PT574195E - 5,8-di-hidrodiaza-antracenos antitumorais - Google Patents

Description

-1 - /^t CL—~~ DESCRIÇÃO "5,8-DI-HIDRODIAZA-ANTRACENOS ANTITUMORAIS"

Esta invenção está relacionada com compostos antitumorais e com as composições farmacêuticas que os contenham. A Diazaquinomicina A é uma 1,8-diaza-antraquinona natural que se encontra durante os estudos de rotina de metabolitos secundários de bactérias. [S. Omura, et al., J. Antibiotics, 35, 1425 (1982); e S. Omura et al., Tetrahedron Letters, 24, 3643 (1963)]. Apresenta boa actividade contra bactérias Gram positivas, devido à sua capacidade de inibir a sintetase do timidilato [S. Omura, et al., J. Antibiotics, 38,1016 (2985); e M. Murata et al., T.Miyasaka, H. Tanaka, S. Omura, J. Antibiotics, 38, 1025 (1985)]. No entanto a Diazaquinomicina A é inactiva como agente antitumoral.

Os derivados da Diazaquinomicina A como agentes antibacterianos e antitumorais são relatados em “Japanese Kokai 63/79830”, ver Chem Abs 110(1989) 134971.

Foi agora descoberto, e de acordo com esta invenção, que certas aza-antraceno-trionas, como daqui em diante definidas, possuem actividade antitumoral.

De acordo com a presente invenção, portanto, são fornecidas aza-antracenotrionas com a seguinte fórmula geral: -2- £---«-(«-1R3 0 R4

(i) em que: R1, R2, R4 e R5 são iguais ou são diferentes e cada um é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo inferior (Ci-C6); e R3 é um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo inferior, ou um grupo fenilo ou um grupo fenilo amino-substituído (de preferência um grupo fenilo dialquilamino-substituído), em que pelo menos um dos R1, R2, R3, R4 e R5 não é um átomo de hidrogénio. A invenção fornece também composições farmacêuticas compreendendo um composto com a formula (I) em associação com um veículo farmacêutico ou diluente. A invenção fornece ainda a utilização de um composto com a fórmula (I) no fabrico de uma composição antitumoral. Finalmente, a invenção fornece , um método para o tratamento de tumores utilizando compostos com a fórmula (I).

Os compostos desta invenção são 5,8-dihidro-lH-l,8-diaza-antra-ceno-2,9,10-trionas.

Os compostos com a fórmula (I) podem ser preparados pela adição de Diels-Alder de uma Ν,Ν-dimetil-hidrazona de um alquenal apropriadamente substituído, seguida de um tratamento posterior se necessário. -3-

Af.

Assim, os compostos podem ser preparados através de reaeçãu de uma dimetil-hidrazona com a fórmula: R3

com uma azanaftoquinona com a fórmula:

Os materiais iniciais são conhecidos ou podem ser preparados usando uma técnica bem estabelecida.

Assim, por exemplo o dienófilo, 4, metil-(lH)-quinolona-2,5,8-triona, pode ser obtido por acetoacetilação da 2,5-dimetoxianilina com 2,2,6-trimetil-4H-l,3-dioxm-4-ona, seguido pela ciclização de Knorr com ácido sulfurico, desmetilação com ácido bromídrico e oxidação com dicromato de potássio em meio acídico. O dienófilo inicial, 3-etil-lH-quinolona-2,5,8-triona, pode ser obtido por intermédio da formilação de Vilsmeier-Haack da 2,5-dimetoxi-butirilanilida, seguido por hidrólise acídica e desmetilação oxidativa com nitrato de amónio cérico. A reacção de Diels-Alder entre estes dienófílos e as N,N-dimetil- -4-

At C hidrazonas (Helv. Chim Acta, 71, 486) de 2-butenal, 2-metil-2-pentenal, 3-fenil-2-propenal, 3-(dimetilamino-fenil)-2-propenal resulta nos aductos 3,8-dihidro parcialmente oxidados. Em todos os casos, os aductos de Diels-Alder são acompanhados por produtos secundários formados na adição da dimetilamina à posição Cg da quinona inicial.

