PT94041B - Processo para a preparacao de analogos de nucleosidos, em particulares derivadosde fosfonometoximetiloxi-purina/pirimidina e derivados de 4'-fosfonometoxitetra-hidrofuranil-1'purina/pirimidina, com accao anti-viral e anti-tumoral e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE ANÁLQOOS DE NUCLEOSIDOS, EM

PARTICULAR DERIVADOS DE FOSFONOMETOXIMETILOXI-PURINA/ /PIRIMIDINA E DERIVADOS DE 4^r-FOSFONOMETOXITPTRA-EIDROFURANIL-l*-PURINA/PIRIMIDINA COM ACÇÃO ANTI-VIRAL

E ANTI—TUMORAL E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS

QUE OS CONTÊM

ANTECEDENTES DA' INVENÇÃO

Âmbito da Invenção ··»

A presente invenção diz respeito a analogos de nucleõsidos, às suas composições e ã sua utilização,. Em particular, a presente invenção diz respeito a derivados fosfonornetoximetiloximetil—purina/pirimidina e a derivados 4 '-fosfonometoxitetrahi^ drofuranil—1'-purina/pirimidina, anti-virais (incluindo anti—re_ trovirais1 e anti-tumorais,

Informação de Antecedentes

As doenças infecciosas virais são consideradas como um importante problema mêdioo. 0~- progresso contra as doenças infecciosas' virais reguer o desenvolvimento de medicamentos com actividade anti-viral selectiva, mas que sejam benignos para as linhas de células normais, Vãrios dos agentes anti-virais , presentemente em estudo, que parece possuirem alguma selectividade, são analogos de nucleosidos. Em geral, estes compostos ff são análogos estruturais dos nucleósidos, gue ocorrem naturalmen_ te. A modificação estrutural, quer no núcleo da base' purínica quer da base pirimidinica e/ou do componente sacãrido resulta num derivado nucleosidico, modificado sinteticamente, que, quando in corporado em processo de formação de ãcido nucleico virai, actua para interromper a síntese posterior de ãcido nucleico viral_K A eficacia destes agentes anti-virais depende da conversão selecti^ va por meio de enzimas virais, mas não por meio de enzimas do hos_ pedeiro, no análogo nucleotídico correspondente _ que, depois, se converterem trifosfato e ocorre a incorporação no ãcido nucleico virai. Um problema com esta estratégia anti-viral ' tem sido o aparecimento de certas estirpes virais .c-ugcs enzimas promovem* infe— lizmente, a fosforilização dos análogos núcleosídicosPara evi^ tar este problema, os análogos nucleotíâicos intactos parecem ser, potencialmente, bastante uteis como agentes anti-virais para incorporação no ãcido nucleico virai.

Reist e Strum em PCT/US 84/00737, publicado a β de Dezembro de 1984, referem novos análogos do ãcido fosfónico .dos fosfa^ tos nucleosídicos que são uteis como agentes anti-virais para incorporação no ADN virai. A fórmula estrutural destes compostos apvesenta-se a seguir:

R,

R1' /

/ >4 .Nos compostos de Reist e Strum₃ o simbolo B representa uma base purinica ou pirimidinica; os simbolos R^ e R^em conjunto₃ completam um açúcar beta-pentofuranose ou o símbolo R^ re_ presenta um átomo dè Hidrogénio e o simbolo R% representa um ato. mo de hidrogénio ou um grupo hidroximetil; o simbolo R$ represen ta um ãtomo de hidrogénio ou um grupo OH; o simbolo X representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo OH ou conjuntamente com o sim_ bolo X representam um· grupo carbonilo oxigenado e o simbolo X pçf de representar₃ também₃ um ãtomo de hidrogénio; os simbolos Z^ e Z% 3 cada um₃ um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alguilo

Semelhantemente₃ a síntese e a actividade anti—vírus de Herpes dos derivados fosfato e fosfonato de 9-/ (1₃ 3~dihidroxi— -2-propóxi)métilifguanina (Formula 21 foram descritas por Prisbe et al. ₃ em J. Med. Chem., 29 ₃ (1996).3 671.

(X-0₃ ch₂1

2f_

Outros anãlpgos nucleotídicos de fosf onato âe. formula ge~ ral na qual o simbolo X representa um grupo CH^₃ foram descri_ /

-4-.

tos por R. M. Riggs et al, ₃ Nucleosid.es and Nucleotides ₃ (1989)

8_ (5&6) 1119-1120; D,E.R. Bouton et al. ₃ Tetrahedvon Letters₃ 3Q₃ nÇ 37 (1972) 4969-4972; e H. Tanaka et al.₃ Tetrahedron Letters₃ 30 (1989) 2567-2570.

Os anãlogos fosfónicos de adenina (Formula 3') e suas sín teses estão descritas no pedido de patente ide invenção Britânica de Eoly et al. ₃ GB2 134 907A publicado a 22 de Agosto de 1984,

r₂~chor₄

3'

Na fórmula 3j os símbolos R% e R^ representam₃ cada um ₃ um ãtomo de hidrogénio ou₃‘-:conjuntamente, completam um núcleo ri~ bonucleosi.dico ; e ambos os símbolos R^ representam* alt.ernadamen_ te* um ãtomo de hidrogénio e um grupo -CE^píO) (OE)_g,

Um exemplo preferido ãe um destes compostos * conhecido como (3_)—EPMPA (Formula 4')* foi descrito por DeClerq et_ al. *. Na

XJ /

ture , 323 C1986), 484-467 e, antes, por Ho-ly. e A al, , Nuelela Acids Research, Symposium Series nQ 14, 1984, pp. 277-78. Compostos fosfonatos que são anãlogos de HPMPA estão descritos na patente de Intenção sul-afrlcana 1987/8607, De acordo com a ex_ perlenela dos Inventores CSi-HTPMPA ê, apenas, ligeíramente actl vo em murganhos inoculados com vlrus-2 âe Herpes simplex, Em um registo de 21 dias, 30% âe um grupo de animais tratados l. p, com SQ mg/kg/dia de CsJ -RPMPA sobreviveu.

Á1

Nao hã doutrina contida nestas referendas ou uma sua com blnação sugerida que possam tornar evidenteo-os compostos, as c&.m poslçoes e as suas utilizações considerados na presente Invenção.

Sumario da Invenção

Os derivados fosfonometoxlmetll-purlnd: e plrlmldfna, os derivados 4 '-fosfonometoxltetrahldro-2—furll-9-purlna e 1-plrlml ãlna, os derivados- fosfonometoxlmetoxlmetll-9—purlna e 1-plrlmldina que tem um grupo fosfonato cíclico e os derivados 4 '-fosfonometoxitetrahidro-2-furil-9~purina e 1-Fpirimidina que tem um gru po fosfonato eícVico foram sintetizados e mostraram possúirlaotividade util anti-viral e anti-tumoral, presente invenção diz respeito a derivados fosfonometo_ ximetoximetil-purina' e pirimidina de formula geral

na qual₃ os símbolos X e X'₃ iguai-s ou diferentes* representam ca_ da um, um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^cr^ce>

os símbolos R e R^r* iguais ou diferentes* representam sa da um* um ãtomo de hidrogénio ou wn grupo alquilo C^-C₆3 hidroxialquilo Cj-C_s ou alcanoílo .^2^7^{3 e} símbolo B representa uma base purínica substituída na posição 9 ou uma base pirimidínica substituída na po* sição 1* escolhidas, entre o grupo. que consiste em xantina* xantina substituída.· por exemplo * hipoxantina* guanina* guanina substituída* por exemplo*

dbromoguanina, 8-cloroguanina, 8-aminoguanina, 8—hidraz· noguanina, 8-hidroxiguanina, 8—metilguanina, 8—tioguani na e ,.3-diesazaguanina, purina, purina substituída, por exemplo, 2-aminopurina, 2,6-ãiaminópurina, citosina, ci· tosina substituída, pôr exemplo, S-etilcitosina e 5-metilcitosina, timina, uracilo-,· uraeilo substituído na' po sição 5, por exemplo, S—clorouracilo, 5—bromouraeilo,

S-etiluracilo, 5—iodouracilo, S-propiluracilo & 5-^vinil -uracilo, adenina e adenina substituída, por exemplo,

3-diesazaadenina, e aos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico,

A, presente invenção diz respeito, também, a um derivado A^fosfonometoxitetrahiâroCou dihidroifur-2~il-purina ou pirimi dina de formula geral

(III na qual os simbolos X e X’, iguais ou diferentes, repre sentam, cada um, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo com 1 ã 8 átomos de carbono’e a linha quebrada re presenta uma ligação dupla eventual,

—8 — os símbolos ϊ e Z, iguais ou diferentes, representam, ca da um, um grupo alquilo C^-C_βΛ eventualmente, substituído,. ou conjuntamente, constituem um átomo de oxigénio ou um grupo metileno, caso em que, a linha quebrada represen ta uma ligação simples, e ô símbolo B representa uma base puriniea substituída na posição 9 ou uma base pirimidíniea substituída na posição 1, escolhidas entre o grupo que consiste em xantina, san tina substituída, por exemplo, hipoxantina, guanina, gua nina substituída, por exemplo, 8-bromoguanina, 8—cloro— guanina, 8-me tilguanina, 8-tioguanina e '''Z-7.es az aguanina, purina, purina substituída, por exemplo, 2-aminopurina , 2,6-diaminopurina, citosina, citosina substituída, por exemplo, 5-etilcito sina e 5-metilcitosina, timina, -uraeilo, uracilo substituído na posição 5, por exemplo, 5-clo rouracilo, 5-bromouracilo, 5-etiluracilo, 5-iodouracilo,

S-propiíuracilo e 5—viniluracilo, adenina e adenina subs_ tituídg, por exemplo, 3-díesazaadenina, e aos seus 'sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico_s

A presente invenção diz respeito·,; também, a um derivado 4'-fosfonometoxitetrahidrofur-2—il—purina ou pirimidina que possui um grupo, fosfonato cíclico de formula geral

-9f/r, //

um na qual, o simbolo X representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo- alquilo com 1 a S átomos de carbono, o simboloHRrepresenta um ãtomo de hidrogénio ou um grupo OH e o simbolo B representa uma base puriniea substituida na posição 9 ou uma base pirimidiniea substituida na posição 1, escolhidas entre o grupo que consiste em xantina, xantina substituida, por exemplo, hipoxantina, g.uanina, guanina substituida, por exemplo, 8-bromoguanina, 8-cloroguanina, 8—amino guanina, 8— hidr as ino guanina, 8—hidroxi. guanina, 8—me tilguanina, 8-tioguanina, e 3—tdesasaguanina, purina, purina substituida, por exemplo, 2—aminopuri. na, 2, β—diaminopurina, citosina, citosina substituida , por exemplo, 5—etilcitosina e 5-metilcito sina, timina, uracilo, uracilo substituida na posição 5, por exemplo, 5-clorouracilo, 5-bromouracilo, 5-etiluracilo, 5-iodoura_ cilo, 5-propiluracilo e -5-viniluracilo, adenina, 'e. .adenina substituida, por exemplo 3—?â_esasaadenina,

e aos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico.

A presente invenção diz aindairespeito aos derivados' fosfonometoximetoximetií-9-substituido-purina ou 1-substituíão-pirimiãina que possuem um grupo fosfonato ciclico, de fórmula geral,

na qual, o símbolo X reresenta um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo com 1 a 6 ãtomos de carbono, o sím. bolo R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquiA: lo com 1 a 6 ãtomos de carbono, ou um grupo alcanoílo com 2 a 7 ãtomos de carbono, e o símbolo B representa uma base purínica ou pirimidínica escolhidas entre o grupo que consiste em xantina, xantina substituída, por exemplo, hipoxantina, guanina, guanina substituída, por exemplo 8-bromo_ guanina^ ;.8 - cloro guanina8-amino guanina, 8-hidrazino guanina, 8-hidroxiguanina, 8-metílguanina, 8-tioguanina &d.esazaguanina, purina,· purina substituída, por exemplo , 2-aminopurina,

2,6-diaminopurina, citosina substituída, por exemplo, 5-etil citosina e 5-metilcitosina, timina, uracilo, uracilo substituído na posição 5, por exemplo, 5-clorouracilo, 5-bromouracilo, 5-etiluracílo, 5-ioâouracilo, 5-propiluracilo e

—5-viniluracilo, adenina, adenina— substituida, por exemplo, 3—ããi$sazaadenina, -e aos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico,

A presente invenção diz respeito também, aos· compostos intermédios de formula geral

na qual, o simbolo B representa uma base pú,rin,ica substi tuida na posição 9 ou uma base pirimidinica substituida na posição 1, escolhidas entre o grupo que consiste em xantina; xantina substituida, por exemplo, hipoxantina, guanina, guanina substituida, por exemplo, 8-bromoguanina, 8-cloroguanina, 8-aminoguanina, 8-hidrazinoguanina , 8-hidroxiguanina, 8-metilguanina, 8—tioguanina e 3-desa-~ zaguanina, purina, purina substituida, por exemplo, _ ::

2—aminopurina, 2,6—diaminopurina, citosina, citosina sub tituida, por exemplo, 5—etilcitosina e S—metilcitosina , timiná, uracilo, uracilo substituido na posição 5, por exemplo, 5—clorouracilo, 5-bromouracilo, 5-etiluracilo , 5-iodouracilo, 5-propiluracilo & 5-viniluracilo, adenina e adenina substituida, por exemplo, 3—rfLesazaadenina;

ou de formula geral /

ί -12,<a

ηα quaZ, ο símboZo X representa um átomo de haZogeneo, por exempZo, de cloro, bromo, iodo ou fluor-, o símbolo X representa um átomo de halogeneo, por esômplo, de cloro, bromo, iodo ou fluor, ou um grupo feniltio ou feniZseZeno e o símbolo B representa uma base pu riniea substituída na posição 9 ou uma base pirimidínica substituída na posição 1, escolhidas entre o grupo que consiste em xantina, xantina substituída, por exemplo , hipoxantina, guanina, guanina substituída, por exempZo,

8-bromo guanina, 8—cloro guanina,. 8—amino guanina, 8—hidra, zinoguanina, 8-hidroxiguanina, 8-metiZguanina, 8-tiogua nina e 3-diazaguanina, purina, purina substituída, por exempZo, 3-aminopurina,. 2,6-âiaminopurina, citosina, ci_ tosina substituída, por exempZo 5-etilcitosina, e S-metil citosina, timina, uracilo, uraciZo substituído na posição 5, por exempZo, 5-clorouracilo, 5-bromouracilo, S-etiluracilo, 5—iodouracilo, 5-propiluracilo e 5—viniluracilo, adenina e adenina swbstituíd.a, por exempZo,

3—ãesazadenina;

ou a seguinte formula geral

CVXfl

3— ./

Τζ na qual., ο símbolo Β representa guanina, guanina substf tuída, por exemplo, 8—bromoguanina, 8 —cl oro guanina, '

8-aminoguanina, 8.-hidrazinoguanina, 8-kidroxiguanina ,

8-me tilguanina, 8-tioguanina e 3-desazccguanina, cltosl— na ou citosina substituida, por exemplo, 5-etilcitosina e 5-metilcitosina;

ou a seguinte formula geral:

CVIII) na qual, 0 simbolo I representa um atomo de halogéneo , por exemplo, cloro, fluor, bromo ou iodo, ou um grupo fe niltio ou fenilseleno, o simbolo R representa um atomo de hidrogénio ou um grupo alquilo com 1 a 6 átomos de carbono e o simbolo ,B representa uma base purínica ou uma base pirimidinica/escolhidas entre o grupo que consiste em xantina, xantina substituída, por exemplo, hipo~ xantina, guanina, guanina substituída, por exemplo,

8—bromo guanina, 8—cl oro guanina,: 8—amino guanina, 8-hidra zinoguanina, 8—hidroxiguanina, 8—metilguanina, 8—tiogua— nina e 3-desazaguanina, purina, purina substituída, por exemplo, 2—aminopurina, 2, 6—diaminopurina, cito sina, ci tosina substituída, por exemplo, 5-etilcitosina, 5-me— tilcitosina, timina, uraoilo, uraoilo substituído na po

*4$ sição 5, por exemplo, 5-clorouracilo, 5-bromouraeilo, 5-etiluracilo, 5-ioãouraeilo,' 5-propiluracilo e 5-vinil-uvaeilo, adenina e adenina substituída, por exemplo, 8-desazaadenina.

A presente inv enção diz respeito, ainda, aos proeessos seguintes:

(R₂)

0

II

RCO^^O^^OCR

II

ECO, aeido de Lewis aeido de Lewis ^(IÍ'^0> (IX) 0°B a 80° B em que,·ο símbolo R representa um grupo alquilo eom 1 a 6 ãtomos de earbono ou um grupo arilo, que eomporta eventualmente eomo substituinte, um ãtomo de halogéneo, por exemplo, bromo ou cloro, um grupo nitro, alquilo eom 1 a 6 ãtomos de earbono ou aleoxi eom 1 a 6. ãtomos de carbono, o símbolo B representa uma base puridínica ou pirimidínica sililadae o símbolo r’ representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo eom 1 a 8 ãtomos de earbono; de preferencia, a relação molar do composto (IX) para B é de 1:1;

/15(R₂) (XI) í?

Λ II (RO) _n PNa (RO) _n P^ Ο £). Cl

-20°C a 25°C

V\Z\z (X) (XII)

em que, o símbolo R representa um grupo alquilo com 1 a 6 átomos de carbono e o símbolo B representa uma base purtmídí-na. ou uma base pirimidinica; de preferencia, o composto ΪΧ) estã mnexaes so de 5 a 10 vezes relativamente aos compostos (XI) e a relação molar preferida do composto (XII) para B e de 1:1;

\l (XIII)

II _(v) HOVP(OR)₂

Perãcido 0°C a 80°C (RO)^P^^O,

(VII) em que, o composto (XIII), de - preferencia; estã 5 a ;10 vezes em relação ao composto (V)';

(R₄) x-y

(VI) (VII) ./

ί * &m que X-X representa uma molécula de halogéneo, por exemplo , Br^ou fenil-Se-Z- ou fenil-S-Z Cem que o svmBolo Z=halogéneo) e o simBolo B representa uma Base purvnica ou uma Base pi_ rimidinica; de preferencia, a relação molecular do compostos (VII) para X-X ê de 1:1;

em que, o símbolo R representa, um ãtomo de hidrogénio ou um gru— po alquilo com 1 a 5 ãtomos de carBono; de. preferencia, o compos. to CXIV] estã num excesso de 5 a 10 rezes em relação ao composto (V),

Descrição' Pormenorizada da Invenção

Os compostos da presente invenção, podem existir soB a forma de Isómeros ópticos e tanto as misturas racêmic&s como Zí diastereomericas dos isómeros, que podem existir para certos com. postos, como ainda os isómeros ópticos individuais estão dentro do ãmBito da presente invenção., EmBora as misturas racemicas se possam separar nos seus isómeros individuais, através de. técnicas Bem conhecidas, tais como, por exemplo, a separação dos- sais

diastereoméricos formados com adjuntos opticamente activos, por exemplo, acidas ou bases, seguida da conversão nos substractos opticamente activos, em muitos casos, para os compostos da presente invenção, o isómero óptico preferido pode ser sintetizado por meio de reacções estereoespedficas, começando com o estereo_ isómero apropriado do composto iniciai desejado.

