml/min
Eluent A: voda + 2% TFA
Eluent B: acetonitril
Minut 00: 90% A, 10% B
Minut 04: 90% A, 10% B
Minut 24: 25% A, 75% B
Minut 25: 5% A, 95% B
Minut 30: 5% A, 95% B
Minut 31: 90% A, 10% B
Minut 35: 90% A, 10% B
Prinos je bio 3.3 g smeše regioizomera etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline i etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline. Hromatografija na silika gelu korišćenjem DIP je dala prinos od
0.8 g etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline kao bezbojnog ulja (Rf (DIP) = 0.37, MS (ES+) : 370 (M+l)<+>)
i 0.63 g etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline kao bezbojnog ulja (Rf (DIP) = 0.30, MS (ES+): 370 (M+l)<+>)
c) 3-Hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidroizoindol-l-on
5.5 g 2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-izoindol-l,3-diona je rastvoreno pomoću 150 ml MeOH (anhidrovanog) i 1.0 g KBH4dodanih na sobnoj temperaturi. Smeša je ostavljena na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, ohlađena do 0°C i sipana u 100 ml vode na 0°C. Metanol je uklonjen u vakumu. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa po 100 ml CH2CI2. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu da bi se dobio prinos od 4.2 g viskoznog ulja (Rf(DIP) = 0.37, MS (DCI) : 300 (M+1)+)
d) 2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-izoindol-l,3-dion 5.0 g 5-trifluorometil-izobenzofurana-l,3-diona je rastvoreno u 50 ml toluena
(anhidrovanog) i dodano 4.6 g 2, 2, 2-trifluoro-etilamina. Smeša je ostavljena na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Tada je dodano 50 mg toluen-4-sulfonske kiseline i smeša refluksovana 5 sati. Dodano je 200 ml EA i smeša isprana dva puta sa 50 ml 10% vodenog rastvora Na2C03. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu da bi se dobio prinos od 5.5 g viskoznog ulja (Rf(DIP) = 0.57, MS (DCI) :298 (M+1)+)
e) 5-trifluorometil-izobenzofuran-l,3-dion
25.0 g 4-trifluorometil-ftalne kiseline je rastvoreno u 50 ml HOAc i dodano 15.1 ml
sirćetnog anhidrida. Smeša je refluksovana 6 sati. Rastvarač je uklonjen u vakumu. Ostatak je tretiran tri puta sa po 50 ml toluena, praćeno svaki put uklanjanjem rastvarača u vakumu. Prinos 23.1 g bezbojnog ulja. (Rf(CH2Cl?) = 0.60).
Primer 22
N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]acetil}-gvanidin
N-{2-[3-okso-2-(2, 2. 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]acetil}-gvanidin je dobijen kao što je opisano u Primeru 21. Na taj način dobijeen je amorfni beli prah, Rf - 0.10 ( hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES<+>: m/e 315.
Primer 23
N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin i N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin
N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin i N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin su dobijeni u obliku smeše dva regiouzomera kao što je opisano u Primeru 21. Tako je dobijen amorfni beli prah. Rf = 0.20 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES<+>: m/e 349.
Primer 24
N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin i N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin su dobijeni u obliku smeše dva regiouzomera kao što je opisano u Primeru 8 Rf = 0.09 ( hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES<+>: m/e 321.
Primer 25
N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil]gvanidin i N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin i N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin su dobijeni u obliku smeše dva regiouzomera kao što je opisano u Primeru 8, Rf = 0.11 ( hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES<+>: m/e 355.
Primer 26
a) N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]-gvanidin i N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin i N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin su dobijeni u obliku smeše dva regiozomera kao što je opisano u Primeru 1, polazeći od 4-hloro-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalimida, Rf = 0.12 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES<+>: m/e 363..
b) 4-hloro-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalimid
Smeša 5.0 g 4-hloro-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalaminskc kiseline i 30 mg para-toluensulfonske kiseline u 100 cm<3>toluena je refluksovano uz mešanje tokom 7 sati. Reakciona smeša je tada koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom Tako je dobijeno 4.2 g 4-hloro-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalimida, Rf = 0.5 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent: diizopropil etar). Maseni spektar: DCI: m/e 278.
c) 4-hloro-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalaminska kiselina 3.6 g l,l,l-trifluoro-3-jodopropanaje dodano u kapima smeši od 7.5 g 4-hloroftalimida i 4.6 g kalijum karbonata u 40 cm<3>dimetilformamida na temperaturi od 110°C uz mešanje. Posle mešanja tokom 11 sati na temperaturi od 120°C, reakciona smeša je ohlađena na temperaturu od 20°C i zatim sipana u 200 cm vode. Smeša je zakišeljena razblaženim rastvorom hlorovodonične kiseline do pH oko 8, i tada ekstrahovana 3 puta sa 100 cm<3>etil acetata. Organska faza je sušena u prisustvu magnezijum sulfata i zatim koncentrovana do suvog. Tako je dobijeno 5.0 g 4-hloro-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalaminske kiseline, Rf = 0.12 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat).
d) 4-Hloroftalimid
Rastvor 10.0 g 4-hloroftalnog anhidrida u 24.6 g formamida je zagrevano na
tempraturi u oblasti 120°C uz mešanje tokom 3 sata i tada ohlađeno na temperaturu od 20 °C i sipano u 100 cm<J>vode. Posle mešanja tokom 30 minuta, smeša je filtrirana i precipitat sušen u vakuumu na temperaturi od 60°C. Tako je dobijeno 10.4 g 4-hloroftalimida u obliku čvrste faze koja se topi na 171°C. Rf = 0.07 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent: dihlorometan).
Primer 27
a) N-[2-(3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[2-(3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin
N-[2-(3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[2-(3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin su dobijeni u obliku smeše dva regioizomera kao što je opisano u Primeru 1, polazeći od 4-trifluorometil-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalimida, Rf = 0.12 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES<+>: m/e 397 b) 4-Trifluorometil-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalimid je dobijen na sličan način kao 4-hloro-N-(3, 3, 3-trifluoropropil)ftalimid opisan u Primeru 26, polazeći od 4-trifluorometilftalnog anhidrida, Rf = 0.12 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat)
4-trifluorometilftalni anhidrid može biti dobijen adaptacijom ili primenom metode opisane u Cavalleri et al., J. Med. Chem., 13(1), 148-149, (1970).
Primer 28
a) N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]-gvanidin i N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-1H-izoindol-1 -il)acetil]gvanidin
N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin i N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidin su dobijeni u obliku smeše dva regioizomera kao što je opisano u Primeru 8, Rf = 0.11 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES~: m/e 377.
Primer 29
N-[2-(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]gvanidin i N-[2-(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin
N-[2-(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutiI)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin i N-[2-(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin su dobijeni u obliku smeše dva regioizomera kao što je opisano u Primeru 27, polazeći od 4-trifluorometil-N-(4, 4, 4-trifluorobutiljftalimida, Rf = 0.12 (hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent etil acetat/metanol (5:1 po zapremini)). Maseni spektar: ES<1>: m/e 411
Primer 30
a) N-[2-(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)propionil]gvanidin
3.75 g (39.2 mmola ) gvanidinijum hlorida je rastvoreno u 20 cm<3>dimetilformamida
pa je zatim dodano 3.96 g (35.3 mmola) kalijum terc-butoksida. Smeša je mešana 45 minuta na temperaturi od oko 20°C, što je praćeno dodavanjem u kapima rastvora 1.08 g (3.92 mmola) etil 2-metil-3-(2-propil-karbamoilfenil)akrilata u 15 cm<3>dimetilformamida. Posle mešanja na temperaturi od oko 20°C tokom 16 sati, rastvarač je otparen i ostatak rastvoren u 2N vodenom rastvoru hlorovodonične kiseline. Posle ekstrakcije sa dihlorometanom, vodena faza je tretirana kalijum hidroksidom do pH vrednosti 12 i tako dobijeni precipitat filtriran<*>.Ovaj precipitat je stavljen u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline, filtriran i tada sušen zamrzavanjem; oko 400 mg jednog od dva dobijena diastereoizomera (diastereoizomer A) je tako dobijen u obliku obogaćenom hidrohloridom u odnosu od oko 6:1 (MS(ES): M+H: 289.1).
<*>Prvi dobijeni filtrat je podvrgnut duploj ekstrakciji sa dihlorometanom. Sakupljeni organski ekstrakti su sušeni u prisustvu natrijum sulfata i potom koncentrovani. Ostatak je stavljen u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline, filtriran i tada sušen zamrzavanjem. 77 mg drugog diastereoizomera (diastereoizomer B) je tako izolovan u obliku obogaćenom hidrohloridom u odnosu od oko 10:1 (MS(ES): M+H: 289.1).
Diastereoizomer A je razdvojen u dva enantiomera HLPC hromatografijom na hiralnoj nosaču (Chiralpak AD 250 x 4.6), eluiranjem sa smešom acetonitril/izopropanol/n-heptan (50/3/4 po zapremini) koja je sadržala 0.3% dietilamina ; brzina toka: 1 ml/min. Tako su dobijeni enantiomer Al: 3.106 min, i enantiomer A2: 3.522 min.
Oba enantiomera su pretvoreni u odgovarajuće fluoroacetate rastvaranjem slobodne baze u razblaženom vodenom rastvoru trifluorosirćetne kiseline, što je praćeno postupkom sušenja zamrzavanjem; enantiomer Al u obliku trifluoroacetata (an<20>= - 73° u metanolu 0.1%), enantiomer A2 u obliku trifluoroacetata (ao<20>- +56° u metanolu0.1%).
b) Etil 2-metil-3-(2-propil-karbamoilfenil)akrilat
Rastvor 0.69 cm<3>(5.0 mmola) trietilamina i 1.64 g (5.0 mmola) 0-[(cijano-(etoksikarbonil)metilen)amino]-l,l,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborata ("TOTU") u 6 cm<3>dimetilformamida je dodano na 0°C u rastvor 1.17 g (5.0 mmola) 2-(2-etoksikarbonilpropen)-l-il)benzoeve kiseline u 10 cm3 dimetilformamida. Posle mešanja tokom 30 minuta na 0°C i potom 30 minuta na temperaturi u oblasti 20°C, ovaj rastvor je dodan u kapima u drugi rastvor koji se sastojao od 296 mg (5.0 mmola) n-propilamina i 0.69 cm<3>(5.0 mmola) trietilamina u 10 cm<3>dimetilformamida, pa je smeša mešana još 6 sati na temperaturi u oblasti 20°C. Pošto je ostavljeno da rastvor stoji preko noćo, rastvarač je uklonjen pod vakumom i ostatak rastvoren u etil acetatu. Posle dvostrukog ispiranja rastvorom natrijum bikarbonata i potom jedanput sa rastvorom natrijum hlorida, organska faza je sušena u prisustvu natrijum sulfata i potom koncentrovana. Tako je dobijeno 1.10 g etil 2-metil-3-(2-propil-karbamoilfenil)akrilata u obliku žućkastog ulja, koje može da reaguje u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
c) 2-(2-Etoksikarbonilpropen)-1 -il)benzoeva kiselina
Smeša 5.0 g (33.3 mmola) 2-formilbenzoeve kiseline i 14.5 g (40.0 mmola) etil 2-(trifenilfosfaniliden)propionata u 100 cm<3>dimetilformamida je mešano na temperaturi u oblasti 20°C tokom 1 sata. Posle uklanjanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i potom ekstrahovan dva puta rastvorom natrijum bikarbonata. Vodene faze su sakupljene, isprane dihlorometanom i tada zakišeljene 6N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline do pH između 1 i 2. Posle dvostrukog ekstrahovanja dihlorometanom, organske faze su sakupljene, osušene u prisustvu magnezijum sulfata i zatim koncentrovane. Tako je dobijena 2-(2-etoksikarbonilpropen)-l-il)benzoeva kiselina u obliku žutog ulja, koje je diraktno korišćeno u daljem postupku bez daljeg prečišćavanja.
Primer 31:
a) N-[2-(2-butil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)propionil]gvanidin
N-[2-(2-butil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)propionil]gvanidin je dobijen kao
što je opisano u Primeru 30, počev od 3.63 g (38.0 mmola) gvanidinijum hlorida u 20 cm<3>dimetilformamida i 3.84 g (34.2 mmola) kalijum terc-butoksida. Smeša je mešana 45 minuta na temperaturi u oblasti 20°C, pa je zatim dodan u kapima rastvor 1.10 g (3.80 mmola) etil 3-(2-butil-karbamoilfenil)-2-metakrilata u 15 cm<3>dimetilformamida, i smeša je mešana tokom 3 sata na temperaturi u oblasti 20°C. Posle stajanja preko noći, rastvarač je uklonjen i ostatak rastvoren u 2N vodenom rastvoru hlorovodonične kiseline. Posle ekstrakcije jedanput sa dihlorometanom, organske faze su koncentrovane i ostatak stavljen u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline, filtriran i sušen zamrzavanjem. Dobijeno je 1.07 g N-[2-(2-butil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)propionil]gvanidina u obliku smeše dva stereoizomera. Pomoću kalijum hidroksida vrednost pH vodene faze je podešena na 12 i tako dobijeni talog ofiltriran<*>. Tako dobijena čvrsta faza je stavljena u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i, posle filtriranja i procedure sušenja zamrzavanjem, dobijeno je oko 106 mg jednog od dva stereoizomera (diastereoizomer A) obogaćenog hidrohloridom u odnosu 5:1 (MS(ES): M+H: 303.1).
