PT93954A

PT93954A - Processo para a preparacao de compostos de 2-hidroxi-3-fenoxipropilamino e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT93954A
Application number: PT93954A
Authority: PT
Inventors: Ralph Howe; David James Lecount; Balbir Singh Rao
Original assignee: Ici Plc
Priority date: 1989-05-05
Filing date: 1990-05-04
Publication date: 1991-01-08
Also published as: DD300542A5; NO910033D0; GR900100332A; HUT58277A; EP0426804A1; ZW6790A1; MW4190A1; JPH03506037A; IE901438L; IE63533B1; GB9008867D0; DE69006178T2; GB8910374D0; AU5540390A; DE69006178D1; ZA903111B; FI910059A0; WO1990013535A1; KR920701123A; BG93509A

Description

Descrição da patente de invenção de IMPERIAL· CHEMICAL· INDUSTRIES PDC, britânica, industrial e comercial, com sede em Imperial Chemical House, Millbank, London SW1P 3JE, Inglaterra, (inventores: Ralph Howe, David James Decount e Balbir Singh Rao, resi dentes na Inglaterra), para "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE COMPOSTOS DE 2-HIDR0XI-3-PEN0XI-PROPIIAMINO E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM".

DESCRIÇÃO A presente invenção refere-se a compostos de 2-hidroxi-3-fenoxi-propilamino e em particular a com postos que contêm um grupo fenilacetilo e a certos derivados seus. Esta invenção refere-se ainda a processos e intermediários para a sua preparação, referindo a sua utilização em métodos de terapia e composições farmacêuticas que os contêm. A I administração dos compostos desta invenção a animais de sangue quente proporciona um efeito termogénieo, isto é a termogénese é estimulada e a administração dos compostos é utilizada, por exemplo, no tratamento da obesidade e condições semelhantes por exemplo a obesidade associada com o estabelecimento de diabetes em adultos. A Patente UK 1245148 reivindica eompos- * tos com a fórmula:

PA - 1 - 1

^&'W£Q&] Βί#1

Ra—I— A--ICH2CH(0H)CH2MfCEaRs-(CH2)n-'í

^<E B R' na qual Raéhidrogénio, halogéneo, um grupo alquilo inferior, fenilo, alooxi inferior ou fenilo substituido com alquilo infe rior, R*3 é hidrogénio com até dois substituintes de halogéneo, alquilo inferior ou alooxi inferior, Rc é um substituinte polar absorvente de electrões que pode incluir grupos como por exemplo grupos carboxi, alooxi inferior-earbonilo, formilo, al canoilo inferior, carbamoilo, sulfo, sulfino, alcoxisulfonilo, alcoxisulfinilo, sulfamoilo, ciano, azido, nitro ou trifluoro- metilo ou qualquer destes grupos separados do anel fenilo por cl ô um grupo metileno ou etileno, R e R representam cada um hi-drogénio ou um grupo alquilo inferior, R representa hidrogénio ou um grupo alquilo inferior, alcanoilo ou benzilo, qualquer dos anéis de benzeno A e B pode ser ainda opcionalmente substituido por um radical -CH=0H-CH=0H- para formar um grupo naftilo, X é oxigénio ou enxofre, e Y é oxigénio, enxofre ou um grupo sulfinilo, sulfonilo ou imino enél, 2 ou 3; ou Y é uma ligação simples enéo, 1, 2, 3 ou 4; em que o termo "inferior*1 significa com até 4 átomos de carbono.

Estes compostos são apresentados como possuindo a capacidade para bloquearem os receptores beta--adrenérgicos e afirma-se que são úteis no tratamento de cura ou profilático de problemas cardíacos como por exemplo angina de peito e arritmias cardíacas e no tratamento da hipertensão. Os dados biológicos referidos descrevem os efeitos cardíacos de vários compostos dentro das reivindicaçães.

Descobriu-se agora uma pequena classe de compostos semelhantes aos que possuem a fórmula geral acima representada que, surpreendentemente, proporcionam um efeito termogénico significativo para doses que provocam relativamente poucos efeitos laterais. Deve entender-se que a se-lectividade do efeito termogénico, por exemplo a falta de - 2 - efeitos cardíacos laterais, é um requisito importante para um agente terapêutico útil no tratamento de, por exemplo, obesida de e condições semelhantes.

Deste modo a presente invenção proporciona um composto com a fórmula (i):

och2ch(oh )ch2nhch2ch2o—<

(I) na qual é hidroxi ou alquilo (1-10°) ou um éster hidrolisá-vel i*1 vivo ou um seu sal farmaeeuticamente aceitável.

Hum aspecto R**" é hidroxi. Noutro aspecto R·^ é alquilo (1-10°) por exemplo metilo, etilo, n-pro-pilo, isopropilo, n-butilo, n-pentilo, n-hexilo e n-heptilo. R*1" é preferivelmente alquilo (1-6C) por exemplo metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo e n-hexilo.

Os compostos com a fórmula (I) são básicos e podem ser separados e utilizados quer na forma de ba se livre quer na forma de um seu sal e adição de ácido farma-ceuticamente aceitável. Além disso, os compostos em que R é hidroxi são anfotéricos e podem ser utilizados na forma zuite-riónica, ou de um seu sal de adição de ácido farmaeeuticamente aceitável, ou um sal formado com uma base que produza um catião farmaeeuticamente aceitável. Os exemplos particulares de sais de adição de ácido farmaeeuticamente aceitáveis incluem, por exemplo, os sais obtidos com ácidos inorgânicos como por exemplo hidratos de halogéneo (especialmente cloridratos ou bromi-drafcos), sulfatos e fosfatos, e sais obtidos com ácidos orgânicos como por exemplo succinatos, citratos, lactatos, tartara-tos, oxalatos e sais derivados de polímeros ácidos soláveis em água. Exemplos particulares de sais obtidos com bases que produzem um catião farmaeeuticamente aceitável incluem, por exemplo, sais de metais alcalinos e metais alcalino-terrosos, como por exemplo sais de sódio, potássio, cálcio e magnésio, e sais de amónio e sais obtidos com bases orgânicas adequadas como [ por exemplo trietalonamina. * Os ésteres hidrolisáveis in vivo - 3 -

MJr· podem ser obtidos no grupo carboxi (-COOH) e/ou no grupo hidroxi (-0H)). Os ésteres hidrolisáveis in vivo são os estepes far-maceuticamente aceitáveis que se hidrolisam no sangue ou corpo do animal para produzir o composto hidroxi mãe. Esses ésteres podem ser identificados por administração, por exemplo intravenosamente, a um animal de ensaio, do composto em ensaio e exame posterior dos fluidos do corpo do animal. Os ésteres hidrolisáveis in vivo adequados para o carboxi incluem os ésteres de alquilo (1-6°). Os ésteres hidrolisáveis in vivo adequados para hidroxi incluem os éstres de alcanoilo (1-6°).

Deve notar-se que os Gompostos com a fórmula (I) contêm um ou mais átomos de carbono assimétricos e podem existir como enantiómeros optioamente activos ou como ra-cematos optioamente inactivos. A presente invenção engloba qualquer enantiómero, raeemato e/ou (quando dois ou mais átomos de carbono assimétricos estão presentes) diastereoisómeros, que quando administrados numa quantidade terapêutica proporcionam um eftito termogénico em animais de sangue quente, sendo bem conhecida a preparação de enantiómeros individuais, por exemplo por resolução do raeemato ou por síntese estereospecífica, e a forma de determinar as propriedades termogénicas, por exemplo, utilizando os ensaios convencionais a seguir descritos Prefere-se que os compostos da presente invenção sejam proporcionados na configuração absoluta (S) no grupo -CH(OH)- (segundo as regras de Chan-Prelong-Ingold) que correspondem geralmente à forma (-) opticamente levorrotatória nessa classe de compostos.

Os compostos particulares da presente invenção incluem: ácido 4-/2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi/fenilaeético, ácido (S)-4-/2-(2-hidroxi-5-fenoxipropilamino)etoxi7fenilacéti-co, 1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7propano-2--ona, (S)-1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil/-propano -2-ona, L-/4-(2-(2-hidroxi-3-f enoxipropilamino) etoxi )f enil/butano-2-ona, 1(s)-1-/4- (2- (2-hidroxi-3-f enoxipropilamino) et oxi )fenil/butano- - 4 -

-2-ona, l-/$-(2-(2-hidroxi-3-f enoxipropilamino )etoxi )f enil/pentano-2--ona, (S )-l-/?- (2- (2-hidroxi-3-í enoxipropilamino) et oxi )f enil7-penta-no-2-ona, 1-/%- (2-( 2-hidroxi-3-f enoxipropilamino )etoxi )fenil7-3-metirbu-tano-2-ona, 1-/4- (2- (2-hidroxi-3-fenoxipropilamino )etoxi )fenil7hexano-2--ona, 1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7-4-metilpen tano-2-ona, 1-/?-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil/heptano-2--ona, 1-/?-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7octano-2--ona e 1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7nonano-2--ona.