Como se indicou antes, a presente invenção diz respeito, tambem₃ aos sais destes compostos, não-tóxicos , aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, contendo, por exemplo, Na , K ,

Ca e Mg Tais sais podem incluir os derivados da combinação de catioes apropriados, tais como iões de metais alcalinos e alcalino-terrosos ou iões amónio e amino quaternários, com o grupo anionico acido do grupo acido fosfóricos Os'sais metálicos podem preparar-se por meio da reacção do hidróxido metálico com um compos_ to desta invenção. Exemplos de sais me tálicos que se podem prepa_ · Ί¹ Ί* rar por este processo sao os sais que contem Lv , Na e K , Um sal metálico menos solúvel pode precipitar a partir da solução de um sal mais solúvel por- meio da adição do composto metálico apropriado. Além disso, os sais podem formar—se mediante adição ácida de certos ácidos inorgânicos e orgânicos, por exemplo, HCl, HBr, H^SO4 ou de ácidos orgânicos sulfonicos, a centros básicos de purina, especialmente guanina, ou base pirimidinica, Binalmen te, deve—se compreender que os compostos da presente invenção na sua forma não ionizada, assim como a forma ^,rzinitteriónica, e/ou na forma de produtos de solvatação consideram-se como parte da presente invenção,·

Os compostos da-presente invenção existem, também, em ?

Des_ pu

-18-:

sub-grupos, com dois grandes sub-grupos nos quais o símbolo B presenta, quer uma base purínica^ quer uma base pirimidínica.

tes grandes sub—grupos, ha grupos preferidos nos quais a base rínica é uma guanina, ou uma guanina substituída e em que as bases pirimidínicas são, quer a timiúa quer a .oitosina·, '0 grupo mais preferido de compostos ê aquele em que o 'símbolo B represen ta a guanina ou a guanina substituída.

Os compostos da presente intenção podem s,ub--clas si ficar -se também de acordo com a estrutura do grupo, fosfonato. Estes grupos compreendem o diéster, o monoéster e o âiacido. Os sub—grupos preferidos do grupo fosfonato são o monoéster e o diãcido.

Os compostos desta invenção, incluindo os seus sais aoei táteis sob o ponto de vista fisiológico, possuem desejável acti— tidade anti-viral e: anti-tumoral, Mostram actividade contra os vírus, por exemplo, '•vírus I de Herpes Simplex, vírus II do Herpes Simplex, citomegalovírus, vírus de Varicela Zoster, vírus da influenza, vírus da vacina, vírus da poliomielite, vírus da ru— béola, vírus da varíola, vírus de cow-pox, vírus de Epstein—Barr, vírus do sarampo, vírus respiratório humano, vírus do pa— piloma e vírus sinbis, lap:enaas para mencionar alguns', e também eon tra os retrovírus, por exemplo, o vírus da imunodeficiência huma~ na (HIV), Os compostos da invenção, também possuem actividade an ti-tumaral, São activos contra a leucemia murina PS88 e outros tumores experimentais, /

-19 — ff

Como se mencionou antes, os compostos- da presente invenção são ingredientes activos, uteis na medicina humana e veterinária para o tratamento e profilaxia de doenças- causadas por re_ trovírus. Exemplos de campos de indicação na medicina humanancom respeito a retrovírus são os seguintes;

(1) o tratamento ou profilaxiã das infecções por retrovírus humano;

(2) o tratamento ou profilaxia de doenças causadas por (RIV) (vírus da'imunodèficiência humana, previamente chamadas RTDV III/ LAV ou SIDA), e das fases associadas a elas, tais como ARC (complicações relacionadas com a SIDA) e DAS' (síndroma da linfadenopa^ tia) e da fraqueza imunológica e encefalopatia causadas por este retrovírus;

(3) o tratamento ou profilaxia da infecçâo por RTDV I ou da infecção por RTDV II;

(4) o tratamento ou profilaxia do estado do portador da SIDA Cestado do transmissor da SIDA); e

CS) o tratamento ou profilaxia de doenças causadas pelo vírus da hepatite B,

Exemplos de indicações em medicina veterinária são os seguintes;

Cl) maedivisna (nos carneiros e cabras);

(2) virus da pneumonia progressiva (PPV) (nos carneiros e cari bras);

(3) virus da encêfallte artrítica caprina (nos. carneiros e nas cabras);

(4) virus da zwoegerzlekte-(nos carneiras);

(5) Infecção por virus da anemia (do cavalo); e (6) Infecções causadas pelo virus da leucemia nos gatos.

Para utilização contra Infecções virais e contra tumores os compostos da presente Invenção podem, formular-se em composiçoes farmacêuticas, Tais composições cõmpoem-se de um ou mais compostos da invenção em associação cçm um veiculo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico., A referencla^Remlngtons Pharmaceu tical Sciences, 17- Edição, por A, R, Gennaro, Cdack Publlshlng Company, 19.85) revela veículos típicos e métodos de. preparação,

Com çbg ectlvos anti-virais, os compostos podem administrar-se topicamente ou slstemàtlcamente a animais de sangue quen te, por exemplo, os seres humanos, Para utilização antl—tumoral, utiliza—se a administração sistémica e, .de preferencia, a administração parental, Por administração sistémica, entendem—se as vias oral, rectal e parental (Isto ê, Intramuscular, Intravenosa subcutânea e nasal). Geralmente,' ê de considerar que, quando um composto da presente Invenção se administra por via oral, necessita—se de uma maior quantidade do agente reactivo para produzir o mesmo efeito produzido por uma quantidade menor administrada por via parentáii cBe acordo com a boa pratica clínica, è preferi vel adminisfí-ar os compostos 'presentes em um nivel de concentração que produza efeito eficaz anti-viral ou anti-tumoral sem cau sar quaisquer efeitos secundários nocivos ou desagradáveis,

Sob o ponto de vista terapêutico e .profiláctico* adminis_ tram—se os compostos presentes sob a forma de composiçoes farmacêuticas que contem- uma quantidade eficaz anti-viral ou anti—tu— moral de um composto de acordo com a presente invenção ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico e um veiculo aceitável· sob o ponto de vista farmacêutico, conforme se referiu antes. As composições farmacêuticas para .efectuar tais tratamentos deverão conter uma maior ou menor quantidade, por exemplo, de 95% a 0,5% de, pelo menos,.· um composto da presente invenção em associação com um veículo farmacêutico constituído por um ou mais diluentes líquidos, semi-soliãos ou solidos, cargas e adjuvantes de formulação que. não sejam toxicos e sejam inertes &: aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Tais composições farmacêuticas apresentam-se, de preferência, sob formas de dosagem unitárias; isto ê, unidades distintas fisicamente que contem uma quantidade pre—determinada do fármaco correspondente a uma fracção ou múltiplo da dose que se. calcula para produzir a. resposta terapêutica desejada* Também, podem estar presentes, outros agentes terapêuticos. As composições, farmacêuticas .que fornecemcerca de lia 50 mg do ingrediente activo por unidade de dosagem são as preferidas e preparam—se convencionalmente, sob a forma de comprimidos, pastilhas, cápsulas, pos, suspensões aquosas ou oleosas, xaropes,' elixires e soluções aquosas*

As composiçoes orais preferidas apresentam-se sob a for— ma de comprimidos ou capsulas., e podem conter excipientes 'convencionais* tais como agentes de ligação- (por exemplo* xarope* acácia,, gelatina, sorbitol, tragacanto ou polivinilpirrolidona)* car_ gas (por exemplo* lactose* açuear* amido de cereais* fosfato de cálcio, sorbitol ou glicina), agentes lubrificantes (por exemplo, estearato de magnésio, taleo* polietilenoglicol ou sílica), agen tes desintegrantes (por exemplo* amido) e agentes molkantes (por exemplo, laurisulfato de sodio), Utilizafh—se soluções ou suspensões de um composto da presente invenção, com veículos farmaceut if cos convencionais para composições parentais* tais, como uma solu ção aquosa para infecção intravenosa ou uma suspensão oleosa para infecção intramuscular. Tais composições* possuindo a pureza* a estabilidade e a adaptabilidade desefadas para utilização parental, obtem-se por meio da dissolução de Q*l% a 10%'* por peso* de um composto activo da presente invenção em agua ou em um veículo que compreenda um ãlcool alifático politudroxilado* tal como glicerina* propilenoglicol e polietilenoglicol ou as suas mis turas. Os polietilenoglic-òis são constituídos por, uma mistura de polietilenoglicois não-voláteis* usualmente· líquidos*, que são so lúv.eis tanto na água como nos líquidos orgânicose possuem pesos moleculares de cerca de 2QQ a. 150Q.,

Considerando as .actividades biológicas possuídas pelos compostos da presente invenção* nota-se que estes ocompostos possuem propriedades anti—virais- e anti—tumoraís* particularmente adequadas a sua utilização no combate ãs infecções virais ou aos tumores, Assim* outro aspecto da presente invenção diz respeito a um processo pava tratamento das infecções virais (incluindo as

retrovirais) ou dos tumores* nos mamíferos oom necessidade de tal tratamento que compreende a administração tÔpica ou sistémica* a esses mamíferos* ãe uma- dose eficaz de um composto da presente invenção ou de um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. Com base nos testes* considera—se que a dose eficaz estã compreendida entre cerca de Q,01 e cerca de 30. mg/kg de peso corporal sendo de 'cerca de l a cerca de 20 mg/kg de peso corporal a dose preferida.- É de prever que para a aplicação clinica anti—virai* os compostos da presente invenção deverão administrar—se da mesma maneira, q.ue o medicamento de ^referencia aciclovir, Para aplicações clínicas* porem* a dosagem e o regime de dosagem devem ser cuidadosamente· ajustados para cada caso* utilizando-se um critério profissional certo e tendo em consideração a idade* peso e estado do doente* a via de administração e a natureza e gravidade da doença. Geralmente* uma dose oral-diãria deverã estar compreendida entre- cerca de ISO e cerca de. 750 mg* de prefe^ rência entre 250 e 500. mg de um composto da presente invenção * administrados uma a tres vezes por dia. Nalguns casos* pode obter -se um efeito terapêutico suficiente com doses mais- baixas* enquanto noutros* deverão ser necessárias doses mais elevadas.

Na reacção '(processo 1 (R^) descrita antes* os exemplos não limitativos dc.. ácidos de Lewis incluem o eter BF$* TiCl ₄ e BCl_s.

Nas reacções (processos) CRe (R/d descritas antes* os.

exemplos não limitativos de perãcidos incluem os seguintes: acido m-cloroperbenzoico* ãcido trifluoroperacêtieo e ãcido perbenzoico,

As reacções (processos). CR^) a (-R$) descritas· antes, são efectuadas, de preferencia, ã pressão atmosférica e, de -preferên eia, na presença de um dissolvente, por exemplo, CH$CN, CH^Cl^, . ClCR^CH^Cl, CHCl THR, dioxano, êter etílico, benzeno e tolueno,.

Descrição de Aspectos Específicos

Os compostos que constituem a presente invenção e os seus métodos de preparação deverão ser melkor compreendidos como auxí~ lio dos exemplos- seguintes que se apresentam com a finalidade de ilustração, apenas, e não como limitativos da presente invenção, na sua esfera ou âmbito, Como aditamento aos compostos descritos nos exemplos seguintes, estão incluídos na presente invenção, os compostos adicionais seguintes:

sal de dissodio de. 9^~[C2^-Hidroxi-^:l-fosfonometoxietoxi)-metil] — —adenina

sal de dissodio de 9- [(2-Hidroxi-l—fosfonometoxietoxi\-met.iíf[^ôtiasina —Δ 5 — sal de mina

dissódio de

9- [(2—Eidrox-i-l-fosfonometoxietoximetiTA -ti—

HQ (NáO)^P

Nos exemplos seguintes, todas as temperaturas são consideradas em graus Celsius, salvo indicação em contrario. As carac_ teristicas do espectro de ressonância magnética nuclear CRMN).'re_ ferem-se a desvios (6) químicos expressos em partes por milhão (ppm) versus tetrametiisilano (TMS), como padrão de referencia,

A area relativa registada para os vãrios desvios nos dados espec trais protonicos RMN corresponde ao numero de ãtomos de hidrogénio de um tipo funcional particular na molécula,. A natureza dos desvios no que respeita ã multiplicidade estã referida como sin— guleto, largo (bs) , singuleto (s), multipleto Cm), dupleto )d), dupleto de dupletos .(dd), tripleto Ct) ou quarteto Cqd As. abre viaturas utilizadas são as seguintes:

ACV	Caciclovir).
BID '	C.duas vezes por dia)
CDClz	Cdeuteroclorofôrmio)
DMF	Cdimetilformamida)
DMS0-do 6	Cperâeuterodimetilsulfoxido)
EMEM	(Meio Essencial Minimo de Earle)
Et	(etil)
BIV	Cimunodeficiencia humana)
H.SV	(Virus do herpes simples)
MuLV	( Virus .da leucemia, murina)
NOE	CEfeito Nuclear de Overhouse)
PFU	Cunidades que formam placa)
$	(..fenilo)
IMS	(.trirn e t ilsi lilo ).
Me .	Cmetilo)
AC	Cacetilo)
Pv	(pivaloilo)
Ph	Cf enilo)

Todos os compostos apresentaram' análises elementares sa tisfatarias<

A presente invenção deverá,. agora, ser descrita com ref renda aos seguintes exemplos não limitativos_t

Exemplos;

Exemplo 1; Éter bisbenzoiloximetilico Cl)

0

II II /CO-^^O^^OC/ ' (D

A uma suspensão de 5,0 g (34,7 mmoles) de benzoato de so dio em 70. ml de DMF, adicionaram—se 20 g (17,3 mmolesl de êter bisclorometilico e aqueceu-se q mistura ã temperatura de 7Q°C du rante 16 horas. Eliminou—se a matêrialinsoluvel por meio de filtração, Concentrou—se o filtrado in vgouo para se obter um cristal branco que se recristalizou em eter-pentano; rendimento de

4,5 g (9.1%); p.f.; 39° C.

Analise; Cale, para CigF.^^0C, 67,12$ ff, 4,92,

Encontrado; C, 66,87; ff, 4,94, (20.0 Mffz, CDCl^) ; & 5,66 (s., 4H.I, 7,75-8,05 lCm, los).

Exemplo 2; l-[{benzoiloximetQxi)-meiÍl -timingi (2)

,7

-'28Cl) Aqueceu—se. ã temperatura de 140^0, durante 16 horas, sob atmosfera de azoto, uma suspensão de 12,6 g CQ,1 mole) de timina, 300 mg de sulfato de amonio de 2, 5 ml' de cloreto de trimetilsi— lilo em 150 ml de frexametildisiiazano, Eliminaram-se os produtos voláteis in vácuo, ã temperatura de 50°C e d,issolveus.e o oleo residual em 30 ml de xile.no e concentrou—se ate ã secura, (2) A uma solução de timina sililada em 200. ml de CS^Cl^, -.adicionaram—se 30 g CO.,l mole) de éter bisbenzoiloximetilico e 50 ml de trifluorometano—sulfonato de- trimetilsililo, Agitou-se a solução durante 8 horas, ã temperatura de 25°C e sob atmosfera de azoto. Diluiu—sé a mistura reaccional com 400 ml de- acetato de etilo e lavou-se com carbonato de sodio aquoso e com uma solu ção concentrada de cloreto de sodio, secou-se

,), filtrouse e concentrou—se in vgcuo, Purificou—se o material oleoso, im. puro, pór meio de cromatografia de coluna de gel de silica, uti— lizandose CH%Cl -MeQH. a 5% co.mo eluente, para se obter o compos_ to em título, sob a forma de cristais brancos; rendimento de 14, 5 g C50.%); p.fí; Γ41°-143°ΰ,Anãlise;

Encontrado; RMN^1SC (50,3

Cale,, para ^cf^q^2^5' 57,93; H, 4,82;

fl, 9,65

C, 5.7,59; H, 4,90; fl; 9,52,

MHz, dçDMSOl: í 70, 779, 72, 477, 72, 915,

73, 3.49, 82, 985, 105, 563, 123, 376, 124, 076, 124, 368, 128, 383.

134, 397, 146, 260, 159, 451, 160, 211.

I f if. τ-ΒΟΝ^Η ⁷ PCD Cl1; 82-Tisj têH) , t H,58^Xs; ' 2H), 5,62 (s, 2H), 7,1Q Cs, IH), 7,4-8,0 Cm, 5H) , f

Exemplo 3:

[(dietilfosfonometoxi)-metoximetil] —timina ( 3)

(3)

A uma solução de 2,9 g ‘CIO mmoles) de 2-[3 (benzoiloxi) -metoximetil ]'-timina e 1,85 g (11 mmoles) de dietilfosfonometanol em 180 ml de benzeno, adicionou-se 0,05 ml de trifluorometano—sul fonãto de trimetilsililo, por meio de uma seringa, sob atmosfera de azoto. Aqueceu-se a solução ã temperatura de 85°C durante 20 minutos. Apôs arrefecimento ate ã temperatura ambiente, adiciona, ram—se 50 ml de acetato de etilo e lavou-se com hidrogeno carbonato aquoso e com uma solução concentrada de cloreto de sodio, secou-se (MgSQ^), filtrou-se e coneentrgu-se in vacuo, Purificou —se o oleo amarelo resultante por meio de cromatografia de coluna de gel de silica, utilizando—se CH%Cl^-MeOH a 5%, como eluente, para se obter o composto em titulo, sob a forma de um oleo branco; rendimento de 980 mg (30%),

RMN^H (200 MHz, CDCl h & 1₃ 39 Ct, J 4 8, ff. Hz, &H1, 1,98 (s, 3H1, 3,85 (d, J = 9,9 Hz, 2Hl, 4,1-4,3 Cm, 4ΚΪ., 4,82 ís, 2ΗΪ, /-30 — í .<=3

5,2Q (&, 2K), 7,20 (s, 1R)L, 9,0 Cs largo, IR),

Exemplo 4:

Sal de sodio de l-[3—(etilfo&fonGmetoxi)-meti/oximetil}.—tfmina(4l

¹ ONa (4j

Agitou—se durante 3 horas d temperatura de 25°C, uma solução de 400 mg (1,2 mmoles) de l—[_(dietilfosfonometoxi)—metoximetilf-timina em 8 ml de EaOR 1E, Coneentrou-se a solução <-.in-. vaeuo e purifieou-se o solido'resultante por meio de ero.matogra— fia de eoluna de fase inversa C—18, utilizando—se ãgua eomo elu — ente, a pressão de 0,56 Kg/em (.8 psi), As fracções que apresentavam absorção ultravioleta foram submetidas a RPLC, reunidas e liofilizadas para se obter o composto em titulo, sob a forma de um po branco, amorfo; rendimento de 220. mg (.55%),

Anãlise: Cale, para C^0^PEa ^³ 34,48;

R, 5,17; E, 8,05.

Encontrado; C, 34, 92; R, 5,37; E, 8,35,

OV (R₂0): λ max 226 nm (ε 96966).

- V :?

ί Λ

RMN^1S C (50,3 MHz, 'D^Ó): & 11,451, 15,843, 61,067, 61,826, 63,585, 75,247, 94,631, 111,049, 141,277, 155,20, 170,907.