<*>Prvi filtrat je podvrgnut duploj ekstrakciji sa dihlorometanom Sakupljeni organski ekstrakti su sušeni u prisustvu natrijum sulfata i potom koncentrovani. Ostatak je stavljen u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline, filtriran i tada sušen zamrzavanjem. 38 mg drugog diastereoizomera (diastereoizomer B) je tako dobijeno u obliku obogaćenom hlorovodonikom u odnosu većem od 10:1 (MS(ES): M+H: 303.1).
Diastereoizomer A je razdvojen u dva enantiomera HLPC hromatografijom na hiralnoj nosaču (Chiralpak AD 250 x 4.6), eluiranjem sa smešom acetonitril/izopropanol/n-heptan (50/3/4 po zapremini) koja je sadržala 0.3% dietilamina ; brzina toka: 1 ml/min. Tako su dobijeni enantiomer Al: 3.195 min, i enantiomer A2: 3.714 min.
Oba enantiomera su pretvoreni u odgovarajuće fluoroacetate rastvaranjem slobodne baze u razblaženom vodenom rastvoru trifluorosirćetne kiseline, što je praćeno postupkom sušenja zamrzavanjem; enantiomer Al u obliku trifluoroacetata (cxd - - 32° u metanolu 0.2%), enantiomer A2 u obliku trifluoroacetata (od<20>= +42° u metanol u 0.2%).
b) Etil-3-(2-butil-karbamoilfenil)-2-metakrilat
Etil-3-(2-butil-karbamoilfenil)-2-metakrilat je dobijen kao što je opisano u Primeru
30, počev od 1.17 g (5.0 mmola) 2-(2-etoksikarbonilpropen-l-il)benzoeve kiseline u 10 cm<3>dimetilformamida, rastvora 0.69 cm<3>(5.0 mmola) trietilamina, 1.64 g (5.0 mmola) 0-[(cijano-(etoksikarbonil)metilen)amino]-l,l,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborata ("TOTU") u 6 cm<3>dimetilformamida i drugog rastvora koji se sastojao od 366 mg (5.0 mmola) n-butilamina i 0.69 cm (5.0 mmola) trietilamina u 10 cm<3>dimetilformamida. Takoje dobijeno 1.13 g etil-3-(2-butil-karbamoilfenil)-2-metakrilata u obliku žućkastog ulja, koje može da reaguje u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Primer32:
a) N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)propionil]gvanidin
N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)propionil]gvanidin je dobijen
kao što je opisano u Primeru 30, počev od 3.73 g (39.0 mmola) gvanidinijum hlorida u 20 cm<3>dimetilformamida i 3.94 g (35.1 mmola) kalijum terc-butoksida. Smeša je mešana 45 minuta na temperaturi u oblasti 20°C, pa je zatim dodan u kapima rastvor 1.13 g (3.90 mmola) etil 3-(2-izobutil-karbamoilfenil)-2-metakrilata u 15 cm<3>dimetilformamida, i smeša je mešana tokom 3 sata na temperaturi u oblasti 20°C. Posle stajanja preko noći, rastvarač je uklonjen i ostatak rastvoren u 2N vodenom rastvoru hlorovodonične kiseline. Posle ekstrakcije jedanput sa dihlorometanom, organske faze su koncentrovane i ostatak stavljen u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline, filtriran i sušen zamrzavanjem. Dobijeno je 862 mg N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)propionil]gvanidina u obliku smeše dva stereoizomera. Pomoću kalijum hidroksida vrednost pH vodene faze je podešena na 12 i tako dobijeni talog ofiltriran<*>. Tako dobijena čvrsta faza je stavljena u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i, posle filtriranja i procedure sušenja zamrzavanjem, dobijeno oko 255 mg jednog od dva stereoizomera (diastereoizomer A) obogaćenog hidrohloridom u odnosu 9:1 (MS(ES): M+H: 303.1).
<*>Prvo dobijeni filtrat je podvrgnut duploj ekstrakciji sa dihlorometanom Sakupljeni organski ekstrakti su sušeni u prisustvu natrijum sulfata i potom koncentrovani. Ostatak je stavljen u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline, filtriran i tada sušen zamrzavanjem. 78 mg drugog diastereoizomera (diastereoizomer B) je tako dobijen u obliku obogaćenom hidrohloridom u odnosu većem od 10:1 (MS(ES): M+H: 303.1).
Diastereoizomer A je razdvojen u dva enantiomera HLPC hromatografijom na hiralnoj nosaču (Chiralpak AD 250 x 4.6), eluiranjem sa smešom acetonitril/izopropanol/n-heptan (50/3/4 po zapremini) koja je sadržala 0.3% dietilamina ; brzina toka: lml/min. Tako su dobijeni enantiomer Al: 3.895 min, i enantiomer A2: 4.437 min.
Oba enantiomera su pretvoreni u odgovarajuće fluoroacctatc rastvaranjem slobodne baze u razblaženom vodenom rastvoru trifluorosirćetne kiseline, što je praćeno postupkom sušenja zamrzavanjem; enantiomer Al u obliku trifluoroacetata (ap<20>= - 43° u metanolu 0.2%), enantiomer A2 u obliku trifluoroacetata (aD<20>= +57° u metanolu 0.2%).
b) Etil-3-(2-izobutil-karbamoilfenil)-2-metakrilat
Etil-3-(2-butil-karbamoilfenil)-2-metakxilat je dobijen kao što je opisano u Primeru
30, počev od 1.17 g (5.0 mmola) 2-(2-etoksikarbonilpropen-l-il)benzoeve kiseline u 10 cm<3>dimetilformamida, rastvora 0.69 cm<3>(5.0 mmola) trietilamina, 1.64 g (5.0 mmola) 0-[(cijano-(etoksikarbonil)metilen)amino]-l,l,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborata ("TOTU") u 6 cm dimetilformamida i drugog rastvora koji se sastojao od 366 mg (5.0 mmola) izobutilamina i 0.69 cm3 (5.0 mmola) trietilamina u 10 cm dimetilformamida. Takoje dobijeno 1.15 g etil-3-(2-izobutil-karbamoilfenil)-2-metakrilata u obliku žućkastog ulja, koje može da reaguje u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Primer 33:
a) N-[2-(2-hidroksietil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol- l-il)propionil]gvanidin
N-[2-(2-hidroksietil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)propionil]gvanidin je
dobijen kao što je opisano u Primeru 30, počev od 3.75 g (39.2 mmola) gvanidinijum hlorida u 20 cm<3>dimetilformamida i 3.96g (35.3 mmola) kalijum terc-butoksida. Smeša je mešana 45 minuta na temperaturi u oblasti 20°C, pa je zatim dodan u
kapima rastvor 1.09 g (3.92 mmola) etil 3-[2-(2-hidroksietilkarbamoil)fenil]-2-metilakrilata u 15 cm<3>dimetilformamida, i smeša je mešana tokom 3 sata na temperaturi u oblasti 20°C. Posle stajanja preko noći, rastvarač je uklonjen i ostatak rastvoren u 2N vodenom rastvoru hlorovodonične kiseline. Posle ekstrakcije jedanput sa dihlorometanom, pH vodene faze je natrijum hidroksidom podešen na 12 i dobijeni talog otfiltriran<*>. Tako dobijena čvrsta faza je stavljena u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline i, posle filtriranja i procedure sušenja zamrzavanjem, dobijeno oko 207 mg jednog od dva stereoizomera (diastereoizomer A) obogaćenog hidrohloridom u odnosu 10:1 (MS(ES): M+H: 291.1).
<*>Prvo dobijeni filtrat je podvrgnut duploj ekstrakciji sa dihlorometanom. Sakupljeni organski ekstrakti su sušeni u prisustvu natrijum sulfata i potom koncentrovani. Ostatak je stavljen u 2N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline, filtriran i tada sušen zamrzavanjem. 50 mg smeše dva diastereoizomera (diastereoizomeri A i B) je tako izolovano u obliku hidrohlorida, odnosu od 1:1 (MS(ES): M+H: 291.1).
b) Etil 3-[2-(2-hidroksietil-karbamoil)fenil]-2-metakrilat
Etil 3-[2-(2-hidroksietil-karbamoil)fenil]-2-metakrilat je dobijen kao stoje opisano u
Primeru 30, počev od 1.17 g (5.0 mmola) 2-(2-etoksikarbonilpropen-l-il)benzoeve kiseline u 10 cm<J>dimetilformamida, rastvora 0.69 cm<3>(5.0 mmola) trietilamina, 1.64 g (5.0 mmola) 0-[(cijano-(etoksikarbonil)metilen)amino]-l,l,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborata ("TOTU") u 6 cm<3>dimetilformamida i drugog rastvora koji se sastojao od 306 mg (5.0 mmola) etanolamina i 0.69 cm (5.0 mmola) trietilamina u 10 cm<3>dimetilformamida. Takoje dobijeno 1.14 g etil 3-[2-(2-hidroksietil-karbamoil)fenil]-2-metakrilata u obliku žućkastog ulja, koje može da reaguje u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Primer 34:
a) N-[2-(2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
N-[2-(2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)acetil]gvanidin --
je dobijen kao što je opisano u Primeru 1, počev od 1.75 g kalijum/erc-butoksida, 1.78 g gvanidinijum hlorida i 0.9 g etil (2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetata.. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 40 sati i zatim sipana u 150 cm vode pa ekstrahovana tri puta sa po 150 cm etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani 3 puta sa po 50 cm<3>vode, sušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i potom koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2.7 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u dietil etar i potom filtriran, dajući 0.66 g N-[2-(2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku bele čvrste faze koja se topi na 266°C. (Anliza C16H22N4O2% izračunato C : 63.56, H : 7.33, N : 18.53, O : 10.58 ; nađeno % C : 63.57, H : 7.48, N : 18.50).
b) Etil (2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat Etil (2-izobutil-5-metil 3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što
je opisano u Primeru 2, počevši sa 0.19 g 75% natrijum hidrida u 25 cm<3>1,2-dimetoksietana, 1.2 cm<3>trietil fosfonoacetata i 0.85 g 3-hidroksi-2-izobutil-6-metil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski na nosaču od silika gela (veličina čestica 15-45 pm), eluiranjem smešom dihlorometan/metanol (99/1 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proizvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2.7 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijen 1 g etil (2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)acetata u obliku bezbojnog ulja., koje je direktno korišćeno u sledećem koraku.