Para se utilizar um composto da presente invenção ou um seu éster hidrolisável in vivo ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para o tratamento terapêutico de mamíferos de sangue quente incluindo o homem, em particular para o tratamento da obesidade, ele é normalmente formulado de acordo com a prática farmacêutica convencional sob a forma de uma composição farmacêutica.

Assim num outro aspecto a presente invenção proporoiona uma composição farmacêutica que compreende um composto com a fórmula (I) ou um seu éster hidrolisável in vivo ou um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável e um veículo farmaceuticamente aceitável.

As composições farmacêuticas desta invenção podem ser administradas de modo convencional por exemplo por administração oral ou parentérica. Para estes objec tivos elas podem ser formuladas por processos conhecidos na forma de, por exemplo, comprimidos, cápsulas, pílulas, pós, so luções ou suspensões aquosas ou oleosas, emulsões e soluções ou suspensões esterilizadas injectáveis aquosas ou oleosas.

Em geral preferem-se as composições para administração oral. - 5 - i

As composições podem ser obtidas utilizando excipientes convencionais e procedimentos bem conhecidos. Uma forma de unidade de dosagem como por exemplo um comprimido ou uma cápsula conterá, habitualmente, por exemplo 0,1-250 mg de ingrediente activo. As composições podem também conter outros ingredinntes activos conhecidos para o tratamentc da obesidade e condições semelhantes, por exemplo supressores do apetite, vitaminas e agentes hipoglicémioos.

Num dos aspectos da presente invenção, pode formular-se um composto com a fórmula (I) para administração oral numa composição de libertação sustida (ou retar dada) por exemplo uma formulação para uma matriz de comprimido compreendendo uma oarga polimérica solúvel ou intumescível, ou uma formulação esteróide revestida.

Quando utilizado para produzir efeitos termogenicos em animais de sangue quente incluindo o homem, administrar-se-á um composto com a fórmula (I) ou um éster hi-drolisável in vivo ou um seu sal farmaceuticamente aceitável quando adequado, a uma dose na gama geral de 0,002-20 mg/kg, preferivelmente na gama de 0,02-10 mg/kg, administrada diariamente, e dada numa dose única ou em doses divididas se necessá rio. Contudo, deve notar-se pelos especialistas que essa dosagem pode necessariamente variar como adequado, dependendo da severidade da condição a tratar e da iâade e sexo do paciente e de acordo com os princípios médicos conhecidos.

Além disso os compostos da presente invenção diminuem os teores de trigliclridos e de colesterol e aumentam os niveis de lipoproteina de alta densidade e tem assim utilização no tratamento de condições médicas em que se pen sa que essa redução (e aumento) seja benéfica. Assim eles podem ser utilizados no tratamento da hipertrigliceridemia, hiperco-lesterolemia e condições de baixos teores de HDL (lipoproteina de alta densidade) em adição ao tratamento da doença da ateros-clerose como por exemplo doença das artérias coronárias, cere-brovasculares, artérias periféricas, coença cardiovascular e condições semelhantes. invenção.

De acordo com um outro aspecto da proporciona-se um método para diminuir os teores de - 6 -

ϊ triglicéridos e/ou coleslecol e/ou aumento dos teores de lipo-proteína de alta densidade que compreende administrar-se, a um animal que necessite desse tratamento, uma quantidade terapeu-ticamente eficaz de um composto com a fórmula (I) ou um éster hidrolisável in vivo ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Num aspecto adicional a presente invenção proporciona um método de tratamente da aterosclerose que compreende a administração, a um animal que necessite desse tratamento, de uma quanti dade terapeuticamente eficaz de um composto com a fórmula (I) ou de um éster hidxiLisável in vivo ou de um seu sal farmaceuti camente aceitável. As composições são formuladas e administradas de modo geral idêntico ao acima referido para produzir um efeito termogénico. Eles podem também conter outros ingredientes activos conhecidos para o tratamento da aterosclerose e cpndições semelhantes, por exemplo, fibratos como por exemplo clorofibratos, benzafibratos e gemfibrozila; inibidores para a biossíntese do colesterol como por exemplo inibidores da HMG--CoA reductase por exemplo lovastatina, simvastatina e pravas-tatina; inibidores da absorção de colesterol por exemplo beta--sitosterol e inibidores da (aeil CoA: colesterol aciltransfe-rose) por exemplo melinamida; resinas de permuta aniónica por exemplo a colestiramina, colestipol ou um&rivado de dialquil-amino de um dextrano racticulado; álcool nicotínico, ácido ni-cotínico ou um seu sal; vitamina E e tiromiméticos.

Num aspecto adicional a presente invenção proporciona um processo para a preparação de um composto com a fórmula (I) ou de um éster hidrolisável in vivo ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável que compreende; a) fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) ou (III) com um composto com a fórmula (IV):

och2ch—ch2 (II)

och2ch(oh)ch2l (III) - 7 -

i íffi20H2GH2O

^CHgCOR1

Mi&ass3trsíL· k1^ (IV) em que R^ é como anteriormente definido e I é um grupo substituível, ou b) iiidrolisar-se um composto com a fórmula (V):

na qual R^ é como atrás definido, ou c) para os compostos com a fórmula (I) em que R^· é hidroxi, hidrolisar-se um compostos com a fórmula (VI):

0 CH2 OH (OH) 0H2mCH2CH20

h2cor (VI) 2 / , na qual R é um grupo Ridrolisável; d) fazer-se reagir um composto com a fórmula (YII) com um composto com a fórmula (VIII) (VII) y-OCH2CH(OH)CH2RH2

(VIII) 1 / , em que R é como atrás definido e L’ é um grupo substituível; 8 1 ou

e) desproteger-se um composto com a fórmula (IX):

Vooh2oh(oh)oh2hhch2oh2o^\ oh2e3 (IX)

•3 , 1 na qual R e um derivado protegido do grupo -COR ; e se necessário formar-se em seguida um éster hidrolisável in vivo ou um sal farmaceuticamente aceitável. A reacção entre um composto com a fórmula (II) ou (III) e um composto com a fórmula (IT) pode ser efeetuada num solvente adequado por exemplo um álcool como por exemplo etanol ou propan-2-ol, a uma temperatura na gama de por exemplo 10°C a 110°C e mais convenientemente no ponto de ebulição da mistura reaccional ou próximo dele. No composto com a fórmula (III) I pode ser por exemplo halogéneo como por exemplo cloro ou bromo ou sulfoniloxi como por exemplo toluenossul-foniloxi ou metanossulfoniloxi.

Os compostos com a fórmula (IT) são preparados por qualquer processo conveniente conhecido. Por exemplo eles podem ser convenientemente preparados fazendo reagir um composto com a fórmula (X) com um composto com a fórmula (XI): (X) nh2ch2ch2oh

Esta reacção pode por exemplo ser efeetuada utilizando a reacção de litsunobu com 230 dicarboxila to de etilo e trifenilfosfina. A função amino (e a função carbo . xi, se presentes) são desejavelmente protegidas durante esta - 9 -

reacção e posteriormente desprotegidas de modo convencional. Exemplos de grupos protectores adequados para a função amina incluem os grupos ftaloilo e t-butoxicarbonilo. Os compostos com a fórmula (XI) podem ser preparados de acordo com os processos descritos nos exemplos seguintes. 0 composto com a fórmula (V) pode ser hidrolisado para um composto com a fórmula (I) em condições conhecidas na técnica dos betabloqueadores; por exemplo através de hidrólise alcalina num solvente adequado.