RMN²H (200 MHz, DO): £ 1,19 (t, J= 6', 8 Hz, 3H), 1,81 (s, 3H), 3,62 (d, J = 8,9 Hz, 2H) , 3,8-4,1 (m,2H), 3,62 (s, 2H), 4,78 (s, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,45 (s, ÍH).

Exemplo 5

Sal de ãissódio de l-((fosfonomztoxi)-metoximetil]-timina (5)

A uma solução de 300 mg (0,9 mmoles) de sal de sódio de

1-[3 ’-(etilfosfonometoxi)-metoximetil]-timina em 5 ml de DMF ani_ dra, adicionaram-se T,5 ml de bromotrimetilsilano, sob atmosfera de azoto. Após agitação durante 3 horas, à temperatura de 25°Cf eliminaram-se os produtos voláteis in vácuo e dissolveu-se o resí_ duo em hiârogenocarboneto saturado aquoso e re-evaporou-se in vacuo para se obter uma espuma sólida.' A purificação deste produ to por .meio de cromatografia de coluna em fase inversa C-18, utilizando-se agua como eluente, sob’ a.pressao de 0,56 kh/cm (8 —32 — psi) e liofilizaçao das fraeções reunidas originaram o composto em título, sob a forma de uma espuma branca, amorfa; rendimento de 140 mg (48%).

Analise: Cald, para C N íDO Plía : C, 29, 64; R,- 3,42;

2 2 4/ &

N, 8,64, Encontrado; C, 28,21; R, 3,61; N* 9.,.16,

UV (RpO): λ max 266 nm Cs ff 8100),

RMN¹R (200 MRz, D^01; & 1,7 5 (&, 3R), 3, 27 Cd* J ff 8,5 Rz, 2R), 4,71 (s, 2R),- 5,11 Cs, 2R1, 7,74 (s* IR),

Exemplo 6:

2-amino-6—cloro—9~ [(dietil fosfonornetoxi) -metoximetil\ -purina (6.)

A uma suspensão de 1,4 g ( 34,5 mmoles) de hidreto de so dio (60% em oleo mineral), em 100 ml de np-pentano , ã temperatura dê 0°C, adicionaram-se, gota a gota, 4,4 ml (34,5 mmoles) de fos~ fato de dietil, sob atmosfera de azoto,' Apos agitação durante 1 hora ã temperatura de Q^C, adicionou—se uma solução de 25 g (172 mmoles) de bis (clorometoxi)-metano (preparado de acordo com o &

^.33processo da literatura·: P,R, Strapp, A, Org, Chem,, 34 (1969), 1143) em 50 ml de n-penta.no ã temperatura de -70.^0, Agitou-se a mistura durante 90 minutos ã temperatura de 0®C e, depois, evapo rou-se o dissolvente sob pressão reduzida. Dissolveu—se o oleo residual em xileno e eliminaram—s.e os produtos yolãtejs' in vacuo para se obter ctorometoxi—(dietoxifosfonometoxil^metano impuro, Sem purificação posterior, utilizou—se este produto na, reacção seguinte.

A uma suspensão, de 1,4 g C34,5. mmoles) de hidreto de. so. dio (60% em oleo mineral) em 10.0. ml de DMF, adicionaram—se 5, 78 g (34,2 mmoles) de 2-amino—6~cloropurina e agitou-se a mistura durante 1 hora ã temperatura de 25°C, A solução amarela resultan te adicionou-se, gota a gota, uma solução de clorometoxiCdietilfosfonometoxi)—metano anterior em 20. ml de DMF, ^-sob atmosfera de azoto, Apos agitação durante 15 horas a temperatura de 25°C, eli. minaram-se os produtos vol ate is in V a e Uo, Suspendeu-se-o oleo re. sidual em 100 ml de. acetato de etilo, lavou—se com 30. ml de ãgua e com uma solução concentrada de cloreto de -sêdio e secou-se C (MgSO^), Eliminou—se o dissolvente sob pressão reduzida e croma— tografou—se o oleo residual sobre gel de sílica, utilizando—se CHgClç—MeQF. a 3% como eluente, para se obter o composto em título, sob a forma de um oleo incolor} rendimento de. 3,0 g C.23%),

RmFíL C3Q.Q MKz, CDCl₃); 1 1,39.5 Ct, A = 6,9. ttz, 63.),

3, 850 Cd, A = 9,0 ffz, 23), 4,05-4,20 Cm, 43), 4,60.7 Cs, 2%), 5,323 Cs largo, 23), 5, 578 Cs, 231,7,883 Cs, 13).,

-3.4Exemplo 7:

Sal de sodio de 9-[(metilfosfonometoxi)-metoximeiil]-guanIna (7)

A uma solução de 325 mg (.0,84 mmole) de 2—amino-6-cloro-9-[3-(die.tilf osfonometoxi)-metoximetilj -purina em 5 ml de metanol, adicionaram-se 10 ml de solução de metóxido de sódio IN em metanol. Aqueceu-se a solução ã -temperatura de 80^PC durante 1 ho_ ra, sob atmos fera, de azoto. Eliminaram-se os produtos voláteis sob pressão reduzida. Depois, dissolveu-se o Óleo residual em 10 ml de ãgua e aqueceu—se a solução ã temperatura de 1QO°C durante 1 hora. Ajustou-se, cuidadosamente, o pE da solução a 8,0, ã tem_ peratura de 0°C, por meio da adição, gota a gota, de ECl IN. Depois,. evaporou—se a ãgua in vacuo e. purificou—se o óleo residual por meio de coluna cromatogrãfica de fase Inversa 1C,utilizando-se ãgua como eluente, para se obter o composto em titulo, sob a forma de um sólido branco; rendimento de 185 mg (60%).

Analise; Calc, para C _QEJy-0 J?Na 4Ϊ.0: C, 26,13; E, 5,12; y ι o o o

N, 16,9.5, Encontrado: C, 26, 05; E, 4,99; N, 16,64,

UV (E 0): \ mãx 254 nm (z = 14,372), 274 nm (6 ='9, 788),

-35RMN-¹³C (7 5,47 MEz, D₉0): i 51, 87 5, 60,464, 63, 627, u

70, 005, 94,711, 94, 952, 116, 171, 139, 925, 151,665, 154,428,

159, 278.

RMN ⁷ ff (300 MEz, D 01; 3,677 (d, J = 10,3 Ez, 3E), 3,620 (d, J - 9,0 Ez, 2E), 4,817 (s, 2E), 5, 539 (s, 2E1, 7,882 (s, 2E) .

Exemplo 8;

Sal de sódio de 9-[3—(fosfonometoxi)—meloximetil]-guanina (8)

A uma solução de 1,5 g (4,4 mmoles). de 9-[(metilfosfono— metoxi)-metoximetil]-guanina em 5 ml de DME, adicionaram—se 5 ml de bromotrimetilsilano, sob atmosfera de azoto. Após agitação du rante 3 horas, d temperatura de 25°C, eliminaram-se os produtos voláteis in vacuo e neutralizou-se o resíduo até pE 8,0 por meio da adição de hidrogenocarbonato de sédio saturado, aquoso. Depois, evaporou—se a agua -in vacuo e purificou—se o resíduo por meio de uma coluna cromatografica de fase inversa utilizan— do—se agua como eluente, sob a pressão de 0,55 Kg/cm (Spsi), pa ζ

β ° —36 ra se obter ο composto em titulo, sob a fovma de um po branco;

rendimento de 900 mg (59%).

!/

Analise; Çalc. para C _pff_1QN _βΡΝα 3H^Q; C, 23, 84; ff, 4,01; N, 17,37. Encontrado: C, 23, 99; ff, 3,92; N, 17,21.

UV (H Ol: λ mãx 252 nm (ε - 12,1131, 2-74 Cç ’ = 8,2011.

RMN· ~¹³C (75,47 MHz, DP»; £ 67,016, 69, 018, 70, 746,

95, 680, 95, 831, 118, 192, 141, 812,- 153, 576, 157, 386, 162, 493.

RMN H (300 MHz, D^O): 3, 525 (d, J = 8,9 Hz, 2ffl.

4, 766 (s, 2H), 5,539 Cs, 2Hl, 7, 892 Cs, IHl,

Exemplo 9:

9-[ (dietilfosfonometoxi1-metoximetil]-adenina C91

A uma suspensão de 1,4 g (34,5 mmolesl de hidreto de sodio (60% em óleo mineral), em 100 ml de DMF, adicionaram-se 4,7 g (34,5 mmolesl de adenina e agitou—se a mistura ã temperatura de 80° C durante 1 hora. Â solução amarela resultante adicionou—se, gota a gota, uma solução de clorometoxi- (dimetoxifosf-ffnolmetoxi) i .Μ

-metano (preparado a partir de fosfato de dietílico (4,4 ml; 34,5 mmoles) e 25 g (172 mmolesl de bis(elorometoxil—metano em 20 ml de DMF, sob atmosfera de azoto. Após agitação ã temperatura (de 25°C durante 15 horas, eliminaram—se os produtos .. voláteis in vaeuo e purifieou-sé o resíduo oleoso resultante por meio de cro_ matografia de coluna de gel de sílica, utilizando-se CH^Cl^-MeOR a 10% como eluente para se obter o composto em título, sob a for_ ma âe um óleo incolor; rendimento de 6,8 g (50%),

RMR-^R (300.MHz, CDCt 1: l 1, 390, (t, J = 6,7 Hz, 6H),

3,821 (d, J = 9,2 Hz, 2Η), 4,05-4,18 (m, 4H) _? 4, 785 (s, 2H),

5,69.0 (s, 2R), 6,20 (s largo, -2Rl, 7,821 (s, IRl, 8, 29 5 (s, 1H).

Exemplo 10;

Sal de dissÓdio de9-[3 — (fosfon.ometoxi).-metoximetil]-adenina, (10)

uma solução de 600 mg (1,7 mmoles) de 9—[(dietilfosfonometoxil-metoximetilJ-adenina em. 4 ml de DME, adicionaram-se 5

-3$/ :{ ml de bromotrimetilsilano, sçb atmosfera de azoto, Apos· agitação durante 3 horas ã temperatura de 25°C, eliminaram—se os produtos voláteis in vgcuo e neutralizou-se o residuo atê pE 8,0. por meio da adição de hidrogenoearbonato·. - de sodio saturado, aquoso, Depois, evaporou—se a ãgua in vácuo e purificou—se o residuo por meio de coluna cromatográfica de fase inversa C^8³ utilizando—se agua como eluente, sob a pressão de 0,56 Kg/cm C.8 psi), para se obter o composto em título, sob a forma de um po branco; rendimento de 280 mg (50%),

Análise: Calc, para C₀N,_nN' _CQ_rPNa„ (,3E_qQ ±0,2 mol NaCl); o 1 Ul b. o ú &

C, 22, 08; E, 4,72; N, 16,10., Encontrado: C, 22,15; E, 4,64; N, 16,26,

UV (Hi₂Q): λ máx 260 nm (£ = 12,0161

RMN ^1SC (7 5,47 MEz, D^l: & 66,913, 68,917, 71,033,

95, 729, 95, 940, 120, 228, 144, 611, 150, 754, 154, 766, 157, 370,

RMN ¹E (300 MEz, D^): 3, 486 (d, 0 = 8,9 Ez, 2E), 4,779 (s, 2E), 5,710 (s, 2E), 8,177 (s, IE), 8,-226 (s, ΙΕ),

Exemplo 11;

1- [(dietllfosfonometoxi)—metoxlmetil]-citosina (EtO)

(11) /

—39A uma suspensão de 700. mg (17 mmoles) de hidreto de sodio (a 60% em óleo mineral) em 50. ml de. ΌΜΈ, adieionaram-s-e 1,9 ~g (17 mmoles) de oitosina e a.quéceu-se a mistura ã temperatura de 80°C durante 2 horas, sob atmosfera de azoto, Ã solução amarela resultante adicionou—se, gota a gota, uma solução de clorometoxi (dietilfosfonometoxi)—metano preparado a partir de 2,4 g ' ' (17 mmoles) de fosfato de dietilo e 12,5 g C8,6 mmoles) de bisCelorcp metoxi).-metano em 10 ml de DMF, sob' atmosfera de azoto, Apos agitação durante 15 horas d -temperatura de 25°C, eliminaram-se os produtos voláteis in vacuo_t Dissolveu-se o- resíduo em 120. .ml de acetato de etilo e 30 ml de ãgua, Lavouse a fas-e orgo/nica com uma solução concentrada de cloreto de sódio ^e ? esecousé ' (MgSO^), Após eliminação do dissolvente in vacuo, cromatografouse o Óleo residual sobre gel de sílica, utilizando—se CH^Cl^— —MeCH a 10%, como eluente, para se obter o composto em título, sob a forma de um óleo branco; rendimento de 1,2 g C22%),

RMN. ¹H (300 MHz, CDCl 1; & 1, 390. (t, J - 6,9 Hz, 6H),

1,90 Cs largo, 2H), 3,815 .Cd, J = 9,0 Hz, 2H), 4, 05-4, 20, Cm, 4H), 4,752 Cs, 2H), 5,20 (s, 1Η), 5, 853 Cd, J = 7,4 Hz, 1H), 7,312 (d, J - 7, 4 Hz, 1H).

/

-4 0if Vd

Exempla 12;

Sal -de dissodio' de l-Cfosfonometoxij-metoximetilcitosina Cl 2)

A uma solução de 1,2 g C3,7 mmoles) de 1-[ (dietilfosfono_ metoxi) -metoximetil ]-citosina em 5 ml de DM1?, adicionavam—se 5 ml de bromotrimetilsilano, sob atmosfera de. azoto. Após agitação durante 3 horas d temperatura de 25°C, eliminaram—se os produtos voláteis in vacuo e neutralizou—se o residuo ate pS 8,0 por meio da adição de hidrogenocarbonato de sodio saturado, aquoso. Depois, evaporou-se 'a ãgua in vacuo e purificou-^se o resíduo por meio de uma coluna cromatçgrdfica de fase inversa C. _o, utilizan1 o „ - 2 do-se agua como'eluente sob a pressão de 0,56 Kg/cm C8 psi), pa ra se obter o composto em título, sob a forma de um sólido branco; rendimento de 460 mg C47%1,

Analise; Calc, para C (3 R^O + 5% NaCl);

C, 21,9.9; R, 4,22; N, 10,99, Encontrado: C, 21,7 2; K, 4,65; N,

10,78.

«

-41~i· (, ΰ .ώ

ΟΝ CH.^01; λ mãx 268 nm Γε - 8, 245)

RMN ¹³C (75,47 MHz, DgQir & 66, 876, 68, 873, 77,710, 96,141, 9.6, 284, 98, 178, 148, 355, 160, 409, 162, 543, RMN ²R (300 MHz, D₂0): â 3,560 Cd, J = 7,3 Hz, IE), 7,714 Cd, 5 = 7,3 Ez, IE),

Exemplo 13;

Cloreto de [2—Cf enllselenll)—etoxi]-metilo (13.1 d§e

A uma solução de 4,0 g (20 mmoles) âe-2--(1enllselenll)-etanol preparado de acordo com ç processe da literatura; F-R].: Rollln, 7,7. Behcomo, R_. Sinay, ' Sy nthesis, 13 (1984) em 15 ml de CE Cl ₂, adicionaram—se 620 mg (20 mmoles) de para formaldeido, Depois, borbulhou—se HCl gasoso na solução, ã temperatura de 5°C, durante 2 horas. Secou—se a solução (MgSO.^l e eliminou—se o dissolvente, s.ob pressão- reduzida, para se obter o composto em tltu lo, sob a forma de um oleo Incolor com um rendimento quantitativo .

RMN ²H. (3QQ. MHz, CDCl ); k 3,059 Ct, J = 7, Q Ez, 2H1,

3, 882 Ct, J = 7,0 Ez, 2E1, 5, 449 £s, 2E), 7,2-7,5 Cm, 5E]_ , /

-42f

Exemplo' 14:

2—amino—6—clo.ro—9-[ (2—(fenilselenil)-etoxi)-metil ]—purina (.14).

Cl

(14)

Aqueceu—se ã temperatura de 145°C, durante 5 horas* sob atmosfera de azoto* uma mistura de 20 g (118 mmoles) de 2—amino— -6-cloropurina e 400 mg de sulfato de amónio em 400 ml de hexametildisilazano e 6 ml de clórotrimetilsilano. Eliminaram-se osprodutos voláteis in vacuo e evaporou—se o'.:,.residuo com-xileno, duas vezes* e depois secou—se in' vacuo durante 3 horas,- Aqueceram-se sob refluxo durante '30 minutos* 15 g (7 2 mmoles) de 2— —amino-6-clorOpurina de 15 g (59 mmoles) de cianeto mercúrio em 900 ml de- benzeno e, depois, adicionaram—se 17 g (68 mmoles) de cloreto de 2-(fenilselenil)—etoximetilo em 100 ml de benzeno. Aqueceu—se a mistura sob refluxo durante 3 horas e, depois, agitou—se durante 15 horas ã temperatura de 25°C, Diluiu—se a mistu_ ra reaccional com CH^Cl% (300 ml) e, depois, èxtinguiu-sé · (quenched) com 2 litros de hidrogenocarbonato s-aturado, aquoso. Lavou—se a fase organica com 200. ml de iodeto de potássio 2N, ./

-43SS largo, 2H), 5, 420. Cs, 2Hj, ( 26, 041, 69, 144, 7 2, 710, 136, 0.62, 144, 946, 151,190, secou— se CMgSQ^) e eliminaram—se. os disso Iventes'' in vacuo.. Croma tografou-se o óleo residual sobre gel de sílica, utilizando—se CR %Cl^-MeCE a 5%, como eluente, para se obter o composto em titu lo, sob a forma de uma, espuma- levemente amarela; rendimento de 15, Q g (63%) .

Análise; Calc* para C ^^H^N ^OClSe 7/2 H^O C, 42,93; H, 3,86; N, 17,88, Encontrado;. C, 42, 92;.H, 3,80; N, 17,59

RMN ²H (300 MHz, COCl 1; £ 2,961 Ct,· J = 6,9. Hz, 2H),

3,70.4 Ct, J = 6,9 Hz, 2H.1, 5,19.6 Cs

7,1-7,4 Cm, 5H)., 7,806 Cs, IHl,

RMN ¹³C (75,-47 MH:z, CDCIA;

ó

127, 206, 128, 6.53, 128, 846, 131, 232,

151, 833, 152, 298.

Exemplo 15;

2-acetamino-6-cloro-9-[C 2-Cfenilselenill-eto xil-metil]-purina Cl 5)

(15).

Aqueceu—se ã temperatura de 55°C, durante 40. horas, uma solução de 8 g (21 mmoles) de 2—amino—6-cloro—9~[(2-Cfenilsele —

ζ nil)-etoxi)-metil]-purina em. 80 ml ãe anidrido acético. Eliminaram-se os produtos voláteis in vacuo e purificou—se o óleo residual por meio ãe coluna cromatográfica de gel de silica, utilizando-se CH%Cl -EtOAc a 4Q%* como eluente* para se obter o com^posto em^. titulo * sob a forma de um pó amarelo; rendimento de 5*8 g (65%).

