PT666746E

PT666746E - Delta5-androstenos uteis para promover a manutencao de peso ou perda de peso e processo de tratamento

Info

Publication number: PT666746E
Application number: PT94927309T
Authority: PT
Inventors: Henry A Lardy; Ieva L Reich; Wei Yong
Original assignee: Humanetics Corp
Priority date: 1993-09-02
Filing date: 1994-09-01
Publication date: 2001-11-30
Also published as: DE69427634T2; EP0666746A1; GR3036666T3; EP0666746B1; JP3143749B2; ATE202707T1; JPH08503491A; WO1995006472A1; DK0666746T3; CA2148373A1; EP0666746A4; DE69427634D1; ES2160128T3; AU7679494A

Description

6667*16 p ^ ^^ DESCRIÇÃO "Δ5-ANDROSTENOS ÚTEIS PARA PROMOVER A MANUTENÇÃO DE PESO OU PERDA DE PESO E PROCESSO DE TRATAMENTO" Âmbito da invenção A presente invenção refere-se a esteróides seleccionados do grupo dos A5-androstenos, para utilização como agentes de controlo de peso, especialmente para a prevenção do ganho de peso, redução de peso e tratamento de obesidade.

Pensa-se que o esteróide desidroepiandrosterona (DHEA) estimula várias respostas biológicas, incluindo (i) induzir a síntese de várias enzimas termogénicas que são eficazes na regulação do metabolismo, promovendo desse modo um controlo do peso, sem afectar a absorção calórica, e (ii) induzir um aumento na produção das hormonas sexuais, androgénio e estrogénio.

Pensa-se que a capacidade da DHEA promover um controlo de peso é mediada por uma termogénese aumentada (conversão de alimentos em energia térmica, em vez de energia química, tal como ATP e/ou triacilglicéridos). Pensa-se que o efeito termogénico, mediado pela DHEA, resulta da capacidade da DHEA estimular a síntese de enzimas termogénicas, incluindo a glicerol 3-fosfato desidrogenase, mitocondrial (G3P-DH) e a enzima málica citosólica (ME). Estas enzimas tendem a reduzir a eficiência do metabolismo energético no corpo.

Infelizmente, a DHEA é geralmente considerada ineficaz como agente terapêutico de controlo de peso, pois a dosagem 1

necessária para se obter o controlo de peso produz frequentemente efeitos secundários significativos, incluindo aumentos substanciais na concentração de hormonas sexuais. A PCT/US91/06147 descreve um processo de tratamento para promover a perda de peso, que utiliza uma A5-androsterona substituída. Os esteróides aí descritos podem ser considerados eficazes para estimular a resposta biológica desejada, sendo ao mesmo tempo ineficazes quanto a respostas biológicas não desejadas, e.g. indução da síntese de hormonas sexuais.

Outros agentes terapêuticos que possuem a característica de controlo de peso da DHEA, sem o efeito secundário de estimular a síntese de hormonas sexuais seriam extremamente úteis. Além disso, a eficácia desse agente terapêutico poderia ser significativamente aumentada, se o agente possuísse uma actividade de controlo de peso aumentada, em relação à DHEA.

Sumário da invenção

Os A5-androstenos que proporcionam a resposta biológica benéfica desejada, sem a resposta biológica indesejada incluem: A5-androsteno-3p-acetoxi-7, 16, 17-triona A5-androsteno-3P, 16a-dihidroxi-7, 17-diona (5) (6) A5-androsteno-3P-propionoxi-16p-acetoxi-7, 17-diona (7) (8) (9) A5-androsteno-3P, 7a, 17p-triol-16-ona A5-androsteno-3p, 17β-όϊο1-7, 16-diona A5-androsteno-3p,16a, 17P~triol, 7-ona 2 (10) Γ u

e derivados destes, em que um ou mais dos substituintes hidroxilo, ou ceto, é um grupo convertível nestes, por hidrólise.

Exemplos destes grupos hidrolizáveis incluem grupos hidroxilo esterifiçados com um ácido seleccionado de entre o grupo constituído por (i) ácidos alifáticos C2-22, normais ou ramificados, saturados ou insaturados, (ii) ácidos aromáticos C7-12, (iii) ácidos dicarboxílicos C3 ou maiores, em que apenas um dos grupos carboxilo é esterificado no(s) grupo hidroxilo no esteróide, ou (iv) ácidos inorgânicos, como o ácido sulfúrico e fosfórico.

Descrição pormenorizada da invenção incluindo um modo melhor

Os A5-androstenos identificados a seguir possuem uma combinação única de propriedades, incluindo a capacidade de promover um controlo de peso sem afectar o apetite e sem estimular a produção de hormonas sexuais. A5-androsteno-3p-acetoxi-7, 16, 17-triona (5) A5-androsteno-3P~ 16a-dihidroxi-7, 17-diona (6) A5-androsteno-3p-propionoxi-16p-acetoxi-7, 17-diona (7) Δ5-androsteno-3β, 7a, 17P-triol-16-ona (8) Δ5-androsteno-3β, 17β-όϊο1-7, 16-diona (9) Δ5-androsteno-3β, 16α, 17β-όΓΪο1, 7-ona (10) e seus derivados, em que um ou mais dos substituintes hidroxilo, ou ceto, é um grupo convertível nestes, por hidrólise. 3

Exemplos destes grupos hidrolizáveis incluem grupos hidroxilo esterifiçados com um ácido seleccionado de entre o grupo constituído por (i) ácidos alifáticos C2-22, normais ou ramificados saturados ou insaturados, (ii) ácidos aromáticos C7-12/ (iii) ácidos dicarboxílicos C3 ou maiores, em que apenas um dos grupos carboxilo é esterificado no(s) grupo hidroxilo, no esteróide, ou (iv) ácidos inorgânicos, como o ácido sulfúrico e fosfórico.

