PT2320908E

PT2320908E - Pró-fármacos de dolutegravir

Info

Publication number: PT2320908E
Application number: PT98009897T
Authority: PT
Inventors: Brian Alvin Johns; Jason Gordon Weatherhead; Yasunori Aoyama; Toshikazu Hakogi
Original assignee: Shionogi & Co; Viiv Healthcare Co
Priority date: 2008-07-25
Filing date: 2009-07-23
Publication date: 2014-03-06
Also published as: SI2320908T1; HRP20140223T2; WO2010011812A1; PL2320908T3; HUE020489T4; ES2448766T3; US20110190236A1; CY1114981T1; EP2320908B9; EP2320908B1; EP2320908A1; US8217034B2; ES2448766T9; HRP20140223T1; DK2320908T3; EP2320908A4; SMT201400030B

Description

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DESCRIÇÃO "Pró-fármacos de dolutegravir"

Antecedentes do invento O vírus da imunodeficiência humana ("HIV") é o agente causador do síndroma da imunodeficiência adquirida ("SIDA"), uma doença caracterizada pela destruição do sistema imunitário, em particular de células T CD4+, com a associada susceptibilidade a infecções oportunistas, e seu complexo precursor relacionado com o SIDA ("ARC"), um síndroma caracterizado por sintomas tais como linfadenopatia generalizada persistente, febre e perda de peso. O HIV é um retrovírus, a conversão do seu ARN em ADN é realizada através da acção da enzima transcriptase inversa. Os compostos que inibem a função de replicação da transcriptase inversa inibem a replicação do HIV em células infectadas. Tais compostos são úteis na prevenção ou tratamento de infecção por HIV em humanos.

Um passo necessário para a replicação do HIV em células T humanas é a inserção pela integrase viralmente codificada de ADN pró-viral no genoma da célula hospedeira. Crê-se que a integração é mediada por integrase num processo que envolve a montagem de um complexo nucleoproteína estável com sequências de ADN virais, a clivagem de dois nucleótidos a partir dos terminais 3' do ADN proviral linear e a ligação covalente dos terminais OH recuados em 3' do ADN proviral num corte escalonado feito no sítio alvo do hospedeiro. A síntese de reparação da lacuna resultante pode ser realizada por enzimas celulares. Há uma necessidade continuada de encontrar novos agentes terapêuticos para tratar doenças humanas. A integrase de HIV é um alvo atractivo para a descoberta de novas terapêuticas devido ao seu papel importante em infecções virais, em particular infecções por HIV. Inibidores de integrase são divulgados em WO 2006/116764. Os compostos do presente invento foram concebidas para administrar agentes terapêuticos activos. 2 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

Sumário do invento O presente invento compreende compostos que são pró-fármacos de inibidores de integrase de HIV e por conseguinte são úteis na inibição da replicação de HIV, na prevenção e/ou tratamento de infecção por HIV e no tratamento do SIDA e/ou ARC. O presente invento compreende compostos da fórmula (I):

O

(D em que: R1 é alquiloCi-Cs ou LR2; L é alquileno; R2 é a) hidroxi; b) alcoxi; c) OR3 em que R3 é P(O)(OH)2 ou alcoxi; d) heterociclilo opcionalmente substituído com oxo ou alquiloCi-Cs; e) C (O) OR4 em que R4 é H, alquiloCi-Cs, ou XR5 em que X é alquileno e R5 é ariloC6-Ci0, heterociclilo, ou NR6R7 em que R6 e R7 são seleccionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e alquiloCi-Cs, ou h) C(0)R10 em que R10 é heterociclilo opcionalmente substituído com XR11 em que R11 é heterociclilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Breve descrição dos desenhos

Figura 1: Concentrações plasmáticas de (4R,12aS)-IV[(2,4-di-fluorofenil)metil]-7-hidroxi-4-metil-6,8-dioxo-3, 4, 6,8, 12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,bl[1,3]oxazina-9-carboxamida (composto la do Esquema 2) e um pró-fármaco, Exemplo 2. 3 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