Análise: Cale, para C Ή H 0 ClSe; C* 45* 25; H* -3*80;

0 10 ú u

N* 16*49; Encontrado: C* 45*12; H*. 3*90; N* 16*47,

RMN ²H. (300 M.H.Z* CDCl „); | 2*49 (s* 3H1* 2*9.61. Ct* J =

O = 6*9 Hz* 2H)* 3* 756 Ct* J - 6*9 Hz* 2H)_* 5*541 (s* 2H) * 7*2-7*4 Cm* 5H)* 8*0,63 (s* lH).

Exemplo 16;

2-acetamino-6-cloro—9—(viniloximetUl—purjna (18 )

A uma solução de 424 mg (1 mmole) de 2—acetamino—6—cloro_ -9-[(2—Cfenilseienil)-etoxi)-metil]-purina em 20 ml de metanol* adicionaram-se 92 mg (1*1 mmoles) de hidrogenocarbonato de só—4 5— dio e 32Qmg (.1,5 mmoles·} de periodato de sodio. Apôs agitação d temperatura de 25°C, durante 30 minutos, filtrou—se a mistura e evapovou-se atê d secura, Dissolveu—se o residuo em 20 ml de ãio_ xano e aqueceu-se a solução d temperatura de 80°C- durante 20 minutos, sob atmosfera de azoto, Evaporou—se a solução-in vácuo e çromatografou—se o oleo residual sobre gel de sílica utilizando— -se CB^Cl -MeQH a 20%, como eluente, para se obter o composto em titulo, sob a forma de uma espuma levemente amarela; rendimento de 220 mg (60%).

Análise; Cale, para C ^Η. $0 %Cl: C, 44, 88; H, 3,77; N,

26,17.

Encontrado; C, 44, 57; H, 3,83; N, 25, 82,

Exemplo 17;

2-acetamino-6—cloro—9- [(l~ (d.imetil fosf onomet oxi )-etoxi) -metil ]-purina C171

(17)

A uma solução âe 2,2 g (.6,0. mmoles). de 2-acetamino-6-clo_ r o-9-(vinil oxi)-purina e 1,67 g (12,0 mmoles). de. dimetilfosfonometanol em 100 ml de cloroformio, adicionaram—s& 120. mg de doido metano-sulfônico. Apôs aquecimento ã temperatura âe. 60®C durante 2 horas, eliminou—se o. dissolvente in vacuo e cromatografou-se o Óleo residual sobre gel de silica utilizando—se CR Clz. a 10%, como eluente, para se obter o composto em titulo, sob a for_ ma de um ôleo incolor; rendimento de 1,2 g (50%).

RMN ¹³C (75,47 MHz, CECl?); 1-8, 794, 25, 054* 53*064,

53, 218, 55, 743, 59, 056, 68*0.71, 99, 254., 99, 502* 129,921, 144* 576, 151, 598, 152, 645, 170, 299,

RMN ²R (300 MHz, CDCl^l; í 1,347 (d, J = 8*1 Hz, 3R), 2,519 (s, 3H), 3, 8 52 (d, J = 16*2 Rz* 6.H.1* 5*0.29 Cq* 1 = 8*1 Hz* 1H)* 5* 648 (d* 1 = 15*6 Hz* IR)* 5,731 (d-, J = 15,6 Rz* IR),

7, 275 (s, IR), 8,20.1 Cs* IR),

Exemplo 18;

Sa l âe ólissôdio' de 9'Of o'Sfo'nom'e't'0 xje to xi)—metil J-gugnina (.18) (NaO)_2p

0.

CH

5» —47 —

A uma solução de 1,2 g (2,95 mmoles) ds 2-acetamino—6— -cloro-9-[(l—(dimetilfosfonomeioxi)-etoxi)_-metil]-purÍna em 5 ml de metanol, adicionou—se metóxido de sodio INem metanol (10 ml). Apôs agitação ã temperatura de 25°C durante 1 hora, adicionou—se 10 ml de agua e aqueceu—se a solução ã temperatura de 9Q°C duran te 1 hora, sob atmosfera de azoto. Eliminaram—se os produtos voláteis in vacuo e purificou—se o oleo residual por meio de croma.

tografia de coluna de fase inversa Cutilizando-se água como 2 eluente, sob pressão de 0,56 Kg/cm (8psi), Analisou—se cada frac. ção de 10 ml por meio de cromatografia liquida de alta pressão. Liofilizaram-se as fracções reunidas para se obter um solido bran. co. Dissolveu-se este produto em 20 ml de DME e, depois, em 5 ml de bromotrimetilsilano. ApÓs agitação durante 2 horas, ã tempera, tura de 25° C, eliminaram—se os produtos voláteis in vacuo e puri_' ficou—se o residuo por meio de coluna de fase inversa C„ utili— * 2 zando—se água como. eluente, sob pressão de 0,56. Kg/cm (8 psi), para se obter o composto em titulo, -'-sob a forma de um pô branco amorfo após 'liofilização; rendimento de. 245 mg (.24%),

Análise; Calo, pana 0gã^^N^Og^Na₂ ^c» 25, 78; R,

4,80; N, 16,70.

Encontrado; C, 25,9.5; H, 4,44;N, -18,91,

UV CH_SO); λ máx 252 Cz -S751),

RMN ^1SC (75, 47 MRz, D₂0) ,· & 20, 859, 64, 079, 88,088,

70, 423, 102, 054, 102,241, 119,11,	140, 287,	153, 110, 162,211,
188,712,
RMN 2H (30.0 MRz, D20)f\	1,195 (d,	0 = .6, 3 Rz, 3R),
3,30.5 (dd, J = 8,9, 8,4 Rz, IR),	3, 496. (dd,	J = 8,9, 8,4 Rz, IR),

f

4,874 Cg, J = 6,3 Hz, 1Η)., 5,475 Cdd, J ~ 14, 0, 11,1 Hz, 1H),

5,523 Cdd, J = 14,0, 11,1 Hz, 1Π), 7,790 Cs, 1H).

Exemplo 19:

l—C5—metoxitetrahidro—2—fupill-timina C.19)

A uma suspensão de 2,5 g C.20 mmoles) de timiná em 30 ml de hexametildisilazano, adiei'onaram-se 50 mg de sulfato de amónio e 0,5 ml de clorotrimetilsilaz ano e aqueceu—se a mistura Cã temperatura de 145°C durante. 4 horas, sob atmosfera de -.azoto, . Eliminou—se?o excesso de hexametilazano sob pressão reduzida se dissolveu-se o óleo residual èm'xileno e evaporou—se in vacuo pa ra se obter um óleo viscoso incolor. A esta timiná sililada em 40 ml de dicloroetano, adicionaram—se 7 ml de 2,5 dimétoxi—tetrahidrofurano . ApÓs arrefecimento da solução ã temperatura sde -30°C, adicionaram—se gota a gota, 2,3 ml de tetracloreto de estanho, por meio de uma seringa, sob atmosfera de aazoto. Aqueceu -se a mistura ã temperatura de —1Q°C e, 'depois, verteu-se em 100 ml de hidrogeno de sódio aquoso, arrefecido em gelo, e 150' ml de acetato de etilo. Filtrou—se a mistura, separou—se a fase orgãni ca e secou-se CMgHO Eliminou-se o dissolvente sob pressão re-

.¾ âuzida e cromatografou—se :o óleo residual sobre gel de silica uti lizando—se CE%Cl^—MeOE a 5%; como eluente, para se obter o composto em titulo, sob a forma de uma- mistura cis/trans em uma pro porção de 1:1, como se mostrou por meio de ERLC analítica e' . da 1

RMN E; rendimento de 3,4g (75%),

Analise: Cale, para C^E^N%0

C, 53, 08; Ξ, 8,24; N,

12, 39

Encontrado: C, 52,81; Ε, β,22; N, 12,38,

UV (EtOE); \ max 268 nm (s = 9.0.76),

RMN ⁷ ff (300 MEz, CDCl 1; 1,4-2,1 (m, 7El, 3,40 e ó

(dois s, 3E), 5,20 e 5, 328 (dois s largos, ΙΕ), 6, 20.8 e 6, (dois: dd, J - 3,5, 7,0 Ez e 7,2,- 7,2 Ez, 1E1, 7,021 e 7,40 largo, IR).

3, 45

417 (s

Separou—se a mistura eis/trans. ' JJ9A/19.B), cuidadosamente, por meio de uma coluna cromatogra fica de gel de sílica. As·?· sim, elulu-se primeiro o isómero'- cis (19A), com CE^Cl^—MeCH ~a

3% e obteve—se uma agulha branca, A cristalográfia por raios X e \

o NOE (Efeito de Ov.erhauser Nuclear 1 RMN confirmaram a configura^ ção estereoqulmica cis de ISA; p. f ,; 15.3°—154°C,

Analise; Cale, para ^0.^14^2^4' 53,09.; E, -6,24; N,

12,38.

Encontrado; C, 52,9.2; E, 6,20; N, 12,10,

RMN ¹³C (75, 47 MEz, CDCl Λ; í 12, 634, 29, 417, 32, 157,

55, 20.2, 10.5, 883, 13 5, 952, 139, 553, 150, 938, 163, 906,

RMN ¹E (300 MEz, CDCl 1; & 1,950 Cs, 3H.1, 1,9-2,3 Cm,

4H), 3,40 (s, 3E), .5,20 Ct, J = 2,9. Ez; 1RL, 6,417 (dd, J = 4,0, _; —50 —

7,2 Rs, IRL, 7,40 Cs, IRL, 8,781 Cs, 1R.L,

Continuando a eluir a coluna com CR^Cl -MeOK a 3%, eluíif -se o isómero trans C.19RL após o isómerocis CISA), e obteve-se aquele, ; sob a forma de agulhas brancas, A observação NOE de 13A esteve conforme com. a estrutura atribuída; p.f,;· 124°-125°ΰ,

Analise; Cãlc, para ^G ^0^14^ 2^ 4^!' 53,09; R, 6,24; N,

12,38,

Encontrado; C, 53,10; R, 6,10; N, 12,0.0/

RMN ¹R (75,47 MRs, CDCl l; 1,820 Cs,. 3R.L, 2,0.-2,5 Cm, 4R), 3, 425 Cs, 3R), 5, 328 Cdd, 0 = 2,5, 6,0. Rs, IRL, 6,20.8 Cdd,

J = 3,5, 7,0 Rs, IRL, 7,021 Cs, IR), 8, 885 Cs, IRl,

Exemplo 20,;l-(4-d.imetilfosfonométoxIletr'ahid.ro—2-furil)~tÍTnina (20 L

(20)

A uma solução de 5,2 g (23 mmolesL de l—CS-metoxitetra— hidro-2—furil)-timina e 6,5 g (.44 mmoles) de dimetilfosfonometa—

nol em tolupno, adicionaram—se 5 ml de acido acético e 500. -mg (2,6 mmoles) de mono—hidrato do doido p —tolueno— sulfÓnico. Aque ceu-se a sotução d temperatura de 100°Ç durante- 2 horas e elimi~ nou-se o sólido insolúvel resultante por meio de filtração por suoção. Após a eliminação do dissolvente, sob pressão reduzida, cromatografou-se o óleo residual sobre gel de silica, utilizando, —se CH%Cl%-MeOH a 5%, como eluente, para se obter o composto em titulo, sob a forma de uma mistura cis/trans (6;4); rendimento de 5,0 g (60%).

RMN (300 Mhz, ÇDCl^l: ^1,9-2, 2 Cm, 10R), 3,8-4,1 Cm, 6H), 5, 19.8, 5, 445 (s largo, 0,6 e 0,41, 6, 250.. (dd, J - 2,8, 7,5 Hz, 0,4H), 6, 437 (t, J - 7,4 Hz, 0,6H), 7, 052 (s, 0,4H), 7,40.5 (s, 0,6H}^:, 9,60 (s largo, 0,6Hl, 7,628 (s largo, 0,4K),.

Exemplo 21;

Sal de sódio de 1-(4-metÍlfosfonometoxÍtetrahÍd.ro-2-furil)—timina(21)

A uma solução de 5 g (14,6 mmoles) de 1 — (4— dimetilfosfonometoxitetrahidro—2—furill-tim ina em 2 0. ml- ' de ( métanoi,. ,ad,icior,a +52ram—se 20 ml de hidróxido de sodio 2N, Após agitação durante 2 horas ã temperatura de 25°Ç, neutralizou—se a reaoção ate pE 8,0 por meio da adição de ECl 3N eom agitação, Depois, evaporou—se a ãgua in vaeuo e purifieou-se o oleo residual por meio de uma' eoluna eromatogrãfiea de fase inversa C^g, utilizando—se ãgua eomo eluente, para se obter o eomposto em titulo, sob a forma de um po braneo. Este produto apresentou—se eomo uma. mistura eis/tr-ans ( 21A/21B) Cl;l), confirmada por meio de EPLC analítica e RMN E; rendimento de 3,2 g C65%1,

Anãlise; Cale, para C ^^E^gN ₂O._?NaP 2%₂Q: C, 34, 92; ) E, 5,29; N, 7,40.

Encontrado: C, 34, 93; Η, 4, 99; N, 7,43,

UV (H₂0): \mãx 268 nm (4= 8668).

1.

RMN H C130Q MHz, D₂° 1; K 1,842 Cs, l,5El_, 1,894 Ca,· ~ 1,5H), 1,9-2,5. Cm, 4ΕΪ, 3,571 Cd, E = 9,8 Ez,- 1E), 3,589 Cd, E + 9,2 Ez, 1E), 3,5.9-3,85 Cm, 2ΚΪ, 5,2.39 C..d, E - 3,5 Ez, 0,511),

5, 483 Cd, E = 4,7 Ez, Q.,5E), 6,198 Cq, E = 2,3 Ez, Q,5E)1, 6,3 31 (t, E + 6,0 Ez, 0,511), 7,371 Cs, 0,5E)l, 7,561 Cs, 0,5E).

Separou—se a misturd' eis/Irdns por meio de uma coluna ./ eromatografiea de fase inversa. C^g Cl QO vezes- o peso)), utilizan^ do—se .ãgua—acetonitrilo a 3%, eomo eluente, sob a pressão 'ae Q,42 Kg/em C6 psil. Analisou—se eada fracção de 15 ml por HPLC-, Primeiro, eluiu—se o isómero eis C2.1A1. e. obteve—se um pb braneo.

RMN ¹E. C3Q.Q MEz; D^f; \ 1*834 Cs*- 3EÍ, 2 ‘ 0-2,45 Cm, 4EL, 3,571 Cd, E =..9,8 Ez, 2EI, 3,5951 Cdã, E - 7,4, 10, Q Ez, 1EI, ύ tf ;?

—53 —

3,781 (dd, Ε = 7,4, 10,8. Ez, IE), 5,239 Cd, E - 3,5 Ez, ΙΕ),

6,331 (t, E = 6,0 Hz, IE), 7,561 Cs, IE).

ApÕs as fracções da mistura cfs/trtDns, obteve-se também o isómero trans (21B) puro sob a forma de um põ branco,

	RMN	1E (300 MEz, -D2Q)	; i	1, 84 2. Cs, 3E1, 2,0-2,5	Cm, 4EL,
3, 589.	(d, E	- 9,2 Ez, 2E)[, 3,	'611	(dd, E = .9, 2, 10, 0 Ez,	IE),
3, 840	(dd,	Γ = 9,2, 10,0. Ez,	IE),	5,483 Cd, E = 4,3 Ez,	IE),

6,198 Cq, E = 2,9. Ez, 1EI, 7,371 (s, IE),

A designação es-tereoqulm.ica dos isómerois e'·· trans foi' confirmada por melo de NOE (Efeito Nuclear de Overhauser) RMN,

Exemplo 22;

Sal de dfssódlo de l—CE/fõsfonometox-ItetraEIdro—Z—furill—tfm^ng' (2 2).

A uma solução de 1,2 g (3,5 mmoles) do sal de sodio de l-(4—metilfosfonotetrahidro—2-furil)—timina em 15 ml de DMF adicionaram—se 10. ml de bromotrimetilsilano, sob atmosfera de azoto.

Após agitação durante 4 horas, ã temperatura de 2 5°C, eliminaram^ —se os produtos voláteis in VaPuo e neutralizou—se o óleo residual ate pH 8,0 por meio da adição de hid,rogenoaarbonato'de sói dio aquoso. Depois, _ evaporou—se a água In vacdo e purificou—se o residuo por meio de uma coluna cromatográfica de- fase inversa C^₈ utilizando agua como eluente, sob a pressão de 0,56 Kg/cm (8 psi), para se obter o composto em título, sob' a forma de um pó branco; rendimento de 857 mg (70%).

Análise: Cate, para C %0 ?PNa % 5H £/,: C, 27, 26; R,

5,20; N, 6,36,

Encontrado: C, 27,14; .H, 5,26; N, 6,03,

UV CR'^C); λ máx 268 nm (& = 7, 350),

RMN ¹H (3QQ MHz, DfDL; á 1, 864 Cs, 1,5R1, 1, 928 Cs,'. ff 1,5R), 1, 85—2, 90 Cm, 4RL, 3,4-3,6 Cm, 2RI, 5,36.3 (t,,J = 3,0 Rz, Q,5R1, 5,56 Qd, J = 4,2 Rz, Q,5R), 6,212 Cdd, J = 2,7, 5,8 Rz, Q,5.R], 6,32.1 Ct; J = 3,8 Rz, 0,5H), 7, 435. Cs, 0.,511), 7, 679 Cs,

0, 5Hf,

Exemplo 23;

- [2, S-dÁdesoxi—4-beta-cIofq-3—Cf e-rijl set enil l-beta—D-er itro fura— no s II ]-timIna · · · p2'3 j

CH (23)

- β ±55/ , fí

A uma solução de 1-,94 g Cl Q mmoles) de l-C2,3-didesoxi-3, 4-didé siâro^b eta-D—eritro furano sil)—timina, '.preparada de aeor_ do eom o processo da literatura: E, Zemlicka, R, Cas-ser, J. V,

Ereisler, J. P. Eorwitz, J, Amer. ' Chem, . Soc,'94, CE872) 3213 , em 30. ml de CE^Cl adicionou—se, gota a gota, ã temperatura 'de

C7 ' «.

—7Q C, uma solução de 1,92 g Clã mmoles) de cloreto de fenilselenilo em 5 ml de. CE^Cl^, sob atmosfera de azoto, Apos agitação d temperatura de -7Q°C durante 1 hora, eliminou—se o dissolvente in vacuo para se obter o composto em título, sob a forma de um oleo amarelado. Este produto foi utilizado na reacção seguinte, s.em mais purificação.