Os compostos com a fórmula (V) podem ser preparados por reacção de um composto com a fórmula (XI) com um composto com a fórmula (XII)}

(XII) na qual é o grupo 0H20H20H. Esta reacção pode ser efectuada por qualquer processo convencional por exemplo por um processo análogo ao da reacção dos compostos com as fórmulas (X) e (XI). Num processo alternativo os compostos com a fórmula (V) podem ser preparados por reacção de um composto com a fórmula (XII) em que R^ e hidrogénio com um composto com a fórmula (VIII) an-teriormente referida. Num processo ainda alternativo os compostos com a fórmula (v) podem ser preparados por reacção de um composto com a fórmula (II) com um composto com a fórmula (XIII): (XIII) r5ognhch2ch2o —([ cí^cor1

' na qual R1 ê como atrás definido e R^O- é um grupo substituíve], por exemplo R^O- é alcoxi (1-40). 0 composto com a fórmula (XII) em que é -CH2CH2OH pode ser preparado por exemplo por reacção de um composto com a fórmula (II) com um derivado de H-alcoxicarboni-lo de um composto com a fórmula (X) em que 0 grupo hidroxi é opcionalmente protegido, por exemplo 0 éter de tetrahidropirani lo de t-butoxiearbonilaminometanol. Os compostos com a fórmula (XII) em que R^ é hidrogénio são possíveis de obter de forma convencional. Os compostos com a fórmula (VIII) e (XIII) podem ser obtidos por alquilação de compostos com a fórmula (XI) de modo convencional. A reacção entre os compostos com as fórmulas (VII) e (VIII) é conveniêntemente efectuada em condi-* ções análogas à reacção entre compostos com as fórmulas (III) e (IV). 1' pode ter valores semelhantes aos acima referidos para I. los compostos com a fórmula (VI) os exemplos do grupo R hidrolisáveis incluem grupos alcoxi e (1-6C) e -RHg de forma a que -COR representam um éster de alquilo (l-6c) ou uma anduâa primária. Esses grupos podem ser hi-drolisados (ácidos, básicos, enzimáticos) para um grupo -CC^H em condições convencionais. As condições ácidos adequados são por exemplo um ácido inorgânico forte como por exemplo ácido clorídrico, sulfúrico ou fosfórico, convenientemente a uma temperatura na gama de, por exemplo, 2q a 110°C, e num solvente po lar, como por exemplo a água, ou um aleanol (1-4C) (por exemplo metanol ou etanol) ou ácido acético. lesses casos, 0 sal do ácido inorgânico correspondente do composto com a fórmula (I) em que R^ é hidroxi pode ser convenientemente isolado. Alterna-feivamente podem utilizar-se condições básicas, por exemplo, hi-3róxido de lítio, sódio ou potássio, convenientemente num solvente ou diluente adequado como por exemplo aleanol (1-40) a xma temperatura na gama de por exemplo, 10 a 110°C; ou um halo-*eneto de metal alcalino por exemplo cloreto de lítio num solvente polar como por exemplo sulfóxido de dimetilo. Como proces-· | 30s ainda alternativos, quando -COR é t-butoxicarbonilo, a de-• jomposição pode ser efectuada, por exemplo, por termolise a - 11 -

X

uma temperatura na gama de, por exemplo, 100 a 22o°0, isoladamente ou na presença de um diluente adequado como por exemplo éter difenilico.

Os compostos com a fórmula (VI) podem ser preparados por processos análogos aos acima descritos para o composto com a fórmula (I), com a protecção opcional da função amino por exemplo com um grupo benzilo.

Os compostos com a fórmula (YI) também proporcionam um efeito termogénioo, em particular os com-postos oom a fórmula (Yl) em que R I -RH . Desta forma, num outro aspecto adicional da presente invenção proporcionam-se os compostos oom a fórmula (Yl), a sua utilização em métodos de terapia (em particular um tratamento do obesidade e condições semelhantes) e composições farmacêuticas que os contêm.

Os compostos com a fórmula (VI) são utilizados e formulados de modo análogo ao descrito para os compostos com a fórmula (I).

Ra desprotecção de um composto com a formula (IX) R pode ser por exemplo um acetal como por exemplo 2-metil-l,3-dioxolan-2-ilo ou 2-etil-l,3-dioxolan-2-ilo. Esses grupos podem ser facilmente convertidos para um grupo -COR·*" em que R é alquilo por hidrólise ácida. Os compostos com a fórmula (IX) podem ser preparados por processos análogos aos acima descritos para a preparação de compostos com a fórmula (I).

Alguns dos compostos com as fórmulas (IV) e (VIII) são novoa. Assim, num aspecto adicional da presente invenção proporGiona-se um composto com a fórmula (XIV):

(XIY) na qual Z é amino, amino protegido ou um grupo substituível como por exemplo halogéneo ou sulfoniloxi e Rla é alquilo (1-100).

Os ésteres hidrolisáveis in vivo po-] dem ser preparados de modo convencional por exemplo fazendo - 12 -

reagir um grupo carboxi com álcool. Deve também ter-se em con-

O *Z sideração que os grupos & e nas fórmulas (YI) e (IX) res-pectivamente, podem ser hidrolisados in vivo.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados fazendo reagir o composto com a fórmula (I) com o ácido adequado de modo convencional. Alternativamente quando se pretende um sal de um halogeneto de hidrogénio, ele pode ser eonvenientemente obtido por hidrogenação da base livre em conjunto com uma quantidade estequeométrica do haloge neto de benzilo correspondente.

Os seguintes métodos de ensaio bioló gicos, dados e Exemplos servem para ilustrar esta invenção.

Os efeitos termogénicos do composto com a fórmula (i) podem ser demonstrados utilizando um ou mais dos seguintes ensaios convencionais: a) adaptam-se ao frio ratos colocando num ambiente frio ($0°C) durante 10 dias de modo a aumentar a sua capacidade para a ter mogénese. Eles são em seguida transferidos para um ambiente termoneutro (29°C). Passadas 3 horas mede-se a temperatura interior para determinar uma leitura da linha de base e adminis-tra-se o composto de ensaio subcutaneamente ou oralmente sob a forma de uma solução ou suspensão numa solução aquosa a 0,45$ p/v de cloreto de sódio, 0}25$ p/v de polisorbato 80. Passada uma hora, mede-se de novo a temperatura mnterior. Reste ensaio um composto que provoque o aumento estatisticamente significativo na temperatura interior de cerca de 0,3°C (ou mais) para uma dose subcutânea de 15 mg/kg (ou inferior) é considerado co mo sendo significativamente activo. 0 composto actua como um modelo para a termogénese reduzida que ocorre durante as dietas. b) Adaptam-se ao frio ratos a 40°0 durante 4 dias para aumentar a sua capacidade para a termogénese. Eles são em seguida transferidos para um ambiente aquecido a 23°c durante 2 dias.

Io dia seguinte, administra-se um composto de ensaio suboutanes. mente ou oralmente da forma descrita em (a). Os animais são sacrificados passada uma hora e é removida o tecido hiperscapu-

j lar, adiposo castanho (ΒΑΪ). Preparam-se mitocóndrias de ΒΑΪ • por centribugação diferencial e determina-se a ligação de GDP - 13 -

" (Holloway e col., International Journal of Obesity, 1984, 8, 295) como medida da activação termogenica. Cada ensaio inclui um controlo que é doseado com um veículo da solução/suspensão apenas e um controlo positivo que é doseado com isoprenalina (sob a forma do seu sulfato) a 1 mg/kg. Os compostos de ensaio são rotineiramente doseados a 0,1 , 0,3 , 1,0 , 3,0 e 10,0 mg/kg e os resultados são expressos em lermos do efeito na ligação G-DP produzido pela isoprenalina. A partir destes resultados, calcula-se a dose (ED^0) necessária para produzir 50$ do efeito da isoprenalina por uma análise de regressão linear. Os compostos são considerados activos se eles provocarem um aumento significativo na ligação de GKDP quando comparados com 0 controlo. Este ensaio aerve para indicar que os efeitos termogéni-cos observados no ensaio (A) são mediados através de um aumento no efeito em BAT em vez de ser por mecanismos não tóxicos ou tó xicos. c) Adaptam-se ratos a um ambiente termoneutro (29°C) durante duas semanas de modo a diminuir a sua capacidade para uma termo génese de BAP mediada sem arrepios. Durante os últimos 3 dias os animais são treinados para utilizarem um dispositivo para medir 0 ritmo cardíaco de forma não invadida através de eléetro dos colocados nas patas ligados a um imperiador de E0G- que dá uma leitura continua do ritmo cardíaco. Administra-se um composto de ensaio subcutaneamente ou oralmente no dose ED50 deter minada no ensaio (b), e determina-se o ritmo cardíaco durante 15-30 minutos após a dosagem. 0 procedimento é em seguida repetido em ensaios posteriores utilizando múltiplos crescentes do valor de ED50 determinados no ensaio (b) até que 0 ritmo cardía co (HR) atinge ou excede 500 pulsações por minuto, permitindo que a dose necessária para produzir um ritmo cardíaco de 500 pulsações por minuto (D500) seja calculada. A proporção de D^qqq para ED^q no ensaio (b) pode ser definida como 0 índice de seleetividade (SI) e proporciona uma medida da seleetividade do composto para BAI em oposição ao sistema cardiovascular. 0s compostos são eonside rados como possuindo uma seleetividade significativa quando SI | é y 1. Os compostos não selectivos têm um valor de SI 4, 1 (por ^exemplo a isoprenalina tem um valor igual a 0,06). - 14 -

d) Adaptam-se ao frio ratos a 4°G durante 4 dias para aumentar a sua capacidade para a termogénese. Eles são em seguida trans feridos para um ambiente aquecido a 23° C durante 2 dias. No dia seguinte, determina-se a taxa metabólica basal dos animais utilizando um dispositivo de consumo de oxigénio em circuito fecbado do tipo descrito por Arundel e col., 1984, J. Appl. Physiol. Respirat. Environ. Ex-saiTEise physiol., 1984, 5^ (5) 1591-1593. Os ratos são em seguida doseados (oralmente ou sub-cutaneamente) com o composto de ensaio a cerca de 10 mg/kg como solução ou suspensão numa solução aquosa a 0,45 p/v de cloreto de sódio, 0,25$ p/v de Polisorbato 80. A taxa metabólica é em seguida determinada pelo menos durante uma hora após a dosagem. Os compostos são considerados activos neste ensaio se provocarem um aumento significativo na taxa metabólica quando comparada com os animais de controlo (ensaio t de Student í P < 0,5) doseados apenas com veículo em solução ou suspensão.