De modo a que a invenção possa ser bem entendida são dados os seguintes exemplos apenas a título de ilustração.

Os pontos de fusão são não-corrigidos, e foram determinados em tubos capilares abertos usando um aparelho de imersão Buchi. As análises elementais por combustão foram obtidas usando um analisador Perkin Elmer 2400 CHN. Os dados espectroscópicos foram obtidos com os seguintes instrumentos: IR, Perkin Elmer 577 e Buck Scientific 500; RMN, Varian VXR-300 (300 MHz para Ή e 75 MHz para 13C) e Bruker Ac-250 MHz para *H e 63 MHz para 13C). As atribuições indicadas com * e ** podem ser trocadas entre si.

Exemplo 1 - Síntese de 4.6-dimetil-5-5.8-dihidro-lH-1.8-diaazantraceno-2.9,10-triona Π) A uma solução de 4-metil-lH-quinolona-2,5,8-triona (196 mg, 1 mmol) em clorofórmio seco sob azoto foram adicionados 159 mg (1,14 mmol) de dimetil-hidrazona de 2-metil-2-pentenal. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 5 minutos. Após evaporação do solvente, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica, eluindo com diclorometano/acetato de etilo (6:4) para originar 33 mg de hidrazona que não reagiu, 133 mg (45%) de 1 e 105 mg de 6-dimetilamino-4-metil-lH-quinolina-1,5,8-triona.

Ponto de fusão: 220-223°C. IR(KBr): 3640-3060(N-H); 1650(C=O)cm '. 'H-NMR (300 MHz, CDCI3): 6,65 (m, 2H, C3-H e N8-H); 6,10 (dd. 1H, J7)8=4,5 Hz e J=l,2 Hz, C7-H): 3,65 (t, 1H, J=4,5 Hz, C5-H); 2,62 (d, 3H, J=l,2 Hz, C4-CH3); 1,73 (d, 3H, J=l,2 Hz, C6-CH3); 1,56 (dq, 2H, J=7,5 Hz e 4,5 Hz, C5-CH2-CH3); 0,81 (t, 311, J=7,5 Hz, C5-CH2-CH3) ppm. I3C-NMR (75,4 MHz, CDC13): 183,08 (C9); 175,79 (Cio); 160>83 (c2); 152,03 (C4); 137,11 (C8a)*; 136,33 (C9a)*; 127,76 (C3); 119,49 (C7); 115,46 (C6): 114,93 (C4a); 111,51 (C10a); 36,43 (C5); 25,46 (C5-CH2-CH3); 22,53 (C4-CH3); 18,68 (C6-CH3); 9,27 (C5-CH2-CH3) ppm.

Exemplo 2 - Síntese de 4-metil-5-fenil-5.8-dihidro-lH-1.8-diaza-antraceno-2.9.10-tríona (21

Foi adicionada uma solução de 233 mg (1,34 mmol) de N,N-dimetil-hidrazona de trans-cinamaldeído a uma solução de 4-metil-lH-quinolina- 2.5.8- triona (127mg, 0,67 mmol) em clorofórmio seco (120 ml). A reacção foi agitada sob azoto à temperatura ambiente durante 3 dias, com adições periódicas de solvente (100 ml cada 12 horas). Foi adicionada uma outra quantidade de 166 mg (0,61 mmol) da hidrazona, e a reacção foi submetida a refluxo durante 24 horas e evaporada até á secura, e o resíduo foi purificado por cromatografia de gel de sílica usando um gradiente de eluição, começando com diclorometano puro até diclorometano/acetato de etilo (7:3), para originar 204 ml do dieno inicial, 72 mg (35%) de 2 e 160 mg de 6-dimetilamino-4-metil-lH-quinolina- 2.5.8- triona. -6-

Ponto de fusão, 206°C. IR (KBr): 3400 (NH), 1660, 1655, 1600 (OO) cm’1. ^-NMR (300 MHz, d5-piridina) δ: 10,40 (d, 1H, J=4,0 Hz, Ng-H); 7,69 (dd, 2H, J2·,3-=8,0 Hz, J2.4>=1,0 Hz, C2, -H, C6, -H); 7,41 (t, 2H, J=8,0 Hz, C3, -H, C5, -H); 7,25 (tt, J4>j3-= 7,8 Hz, J4>,2. = 1,1 Hz, C4, -H); 6,70 (m, 2H, C3-H, C7-H); 5,17 (m, 1H, C6-H); 5,11 (d, 1H, J=5,0 Hz, C5-H), 2,46 (d, 3H, J=1,0 Hz, C4-CH3) ppm.