Descrição detalhada do invento O presente invento compreende compostos da fórmula (I): o (A»-*’

em que: R1 é alquiloCi-Cs ou LR2; L é alquileno; R2 é a) hidroxi; b) alcoxi; c) OR3 em que R3 é P(O)(OH)2 ou alcoxilo; d) heterociclilo opcionalmente substituído com oxo ou alquiloCi-Cs; e) C (O) OR4 em que R4 é H, alquiloCi-C8, ou XR5 em que X é alquileno e R5 é ariloCg-Cio, heterociclilo, ou NR6R7 em que R6 e R7 são seleccionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e alquiloCi-C8, ou h) C(0)R10 em que R10 é heterociclilo opcionalmente substituído com XR11 em que R11 é heterociclilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 0 presente invento também compreende compostos da fórmula (I) em que R1 é Ci-8alquilo ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. O presente invento também compreende compostos da fórmula (I) em que R1 é LR2 em que L é alquilenoCi-8 e R2 é hidroxi, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 0 presente invento também compreende compostos da fórmula (I) em que R1 é LR2 em que L é alquilenoCi-8 e R2 é -OP(O)(OH)2 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 4 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ Ο presente invento também compreende compostos da fórmula (I) em que R1 é LR2 em que L é alquilenoCi-s e R2 é heterociclilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 0 presente invento também compreende compostos da fórmula (I) seleccionados do grupo que consiste em: metilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluorofenil)metil]-amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[l' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi}-metilo; 2-(metiloxi)etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluoro-fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3, 4,6,8,12,12 a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7- il]oxi Jmetilo; 2-hidroxietilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluoro- fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12 a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo; 2-(fosfonooxi)etilcarbonato de {[(4R,12aS)—9—({[(2,4 — difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3, 4, 6,8, 12, 12a-hexa-hidro-2H-pirido [ 1' ,2' : 4,5] pirazino [2, l]-b [ 1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo; 2-(4-morfolinil)etilcarbonato de { [(4R,12aS)—9—({ [ (2,4 — difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3, 4, 6,8, 12, 12a-hexa-hidro-2H-pirido [ 1' ,2' : 4,5] pirazino [2, l]-b [ 1,3]oxazin-7-il]oxiJmetilo; e seus sais farmaceuticamente aceitáveis. O termo "alquilo", sozinho ou em combinação com qualquer outro termo, refere-se a um radical hidrocarboneto alifático saturado de cadeia linear ou cadeia ramificada que contém o número especificado de átomos de carbono. Exemplos de radicais alquilo incluem, mas não estão limitados a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, isoamilo, n-hexilo e similares. 5 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ Ο termo "alquileno" refere-se a um radical hidrocarboneto divalente de cadeia linear ou ramificada, de preferência tendo um a doze átomos de carbono, excepto se definido de outro modo. Exemplos de "alquileno", tal como aqui utilizado incluem, mas não estão limitados a, metileno, etileno, propileno, butileno, isobutileno e similares. O termo "alcoxi" refere-se a um radical éter alquílico, em que o termo "alquilo" é definido acima. Exemplos de radicais éter alquílico adequado incluem, mas não estão limitados a, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, sec-butoxi, terc-butoxi e similares. O termo "arilo" sozinho ou em combinação com qualquer outro termo, refere-se a uma porção aromática carbocíclica (tal como fenilo ou naftilo) contendo o número especificado de átomos de carbono, de preferência 6-10 átomos de carbono. Exemplos de radicais arilo incluem, mas não estão limitados a, fenilo, naftilo, indenilo, azulenilo, fluorenilo, antracenilo, fenantrenilo, tetra-hidronaftilo, indanilo, fenantridinilo e similares. A menos que indicado de outra forma, o termo "arilo" também inclui cada isómero posicionai possível de um radical hidrocarboneto aromático, tal como 1-naftilo, 2-naftilo, 5-tetra-hidronaftilo, 6-tetra-hidro-naftilo, 1-fenantridinilo, 2-fenantridinilo, 3-fenantridinilo, 4-fenantridinilo, 7-fenantridinilo, 8-fenantridinilo, 9-fenantridinilo e 10-fenantridinilo. Exemplos de radicais arilo incluem, mas não estão limitados a, fenilo, naftilo, indenilo, azulenilo, fluorenilo, antracenilo, fenantrenilo, tetra-hidronaftilo, indanilo, fenantridinilo e similares.