Nos ensaios acima referidos os compostos com a fórmula (I) produzem em geral efeitos da seguinte ordem sem produzir toxicidade excessiva: ensaio (a): aumento da temperatura interior cerca de 0,5°0 (ou mais) após uma dosagem subcutânea ^ 15 mg/kg-1; ensaio (b); administração subcutânea ou oral de EDKn para a ligação de GP em mitocondrios ΒΑΪ de 0,01-10 mgkg-·; e ensaio (c) apresentam um valor de SI > 50.

Como ilustração, o composto descrito no Exemplo 5 anexo produziu os seguintes efeitos nos ensaios acima referidos. (b) sub-cutânea (oral) ed^q 0,23 mg/kg-1; (c) D500: > 23 mg/kg-1 (oral); SI > 100 (oral). (d) 6,6 ml 02 mia. _1Kg*^^ a 1 mg/kg-1 p.o. A invenção será agora ilustrada pelos seguintes Exemplos em que, a menos que se diga o contrário: a) Os espectros de ressonância magnética nuclear (R1N) foram determinados a 200 MHz em dg-sulfóxido de dimetilo/d^-áeido acético como solvente a menos que se diga o contrário, utilizando tetrametilsilano (IMS) como padrão interno e são expres- m . sos como valores delta (partes por milhão) para os protões re lativos a IMS, utilizando as abreviaturas convencionais para 15 -

descrever os tipos de sinais. b) Efectuou-se a cromatografia em Merck Kieselgel (Irt 7736) (para o Exemplo 1) ou Eieseelgel (Art 9385; 250-400 Malhas) (para os Exemplos 2-13) obtidos de E. Merck, Darmstadt, República Eederal da Alemanha. c) Quando referido, as soluções foram levadas a valores a pH indicados por papel indicador humedecido. d ) As evaporações foram efectuadas a pressão reduzida utilizando um evaporador rotativo, e) Os pontos de fusão não são corrigidos.

Exemplo 1

Acido 4-/2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino )etoxiJ7fenilacético

Aqueceu-se a 4-/5-(2-hidroxi-3-feno-xipropilamino)etoxi7fenilacetamida no banho de vapor durante 4 horas em HG1 21 (10 ml). Arrefeceu-se a mistura reaccional e recolheu-se o sólido por filtração. Cristalizou-se o sólido de solução aquosa de acetona para se obter o ácido 4-/5-(2-hidro-xi-3-fenoxipropilamino)etoxi7fenilacético como cloridrato (0,lSg), p.f. 190°C; microanálise; determinada C, 59»6; H, 6,3; I, 3,6; Cl,9.2$; requerida para C-j^Hg^GlIO^i 0, 59,8; H, 6,3; 1, 3,7; Gl,9,396; EME 3,10 (dd, 1H, um H de -OH(OH)-CHglH); 3,20 (m, 1H, o outro H de -CH(0H)CH2EH); 3,40(t,2H, EHCHgCHg); 3,51 (fl, 2H, CHgCOOH); 4,00 (m,2H,0CH2CH(0H)-); 4,2-4,35(m,3H,-CH(0H)- e -0CH2GH2), 5,87(d,lH,0H); 6,95-7,30 (m,9H, aromático H); 8,7-9,3(br,2H,IH2). 0 material de partida foi obtido da forma seguinte:

Aqueceu-se sob refluxo durante 18 horas uma mistura de 4-(2-1--benzilaminoetoxi)fenilacetamida (OES 2135678) (3,38 g), éter fenilglicidilico (1,79 g) e etanol (150 ml). Arrefeceu-se a mistura e evaporou-se o solvente a pressão reduzida. Purificou -se o resíduo por cromatografia rápida de coluna seca. A elui-ção com o metanol a 10$ em diclorometano proporcionou a 4-/2--(E-benzil-E-(2-hidroxi-3-fenoxipropil)amino)etoxi/fenilaceta- • mida como óleo (4,98 g). Dissolveu-se esse produto em metanol • (70 ml) e ácido acético (30 ml). A solução obtida foi hidroge- - 16 -

nada na presença de 10$ p/p de paládio em carvão (0,5 g) a uma pressão de cerca de 20 "bar e a 60°C durante 48 horas. Arrefeceu-se a mistura, filtrou-se e evaporou-se o filtrado a pressão reduzida. Dissolveu-se o óleo residual em metanol e aqueceu-se com uma solução de éter saturado com cloreto de hidrogénio. Cristalizou-se o sólido precipitado de metanol para se ohter o cloridrato de 4-/2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)eto-iiJ7f enilacetamida (4,3g), m.p. 249°C; mioroanálise: encontrado C, 60,0; H, 6,6; U, 7,4; Cl, 9,3$; requerido para C19H2501H2°4 C, 59,9; H, 6,6; H, 7,4; Cl, 9,3$.

Exemplo 2 l-i/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino )etoxi)f enil7propan-2-ona

Iratou-se a 4-(2-ftalimidoetoxi)fe-nilpropan-2-ona (10 g) e etanol (40 ml) a 0o C com uma solução aquosa a 40 p$ de metilamina (10 ml). Agitou-se a mistura reaccional durante 45 minutos à temperatura amhiente, tratou--se com água (20 ml) e agitou-se durante mais 45 minutos. Evaporou-se o etanol a pressão reduzida e tornou-se o resíduo básico com laOIi a 30$. Adicionou-se água (100 ml) e extraiu-se a mistura com acetato de etilo (3 x 100 ml). Secaram-se os ex-tractos orgânicos combinados, evaporaram-se à secura e submete ram-se a cromatografia utilizando como eluente metanol: acetato de etilo (30:70).

Combinaram-se as fracções desejadas, recolheram-se, evaporaram-se e aqueceram-se durante 3 horas em propan-l-ol (100 ml) com uma quantidade equimolar de éter fe-nilglicidilico. Evaporou-se a solução reaccional à secura a pressão reduzida e submeteu-se o resíduo a cromatografia tal como anteriormente utilizando metanol a 5$ em diclorometano como eluente. Cristalizou-se a fracção adequada a partir de etanol l-4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamiLno )etoxi)fenil/-pro-pan-2- ona p.f. 105-106°C. mioroanálise: determinado C, 69,7; II, 7j2; I, 4,2$; requerida para CgQHg^IO^: C, 70,0; H, 7,3; N, 4,1$; RMI (CDC13) 2,13 (s,3E, CH^), 2,80-3,10 (m,4H, CHg-ITCH2), 3,62 (s, 2H, CHg), 3,97-4,12 (m, 5H, OCHg, CHgO e CEOH), 6,83-7,32 (m, 9H, aromático H). - 17 - 0 material de partida foi obtida de forma seguinte:

Tratou-se gota a gota a -5 0 C com azodicarboxilato de dietilo (23 ml) uma solução de 4-hidroxi-fenilpropan-2-ona (22,5 g). E-(2-hidroxietil)ftalimida (28,6 g) oom tetrahidro-urano (1 1). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante a noite, evaporou-se à secura e tratou-se com éter (500 ml). Manteve-se a solução durante a noite a cerca de 4° 3 e recolbeu-se o sólido e cristalizou-se de etanol para se obter a 4-(2-ftalimidoetoxi)fenilpropan-2--ona, p.f. 116-117°C; microanálise encontrado C, 70,5; Π, 5,4; Έ, 4,4fo; requerida para G^H-^IO^: C, 70,6; H, 5,2; N, 4,3$.

