PT706422E - Conjunto de sacos para utilizar em separacao centrifuga - Google Patents

Description

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DESCRICÀO “Conjunto de sacos para utilizar em separação centrífuga” O invento refere-se a um conjunto de sacos destinado à separação centrífuga por lotes. Mais particularmente, o invento refere-se a um conjunto de sacos do tipo que compreende um saco exterior essencialmente em forma de anel e um saco interior, formado a partir da parte central do anel, assim como um ou mais tubos de ligação entre os interiores destes sacos.

Os sistemas de sacos acoplados são utilizados para a separação centrífuga de sangue, produtos de sangue e outros fluidos biológicos. O fluido que se destina a ser separado é fornecido a um saco primário do sistema e, depois da centrifugação e separação do fluido em duas ou mais fracções, uma ou mais destas fracções é .pressionada para os sacos fixos. Conhecem-se a este respeito sacos redondos e em forma de anel especialmente adaptados para a separação centrífuga. Os sistemas de sacos deste tipo encontram-se descritos, por exemplo, nos pedidos de patente internacional WO 87/06844 e WO 89/02273. Estes documentos também descrevem a forma como este tipo de sistema de sacos pode ser fabricado a partir de filmes de plástico que são deitados um sobre o outro e unidos por meio de uma costura exterior em forma de anel e por uma costura interior em forma de anel, de modo que é formado um saco exterior em forma de anel assim como um saco interior em forma de placa na porção central do anel. Podem ser obtidas no saco interior várias câmaras dispostas umas sobre as outras, dependendo do número de camadas de filme que se encontram conjuntamente seladas. A costura interior é adequadamente proporcionada com uma perfuração, de modo que os sacos interior e exterior podem ser separados um do outro. O fluido que se destina a ser separado é fornecido ao saco exterior em forma de anel e depois da centrifugação é sujeito a uma pressão externa que pressiona a ffacção que está mais próxima do centro do rotor através do canal de ligação até ao saco interior. Podem ocorrer diversas combinações diferentes de canais ligados caso o saco interior compreenda uma pluralidade de câmaras. Conhecem-se também diferentes métodos para alcançar a pressão compressiva no saco enquanto este se encontra no rotor e decorre a rotação.

De um ponto de vista do custo é vantajoso se o saco interior poder ser fabricado a partir de material de filme que é obtido a partir da porção central restante do saco exterior. Se for necessário um grande volume para o saco interior, isto significa que, apesar de tudo, o diâmetro do saco exterior será grande, o que é uma desvantagem em muitas aplicações e requer centrifugadoras com grandes diâmetros de rotor.

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Um objectivo do presente invento consiste em proporcionar um conjunto de sacos aperfeiçoado do tipo atrás mencionado, o qual ofereça uma flexibilidade aumentada no que diz respeito à escolha do volume do saco interior e ao diâmetro do saco exterior.

Este e outros objectivos e vantagens, que se encontram descritos em maior detalhe na descrição que se segue, são conseguidos por um conjunto de sacos tal como definido nas reivindicações.

Assim, o conjunto de sacos compreende um saco exterior essencialmente em forma de anel e um saco interior, formado a partir da porção central do anel e podendo de preferência destacar-se do anel, assim como um ou mais tubos de ligação entre os interiores destes sacos. De acordo com o invento o conjunto de sacos compreende adicionalmente uma parte central circular rígida na qual o saco exterior se encontra montado numa posição para a centrifugação, pelo que é dado ao saco exterior uma forma cónica em tomo da parte central por meio de um encurtamento de anel contrativo. A parte central também tem a tarefa de facilitar o manuseamento do conjunto de sacos assim como a fixação do saco interior na posição pretendida para centrifugação. A parte central tem uma cavidade interior na qual o saco interior está colocado de uma forma que limita a sua dispersão radial mas permite uma expansão na direcção axial quando se encontra cheio com fluido. A cavidade interior tem um diâmetro que é inferior ao diâmetro do saco interior, pelo que o saco interior é pressionado para a cavidade de modo a que a sua parte periférica curve ao longo das paredes da cavidade. A parte central tem de preferência essencialmente a forma de um cilindro aberto para baixo. O encurtamento de anel contrativo do saco exterior pode ser conseguido por uma secção do anel que está conjuntamente reunida numa dobra. A comunicação de fluido em forma de anel interior no saco está por isso bloqueada. A dobra pode ser colocada no anel de modo que sejam obtidas duas extremidades de saco sobrepostas, assim como uma peça de material entre as extremidades de saco que permanecem vazias e bloqueadas para o escoamento de fluido. O saco exterior também pode ser cortado e as extremidades livres resultantes seladas. O encurtamento do saco pode então ser conseguido ao arrastar as extremidades conjuntamente, de modo a que as mesmas se sobreponham entre si. O saco pode também ser cortado em dois locais e a peça de material intermédia removida, pelo que as extremidades livres são arrastadas uma para a outra de uma maneira correspondente até que se sobreponham.