Estes esteróides podem também ser administrados como um carbamato ou outro derivado capaz de libertar o esteróide específico no tracto intestinal, sangue e/ou tecido corporal. A actividade biológica desejada é uma função da porção esteróide. As derivações de uma porção poderão servir uma variedade de funções benéficas, incluindo estabilizar o esteróide, aromatizar ou disfarçar o aroma natural do esteróide, ou afectar a taxa de absorção do esteróide Síntese (5) A5-androsteno-3p-acetoxi-7, 16, 17-triona A A5-androsteno-3p-acetoxi-7, 16, 17-triona (5) pode ser sintetizada a partir de acetato de DHEA disponível no mercado, convertendo sequencialmente: 3p-acetoxi-A5-androsten-17-ona (acetato de DHEA) - em - 3β -acetoxi-A5-androsteno-7, 17-diona (51) 4 em Γ u éter 3p-acetoxi-17- éter 3p-trimetilsililacetoxi hidroxi-A5, Δΐβ-androstadien- -17-hidroxi-A5,Δ16- 7-ona-trimetilsilílico androstadien-7-ona (52a) trimetilsilílico 30% (52b) 70% em - 3p-acetoxi-16- 3p-trimetilsililacetoxi- fenilseleno-A5- 16-fenilseleno-A5- androsteno-7,17-diona androsteno-7,17-diona (53a) (53b) em - 3p-acetoxi-16-fenilseleno-A5-androsteno-7-,17-diona (53a) em - 3p-acetoxi-A5-androsteno- 3β,acetoxi-A5-androsteno- 16-fenilseleno-7,17- 16-fenilseleno-16-m- diona (54) clorobenzoato-7,17-diona (55) 5 em

3p-acetoxi-16-m-clorobenzoato-A5,Δ15 androstadieno-7,17-diona (56) 3β,16-diacetoxi-A5,Δ15-androstadieno-7,17-diona (57) em 3p-acetoxi-A5-androsteno-7,16,17-triona (5) A 3p-acetoxi-A5-androsten-7, 17-diona (51) pode ser sintetizado a partir de 3p-acetoxi-A5-androsten-17-ona (acetato de DHEA) , por reacção de acetato de DHEA com o agente oxidante Cr03, de acordo com o processo descrito em Fieser, L.F. Jour. Am. Chem Soc., vol. 75, pp 4386-4394 (1953).

Pode sintetizar-se uma mistura de 70% de 3β-(trimetilsilil)acetoxi-17-hidroxi-A5, A16-androstadien-7-ona trimetilsilil éter androstadien-7-ona trimetilsililico (52a) a partir de 3β-acetoxi-Δ5-androsten-7,17-diona (51), por reacção de (51) com litio diisopropil amida na presença de trimetilclorosilano num solvente adequado, como o tetrahidrofurano, a -78 °C.

Pode-se sintetizar ο 3β-3θβίοχϊ-16-£θηϊΐ3θ1βηο-Δ5-androsten-7,17-diona (53a) e 3β-(trimetilsilil)acetoxi-16-fenilseleno-A5androsteno-7,17-diona (53b) a partir de éter 3β-acetoxi-17-hidroxi-A5, A16-androstadien-7-ona trimetilsililico (52a) e éter 3β-(trimetilsilil)acetoxi-17-hidroxi-A5, Δ16-androstadien-7-ona trimetilsililico (52b), respectivamente por 6

reacção da mistura de (52a) e (52b) com cloreto de benzenoselenilo, na presença de piridina e um solvente adequado, como o tetrahidrofurano, a -78 °C. 0 acetato sililado de carbono ligado ao átomo de carbono C3 na fracção (53b) da mistura (53) pode ser des-sililado de forma a converter o (53b) em (53a) na mistura (53), por tratamento da mistura (53) com fluoreto de tetra n-butilamónio num sistema solvente adequado, como éter-diclorometano-tetrahidrofurano-água. A 3β,16-diacetoxi-A5-androsteno-16-fenilseleno-7,17-diona (54) pode ser sintetizada a partir de 3p-acetoxi-16-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (53a), submetendo (53a) à reacção de seleno-Pummerer, descrita em Ikota, N.; Ganem, B. Jour. Org. Chem., vol. 43, pp. 1607-1608 (1978). Em resumo, a 3p-acetoxi-16-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (53a) é sequencialmente reagido com ácido m-cloroperbenzóico e anidrido acético num solvente adequado. A 3p-acetoxi-A5-androsteno-16-fenilseleno-16-m-clorobenzoato-7,17-diona (55) é também sintetizado durante esta reacção. A 3β,16-diacetoxi-A5,A15-androstadieno-7,17-diona (57) pode ser sintetizado a partir de 3β,16-diacetoxi-A5-androsteno-16-fenilseleno-7,17-diona (55), por desidrogenação oxidativa. A 3p-acetoxi-A5-androsteno-16-fenilseleno-16-m-clorobenzoato-7,17-diona (54) presente com (55), produz 3p-acetoxi-16-m-clorobenzoato-A5,A15-androstadieno-7,17-diona (56), que pode ser separado por cromatografia, se desejado. 7

A 3p-acetoxi-A5-androsteno-7,16,17-triona (5) pode ser sintetizada a partir de 3p-acetoxi-A5,A15-androstadieno-16-m-clorobenzoato-7,17-diona (56) e/ou 3β,16-diacetoxi-A5,Δ15-androstadieno-7,17-diona (57), por tratamento com trietilamina em metanol. (6) A5-androsteno-3p-16a-dihidroxi-7,17-diona (7-ceto-l6a-hidroxi-DHEA) A 3p-16a-dihidroxi-A5-androsteno-7,17-diona pode ser sintetizada pela sequência seguinte, a partir de propionato de DHEA. 0 propionato de DHEA pode ser produzido por esterificação simples de DHEA. 3p-propionoxi-A5-androsteno-17-ona (propionato de DHEA) - em - 3p-propionoxi-A5-androsteno-7,17-diona (61) - em - éter 3p-propionoxi-17-hidroxi-A5,A16-androstadieno -7-ona trimetilsilílico (62) - em- 3p-propionoxi-16a-hidroxi-A5-androsteno-7, 17-diona (63) 8 em 3β,16a-dihidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (6) A 3p-propionoxi-A5-androsteno-7,17-diona (61) (RMN apresentado na tabela 8) pode ser sintetizada a partir de 3β-propionoxi-A5-androsteno-17-ona (propionato de DHEA) por reacção de propionato de DHEA com o agente oxidante CrC>3, de acordo com o processo descrito em Fieser, L.F. Jour Am. Chem. Soc. , vol. 75, pp 4386-4394 (1953). 0 éter 3β-propionoxi-17-hidroxi-Δ5,A16-androstadien-7-ona trimetilsilílico (62) pode ser sintetizado a partir de 3β-propionoxi-A5-androsteno-7,17-diona (61) por reacção de (61) com litio diisopropil amida, na presença de trimetilclorosilano num solvente adequado, como tetrahidrofurano, a -78 °C. A 3β-propionoxi-16α-hidroxi-Δ5-androsteno-7,17-diona (63) pode ser sintetizada a partir de éter 3β-propionoxi-17-hidroxi-Δ5,Δ16—androstadien-7-ona trimetilsililico (62) por oxidação com ácido m-cloroperbenzóico em tetrahidrofurano, seguido de tratamento com uma solução de HC1 IN. 0 produto final desejado, 3β,16a-dihidroxi-A5-androsteno-1,17-diona (6) pode então ser sintetizado a partir de 3β-propionoxi-16a-hidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (63), por tratamento com ácido sulfúrico em metanol. 9