RMN ¹R C3QQ MEz, CDCl ); 01,95 Cs, ZE), 2,5-2,8 Cm, 2.E), 4,18 Cd, J = 6,5 Ez, IE), 6,20 Cs, ΙΕ), 6,55 Cq-, E = 6,Q, 7,5 Ez, IE), 7,1-7,7 Cm, 6E), 9,3Q Cs largo, ΙΕ),

Exemplo 24;

1- [2, 3—d.idesoxi—4—b eta-Cd.imétibfosf dno) metoxi—3-Cfenilselenjl')~

-betá-D-eritrofuranosil]-timina ' Ç24)

Β6Α uma solução de 3,85 g (10 mmoles) de l-[2,3—ãidesoxi-4-cloro—3—(fenilselenil)—beta—D—eritrofuranosilJ—timina e 1,5 g (11 mmoles) de âimetoxifosfinilmetanol em 20 ml de CR^Cl^ adicio_ nou—se, gota a gota, ã temperatura de —70°C, uma solução de 2,3 g (11 mmoles) de perelorato de prata em 3 ml de CR^CE, durante 3 minutos e sob atmosfera de azoto. Deixou—se : aquecer a mistura até ã temperatura de 0°C e, depois, veTteu-se em 10 ml de hidro— genoearbonato saturado aquoso e 15 ml de uma solução concentrqda de cloreto de sódio. Separou—se a fase orgânica após filtração e secou—se (MgSQ^). Eliminaram—se os dissolventes sob pressão re_ duzida e purificou—se o óleo residual por meio de cromatografia de coluna de gel de sílica, utilizando CS Cl —MeOE a 5%, como elu

Ci Cl ente, para se obter o composto em titulo, sob a forma de um óleo incolor; rendimento de 1,3 g (31%).

W²S (300 MRz, CDCl₃),' bl,93 (s, 3R),-2,45. (m, 2.R) , 3,70 (dd, J = 8,4, 8,0 Rz, 1H), 3,75 Cd, J = 12,0 Rz, SR), 3,85 (d,

J = 6,9 RZ, IR), 3,90 (dd, J = 8,4, 8,0 Hz, 1H.L, 5,10 (s, IR), 6,52 (s, IR), 7,35 (s, IR), 8,86 (s largo, IR),

Exemplo 25:

Sal Ide d.i'ssõd,io d'e .!-[ 2, '3-didesoxi—2, '3—dide sidro -4-fosfonometo — xi—betq-D-er itr o furano sií]-timina ' ' ' Ç25) (NaO)₂P

(25) a β /

7-57'I

A uma solução de. 1,15 g (2,76 mmoles) âe 1--(2, 3-âtdesoxl—4—(dimettlfosfono)—metoxi-3—(fenllselenll1—beta-D—erltrofura — nosll]-tlmlna em 4 ml de DMF, aâieionaram—s-e 3 ml de bromotrlme— tllsilano, ã temperatura de 5°C e sob atmosfera de azoto, Apos agitação durante 4 horas, ã temperatura de 5°C, eliminaram-se os produtos voláteis in vacuo e d,issolveu,—se o residuo em 3 ml :de hidrogenocarbonato saturado aquoso e evaporou-se-, novamente, in vacuo, para se obter um solido ligeíramente amarelo,

RMN²H (20.0. MHz, D^QI; í 1,7-9. Cs,. 3H), 2.,3-2,5. Cm, 2H),

	27	£1,	5 =	7,6, 8,	4 Hz,	1H),	3,50 (1,	9 =	: 7,6, 8,4	Hz,	12),
3,	9.3	(d,	J -	6., 8 Hz,	1H1>_	5, 2 3	Cs, ÍH),	6, Q	r Ct, 5 = <	1,9	Hz, 1H),
7,	53	(s,	1H),

Dissolveu—se o produto da reacção do exemplo anterior em

I ml de agua e, depois, juntou—se 1,7 g (8,0 mmoles)- âe perloda— to de sódio. Após- agitação du.ra.nte 30: minutos, aqueceu—se a mistura reaccional. d temperatura de 80° C durante 8 minutos e, .de— pois, filtrou—se, Evaporou—s-e. q filtrado atê- ã secura e purificou—se o sólido residual por melo de cromatografia de coluna de fase Inversa Cutilizando ótgua, >como eluente, d pressão de ~

0,56 Kg/cm (8 psl), Analisou—se cada fracçao de 15. ml por meto de cromatografia liquida de alta pressão, A liofilização das : fraeções reunidas originou o composto .em titulo, sob a forma de um sólido branco, amorfo; rendimento de 538 mg £5.0%); p,f,;

2,3 3°—2 3 7^Q C.

/ -58—

Anãlise; Cale, para C_Qff?Naff^O; C, 32,61; 'ff, 3,51; N, 7,61.

Encontrado; C, 32,31; ff, 3,63; N, 7,35.

RMN^1SC (5Q,3 Mffz, DO); j 13,821, 67., 870, 68, 848, 89,868 111, 242, 111, 364, 113, 908, 131,177, 134, 655', 139, 350,

RMN¹ ff (300 Mffz,. DO); k 1,848 (s, 3ff), 3, 565 (dd, d =

8,4, 8,7 Hz, IH), 3, 738 (dd, d = 8,4, 8,7. ffz, IR), 5,8.87 (s, IH), 6,180 (d, d = 6,0 ffz, lff.1, 6, 432 (d, d / 6,0. ffz, Iffl, 6,817 (s, lffl, 7, 377 (s, IH).

UV (ff^O); λ mãx 266 nm Ce - 10,1341,

Exemplo 26;

l-'[ 2, 3-didesoxi—2, 3~d,idesidro-4-beta-Cdimetilfosfono) -metoxi-beta-D—eritrofuranosil]—timina ' ' (261

A uma solução de 6,0 g (12,2 mmoles) de l-(2,3-didesoxi-4—beta—(dimetilfosfono)-metoxi—3—(fenilselenil)-beta-D—eritro— furanosil]—timina em 20 ml de metanol adicionou—se, gota a gota, uma solução aquosa suspensa de 1,8 g (21 mmoles) de hidrogeno/ carbonato de sódio e 3,2 g C.15. mmoles) de periodato de sódio em 20 ml de agua,. Apos agitação ã temperatura de 25° C durante. 1 hora, aqueceu—se a mistura ã temperatura de 80°C durante .60 minuetos, Eliminaram-se os produtos voláteis in- vacuo e suspendeu-se o resíduo em 120 ml de- CR^Cl^. Após, eliminação da mqtêriq insolú vel, secou-se a fase organica. CMgS'0^). e evaporou—se in va'cl<.o. Cromatografou-se o residuo sobre, gel de silica utilizando—se CHCl -MeOH a 5%, como eluente, para se obter o composto em titu ú ύ lo, sob a forma de um -pó branco; amorfo; rendimento de 3,4 g (85%).

Análise; Cale, para C; C, 43, 38; R, 6,16.; N,

8,43,

Encontrado; C, 43, 53; H, 5,20; N, 8,26,

RMN¹³C (75,47 MHz, CDCl^); á 12, 339, 52, 888, 52,976,

53, 0.80, 60,481, 62, 738, 87, 837, 108, 402, 10.8, 569, 111, 653, 1130,6.13, 131, 675, 13 5, 435, 150, 480, 163, 503,

RMO¹! (300 MHz, CDCl?)} Í 1,86.2 Cs, ~3HL, 3, 748 Cd, J ó = 12,8 Hz, 3Π1,- 3,814 Cd, J = 12,8 Hz, 1H), 3, 826 (dd, J =8,9,

8,4 Hz, 1H.1, 3,90.2 Cdd, J = 8,8, 8,4 Hz, 1H), 5,711 Cs, 1H),

6,0.7 5 Cd, J = 5,7 Hz, IHl, 6,233 Cd, -J - 5,7 Hz, l.R), 6,815 Cs, IR), 7,129. Cs, 1K)_, 8,95 Cs largo, 1H), • —60

L ί

Exemplo 27;

Sal de sodio de l-f2,3—didesoxi—2₃ 3'—dÍdesidro—4'—beta — (metilfos—:· fono)-metoxi-beta-D—erit rofur g ho sil ]-tjm in a_(27 l (MeO)

NaO

Agitou-se á temperatura de 25°C durante 2 horas; uma solução de 180 mg (0,54 mmolesl de l-[2,3-didesoxi—2,3—dihidro-4-beta—(dimetilfosfonol—metoxi-beta~D—2-eritrofuranosil]—timina em 2 ml de solução aquosa de hidróxido âe sódio IN, Neutralizouse a reacção , cuidadosa.men.te, ate pff 8, 0 por meio de. adição, go ta a gota, de HCl IN; com boa agitação, Depois, evaporou-se ' a agua in vgcuo e purificou—se o resíduo por meio de uma coluna or oromatogrdfica de fase inversa 0^ utilizandose dgua-acetonitri lo a 3%, como eluente, para se obter o composto em título, sob a forma de um solido branco;' rendimento de 125 mg (68%),

Análise; Cale, para C IL· N JC DNa 1,5 E.O: C, 34, 28; H,

13: ά ( %

4,93; N, 7,27,

Encontrado; C, 34, 92; ff, 49', 4; N, 7,19,

UV (S 0); λ max, 269 nm (ε b 8160)

Rm/r C300 ΜΗΙζ, D Ol.í â 1,847 Cs, 3R), 3,52.5 Cd, J = 11 = 11,0. Rz, 3Η), 3,917 Cdd, J = .13,6, 17,0 Rz, IR), 3,765 Cdd,

J - 13,6, 17,0. Rz, IR); 5,845. Cs, .IR),. 6,198 Cd, R - 4,6 Rz, IR), 6,415 Cd, Π - 4,6 Rz, IR), 6, 847 Cs, IR.),, 7, 374 Cs, lRly

Exemplo 28;

Sal de sodio de l-[2,3-diâesoxi-4-be^:la-(metilfo'sfono)-metoxi-be~ ta-D-eritrofuranosii]~timina C2'8)

A uma solução de 300 mg (2,9 mmoles) de sal de sódio de l-[2, 3-didesoxi-2, 3-âidesidro-4—beta—Cmetilfosfono)-metoxi—beta— -D-eritrofuranosil]-timina em 20 ml de ãgua adicionaram—se 200 mg de paládio a 10% sobre carvão aetivado e hidrogenou-se durante 30 minutos, sob a pressão de 2,5 Rg/cm (35 psi) R . FiltrouCl

-se o catalisador e lavou—se com 30. ml de metanol. Evaporou—se, o filtrado reunido- e lavado, in vácuo e purificou—se o residuo por meio de uma coluna cromatografica de fase inversa ^uiHi.

zando ãgua-acetonitrilo- a 2%,. sob uma pressão de 0,56 Kg/cm (8 psi), para se obter o composto em titulo, sob a forma de um soli_ do branco; Rendimento de 250 mg (8:4%).

» β

-62- ,/

L .

Este produto mostrou uma RMN- idêntica ã do composto C21A) que se preparou a partir de 2, 5—dimetoxitetrahidrofurano e a âe signação estereoquímica do composto C.21A1 foi confirmada peio NOE.

RMN²R CZQQ MKz, R₂O1;\ 1,94 3 Cs, 3 Hd, 2,168 Cm, 2R),

2,418 Cm, 2H), '3,698 Cd, J = 6,9. Rz, 3H), 3,68 Cdd, J = 13,5,

18,Q Hz, IR), 3,85 Cdd, J = 13,5, 18,QRz)', 5, 303 Cs, 1R1,

6, 390 Cd, J = 6,3 Rz, IR), 7,62.7 Cs, IR).

De modo semelhante ao anterior Exemplo 2.8, o reagente contendo timina pode ser substituido por um reagente correspondente de adenina, guanina ou citosina pana se obter o sal de sodio de l—[ 2, 3—didesoxi—2, 3—diâe.sidro-4-beta-Cmetilfosfono.}-meto — xi-beta-D-eritrofuranosil]—adenina* ou o sal de sodio de 1-/2,3-didesoxi-2, 3—didesidro-4-beta—Cmetilfosfono)—metoxi-beta-D-eri— trofuranosil -guanina, ou o sal de sodio de l-[2,3-didesoxi—2,3— —didesidro-4—beta—CmeHlfosfonoi.—m'stQxi—beia—D-eritrofuranosilJ— -citosina.

Exemplo 28;

l-/4-b'et'a-CâimetiÍf osf õhod-ti.ediõxi-deiã-D-eritro f urano sil J-tififi^o

“ ₉ £

A uma solução de 3,1 g CIO. mmoles) de l—[2,3—âidesoxÍ—

-2, 3-diâ'esiâro —4—beta-Cdimetilfosfono)^metoxi—b eta—D—eritrofura, nosilj-timina em 20 ml de piridina adicionaram—se 2,64 g 'CIO mmoles) de tetroxido de osmio, ã temperatura de 0°C, e agitou—? -se durante 2 horas. Eliminou— se o dissolvente''ih vacuo, Dissolveu-se o resíudo em 100 ml de acetato de etilo, lavou—se com 30 ml de ãcido fosfórico a 10%, 20 ml de ãgua, 20 ml de hidrogeno— carbonato de sodio aquoso e com uma solução concentrada de clore_ to de sodio é secou—se CMgSO^). Eliminou—se o dissolvente iuin vacuo e cromatografou—se o oleo residual sobre gel de sílica, utilizando CH%Cl^-MeQH. a 5% como eluente .para se obter o compos to em titulo, sob a forma de um po branco; rendimento de 2,56 g 170%).

Anãlise: Cale. para. 2^ 9^' 29, 35; H, 5,23; N,

7,65.

EncontradoC, 38,98; Ή, 5,09; N, 7,42,

RMH^1SC C75, 47 MHz, dg-DMSO).; â 11, 861, 52, 672, 52, 797,

59, 114, 61, 411, 72, 608, 73, 316, 73, 39.9, 87, 419, 107, 607, 107, 863, 1.10,810, 135,217, 150, 973, 163, 581,

RmFh C3Q.0 -MHz, â^-DMSO); 1,6.75 Cs,- 3H1, 3, 540. Cd, A =

= 10,5	Hz, 611) , 3,736	Cl, A = 4,	0- Hz,	1H), 3,817	Cd,	A = 9,6	Hz,
2H1, 4,	03 Cdd, A = 6, C	1, 11,2 Hz,	1H.L,	4, 763 Cs,	1H)_,	5,3 5 Cd,
A - 4,0	! Hz, 1H1, 5,4 5	Cd, A = 7,	a Hz,	1.H), 5,9.19	Cd,	A = 6,9	Hz,

lH), 7,128 Cs, 1H.I, 11,22.8 Cs largo, 1H),

De modo semelhante ao do anterior Exemplo 29, o reagente contendo timina pode ser substituído por um reagente correspondente de adenina, guanina ou citosina, para se obter a l-Ç4—be-

ta-(ãimetilfosfono) —metoxi—beta—D—eritrofuranosil]—adenina* ou l-[4-beta-(dimetilfosfono)-metoxi-beta—D—eritrofuranosil]—guanina ou l—[r4—beta-Ç.dimetilfosfono)-meloxi-beia—D—eritrofuranosil]— -oito sina,

Exemplo 30;

Sal de sódio de 1-[4-('.rrietilfosfono)-metoxi-beta—D—eritrofurano — sil ]-timina_(.30)

Agitou—se uma solução de 200. mg (0*5 mmole) de l-[ 4-beta-(âimetilfos fono ) -metoxi-beta— D-eritro furano sil I-timina em 2 ml de NaOH IN* ã temperatura de 25°C durante 2 horas, Neutralizou-se a mistura reaccional cuidadosamente* atê pH 9*0 pov meio da adição gota a gota* de HCl IN* com agitação. Depois* evaporou -se a agua in vacuo e purificou-se o óleo residual por meio (de uma coluna cromatográfica de fase inversa C^^ utilizando-se água_ ~ 2

-acetonitrilo a 2%* como eluente* sob a pressão de 0*56 Kg/cm

(.8 psi)* para se obter o composto em titulo* sob a forma de um pÓ branco* amorfo; rendimento de 114 mg (56%),

Análise; Cale, para C ^^H^^N ₂0 gPNa ZH^Q; C, 32, 27; H, 4,64; N, 6,84.

Encontrado: C, 31,94; H, 4,32; N, 6,86,

UV CH₂O): λ máx 2.68 nm (ε = 81531.,

RMN¹³ (75,47 MHz, D%): i 35, 644, 35,719, 45, 366, 47, 479, 57, 032, 57,411, 71,9.15, 92, 426, 92, 599,-96, 463, 120, 50.3, 137,007, 144, 422, 151, 377,

RMN¹ (300 MHz, D 01; i 1,922 Cs, 3E1, 3,615 CD, 5 = 10,1 Hz, 3H), 3, 687 Cdd, J = 11,3, 11,1 Hz, 1H), 3, 885. Cdd, J = 11,5, 11,1 Hz, 1H), 4, 220 Cd, J = 4,3 Hz, IHl, 4, 574 (dd, J - 6,7, 4,3 Hz, IHl, 5,09 Cs, IHl, 6,175 Cd,. J = 6,7 Hz, IR), 7, 485 (s, IR).

De modo semelhante ao do anterior Exemplo 30, o reagente contendo timiná pode ser substituido por um reagente correspondente de adenina, guanina ou citosina para se obter a 1—[4—beta— - (metil f o sfono) -me toxi—beta—D—eritro furano sil ] -adenina. >au z _ a 1- [4-beta—(metil fosfono )-metoxi—beta.-D—eritro furano sil] -guanina ou a l—[ 4-beta-(rnetil fosf ono 1-metoxi-ibeta—D—eritrofuranosilJ -citosina.

Exemplo 31;

Sal de sodio de l—C.4—H'e.-t'a—fosfonomeidxi-beta—D—eritrofuranosill—timiná ' C311

* 9

A uma solução de 320 mg (0,87 mmole) de 1—ff 4—beta—(dime_ tilf os fano ) -metoxi—beta-D-eritro furanosil ff?—timina em 2 ml de DMF adicionaram-se 1,4 ml de bromotrimetilsilano, ã temperatura de 0°C, sob atmosfera de azoto. Apos agitação ã temperatura de 0°C, durante 80 minutos, eliminaram—se os produtos voláteis in vácuo e neutralizou—se o residuo até pE 8,0 por meio da adição de hidro_ genoearbonato de sodio aquoso, saturado. Depois, evaporou-se a ãgua in vãeuo - e purificousse o solido residual por meio de uma ooluna cromatográfica de fase inversa utilizando—se ãgua-ace_ tonitrilo a 2%, como eluente, pura se obter o composto em titulo, sob,a forma de um solido branco, rendimento de 153 mg (46%); p, f. : 250°C. (decomposição)

Análise: Calcd. para C^^Ε^N%0gENa 2EgO; C, 27, 52; E,

4,3 5; N, 6,42.

Encontrado; C, 27, 05; E, 3,99; N, 6,12.

UV ÇE^O): λ max 268 nm (ε - 7, 568),

RMN ²³C (75, 47)MEz, 0^0:^ 49, 580, 51, 582, 57, 347, 57, 541, 71, 861, 93, 034, 83, 169, 95, 541, 121,178, 136, 393, 144, 222,

150, 602,

RMN²E (300 MEz, D₂0).: â 1/36 Cs, 3E), 3, 468 (dd, J = =12,3, 12,6 Ez, 1H), 3, 756 (dd, J = 12,3, 12,6 Ez, 1H.),_ 4,

258 e » ^67 (d, J - 4,5 Ez, 1E), 4, 578 (dd, J = 4,5, 6,2 Ez, ΙΕ), 5,175 (s, 1E), 6,182 (d, J = 6,2 Hz, ÍH), 7,591 (s, 1E).

De um modo semelhante ao do anterior Exemplo 31, o reagente contendo timina pode ser substituído pelo reagente correspondente de adenina, guanina ou citosina para se obter o sal de dissódio de l—Z4—beta—fosfonometoxi-beta—D—eritrofuranosilf/—ade nina, ou o sal de dissódio de 1~Z~4—beta—fosfonometoxi—beta-D-eri. trofuranosil ff-guanina ou o sal de dissódio de 1- Z4-beta-fosfono_ metoxi—beta—D-eritrofuranosil J-citosina.