Primer 35:
a) N-[2-(2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
N-[2-(2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]gvanidin
je dobijen kao stoje opisano u Primeru 1, počev od 2.52 g kalijum terc-butoksida, 2.58 g gvanidinijum hlorida i 1.3 g etil (2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetata.. Reakciona smeša je mešana n temperaturi u oblasti 20°C tokom 40 sati i zatim sipana u 150 cm<3>vode pa ekstrahovana tri puta sa po 150 cm<3>etil acetata. Organski ekstrakti su sakupljeni, isprani dva puta sa po 50 cm<J>vode, sušeni u prisustvu magnezijum sulfata, filtrirani i potom koncentrovani do suvog pod sniženim pritiskom (2.7 kPa) na temperaturi u oblasti 40°C. Ostatak je stavljen u dietil etar i potom filtriran, dajući 0.81 g N-[2-(2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetil]gvanidina u obliku bele čvrste faze koja se topi iznad 260°C. (Rf = 0.28, hromatografija na tankom sloju silika gela, eluent:dihlorometan/metanol (90/10 po zapremini)). (Analiza C16H22N4O2% izračunato C : 63.56, H : 7.33, N : 18.53, O : 10.58 ; nađeno %C : 63.40, H : 7.33, N : 18.37).
b) Etil (2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetat Etil (2-izobutil-6-metil 3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetat je dobijen kao što
je opisano u Primeru 2, počevši sa 0.24 g 75% natrijum hidrida u 30 cm<3>1,2-dimetoksietana, 1.5 cm<3>trietil fosfonoacetata i 1.1 g 3-hidroksi-2-izobutil-5-metil-2, 3-dihidroizoindol-l-ona. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografski na nosaču od silika gela (veličina čestica 15-45 pm), eluiranjem smešom dihlorometan/metanol
(50/50 po zapremini). Frakcije koje su sadržavale očekivani proizvod su sakupljene i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2.7 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 1.4 g etil (2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetata u obliku bezbojnog ulja, koje je direktno korišćeno u sledećem koraku.
c) 3-Hidroksi-2-izobutil-5-metil-2, 3-dihidroizoindol-l-on i 3-hidroksi-2-izobutil-6-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-on
3-Hidroksi-2-izobutil-5-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-on i 3-hidroksi-2-izobutil-6-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-on su dobijeni kao što je opisano u Primeru 1, polazeći od 6.7 g N-izobutil-4-metil-italimida u 65 cm<3>metanola i 1.7 g kalijum borohidrida. Reakciona smeša je mešana na temperaturi u oblasti 20°C tokom 16 sati, zatim je
dodano 0.3 g kalijum borohidrida, i reakciona smeša je mešana na temperaturi od oko 20°C dva sata. Smeša je tada ohlađena na temperaturu od oko 0°C, pa je zatim dodano u kapima 40 cm destilovane vode. Dobijeni talog je filtriran, i filtrat koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi od oko 25°C.Ostatak je prečišćen hromatografski pod pritiskom argona (50 kPa), na nosaču od silika gela (veličina
čestica 40 = 63 um), eluiranjem sukcesivno smešama cikloheksan/etil acetat (70/30; 60/40 po zapremini) Frakcije koje su sadržale smešu dva očekivana proizvoda su sakupljene i koncentrovane do suvog pod sniženim pritiskom na temperaturi od oko 25°C. Tako je dobijeno 2.27 g smeše 3-hidroksi-2-izobutil-5-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-ona i 3-hidroksi-2-izobutil-6-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-ona u obliku bele čvrste faze (Rf = 0.54, hromatografija tankog sloja na silika gelu, eluent: cikloheksan/etil acetat (50/50 po zapremini)). Druga serija u kojoj se pošlo od 3.5 g N-izobulil-4-metilftalimida na isti način dala je prinos od 2.2 g smeše 3-hidroksi-2-izobutil-5-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-ona i 3-hidroksi-2-izobutil-6-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-ona u obliku bele čvrste faze. Dve serije su spojene i zatim razdvojene HPLC hromatografijom na sistemu koji uključuje dve kolone prečnika 60 mm useriji, a koje sadrže 700g i 475 g CHRALPAK AS hiralne stacionarne faze sa veličinom čestica od 20 um, eluiranjem sa smešom heptan-izopropanol (90/10 po zapremini) pri brzini toka od 90 ml/min. Prvi i drugi izomer koji su eluirani odgovagaju prvom paru regioizomera. Treći i četvrti izomer koji su eluirani odgovaraju drugom paru regioizomera. Tri ubrizgavanja od 1, 1.6 i 1.7 g su izvedena pod ovim uslovima. Koncentrovanje frakcija pod sniženim pritiskom (1 kPa) na temperaturi od oko 40°C dalo je sledeće: 0.77 g (+)-3-hidroksi-2-izobutil-5-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-ona kao belu čvrstu fazu (cio20 = +17.3+0.8° u metanolu pri koncentraciji od 0.5%), 1.09 g (+)-3-hidroksi-2-izobutil-6-metil-2, 3-dihidroizoindol - 1-ona u obliku bele čvrste faze, (aD<20>= +23.2+0.7° u metanolu pri koncentraciji od 0.5%)), 1.17 g (-)-3-hidroksi-2-izobutil-6-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-ona kao belu
čvrstu fazu (oio20 = -20.1+0.8° u metanolu pri koncentraciji od 0.5%), i 0.85 g (-)-3-hidroksi-2-izobutil-5-metil-2, 3-dihidroizoindol -1-ona kao belu čvrstu fazu, (oid20 = - 15.6+0.6° u dihlorometanu pri koncentraciji od 0.5%).
d) N-izobutil-4-metilftalimid
N-izobutil-4-metilftalimid je dobijen kao stoje opisano u Primeru 2, počevši sa 6.0 g
4rmetilftalnog anhidrida, 3.7 cm<3>izobutilamina i katalitičke količine para-toluensulfonske kiseline u 60 cm<J>toluena. Reakciona smeša je zagrevana na temperaturi od 140°C tokom 3 sata i tada ohlađena na tempeaturu u oblasti 20°C. Reakciona smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi od oko 40°C. Ostatak je stavljen u u 50 cm<3>sa zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i smeša potom ekstrahovana dva puta sa 75 cm<J>dihlorometana. Organske faze su spojene, osušene u pisustvu natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 30°C, dajući 6.7 g N-izobutil-4-metilftalimida u obliku bele čvrste faze koja se topi na 102°C.
Primer 36
a) (R)-N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-1H-izoindol-1 -iljacetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-iljacetil}-gvanidin
1.6 g KOtBu je rastvoreno u 22 ml DMF (anhidrovanog). Ovaj rastvor je dodan rastvoru koji je pripremljen od 1.5 g gvanidin-hidrohlorida u 15 ml DMF (anhidrovanog). Smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Zatim, dodan je rastvor pripremljen od 1.1 g etil estra [6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol- l-il]-sirćetne kiseline u 15 ml DMF (anhidrovanog).
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 22 h. Posle toga, smeša je stavljena u 500 ml poluzasićenog rastvora NaHC03i ekstrahovana dva puta sa po 200 ml etil acetata. EA sloj je sušen u prisustvu Na2S04i rastvarač uklonjen u vakuumu . Hromatografija na silika gelu korišćenjem EA/MeOH 3:1 dala je 0.28 g amorfne čvrste faze (Rf (EA/MeOH 3:1) = 0.15; MS (ES+) : 393 (M+l)<+>.
b) Etil estar [6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline
0.56 g 60% suspenzije NaOH u mineralnom ulju je stavljeno u 20 ml DME. Posle toga, dodano je u kapima na sobnoj temperaturi 2.8 ml etil estra (dietoksi-fosforil)-sirćetne kiseline i smeša mešana 1 sat na toj temperaturi. Tada je dodan rastvor 3-hidroksi-5-metansulfonil-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-ona u 30 ml DME i smeša zagrevana da refluksuje. Smeša je refluksovana tokom 4 sata i ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Dodano je 300 ml EA i smeša isprana tri puta sa po 100 ml zasićenog rastvora NaHCC>3. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa po lOOml E.Vodeni slojevi su osušeni iznad Na2SC>4 i rastvarač uklonjen u vakuumu . Hromatografija na silika gelu korišćenjem MTB dala je 1.1 g bezbojnog ulja (Rf (MTB) = 0.40; MS (DCI) : 380 (M+l)<+>.
b) 3-hidroksi-5-metansulfonil-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1-on
3.4 g 5-metansulfonil-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-izoindol-l,3-diona je rastvoreno u 240 ml MeOH. Zatim je dodano 0.63 g KBH4 u malim delovima na sobnoj temperaturi. Rakciona smeša je mešana 20 sati na sobnoj temperaturi i zatim sipana u 1 1 vode na 0°C. Vodeni sloj je zatim ekstrahovan tri puta sa po 300 ml CH2CI2. Potom, vodeni sloj je ekstrahovan 4 puta sa po 400 ml EA . Svaki organski sloj je sušen posebno iznad Na2SC>4. Rastvarači su uklonjeni u vakuumu . EA sloj je dao 1.4 g čistog proizvoda kao bledo žuto ulje. CH2CI2sloj je hromatografijom na silika gelu koristeći EA/HEP 1:2 dao dodatnih 1.5 g proizvoda (Rf (EA/HEP 1:2) = 0.035; MS (DCI) : 310 (M+l)<+.>
c) 5-Metansulfonil-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-izoindol-l,3-dion
4.0 g 5-metansulfanil-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-izoindol-l,3-diona je rastvoreno u 100
ml CH2C12ii dodano 7.2 g 3-hloro-benzenkarboperoksidne kiseline u malim delovima
na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 12 sati i ostavljena da stoji na toj temperaturi daljih 60 sati. Posle toga, dodano je 400 ml CH2CI2, isprano dva puta sa 150 ml zasićenog vodenog rastvora Na2S03, i najzad isprano tri puta poluzasićenim vodenim rastvorom Na2C03. Organski sloj je sušen iznad Na2S04. Rastvarači su uklonjeni u vakuumu, da bi se dobilo 3.4 g amorfne čvrste faze (Rr(EA) = 0.013; MS (DCI) : 308 (M+l)<+>).
d) 5-Metansulfanil-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-izoindol-l,3-dion
4.0 g 5-hloro-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-izoindol-l,3-diona (vidi primer 23), 4.1 g
K2CO3i 1.1 g natrijum metantiolata je suspendovano u 50 ml DMF (anhidrovanog).. Smeša je mešana na 60°C u toku 9 sati i, posle hlađenja, razblažena sa 400 ml poluzasićenog vodenog rastvora NaHC03i ekstrahovana 4 puta sa po 200 ml etil acetata. Organski sloj je sušen iznad Na2S04. Rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobilo 4.1 g amorfne čvrste faze (Rf(EA/HEP 1:2) = 0.43; MS (DCI) : 276 (M+l)<+>.
Jedinjenja iz naslova primera 36a i 36b su dobijena hromatografijom 270 mg uzorka jedinjenja iz Primera 36 na Chiralpaku AD-H. 250 x 20 mm, 10 um koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:6:3 pri toku od 6 ml/min:
Primer 36a
Prinos 12 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpaku AD-H/33, 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:6:3 pri toku od 1 ml/min: RT = 3.722 min.
Primer 36b
Prinos 11 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpaku AD-H/33, 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:6:3 pri toku od 1 ml/min: RT = 5.601 min.
Primer 37
N-[2-ciklopropilmetil-6-metansulfonil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil]-gvanidinijum acetat
Jedinjenje iz naslova primera 37 je sintetizovano analogno Primeru 36 koristeći 5-hloro-2-ciklopropilmetil-izoindol-l,3-dion (vidi primer 24 ) kao početni materijal.
(Rr(EA/5%HOAc 1:2) = 0.047; MS (ES+) : 365 (M+l)<+>.
Primer 38
a) (R)-N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin i
(S)-N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 - i ljacetil]-gvanidin
0.3 g (2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)-sirćetne kiseline je rastvoreno u 5 ml NMP (anhidrovanog).. Dodano je 0.3 g CDI i smeša mešana na sobnoj temperaturi 17 sati da bi se dobio intermedijar (2-ciklopropilmetil-3-(2-imidazol-l-il-2-okso-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-1H-izoindol-l-on. U međuvremenu, 0.55 g gvanidin hidrohlorida je suspenovano u 10 ml NMP (anhidrovanog) i smeša mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Posle toga rastvor je dodan gornjem imidazolidu i reakciona smeša ostavljena 15 sati na sobnoj
temperaturi.Dodano je 100 ml EA i isprano sa po 100 ml poluzasićenog rastvora NaHC03. Organski sloj je sušen iznad MgS04i rastvarač je uklonjen u vakuumu . Hromatografija na silika gelu korišćenjem EA/MeOH 3:1 je dala 0.21 g amorfne čvrste faze Rf (EA/MeOH 5:1) = 0.25; MS (ES+) : 355 (M+l)<+>).
b) (2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-sirćetna kiselina
1-0 g etil estra(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)-sirćetne kiseline je rastvoreno u 10 ml etanola paje dodano 3.5 ml 1N vodenog rastvora NaOH. Meša je mešana 3 sata na sobnoj temperaturi i rastvarač uklonjen u vakuumu . Posle toga, dodano je 30 ml vode i pH rastvora podešen na pH = 2 koristeći vodeni rastvor HCL. Rastvor je tada ekstrahovan tri puta sa po 50 ml EA. Organcki sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakuumu da bi se dobio prinos od 0.35 g amorfne čvrste faze Rf (EA/MeOH 5:1) = 0.43; MS (ES+) : 314(M+1)<+>). c) Smeša etil estra (2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-sirćetne kiseline i etil estra (2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-sirćetne kiseline je sintetizovana analogno Primeru 8. Da bi se razdvojili regioizomeri, hromatografija 10.5 g smeše je izvedena u 9 serija na Merck Lichrospher kolini, RP 18, 10 um50<*>250 mm. Uslovi su sledeći:
Protok 150 ml/min
Eluent A: voda + 0.2% TFA
Eluent B: acetonitril
Minut 00: 65% A, 35% B
Minut 38: 65% A, 35% B
Minut 40: 10% A, 90% B
Minut 45: 10% A, 90% B
Minut 46: 65% A, 35% B
Minut 50: 65% A, 35% B
Prinos:
0.84 g etil estra(2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-sirćetne kiseline
Rf(DIP) = 0.24
i
l.Og etil estra(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 - il)-sirćetne kiseline
Rf (DIP) = 0.30
Jedinjenja iz naslova primera 38a i 36b su dobijena hromatografijom 207 mg uzorka 38 na Chiralcel OJ, 250 x 50 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 25:1:1 + 0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min:
Primer 38a
Prinos 30 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC Chiralcel OJ/16, 250 x 4.6 mm, 20 um koristeći HEP/EtOH/MeOH 25:1:1+0.1% DEA na pri protoku od 1 ml/min: RT = 8.763 min.