(7) A5-androsteno-3p-propionoxi,16p-acetoxi-7,17-diona (propionato de 7-ceto-16fi-acetoxi DHEA) A A5-androsteno-3P~propionoxi,16P-acetoxi-7,17-diona (7) pode ser sintetizada a partir de A5-androsteno-3P-propionoxi, 16<x-hidroxi-7,17-diona (63) produzido de acordo com a sequência de reacções apresentada acima. A A5-androsteno-3P-propionoxi,16a-hidroxi-7,17-diona é tratada de acordo com as condições de Mitsunobu, apresentadas em Hughes D.L.; Reamer, R.A.; Bergan, J.J.; Grabowski, E.J.J. Jour Am. Chem. Soc., vol. 110, pp 6487-6491, para inverter a configuração e acetilar o grupo 16-hidroxi. (8) A5-androsteno-3P~7a,17p-triol-16-ona A A5-androsteno-3p-7a,17p-triol-16-ona (8) pode ser sintetizada a partir de diacetato de A5-androsteno-3p-16a-dihidroxi-17-ona (81) . O material de partida, diacetato de Δ5-androsteno-3p-16a-dihidroxi-17-ona (81) pode ser sintetizado de acordo com o processo apresentado em Numazawa, M. e Osawa, Y. Steroids, vol. 32, p 519 (1978). A A5-androsteno-3p-16a-diacetoxi-7-bromo-17-ona (82) pode ser sintetizada a partir de A5-androsteno-3p-16a-diacetoxi-17-ona (81) , por reacção de A5-androsteno-3p-16a-diacetoxi-17-ona (81) com um agente de bromação, tal como dibromantina (1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoina). A A5-androsteno-3P-16a- diacetoxi-7-bromo-17-ona (82) é instável e deverá ser utilizada imediatamente no passo seguinte do processo. 10 V Γ

U A A5-androsteno-3p-16a-diacetoxi-7-bromo-17-ona (82) contém uma mistura isomérica de isómeros 7a-bromo e 7p-bromo. A mistura isomérica pode ser equilibrada com 7a-bromo, de acordo com o método descrito para equilibrar um derivado de colesterol em Confalone, P.N., Kulesha, I.D. e Uskokovic, M.R. Jour. Orq. Chem. , vol. 46, pp 1030-1032 (1981). Em resumo, a mistura isomérica é contactada com LiBr anidro, frio e protegida da luz, para converter o produto de uma mistura isomérica de la e 7β, predominantemente em la. A A5-androsteno-3P,16a-diacetoxi-7a-hidroxi-17-ona (83) pode ser sintetizada a partir A5-androsteno-3p, 16a-diacetoxi-7a-bromo-17-ona (82) por reacção da A5-androsteno-3p,16a-diacetoxi-7a-bromo-17-ona (82), com uma mistura de ácido acético glacial e acetato de prata em pó, à temperatura ambiente, num solvente adequado, tal como uma mistura de cloreto de metileno e acetona. Também se produz nesta reacção um rendimento de 20% em A5-androsteno-3p, 7a,16a-triacetoxi-17-ona. A A5-androsteno-3p-7a,17p-triol-16-ona (8) pode ser sintetizada a partir de A5-androsteno-3P,16a-diacetoxi-7a-hidroxi-17-ona (83) dissolvendo a A5-androsteno-3P,16a-diacetoxi-7a-hidroxi-17-ona (83) numa solução de metanol de K2CO3, à temperatura ambiente e agitando a solução durante duas horas. A solução alcalina enoliza o 17-ceto para formar uma combinação 17-hidroxi-16-ona mais estável. A A5-androsteno-3p-7a,17-trihidroxi-16-ona (8) pode então ser isolada por filtração para remover o sal insolúvel, evaporando o metanol sob vácuo, purificando e removendo por extracção o composto 11 p U, ^ por cromatografia. 0 esteróide cristaliza a partir de solução quente de metanol/éter, por arrefecimento. (9) A5-androsteno-3p-17p~diol-7,16-diona A A5-androsteno-3p-17p-diol-7,16-diona (9) pode ser sintetizada a partir de 3P~propionoxi-16a-hidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (63) por tratamento de 3p-propionoxi-16a-hidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (63) com uma solução aquosa de carbonato de sódio a 5% em metanol. (10) A5-androsteno-3p,16a,17p-triol-7-ona A A5-androsteno-3p,16a,17p-triol-7-ona (10) pode ser sintetizada a partir de 3p,16a,17p-triacetoxi-A5-androsteno, por reacção do 3P,16a,17p-triacetoxi-A5-androsteno com o agente oxidante Cr03, de acordo com o processo descrito em Fieser, L.F., Jour Am. Chem. Soc., vol 75, pp 4386-4394 (1953) com hidrólise subsequente dos grupos acetilo.

Sem pretender estar limitado, pensa-se que os esteróides identificados acima podem ser modificados sem perda de actividade biológica, esterifiçando um ou mais dos grupos hidroxilo com qualquer, de uma variedade de ácidos orgânicos e ácidos inorgânicos, tais como ácido sulfúrico ou fosfórico.

Tratamento

Pode-se tratar um indivíduo com os esteróides especificados aqui, por qualquer das práticas vulgarmente aceites, incluindo oralmente ou por injecção. Apesar de haver 12 U, ^^ muitos factores que afectam a dosagem necessária para se obter a resposta biológica desejada, o tratamento a uma dosagem de cerca de 0,1 a 2 gramas, de preferência cerca de 0,5 a 2 gramas de esteróide, por 100 quilogramas de peso corporal, por dia, deverá geralmente ser eficaz para promover o controlo de peso. Uma dosagem inferior a 0,1 gramas por 100 quilogramas de peso corporal, por dia, é geralmente ineficaz para prevenir o ganho de peso, enquanto que uma dose superior a cerca de 2 gramas por 100 quilogramas de peso corporal, por dia, aumenta o custo do tratamento, sem proporcionar um beneficio correspondente na performance. A dosagem óptima a ser administrada a um indivíduo é específica de cada caso, dado que a dosagem óptima depende de vários factores, incluindo a composição corporal efectiva (percentagem de gordura), o efeito desejado (manutenção do ganho de peso versus perda de peso), hábitos alimentares do indivíduo (absorção calórica diária) e factores semelhantes. Tal como seria de esperar, a dosagem proporcionada a um indivíduo para fins de promoção do ganho de peso será maior, do que o necessário para promover uma manutenção de peso, assumindo uma absorção calórica idêntica em cada programa.