Exemplo 32;

1—f 2—desoxi—4—Deta—Cãi^:é‘'tIÍfosfano)—me'boàÍ—heta-D—erltra,fuvano — sil Jtimina (32A) e o isómero trans (32B)

V\ ^J ^CH„ (32B)

A uma solução de. 2,4 g (12,4 mmoles 1 de l—(2, 3—didesoxi— —3, 4-didesidro—beta-D—eritrofuranosil) —timina e 17,4 g (103 mmoles) de dietilfosfonometanol em 2 ml de CE^Cl^ adicionaram—se

17,4 g.l (13, 14 mmoles) de acido 3—cloroperoxibenzóico a 80—85% ã temperatura de 5°C, Após agitação durante 60 minutos d tempera— /

S » •ψ tura ãe 25°C, puvificou-se a mistura reaccional por meio de cromatografia de coluna sobre gel de silica, utilizando-se CR^Cl^-MeOH a 2%para se obter o composto impuro que se recnomatognafou cuidadosamente, sobre gel de silica para separar :o.s dois isómeros. Utilizando CH^Cl^—MeOH a 1%, eluiu, em primeiro lugar, o isómero secundário B, que se obteve sob a forma de um Óleo incolor; rendi mento de 75 mg (1,7 7o),

	RMN		(200 MRz, CDClg) ã	e 32B: & 1,	287	(t, J =	6,	9 Rz ,
6H), 1,	900	ís,	3R), 1,97-2,58 Cm,	2R), 2,807	(dd	, J = 9,	o>	12, 8
Rz), 4,	016	Cdd.	, J = 9,0, 13,8 Rz,	IR) , 4,138	(m,	4H),· 4,	20	(m,
1H), 4,	934	(â,	J =4,2 Hz, IR), 6,	321 Ct, J =	6, 6	Rz, IR)	3	7,417
(s, 1H)	, 9,	80	(s largo, 1H),

Eluiu—se, continuamente, a coluna ãe gel de sílica, com CH%Clg—MeOH a 5% para se obter o isómero principal 32A, sob a for. ma de um óleo incolor; rendimento de 725 mg (17 %).

RMN 'H (200 MRz, CDCl.^) de 22A ; j 1,210 Ct, J = 7,5 Rz, 6R), 1, 872 (s, ’3R), 1,95 (m,- IR), 2,70 (m, IR), 3, 780 (dd, J = = 9,2, -13,8 Rz, 1H), 3, 920 Cdd,· J = 9,2, 13,8 Rz, 1H), 4,139 (m, 4R), 4,330 (d, J = 5,7 Rz, 1H), 5, 268 (s, IR), .5,268 (s, 111) ,

6, 228 (dd, J = 2,7, 8,4 Rz, IR), 7, 624 (s, IR), 9,176 (s largo,

IR) .

A designação estereoquimica de - 3 2A e 32B esteve conforme a observação NOE RMN.

Be modo semelhante ao do anterior Exemplo 22, a 1-(2,3—68—desoxi—3,4-dis ehidro—b eta—D—eritro furano sil)—timina pode -ser substituída por um reagente correspondente de ádenina, --guanina ou citosina para se obter a 1-/2—âesoxi—4-beta—Cdietilfosfono)—metoxi—beta—D—evitrofuranosil ff—adenina, o sal de sódio de 2-/2— —desoxi—4—beta—(metilf os fono 1—metoxi—beta:-FD—erÍtr o furanosil ff—gua nina ou 2-/*2-desoxi-4—beta-(dietilfosfono)-metoxi-beta-D-eritro— furanosil /-citosina.

Exemplo 33;

Sal de dissódio de l-C2,—desoxi—4—beta—fosfonometoxi—beta—D-eri— trofuranosil),—timina (33) (NaO)

II

F.

A uma solução de 480 mg (1,3 mmoles) de l/[2-desoxi-4-(dietilfbsfono)-metoxi-beta—D-eritrofuranosilfj-timina em 2 ml de DMF adicionaram-se 2 ml de bromotrimetilsilano, sob atmosfera de azoto. Após agitação durante 3 horas, ã temperatura de 25°C, eliminaram-se os produtos voláteis in vácuo e neutralizou—se , cuidadosamente, o resíduo atê pS 8,5, por meio da adição de hidro genocarbonato de sodio aquoso saturado, Evaporou—se a ãgua atê ã secura e- purificou—se o solido residual por meio de coluna cpo_

matogrãfica de fase inversa C^_p utilizando—se água-acetonitrilo a 3% como eluente para se obter o. composto em titulo, sob a for ma de um po branco; rendimento de 165 mg (40%).

Análise; Galcd.' para C .^R^N ₂Q _pRNa ₂ 3R^0: C, 28, 57 ; H, 4,52; N, 6,67.

Encontrado: C, 28, 48; R, 4,49; N, 6,52,

UV (H_p0): λ max 268 nm (£ - 7, 602).

69, 570,

RMN ²H (75,47 MRz, D₂0):& 20, 803, 48, 289, 94, 015, 94, 994, 122, 321, 135, 750, 150, 715.

50, 29.1, 56, 714,

RMN ²H = 2,6, 13,4 Hz,

3, 415 (dd, J = 1H), 4, 372 (d, (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,776 Cs, (300 MHZ, D₂0): & 1, 853 (s, 3Π1, 1, 924 (dd, J =

1H), 2,8=785 (dã, J = 2,6, 5,3, 8,0 Hz, IR) ,

8,9, 12,4 Hz, IHl, 3, 669 (dd, J = 8,9, 12,4 Hz,

J = 5,3 Hz, IHl, 4, 372 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,372

1H), 4,310. (s, IR), 6, 285 (dd, J = 2,6, 8,0 Hz, 1H) .

De um modo semelhante ao do anterior Exemplo 33, o reagente contendo timina pode ser substituído por um reagente correspondente de adenina, guanina ou^citosina para se obter o sal de dissôdio de l~(.2-desoxi-4—beta-fosfono;-etoxi-beia—D-eritrofu ranosil)-adenina ou o sal de dissôdio de l-(2—desoxi-4—beta-fosfonometoxi-beta-D-eritrofuranosil1-guanina ou o sal de dissôdio de l-(2-desoxi—4-beta—fbsfonometoxi—beta—D—eritrofuranosil)—cito sina,

Exemplo 34;

2-aeetamino-6-difenilcarbamoiloxi-9—/f -2—fenilselenil).-etoxime—'· til /-purina (34)

NAe (34)

Aqueeeu-se d temperatura de 80°C durante 60 minutos uma mistura de 36,7 g (94,6 mmoles) de 2-aeetamino-6-difenilearbamoíl_ purina /preparada de acordo ->com o seguinte processo da literatura: R, Zou e M. J, Ropbins, Can, ¢7¾em, ₃ 65, nÇ 6 (1436) (1987)/ e 47,6 ml (193 mmoles) de N,O-bis(trimetilsilil)-acetamida em 700 ml de dicloroetano anidro. Eliminaram-se os produtos voláteis. in vaeuo, e evaporou-sè .o residuo com tolueno, duas vezes. Aqueeeu-se sob refluxo durante 60 minutos a purina siliiada e 29,6 g (117 mmoles) de cianeto mercurico em 800 ml de benzeno e, depois, adicionou—se, gota a gota, uma solução de 24 g (94,5 mmo~ les) de eloreto de 2 — (fe.nilselenil)—etoximetilo. em 10Q ml de ben zeno, Aqueeeu-se a mistura d temperatura de refluxo durante 4 horas e, depois, agitou-se durante 15 horas ã temperatura de í *

25. U, DUlutu-se a misturo reaccional com 500 ml de CEJCll e ex

Ct Ct tinguíu-se eom l litro de hidrogeno earbono, to aquoso, saturado, La vou-se a fase orgdnica eom 200 ml de iodeto de potássio 2N, secou—se (MgSO ) e eliminaram—se os dissolventes in vaeuo, Cromatogra f

fou-se o óleo residual sobre gel de sílica, utilizando CH~Cl -Me ú Cr

OH a 5% eomo eluente, para se obter o composto em titulo, sob a forma de um’pó ligeiramente amarelo; rendimento de 22 g (39%),

Analise: Calcd. para C^R^NqO Se: C, 57,91, E, 4,36; N, 13,98. Encontrado: 0, 57, 76; H, 4,46; N, 13,48.

RMN ¹H (300MHz, CDCl^): 2,459 (s,_ 3H), 2,951 (t, E- 6,9 Hz, 2H), 3,714 (t, J= 6,9 Hz, 2H), 5, 477 (s,.2H), 7,07-7,7 (m, 15H), 8,001 (S, 1H), 8,171 (s, 1H).

RMN ¹³C (75, 45 MHz; CDCIJ: λ 25, 133, 26, 196, 69,192, ó

72, 602, 120, 363, 126, 970, 127, 014, 129, 174, 141, 686, 143, 734, 1 150, 247, 152, 487, 155, 232, 156, 247, 156, 297, 170, 793.

Exemplo 35:

2-acetamino-6-difenilearbamoIl-9-(viniloximetil)—purina (35)

A uma solução de 4,9,2 g (8,16 mmoles) de 2-acetamino-6-dif enilcarbamoil-9 —ff 2-(f enilselenil) -etoximetil fj—purina em 80 ml de dioxano adicionaram-se 4 ml (35 mmoles) de E^O^ ^a 30% /

~^?s\ e 2,1 g (24,5 mmoles) de hidrogenocarbonato de sodio. Aqueaeu-se a mistura d temperatura- âe 60°C durante 20 minutos. Depois, concentrou-se a mistura reaeeional até cerca de 10 ml, diluíu-se com 100 ml de aeetato de etilo, secou-se (MgSO^) e eliminaram-se os dissolventes in vãcuo. Dissolveu-se o resíduo sem ml de dioxano, adicionaram-se 1,27 g (10 mmoles) de diisopro_ piletilamina e aqueceu-se a solução ã temperatura de 80°C duran te 50 minutos, sob atmosfera de azoto. Evaporou—se o ãissolven te in vãcuo e cromatografou-se o oleo residual .sobre gel de sílica utilizando-se CH%Cl%-aeetato de etilo (1:1) como eluente, para se obter o composto em título, sob a forma de um po amaref lado; rendimento de 2,5. g (65%).

Analise: Calcd. para C’ ^00,5R^O:. C, 60, 98;

R, 4,67; N, 18,55. -Encontrado: C, 61,20; R, 4,7.6; N, 18,84.

RMN ¹H (SOO MHz, CDCÍ 1: Ã 2,485 Cs, 3H) , §,170 (dd,

J =. 2,7, 6,6 Hz, 1H), 44,473 (dd, J = 2,7,, 14,1. Hz, 1H), 6,395 (dd, J = 6,6, 14,1 Hz, 1H) . 7,0-7,5 (m, 10H), 7,9.61 (s, 1H),

7, 996 (s, 1H).

RMN ¹³C (75, 47 MHz, CDCl^):^ 25,121, 70, 572, 82, 427,

126, 272, 126, 344, 126, 443, 26, 496, 26, 566, 126, 644, 141, 628 ,

143, 226, 148, 925, 152, 552, 170, 505.

Exemplo 36:

2-acetamino-6-difenilcarbamoiloxi-9—ff (2—hidroxi—1—(dimetilfos— fonometoxi)—etoximetil ff -purina (36) » 9

Ζ // /'

Α uma suspensão de 1,0 lg (2,25 mmoles) de2-acetamino-6-difenilcarbamoiloxi-9-(viniloximetil)—purina e 6 ml de âimetilfosfonometanol em 6 ml de CH^C.l^ adicionaram-se '611 mg (3 mmoles) de ácido m_-clòroperbenzóico a 8Q%-85%. Apos agitação duran te 18 horas ã temperatura de 25°C, diluíu-se a solução límpida com HC ^Gl (100 ml) e lavou-se com 4 ml de NaOH IN arrefecido com gel e 20 ml de umaysolução concentrada de cloreto de sodio. Lavou-se a fase orgânica, outra vez, com 20 .ml de uma so.lução con centrada de cloreto de sódio, secou-se (MgSO^) e eliminou-se o dissolvente in vácuo. Cromatografou-se o óleo resiudal sobre gel de silica, utilizando CH^Cl^-MeOH a 5%, como eluente, para se obter o composto em· titulo, sob a forma de Um óleo incolor ; rendimento de '360 mg (27%).

Análise Calcã. para C^gH^gNgOgP Ο,δΰΗ^ΰΙ^: C, 49, 22;

H, 4,64; N, 13,00. Encontrado: G, 49, 89; H, 4,47; N, 12,76.

RMN ¹H (300 MHz, CDCl^);. £ 2, 384 (s, 3H), 3, 582 (dd

-75?

···.

J = 4/, (dd, J = 5,469 Cd, (m, 10H),

12,5	Rz,	IR),	3, 722	(dd,	J = 4,5, 12,5 Hz, 1E), 3,768
2,9,	10,	7 Rz,	6R),	3, 798	(dd,· J - 8,8, 14,0 Hz, 1E),
J =	10,	8 Rz,	1E),	5, 723	.(d, J =10,8 Ez, 1E), 7,0-7,

8,032 (s, 1H), 8, 662 (s, IR) .

Exemplo 37:

Sal de amónio de 9-f~ (2-h.idroxi-l-(metilfosfonometoxi)-etoxim.etil /-guanina (37)

Aqueceu-se d temperatura:de 60°C, durante 90 minutos uma solução de. 2,9 g (4,8 mmoles) de 2-acetamino-6-difenilcarbamoilo_ xi-9-ff (2-hidroxi-l- (dimetilfos fonometoxi) -etoxi) -metil /-guanina em 300 ml de metanol e 300 ml de NE/OE a 28%. Concentrou-se a solução in vãeuo e purificou-se o óleo residual por meio de cromatografia de coluna de fase inversa C^g utilizando-se ãgua, ~ 2 como eluente, sob pressão de 0,56 kg/cm (8psi). As fracçoes possuindo fracções ultravioletas foram confrontadas por HPLC , á

~7 6 —

- * reunidas e liofilizadas para se obter o composto em título, sob a forma de um po branco; rendimento de 1,15 g (65%).

Analise

5,51; N, 21,87.

Calcd. para C_QH_gN_β0?P H: C, 31,26; H,

EncontradoC, . 31, 63; H, 5,43; N, 21,72.

RMN ²H (300 MHz,fD₂O) : £ 3, 549 (d, J = 10,5 Rz, 3H),

3,571 (dd, J = 4,8, 13,2 Hz, 1H), 3,67 5	(dd,	J = 9,3, 13,2 Hz,
1H), 3,4-3,6 (m,	2H) , 4, 844 (t, J - 3,9	Hz,	1H),	5, 573 (d, J =
= 11,4 Hz, 1H),	5, 638 ' (â, J = 11,4 Hz,	1H),	7,	934 (s, 1H).

UV (H₂0): A máx 252 nm ,( g = 13, 871).

Exemplo 38:

Sal de dissodio de 9-£~ (2-hidroxi-l-(fosfonometoxi)-etoxi)-metil ff -guanina .(38)

A uma solução de 780 mg (2,0 mmoles) do s.al de amónio

-77de 9-// (2-hidroxi-l-(metilfosfonometoxi) -etoxi) -metil //-guanina em 20 ml de DMF anidra adicionaram-se 8- ml (60 mmoles) de bromo_ trimetilsililo, sob atmosfera de azoto e d temperatura de 5°C . Apos agitação durante 3 horas, ã temperatura de 5°C, eliminaram-se os produtos voláteis in vácuo e dissloveu—se o residuo em hi_ drog eno carbonato aquoso, saturado,, e re-evaporou-se in vácuo para s'e obter um solido. A punificação · deste produto pormeio de cromatografia de- coluna- dé' fase inversa C/g» utilizando, ãgua , como eluente, sob pressão .de. 8 psi, e liofilização das fracções reunidas, originou o composto em' titulo, sob a forma de um- põ branco; rendimento de 520 mg. (62%).

Análise Calcd. para C$Η^0^Pfla% 2H^0: C, 26,04; H, 3,89; N,· 16,87; Encontrado:· C, 26, 25; H, 4,05; N, 16,89.

UV (H₂):Ámãx 252 nm (Z = 15,150).

.. m/lRz, ('30.0MHz, D20)i^. 3,40'-3,59/(mf. 2H), (3,-605 fdd' ,

3.: = 5,.4, 11,6 Hz, IH).,. (-3, 698(ââ, 13. -9,0, 11,6 Hz, .111), 4, 837/) (t, 3 = 4,5 ílz, (IH) , 5,6.65 . (â,. 3: = . 11, 3 .'Hz, . 1'H) , 5,7.25 (d,·· 3'. = ..

- 11,3 Hz,: IH), 7, 999 (s, IH) .

RMN ¹³C (75, 47 MHz, D₂0) : 63, 268,- 6 5, 832, -67, 834 ,

71, 636, 104, 561, 104, 712, 117, 980, 141,823, 153, 521, 156, 320 ,

161,129.

Exemplo 39:

1- (4-metoxitetrahidro-2-furii)-timina (3A)

OCH,

ΙΑ

Φ

TMSO

ο

2Α

3Α

Α uma suspensão de 2,5 g/(20 mmoles) de timina em pó, < anidra, em 30 ml de hexametildisilazano adicionaram-se 50 mg de sulfato de amonio e 0,5 ml de cloreto de trimetilsililo. Aqueceu-se a mistura ã temperatura de 140°-145° C (durante 4 horas,) para se obter uma solução limpida. - Eliminou-se o excesso de he_ xametildisilazano sob pressão reduzida, depois dissolveu—se o óleo branco residual em xileno e evaporou—se em alto vácuo para se obter um óleo viscoso incolor-. Dissolveu-se a timina silila. da impura em 40 ml de diclorometano e arrefeceu-se ate ã temperatura de -20°C, e, depois, juntou-se 7,8 g (60 mmoles) de 2,5-dimetoxitetrahidrofurano. A esta solução adicionaram-se 2,3 ml de tetracloreto de estanho, por meio 'de uma seringa, durante 2 minutos e depois agitou-se durante 10 minutos, sob atmosfera de azoto. Verteu-se a mistura reaccional em 100 ml de NaRCO^ aquo_ so, arrefecido :-com-gelo, e 100 ml de acetato de etilo. ' Filtrou-se a solução leitosa através de celitee separou—se a camada or_ ganica e secou-se :sobre MgSO^. A evaporação dos dissolventes anidros originou um óleo amarelo que se cromatografou sobre SiO₂ —79 — (CHpCl₂~MeOH) para se obterem 4,3 g (95%) de 3A, sob a forma de um oleo incolor. Este óleo representava uma mistura de dois iso meros (cis/trans) em uma proporção de 1:1, como se verificou por meio da HPLC analítica e da RMN H.

RMN ²H (CDCl₃): & 1,4-2,2 (m, 7H), 3,40 e 3,42 (dois s, 3H), 5,2 e 5,25 (dois & largos, 1H), 6,20 e 6,41 (dois q, 1H, E = 3,5, 7,0 Hs, e 4,0, 7,2 Hs), 7,0 2' e 7,40 (dois s₃ 1H) .