Os termos "heterociclo", "heterocíclico" e "heterociclilo", tal como aqui utilizados, referem-se a um sistema anelar heterocíclico monocíclico de 3 a 7 membros ou a um sistema anelar heterocíclico bicíclico de 8 a 11 membros, em que qualquer anel é saturado, parcialmente saturado ou insaturado, e que pode estar opcionalmente benzofundido se monocíclico. Cada heterociclo consiste em um ou mais átomos de carbono e de um a quatro heteroátomos seleccionados a partir do grupo que consiste em N, O e S, e 6 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ em que os heteroátomos de azoto e enxofre podem opcionalmente ser oxidados, e o átomo de azoto pode opcionalmente ser quaternizado, e incluindo qualquer grupo biciclico no qual qualquer um dos anéis heterocíclicos acima definidos está fundido com um anel benzeno. O anel heterocíclico pode estar ligado a qualquer carbono ou heteroátomo, desde que a ligação resulte na criação de uma estrutura estável. Os heterociclos preferidos incluem heterociclos monociclicos de 5-7 membros e heterociclos biciclicos de 8-10 membros. Quando o anel heterocíclico tem substituintes, entende-se que os substituintes podem estar ligados a qualquer átomo no anel, quer seja um heteroátomo ou um átomo de carbono, desde que resulte uma estrutura química estável. "Heteroaromáticos" ou "heteroarilo" estão incluídos dentro dos heterociclos como definidos acima e, geralmente, refere-se a um heterociclo em que o sistema anelar é um radical anelar aromático monocíclico ou policíclico contendo cinco a vinte átomos de carbono, preferivelmente cinco a dez átomos de carbono, em que um ou mais carbonos do anel, preferivelmente um a quatro, estão cada um substituídos por um heteroátomo tal como N, O, S e P. Grupos heteroarilo preferidos incluem heteroarilos monociclicos de 5-6 membros e heteroarilos biciclicos de 8-10 membros. Também incluídos no âmbito do termo "heterociclo", "heterocíclico" ou "heterociclilo" é um grupo no qual um anel contendo heteroátomo não aromático está fundido com um ou mais anéis aromáticos, tais como num indolinilo, cromanilo, fenantridinilo ou tetra-hidro-quinolinilo, onde o radical ou ponto de ligação está no anel contendo heteroátomo não aromático. A menos que indicado de outra forma, o termo "heterociclo", "heterocíclico" ou "heterociclilo" também inclui cada possível isómero posicionai de um radical heterocíclico, tal como em 1-indolinilo, 2-indolinilo, 3-indolinilo. Exemplos de heterociclos incluem imidazolilo, imidazolinoilo, imidazolidinilo, quinolilo, isoquinolilo, indolilo, indazolilo, indazolinolilo, per-hidropiridazilo, piridazilo, piridilo, pirrolilo, pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolilo, pirazinilo, quinoxolilo, piperidinilo, piranilo, pirazolinilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, morfolinilo, tiamorfolinilo, furilo, tienilo, triazolilo, tiazolilo, carbolinilo, tetrazolilo, tiazolidinilo, benzofuranoilo, tiamorfolinilsulfona, oxazolilo, oxadiazolilo, benzoxazolilo, oxopiperidinilo, 7 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ oxopirrolidinilo, oxoazepinilo, azepinilo, isoxozolilo, isotiazolilo, furazanilo, tetra-hidropiranilo, tetra-hidrofuranilo, tiazolilo, tiadiazolilo, dioxolilo, dioxinilo, oxatiolilo, benzodioxolilo, ditiolilo, tiofenilo, tetra-hidrotiofenilo, sulfolanilo, dioxanilo, dioxolanilo, tetra-hidrofurodi-hidrofuranilo, tetra-hidropiranodi-hidrofuranilo, di-hidropiranilo, tetra-hidrofurofuranilo e tetra-hidro-piranofuranilo. 0 termo "heteroátomo" significa azoto, oxigénio ou enxofre e inclui qualquer forma oxidada de azoto, tal como N (0) , {N+-CT} e enxofre, tal como S(O) e S(0)2, e a forma quaternizada de qualquer azoto básico.