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Devido ao facto de a comunicação de fluido em forma de circulo no saco exterior estar bloqueada ou interrompida, é impedido um escoamento do fluido à volta do saco quando a centrifugadora acelera ou atrasa, o que acelera a iniciação do procedimento de separação e impede a obstrução quando o rotor é abrandado. A câmara de separação no rotor está adaptada à forma cónica do saco exterior encurtado. Devido ao facto de a separação ocorrer numa direcção radial numa câmara cónica relativamente estreita, são conseguidos um efeito de separação angular e uma separação rápida. O percurso da separação na direcção radial é curto e o componente especificamente mais pesado viaja apenas uma curta distância antes que encontre uma superfície oblíqua que conduz o mesmo à parte do fundo do cone.

Uma colocação central do saco interior no meio do rotor combinado com uma dispersão limitada na direcção radial significa que o fluido que é levado para cima no saco interior é sujeito a um campo limitado de força. Isto mostrou por si só ser particularmente importante quando se recuperam suspensões de partículas, por exemplo, suspensões de trombócitos, dado que tem que ser evitada uma formação de agregados não desejável e uma nova sedimentação das partículas. O conjunto de sacos de acordo com o invento é também particularmente adequado para a recuperação de células de medula óssea pela separação centrífuga de suspensões de medula óssea. O invento vai agora ser descrito em maior detalhe com referência às figuras anexas: a fig. 1 mostra uma concretização de um saco exterior e de um saco interior para um conjunto de sacos de acordo com o invento; a fig. 2 mostra uma concretização parcialmente diferente de um saco exterior e interior de acordo com o invento; a fig. 3 mostra um corte transversal através da parte central rígida para um conjunto de sacos de acordo com o invento; a fig. 4 mostra a parte central de acordo com a fig. 3 em corte horizontal; a fig. 5 mostra uma vista em corte através de um conjunto de sacos de acordo com o invento com a parte central rígida de acordo com as figs. 3-4; 4 85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ a fig. 6 mostra ο conjunto de sacos de acordo com a fig. 5 em corte horizontal; a fig. 7 mostra uma vista em corte através de um conjunto de sacos com câmaras de saco interior duplas, montado num rotor de centrifugadora; a fig. 8 mostra o rotor de centrifugadora visto por cima; as figs. 9-11 mostram esquematicamente a utilização de um conjunto de sacos de acordo com o invento durante a recuperação da suspensão de trombócitos. A fig. 1 mostra assim uma concretização de um saco exterior 1 essencialmente em forma de anel e um saco interior 2 central essencialmente circular formado a partir da porção central do anel. Os interiores dos sacos estão unidos com um tubo 3 que tem um orifício 4 no saco exterior e um orifício 5 no saco interior. O saco exterior está provido de uma ligação adicional 6 para fornecimento e remoção de fluido para e a partir do saco exterior. O orifício 4 está colocado numa protuberância 7 voltada radialmente para dentro do saco exterior. Quando a fase enriquecida mais leve contra o centro do rotor é pressionada para fora do saco exterior após a separação por meio de aplicação de pressão a este, pode ocorrer facilmente a formação de um redemoinho em tomo da abertura de saída e as partes da próxima fase podem ser sugadas para fora. Ao colocar o orifício 4 numa protuberância que se prolonga radialmente ainda mais para dentro do que as outras partes do saco exterior e ao formar o rotor de modo a que esta parte do saco forme uma folga relativamente estreita entre o rotor e a cobertura de rotor na direcção da altura, a formação do redemoinho em tomo do orifício 4 pode ser evitada e a fase mais leve pode ser recuperada com elevada qualidade e elevado rendimento. O saco exterior está ainda provido de um certo número de meios de fixação, por exemplo, pequenos orifícios 8, para fixação do saco exterior na parte central rígida, a qual irá ser descrita em maior detalhe com referência às figs. 4--7.