Exemplo 3 - Síntese de 5-f4-Dimetilamino-fenin-4-metil-5.8-dihidro-lH-l.8-diaazantraceno-2.9.10-triona (31

Uma solução de 41,5 mg (2,2 mmol) de 4-metil-lH-quinolina-2,5,8-triona em clorofórmio seco (130 ml) e 524 mg (2,4 mmol) de N,N-dimetil~ hidrazona de p-dimetilaminocinamaldeído foi agitada sob refluxo durante quatro dias. Depois da evaporação do solvente, o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica usando um gradiente de eluição desde dicloro-metano até diclorometano/acetato de etilo (7:3), para originar 80 mg (11%) de 3 e 313 mg de 6-dimetilamino-4-metil-lH-quinolina-2,5,8-triona.

Ponto de fusão: 252-256°C. IR (KBr): 3630-3100 (NH), 1650,1640,1635 (C=0) cm'1. 'H-NMR (300 MHz, ds-piridina); 10,24 (d, 1H, J=3,0 Hz, Ng-H); 7,62 (d, 2H, J=8,8 Hz, C2, -H, C6, -H); 6,85 (d, 2H, J=8,8 Hz, C3, -H, C5, -H); 6,76 (m, CrH); 6,74 (s, 1H, C3-H);2,78 (s, 6H, N(CH3)2); 2,54 (s, 3H, C4-CH3)ppm. (O sinal de Cfi-H está incluído no sinal da água). -7-

ACTIVIDADE BIOLÓGICA

Os compostos foram diluídos em DMSO/MeOH/Acetona (1:4,5:4,5) e foram testados a diferentes concentrações. Foi permitido que o solvente evaporasse antes de as células serem inoculadas. O ensaio antitumoral seguinte, empregando o corrente protocolo de despistagem foi levado a efeito utilizando a seguinte célula: P-388 (neoplasma linfóide do ratinho DBA/2).

Ensaio contra as células P-338 (neoplasma linfóide do ratinho DBA721.

As células P-388 foram inoculadas em poços de 16 mm a uma concentração de lxlO4 células por poço em alíquotas de 1 ml de MEM 10C contendo diferentes concentrações do produto. Todas as determinações foram conduzidas em triplicado. Um conjunto separado de culturas sem fármaco foi contado diariamente para assegurar que as células permaneciam em crescimento exponencial ao longo do período de observação. Depois de três dias de incubação, as células foram contadas e foi determinado o IC50. COMPOSTOS IC5o9g/ml 1 1 2 0,25 3 20

Lisboa, 22 de Outubro de 2001

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ALBERTO CANELAS

Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 41ΛΛ i (CDH&

Claims (4)

1. -1- REIVINPICACÔES 1. Aza-antraceno-trionas com a fórmula: . P? 0 R4

   em que: R1, R2, R4 e R5 são iguais ou são diferentes e cada um é um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo inferior (Q-Cô); e R3 é um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo inferior, ou um grupo fenilo ou um grupo fenilo amino-substituído.
2. 2. Compostos tal como reivindicado na reivindicação 1, como especificamente revelados em qualquer dos exemplos inclusos.
3. 3. Uma composição farmacêutica compreendendo um composto tal como reivindicado na reivindicação 1 ou reivindicação 2 em associação com um veículo farmacêutico ou diluente.
4. 4. A utilização de um composto tal como reivindicado na reivindicação 1 no fabrico de uma composição antitumoral. Lisboa, 22 de Outubro de 2001 ^^ U j ALBERTO CANELAS Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 * 'ϊΛΛ | ΙΟΒΛΛ