Exemplo 5 1-/4- (2- (2-Hidroxi-3-f enoxipropilamino )etoxi )f enil)7propan-2--ona

Aqueceram-se a 65° C durante 12 horas em sulfóxido de dimetilo (10 ml) a l-/4-((2-metil-l,3-dio- xolan-2-il)metil)fenoxi7-2-(p-toluenossulfoniloxi)etano (1 g) e l-fenoxi-3-aminopropan-2-ol (0,4 g). Tratou-se a mistura reaccional fria com HC1 2U refrigerado com gelo (50 ml) à temperatura ambiente durante 1 hora. Tornou-se a mistura básica com carbonato de sódio sólido e extraiu-se com éter (2 x 50 ml). Secaram-se os extractos de éter combinados, evaporaram-se à secura e tratou-se o resíduo com um pequeno volume de acetona para se obter um sólido, idêntico em todos os aspectos ao produto do Exemplo 2. 0 material de partida foi obtido da forma aeguinte:

Tratou-se a 0° 0 com cloreto de p--toluenossulfonilo (25 g) em porções uma solução de 2-/4-/~(2--metil-1,3-dioxolan-2-il)metil7fenox/7-etanol (EP-A-70133) (30 g) em piridina anidra (500 ml). Agitou-se a mistura reaccic nal a 0o C durante 2 horas e à temperatura ambiente durante 2 horas. Evaporou-se a maior parte da piridina a pressão reduzi- • da. Adicionou-se água (1,5 1) seguida de solução saturada de • hidrogenocarbonato de sódio suficiente para lavar 0 pH da so- 18

lução para aproximadamente 9· Extraíu-se a mistura com éter (3 x 500 ml) e lavaram-se os extractos orgânicos combinados com HC1 1(100 ml) e com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio (várias vezes) até os extractos serem alcalinos. Secou-se a solução etérea e evaporou-se à sectura pa se obter o 1-/4-((2--metil-l,3-dioxolan-2-il)metil)fenoxi7-2-(p-toluenossulfonilo-xi)etano, p.f. 80° G (de etanol); microanálise: encontrado: 0, 61,0; H, 6,1$; requerida para 620^24°6^: 0, 61,2; H, 6,1$.

Exemplo 4 1-/4-(2-( 2-Hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil/butan-2-ona

Agitou-se a 65° 0 durante 1,5 boras o l-/2-(4-(2-etil-l,3-dioxolan-2-dimetil)fenoxi)etilamino7-3--fenoxipropan-2-ol (2,0 g) numa mistura de metanol (38 ml) e ácido clorídrico concentrado (38 ml). Arrefeceu-se a mistura reaccional, deitou-se em água (120 ml), tornou-se básica com uma solução de hidróxido de sódio e extraíu-se em acetato de etilo (3 x 50 ml). Lavaram-se os extractos de acetato de etilo com solução salina (2 x 50 ml), secaram-se e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Converteu-se o sólido residual no sal cloridrato e cristalizou-se o sal de etanol para se obterem cristais brancos do composto do titulo na forma do cloridrato. (1,70 g); p.f. 167-169°C; microanálise: encontrado C, 63,9; H, 7,2; I, 3,4$, requerida para 021H28Gllí04’ C, 64,0; H, 7,1; IT, 3,6$; mm 0,93 (t,3H,C0CH2CH3), 2,48 (q, 2H, COOHgCHj), 3,06--3,47 (m,4H,CH2MCH 3,68(s,2H,ArCH2C0), 3,92-4,08(m,2H,Ph0CB? CH), 4,22-4,38(m,3H,CH0B e CB20H20Ar), 6,88-7,35 (m,9H, aromático H). 0 material de partida foi preparado da forma seguinte: a) Preparou-se r l-(4-hidroxifenil)butan-2-ona pela acção de dietilcálmio em cloreto de 4-metoxifenilacetilo em tolueno seguido de desmitalação numa mistura deácido bromídrico e ácido acético da forma descrito por ¥ R Biggerstaff e col., J. Med. Chem. 1964, 7, 110-113. • b) Agitou-se sob refluxo num dispositivo de Dean e StarK, du- • rante 2 horas numa atmosfera de Argon uma solução de l-(4-hi- - 19 -

droxifenil)butan-2-ona (10,0 g), 1,2-etanoàiol (7,5 ml) e ácido p-toluenossulfónico (100 mg) em tolueno (200 ml). Arrefeceu -se a Biistura reaccional, lavou-se com solução aquosa a 5$ de bicarbonato cie sódio (150 ml), lavou-se com água (2 x 100 ml), lavou-se com solução salina (100 ml) e secou-se. Removeu-se o tolueno a pressão reduzida e triturou-se o óleo residual com hexano para se obter um sólido amarelo claro, que foi cristalizado de tolueno para se obter o 4-/""(2-etil-l, 3-dioxolan-2--il)metil7fenol como cristais brancos (10,2 g) p.f. 88-90°C; microanálise: determinada C, 69,3; H, 7,8$; requerida para C12H1603: °’ 69’2’ H» 7’7^0· c) Adicionou-se gota a gota azodicarboxilato de dietilo (9,7 ml) a uma solução agitada de 4~,/~(2-etil-l, 3-dioxolan-2--il/metil/fenol (10,0 g), H-t-butoxicarbonilaminoetanol (13,3 g) e trifenilfosfina (16,3 g) em tetrahidrofurano anidro (300 ml), à temperatura de banbo de gelo, em atmosfera de Argon. Deixou-se a mistura reaccional durante 64 boras a 20°0 e em seguida removeu-se o solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em éter (600 ml) e la®ou-se a solução a etérea com solução aquosa 2f[ de hidróxido de sódio (2 x 150 ml), água (2 x 100 ml) e solução salina saturada (100 ml). Extraíram-se por sua vez as lavagens aquosas com éter (100 ml). Combinaram--se as soluções etéreas, secaram-se e removeu-se o éter a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia utilizando acetato de etilo a 35$ em hexano como eluente. Combinando as fracções adequadas e após cristalização de hexano obteve-se o l-t-butoxicarbonilamino-2-^4-(2-etil-l,3~dioxolan--2-il)metil/fenoxi/etano como cristais brancos (11,1 g) p.f. 64-66°C; microanálise: encontrado C, 65,4; H, 8,0; 1, 4,2$; requerida para C-j^lí^NO^: C, 65,0; H, 8,3; 1 4,0$. d) Adicionou-se o produto de c) de cima (11,0 g) a uma suspen são agitada de hidreto de sódio (1,50 g de uma dispersão a 50$ em óleo inorgânico) em dimetilformamida seca (220 ml) em árgon. Agitou-se a mistura reaccional a 50°C durante 1,5 horas. Arrefeceu-se a mistura para 0o C, adicionou-se éter fenilglicidili co (4,3 ml) e agitou-se em seguida a mistura reaccional a 50°G durante 1,75 horas. Arrefeceu-ae a mistura reaccional, deitou-; -se em água (1,2 1) e extraiu-se o produto em acetato de eti- 20 - lo (400 ml, 250 ml, 200 ml). Iavaram-se extractos combinados de acetato de etilo com água (500 ml), secaram-se e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cro-matografia utilizando acetato de etilo a 6o$ em hexano como eluente. Ooníbinaram-se as fracções adequadas, evaporaram-se e triturou-se o resíduo com hexano para se obter um sólido que foi cristalizado de eiclohexano para se obter a 3-/2(4-etil--1,3-dioxolan-2-ilmetil)fenoxi)etil-5-(fenoximetil)oxazolidin--2-ona como cristais brancos (4,0g), m.p. 88-90°G; microanáli-se: encontrado} 0, 67,4; H, 7,0; I, 3,2$; requerido para G24H29I[05: C, 67,4; H, 6,8; ff, 3,3$. e) Aqueceu-se sob refluxo em árgon durante 8 horas uma solução do produto de b) de cima (4,0 g), numa mistura de uma solu ção aquosa 2ff de hidróxido de sódio (12 ml) e etanol (60 ml). Arrefeceu-se a mistura reaccional, deitou-se em água (100 ml) e extraíu-se o produto em diclorometano (3 x 60 ml). Lavaram--se os extractos combinados com solução salina (60 ml), secaram-se, e removeu-se o solvente a pressão reduzida. 0 sólido residual foi cristalizado de etanol para se obter o 1-^2-(4--(2-etil-l,3-dioxolan-2-ilmetil)fenoxi)etilamino7~3-fenoxipro-pan-2-ol como cristais brancos (3,0 g) p.f. 101-103° 0; micro-análise: encontrado 0, 69,1; H, 7,8; 1, 3,4$; requerido para C25H51I05: C, 68,8; H, 7,7; ff, 3,5$.

Exemplos 5 e 6

De modo semelhante ao referido no Exemplo 4, prepararam-se os seguintes compostos sob a forma de sais cloridratos a partir de l-(4-hidroxifenil)pentan-2-ona e l-(4-hidroxifenil)-3-metilbutan-2-ona respectivamente.