Os sacos são produzidos por dois filmes de plástico que são colocados um sobre o outro e selados conjuntamente com uma soldadura exterior 9 em anel e uma soldadura interior 10 em anel. A última soldadura é tal que separa quer os sacos totalmente uns dos outros quer permite que os mesmos se separem uns dos outros por rasgamento. A fig. 2 mostra uma concretização parcialmente diferente de um saco de acordo com o invento e difere daquilo que tem sido descrito com referência à fig. 1 pelo facto de a soldadura interior 10 em anel estar colocada um pouco desviada do centro em relação ao

85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ 5 exterior. Ο saco exterior é desse modo mais largo na área do orifício 4 do tubo 3 no saco exterior. Esta porção mais larga satisfaz a mesma função que a protuberância 7 na concretização de acordo com a fig. 1. A parte mais larga do saco exterior é colocada de uma maneira correspondente na folga estreita entre o rotor e a cobertura de rotor. Os detalhes que correspondem uns aos outros nas figuras foram indicados com as mesmas referências numéricas. A forma de anel do saco exterior é cortada e as extremidades livres 11 e 12 assim resultantes são fechadas. O corte pode ser executado, por exemplo, por meio de uma soldadura que ao mesmo tempo sela as extremidades. Na concretização mostrada o saco exterior é cortado com duas soldaduras voltadas substancialmente de modo radial 13 e 14 a uma certa distância uma da outra. A peça de material intermédia 15 é removida. O saco exterior essencialmente em forma de anel é assim libertado de qualquer comunicação de fluido interior que circula.

Por forma a reduzir o diâmetro que é tomado pelo sistema de sacos e ao mesmo tempo facilitar o manuseamento dos sacos e a mistura destes nas posições pretendidas para centrifugação, é utilizada uma parte central circular rígida 16. O saco exterior é montado à volta do lado de fora da parte central e o lado de dentro do saco interior numa cavidade interior 17 na parte central. O conjunto de sacos pode desse modo ser levantado para dentro e para fora do rotor com um simples agarrar da mão. As figs. 3 e 4 mostram uma concretização de uma tal parte central na forma de um cilindro aberto para baixo. A fig. 3 mostra uma vista em corte através da parte central e a fig. 4 mostra a parte central em corte horizontal. O cilindro, na sua extremidade aberta, está provido de um rebordo cónico inclinado 18, no qual o bordo interior do saco exterior é preso nos meios de prender 19 que cooperam com os pequenos orifícios de prender 8 no saco exterior. No seu lado de dentro, o cilindro tem suportes 20 e 21 para fixar o tubo de ligação 3 entre o saco interior e o saco exterior e está provido de aberturas 22 e 23 para acesso ao tubo a partir do lado superior da parte central, para permitir a fixação de válvulas de constringir ou sensores ópticos etc. no tubo, quando o conjunto de sacos se encontra colocado no rotor.

As figs. 5 e 6 mostram um conjunto de sacos completo com a parte central em corte e em vista horizontal, respectivamente. O saco interior 2 está colocado no lado de dentro da parte central 16, a qual está disposta para limitar a dispersão radial do saco interior mas para permitir uma expansão axial do saco interior quando este é enchido com um fluido. É mostrada nas figuras uma parte central na forma de um cilindro de acordo com as figs. 3—4. O cilindro tem um diâmetro mais pequeno do que o saco que é pressionado para o cilindro, de modo que a sua parte periférica 25 é dobrada e assenta contra a superfície interior do