Primer 38b
Prinos 25 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralcel OJ/16, 250 x 4.6 mm, 20 um koristeći HEP/EtOH/MeOH 25:5:2 + 0.3% DEA na pri protoku od 1 ml/min: RT = 10.598 min.
Primer 39
a) N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin
Jedinjenje iz naslova Primera 39 je sintetizovano analogno Primeru 38 koristeći etil estar (2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)-sirćetne kiseline kao početni materijal.
Rf (EA/MeOH 3:1) = 0.21; MS (ES+) : 355 (M+l)<+>).
Primer 40
(R)-N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}-gvanidin
Jedinjenje iz naslova Primera 40 je sintetizovano analogno Primeru 27. Rf (EA/MeOH 3:1) = 0.33; MS (ES+) : 365 (M+l)<+>).
Jedinjenja iz naslova primera 40a i 40b su dobijena hromatografijom 207 mg uzorka iz primera 40 na Chiralpak AD-H, 250 x 20 mm, 10 nm koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:3:6 + 0.1% DEA pri protoku od 19 ml/min:
Primer 40a
Prinos 30 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD-H/33, 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:3:6+ 0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 4.708 min.
Primer 40b
Prinos 30 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD-H/33, 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:3:6 + 0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 9.719 min.
Primer 41
(R)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}-gvanidin
Jedinjenje iz naslova primera 41 je sintetizovano analogno Primeru 27. Slobodna baza je pretvorena u acetat hromatografijom na silika gelu koristeći EA/5% HOAc.
Primer 41a
N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3. 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidinijum acetat
Rr(EA/5% HOAc) = 0.16; MS (ES+) : 397 (M+l)<+>).
Jedinjenje iz naslova primera 41b i 41c su dobijena hromatografijom 530 mg uzorka iz Primera 41a na Chiralcel OJ, 250 x 50 mm, 20 um koristeći HEP/EtOH/MeOH 10:1:1+0.1% DEA pri protoku od 100 ml/min:
Primer 41 b
Prinos 165 mg amorfne slobodne baze.
Analitički HLPC Chiralcel OJ/37, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 20:1:1 + 0.1% DEA na pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 1 1.838 min.
Primer 41c
Prinos 122 mg amorfne slobodne baze.
Analitički HLPC Chiralcel OJ/37, 250 x 4.6 mm, 20 um koristeći HEP/EtOH/MeOH 20:1:1 + 0.3% DEA na pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 16.029 min.
Jedinjenja iz naslova primera 42 do 45 su sintetizovana analogno Primeru 8: Primer 42 (R)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetilj-gvanidin i (S)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)-acetilj-gvanidin
Rf (EA/MeOH 5:1) = 0.082; MS (ES+) : 355 (M+l)<+>).
Jedinjenje iz naslova primera 42a i 42b su dobijena hromatografijom 830 mg uzorka 42 na Chiralcel OJ, 250 x 50 mm, 20 um koristeći HEP/EtOH/MeOH 25:1:1 + 0.1% DEA pri protoku od 100 ml/min:
Primer 42a
Prinos 113 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralcel OJ/16, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 25:1:1 +0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 11.691 min.
Primer 42b
Prinos 199 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralcel OJ/16, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 25:1:1+0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 14.032 min.
Primer 43
(R)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin i
(S)- N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin
Rf(EA/MeOH2:l) = 0.13;MS (ES+): 341 (M+l)<+>).
Jedinjenja iz naslova primera 43a i 43b su dobijena hromatografijom 110 mg uzorka jedinjenja iz Primera 43 na Chiralpak AD-H, 250 x 20 mm, 10 um koristeći HEP/EtOH/MeOH 1:1:1 + 0.1% DEA pri protoku od 10-15 ml/min:
Primer 43 a
Prinos 60 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD-H/31, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 1:1:1+0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 6.420 min.
Primer 43b
Prinos 41 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD-H/31, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 1:1:1 +0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 15.401 min.
Primer 44
(R)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin
Slobodna baza je pretvorena u acetat hromatografijom na silika gelu korišćenjem EA/5%HOAc.
Primer 44a
N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidinijum acetat
Rf (EA/5%H0Ac) = 0.27; MS (ES+): 383 (M+l)').
Jedinjenja iz naslova primera 44b i 44c su dobijena hromatografijom 100 mg uzorka jedinjenja iz Primera 44a na Chiralpak AD-H, 250 x 20 mm, 10 pm koristeći HEP/EtOH/MeOH 2:1:1+0.1% DEA pri protoku od 14 ml/min:
Primer 44b
Prinos 25 mg amorfne slobodne baze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD-H/31, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 20:1:1 +0.1% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 5.027 min.
Primer 44c
Prinos 26 mg amorfne slobodne baze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD-H/31, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 20:1:1+0.1 DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 9.012 min.
Primer 45
N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin
(Rf (EA/MeHO 3:1) = 0.21; MS (ES+) : 351 (M+l)<+>).
Primer 46
(R)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}-gvanidin
Jedinjenje iz naslova primera 46a i 46b su dobijena hromatografijom 0.56 g uzorka jedinjenja iz Primera 21 na Chiralcel OD, 250 x 50 mm, 20 pm koristeći HEP/EtOH/MeOH 50:5:2 pri protoku od 100 ml/min što je razdvojilo dva enantiomera:
Primer 46a
Prinos 120 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralcel OD/20 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 50:5:2 pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 9.620 min.
Primer 46b
Prinos 190 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralcel OD/20, 250 x 4.6 mm, koristeći HEP/EtOH/MeOH 50:5:2 pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 11.899 min.
Primer 47
(R)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil} -gvanidin
Jedinjenja iz naslova su sintetizovana analogno Primeru 21 koristeći etil estar [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline (Primer 21) kao početni materijal (Rf (EA/MeHO 3:1) = 0.40; MS (ES+) : 383 (M+l)<+>).
Hromatografija na Chiralpak AD-H, 250 x 20 mm, 10 um koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 3 do 6 ml/min razdvojilaje enantiomere:
Primer 47a
Prinos 24 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralcel OD/20 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2+ 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 4.236 min.
Primer 47b
Prinos 31 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralcel OD/20 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 6.296 min.
Primer 48
N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidinijum hidrogen fumarat,
1.5 g jedinjenja iz naslova 46b i 0.45 fumarne kiseline je rastvoreno zajedno u smeši aceton/ACN 1:1 + 1 ml vode i mešano 15 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarači su uklonjeni u vakuumu , ostatak je suspendovan u 50 ml CH2CI2 i proizvod otfiltriran. Proizvod je sušen u vakuumu da bi se dobio prinos od 1.65 g belih kristala, t.t. 202°C.
Jedinjenja iz naslova primera 49 i 50 su dobijena hromatografijom 600 mg primera 26 na Chiralpak AD, 250 x 20 mm, 20 um koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:4:3 + 0.3% DEA pri protoku od 100 ml/min:
Primer 49
(R)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetil]-gvanidin i
(S)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il) acetilj-gvanidin
Primer 49a
Prinos 90 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:3:4+ 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 6.092 min.
Primer 49b
Prinos 110 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:3:4 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 11.876 min.
Primer 50
(R)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin i
(S)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin
Primer 50a
Prinos 35 mg amorfne čvrste faze'.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:3:4+ 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 5.663 min.
Primer 50b
Prinos 51 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:3:4 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 23.673 min.
Jedinjenja iz naslova primera 51 i 52 su dobijena hromatografijom 280 mg uzorka primera 26 na Chiralpak AD, 250 x 20 mm, 20 pm koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:4:3 + 0.3% DEA pri protoku od 50 ml/min:
Primer 51
(R)-N-{2-[3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-frifluoro-propil)-2, 3-dihidro-1H-izoindol-1 -il]-acetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin
Primer 51a
Prinos 29 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2+ 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 4.037 min.
Primer 51b
Prinos 27 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 5.083 min.
Primer 52
(R)-N-{2-[3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il]-acetil}-gvanidin i
(S)-N-{2-[3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il]-acetil} -gvanidin
Primer 52a
Prinos 15 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2+ 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 4.497 min.
Primer 52b
Prinos 68 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 8.228 min.
Jedinjenja iz naslova primera 53 i 54 su dobijena hromatografijom 300 mg uzorka primera 28 na Chiralpak AD, 250 x 20 mm, 20 pm koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 100 ml/min:
Primer 53
(R)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin i
(S)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il) acetilj-gvanidin
Primef 52a
Prinos 15 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2+ 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 4.497 min.
Primer 52b
Prinos 68 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 8.228 min.
Jedinjenja iz naslova primera 53 i 54 su dobijena hromatografijom 300 mg uzorka primera 28 na Chiralpak AD, 250 x 20 mm, 20 pm koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 100 ml/min:
Primer 53
(R)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin i
(S)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin
Primer 53a
Prinos 76 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:4:3 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 5.761 min.
Primer 53b
Prinos 34 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:4:3 + 0.3% DEA pri protoku od 1 ml/min: RT = 7.079 min.
Primer 54
(R)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il) acetilj-gvanidin i
(S)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin
Primer 54a
Prinos 34 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:4:3 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 5.421 min.
Primer 54b
Prinos 72 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:4:3 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 9.865 min.
Primer 55
(R)-N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin i
(S)-N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin
Primer 55a
Prinos 16 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 7.330 min.
Primer 55b
Prinos 46 mg amorfne čvrste faze. Analitički HLPC Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1 ml/min: RT =11.908 min.
Primer 56
R)-N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin i
(S)-N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il) acetilj-gvanidin
Primer 56a
Prinos 32 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT = 6.821 min.
Primer 56b
Prinos 47 mg amorfne čvrste faze.
Analitički HLPC na Chiralpak AD/H 250 x 4.6 mm, koristeći ACN/HEP/i-PrOH 50:5:2 + 0.3% DEA pri protoku od 1.0 ml/min: RT =27.738 min.
Metode NHE inhibicije
Inhibitorne aktivnosti NHE (IC5ovrednosti) jedinjenja prema pronalasku određene su FLIPR testom.
Test je izveden na FLIPR (Fluorescent Imaging Plate Reader) aparatu opremljenim 96-ćelijskim mikrotitarskim pločama koje imaju providno dno i crne zidove. Transfektovane ćelijske linije koje izražavaju različite NHE podtipove (roditeljske ćelijske linije LAP-1 ne pokazuju andogenu NHE aktivnost kao rezultat mutageneze i selekcije koja sledi) su zasejane prethodnog dana gustinom od približno 25 000 ćelija po ćeliji ploče.
Medijum rasta za transfektovane ćelije (Iscove + 10% teleći fetalni serum) takođe sadrži G418 kao odabrani antibiotik da se osigura prisustvo transfekovanih sekvenci.
Stvarni test počinje eliminacijom medijuma rasta i dodavanjem 100 ul pufera po ćeliji ( 5 uM BCECF-AM [acetoksimetil estar 2','7'-bis(karboksietil)-5-(6)-karboksi-fluoresceina] u 20 mM NH4C1, 115 mM holin hlorida, 1 mM CaCl2, 5 mM KC1, 20 mM HEPES-a i 5 mM glukoze; pH 7.4 (podešen sa KOH). Ćelije su zatim inkubirane tokom 20 min na 37°C. Ova inkubacija dovodi do ulaženja fluorescentne boje u ćelije, čiji intenzitet fluoroscencije zavisi od pH„ i od NH4C1, što rezultuje blagom bazifikacijom ćelija.
Prekursor BCECF-AM, ne-fluoroscentna boja, je estar, sposoban da prođe kroz membranu. Stvarna boja, koja nije sposobna đa prođe kroz membranu, je oslobođena u ćeliji pomoću esteraze.
Posle ove 20.-minutne inkubacije, osnovni pufer, koji sadrži NH4C1 i slobodni BCECF-AM, je uklonjen ispiranjem tri puta u uređaju za ispiranje ćelija (Tečan Columbus), pri čemu je svako ispiranje izvedeno sa 400 ul pufera za ispiranje (133.8 mM holin hlorida, 4.7 mM KC1, 1.25 mM MgCl2, 1.25 mM CaCl2,0.97 mM K2HP04, 0.23 mM KH2P04, 5 mM HEPES-a i 5 mM glukoze; pH 7.4 (podešen sa KOH)). Zaostala zapremina u ćelijama je 90 ul (moguće između 50 i 125 ul). Ovaj postupak ispiranja uklanja slobodni BCECF-AM i dovodi do intracelularne acidifikacije (pHjod 6.3 do 6.4) usled uklanjanja eksternih amonijum jona.