Sem pretender estar limitado a estes factos, pensa-se que os esteróides aqui especificados são intermediários metabólicos ao longo da via de conversão do DHEA num último metabolito(s), que é de facto responsável por mediar uma produção aumentada de enzimas termogénicas, tais como a glicerol-3-fosfato desidrogenase e enzimas málicas.

Um indivíduo pode ser tratado com um dos esteróides aqui especificados, praticamente com qualquer programa. Pensa-se que os esteróides aqui especificados são eficazes em promover 13 t o controlo de peso, enquanto o esteróide estiver ele próprio presente, activo, no corpo, bem como enquanto a concentração aumentada da(s) enzima termogénica induzida permanecer elevada. A esperança de vida in vivo dos esteróides e da(s) enzima termogénica aqui induzida não é ainda totalmente conhecida. No entanto, pensa-se que os próprios esteróides não são armazenados no corpo e são removidos e/ou desactivados dentro de dias após a administração. Assim, para uma eficácia óptima, o indivíduo em tratamento deverá ser tratado dia sim dia não ou a cada dois dias. Por motivos de conveniência, o indivíduo em tratamento pode ser tratado menos frequentemente, tal como uma vez por semana, quando é aceitável menos do que a performance máxima.

Tal como se pode ver pelos factores que afectam a dosagem e a frequência de dose, cada indivíduo particular deve ser observado cuidadosa e frequentemente observado e a dosagem e/ou frequência de dose deverão ser alteradas de acordo com a situação particular.