85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ 6 cilindro. Quando ο saco interior é enchido expande-se na direcção vertical no lado de dentro do cilindro. A dobragem da parte periférica do saco interior, a qual é o resultado do mesmo ter um diâmetro mais largo do que a parte central 16, mostrou por si própria ter apenas uma intrusão marginal no volume máximo que pode ser tomado no saco interior. O saco exterior 1 tem um diâmetro demasiado grande para que o seu bordo interior encaixe no rebordo 18. Em ligação com a montagem na parte central, o saco exterior em forma de anel é encurtado por uma secção do anel que é arrastada juntamente para uma dobra 24 que é deitada no anel. A comunicação de fluido contínua no anel é assim quebrada. No caso em que o anel é cortado por uma soldadura ou semelhante, o anel é encurtado pela extremidade que é deitada numa relação de sobreposição. Com o encurtamento do anel, o saco irá assumir uma forma cónica sem ser dobrado e pode facilmente ser preso ao rebordo inclinado 18 de modo cónico formado da mesma maneira no cilindro 16. Deste modo o sistema de sacos tem um.diâmetro mais pequeno e pode ser utilizado em rotores de centrifugadoras pequenas, apesar de os sacos serem fabricados com um diâmetro que está dependente do volume que o saco interior 2 está destinado a ter, isto é, a secção central do saco exterior. A fig. 7 mostra um corte através de um conjunto de sacos colocado num rotor de centrifugadora 26 adaptado ao sistema. Neste caso, o conjunto de sacos tem um saco interior com uma câmara superior 27 e uma câmara inferior 28. A fig. 8 mostra o rotor visto por cima, indicando 29 a base do rotor e 30 a sua cobertura. Um canal 31 para fluido hidráulico passa através do eixo do rotor para o compartimento anular 32 do rotor, onde uma câmara hidráulica 33 em forma de anel é delimitada do resto do compartimento anular por uma membrana 34. O saco exterior é colocado no compartimento anular e a sua porção protuberante 7 fica posicionada na folga 35 entre a base do rotor e a sua cobertura. O tubo de ligação 3, o qual tem um orifício na protuberância 7 no saco exterior, ramifica-se num ramal 36 que tem um orifício na câmara superior 27 do saco interior e um ramal 37 que tem um orifício na inferior. As condutas de ramal estão colocadas em válvulas de constringir 38 e 39, as quais são controladas pela operação programada da centrifugadora, e/ou fotocélulas que detectam o deslocamento da superfície limite da fase no tubo de ligação 3. O saco exterior está ligado a um tubo adicional 6, o qual é arrastado para cima através do furo 22 na parte central e ainda através de um furo 40 na cobertura de rotor. O tubo é utilizado para enchimento do recipiente exterior com o fluido que se destina a ser separado e fica assim acessível a partir do lado exterior do rotor. Após o enchimento do recipiente exterior, o tubo é fechado com pinças de soldadura de tubo e é colocado numa ranhura 41 na cobertura de rotor.

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Em vez de um tubo ligador ramificado 3, o saco exterior pode ser ligado a cada uma das câmaras no saco interior através de tubos separados e válvulas anti-retomo da mesma forma que está descrito na WO 89/02273, e o conjunto de sacos pode ser utilizado para operações de lavagem tais como as descritas no referido documento. O conjunto de sacos de acordo com o invento pode assim ser utilizado para a separação de sangue e outros fluidos biológicos e com tratamento desses fluidos com diferentes componentes. O sistema com câmaras duplas de saco interior e tubo ligador ramificado entre o saco interior e o saco exterior pode ser utilizado quando tiver de ocorrer uma separação em três fracções diferentes. Cada uma das duas fracções são conduzidas às suas respectivas câmaras de saco interior e a terceira permanece no saco exterior. O conjunto de sacos de acordo com o invento está especialmente adaptado para a recuperação de suspensões de trombócitos a partir de fracções isoladas de “buffycoat”, o que está esquematicamente mostrado nas figs. 9-11. A “buffycoat” é recuperada como uma fracção intermédia através da separação centrífuga da totalidade do sangue. Um certo número de “buffycoats” 42, por exemplo seis, são transferidas através do tubo 6 para o saco exterior 1, após o que o tubo 6 é cortado e selado com pinças de soldadura de tubo (fig. 9). As “buffycoats” são centrifugadas e divididas num plasma 43 rico em trombócitos e num volume restante 44 (fig. 10). Esta centrifugação ocorre com uma certa dose de cuidado por forma a evitar a centrifugação para fora das células de trombócitos. A inclinação cónica do saco exterior e o diâmetro relativamente pequeno são por isso uma grande vantagem. Depois disso é levada a exercer-se no saco exterior uma certa pressão e a suspensão de trombócitos é pressionada durante o decorrer da centrifugação através do tubo 3 para o saco interior 2 (fig. 11). O saco interior irá então expandir-se desse modo na direcção vertical enquanto que a sua dispersão radial é fixa pela parte central (não mostrada).