Postoje poremećena ravnoteža intracelularnog amonijuma sa vodenim amonijumom i protonima, uklanjanjem ekstracelularnog amonijuma i neposrednim prelaženjem vodenog amonijuma kroz ćeljisku membranu, proces ispiranja dovodi do ostajanja intracelularnih protona, što dovodi do intraceluarne acidifikacije. Ova acidifikacija može da na kraju dovede do smrti ćelija ako traje dovoljno dugo. Ovde je važno da pufer za ispiranje ne sadrži natrijum (< 1 mM), inače će ekstracelularni natrijumovi joni dovesti do neposrednog povećanja vrednosti pHjusled aktivnosti kloniranih NHE izoformi. Takođe je važno da sva tri bufera koji se koriste (osnovni pufer, pufer za ispiranje i pufer za regeneraciju) ne sadrže HCO3jone, inače će prisustvo bikarbonatna dovesti do aktivacije sistema koji zavise od bikarbonata a koji remete regulaciju pHi, sistema koje sadrže LAP-1 roditeljske ćelijske linije.
Mikrotitarske ploče koje sadrže acidifikovane ćelije su tada stavljene (u roku do 20 minuta posle acidifikacije ) u FLIPR. U FLIPR-u, intracelularna fluorescentna boja je aktivirana svetlom talasne dužine 488 nm, generisanim argonovim laserom, i merni parametri (snaga lasera, vreme iluminacije i dijafragma CDD kamere koja je urađena u FLIPR-u) su izabrani tako da srednja vrednost fluorescentnog signala po ćeliji bude između 30 000 i 35 000 relativnih fluorescentnih jedinica.
Stvarna merenja u FLIPR-u počinju snimkom pomoću CDD kamere svake dve sekunde posle provere softvera. Posle 10 sekundi, povećanje intracelularnog pH je inicirano dodatkom 90 ul regeneracionog pufera (133.8 mM NaCl, 4.7 mM KC1, 1.25 mM MgCl2, 1.25 mM CaCl2, 0.97 mM K2HP04, 0.23 mM KH2P04, 10 mM HEPES-a i 5 mM glukoze; pH 7.4 (podešen sa NaOH)) pomoću 96-ćelijske pipete koja je ugrađena u FLIPR. Neke ćelije, kojima je dodan čisti regeneracioni pufer, služe kao pozitivne kontrole (100% HNE aktivnosti). Negativna kontrola (0%o NHE aktivnosti) sadrži pufer za ispiranje. Regeneracioni pufer sa dostrukom koncentraciom probne supstance je dodan svim drugim ćelijama. Meranja na FLIPR završavaju se posle 60 merenja (dva minuta).
Eksperimantalni podaci dozvoljavaju da se izračunaju NHE akivnosti za svaku koncentraciju probne supstance, i iz njih vrednosti IC50supstance. Za podtip NHE-1 dobijeni su sledeći rezultati: Pronalazak se takođe odnosi na upotebu derivata izoindolona formule I i/ili njihovih farmaceutski prihvatiljuvih soli za dobijanje lekova i farmaceutskih preparata kao inhibitora NHE. Traži se zaštita za lek za primenu kod ljudi, u veterini ili fitoprotektivnu upotrebu, koji sadrži efekivnu količinu jedinjenja formule I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačima i aditivima, samog ili u kombinaciji sa drugim farmaceutskim sastojcima ili lekovima.
Farmaceutski preparati prema pronalasku sadrže jedinjenje formule I i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so , u čistom obliku ili kao preparat u kome je kombinovana sa bilo kojim farmaceutski kompatibilnim proizvodom, koji može biti inertan ili fiziološki aktivan. Lekovi prema pronalasku mogu biti administrirani, na primer, oralno, parenteralno, intravenozno, rektalno, transdermalno, topikalno ili inhalacijom. Lekovi u opštem slučaju sadrže aktivne sastojke formule I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u količini od oko 0.001 mg do 1 g po doznoj jedinici.
Ekscipijenti pogodni za željenu farmaceutsku formulaciju su poznati prosečnom stručnjaku na osnovu njegovog stručnog znanja. Osim rastvarača, sastojaka za stvaranje gela, baza za supozitorije, ekscipijenata tableta, i drugih aktivnih sastojaka nosača, moguće je koristiti, na primer, antioksidante, disperzante, emulzifikatore, sredstva protiv penušanja, dodatke za poboljšanje ukusa, prezervative, sredstva za poboljšanje rastvorljivosti ili boje.
Za farmaceutski preparat za oralnu administraciju, aktivna jedinjenja su mešana sa aditivima pogodnim za ovu svrhu, kao što su nosači, stabilizatori ili inertni razblaživači, i pretvoreni konvencionalnim metodama u pogodne dozne oblike kao što su tablete, obložene tablete, tvrde želatinske kapsule, alkoholni ili uljasti rastvori. Primeri inertnih nosača koji se mogu koristiti su gumi arabik, magnezia, magnezijum karbonat, kalijum fosfat, laktoza, glukoza ili škrob, naročito kukuruzni škrob. Osim toga, moguće je da se dobijanje izvede u obliku suvih granula i obliku vlažnih granula. Primeri za pogodne uljane nosače su biljna ili životinjska ulja, kao što je suncokretovo ulje ili riblje ulje.
Tablete, pilule, prahovi (želatinske kapsule ili vrećice) ili granule mogu se koristiti kao čvrsti preparati za oralnu adinistraciju. U ovim preparatima, glavna aktivna komponenta prema pronalasku mešana je sa jednim ili više razblaživača, kao što je škrob, celuloza, sukroza, laktoza ili silika, u struji argona. Ovi preparati mogu takđe da sadrže i druge supstance osim razblaživača, n primer, jedan ili više lubrikanata, kao što je magnezijum stearat ili talk, sredstvo za bojenje, sredstvo za oblaganje (dražea) ili lak.
Farmaceutski prihvatljivi rastvori, sispenzije, emulzije, sirupi i eliksiri koji sadrže inertne razblaživače, kao što je voda, etanol, glicerol, biljno ulja ili tečni parafin, mogu se koristiti kao tečni preparati za oralnu administraciju. Ovi preparati mogu da sadrže i druge sastojke osim razblaživača, na primer proizvode za vlaženje, zaslađivače, zgušnjivače, sredstva za poboljšanje ukusa ili stabilizatore.
Sterilni preparati za prenteralnu administraciju mgu prvenstveno da budu vodeni ili ne-vodeni rastvori, suspenzije ili emulzije. Rastvarači ili nosači koji se mogu koristiti obuhvataju vodu, propilen glikol, polietilen glikol, biljna ulja, naročito maslinovo ulje, organske stre koji se mogu injektirati, na primer, etil oleat, ili druge pogodne organske rastvarače. Ovi preparati mogu takođe da sadrže pomoćna sredstva, naročito agense za vlaženje, agense za napetost mišića, emulzifikatore, disperzante i stabilizatore. Sterilizacija može bit izvedena na više načina, na primer aseptičnom filtracijom, uvođenjem agenasa za sterilizaciju u preparat, ozračivanjem ili zagrevanjem. Oni takođe mogu biti pripremljeni u obliku sterilnih čvrstih preparata koji se mogu rastvoriti u vreme korišćenja u sterilnoj vodi ili drugom sterilnom medijumu koji se može injektirati.
Preparati za rektalnu administracioju su supozitorije ili rektalne kapsule koje sadrže, osim aktivnog proizvoda, ekscipijente, kaošto je kakao puter, polu-sintetički gliceridi ili polietilen glikoli.
Preparati za topikalnu administraciju mogu biti, na primer, kremovi, losioni, kapi za oči, sredastva za ispiranje usta, kapi za nos ili aerosoli.
Za supkutanu, intramuskularnu ili intravenoznu administraciju, po potrebi aktivna jedinjenja su pretvorena, po želji sa supstancama koje su uobičajene za ovu svrhu, kao što su solubilizatori, emulzifikatori il drugi ekscipijenti, u rastvore, suspenzije ili emulzije. Primeri pogodnih rastvarača su: voda, fiziološki rastvor ili alkoholi, na primer etanol, propanol, gicerol, kao i rastvori šećera, kao što su rastvori glukoze ili manitola, ili smeša različitih pomenutih rastvarača.
Pogodni farmaceutski preparati za administraciju u obliku aerosola ili spreja su, na primer, rastvori, suspenzije ili emulzije aktivnog sastojka formule I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u farmaceutski prihvatljivom rastvaraču kao što je, naročito, etanol ili voda, ili smeša takvih rastvarača. Formulacije mogu, ako je potrebno, takođe da sadrže druge farmaceutske ekscipijente, kao što su površinski aktivne materije, emulgatori ili stabilizatori, i propelant kao gas. Takvi preparati mogu da sadrže, na primer, aktivni astojak u koncentraciji od oko 0.1 do 10, naročito oko 0.3 do 3% tež.
Doza aktivnog sastojka koji će biti administriran, i učestalost administracije, zavise od željenog efekta, moći i trajanja akcije upotrebljenog jedinjenja; osim toga takođe od prirode i težine poremećaja koji će se lečiti, kao i roda, starosti i individualne reakcije sisara koji će se lečiti. U opštem slučaju, doktor će odrediti odgovarajuću dozu kao funkciju godina i težine i svih drugih faktora specifičnih za pojedinca koji će se lečiti.
Prosečno, dnevna doza jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli za pacijenta koji teži oko 75 kg je najmanje 0.001 mg/kg, prvenstveno 1 mg/kg, do maksimalno 1000 mg/kg, prvenstveno 100 mg/kg, telesne težine. Za akutne slučajeve poremećaja, na primer neposredno posle miokardijalnog infarkta, više i, naročito, češće doze mogu takođe biti neohodne, na primer do 4 pojedninačne doze dnevno. Može biti neophodno do 2000 mg na dan, naročito kod i.v. administracije, na primer kod pacijenata sa infarktom u intenzivnoj nezi, i jedinjenja pronalaska se mogu administrirati infuzijom.