Exemplo VII (esteróide 5) Síntese de A5-androsteno-3P-acetoxi-7,16,17-triona (Passo 1) Num frasco de 50 ml, equipado com um agitador magnético e um banho de água, colocaram-se 6,5 ml de anidrido acético, 23 ml de ácido acético, 1,7 gramas de acetato de sódio e 2 gramas de acetato de DHEA, para formar uma primeira mistura. Adicionaram-se à primeira mistura 2 gramas de trióxido de crómio durante um período de trinta minutos, para 14 formar uma segundo mistura. A primeira mistura foi mantida a uma temperatura constante de 56-58 °C e foi continuamente agitada durante a adição de trióxido de crómio. (Passo 2) A segundo mistura foi mantida a 56-58 °C e continuamente agitada durante mais uma hora, após o gue a segunda mistura foi arrefecida e vazada lentamente, sob agitação continua, em 600 ml de água gelada, para formar um precipitado. 0 precipitado floculento foi recolhido num funil de vidro sinterizado e lavado com água até não se observar mais a cor verde. Após secagem em vácuo sobre P2O5, o produto foi dissolvido em metanol e recristalizado para se obter 3β-acetoxi-A5-androsteno-7,17-diona (51) puro, com um ponto de fusão de 184-185 °C. (Passo 3) Num segundo frasco de fundo redondo de 50 ml, equipado com um agitador magnético e mantido num banho de gelo seco, colocou-se 1,00 grama (1,90 mmoles) de 3P~acetoxi-A5-androsteno-7,17-diona (51) e 20 ml de tetrahidrofurano limpo, para formar uma terceira mistura. A terceira mistura foi colocada sob uma atmosfera de N2. Numa terceira mistura adicionaram-se 1,07 ml (8,43 mmoles) de trimetilclorosilano para formar uma quarta mistura. A quarta mistura foi mantida sob a atmosfera de azoto e arrefecida a -78 °C. (Passo 4) Num terceiro frasco de fundo redondo de 25 ml equipado com um agitador magnético e mantido num banho de gelo seco, colocaram-se 1,07 ml (7,66 mmoles) de diisopropilamina, 3,60 ml de uma solução 1,94M de n-butillitio em hexano (6,96 mmoles) e 4 ml de tetrahidrofurano, para formar litio diisopropilamida. A solução (solução LDA) foi preparada sob atmosfera de N2, a -78 °C. A solução de LDA foi aquecida 15 Γ u t ligeiramente para dissolver quaisquer sólidos e adicionada em seguida, sob atmosfera de N2, à quarta mistura, através de uma cânula, para formar a quinta mistura. (Passo 5) A quinta mistura foi removida do banho de gelo-seco e deixada aquecer á temperatura ambiente durante 15 minutos, altura em que se adicionaram 1,25 ml de trietilamina à quinta mistura, para formar a sexta mistura. Num funil separador, colocaram-se 40 ml de hexano, 40 ml de solução aquosa saturada de NaHC03, e a sexta mistura. A fase orgânica foi extraida com hexano, lavada com uma solução aquosa saturada de NaCl, seca sobre Na2S04 e o solvente removido para se obter 1,42 gramas de um sólido orgânico seco. O sólido orgânico foi identificado por RMN (CDCI3) como uma mistura de aproximadamente 70:30 de éter 3β-(trimetilsilil)acetoxi-17-hidroxi-A5, A16-androstadien-7-ona trimetilsililico (52b) e éter 3p-acetoxi-17-hidroxi-A5,Al6-androstadieno-7-ona trimetilsililico (52a). Os resultados da análise de RMN são apresentados nas tabelas um e dois. (Passo 6) Num quarto frasco de fundo redondo de 100 ml, equipado com um agitador magnético e mantido num banho de gelo seco, colocaram-se 2,85 mmoles do sólido orgânico obtido no passo 5, 20 ml de tetrahidrofurano limpo e 0,320 ml (4,00 mmole) de piridina limpa, para formar uma sétima mistura. A sétima mistura foi arrefecida a -78 °C e colocada sob atmosfera de N2. Adicionou-se à sétima mistura 0,710 gramas (3,71 mmoles) de cloreto de benzenoselenilo em 4 ml de tetrahidrifurano, para formar uma oitava mistura. (Passo 7) Num funil separador, colocaram-se um sistema co-solvente de uma solução aquosa de HC1 0,5N aquoso e 16 p Lc ^ diclorometano. No sistema de co-solvente adicionou-se a oitava mistura, para extrair a fase orgânica. A segunda fase orgânica foi extraída com diclorometano, lavada sequencialmente com água e solução aquosa saturada de NaHC03, seca sobre Na2S04 e o solvente foi removido para se obter 1,72 gramas de um óleo orgânico. 0 óleo orgânico foi separado por cromatografia (100 gramas se sílica eluída com acetato de hexano-etilo a 90:10 a 50:50, com fracções de 50 ml) em 1,44 gramas da primeira e segunda fracções orgânicas (fracções 14-17), difenildiselenide (fracções 9-11) e 3p-acetoxi-A5-androsten-7, 17-diona (51) não reagida (fracções 18-19). As primeira e segunda fracções foram identificadas por RMN como 3p-acetoxi-16*-fenilseleno-A5-androsten-7,17-diona (53a) e 3β-(trimetilsilil)acetoxi-16-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (53b), respectivamente. Os resultados das análises de RMN são apresentados nas tabelas três e quatro. (Passo 8) Num quarto frasco de fundo redondo de 100 ml equipado com um agitador magnético, colocaram-se 25 ml de éter, 5 ml de diclorometano e 1,19 mmoles da segunda fracção orgânica obtida no passo 7 (53b), para formar uma nona mistura. Adicionaram-se à nona mistura, 8 ml de uma solução aquosa a 105 de fluoreto de potássio e 3 ml de uma solução de fluoreto de tetra-n-butilamónio 1M em tetrahidrofurano, para formar uma décima mistura. A décima mistura foi mantida a 25 °C e agitada continuamente durante duas horas após o que se vazou a décima mistura num sistema solvente éter-hexano-água, para extrair a fase orgânica. A fase orgânica extraída foi lavada duas vezes com água, uma vez com uma solução aquosa saturada de Nacl, seca sobre Na2SC>4 e o solvente foi removido para se obter 0,594 gramas de 3p-acetoxi-16-fenilseleno-A5-androsten-7,17-diona (53a). 17 ^ (Passo 9) Num sexto frasco de fundo redondo de 100 ml, equipado com um agitador magnético, colocaram-se 25 ml de diclorometano e 1,10 mmoles de 3p-acetoxi-16-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (53a), para formar uma décima primeira mistura. A décima primeira mistura foi arrefecida a 0 °C e mantida sob agitação continua. Adicionaram-se à décima primeira mistura 0,296 gramas (1,2 mmoles) de ácido m-cloroperbenzóico (70%) seguido, cinco minutos mais tarde, de 0,40 ml de dimetilsulfureto para formar uma décima terceira mistura. A décima terceira mistura foi lavada 3 vezes com 50 ml de uma solução aquosa, fria de NaHCC>3 e filtrada através de Na2S04. (Passo 10) Num sétimo frasco de fundo redondo, de 250 ml, equipado com um agitador magnético, colocaram-se 1,2 ml de anidrido acético, 1,2 ml de piridina e a fase liquida da décima terceira mistura para formar uma décima quarta mistura. A décima quarta mistura foi agitada continuamente à temperatura ambiente, durante uma hora, após o que se adicionaram 60 ml de uma solução aquosa saturada de NaHC03 para formar uma décima quinta mistura, com camadas orgânica e inorgânica separadas. A décima quinta mistura foi mantida sob condições de agitação continua, até cessar a borbulhagem. A camada orgânica foi separada da camada inorgânica por remoção da camada orgânica num funil separador. A camada orgânica separada foi lavada com uma solução aquosa, saturada, de NaHC03, seca sobre Na2S04 e o solvente foi removido para se obter 0,713 gramas de um sólido orgânico seco. O sólido orgânico foi identificado por RMN (CDCI3) como uma mistura 90:10 de 3β,16-diacetoxi-16-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (55) e 3p-acetoxi-A5-androsteno-16-fenilseleno-16-m-clorobenzoato-7,17-diona (54). Os resultados de uma análise de 18 (j- u, ^ RMN da fracção (55) na mistura são apresentados na tabela cinco. (Passo 11) Num frasco de fundo redondo, equipado com um agitador magnético colocaram-se 25 ml de tetracloreto de carbono e 1,10 mmoles da mistura 90:10 de 3β,16-diacetoxi-16-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (55) e 3p-acetoxi-A5-androsteno-16-fenilseleno-16-m-clorobenzoato-7,17-diona (54) , para formar uma décima sexta mistura. À décima sexta mistura adicionaram-se 0,12 ml de piridina, 10 mg de ácido benzenoseleninico e 19 mg de difenilseleneto, para formar uma décima sétima mistura, a décima sétima mistura foi mantida sob agitação vigorosa e adicionaram-se 3,4 ml de uma solução aquosa de H2O2, para formar uma décima oitava mistura. A décima oitava mistura foi agitada continuamente durante 45 minutos, após o que esta foi lavada duas vezes com uma solução aquosa, saturada, de NaHCC>3 e seca sob vácuo para se obter 0, 390 gramas de um sólido orgânico. 0 sólido orgânico foi separado por cromatografia (50 gramas de sílica gel, eluidos com 50% de hexano-acetato de etilo com fracções de 25 ml) para se obter 0,236 gramas de uma fracção orgânica (fracções 9-10). A fracção orgânica foi identificada por RMN como 3β,16-diacetoxi-Δ5,A15--androstadieno-7,17-diona (57) puro. Os resultados da análise de RMN são apresentados na tabela seis. (Passo 12) Num frasco de fundo redondo equipado com um agitador magnético, colocaram-se 1,03 mmoles de 3β,16-diacetoxi-A5,A15-androstadieno-7,17-diona (57) e 15 ml de metanol para formar uma décima nona mistura. Na décima nona mistura colocaram-se 0,500 ml de trietilamina para formar uma vigésima mistura. A vigésima mistura foi colocada sob uma atmosfera de N2 e mantida sob agitação constante durante 16 19

V

horas. A vigésima mistura foi então extraída entre H2O e CH2CI2. A camada orgânica foi lavada duas vezes com solução aquosa saturada de NaHC03 e em seguida seca e evaporada sob pressão reduzida, para se obter 0,281 gramas de um sólido orgânico amarelo. 0 sólido orgânico foi identificado por RMN como uma mistura de compostos orgânicos incluindo cerca de 65% de 3p-acetoxi-A5-androsteno-7,16,17-triona (5). Os resultados da análise de RMN são apresentados na tabela sete.