Uma combinação de substituintes ou variáveis só é permitida se tal combinação resultar num composto estável ou quimicamente viável. A menos que indicado de outra forma, as estruturas aqui ilustradas pretendem também incluir todas as formas estereoquimicas da estrutura, isto é, as configurações R e S para cada centro assimétrico. Portanto, os racematos e misturas racémicas, os enantiómeros simples, as misturas diastereoisoméricas e os diastereoisómeros individuais dos presentes compostos estão expressamente incluídas no âmbito do invento. Embora os compostos específicos exemplificados aqui possam ser representados numa configuração estereoquímica particular, os compostos tendo a estereoquímica oposta em qualquer dado centro quiral ou as suas misturas também estão previstos. A menos que indicado de outra forma, as estruturas aqui ilustradas pretendem também incluir compostos que diferem apenas na presença de um ou mais átomos isotopicamente enriquecidos. Por exemplo, compostos possuindo as presentes estruturas excepto para a substituição de um hidrogénio por um deutério ou trítio, ou a substituição de um carbono por um carbono enriquecido em 13C ou 14C estão também dentro do âmbito do presente invento.

Será evidente para um perito na especialidade que certos compostos deste invento podem existir em formas tautoméricas 8 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ alternativas. Todas estas formas tautoméricas dos compostos do presente invento estão dentro do âmbito do invento. Salvo indicação em contrário, a representação de qualquer tautómero pretende incluir o outro. 0 termo "quantidade farmaceuticamente eficaz" refere-se a uma quantidade eficaz no tratamento de uma infecção por vírus, por exemplo uma infecção por HIV, num paciente como monoterapia ou em combinação com outros agentes. O termo "tratamento" como aqui utilizado refere-se ao alívio de sintomas de um distúrbio particular num paciente, ou à melhoria de uma medição verificável associada a um distúrbio particular, e pode incluir a supressão de recorrência de sintomas num paciente assintomático tal como um paciente no qual uma infecção virai ficou latente. 0 termo "quantidade profilaticamente eficaz" refere-se a uma quantidade eficaz na prevenção de uma infecção por vírus, por exemplo uma infecção por HIV, ou prevenir a ocorrência de sintomas de uma tal infecção, num paciente. Tal como aqui utilizado, o termo "paciente" refere-se a um mamífero, incluindo um ser humano. O termo "transportador ou adjuvante farmaceuticamente aceitável" refere-se a um transportador ou adjuvante que pode ser administrado a um paciente, em conjunto com um composto deste invento, e que não destrói a sua actividade farmacológica e não é tóxico quando administrado em doses suficientes para entregar uma quantidade terapêutica do agente antiviral. O termo "tratamento" como aqui utilizado refere-se ao alívio de sintomas de um distúrbio particular num paciente, ou à melhoria de uma medição verificável associada a um distúrbio particular, e pode incluir a supressão de recorrência de sintomas num paciente assintomático tal como um paciente no qual uma infecção virai ficou latente. O tratamento inclui a profilaxia que se refere à prevenção de uma doença ou condição ou prevenir a ocorrência de sintomas de tal doença ou condição, num paciente. Tal como aqui utilizado, o termo "paciente" refere-se a um mamífero, incluindo um ser humano. 9 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

Tal como aqui utilizado, o termo "sujeito" refere-se a um paciente, animal ou uma amostra biológica. O termo "amostra biológica", tal como aqui utilizado, inclui, sem limitação, culturas de células ou seus extractos; preparações de uma enzima adequada para ensaio in vitro; material de biópsia obtido a partir de um mamífero ou seus extractos; e sangue, saliva, urina, fezes, sémen, lágrimas, ou outros fluidos corporais ou seus extractos.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de acordo com o invento incluem os derivados de ácidos e bases inorgânicos e orgânicos farmaceuticamente aceitáveis. Exemplos de ácidos adequados incluem ácidos clorídrico, bromídrico, sulfúrico, nítrico, perclórico, fumárico, maleico, fosfórico, glicólico, láctico, salicílico, succínico, tolueno-p-sulfónico, tartárico, acético, cítrico, metanossulfónico, etanossulfónico, fórmico, benzóico, malónico, naftaleno-2-sulfónico e benzenossulfónico. Outros ácidos, tais como oxálico, embora não sejam eles próprios farmaceuticamente aceitáveis, podem ser empregues na preparação de sais úteis como intermediários na obtenção dos compostos do invento e os seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis.