Uma vez que a suspensão de trombócitos é transferida para o centro do rotor e é mantida numa área limitada na direcção radial, irá apenas ser sujeita a uma fraca força centrífuga assim que for recuperada. Se a suspensão de trombócitos for sujeita a uma força centrífuga fortemente prolongada, ocorre uma formação de agregados indesejável e uma perda de células de trombócitos. Os requisitos especiais que são feitos para recuperação da suspensão de trombócitos de alta qualidade e alto rendimento são assim satisfeitos pelo conjunto de sacos de acordo com o invento.

Outro campo de aplicação onde o conjunto de sacos de acordo com o invento é especialmente adequado é na separação de medula óssea. A separação de medula óssea é aplicada em ligação com os tratamentos de cancro utilizando grandes doses de tratamento

85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ 8 por radiação. A medula óssea é retirada do paciente antes do tratamento por radiação e, através de várias separações e procedimentos de lavagem, as células de medula óssea são isoladas as quais são de novo transfundidas depois do tratamento por radiação.

Um procedimento conhecido para isolamento de células de medula óssea compreende os seguintes passos: a) separação centrífuga da suspensão de medula óssea em três ffacções e recolha da fracção intermédia, “buffycoat”; b) a fracção “buffycoat” do passo (a) é centrifiigada uma vez mais num fluido de separação, geralmente FICOLL® (Amersham Pharmacia Biotech AB), e é recolhida uma fracção intermédia que contem as células de medula óssea; c) lavagem da fracção recolhida do passo (b) para recuperação das células de medula óssea que podem ser transfundidas de novo. O conjunto de sacos de acordo com o invento pode ser utilizado num tal processo da seguinte maneira:

No passo (a) é utilizado um conjunto de sacos com câmaras duplas no saco interior e uma conduta de ligação ramificada a partir do saco exterior para os sacos interiores, isto é, do tipo que está mostrado na fig. 7. O saco exterior é fornecido com uma quantidade de suspensão de medula óssea, a qual através da centrifugação é dividida em plasma, “buffycoat” (compreendendo as células de medula óssea) e os produtos restantes. Devido à influência da pressão no saco exterior, a fracção de plasma é depois disso pressionada, durante o decorrer da rotação, para o primeiro saco interior e depois disso uma determinada quantidade de “buffycoat” para o segundo saco interior, sendo deixados os produtos restantes no saco exterior.

No passo (b) é utilizado um conjunto de sacos semelhante ao que é utilizado no passo (a). O fluido de separação (Ficoll) é fornecido ao saco exterior e uma suspensão da fracção de “buffycoat” do passo (a) é adicionada cuidadosamente, de modo que forme uma camada acima do fluido de separação. A centrifugação é iniciada lentamente, de modo que seja evitada a mistura. Dependendo do peso específico das células, as mesmas irão migrar através do fluido de separação ou ficar acima deste durante a centrifugação. As células de medula óssea são enriquecidas numa camada acima do fluido de separação. O que flutua à superfície (plasma) é depois disso pressionado, durante o decorrer da centrifugação, para dentro da 9 85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ primeira câmara de saco interior e depois disso, uma fracção intermédia que consiste na camada mais perto acima do fluido de separação (contendo as células de medula óssea), é pressionada para a segunda câmara de saco interior. O material de células mais pesado permanece no saco exterior.