Exemplo VIII (esteróide 6) Síntese de 3β, 16a-dihidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (Passo 1) Num frasco de fundo redondo, equipado com um agitador magnético, colocaram-se 2,80 mmoles de éter 3β-propionoxi-17-hidroxi-A5,A16-androstadien-7-ona trimetilsilílico (62), sintetizados de acordo com o processo descrito no exemplo VII e identificados por RMN (veja-se tabela nove) e 40 ml de tetrahidrofurano, para formar uma primeira mistura que foi arrefecida a 0 °C num banho de gelo. Na primeira mistura colocaram-se 2,95 mmoles de ácido m-cloroperbenzóico (80-90%) para formar uma segunda mistura. A segunda mistura foi aquecida a 25 °C e mantida sob agitação constante durante 10 min. (Passo 2) A segunda mistura foi continuamente agitada e adicionaram-se 40 ml de HC1 IN aquoso para formar uma terceira mistura que foi mantida sob agitação constante durante 20 min. A terceira mistura foi particionada entre éter e água e separada por decantação da fase éter da fase aquosa. A fase 20 éter foi lavada com uma solução aquosa saturada de NaHC03, em seguida uma solução aquosa saturada de NaHCC>3, em seguida uma solução aquosa saturada de NaCl e seca sob vácuo, para se obter um sólido orgânico. 0 sólido orgânico foi purificado por cromatografia (140 mg de sílica eluída com 60:40 a 70:30 de acetato de etilo-hexano com fracções de 25 ml) para se obter 0,586 mg de um primeiro composto orgânico. 0 primeiro composto orgânico foi identificado por RMN como 3p-propionoxi-16a-hidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (63). Os resultados da análise de RMN são apresentados na tabela dez. (Passo 3) Num segundo frasco de fundo redondo equipado com um agitador magnético colocaram-se 0,155 mmoles de 3β-propionoxi-16a-hidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (63) dissolvido em 6 ml de metanol, para formar uma terceira mistura. A esta terceira mistura adicionaram-se 1,5 ml de uma solução aquosa de ácido sulfúrico 6N para formar uma quarta mistura que foi mantida a 25 °C durante 18 horas. A quarta mistura foi então particionada entre acetato de etilo e água e separada por decantação do acetato de etilo da fase aquosa. 0 acetato de etilo foi evaporado para se obter um produto orgânico, que foi purificado por cromatografia (placa preparativa de sílica eluída três vezes com 60% de acetato de etilo-hexano) para se obter 18 mg de um composto orgânico, que foi então dissolvido em e cristalizado a partir de metanol para se obter 6 mg de material substancialmente puro com um ponto de fusão de 235-239 °C. 0 composto orgânico foi identificado por RMN como 3p-16a-dihidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (6). Os resultados da análise de RMN são apresentados na tabela onze. 21

V

u

Exemplo IX (esteróide 7)

Síntese Δ5-βηάΓθ3ίβηο-3β-ρΓορίοηοχί-16β-3θ6ίοχί-7,17-diona (Passo 1) Num frasco de fundo redondo, equipado com um agitador magnético colocaram-se 1,52 mmoles de 3β-ρ^ρΐοηοχϊ-16a-hidroxi-A5-androsteno-7,17-diona, 3,0 mmoles de trifenilfosfina, 6,0 mmoles de ácido acético em 11 ml de tetrahidrofurano. A primeira mistura foi colocada sob N2 e arrefecida a 0 °C num banho de gelo. À primeira mistura adicionaram-se 3,0 mmoles de dietil azodicarboxilato, gota a gota, para formar uma segunda mistura. A segunda mistura foi aquecida a 25 °C e mantida a esta temperatura durante 18 horas. Foi em seguida particionada entre éter-hexano e água. A camada de éter-hexano foi lavada com água, água, solução aquosa saturada de NaHC03, solução aquosa saturada de Nacl, seca sobre Na2S04 e evaporada para se obter um sólido orgânico que foi purificado por cromatografia em 130 g de sílica eluída com acetato de etilo:hexano (20:80 a 50:50) com fracções de 25 ml e cristalizado a partir de diclorometanohexano para se obter 0,267 g de um composto orgânico. O composto orgânico foi identificado por RMN como 3β-ρΓθρϊοηοχϊ-16β-3θθίοχι-Δ5- androsteno-7,17-diona contendo 20% do epímero 16a. Os resultados da análise de RMN são apresentados na tabela doze. (Passo 2) A conversão da Δ5-androsteno-3β,16β-dihidroxi-7,17-diona pode ser realizada como descrito no exemplo VIII. 22

V

L-Cj t

Exemplo X (esteróide 8) Síntese A5-androsteno-3P,7a,17P-triol-16-ona (Passo 1) Num frasco de fundo redondo de 100 ml colocaram-se 3 gramas (7,7 mmoles) de 3β,Ιβα-diacetoxi DHEA (preparado de acordo com o processo descrito em Numazawa, M. e Osawa, Y. Steroids, vol. 32, p 519 (1978)) e 3,5 gramas de NaHC03 em 50 ml de hexano, para formar uma primeira mistura. A primeira mistura foi agitada e aquecida até ao refluxo sob atmosfera de N2. À primeira mistura adicionaram-se 1,6 gramas de dibromantina (1,3-dibromo-5,5-dimetilhidantoina) para formar uma segunda mistura. (Passo 1) A segunda mistura foi agitada, levada ao refluxo durante 30 minutos e em seguida arrefecida à temperatura ambiente. A segunda mistura levada ao refluxo foi filtrada para remover os sólidos e lavada com CH2C12. O filtrado resultante foi concentrado quase até à secura, sob vácuo, utilizando um banho de água mantido abaixo de 35 °C. (Passo 3) O filtrado seco foi re-solubilizado em 21 ml de tolueno, num frasco rolhado, de 1 litro, equipado com um agitador magnético e colocado num banho de gelo. Ao filtrado re-solubilizado adicionaram-se 2,1 gramas de LiBr anidro em 80 ml de acetona arrefecida em gelo, para formar uma terceira mistura. A terceira mistura foi protegida da luz e agitada continuamente durante três horas a 0 °C. A mistura resultante, contendo predominantemente 7a-bromo, foi utilizada imediatamente no passo quatro. 23 Γ u (Passo 4) Num frasco de 500 ml, equipado com um agitador magnético, colocaram-se 80 ml de diclorometano, 21 ml de ácido acético glacial e 6,7 gramas de acetato de prata para formar uma primeira suspensão. A primeira suspensão foi agitada continuamente durante 20 minutos à temperatura ambiente. A primeira suspensão agitada foi adicionada sob agitação constante, à terceira mistura aquecida, para formar uma segunda suspensão. A segunda suspensão foi constantemente agitada durante 30 minutos à temperatura ambiente, após o que a suspensão foi filtrada através de um funil de vidro sinterizado, para separar um resíduo sólido. O filtrado foi concentrado para se obter um resíduo oleoso. (Passo 5) Ao resíduo oleoso adicionaram-se 300 ml de H2O e NaHC03 suficiente para se obter uma quarta mistura com um pH neutro. A quarta mistura foi extraída cinco vezes com 150 ml de acetato de etilo, as camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas sobre MgS04 e concentradas até à secura. (Passo 6) A fase orgânica bruta foi separada por cromatografia (sílica gel eluída com acetato de etilo: pet éter a 1:3, 1:2 e 1:1) para se obter 700 mg (20%) de uma primeira fracção orgânica e 1,5 gramas (48%) de uma segunda fracção orgânica. Após cristalização a partir de éter dietílico, as primeira (pf 170-172 °C) e segunda (pf 155-158 °C) fracções orgânicas foram identificadas por RMN como Δ5-androsteno-3p,7a,16p-triacetoxi-17-ona e a A5-androsteno-3β,16P~diacetoxi-7a-ol-17-ona (83) correspondente, respectivamente. Os resultados da análise de RMN destes dois compostos são apresentados nas tabelas treze e catorze. 24