Os sais derivados de bases apropriadas incluem sais de metal alcalino (por exemplo sódio), metal alcalino-terroso (por exemplo, magnésio) , amónio, NW4+ (em que W é alquiloCi_4) e outros sais de amina. Os sais fisiologicamente aceitáveis de um átomo de hidrogénio ou de um grupo amino incluem sais ou ácidos carboxílicos orgânicos tais como os ácidos acético, láctico, tartárico, málico, isetiónico, lactobiónico e succínico; os ácidos sulfónicos orgânicos tais como os ácidos metanossulfónico, etanossulfónico, benzenossulfónico e p-toluenossulfónico e ácidos inorgânicos tais como os ácidos clorídrico, sulfúrico, fosfórico e sulfâmico. Os sais fisiologicamente aceitáveis de um composto com um grupo hidroxi incluem o anião do referido composto em combinação com um catião adequado tal como Na+, NH4+ e NW4+ (em que W é um grupo alquiloCi_4) . Os sais preferidos incluem sais de sódio, cálcio, potássio e cloridrato. 10 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

Outros compostos deste invento podem ser preparados por um perito na especialidade seguindo os ensinamentos do fascículo juntamente com o conhecimento na técnica, empregando reagentes que são facilmente sintetizados ou disponíveis comercialmente.

Qualquer referência a qualquer dos compostos anteriores inclui também uma referência a um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Os sais dos compostos do presente invento podem ser produzidos por meio de métodos conhecidos de um perito na especialidade. Por exemplo, o tratamento de um composto do presente invento com uma base ou ácido apropriado num solvente adequado irá produzir o sal correspondente.

Os compostos do presente invento são úteis como pró-fármacos para entregar compostos terapêuticos, por exemplo, compostos revelados em WO 2006/116764, que se demonstrou terem actividade inibidora de integrase de HIV. Um aspecto do presente invento refere-se a métodos de tratamento ou prevenção de infecções virais, por exemplo uma infecção por HIV, numa amostra biológica que compreende o contacto da amostra biológica com compostos de fórmula (I) ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Outro aspecto do presente invento refere-se a métodos de tratamento ou prevenção de infecções virais, por exemplo, uma infecção por HIV num doente, que compreende a administração ao doente de uma quantidade terapeuticamente eficaz de compostos de fórmula (I) ou (Ia) ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Os compostos de acordo com o invento são particularmente adequados para o tratamento ou profilaxia de infecções por HIV e condições associadas. A referência aqui ao tratamento estende-se à profilaxia assim como ao tratamento de infecções estabelecidas, sintomas e condições clinicas associadas, tais como o complexo relacionado com SIDA (ARC), sarcoma de Kaposi e demência do SIDA.