PhOCH2CH( OH) CH21ÍHCH2CH20 21

Exemplo R p.f. [ Microanálise/RM ^ ((solvente). I -CH2CH2CH3 Il65-7°C (etanol) 5

Determinado: G, 64»9; H, 7,5; 1, 3,5a/o\ requerida para °22H30G1I04: °’ 64 ’8’ H» 7’4> H, 3,#; EME 0,83(t,3H,C0CH2CH2CH5), I, 49(sexteto, 2H, G0GH2CH2CH3), 2,44(t,2H, COGH2CH2CH3), 3,11-3,50(m,4H, CH2IHGH2), 3,67(s,2H, ArCH2CO-), 3,95-4,09(m,2H,Pli0GH20H-), 4,22- 4,38(m,3H,CHOH e GH2GH20Ar), 6,90-7,34(m,9H,aromático H). 6 I -oh(gh5)2 175-7°G (etanol)

Encontrado; G, 64,9; H, 7,4; 1, 3,3$, Requerida para G22H30G1I04: G’ 64>85 H» 7 1, 3,4$ EME l,05(d,6l-I,G0CH(CH3)2), 2,74(septeto, 1H, C0CH(CH3)2), 3,18-3,54(m,4H,CH2EHCH2), 3,74(s,2H,Ar0H2GO), 3,98-4,ll(m,2H,PhOGH2CH-), 4,29-4,40(m,3H,GH0H e GH2CH20Ar), ^6,90-7,34(m,9H, aromático H).

Para conveniência apresenta-se em seguida o esquema para a preparação dos compostos dos Exemplos 4-6 (em que B. e etilo, n-propilo ou isopropilo. - 22 -

Esquema 1

/~\ 0 0 \ /

CH2C-E (4) (3) v

PhO CH2CH (OH) CH2mCH2CH20 (5)

PhOCH2OH(OH)CH2raCH2CH20

CHgCOE - 23 - (6)

lotas ao esquemas A. A l-(4-bidroxifenil)pentan-2-ona (composto (l)s R= - foi preparada da forma seguinte;

Adicionou-se gota a gota durante 30 minutos 1-bromopropano (33,2 ml) em éter anidro (100 ml) a uma suspensão agitada de pedaços de lítio (6,0 g; 0,86 átomos grama) em éter (150 ml) em árgon, mantendo a temperatura interna entre 0 e -10° G. Agitou-se a mistura reaccional durante 1,5 horas a 0-5 0 e adicionou-se a uma solução agitada do acido 4-Mdroxifenilacético (5,6 g) em tetrahidrofurano (300 ml) a uma temperatura entre 0-l0°C em atmosfera de árgon, eliminando qualquer lítio não reagido. Agitou-se a mistura reaccional durante 40 horas a 22°C e em seguida arrefeceu-se num hanho de gelo e adicionou-se clorotrimetilsilano (50 ml) durante 15 minutos. Deixou-se a temperatura subir para 22°C, e deitou-se a mistura reaccional em ácido clorídrico 11 (600 ml) e agitou-se durante 30 minutos. Extraíu-se o produto em acetato de etilo (3 X 200 ml) e lavaram-se os extractos combinados com solução aquosa de bicarbonato de sódio (2 x 300 ml), lavaram-se com solução salina (100 ml), secaram-se e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Repetiu-se o procedimento por 3 vezes à mesma escala e purificou-se acetona bruta combinada por cromato-grafia utilizando acetato de etilo a 22^ em hexano como eluen-te. Combinaram-se as fracções adequadas e evaporaram-se para se obter a l-(4-bidroxifenil)pentan-2~ona (3,4 g) como óleo amarelo, (descreve-se um procedimento semelhante para a preparação de metil cetonas em G M Rubottom e Chong-Wan Kim, J.O.G. 1983, 48, 1550-1552. B. Preparou-se a l-(4-bidroxifenil)-3-metilbutan-2-ona (composto (1): R = -0H(CH^)2) da forma seguinte;

Adicionou-se gota a gota durante 30 minutos uma solução de brometo de isopropil magnésio (preparada a partir de magnésio (1,75 g) e 2-bromopropano (8,9 g)) em tetrahidrofurano amido (100 ml) a uma solução agitada de cloreto de 4-metoxifenilacetilo (26,6 g) em tetrahidrofurano (75 ml) em árgon, mantendo a temperatura interna entre -65°C e - 24 -

-70°C. Deixou-ae a mistura reaccional aquecer para 20° C duran te 1 hora e em seguida deitou-se em água (150 ml). Extraíu-se o produto em éter (2 x 70 ml). Lavaram-se os extractos de éter com solução aquosa II de hidróxido de sódio (2 x 70 ml), solução salina (70 ml), secaram-se e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia utilizando acetato de etilo a 10$ em hexano como eluente. Combinaram-se as íracções adequadas e removeu-se o solvente a pressão reduzida para se obter a 1-(4-metoxifenil)-3-metilbutan-2-ona (2,5 g) como óleo.

Adicionou-se a l-(4-metoxifenil)-3--metilbutan-2-ona (10,2 g) a um funâido agitado de cloridrato de piridina (26 ml) a 140° 0 em atmosfera de argon. Aqueceu-se a mistura reaccional a 220°C durante 2 horas. Arrefeceu-se a mistura, adicionou-se água (400 ml) e extraiu-se o produto em éter (3 X 150 ml). Lavaram-se os extractos etéreos combinados dos extractos com a solução salina (100 ml) secaram-se, e rem£ veu-se o solvente à. pressão reduzida. Purificou-se o óleo resi dual por cromatografia utilizando acetato de etilo a 25$ em he xano como eluante. Combinaram-se as fracções adequadas para se obter a l-(4-hidroxifenil)-3-metilbutan-2-ona (7,9 g) como óleo. C. Dados Eísicos para os Intermediários na preparação dos compostos dos Exemplos 5 e 6.

Exemplo 5 p.f. (solvente)

Microanálise

Encontrado C, 65,6; H, 6,6; I,

Composto (2) óleo Composto (3) 80-2°C (ciclohexano)

Composto (4)

90-l°C

Composto (5) (ciclohexano) 104-6°C (etanol) ^JSK)5s C, 65,8; H, 8,5; I, 3,8$" Encontrado C, 67,0; H, 7,1; I, 3,3$; requerida para G25H31106 1/2E20: C, 66,7; H, 7,1; I, 3,1$. Encontrado C, 69,4; H, 8,0; I, 3,2$; requerida para Cg^I^EO^: C, 69,4; H, 8,0; I, 3,4$ para u, - 25 -

Exemplo 6 1 p.f. i (solvente) 1 Microanálise í Composto 2 1 84-6o0 (Encontrado C, 70,8; H, 8,5$; requerida (ciclohexano) para Oq3^30^ C, 70,3; H, 8,156 Composto 3 1 H3-5°c Encontrado C, 65,7; H, 8,5; I, 3,7$; |(ciclohexano) [requerida para C^H^NO^ c> 65,8; H, | 8,5; N, 3,8$ Composto 4 128-9°C (Encontrado C, 67,6; H, 6,8; 1, 3,1$; (tolueno) requerida para 025¾.1^ 68>°> | '7,0; H, 3,2?« Composto 5 98-100°C (Encontrado C, 69,2; n, 7,9; I, 3,3$; 1(etanol) |requerida para Cg^H^ETO^ C, 69,4; Π, 1 t 8,0; H, 3,4/« 1 Exemplo 7 1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7butan-2-ona

Tratou-se uma solução de 3-/2-(4-(2--oxobutil)fenoxi)etil-5-(fenoximetil)oxazolidin-2-ona (200 mg) em etanol quente (4 ml) com uma solução aquosa 21 de hidróxido de sódio (0,75 ml) e agitou-se a mistura reaocional sob refluxo durante 4 horas em argon. Arrefeceu-se a mistura reaocional deitou-se em água (20 ml) e extraíu-se o produto com dicloro-metano (3 x 20 ml). Lavaram-se os extractos de diclorometano com solução salina (20 ml), secaram-se, e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Oonverteu-se o resíduo no sal cloridrato e cristalizou-se de etanol para se obter o composto do título na forma de cloridrato (150 mg); p.f. 166-8°G. 0 material de partida foi preparado da forma seguinte: a) Agitou-se à temperatura ambiente durante 2,5 horas uma solu ção de l-t-butoxicarbonilaminoetanol (2,0 g), e dihidropirano (1,7 ml) e p-toluenossulfonato de piridinio (310 mg) em dicloro . metano anidro (90 ml). Adicionou-se éter (150 ml) e lavou-se a [ solução com água (2 x 50 ml), secou-se, e removeu-se o solvente - 26 -

a pressão reduzida para se obter o 2-(2-(l-t-butoxicarbonilami-noJetoxiJtetrahidropirano (3,0 g) como um óleo amarelo, b) Adicionou-se o produto de a) de cima (2,9 g) a uma suspensão agitada de hidreto de sódio (570 mg de uma dipersão a 50$ em óleo inorgânico, 0,012 mol) em dimetilformamida anidra (100 ml) em árgon. Agitou-se a mistura reaccional a 55°C durante 1,5 horas. Arrefeceu-se a mistura para 0°C. Adicionou-se éter fenilglicidílico (1,6 ml) e em seguida agitou-se a mistura reac cional a 20°0 durante 2,5 boras. Deitou-se a mistura reaccional em água (500 ml) e extraíu-se o produto em acetato de etilo (350 ml, 100 ml, 100 ml), lavaram-se os extractos combinados de acetato de etilo com água (200 ml), secaram-se, e removeu-se o solvente a pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a cromatogra fia utilizando acetato de etilo a 60$ em bexano como eluente.