Sledeći primeri ilustruju preparate prema pronalasku:
PRIMER A
Gel kapsule koje sadrže 50 mg doze aktivnog proizvoda, i imaju sastav naveden niže, dobijene prema uobičajenoj tehnici:
PRIMER B
Tablete koje sadrže 50 mg doze aktivnog proizvoda, i imaju sastav naveden niže, dobijene prema uobičajenoj tehnici:
Smeša hidroksimetilceluloze, glicerola i titanijum
oksida (72/3.5/24.5) qs 1 dopunila je težinu filmom
.obložene tablete od 245 mg
PRIMER C
Dobijen je rastvor za injekcije koji sadrži 10 mg aktivnog proizvoda, a koji ima sastav naveden niže:

Claims (25)

1. Jedinjenja formule I u kojoj Rl iR2 nezavisno jedan od drugog, predstavljaju vodonik, alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, alkenil koji ima 2, 3,4,5 ili 6 ugljenikovih atoma, alkinil koji ima 2, 3,4,5 ili 6 ugljenikovih atoma, aril, heteroaril, F, Cl, Br, J, NO2, NFI2, alkilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, NRaRb, alkilkarbonil amino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, S(0)nR7, CO2H, alkoksikarbonil koji ima 1,2,3 i.i 4 ugljenikova atoma, alkilkarbonil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, CONH2, CONRaRb, CN, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkoksi koji ima 1,2 ili 3 ugljenikova atoma ili SO3H; pri čemu su sami Rl i R2 po izboru supstituisani sa linearnom ili razgranatom alkil grupom koja ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; n nula, 1 ili 2 R3 je vodonik, aril, heteroaril, grupa Alk-R8 tipa ili cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma, u kojoj je cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe F, Cl, Br i J, Alk je alkil koji ima 1, 2, 3,4 ili 5 ugljenikovih atoma u linearnom ili razgranatom lancu, R8 je vodonik, cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, aril, heteroaril, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; C02H, CONH2, CONRaRb, NH2, alkilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma ili NRaRb; R4,R5 i R6 su, nezavisno jedan od drugog, vodonik ili linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; R7 je linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; Ra i Rb su, nezavisno jedan od drugog, definisani kao R7, ili alternativno Ra i Rb grade, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, 5- ili 6-člani heterociklični prsten koji po izboru sadrži drugi hetero atom izabran od O, S ili N, i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
2. Jedinjenja formule I prema zahtevu 1, u kojoj Rl i R2 nezavisno jedan od drugog, su vodonik, alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; F, Cl, Br, J NH2, alkilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma. NRaRb, alkilkarbonilamino koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, C02H, alkoksikarbonil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkoksi koji ima 1,2 ili 3 ugljenikova atoma ili S03H, Rl i R2 su po izboru supstituisani sa linearnom ili razgranatom alkil grupom koja ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; R3 je grupa Alk-R8 tipa ili cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma, u kojoj je cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe F, Cl, ili Br, Alk je alkil koji ima 1, 2, 3,4 ili 5 ugljenikovih atoma u linearnom ili razgranatom lancu, R8 je vodonik, cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, aril ili heteroaril, R4, R5 i R6 su, nezavisno jedan od drugog, vodonik ili linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; Ra i Rb su, nezavisno jedan od drugog, linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, ili Ra i Rb grade, zajedno sa atomom azota za koji su vezani, 5- ili 6-člani heterociklični prsten koji po izboru sadrži drugi hetero atom izabran od O, S ili N, i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli
3. Jedinjenja formule 1 prema zahtevu 1 ili 2, u kojoj Rl iR2 su, nezavisno jedan od drugog, vodonik, alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; F, Cl, Br, J, OH, alkoksi koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma ili polifluoroalkoksi koji ima 1, 2 ili 3 ugljenikova atoma, Rl i R2 su po izboru supstituisani sa linearnom ili razgranatom alkil grupom koja ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; R3 je grupa Alk-R8 tipa ili cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma,u kojoj je cikloalkil po izboru supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe F ili Cl, Alk je alkil koji ima 1, 2, 3,4 ili 5 ugljenikovih atoma u linearnom ili razgranatom lancu, R8 je vodonik, cikloalkil koji ima 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 ugljenikovih atoma ili polifluoroalkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma, R4, R5 i R6 su, nezavisno jedan od drugog, vodonik ili linearni ili razgranati alkil koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma; i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli
4. Jedinjenja prema jednom ili više zahteva 1 do 3, naznačena time, što su izabrana iz grupe koja se sastoji od: N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-2-metilpropionil] gvanidin, N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-2-metil-propionilj-gvanidin, N-[(3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-7-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(7-amino-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)acetil] gvanidin, N-[(4-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(7-hidroksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4,7-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(4-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4,5-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetilj gvanidin, N-[(6,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(4-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(6-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(7-karboksi-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-l-metil 3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, i njihove racemske smeše,njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli
5. Jedinjenja prema jednom ili više zahteva 1 do 3, naznačena time, što su izabrana iz grupe koju čine: N-[(2-metil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)acetil] gvanidin, N-[(2-etil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(2-(3-okso-2-propil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljpropionil] gvanidin, N-[(2-izopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[2-(2-butil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljpropionil] gvanidin, N-[(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[2-(2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -il)propionil] gvanidin, N-[(2-ciklopropilmetilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-benzil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroctil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-4-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-5-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-6-metil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(5-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(6-terc-butil-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(2-izobutiil-5-izopropoksi-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(5-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(6-hloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(5-hloro-3-okso—2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l -il)acetil]-gvanidin, N-[(6-hloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin, N-[(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin, N-[(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin, N-[(5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin, N-[(6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin, N-[(5,6-dihloro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(7-fluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(4,7-difluoro-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(5-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(6-bromo-2-izobutil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)acetil] gvanidin, N-[(2-izobutil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(2-ciklopropilmetil-3-okso-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil]-gvanidin, N-[(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-l-il)acetil]-gvanidin, N-[(3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoroetil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acctil]gvanidin, N-[(3-okso-2-(2, 2,-2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljacetil] gvanidin, N-[(3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol- 1-il)-acetil]gvanidin, N-[(3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetil]gvanidin, N-[(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetil]gvanidin, N-[(3-okso-2-(4, 4, 4-trifluorobutil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil]gvanidin, [l-(2-gvanidino-l-metil-2-oksoetil)-3-okso-l,3-dihidroizoindol-2-il] sirćetna kiselina, N-{2-[(3-okso-2-(2-pirolidin-l-iletil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -iljpropionil }-gvanidin, N-[2-(2-hidroksietil)-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)propionil]gvanidin, N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil} gvanidin, N-[2-(2-ciklopropilmetil-6-metansulfonil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil] gvanidinium, N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil} gvanidin, N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil} gvanidin, N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin, N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin, N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil} gvanidin, N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil} gvanidin, i njihove racemske smeše, njihovi enantiomeri i diastereoizomeri i njihove smeše, njihovi tautomeri i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
6. Jedinjenja prema jednom ili više zahteva 1 do 3, naznačena time, što su izabrana od: (R)-N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1- iljacetiljgvanidin, (S)-N-{2-[6-metansulfonil-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1- iljacetil}gvanidin, (R)-N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetilj-gvanidin, (S)-N-[2-(2-ciklopropilmetil-3-okso-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)-acetilj-gvanidin, (R)-N-{2-[5,6-dilfuoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}gvanidin, (S)-N-{2-[5,6-difluoro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}gvanidin, (R)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}gvanidin, (S)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-acetil}gvanidin, (R)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1 -iljacetiljgvanidin, (S)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-iljacetil}- gvanidin, (R)-N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1-il)-acetil]-gvanidin, (S)- N-[2-(5,6-dihloro-2-ciklopropil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1-il)-acetil]-gvanidin, (R)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil} gvanidin, (S)-N-{2-[5,6-dihloro-3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-ilJacetil} gvanidin, (R)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-triffluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}gvanidin, (S)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-triffluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol- . l-il]-acetil}gvanidin, (R)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-triffluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol- ~" l-il]-acetil}gvanidin, (S)-N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-triffluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il] -acetil} gvanidin, (R)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetiljgvanidin, (S)-N-[2-(6-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetil] gvanidin, (R)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il)-acetiljgvanidin, (S)-N-[2-(5-hloro-3-okso-2-(3, 3, 3-trifluoropropil)-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il)-acetil]gvanidin, (R)-N-{2-[3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il]-acetil} -gvanidin, (S)-N-{2-[3-okso-6-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol- l-il]-acetil}-gvanidin, (R)-N-{2-[3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-1H-izoindol-1 -il]-acetil} -gvanidin, (S)-N-{2-[3-okso-5-trifluorometil-2-(3, 3, 3-trifluoro-propil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1 -il]-acetil} -gvanidin, (R)-N-{2-[6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il]-acetil}-gvanidin, (S)-N-{2-[6-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -iljacetil }-gvanidin, (R)-N-{2-[5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-ilJacetil}-gvanidin, (S)-N-{2-[5-hloro-3-okso-2-(4, 4, 4-trifluoro-butil)-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-ilJacetil}-gvanidin, (R)-N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-il)-acetilj-gvanidin, (S)-N-[2-(6-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin, (R)-N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetil]-gvanidin, (S)-N-[2-(5-hloro-2-ciklopropilmetil-3-okso-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il)-acetilj-gvanidin
7. Jedinjenje formule I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli prema jednom ili više zahteva 1 do 6 za primenu kao lek.
8. Farmaceutski preparat za primenu kod ljudi, u veterini i/ili za zaštitu biljaka, naznačen time, što sadrži efektivnu količinu jedinjenja formule I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli prema jednom ili više zahteva 1 do 6, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim medijumom.
9. Farmaceutski preparat za upotrebu kod ljudi, u veterini i/ili za zaštitu biljaka , naznačen time, što sadrži efektivnu količinu jedinjenja formule I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli prema jednom ili više zahteva 1 do 6, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim medijumom u kombinacii sa drugim farmakološki akivnim sastojcima ili medikamentima.
10. Primena jedinjenja formule I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli prema jednom ili više zahteva 1 do 6 za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu akutnih ili hroničnih oštećenja, poremećaja ili indirektnih posledica na organe ili tkiva kao posledice ishemijskih ili reperfuzionih slučajeva, za lečenje ili profilaksu aritmija, kardialne ventrikularne fibrilacije koja ugrožava život, miokardialnog infarkta, angine pektoris, za lečenje ili profilaksu ishemijskih stanja srca, ishemijskih stanja perifernih i centralnog nervnog sistema ili kapi ili ishemijskih stanja perifernih organa i tkiva, za lečenje ili profilaksu stanja šoka, na primer, alergijskog šoka, kardiogenog šoka, hipovolemičnog šoka ili bakterijskog šoka, oboljenja u kojima celularna proliferacija predstavlja primarni ili sekundarni uzrok kancera, metastaze, hipertofije prostate i hiperplazije prostate, ateroskleroze ili poremećaja metabolizma lipida, visokog krvnog pritiska, naročito esencijalne hipertenzije, poremećaja centralnog nervnog sistema, naročito poremećaja koji su rezultat prekomerne eksitabilnosti CNS, kao što je epilepsija ili centralno idukovane konvulzije, ili poremećaja centralnog nervnog sistema, naročito stanja anksioznosti, depresija ili psihoza, za lečenje ili profilaksu insulin nezavisnog dijabetes melitusa (NIDMM) ili kasnijih oštećenja od dijabetesa, tromboza, poremećaja koje su rezultat endotelialne disfunkcije, isprekidane kaluđikacije, za lečenje ili profilaksu fibrotičkih poremećaja unutrašnjih organa, fibrotičkih poremećaja jetre, fibrotičkih poremećaja bubrega, fibrotičkih poremećaja sudova, fibrotičkih poremećaja pluća i fibrotičkih poremećaja srca, za lečenje ili pofilaksu srčane insufijencije ili kongestivne srčane insufijencije, za hronične ili akutne inflamatorne poremećaje, za poremećaje uzrokovane protozoom, malarije i kokodioze kod živine, i za upotrebu za hirurške operacije i transplantaciju organa, za zaštitu i čuvanje transplantanata za hirurške procedure, za prevenciju promena tkiva povezanih sa starenjem, za dobijanje lekova koji su usmereni protiv starenja ili za produženje života, za lečenje i redukciju kardiotoksičnih efekata u tirotoksikozama ili za dobijanje sredstava za dijagnostiku
11. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli prema jednom ili više zahteva 1 do 6 u kombinaciji sa drugim lekovima ili aktivnim sastojcima za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu akutnih ili hroničnih oštećenja, poremećaja ili indirektnih posledica na organe ili tkiva kao posledice ishemijskih ili reperfuzionih slučajeva, za lečenje ili profilaksu aritmija, kardialne ventrikularne fibrilacije koja ugrožava život, miokardialnog infarkta, angine pektoris, za lečenje ili profilaksu ishemijskih stanja srca, ishemijskih stanja perifernih i centralnog nervnog sistema ili udara ili ishemijskih stanja perifernih organa i tkiva, za lečenje ili profilaksu stanja šoka, na primer, alergijskog šoka, kardiogenog šoka, hipovolemičnog šoka ili bakterijskog šoka, oboljenja u kojima celularna proliferacija predstavlja primarni ili sekundarni uzrok kancera, metastaze, hipertofije prostate i hiperplazije prostate, ateroskleroze ili poremećaja metabolizma lipida, visokog krvnog pritiska, naročito esencijalne hipertenzije, poremećaja centralnog nervnog sistema, naročito poremećaja koji su rezultat prekomerna ekscitabilnost CNS, kao što je epilepsija ili centalno indukovane konvulzije, ili poremećaja centralnog nervnog sistema, naročito stanja anksioznosti, depresije ili psihoze, za lečenje ili profilaksu nezavisnog od insulina dijabetes melitusa (NIDMM) ili kasnijih oštećenja od dijabetesa, tromboza, poremećaja koje su rezultat endotelialne disfunkcije, isprekidane klaudikacije, za lečenje ili profilaksu fibrotičkih poremećaja unutrašnjih organa, fibrolitičkih poremećaja jetre, fibrolitičkih poremećaja bubrega, fibrolitičkih poremećaja sudova, fibrolitičkih poremećaja pluća i fibrolitičkih poremećaja srca, za lečenje ili pofilaksu srčane insufijencije ili kongestvne srčane insufijencije, za hronične ili akutne inflamatorne poremećaje, za poremećaje uzrokovane protozoom, malarije i kokodioze kod živine, i za upotrebu za hirurške operacije i transplantaciju organa, za zaštitu i čuvanje transplantanata za hirurške procedure, za prevenciju promena tkiva povezanih sa starenjem, za dobijanje lekova koji su usmereni protiv starenja ili za produženje života, za lečenje i redukciju kardiotoksičnih efekata u tirotoksikozama ili za dobijanje sredstava za dijagnostiku
12. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli prema zahtevu 10 u kombinaciji sa kardiotoksičnim ili citotoksičnim lekovima ili aktivnim sastojcima za dobijanje lekova sa redukovanim kardiotoksičnim i citotoksičnim osobinama.
13. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli samih ili u kombinaciji sa drugim lekovima ili aktivnim sastojcima prema zahtevu 10 i/ili 11 za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu akutnih ili hroničnih oštećenja, poremećaja ili indirektnih posledica na organe i tkiva kao posledice ishemijskih ili reperfuzionih slučajeva.
14. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli samih ili u kombinaciji sa drugim lekovima ili aktivnim sastojcima prema zahtevu 10 i/ili 11 za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu kardialne ventrikularne fibrilacije koja ugrožava život.
15. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli samih ili u kombinaciji sa drugim lekovima ili aktivnim sastojcima prema zahtevu 10 i/ili 11 za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu metastaza.
16. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli samih ili u kombinaciji sa drugim lekovima ili aktivnim sastojcima prema zahtevu 10 i/ili 11 za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu fibrotičkih poremećaja srca, srčane insufijencije ili kongestivne srčane insufijencije.
17. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli samih ili u kombinaciji sa drugim lekovima ili aktivnim sastojcima prema zahtevu 10 i/ili 11 za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu oboljenja koja su povezana sa NHE.
18. Primena jedinjenja formule I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli samih ili u kombinaciji sa drugim lekovima ili aktivnim sastojcima prema zahtevu 10 i/ili 11 za dobijanje lekova za lečenje ili profilaksu oboljenja koja su povezana sa NHE1.
19. Postupak za dobijanje jedinjenja kako je definisano u jednom ili više zahteva 1 do 6, u kome su R4 i R6 vodonik, naznačen time što a) kompleksni hidrid je reagovao sa ftalimidom ( formule II, pri čemu Rl, R2 i R3 imaju istu definiciju kao u zahtevima 1 do 6), b) dobijeni proizvod je zatim reagovao sa alkoksikarbonilmetilentrifenil-fosforanom u toluenu, ili sa trialkil fosfonoacetatom i bazom, c) dobijeni proizvod je reagovao sa gvanidinijum hloridom i bazom, ili sa gvanidinom na primer u alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma.
20. Postupak za dobijanje jedinjenja kako je definisano u jednom ili više zahteva 1 do 6, u kome su R4 i R6 vodonik, naznačen time što a) jedinjenje formule III (pri čemu Rli R2 imaju istu definiciju kao u zahtevima 1 do 6) je reagovalo sa alkoksikarbonilmetilentrifenil-fosforanom u toluenu, ili sa trialkil fosfonoacetatom i bazom b) dobijeni proizvod je reagovao sa aminom formule R3NH2(pri čemu R3 ima isto značenje kao stoje definisano u jednom ili više zahteva 1 do 6) i karbodiimidom c) dobijeni proizvod je reagovao sa gvanidinijum hloridom i bazom, ili sa gvanidinom na primer u alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma.
21. Postupak za dobijanje jedinjenja kako je definisano u jednom ili više zahteva 1 do 6, u kome je R4 alkil i R6 je vodonik, naznačen time, što: a) ftalimid (formule II kao što je definisano u zahtevu 19) je reagovao sa alkilmagnezijum halidom ili alkillitijum reagensom u etru b) dobijeni proizvod je reagovao sa alkoksikarbonilmetilntrifenil-fosforanom u toluenu, ili sa 1-etoksi-l-trimetilsiloksietilenom i Le\vis-ovom kiselinom c) dobijeni proizvod je reagovao sa gvanidinijum hloridom i bazom, ili sa gvanidinom na primer u alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma
22. Postupak za dobijanje jedinjenja kako je definisano u jednom ili više zahteva 1 do 6, u kome je R6 alkil, naznačen time, što: a) jedinjenje formule IV (pri čemu Rl do R5 imaju istu definiciju kao u zahtevima 1 do 6), je reagovao, u prisustvu litijum diizopropilamida, sa R6-Hal, gde je Hal F, Cl, Brili J. b) dobijeni proizvod je reagovao sa gvanidinijum hloridom i bazom, ili sa gvanidinom na primer u alkoholu koji ima 1, 2, 3 ili 4 ugljenikova atoma Zahtev za isparavljanje očiglednih grešaka Molba da strane 73, 74 i 74 opisa, na kojima je, između ostalog, opisano dobijanje jedinjenja primera 21, budu zamenjene odgovarajuim ispravljenim stranama. U prilogu su date ispravljene strane 73, 74 i 75 na engleskom jeziku koje odgovaraju originalnim stranama 73, 74 i 75 PCT prijave kao stoje objavljeno. Na ispravljenoj strani 73, red 26 dodana je sledeća fraza "[etil estar 3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol -l-il]-sirćetne kiseline". Na ispravljenoj strani 74, red 5 i na ispravljenoj strani 75, red 5, dodanaje fraza " i 3-hidroksi-2-(2, 2, 2-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-l-on". Prema tome, molimo da se izmene ekvikalentne strane u odgovarajućem tekstu nacilnalne prijave i da se u saglasnosti sa vašim nacionalnim zakonom o patentima ova ispravka autorizuje i da se originalne strane (koje odgovaraju stranama 73, 74 i 75 u engleskom tekstu) zamene ispravljenim novim sranama, u kojima treba uneti samo gore pomenute ispravke. Razlozi za ispravljanje: Tokom pripreme prijave gore pomenute fraze su slučajno zaboravljene. Prosečnom stručnjaku je očigledno da su tokom redukcije 2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-1,3-diona sa KBH4 (opisanom u Primeru 21 c), str.75) stvorena dva regioizomera, naime 3-hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-1,3-on i 3-hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-1,3-on. Takođe je očigledno daje smeša oba regioizomera reagovala u sledećem postupku (opisanomu Primeru 21 b), str. 74) pošto reakcija daje odgovarajuće regioizomeriske proizvode, naime etil estar 3-[okso-2-(2, 2, 2-tritluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol- l-il]-sirćetne kiseline i etil estar [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-il]-sirćetne kiseline (cf. detaljni iskazi na str 74, red 24 do str 75 red 3, koji se tiču dobijenih izomera). Pošto su dva regioizomera proizvodi reakcije opisani u primer 21 b), očigledno je daje naslov primera 21 b) na str. 73, red 26, trebao da ovo odslika. Ispravljena formulacija u Primeru 21 c) na str. 75, red 5, i primera 21 b) na str. 74, red 5 i str 73, red 26, odgovara formulaciji u drugim primerima prijave u kojima je prisutna slična situacija, kao što je primer 10 (sf. Primer 10 c) na str 46, red. 31, i Primer 10 b) na str. 46, red 8 i red 2) ili primer 15 (cf. primer 15 c) na str 57, red 16, i primer 15 b) na str 56, red 20 i red 14). Dalji dokazi da se nameravalo da se koriste formulacije u primerima 21 b) i 21 c) koje su sugerisane ispravkama, proizlaze iz činjenice daje krajnji proizvod primera 21 N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il]-acetil}gvanidin koji je jasno identifikovan u Primeru 21 a) svojim imenom, svojom strukturnom formulom i svojim neposrednim prethodnikom etil estrom 3-[okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline specifikovanim na str. 73, red 17. Ovaj regiostereoiomer očigledno ne bi mogao da bude dobijen korišćenjem 3-hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-l,3-ona. Ovo takođe pokazuje da smo očigledno slučajno zaboravili da pomenemo 6-trifluorometil regioizomer u Primeru 21 c) na str. 75, red 5, i u Primeru 21 b) na str 74 red 5. Sta više, u primerima 46 i 47 na str. 104 i 106, u kojima se opisuje hiralno razdvajanje (R) i (S) enantiomera 6-trifluoromctil regioizomera i 5-trifluorometil regioizomera, naznačeno je daje 6-regioizomer jedinjenje primera 21 i da je 5-regioizomer koji je korišćen u hiralnoj separaciji sintetizovan analogno Primeru 21 koristeći etil estar 3-[okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-izoindol-1 -il]-sirćetne kiseline kao početni materijal (cf. str 105, red 21). Ovi iskazi potvrđuju da smo nameravali da pomenemo 5-trifluorometil regioizomer u Primeru 21 b) na str 73, red 26. Ova neslaganja u dobijanju primera 21 su zbog toga očigledna, i isto tako je očigledno da se ništa drugo nije moglo nameravati za vreme pripreme ove prijave osim onog što je ponuđeno u ispravci. oblasti 20°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) na temperaturi od oko 40°C. Ostatak je stavljen u dihlorometan i ispran dva puta sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organske faze su razdvojene posle taloženja, osušene u pisustvu magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrisane do suvog pod sniženim pritiskom (2 kPa) u temperaturskoj oblasti od 40°C. Tako je dobijeno 6.0 g N-izobutil-3-rnetilftalimida u obliku ulja boje karamela. (Rf = 0.76, hromatografija u tankom sloju na silika gelu, eluent: dihlorometan Primer 21 a) N-{2-[3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]acetil}-gvanidin Suspenzija 1.24 g gvanidinijum hidrohlorida i 1.21 g KOtBu u 30 ml anhidrovanog DMU je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Zatim, dodan je rastvor 0.8 g etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline u 5 ml anhidrovanog DMF i smeša mešana tokom 17 sati na sobnoj temperaturi. Smeša je tada sipana u 100 ml vode i vrednost pH podešena na 8 pomoću vodenog rastvora HCI. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta koristeći po 100 ml EA. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu. Hromatografija na silika gelu korišćenjem RA/MeOH 3:1 dala je 0.56 g amorfne čvrste faze (Rf(EA/MeOH 3:1) = 0.45, MS (ES+) : 383 (M+l)+) b) Etil estar [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-I-il]-sirćetne kiseline i etil estar [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il]-sirćetne kiseline
0.84 gNaHje suspendovano korišćenjem 60 ml anhidrovanog DME i 4.5 ml etil estra (dietoksi-fosforil)-sirćetne kiseline dodanoh na temperaturi između 10°C i 25°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta pa je zatim dodan rastvor 4.2 g 3-hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-ona i 34iidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-ona u 20 ml anhidrovanog DME. Reakciona smeša je refluksovana tokom 1 sata, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Tada je dodano 100 ml EA i smeša isprana dva puta sa 200 ml poluzasićenog vodenog rastvora NaHC03. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu. Hromatografija je izvedena na Merck Lichrospher RP18, 10 pm, 50<*>250 mm. Uslovi su sledeći: Protok: 150 ml/min Eluent A: voda + 2% TFA Eluent B: acetonitril Minut 00: 90% A, 10% B Minut 04: 90% A, 10% B Minut 24: 25% A, 75% B Minut 25: 5% A, 95% B Minut 30: 5% A, 95% B Minut 31: 90% A, 10% B Minut 35: 90% A, 10% B Prinos je bio 3.3 g smeše regioizomera etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifIuoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-il]-sirćetne kiseline i etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-l-il]-sirćetne kiseline. Hromatografija na silika gelu korišćenjem DIP je dala prinos od 0.8 g etil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-1 H-izoindol-1 -il]-sirćetne kiseline kao bezbojnog ulja Rr(DIP) = 0.37, MS (ES+) : 370 (M+l)<+>) i 0.63 getil estra [3-okso-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-1-ilj-sirćetne kiseline kao bezbojnog ulja (Rt-(DIP) = 0.30, MS (ES+) : 370 (M+l)<+>) c) 3-Hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-2, 3-dihidro-lH-izoindol-l-on i 3-Hidroksi-2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-6-trifluorometil-2, 3-dihidro-l H-izoindol-1-on 5.5 g 2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-izoindol-l ,3-diona je rastvoreno pomoću 150 ml MeOH (anhidrovanog) i 1.0 g KBH4dodanih na sobnoj temperaturi. Smeša je ostavljena na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, ohlađena do 0°C i sipana u 100 ml vode na 0°C. Metanol je uklonjen u vakumu. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa po 100 ml CH2CI2. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu da bi se dobio prinos od 4.2 g viskoznog ulja (Rf(DIP) = 0.37, MS (DCI) : 300 (M+l)<+>) d) 2-(2, 2, 2-trifluoro-etil)-5-trifluorometil-izoindol-l ,3-dion
5.0 g 5-trifluorometil-izobenzofuran-l,3-diona je rastvoreno u 50 ml toluena (anhidrovanog) i dodano 4.6 g 2, 2, 2-trifluoro-etilamina. Smeša je ostavljena na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Tada je dodano 50 mg toluen-4-sulfonske kiseline i smeša refluksovana tokom 5 sati. Dodano je 200 ml EA i smeša isprana dva puta sa 50 ml 10% vodenog rastvora Na2C03. Organski sloj je sušen u prisustvu MgS04i rastvarač uklonjen u vakumu da bi se dobio prinos od 5.5 g viskoznog ulja (Rf(DlP) = 0.57, MS (DCI) : 298 (M+l)<+>) e) 5-trifluorometil-izobenzofuran-l,3-dion
25.0 g 4-trifluorometil-ftalne kiseline je rastvoreno u 50 ml HOAc i dodano 15.1 ml sirćetnog anhidrida. Smeša je refluksovana 6 sati. Rastvarač je uklonjen u vakumu. Ostatak je tretiran"tri puta sa po 50 ml toluena, praćeno svaki put uklanjanjem rastvarača u vakumu. Prinos 23.1 g bezbojnog ulja. (Rf(CH2Cl2) = 0.60).