Γ \l

U (Passo 7) Num frasco equipado com um agitador magnético adicionaram-se 400 mg (1 mmol) de A5-androsteno-3P, 16β-diacetoxi-7a-hidroxi-17-ona (83) e 342 mg de K2CO3 em 25 ml de metanol, à temperatura ambiente, para formar uma quinta mistura. A quinta mistura foi agitada durante duas horas. A solução alcalina enolizou o 17-ceto para formar o composto 17-hidroxi-16-ona mais estável. Isolou-se a A5-androsteno-3β,7α,17-trihidroxi-16-ona (8) a partir da quinta mistura, por filtração, para remover o sal insolúvel, evaporando o metanol sob vácuo, purificando o resíduo orgânico sobre sílica gel e cristalizando o composto orgânico a partir de metanol-solução de éter etílico. A fracção orgânica cristalizada (180 mg, 56%, pf: > 230 °C) foi identificada por RMN como a A5-androsteno-3β,7α,17-trihidroxi-16-ona (8). Os resultados da análise de RMN são apresentados na tabela quinze.

Exemplo XI (esteróide 9) Síntese Δ5-androsteno-3β, 17β^ϊο1-7,16-diona (Passo 1) Num frasco de fundo redondo, equipado com um agitador magnético adicionaram-se 1,05 gramas (2,80 mmoles) de Δ5-androsteno-3β-propionoxi-16α-hidroxi-7,17-diona (63), 80 ml de metanol e 40 ml de uma solução aquosa de Na2C03 a 5%, agitando ao mesmo tempo, rapidamente, para formar uma primeira mistura. A primeira mistura foi agitada durante 42 horas após o que o metanol foi evaporado e se adicionou uma combinação de 100 ml de água e 2 ml de ácido acético, para formar uma segunda mistura. Filtrou-se um material sólido a partir da 25 segunda mistura, re-solubilizou-se em metanol e em seguida cristalizou-se para se obter 0,324 g de um composto orgânico.

Uma pequena amostra de composto orgânico foi mais uma vez recristalizada a partir de metanol, para produzir uma amostra purificada, com um ponto de fusão de 215-218 °C. 0 primeiro composto orgânico foi identificado por RMN como A5-androsteno 3p-17p-diol-7,16-diona. Os resultados da análise de RMN são apresentados na tabela dezasseis.

Tabela um

Resultados de RMN éter 3p-acetoxi-17-hidroxi-A5,Δ16 -androstadieno-7-ona trimetilsililico (52a) Condições Pico Significado (δ) CDC13 270 MHz 0.21 s, 0-SiMe3 0.87 s, 18-CH3 1.25 s, 19-CH3 2.07 s,CH3COO 2.75 ddd, J=14,6,3, Hz 15ot-H 4.54 dd, J=3,1.5 Hz 16-H 4.73 tt, J=ll,5 Hz 3a-H 5.76 d, J=2 Hz

6-H 26

II

Tabela dois

Resultados de RMN éter 3β-(trimetilsilil)acetoxi-17-hidroxi-A5,A16-androstadien-7-ona trimetilsilílico (52b)

Condições Pico Significado (δ) CDCla 270 MHz 0.13 s, C-SiMe3 0.21 s, 0-SiMe3 0.87 s, 18-CH3 1.25 s, I9-CH3 1.90 s, ch2-sí 2.75 ddd, J=14,6,3, H: 15a-H 4.54 dd, J=3,1.5 Hz 16-H 4.73 tt, J=ll,5 Hz 3a-H 5.76 d, J=2 Hz 6-H 27

V

Γ I \]

Tabela três

Resultados de RMN 3p-acetoxi-16a-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (53a)

Condições Pico Siqnifiçado (Ô) CDC13 270 MHz 0.92 s, 18-CH3 1.21 s, 19-CH3 2.07 S, CH3COO 3.00 ddd, J=14,5,0.5 15a-H 4.10 d, J=7.5 Hz JseH=5 HZ 16β-Η 4.73 tt, J=ll,5 Hz 3a-H 5.74 d, J=1.5 Hz 6-H 7.31 m, SePh 7.68 m, SePh 28

Tabela quatro

Resultados de RMN 3β-(trimetilsilil)acetoxi-16a-fenilseleno-A5-androsteno-7,17-diona (53a)

Condições Pico Siqnifiçado (δ) CDC13 200 MHz 0.13 s, C-SiMe3 0.91 s, 18-CH3 1.21 s, 19-CH3 1.91 s, CH2Si 3.00 ddd, J=14 5.5,0.5 Hz 15a-H 4.10 d, J=7.5 Hz JseH=5 Hz 16β-Η 4.73 tt, J=10,5 Hz 3a-H 5.74 d, J=1.5 Hz 6-H 7.32 m, SePh 7.68 m, SePh 29 y u

Tabela cinco

Resultados de RMN 3p-16-diacetoxi-A5-androsteno-16-fenilseleno-7,17-diona (55)

Condições Pico Significado (δ) CDC13 200 MHz 1.25 s, 18-CH3 1.35 s, I9-CH3 2.05 s, 3-CH3COO 2.09 S, I6-CH3COO 3.20 dd, J=14.5,6 Hz 15a-H 4.73 tt, J=ll,5.5 Hz 3a-H 5.74 d, J=1.5 Hz 6-H 7.35 m, SePh 7.68 m, SePh 30 [

Tabela seis

Resultados de RMN 3β,16-diacetoxi-A5,A15-androstadieno-7,17-diona (57)

Condições Pico Siqnifiçado (δ) CDC13 200 MHz 1.24 s, 18-CH3 1.30 s, I9-CH3 2.07 s, 3-CH3COO 2.25 s, 16-CH3COO 4.75 tt, J=ll,5 Hz 3a-H 5.83 d, J=1.5 Hz 6-H 7.82 broad s, 15-H 31

V

L-i

Tabela sete

Resultados de RMN -acetoxi-A5-androsteno-7,16,17-triona (5)