Exemplo 40:

1-(5-dietilfosfonometoxitetrahidro-2-furil)-timina -(5A)

4A 5A

A uma' solução de 600 mg (2,65 mmoles) de 3A_ . (Exemplo 39) em -15 ml de cloreto de metileno, adicionou-se 0,6 ml de brometo de trimetilsililo e aqueceu-se ã temperatura de 4Q°-50°C durante 10 minutos, sob atmosfera de azoto. Evaporou-se a mistura reaccional in vãcuo para se obter 4AW, sob a forma de um oleo amare lo, que se dissolveu em 20 ml de-cloreto de metileno, e, depois, em 440 mg (2₃ 60 mmoles) de ãlcool dietilfosfonometílico. Arrefe.

ml de ar_ lavouceu-se esta solução ã temperatura âe -10°C, adicionou-se Q, devtrietilamina e agitou-se durante '15 minutos sem o banho refecimento. Após diluição com. 40 ml de acetato de etilo,

-se a mistura- reaccional com ãgua e uma. solução concentrada de cloreto de sodio. A evaporação do dissolvente, seco (MgSO^)., originou um óleo amarelo que- se cromatograf ou sobre SiO % (CH^CH^-MeOH) para se obterem 180 mg (18,5%) de 5A , sob a forma de um óleo branco.' Este Óleo era uma mistura de dois- isómeros cis/trans na proporção de 1:1, conforme se comprovou por meio de HPLC analítica e RMN ²H; RMN ²R (COCl.£ Í 1,25 (t, 6H, J = 7,0 Hz),

1,9 5 e 2,0 (dois S, 3H ), '2, 8-4, 0 (m, 2H), 4, 0-4,2 (m, 4H), 5,2 e 5,3 (dois S largos, 1H), 6,2 e 6,42 (q, q, ÍH, J - 2,5, 7,0 Hz e 4,0, 7,2 Hz), 7,0 e 7,4 (dois s, ÍH) .

Exemplo 41:

Ensaio e avaliação dos compostos contra·, p·.vírus- do herpes

A. Ensaio de redução dg-placa

Cultivaram-se estirpes de vírus- do herpes simples (HSV) e titularam-se ã temperatura de 37° C em células Vero/células do. rim de macaco verde africano) e utilizaram-se no trabalho virai antes da décima passagem. Cultivaram-se as células e mantiveram— -se no meio essencial mínimo de Earle (EMEM), de Gibco Laboratories, suplementado com hidrogenocarbonato de sódio a 0,7 5%, 2 mmo_ les de 1-glutamina, Pen-streep e soro fetal de vitela a 5—10%.

-81Sz

Determinou-se o titulo das estirpes, do HSV por meio :.âo método de titulação da placa (Roizman e. Roane, Virology, 115 ,

11961), 75-79. Semearam~se placas de petri de 24 cavidades com a cultura do tecido, com células e. utilizaram-s.e para ensaios quando se obteve, aproximadamente, uma monocamada de 75%. Inocu_ laram-se volumes (0,1 ml) de diluições logarítmicas das estirpes virais em cada grupo de tres cavidades e foram absorvidas durante 1 hora, com agitação intermitente. Depois, removeu-se o inoculado e adicionou-se 1 ml.de EMEM a.5-10% contendo 0,5% de globulina de soro humano, imune. Apos uma incubação durante um período de 48 horas, ã temperatura de 5 7° C, em uma atmosfera de CO₂ a 5%, removeu-se a camada superficial do meio- e coraram-se as finas camadas celulares com corante de Giemse; Contou-se o numero de placas, calculou-se a média do triplicado e calculou— -se o numero de placas que formavam unidades por ml. Os compostos foram testados relativamente ã actividade contra as manchas do herpes simples utilizando-se uma- solução da reserva de cada composto, recentemente preparada. ' Fez-se a diluição apropriada de cada composto em EMEM a 10% antes da utilização. Determinou-se a eficácia anti-viral de cada composto utilizando-se o ensaio de redução da placa, descrito antes. Em resumo, fez~se a determinação com a cultura do tecido em placas de 24 cavidades, ::..3cam:· aproximadamente 50 unidades da formação de placas de HSV por 0,1 ml , e o vírus absorvido durante 1 hora, com agitação intermiten. te. Após a remoção do inóculo, adicionou—se em triplicado, mlde EMEM a 10% contendo .diluições -duplas do fármaco apropria do. Tres cavidades por placa não receberam o fármaco e utilizaram-se como um controlo do vírus. Apos. um- período de incubação de 48 horas, a temperatura de 37°C, em uma atmosfera de CO% a .

Ζ

-sk,Ώ

5% j removeu-se a camada superficial do meio, coraram-se as células como se descreveu antes, e contaram-se as placas, Calculou-se a media das contagens das cavidades em triplicado e calculou-se o numero de placas na presença de cada diluição do fãrmaco.

Determinou-se a potência anti-viral do medicamento por in termêdio da DI a concentração do fãrmaco neces-sãria para reduzir o numero de placas de 50% das existentes nas culturas de vírus de controlo.

Mostram-se os resultados no Quadro 1 indicado a seguir.

Quadro 1

Resultadas do teste anti-viral do composto'8 -(ver Exemplo 8) contra HSV-1 e HSV-2

Dlgg (/ug/ml)

Composto- HVS-1 HVS-2

ACV (Aciclovir) 0,5. 0,5

Composto 8 2,6 11

Exemplo 42: Comparação do Composto 8 e do Aciclovir (ACV)in vivo

Inocularam-se grupos de dez murganhos, por via intraperi_ toneal, com 200 a 600 PFU/0,2 ml. de vlrus-l de herpes simples_ (estirpe HL-34). Administraram-se doses diferentes do composto

-8-2Λ3 do teste α grupos separados de animais .com base em BID* durante cinco dias consecutivos* a começar tres horas apos a - inoculação. 0 tratamento efectuou-se por via intraperitoneal.. A.-, experiencia:: terminou 21 dias após a inoculação e contou—se o número de sobre_ viventes em cada grupo. Calculou-se o tempo medio de sobrevivên. cia (MST* dias).

Quadro 2

Acção anti-viral	do composto- 8 contra Infecção Sistémica por HSV-.
	nos	murgahnos
Composto	Dose (mg/kg/d). Via-	Sobrevivência
Composto 8..	300 100 10	i.p. i.p. i.p.	10/10 9/10 2/10
ACV	200 100	i.p. i>p.·	6/7 7/10

Iniciou-se o tratamento 2 horas após a infecção e administrou-se BID durante 5 dias consecutivos.

Exemplo 43:

leste de avaliação dos compostos contra os retrovírus murinos

Avaliaram-se os compostos no que respeita ã actividade

anti-viral contra as estirpes do vírus da leucemia- murina (MuLV) utilizando-se o ensaio da placa UV-XC / Rowe'et al., Virology , 42, (1970) 1136. As estirpes MuLV foram cultivadas em células (SC-1) de murganho silvestre' e utilizadas em- testes anti—virais usando-se o ensaio da placa UV-XC. Em resumo, as células (SC-1) são cultivadas como monocamadas em placas de cultura de tecidos, de 4 cavidades,- e são inoculadas com, aproxímadamente, 50 a 100 unidades de formação de placas de MuLV em 0,-5 ml de EMEM a 5% con_ tendo 20 ug/ml âe DEAE/dextrano. Após 1 hora'âe adsorção, remove-se o inoculo .e adicionam-se 5 ml de EMEM a 5%.contendo o triplo das diluições do fármaco· apropriadoCinco dias depois, irradiam-se as culturas eom UV, com uma lâmpada de ultravioletas e adicionam-se as células XC do., sarcoma de ratos ãs ycHílturas, Tres a quatro dias após a irradiação por UV, coram-se as culturas celulares com corante de Giemsa e contam-se as placas. A activida. de anti-viral expressa-se -em--termos de redução do numero medio das placas UX-XC contadas nas- culturas infectadas- pelo virus , tratadas com o fármaco, comparadas com o número- médio de placas contadas- nas culturas de-controlo infectadas, por vírus, não tratadas.

Exemplo 44:

Avaliação contra HIV in vitro

Utilizou-se o ensaio'de,HIV in vitro, descrito como se segue: mede-se a actividade -anti-HIV/LAV em culturas -de células

CEM-E. As células CEM são infectadas com, aproxímadamente, 30 T ζ

/85Í κ

DIçg £ 207ο da dose infecciosa do tecido, de cultura HIV (estirpe LAV)£. Depois, incubam-se as células durante 45 minutos, ã tem. peratura de 37° C. Adicionam-se os compostos do teste em meio de cultura, em varias concentrações, a células infectadas e depois, incubam-se durante mais 8 dias. Apos. 8 dias,- avalia-se a activi. dade anticviral no sobrenadante do meio de cultura pela proteína p-24 inibida, por meio de um ensaio, de. captura de enzima.(ELISA). A actividade anti-viral foi expressa como a dose que inibe 50% da expressão do vírus (DIem ug/ml), como se averiguou por meio do ensaio descrito.

Quadro 3

Resultados do teste anti-viral do composto 25 (ver Exemplo 25) contra os retrovirus

Composto

AZT

Composto 25 (IDçq (fiig/mL)

R-MuLV HIV

0, 05 0,1

0,3 1,8

Exemplo 45:

6~N-pivaloil-9-(2, 3-diâesoxi-3, 4-dihidro- -D-eritrofuranosil) -adenina /-8 6'V

HNPV

A uma solução de 2,0 g (10 mmoles) de 9-(2,3-diãeso,xiV

-3,4-dihidro-^-D-eritrofuranosil)-adenina /preparada de acordo com o processo da literatura: J, Zemlicka, R. Gasser-, J. V. Freisler, J. P. Horwitz, J_. AmerOhem; Soc., 94, (1972) 3213 , em 10 ml de 1, 2-dicloroetano adicionou—se 1 ml.de piridina, 170mg de dimetilamiho.piridina e 1,5 g (12 mmoles) de cloreto de pivaã loílo. Aqueceu-se · a solução- resultante a temperatura de 55°—56°C durante 6 horas, sob atmosfera de azoto. Depois, concentrou-se a mistura in vácuo, adicionou-se CH/Slg, lavou-se com ãgua,

HgPO^ a 20% e com uma solução concentrada de cloreto de sodio , secou-se sobre MgSO^ e evaporou-se in vãóuo. Cromatografou-se o oleo residual sobre gel d.e sílica, -utilizando CR%Cl%-MeOE a 3%, como eluente,: para se obterem 2,45 g (85%) do composto 2, sob a forma de um po branco.

RMN ²H (CDCl%) k 1,24 ' (s, 9H), 2,29 (dãd, J13,5, 5,0

17,1 Rz, 1H), 3,33 (dddd,> J=2,4, 5,0, 9,4, 17,1 Hz, 1H), 5,24 (dd, J=2,4, 5,0 Hz, 1H), 6,41 (dd, J=3,5, 9,4 Hz, IR), 6,48 (dd,

J=2,4, 5,0 Hz, IR), 8,18 (s, 1H), 8,73 (s, IR) .

/ t-87.ç?

Exemplo 46:

6-N~pivaloil~9~£~ 2, 3-didesoxi-4-fi-cloro~3-^,1>‘-( fenilselenil) - -D-eritrofuranosil ff-adenina

HNPv

A uma solução do composto .do Exemplo 45 (3,5 g; 12,2 mmo_ les) em 40 ml de CH^Cl^ adicionou-se, ã temperatura de -25°C, uma solução de 2,7 g (14,0 mmoles) de cloreto de fenil de azoto. Apos agitação durante 30 minutos;, ã temperatura .de -25°C, eliminou-se o dissolvente in vacuo para se obter o -composto 3_, sob a forma, de um óleo amarelo) Utilizou-se este produto, prontamente, na reacção seguinte.

^: RMN ²E (CDCl_ê) & 1,41 (s, 9H), 2,88 .(m, 1H), 3,23 (m, 1H), 4,36 (d, J=6, 3 Hz, 1H), 6,29 (s, 1H), 6,80 (dd, 5=6,6, 8,4 Hz, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,77 (s, 1H) .

^<z-8.8f'z

Exemplo 47:

6-N-pivaloÍl-9-/f ( 2, 3-ãidesoxi-4-fi-dimetilfo sfono)-metoxi-3-*-( r (f enilselenil)-t-D—eritrofuranosil- ff-adenina

A uma solução do composto do Exemplo 46 (aproximadamente 12 mmoles) e de hidroximetilfosfonato de dimetilo (16,8 g; 120 mmoles) £ preparado de acordo com o processo da literatura: Ό. P Philion e S. S. Andrés, Tetrahedron Lett. 27, (19.86) 1447 ff em ml de CH^Cl^ adicionou—se, ã temperatura de -25°C, uma solução em suspensão de 4,0 g (20 mmoles) de perclorato de prata em 10 ml de CH^Cl^ e 5 ml de hidroximetilf osf onato de dimetilo, du_ rante 5 minutos sob atmosfera de azoto. Aqueceu-se a mistura ã temperatura de 0°C, agitou-se durante 60 minutos e, depois, ver_ teu-se em 100 ml de CH^Cl^ -100 ml de hidrogenocarbonato áquoso-50 ml de uma solução concentrada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica após a filtraçao, secou-se sobre MgSO^ e eva_ porou-se. Cromatografou-se o óleo residual sobre gel de silica utilizando-se CH%Cl%-MeOH'a 5%, como eluente, -para se obter o j composto 4. (3,2g ; 451)., sob a forma de um óleo incolor.

l

V f

	RMN 2	H (CDCIJ i 1,25 6	(s, 9H), 2, 61	(ddd,	2,7, 6,6,
14,4	Hz, 1H),	2,96 (ddd, J=6,6,	7,5, 14,4	Hz, 1H),	3,68 (d,
J=ll	Hz, 6H),	3,7-4,0 (m, 3H),	5,24 (s, 1H),	8,27 (S,	1H), 8,67

(s, ΙΗ).

Exemplo 43:

6-N-pivaloíl-9-E' 2,3-didesoxi-2,3-dihidro—4-l·-(dimetilfosfono)-metoxi-l·-Ό-eritrofuranosil Tf-adenina

A uma solução do composto do exemplo 47 (3,3 g; 5,6 mmoles) em 30 ml de dioxano adicionou-se uma solução de 6,3 g (30mmo_ les) de periodato de sodio em. 30 ml de ãgua e agitou-s e:,a solução resultante ã temperatura de 23°C durante 4 -horas. Adicionaram-se 200 ml de CH^Cl^ e filtrou-se a mistura através de celite. Lãvou-se a fase orgânica com ãgua e uma -solução concentrada de- cloreto de sódio, secou-se sobre MgSO^ e evaporou-se in vãcuo. Cr&matógra. fou-se o oleo residual sobre gel de silica, utilizando CH ^Cl^-MeOH a 5%, como eluente, para se obter o composto 5 (1,4 g;:57%), sob a forma de um oleo incolor.

// ί-η

RMN ²Η (CDCl$) i 1,21 (s, 6H), 2,64 (d, 1=10,8 Hz, 3H), 3,71 (d, J=10,8 Hz, 2H), 2,84 (dd, J=8,7, 9,9 Hz, 1H), 5,87.'(s, 1H), 6,27 (d, J=6,0 Hz, 1H), 6,34 (dd, 1=1,5, 6,0 Hz) 1H), 7,00 (d, J=l,5 Hz, 1H), 8,04 (s, 1H), 8,66 (s; 1H) ;

RMN ¹³ C (CDCl_z) 4 27, 524, 40, 607, 53, 218, (d, 1=6,2

Hz), 61,588 (d, 1=165 Hz), 86, 247, 109, 202, 122,406,' 130, 657, 132, 679, 141, 966, 150, 205, 152, 056, 176, 547.

Exemplo 49:

Sal de sódio de p-/f2,3~didesoxi-2,3-didesIdro^4~$-(metÍlfosfono)-metoxi-$-D-eritrofuranosil J-adenina

Agitou-se uma solução do eomposto do Exemplo' 48 (330 mg; 0,78 mmoles) e 250 mg (4,6 mmoles) de metóxido de sodio em 10 ml de metanol, ã temperatura de 23°C durante 18 horas. Neutralizou-se cuidadosamente a mistura reaccional até pH 5,0 por meio da adição, gota a gota, de HCl 2N em um. banho de gelo. Registou-se o pH da solução para 8,0 por meio de NH^OH concentrado e elimina^ ram-se os produtos voláteis in vãcuo. Purificou-se o resíduo

-91/

Λ sólido por meio de coluna cromatografica de fase inversa C^^ uti_ ~ 2 .

lizando-se agua, como eluente, sob pressão- de 0,56 kg/cm ((8 psi) para se obter o composto 6_ (141 mg; 49%), sob a forma de um pó branco, amorfo.

RMN ⁷ tf (D₂0) i 3,34 (d, 9=10,5 Hz, 3H), 3, 65 (dd, 9=9,2, 13,2 Hz, IH), 3,80 (dd, 9=9,2, 13,2 Hz, 1H), 5,99 Is, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,83 (s, 1H), 8,11 (s,- lR), 8,14 (s, 1H);

RMN ¹³ C (D₂0) 58,542 (d, 9=3,0 Hz), .68,483 (d, 9= 150

Hz), 92, 797, 116, 319, 125, 121, 136,147, 139, 719, 147,-131, 155, 275,

159, 781, 162, 359.

UV max- (-ΒρΟ) 260 nm ( 6 12, 964).

Anal. Cale, para CH^H_rsN_s0PNà H₂0: C, 3 5, 97; H, 3,90;

N, 19,07.

Encontrado: C, 35, 53; H, 3,71; N, 18,78.

Exemplo 50:

Sal de amónio de 9-ff 2, 3-diãesoxi-2, 3-diHidrá—4-í>-(fosfonometoxi) -D-eri tro furano sil //-adenina

HO f/ /

-92, .ο

Agitou-se ã temperatura de 0°C, dwzante '3 horas- e sob at_ mos fera -de azoto, uma solução do composto do Exemplo 49 (310 mg;

0,9 mmole ) e 1,0 ml de brometo de trimetilsililo em 4 ml de DMF.

Eliminaram-se os produtos voláteis in vácuo e dissolveu-se o residuo em 2 ml de NR^OR concentrado. Evaporou—se a água innvã— cuo e purificou-se o solido residual por meio de coluna cromato.

gráfica de fase.inversa Cutilizando água, como- eluente, sob a ~ - 2 pressão de 6,56 kg/cm (8 psi), para se obter o composto 7_ (128 mg; 43%), sob a forma de um po branco amorfo.

UV máx- (%₂0) 260 nm ( ê 14,982);

RMN ²H (D^O) á 3,59 (dd,- 9=9,3, 22,2 Hz, IR), 3,69 (dd, 9=9,3, 22,2 Hz, 1H), 5,99 (s, IR), 6,46 (d, 9=6,0 Hz, 1H), 6/50 (d, 9=6,0 Hz, 1H), 6,83 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 8,13 (s, 1H);

RMN ²Jc (D₂0) i 70, 256 (d, 9-150 Rz), 93, 065, 122, 434, 136, 579, 139, 835, 147, 763, 155, 424, 15-8, 990,

116,510 ,

161, 809.