YUP104804 2002-06-03 2003-05-20 Derivati n-((3-okso- 2,3-dihidro-1h-izoindol-1-il) acetil) gvanidina kao inhibitori nhe-1 za lečenje infarkta i angine pektoris RS51636B (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0206783A FR2840302B1 (fr) 2002-06-03 2002-06-03 Derives d'isoindolones, procede de preparation et intermediaire de ce procede a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques les renfermant
PCT/EP2003/005279 WO2003101450A1 (en) 2002-06-03 2003-05-20 N- ((3-oxo2, 3-dihydro-1h-isoindol-1-yl) acetyl) guanidine derivatives as nhe-1 inhibitors for the treatment of infarction and angina pectoris

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RS104804A true RS104804A (sr) 2006-12-15
RS51636B RS51636B (sr) 2011-08-31

Family

ID=29558914

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
YUP104804 RS51636B (sr) 2002-06-03 2003-05-20 Derivati n-((3-okso- 2,3-dihidro-1h-izoindol-1-il) acetil) gvanidina kao inhibitori nhe-1 za lečenje infarkta i angine pektoris

Country Status (41)

Country Link
US (2) US7078428B2 (sr)
EP (1) EP1528923B1 (sr)
JP (1) JP4634793B2 (sr)
KR (1) KR101149771B1 (sr)
CN (1) CN1290833C (sr)
AR (1) AR039927A1 (sr)
AT (1) ATE324889T1 (sr)
AU (1) AU2003240677B2 (sr)
BR (1) BR0311556A (sr)
CA (1) CA2488373C (sr)
CY (1) CY1105115T1 (sr)
DE (1) DE60305042T2 (sr)
DK (1) DK1528923T3 (sr)
EC (1) ECSP045472A (sr)
EG (1) EG24784A (sr)
ES (1) ES2261939T3 (sr)
FR (1) FR2840302B1 (sr)
HN (1) HN2003000162A (sr)
HR (1) HRP20041151B1 (sr)
IL (1) IL165520A (sr)
JO (1) JO2357B1 (sr)
MA (1) MA27308A1 (sr)
ME (1) MEP27508A (sr)
MX (1) MXPA04011931A (sr)
MY (1) MY142502A (sr)
NO (1) NO329224B1 (sr)
NZ (1) NZ536953A (sr)
OA (1) OA12864A (sr)
PA (1) PA8574701A1 (sr)
PE (1) PE20040531A1 (sr)
PL (1) PL372188A1 (sr)
PT (1) PT1528923E (sr)
RS (1) RS51636B (sr)
RU (1) RU2318809C2 (sr)
SI (1) SI1528923T1 (sr)
TN (1) TNSN04237A1 (sr)
TW (1) TWI286545B (sr)
UA (1) UA81118C2 (sr)
UY (1) UY27835A1 (sr)
WO (1) WO2003101450A1 (sr)
ZA (1) ZA200409094B (sr)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10356717A1 (de) * 2003-12-02 2005-07-07 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Verfahren zur Herstellung von (3-Oxo-2,3-dihydro-1H-isoindol-1-yl)-acetylguanidin-Derivaten
US7531569B2 (en) 2003-12-02 2009-05-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Process for preparing (3-oxo-2,3-dihydro-1H-isoindol-1-yl) acetylguanidine derivatives
KR100518184B1 (ko) * 2003-12-27 2005-10-04 한국화학연구원 퓨란카보닐구아니딘 유도체, 그의 제조방법 및 그를포함하는 약학적 조성물
TW200613272A (en) 2004-08-13 2006-05-01 Astrazeneca Ab Isoindolone compounds and their use as metabotropic glutamate receptor potentiators
US7807706B2 (en) 2005-08-12 2010-10-05 Astrazeneca Ab Metabotropic glutamate-receptor-potentiating isoindolones
US20070161648A1 (en) * 2005-10-14 2007-07-12 Hughes Terry V Substituted dihydro-isoindolones useful in treating kinase disorders
TW200812962A (en) * 2006-07-12 2008-03-16 Astrazeneca Ab New compounds I/418
TWI417100B (zh) 2007-06-07 2013-12-01 Astrazeneca Ab 二唑衍生物及其作為代謝型麩胺酸受體增效劑-８４２之用途
US7790760B2 (en) 2008-06-06 2010-09-07 Astrazeneca Ab Metabotropic glutamate receptor isoxazole ligands and their use as potentiators 286
GB0811643D0 (en) 2008-06-25 2008-07-30 Cancer Rec Tech Ltd New therapeutic agents
WO2012003147A1 (en) * 2010-07-01 2012-01-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Isoindolone m1 receptor positive allosteric modulators
AR088320A1 (es) 2011-10-14 2014-05-28 Incyte Corp Derivados de isoindolinona y pirrolopiridinona como inhibidores de akt
CN103193794B (zh) * 2013-04-12 2016-04-06 中国药科大学 一种异吲哚酮并异噁唑类稠环化合物及其合成方法
GB201517217D0 (en) 2015-09-29 2015-11-11 Astex Therapeutics Ltd And Cancer Res Technology Ltd Pharmaceutical compounds
GB201517216D0 (en) 2015-09-29 2015-11-11 Cancer Res Technology Ltd And Astex Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
CN106316922B (zh) * 2016-08-17 2019-02-01 华东师范大学 一种含c-3全取代氧化吲哚衍生物及其合成方法和应用
US10344002B2 (en) 2016-09-26 2019-07-09 Nusirt Sciences, Inc. Compositions and methods for treating metabolic disorders
GB201704966D0 (en) 2017-03-28 2017-05-10 Astex Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
GB201704965D0 (en) 2017-03-28 2017-05-10 Astex Therapeutics Ltd Pharmaceutical compounds
CN110664803B (zh) * 2019-09-19 2023-08-29 中山大学 异吲哚酮类化合物在制备防治溶骨性疾病药物中的应用

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2708605A1 (fr) * 1993-07-30 1995-02-10 Sanofi Sa Dérivés du N-sulfonylindol-2-one, leur préparation, les compositions pharmaceutiques en contenant.
DK0612723T3 (da) 1993-02-20 1998-03-30 Hoechst Ag Substituerede benzoylguanidiner, fremgangsmåde til fremstilling, deres anvendelse som lægemiddel, som inhibitor af den cellulære Na+/H+-udbytning eller som diagnostikum samt lægemiddel med indhold deraf
FR2735166B1 (fr) * 1995-06-08 1997-08-29 Aerospatiale Procede de fabrication d'un panneau ou analogue a proprietes structurale et acoustique et panneau ainsi obtenu
DE19737224A1 (de) 1997-08-27 1999-03-18 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Pharmazeutisches Kombinationspräparat aus einem Inhibitor des Natrium-Wasserstoff-Austauschers und einem Arzneimittel zur Behandlung von Herz-Kreislauferkrankungen
DE19737463A1 (de) 1997-08-28 1999-03-04 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Verwendung von Inhibitoren des Natrium-Wasserstoff-Austauschers zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Erkrankungen, die durch Protozoen verursacht werden
DE19738604A1 (de) 1997-09-04 1999-03-11 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Die Verwendung von Hemmern des Natrium-Wasserstoff-Austauschers zur Herstellung eines Medikaments zur Verminderung der Giftigkeit cardiotoxischer Stoffe
PT1056729E (pt) * 1998-02-27 2005-04-29 Pfizer Prod Inc Derivados de n-[ciclo di- ou tri-aza di-insaturado de cinco membros substituido) carbonil] guanidina para o tratamento de isquemia
DE19859727A1 (de) 1998-12-23 2000-06-29 Aventis Pharma Gmbh Die Verwendung von Hemmern des Natrium-Wasserstoff-Austauschers zur Herstellung eines Medikaments zur Verhinderung von altersbedingten Organ-Dysfunktionen, altersbedingten Erkrankungen zur Lebensverlängerung
US6534651B2 (en) * 2000-04-06 2003-03-18 Inotek Pharmaceuticals Corp. 7-Substituted isoindolinone inhibitors of inflammation and reperfusion injury and methods of use thereof
AU2001235896A1 (en) * 2000-04-28 2001-11-12 Pfizer Products Inc. Sodium-hydrogen exchanger type 1 inhibitor (nhe-1)
DE10046993A1 (de) 2000-09-22 2002-04-11 Aventis Pharma Gmbh Substituierte Zimtsäureguanidide, Verfahren zur ihrer Herstellung, ihre Verwendung als Medikament sowie sie enthaltendes Medikament
PT1385823E (pt) * 2001-04-09 2007-01-31 Novartis Vaccines & Diagnostic Compostos de guanidino como agonistas do receptor de melanocortina-4 (r-mc4)

Also Published As

Publication number Publication date
FR2840302B1 (fr) 2004-07-16
BR0311556A (pt) 2005-04-12
TWI286545B (en) 2007-09-11
ZA200409094B (en) 2005-08-31
PA8574701A1 (es) 2004-05-07
DK1528923T3 (da) 2006-09-04
JP2005533034A (ja) 2005-11-04
TNSN04237A1 (en) 2007-03-12
AU2003240677A1 (en) 2003-12-19
US7589117B2 (en) 2009-09-15
PL372188A1 (en) 2005-07-11
US20040048916A1 (en) 2004-03-11
RU2004138789A (ru) 2005-06-27
CY1105115T1 (el) 2010-03-03
CN1290833C (zh) 2006-12-20
AR039927A1 (es) 2005-03-09
US7078428B2 (en) 2006-07-18
WO2003101450A1 (en) 2003-12-11
JP4634793B2 (ja) 2011-02-16
JO2357B1 (en) 2006-12-12
ES2261939T3 (es) 2006-11-16
HK1076383A1 (en) 2006-01-20
KR20050010855A (ko) 2005-01-28
MA27308A1 (fr) 2005-05-02
US20060148880A1 (en) 2006-07-06
NO20045660L (no) 2004-12-27
NO329224B1 (no) 2010-09-20
UY27835A1 (es) 2003-12-31
PE20040531A1 (es) 2004-09-27
DE60305042T2 (de) 2007-05-24
NZ536953A (en) 2007-10-26
KR101149771B1 (ko) 2012-06-08
RS51636B (sr) 2011-08-31
EG24784A (en) 2010-09-01
MEP27508A (en) 2010-06-10
EP1528923B1 (en) 2006-05-03
IL165520A0 (en) 2006-01-15
ECSP045472A (es) 2005-01-28
UA81118C2 (en) 2007-12-10
ATE324889T1 (de) 2006-06-15
MY142502A (en) 2010-11-30
OA12864A (en) 2006-09-15
HN2003000162A (es) 2004-05-05
CA2488373C (en) 2012-07-17
IL165520A (en) 2009-12-24
FR2840302A1 (fr) 2003-12-05
AU2003240677B2 (en) 2008-07-17
HRP20041151B1 (hr) 2013-06-30
DE60305042D1 (de) 2006-06-08
TW200404780A (en) 2004-04-01
CN1658869A (zh) 2005-08-24
PT1528923E (pt) 2006-08-31
RU2318809C2 (ru) 2008-03-10
HRP20041151A2 (en) 2005-06-30
MXPA04011931A (es) 2005-03-31
CA2488373A1 (en) 2003-12-11
SI1528923T1 (sl) 2006-08-31
EP1528923A1 (en) 2005-05-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS104804A (sr) Derivati n-((3-okso 2,3-dihidro-1h-izoindol-1-il) acetil gvanidina kao inhibitori nhe-1, za lečenje infarkta i angine pektoris
US8283374B2 (en) Process for preparing (3-oxo-2,3-dihydro-1H-isoindol-1-yl) acetylguanidine derivatives
CA2548020C (en) Method for producing (3-oxo-2,3-dihydro-1h-isoindol-1-yl)acetylguanidine derivatives
MXPA05000269A (es) Derivados de 3-guanidinocarbonil-1-heteroaril-indol procedimiento de preparacion, su uso como medicamentos, y composiciones farmaceuticas que los contienen.
EP1641791A1 (en) 3-(guanidinocarbonyl)heterocycle derivatives, preparation process and intermediates of this process, their use as medicaments, and pharmaceutical compositions including them
HK1097525B (en) Method for producing (3-oxo-2,3-dihydro-1h-isoindol-1-yl) acetylguanidine derivatives