Condições (δ) CDC13 270 MHz

Pico Significado 1.07 s, 18-CH3 1.30 s, I9-CH3 2.05 s, 3-CH3COO 2.44 dd, J=18.5,8 Hz 15β-Η 2.61 m, 4-H 3.43 dd, J=18.5,6.5 Hz 15a-H 4.75 tt, J=ll, 5 Hz 3a-H 5.80 d, J=1.5 Hz 6-H 32 y u

Tabela oito

Resultados de RMN 3p-propionoxi-A5-androsteno-7,17-diona (61)

Condições Pico Significado (δ) CDC13 270 MHz 0.91 s, 18-CH3 1.16 t, J=7.5 Hz CH3CH2COO 1.25 s, I9-CH3 2.15 dt, J=19, 8.5 16a-H 2.33 q, J=7.5 Hz CH3CH2COO 2.83 dddd, J=15.5, 8.5, 4, 1 Hz 15<x-H 4.75 tt, J=ll,5 Hz 3a-H 5.77 d, J=2 Hz

6-H 33 t

Tabela nove

Resultados de RMN éter 3p-propionoxi-17-hidroxi-A5,A16-androstadien-7-ona trimetilsilílico (62)

Condições Pico Siqnifiçado (δ) CDC13 270 MHz 0.18 s, Si-Me3 0.85 s, 18-CH3 1.13 t, J=7.5 Hz CH3CH2COO 1.21 s, 19-CH3 2.14 ddd, J=14.8, 10.7, 1.5 Hz 15β-Η 2.31 q, J=7.5 Hz CH3CH2COO 2.71 ddd, J=14.8, 6.4, 2.1 Hz 15a-H 4.52 dd, J=3.1, 1.5 16-H 4.72 tdd, J=11.4, 5.3, 4.4 Hz 3a-H 5.71 d, J=l.6 Hz

6-H 34

Tabela dez

Resultados de RMN 3p-propionoxi-16a-hidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (63)

Condições Pico Siqnifiçado (δ) CDC13 270 MHz 1.00 s, 18-CH3 1.15 t, J=7.5 Hz CH3CH2COO 1.23 s, 19-CH3 2.33 q, J=7.5 Hz CH3CH2COO 2.75 ddd, J=13.5, 6.5, 1.5 Hz 15a-H 4.42 d, J=8 Hz 16β-Η 4.76 tt, J=10.5, 4.5 3a-H 5.77 d, J=1.5 Hz 6-H 35

V

U κ

Tabela onze

Resultados de RMN 3β, 16a-dihidroxi-A5-androsteno-7,17-diona (6)

Condições Pico Siqnifiçado (δ) CDCls 270 MHz 1.00 s, 18-CH3 1.23 s, 19-CH3 2.26 ddd, J=14.5, 10.5, 8.6 Hz 15β-Η 2.55 ddd, J=14.1, 5.0, 1.3 Hz 4a-H 2.76 ddd, J=14.6, 6.

1.4 Hz 15a-H

3.69 broad t, J= 3a-H 4.41 d, LO 00 II ^0 16β-Η 5.75 d, J=1.7 6-H 36

Tabela doze

Resultados de RMN 3p-propionoxi-16p-acetoxi-A5-androsteno-7,17-diona (7)

Condições Pico Significado (δ) CDC13 270 MHz 1.00 S, I8-CH3 1.15 t, J=7.5 Hz CH3CH2COO 1.25 s, I9-CH3 2.12 S, CH3COO 2.33 q, J=7.5 Hz CH3CH2COO 3.35 ddd, J=ll, 8.5 4 Hz 15a-H 4.74 tt, J=ll, 4 Hz 3a-H 5.77 d, J=1.5 Hz

6-H 37 (—1 r

Tabela treze

Resultados de RMN A5-androsteno-3p,16a-diacetoxi-7a-hidroxi-17-ona (83)

Condições Pico Siqnifiçado (δ) CDCls 300 MHz 0.98 s, CH3 1.02 s, CH3 2.02 s, 2xC02CH3 2.10 s, C02CH3 4.70 m, 1H, 3-H 5.02 dd, 1H, J=2 Hz 7-H 5.40 d, 1H, J=4 Hz 16-H 5.61 d, 1H, J=2 Hz

6-H 38

Tabela catorze

Resultados de RMN A5-androsteno-3P,16a-diacetoxi-7a-ol-17-ona

Condições (δ) CDC13 300 MHz

Pico Siqnifiçado 0.97 s, CH3 1.02 s, CH3 2.04 s, CC>2CH3 2.15 s, CO2CH3 3.92 m, 1H, 7-H 4.63 m, 1H, 3-H 5.44 d, 1-H, J=5 Hz 16-H 5.64 d, 1-H, J=4 Hz 6-H 39

i ' ^ Tabela quinze Resultados de RMN A5-androsteno-3p,7a,17-trihidroxi -16-ona (8) Condições Pico Siqnifiçado (δ) DMSO 300 MHz 0.61 s, CH3 0.92 s, CH3 3.32 m, 3-H 3.60 broad s 1H, 7-H 3.64 s, 1H, 16-H 4.26 d, 1H, J=2 Hz OH, D20 exch. 4.68 broad s, 1H OH, D20 exch. 5.30 broad s, 1H OH, D20 exch. 5.42 d, 1H, J=2 Hz 6-H 40

Tabela dezasseis

Resultados de RMN 3β,17p-dihidroxi-A5-androsteno-7,16-diona (9)

Condições Pico Significado (δ) CDC13 270 MHz 0.75 s, I8-CH3 1.26 s, 19-CH3 3.15 ddd, J=19,7, 1.5 Hz 15a-H 3.72 tt, J=10, 4.5 : 3a-H 3.78 broad s 17a-H 5.77 d, J=1.5 Hz

6-H

Lisboa, 29 de Agosto de 2001

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Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Esteróide seleccionado do grupo constituído por A5-androsteno-3p-acetoxi-7, 16, 17-triona A5-androsteno-3p, 16a-dihidroxi-7, 17-diona A5-androsteno-3p-propionoxi-16P~acetoxi-7, 17-diona A5-androsteno-3p, 7a, 17p~triol-16-ona A5-androsteno-3p, 17p-diol-7, 16-diona A5-androsteno-3p,16a, 17p-triol, 7-ona e seus derivados, em que um ou mais dos substituintes hidroxilo ou ceto é um grupo convertível nestes por hidrólise, para utilização como agentes de controlo de peso, especialmente para a prevenção do ganho de peso, redução de peso e tratamento da obesidade.
2. Esteróide de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser destinado para o tratamento de um humano. Lisboa, 29 de Agosto de 2001 O AGENTE OFICIAL DA PROPRIEDADE INDUSTRIAL

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