No passo (c) pode ser utilizado um conjunto de sacos com um saco interior de câmara única, isto é, do tipo que se encontra descrito com referência à fig. 5. A fracção das células de medula óssea contaminadas com o fluido de separação do passo (b) é transferida para o saco exterior e é fornecido um fluido de lavagem adequado. Depois da centrifugação, o fluido de lavagem utilizado é pressionado para fora para o saco interior. Pode então ser fornecido um novo fluido de lavagem ao saco exterior através de um tubo (tal como mostrado na fig. 7) que está acessível a partir do lado de fora da cobertura de rotor, e o procedimento de lavagem pode ser repetido conforme seja necessário. As células de medula óssea lavadas são isoladas no saco exterior..

Com o conjunto de sacos de acordo com o invento pode ser obtida uma disposição de tratamento de preço reduzido, o que permite a separação de fluidos biológicos durante o decorrer da centrifugação em recipientes de componentes separados sem que os fluidos passem acoplamentos de rotação complicados, dispendiosos e inseguros sob o ponto de vista da esterilidade. Apesar de um pequeno diâmetro, o qual pode ser adaptado a um tipo de centrifugadora existente, podem ser levados no saco interior volumes relativamente grandes. O conjunto de sacos pode por conseguinte ser utilizado para muitos tipos diferentes de separações.

Lisboa, r.-7

Por Sanguistech AB - O AGENTE OFICIAL -

Claims (11)