Combinaram-se as fracções adequadas para se obter a 5-fenoxime-til-3-(2-(tetrahidropiran-2-iloxi)etil)oxazolidin-2-ona (l,0g) p.f. 78-80°0 (ciclohexano); microanálisej encontrado: C, 63,3; H,7,2; H, 4,3$; requerida para C-^Hg^IO^: C, 63,6; H, 7,2; R, 4,4$. c) Agitou-se a 65°0 durante 4 horas uma solução do produto b) anterior (0,88 g) e p-toluenosulfonato de piridinio (70 mg) numa mistura de água (1,0 ml) e etanol (24 ml). Removen-se o eta-nol a pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre água (30 ml) e acetato de etilo (30 ml). Separou-se a fase orgânica e re-extraíu-se a fase aquosa com acetato de etilo. lavaram-se os extractos de acetato de etilo com água (20 ml), secaram-se, e removeu-se o sslivente a pressão reduzida. A trituração do resíduo com éter seguido de cristalização de propan-2-ol produziu o 5-fenoximetil-3-(2-hidroxietil)oxazolidin-2-ona (0,52 g) p.f. 89-91°0; microanálisej encontrado G, 60,8; Ξ, 6,3; 1, 5,8$; requerida para 0^2^15^4 * C, 60,8; H, 6,3; R, 5,9$. d) Adicionou-se gota a gota azodicarboxilato de dietilo (0,33 ml) a uma solução agitada de l-(4-bidroxifenil)butan-2-ona (0,35 g), parte do produto de c) anterior (0,50 g) e trifenil-fosfina (0,55 g) em tetrabidrofurano anidro (13 ml), à temperatura de banho de gelo, em árgon. Deixou-se a mistura reaacional durante 100 boras a 20°C e em seguida removeu-se 0 solvente a pressão reduzida. Dissolveu-se 0 resíduo em acetato de etilo e - 27 -

nucleou-se a solução com 1,2-dicarbetoxihidrazina. Deixou-se a solução em repouso durante 2 horas, recolheu-se o sólido e submeteu-se o filtrado a cromatografia utilizando acetato de etilo a 50$ em hexano como eluente. Combinaram-se as fracções adequadas, evaporaram-se e cristalizou-se o resíduo de acetato de etilo/ciclohexano para se ohter 3-/2-(4-(2-oxobutil)fenoxi-etil7-5-(fenoximetiil)oxazolidin-2-ona (280 mg) (280 mg); p.f. 67-69°C; microanálise encmitrada E, 68,9; Η, β,β; I, 3,7$; requerida para 022^251^^ C, 68,9; H, 6,5; 1, 3,7$.

Exemplos 8-12

De modo semelhante ao referido no Exemplo 7, prepararam-se os seguintes compostos como sais clo-ridratos a partir de l-(4-hidroxi-fenil)hexano-2-ona, l-(4--hidroxifenil)-4-metilpentan-2-ona, l-(4-hidroxifenil)heptan-2--ona, l-(4-hidroxifenil)octan-2-ona, e l-(4-hidroxifenil)nonan--2-ona respectivamente. CHgCOR1 pho ch2 ch ( oh ) ch2hhch2ch2o

Exemplo ' | p.f. j licroanálise/RMi I j (solvente) | 8 -(CH2)5GH5 I173“5°C jEncontrado: c, 65,1; H, 7,Ç I (etanol) 3,3$; requerida para I ^ |C23H32Cllí04! 65,5; H, 1 7,6; I, 3,3$; i |EM 0,84 (t, 3H, OOCHgCHg- I CH2GH^) 1,23 (sexteto, 2H, |C0CH2CH2CH2CIi3); 1,46 (quin I | teto, 2H, COGH2GH2CH2CH5); | |2,46(t,2H, C0CH2CH2CH2CH5); , I j3»09-3,47(m,4H, 0H2IHCH2); - 28 -

Exemplo > 3,68(s,2H,lrGH2C0)5 3,9 5-4,0 9(m,2H,PhO CH2 CH)} 4,22-4,36(m,3H,0H0H e CHgGHgOAr' 6,90-7,36(m,9H, aromático H). 9 CH2CH(CH3)2 176-8°C (etanol) Encontrado; C, 65,1; H, 7,5; H, 3,1#; requerido para C25H32C1N04; G, 65,5; H, 7,6; H, 3,3#; RMI 0,84 (d, 6H, COCH2CH(CH3)2); 2,04 (m, 1H, 000H2CH(GH5)2) ; 2,35(d, 2E, GOCH2GH(CH3)2); 3,10-3,50(m, 4H, CíyJHGHg); 3,66(s, 2H ArCH2C0); 3,95-4,10(m, 2Ξ, PHOCHgCH); 4,22-4,36(m, 3H, OHOH e fCHgOHgOAr), 6,92-7,35(m, 9H, aromático H). 10 (CH2)40H5 h-7 2—4°G |(etanol) 1 Encontrado; C, 65,8; H, 7,8; H, 3,4#; Requerido para C24H34C1I04: G, 66,1; H, 7,8; I, 3,2#; mm 0.,84(t, 3H, cii2ch2gh2gh2gh3; I 1,10-1,35(121, 4H, CH20H2GH20H2-OH^); 1,48 (quinteto, 2H, 0H2GH2GH2CH2CH5); 2,46 (t, 2H, G0CH2CH2GH2CH2CH5); 3,12-3,50 (m, 4H, 0Η21Η0Η2); 3,67(s, 2H, | ArCH2C0); 3,95-4,10 (m, 2H, Hi00H2CH); 4,24-4,39 (m, 3H, | OHOH e CH2GH20Ar), 6,90-7,36 (m, 9H, aromático Ξ) - 2-9 -

Para conveniência apresenta-se em seguida o esquema para a preparação dos compostos dos Exemplos 7-12 (em que R é etilo, n-butilo, isobutilo, n-pentilo, n-bexi lo ou n-heptilo.

Esquema 2

(8)

PhO 0H2 Cli (OH) 0H2mCH2 OHgO

CH^OR1 - 31 - (9)

Notas ao Esquema 2 D. Preparou-se a l-(4-hidroxifenil)hexan-2-ona de modo semelhante ao descrito na nota 1 do Esquema 1 a partir de n-hutil--lítio comercial. E. De modo semelhante ao descrito na nota B do esquema 1 prepararam-se as l-(4-hidroxifenil)metilpentan-2-ona, l-(4-hidro-xifenil)heptan-2-ona, l-(4-hidroxifenil)octan-2-ona e l-(4-hi-droxifenil)nonan-2-ona a partir do Brometo de alquilo adequado. F. Dados Eísicos para os Intermediários na preparação dos com postos dos Exemplos 8-12.

Exemplo 8 f .p. (solvente) Microanálise Composto (7) Composto (8) óleo 77-9°C (Ciclohexano) Encontrado C, 69»8; H, 7,1; 3tf, 3,4$; requerido para C24H2qN05: C, 70,1; g, 7,1; Exemplo 9 Composto (7) Composto (8) óleo 93-5°C (acetato de eti lo/oiclohexano) Encontrado C, 70,0; H, 7,2; I, 3,4$; requerido para C24H2gN05: C, 70,1; H, 7,1; N, 3,4$. Exemplo 10 Composto (7) (tampo st o (8) óleo 76-8°C (acetato de eti lo/ciclohexano) Encontrado C, 70,8; H, 7,6; N, 3,3$; requerido para C25H31E05í c’ 70’65 7,3; I, 3,3$. - 32 4 4

Exemplo 11

Composto (7) óleo

Composto (8) I 81-3°C [Encontrado C, 71,1; Ξ, 7,5; (acetato de eti 1, 3,1$; requerido para

I lo/eiclohexano) I 5: G, 71,1; H, 7,5; B, 3,2$.

Exemplo 12 j Composto (7) 44-6°C j (ciclohexano) Composto (8) ^ 83-5°C , (acetato de eti j lo/ciclohexano)

Encontrado 0, 77,0; H, 9,7$; requerido para 0-|^H22025 0, 76,9; H, 9,4$. Encontrado C, 71,3; H, 7,7; 1, 3,0$; requerido para C27H55I05s C, 71,5; H, 7,7; 3,1$.