Anál. Cale, para C gH^gN^OõH^O:

C, 31,25; H, 5,46;

N, 21,87.

Encontrado: C, 31,. 32; H, 5,85; N, 22,15.

controlos AZT para confirmar a validade do teste.

Avaliou-se este composto com actividade anti-retroviral por meio dos métodos descritos -nos Exemplos 43 e 44. Obtiveram-se os resultados, seguintes. Marcaram-se, simultaneamente, os /?

-93Vírus

Linha de Células

Células toxicas

DI

HIV	CEM	1 OOum	4 5um
MuLV	SC-1	lOOum	0, lum
HIV	MT-4	5OOum ''	1, 5um
MuLV-R	SC-1	lOOum.	0,Olum

Exemplo 51:

6-N-pivaloíl-9-/ 2, 3-didesoxi-4-f>- ( dime til fosf ono ) -me to xi-S-*¹·-iodo-jl> -D-eritrofuranosil)-adenina

A ..uma solução do composto do Exemplo 45 (3,5 g; 12,2 mmo_ les) e 16,8 g (120 mmoles) de hidroximetilfosfonato de dimetilo em 40 ml de CH^Cl^ adicionaram-se, gota a gota, e ã temperatura de 0°C, 2,75:g (12,2 mmoles) de. N-iodo-succinimida e agitou-se a mistura durante 2 horas, ã temperatura de 0°C. Diluíu-se a mistura reaccional com 50 ml âe CH^Cl^, lavou-se com agua e com uma solução concentrada de cloreto de sodio e secou-se sobre MgSO^. Cromatografou-se o óleo residual sobre gel de sílica CH%Cl^-MeOH a 3%, como eluente, para se obter o composto 8_ (4,9 g; 7 2%), sob a forma de- um óleo ligeiramente amarelo..

/

ç.·

	RMN 2H	(CDCl$) á 1,36	(s,	9H), 2,	89 (dd, J=6,3, 9,7
1H),	3, 20	(dd.	J-6, 3, 10,3 Hz,	1H)	, 3,7 ~3,	9. (m, 8H), 4,49 (d.
J-5,	4 Hz,	1H),	5,50 (s, IR), 6	, 86	Ct., J=7,	2 Hz, 1H), 8,29 (s.
1H),	8, 50	(S largo, 1H), 8,74	(s;	1H) .

Exemplo 52:

6-N-pivaloÍl-9-£ 2, 3-didesoxi—2, 3-dihidro-4-$-(dimetilfosfono)-metoxi-fr-D-eritrofuranosil .J-adenina

Aqueceu-se ã temperatura de 65°C, durante 2 horas, uma solução do composto do~ Exemplo 51 (1-, 7 g; 3,0 mmoles) e 912 mg (6,0 mmoles) de 1, 8-diazabiciclof_ 5,4,0 f?undec-7-eno em 20 ml de CRCl^. Lavou-se a mistura reaccional com H^PO^ a 20%, arrefecido com gelo e com uma solução concentrada de cloreto de sodio, seco.u~se sobre MgSO^ e. evaporou-se in váeuo . . Purificou-se o oleo residual sobre gel de silica, utilizando-se CR %Cl%-MeOR a 3%, para-se obter 0 composto 5_ (1,2 g; 90%), sob a forma de um óleo incolor. Este produto era idêntico ao composto do Exemplo

48.

Exemplo 52:

Sal de dissodio de

1-/Ã 2, 3-didesoxi-4-&~(fosfonometoxi)-$-D-eritrofuranosil J-timina

Hidrogenou~se durante 30 minutos- e sob pressão de 2,1 kg/ /em (30 psi)H^, num- hidragenador Parr; uma mistura do composto do Exemplo 25 (200 mg; 0,57 mmoles) e 180 mg de paládio a 10% sobre carvão activado, em 20 ml de ãgua, Filtrouse o catalisador através de celite com-o auxílio de uma lavagem com ãgua. Eli. minou-se a ãgua mediante liofilização, -para se obterem 205 mg (100%) do composto desejado, sob a forma de um pó branco, amorfo.

UV	máx	(h2°)	268 nm	( ε	8844);
RMN	Ih	(D20) &	1,8-6 (s.	3H)	, 2,0-2,4	(m, 4H),	3,	41	(dd,
J=8,l, 12,9	Hz,	1H), 3,	62 (dd,	J=8,	1, 12,9Hz,	1H), 5,	32	(t,	J-2, 7

Hz),’ 6,24 (t, J=7,0 Hz, 1H) , 7,60 (s, 1H) .

RMN ¹²C (D₂0) i 18, 496, 35, 384, 38, 041, 72, 628, (d, Jíl50 H₂), 93, 249, 113, 423, 118, 884, 158, 494, 174, 169.

Anãl. Calcd. para C.^^H^^N^O^ PNa 1 1/2 H %0: C, 31,83 ;

H, 4,24; N, 7,42.

i \x

Encontrado: C, 31,62; H, 3,95; N, 7,28,

Exemplo 54:

e-N-pivaloíl-O-f 4-$> - (dimetilfosfono) —metoxi-$-D-eritrofurano— sil ff -adenina

A uma solução de 860 mg (7,0 mmoles) de doido fenilborico e 900 mg (7,5 mmoles) de N-óxido de' 4-metilmorfolina em 20 ml de CK^Cl adicionaram-se, ã temperatura de 23°C, 25 mg de tetroxido de'ósmio e 2,75 g (6,4 mmoles) do composto do Exemplo 52 em 10 ml de CE^Cl^. Agitou-se a mistura durante 2 horas e adicionaram-se 4 ml de biossulfito de sódio aquoso a 10%. Após agitação durante 1 hora, separou-se o CH^Cl^, lavou—se com uma solução concentrada de cloreto de 'sodio e secou-se sobae MgSO^. AZeVapo— ração do dissolvente originou um óleo branco que se dissolveu em 15 ml de acetona e 760 mg (10 mmoies) de 1,3-dipropanol. Eliminaram-se todos os produtos voláteis in vãcuo e cromatografou-se o óleo resultante sobre gel de sílica utilizando uma mistura do CE^Cl ^anterior, em etanol a 7%, como eluente, para se obterem

2,3 g (76%), sob a forma de uma espuma branca.

-afRMN ²S (CDClg) Í 1,28 (s, 9R) , 3,72 Cd, J=10,5Hs, 6H), 3,73 (dd, J=10,6, 13,5Hs, 1H), 3,95 (d, J=1Q,6, 13,5 Rs, 1H)

4,91 (dd,J=4, 5, 6,3 Hs, 1H), 4,33 (d; J=4,5 Hs, 1H) , 5,09 Cs,

1H), 6,38 (d, J=6,3Hs, 1H), 8,35 (s, ÍH), 8,49 (s, ÍH), 8,83 (s largo, 1H).

Exemplo 55:

Sal de amonio de 8-/ 4-f>-(metoxihidroxifosfinil)-metoxi-$^>-D-erifuranosil ff-adenina

Agitou-se ã temperatura de 23°C, durante 7 horas e sob atmosfera de asoto, uma solução do com-osto do Exemplo 54 (2,2 mg

4,8 mmoles) e 1,49 g (26 mmoles) de metóxido de sódio em 50 ml de metanol. Eliminaram-se os produtos voláteis in vãcuo e dissolveu—se o Óleê> residual em 20 ml de ãgua. Aqueceu-se a solução aquosa ã temperatura de 35°C durante 10 horas. Neutralisou-se a mistura reaccional, cuidadosamente, ate -pH 5₃0 por meio âa adi_ ção, gota a gota, de HC12N em. um banho de gelo. Depois, r.eajus_ tou-se o pH da solução para 8,0 comNH^OH concentrado e elimina-9.8 — /5’ ί <ζ, ram-se os produtos voláteis in vácuo. Purificou-se o residuo solido por meio de uma coluna cromatog.rãficá :de · fase inversa utilizando-se ãgua CH^Cl a 5%, como eluente-, sob pressão de 2

0,56 kg/cm (8 psi), para se obter o oomposto 11 (1,3 g; 75%).

UV mãx (H^O) 260nm (S 10,019);

RMN ²H (D₂0) 3, 56 (d, 5=10,5 Hz, 3H), 3,61 (.dd, 5=10,

12,9.5Hz, ÍH), 3,83 (dd, 5=10, 12,9 Hz, 1H), 4,38 (d, 5-11,0 Hz, 1H), 5,0 (dd, 5-6,2, 11,0 Hz, ÍH), 5,19 (§, 1H);

RMN ¹³C (D^O) & 53, 897, (d, 5-6,0 Hz), 64, 192 (d, 5-150 Hz), 75, 589, 75, 909, 111, 096, 141,824, 151, 079, 154, 785, 157, 254.

Anãl. Cale., para CH £1 £1 0?.. 1 ³^4 NaCl: C, 28, 46; A Η,.3,46; N, 15,08.

Encontrado: C, 28,59; H, 343; N, 14,72.

Exemplo 56:

Sal de amónio de 9-f 4-$-(fosfonomeioxi)-me’toxi-$-D-eritrofuranosil /-adenina

/Γ

Agitou-se ã temperatura de 23 g durante .6 horas' e sob atmosfera de azoto, uma solução do composto do-Exemplo 55 (1,5 g;

4,1 mmoles) e 7 ml de brometo de trimetilsililo 'em 30 ml de DMF. Eliminaram-se- os produtos- voláteis in .vãcuo e dissolvèu-se o re síduo em 3 ml de NH^OH concentrado .· Evaporou-se’ a ãgua in vãcuo e purificou-se o solido residual por meio de coiuna cromatográfi_ ca de fase inversa .C$ utilizando ãgua -como eluente, para se obter o composto 12 (600 mg; 40%), sob a forma de um po branco, amorfo.

UV mãx (H₂0) 262 nm ( £ 12, 640);

RMN H (D₂0) j 3,56 (dd, J=10,Q, 12,9 Rz 1H), 3,79 (dd, J=10,0, 12,9 Hz, 1H), 4.,31 (d, J=ll,0 Rz, 1H), 4,92 (dd, J= = 6,0, 11,0 Hz, 1H), 5,17 (s, 1H), 6,08 (d, J=O.Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,25 (s, 1H).

13.

RMN C (D₂0) Φ · 66, 296 (d, J=l-5? Hz), 7 5, 881, 76, 967, 88, 982, 111, 148, 119,.927, 142, 208, 150, 689, 153, 560, 156, 330.

Anãl. Calcd. para. C ^^Η^^ΝρΟ P 2®^: C* 30,0 5; H,- 5,26;

N, 21,03.

Encontrado: C, 30, 09; H, 5,06; N, 20, 38.

Deve notar-se que a memória(descritiva e as reivindicações foram estabelecidas comoo objectivo de ilustrar e não de limitar a presente invenção·, ' sendo possível' efectuar várias modi ficações e substituições sem afastamento do espírito e do âmbito da invenção.

Claims (11)

1. REIVINDICAÇÕES ral

   1.O

   II

   XO-Ps óx¹ (I)

   R’ na qual

   X e X’, iguais ou diferentes, representam, cada um, um ãtomo de hidrogénio, um grupo alquilo C^_g tiao de uma base capaz de originar sais, ou um ca-101¹ R e R*, iguais ou diferentes, representam, cada um, um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C₁__g, hidroxialquilo C^_g ou alcanoílo ^θ

   B representa uma base purínica ou pirimidínica escolhida entre as bases xantina, guanina, purina, citosina, uracilo ou adenina, bases estas eventualmente substituídas, ou timina, e dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto (a) para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

   R' representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^Cl-6' ^e

   B tem os significados definidos antes, de se fazer reagir um composto de fórmula geral na qual

   R representa um grupo alquilo C/_g ou arilo eventualmente substituído, com uma pirimidina ou purina sililadas na presença de um ácido de

   Lewis para se obter um composto de fórmula geral ,-1020 na qual

   R tem os significados definidos antes na fórmula geral IX, e

   B tem os significados definidos antes, e de se fazer reagir este último composto com um composto de fórmula geral

   II (OR’) na qual

   R* representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo na presença de um ãcido de Lewis, ou (b) para a preparação de compostos de. fórmula geral o

   na qual

   R representa um grupo alquilo C₁__g, e B tem os significados definidos antes, de se fazer reagir um composto de fórmula

   -103- com um composto de fórmula geral

   II (RO)gPNa na qual

   R representa um grupo alquilo C_{n c}, ±•0 para se obter um composto de fórmula geral na qual

   R representa um grupo alquilo e de se fazer reagir este último composto com uma base purlnica ou pirimidínica, ou (c) para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

   R representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^cl_6' ^e

   B tem os significados definidos antes,

   -104de se fazer reagir um composto de fórmula geral na qual

   B tem os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral

   II

   Ηθ_χ^_/Ζ^Ρ(0Κ)2 na qual

   R representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^Cl-6' na presença de um perãcido.
2. 2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual X e X', iguais ou diferentes, representam, cada um, um ãtomo de hidrogénio ou de sódio ou um grupo etilo ou metilo e R e R’, iguais ou diferentes, representam, cada um, um ãtomo de hidrogénio ou um grupo metilo, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3. 3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de

   105-

   (a) sal dissõdico de (b) sal dissõdico de (c) sal dissõdico de (d) sal dissõdico de (e) sal dissõdico de -meti1_7~guanina (f) sal dissõdico de -metil _7-adenina (g) sal dissõdico de -citosina e (h) sal dissõdico de

   -metil_7-timina, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corre spondentemente substituídos.
4. 4.Processo para a preparação de compostos de formula ger;

   na qual a linha ponteada representa, eventualmente, uma ligação dupla,

   Y e Z, iguais ou diferentes, representam, cada um, um ãtomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi ou alquilo C_1-6 eventual106mente substituído ou Y e 2 representam, considerados conjuntamente, um ãtomo de oxigénio ou um grupo metileno, situação em que a linha ponteada representa uma ligação simples, e

   X, X* e B têm os significados definidos antes na fórmula geral I, e dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se fazer reagir um composto de fórmula geral na qual

   B tem os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral na qual

   R representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^Cl-6' na presença de um perãcido, para se obter um composto de fórmula geral

   -107ο ¹¹ Ζ <RO)gP^/

   Β

   HO na qual <

   R e B têm os significados definidos antes.
5. 5. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral II na qual Y e Z, iguais ou diferentes, representam, cada um, um grupo alquilo comportando um substituinte escolhido entre ãtomos de halogéneo ou grupos hidroxi, amino ou azido, caracterizado pelo facto de se utili zarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. 6. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de (a) sal dissõdico de 1-(4-fosfonometoxitetra-hidro-2-furil)-timiná, (b) sal dissõdico de l-/~2,3-didesoxi-2,3-didesidro-4-fosfonometoxi-beta-D-eritrofuranosil_
7. 7-timina, (c) sal sõdico de l-Z2,3-didesoxi-2,3-didesidro-4-beta-(metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil_7-timina, (d) sal sõdico de 1-/”2,3-didesoxi-4-beta-(metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil JZ-timina,

   -1086' (e) sal sõdico de 1-/ 2,3-didesoxi-2,3-didesidro-4-beta-(metilfosfono) -metoxi-beta-D-eritrofuranosil_7-adenina, (f) sal sodico de l-/^_2,3-didesoxi-2,3-didesidro-4-beta-metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil //-guanina, (g) sal sõdico de l-/“2,3-didesoxi-2,3-didesidro-4-beta-(metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil //-citosina, (h) 1-/7 4-beta- (dimetilfosfono) -metoxi-beta-D-eritrofuranosil /7-timina, (i) 1-/7 4-beta- (dimetilfosfono) -metoxi-beta-D-eritrofuranosil/7-adenina, (j) 1-/Γ 4-beta-(dimetilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil/7-guanina, (k) 1-yT 4-beta- (dimetilfosfono) -metoxi-beta-D-eritrofuranosil J-xitosina, (l) 1-/ 4-beta-(metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil_//-timina, (m) l-/^- 4-beta-(metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil_7~ -adenina, (η) 1-/Γ4-beta- (metilfosfono) -metoxi-beta-D-eritrofuranosil__7-guanina, (o) 1-/7 4-beta-metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosilJ-citosina, (p) sal dissõdico de 1-/” 4-beta-fosfonometoxi-beta-D-eritrof uranosil^7-timina, (q) sal dissõdico de 1-/7 4-beta-fosfonometoxi-beta-D-eritro-109f uranosil/⁷-adenina, (r) sal dissódico de l-£~4-beta-fosfonometoxi-beta-D-eritrofuranosil)-citosina, (s) sal dissódico de 1-/7 4-beta-fosfonometoxi-D-eritrofuranosil)-citosina, (t) 1-/Γ 2-desoxi-4-beta-(dietilfosfano)-metoxi-beta-D-eritrofuranosilJ7~timina, (u) l-£~2-desoxi-4-beta- (dietilfosfono) -metoxi-beta-D-eritrofuranosil/7-adenina, (v) 1-/72-desoxi-4-beta-(dietilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil_7-guanina, (w) 1-Z 2-desoxi-4-beta-(dietilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil_7-citosina, (x) sal dissódico de 1-(2-desoxi-4-beta-fosfonometoxi-beta-D-eritrofuranosil)-timina, (y) sal de monoamónio de 1-(2-desoxi-4-beta-fosfonometoxi-beta-D-eritrofuranosil)-adenina, (z) sal dissódico de l-(2-desoxi-4-beta-fosfonometoxi-beta-D-eritrofuranosil)-guanina, (aa) sal dissódico de 1-(2-desoxi-4-beta-fosfonometoxi-beta-D-eritrofuranosil)-citosina e (ab) sal sódico de 1-(2-desoxi-4-beta- (metilfosfono)-metoxi-beta-D-eritrofuranosil)-adenina, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   1107.- Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

   X representa um atomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^Cl-6'

   R representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo hidroxi, e B tem os significados definidos antes na fórmula geral I ou II, e dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8. 8.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

   -111ύ ΛX representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo ^Cl-6^f

   R representa um ãtomo de hidrogénio, um grupo alquilo

   C^_g ou hidroxialquilo ou um grupo de fórmula geral

   R’”-CO- na qual R”' representa um grupo alquilo e

   B tem os significados definidos antes na fórmula geral I, e dos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corres pondentemente substituídos.
9. 9.- Processo para a preparaçao de composições farmacêuticas utilizadas no tratamento de infecções virais ou retrovirais ou de neoplasias em animais de sangue quente, caracterizado pelo fac to de se misturar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral I, II, III ou IV, preparado pelo processo de acordo com as reivindicações 1 ou 4, como ingrediente activo, com um veículo só lido ou líquido aceitável em farmácia.
10. 10. - Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação de derivados de 4¹-fosfonometoxitetra-hidrofuranil-l'-purina/pirimidina, caracterizado pelo facto de se utilizarem com postos iniciais correspondentemente substituídos.
11. 11, - Processo para a preparação de compostos intermédios de fórmula geral

    112- na qual

    X representa um átomo de halogéneo,

    Y representa um átomo de halogéneo ou um grupo

    B tem os significados definidos antes nas fórmulas gerais I ou II, caracterizado pelo facto de se fazer reagir vim composto de fórmula geral

    B na qual

    B tem os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral

    X-Y na qual

    X e Y têm os significados definidos antes,