1. 85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ 1/3 REIVINDICAÇÕES 1 - Conjunto de sacos para utilização em separação centrífuga que compreende um saco exterior (1) essencialmente em forma de anel; e um saco interior central (2), o qual é formado a partir da porção central do anel e podendo destacar-se do anel; e um ou mais tubos de ligação (3, 36, 37) entre os interiores dos referidos sacos, caracterizado por compreender uma parte central circular rígida (16) na qual o saco exterior (1) se encontra montado numa posição para centrifugação, pelo que é dada ao saco exterior (1) uma forma cónica à volta da parte central rígida (16) por meio de um encurtamento de anel contrativo do referido saco (1).
2. 2 - Conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o saco exterior ter duas extremidades livres, as quais são formadas ao cortar o anel e ao selar as extremidades resultantes, e por as referidas extremidades livres serem envolvidas umas sobre as outras para encurtar o anel quando o saco exterior (1) está montado na parte central rígida (16).
3. 3 - Conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por o anel ser cortado em dois locais e a secção de material entre eles ser removida.
4. 4 - Conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o saco exterior (1) ser encurtado por uma dobra, depois do destacamento do saco interior central (2).
5. 5 - Conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o saco exterior ter uma extensão radial (7) voltada para dentro, na qual se encontra situada uma abertura para o tubo de ligação.
6. 6 - Conjunto de sacos de acordo com a reivindicação l, caracterizado por a porção central do saco exterior (1), o qual é utilizado como o saco interior (2), estar localizada um pouco desviada do centro de modo que o saco exterior (1) é mais largo num lado, e por uma abertura (4) para o tubo de ligação se encontrar situada no bordo interior do referido lado mais largo.
7. 7 - Conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o saco interior (2) compreender duas ou mais câmaras (27, 28) dispostas uma sobre a outra, comunicando cada uma delas com o saco exterior (1) através de tubos de ligação ramificados ou separados. 85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ 2/3
8. 8 - Conjunto de sacos de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-7, caracterizado por a parte central rígida (16) ter uma cavidade (17) na qual o saco interior (2) está posicionado, e cavidade essa que está disposta para restringir as dimensões radiais do saco interior (2), mas para permitir uma expansão axial do referido saco quando é cheio com um líquido.
9. 9 - Método para a separação centrífuga de uma suspensão de trombócitos da “buffycoat”, obtida por separações de todo o sangue, utilizando o conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 8 e uma centrifugadora que tem um rotor (26) com um espaço de processamento concêntrico relativamente ao eixo de rotação do rotor, compreendendo o referido espaço de processamento um compartimento de rotor centrai e um compartimento de rotor anular (32), e tendo meios (31, 33, 34) para reduzirem o volume do compartimento de rotor anular durante a rotação do rotor, caracterizado pelo(a) fornecimento da referida “buffycoat” ao saco exterior (1) em forma de anel do conjunto de sacos e pela colocação do referido conjunto de sacos no referido espaço de processamento, de uma tal forma que a parte central circular rígida (16) se encontra posicionada no referido compartimento de rotor central, estando o saco exterior em forma de anel posicionado no referido compartimento de rotor anular (32), centrifugação da referida “buffycoat” para separar a mesma numa fase leve que compreende a referida suspensão de trombócitos e uma fase mais densa dos produtos restantes; expelir a referida suspensão de trombócitos do referido saco exterior (1) para o saco interior do conjunto de sacos durante a rotação do rotor, ao reduzir o volume do referido compartimento de rotor anular (32), e obtenção da referida suspensão de trombócitos no referido saco interior (2).
10. 10 - Método para a separação centrífuga de células de medula óssea das suspensões de medula óssea utilizando o conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 8, quando apensa à reivindicação 7, e uma centrifugadora de um tipo que tem um rotor (26) com um espaço de processamento concêntrico relativamente ao eixo de rotação do rotor, compreendendo o referido espaço de processamento um compartimento de rotor central e um compartimento de rotor anular (32), e tendo meios (31, 33, 34) para reduzirem o volume do compartimento de rotor anular durante a rotação do rotor, caracterizado pelo fornecimento da referida suspensão de medula óssea ao saco exterior (1) em forma de anel do conjunto de sacos, e pela colocação do referido conjunto de sacos no referido espaço de processamento de uma tal maneira que a parte central circular rígida (16) fica posicionada no referido compartimento de rotor central e o saco exterior em forma de anel fica posicionado no referido compartimento de rotor anular (32), 85 782 ΕΡ Ο 706 422/ΡΤ 3/3 centrifugando a referida suspensão de medula óssea para separar a mesma numa ffacção de plasma leve, numa ffacção “buffycoat” intermédia e numa ffacção mais densa de produtos restantes; expelindo a referida fracção de plasma leve do referido saco exterior (1) para uma primeira câmara de saco (27) do saco interior do conjunto de sacos, e depois disso expelir a referida ffacção intermédia “buffycoat” para uma segunda câmara de saco (28) do referido saco interior durante a rotação do rotor, ao reduzir o volume do referido compartimento de rotor anular (32), e recolhendo a referida fracção intermédia “buffycoat” da referida segunda câmara de saco (28) para uma separação continuada.
11. 11 - Método de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por a referida separação continuada ser executada num segundo conjunto de sacos de acordo com a reivindicação 8 e compreender o fornecimento de um fluido de separação ao saco exterior (1) em forma de anel do referido segundo conjunto de sacos, fornecendo a referida fracção intermédia de “buffycoat” recolhida como uma camada acima do referido fluido de separação no referido saco exterior e colocando o referido conjunto de sacos no espaço de processamento do rotor de uma tal forma que a parte central circular rígida (16) fica posicionada no referido compartimento de rotor central, e o saco exterior em forma de anel é posicionado no referido compartimento de rotor anular (32), centrifugando a referida fracção recolhida com o referido fluido de separação no referido saco exterior para separar a referida fracção recolhida numa fracção de plasma leve, numa fracção intermédia disposta numa camada acima do fluido de separação e numa fracção mais densa; expelindo a referida fracção de plasma leve do referido saco exterior (1) para uma primeira câmara de saco (27) do saco interior do referido segundo conjunto de sacos, e depois disso expelir a referida fracção intermédia para uma segunda câmara de saco (28) do referido saco interior durante a rotação do rotor, ao reduzir o volume do referido compartimento de rotor anular (32), recolhendo a referida fracção intermédia, a qual contem as células de medula óssea, a partir da referida segunda câmara de saco para o tratamento continuado; e lavando a referida ffacção intermédia recolhida para obter células de medula óssea que se podem transfundir de novo. Lisboa, n r·.·: *v>. ./,. Por Sanguistech AB O AGENTE OFICIAL- O ADJJ

    ΑΝΙύΝΙΟ JOÃO CUNHA FERREIRA Ag. Of. Pr. Ind. das Flores, 74 - 4.® 1 ieoo LISBOA