Exemplo 13 (S)-1-/4-(2-(2-Hidroxi-3-fenoxipropilamino)-etoxi)f enil/pentan· -2-ona

De modo semelhante ao referido no Exemplo 7, fez-se reagir a (S)-5-fenoximetil-3-(2-hidroxetil)-oxazolidin-2-ona com l-(4-hidroxifenil)pentan-2-ona para se obter a (S)-3-/2-(4-(2-oxopentil)fenoxi)et11/-5-(fenoximetil)-oxazolidin-2-ona que foi hidrolisada para o composto do título n — 28 sob a forma de eloridrato; p.f. 166-7 C (etanol); ΖηΛ° = = -11,3 (c = 1,0, metanol); microanálise: encontrado C, 64,9; H, 7,5; N, 3,7$; requerââo para C22H30G1S045 C, 64,8; H, 7,4; I, 3,4$; BM (DMSO-dg) 0,82 (t, 3H, OHgOHgCHj); 1,49 (sexteto, 2H, CI-I2CH2CH3); 2,44 (t, 2H, CH2CH2CH5); 3,20-3,48 (m, 4H, CH^ • NHCH2); 3,66 (s, 2H, ArCH2C0); 3,92-4,07 (m, 2H PhOCH2CH); ]_ 4,22-4,38 (m, 3H, CHOI-I e CHgCH^OEr); 5,90 (1H, OH); 6,90-7,34 - 33 -

(πι, 9Η, aromá-tico H); 9,13 e 9,35 (2H, lli2+). 0 material de partida foi obtido da forma seguinte: a) Preparou-se a (S)-5-feno:ximetiloxazolidin-2-ona a partir do eter (S)-fenilglicidilico e ureia utilizando o procedimento descrito por W. J. Iíauffman and J. E. Herweh, J. Org. Ohem. 1972, 37, 1842-1845. b) Adicionou-se hidreto de sódio (2,2 g de uma dispersão a 50$ em óleo inorgânico) a uma solução agitada de acetato de 2--bromoetilo (5 ml) e (S)-5--fenoximetiloxazolidin-2-ona (8,0 g) em dimetilformamida anidra (150 ml), em árgon a 20°C. Quando terminou a efervescência, aqueceu-se a mistura reaccional a 45-50°C durante 2 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional, deitou-se em água (750 ml) e extraiu-se o produto em acetato de etilo (3 X 400 ml). Lavaram-se os extractos combinados de acetato de etilo com água (300 ml), secaram-se, e removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a cromato grafia utilizando acetato de etilo em hexano como eluente (gra diente de eluição; 60$ a 70$ de acetato de etilo). Combinaram--se as fracções adequadas para se obter a (S)-5-fenoximetil-3-(2-acetoxietil)oxazolidin-2-ona (4,6 g). c) Agitou-se a 20° C durante 1 hora uma solução do produto de B) anterior (4,5 g) e metóxido de sódio (1,0 g) em nebanol (50 ml). Removeu-se o metanol por evaporação e repartiu-se o resíduo entre acetato de etilo e água. Separou-se a fase de acetato de etilo, secou-se, e removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a cromatógrafia utilizando 2$ de metanol em diclorometano como eluente. Combinaram-se as fracções adequadas para se obter a (S)-5-fenoximetil-3-(2-hidroxi-etil)oxazolidin-2-ona (2,2 g). - 34 -

Claims

' h EEIVIOI C A 0 0 E S

- li - Processo para a preparação de um cm. posto com a fórmula (i):

ooh2ch(oh)ch2ihch2ch2o CHgCOIT (I) na qual R·*" é hidroxi ou alquilo(1-10C), ou de um seu sal Ridro lisável in vivo ou farmaceuticamente aceitável, caracterizado por j a) fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) ou (II|) com um composto com a fórmula (IV): 0

OOHgCH— CH2

och2ch(oh)ch2i ih2ch2ch2o

>-gh2gor (II) (III) (IV) - 35 -

em que R**- é como acima definido e L é um grupo substituível, ou b) hidrolisar-se um composto com a fórmula (V):

na qual R"1" é como acima definido, ou c) para os compostos com a fórmula (I) em que é hidroxi, bidrolisar-se um composto com a fórmula (VI):

0CH2CH(0H)CH2IHCH2CH20 —< CH2COR1 (VI) xVoch2gh(oh)ch2iil

na qual Rx é como acima definido e 1’ é um grupo substituível, - 36 - 1 , na qual R é um grupo Mdrolisável, d) fazer-se reagir um composto com a fórmula (VII) com um composto com a fórmula (VIII): (VII) (VIII) GH2 OH(OH)OHgHHOHgOHgO

ou e) desproteger-se um composto com a fórmula (IX);

Ί * na qual R é como acima definido e E; é um derivado protegido de -SOR·*", e se necessário formar-se em seguida um éster hidroli sável in vivo ou um seu sal farmaceuticamente ac&tável. _ 2§ - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto em que R**" é hidro xi. _ 3a _ Processo de acordo com a reivindica- 1 ção 1, caracterizado por se obter um composto em que R é alqui lo (1-6C). - 4§ - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por se obter um composto em que R·*· é metilo stilo, n-propilo, is-butilo, n-butilo ou n-hexilo. 37 - I * iaSMSSSZ®S2^ãB2B2S5Í Processo de acordo com a reivindica-ção 1, caracterizado por se obterem nomeadamente os seguintes compostos: ácido 4-/2-(2-bidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi7fenilacético ou ácido (S )-4-/2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino )etoxi/fenilacético. - 6§ - Processo de acordo com a reividinca-· ção 1, caracterizado por se obterem nomeadamente os seguintes compostos: 1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino )etoxi )fenil/propan-2- -ona, (S )-1-/4- (2-(2-hidrox±~3-f enoxipropilamino )etoxi )fenil/propan--2-ona, 1-/4- (2- (2-hidroxi-3-f enoxipropilamino) et oxi )fenil/butan-2-ona, (S)-1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7butan-2--ona, 1-/4-(2-(2-bidroxi-3-fenoxiprppilamino)etoxi)fenil/pentan-2--ona, (S )-1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil/pentan--2-ona, 1-/4-(2-(2-bidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7-3-metilbu-tan-2-ona, 1-/4-(2-(2-bidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7hexan-2-ona, 1-/4-(2-(2-bidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil/-4-metilpen-tan-2-ona, 1-/4-(2-(2-bidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil7beptan-2-ona 1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil/octan-2-ona ou 1-/4-(2-(2-hidroxi-3-fenoxipropilamino)etoxi)fenil/nonan-2-ona. - 7a - - 38 -

* Processo de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 6 caracterizado por se obter um composto na configuração absoluta (S) no grupo -CH(OH)-. - 8ô - Processo para a preparação de um composto com a fórmula VI caracterizado por: a) fazer-se reagir um composto Gom a fórmula (II) ou (III) con um composto com a fórmula: IHgCHgCHgO

gh2coe b) hidrolisar-se um composto com a fórmula : 0 0

c) fazer-se reagir um composto com a fórmula (VII) com um composto com a fórmula

ch2ooe - 2

1 2 em que L e R são como definidos na reivindicação 1. ga _ Processo de acordo com a reivindica-ção 8 caracterizado por se obter um composto em que R é alcoxi (1-6C) ou amino (-HH2)· - loa - Processo para a preparação de um composto com a fórmula (V) caracterizado por: a) fazer-se reagir um composto com a fórmula (XI). HO

OHgCOR (XI) com um composto com a fórmula (Xlljf; 0. ,0

4 OCHgCH N-R' na qual ift é GH2CH20H, ou b) fazer-se reagir um composto com a fórmula (VIII) com um composto com a fórmula (XII) em que R^ é Hidrogénio, ou c) fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) com um com posto com a fórmula (XIII) - 40 - J

(XIII) em que íro- é um processo substituível. - 11a - Processo para a preparação de um com posto com a fórmula (IX) caracterizado por: a) fazer-se reagir um composto com a fórmula (II) ou (III) com um composto com a fórmula:

1) hidrolisar-se um composto com a fórmula:

c) fazer-se reagir um composto com a fórmula- (VH) com um composto com a fórmula: - 41 - l1gh2ch2

>

1 2 em que I e R são como definidos na reivindicação 1. - 12s - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizada por se incorporar como ingrediente activo um composto quando preparado de acordo com as reivindicações 1 a 6 em associação com um veículo farmacêuti camente aceitável. 13s - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por se incorporar como in grediente activo um composto quando preparado de caordo com a reivindicação 7 em associação com um veículo farmacêuticamente aceitável. A requerente reivindica a prioridade do pedido britânico apresentado em 5 de Maio de 1989, sob o ]js. 8910374.1. lisboa, 4 de Maio de 1990

- 42 -