De acordo com uma concretização do invento, os compostos de fórmula (I) ou seus sais podem ser formulados em composições. Numa concretização preferida, a composição é uma 11 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ composição farmacêutica, que compreende um composto de fórmula (I) e transportador farmaceuticamente aceitável, adjuvante ou veiculo. Numa concretização, a composição compreende uma quantidade de um composto do presente invento eficaz para tratar ou prevenir a infecção virai, por exemplo uma infecção por HIV, numa amostra biológica ou num doente. Numa outra concretização, os compostos deste invento e suas composições farmacêuticas, que compreendem uma quantidade de um composto da presente inovação eficaz para inibir a replicação do vírus ou para tratar ou prevenir uma infecção virai ou doença ou distúrbio, por exemplo uma infecção por HIV, e um transportador farmaceuticamente aceitável, adjuvante ou veículo, podem ser formulados para administração a um doente, por exemplo, para administração oral. 0 presente invento apresenta compostos de acordo com o invento para utilização em terapia médica, por exemplo para o tratamento ou profilaxia de uma infecção virai, por exemplo uma infecção por HIV e de condições associadas. Os compostos de acordo com o invento são especialmente úteis para o tratamento do SIDA e condições clinicas relacionadas tais como o complexo relacionado com SIDA (ARC), linfadenopatia generalizada progressiva (PGL), sarcoma de Kaposi, púrpura trombocitopénica, condições neurológicas relacionadas com o SIDA, tais como complexo de demência de SIDA, esclerose múltipla ou paraperese tropical, condições positivas para anticorpo anti-HIV e positivas para HIV, incluindo tais condições em doentes assintomáticos. O presente invento inclui adicionalmente a utilização de um composto de acordo com o invento no fabrico de um medicamento para administração a um sujeito para o tratamento de uma infecção virai, em particular, e infecção por HIV.

Os compostos de acordo com o invento também podem ser utilizados em terapia adjuvante para o tratamento de infecções por HIV ou sintomas ou efeitos associados ao HIV, por exemplo o sarcoma de Kaposi. A referência aqui ao tratamento estende-se à profilaxia bem como ao tratamento de condições estabelecidas, distúrbios e infecções, dos seus sintomas, e associados. Os compostos 12 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ anteriores de acordo com o invento e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser utilizados em combinação com outros agentes terapêuticos para o tratamento das infecções ou condições acima. As terapias de combinação de acordo com o presente invento compreendem a administração de um composto do presente invento ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e outro agente farmaceuticamente activo. O ingrediente activo(s) e agentes farmaceuticamente activos podem ser administrados simultaneamente (ou seja, ao mesmo tempo) na mesma ou em diferentes formulações farmacêuticas ou sequencialmente em qualquer ordem. As quantidades do ingrediente activo(s) e do agente farmaceuticamente activo(s) e os tempos relativos de administração serão seleccionados de modo a conseguir o efeito terapêutico combinado desejado.

Exemplos de outros agentes terapêuticos incluem:

Inibidores de transcriptase inversa de nucleótido, como zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavidina, adefovir, adefovir dipivoxil, fozivudina, todoxil, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina e agentes similares;

Inibidores de transcriptase inversa não de nucleótido (incluindo um agente possuindo actividade anti-oxidação tal como imunocal, oltipraz, etc.), tais como nevirapina, delavirdina, efavirenz, lovirida, imunocal, oltipraz, capravirina, TMC-278, TMC-125, etravirina e agentes similares;

Inibidores de protease, tais como saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, raltegravir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir, e agentes similares;

Inibidores de entrada tais como enfuvirtida (T-20), T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, 5-Helix e agentes similares;

Inibidores de integrase tais como L-870, 810, raltegravir, e agentes similares; 13 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

Inibidores de desenvolvimento (budding) tais como PA-344 e PA-457, e agentes similares; e

Inibidores de CXCR4 e/ou CCR5, tais como vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc (UK 427,857), TAK449 e agentes similares. O presente invento inclui ainda a utilização de um composto de acordo com o invento no fabrico de um medicamento para administração simultânea ou sequencial com pelo menos um outro agente terapêutico, tal como aqueles aqui anteriormente definidos.

Os compostos do presente invento podem ser administrados com um agente conhecido para inibir ou reduzir o metabolismo de compostos, por exemplo, ritonavir. Por conseguinte, o presente invento compreende um método para o tratamento ou profilaxia de uma doença tal como anteriormente descrito, por administração de um composto do presente invento em combinação com um inibidor metabólico. Uma tal combinação pode ser administrada simultânea ou sequencialmente.

Em geral, uma dose adequada para cada uma das condições anteriormente mencionadas estará na gama de 0,01 a 250 mg por quilograma de peso corporal do receptor (por exemplo, um ser humano) por dia, de preferência na gama de 0,01 a 100 mg por quilograma de corpo peso por dia. Salvo indicação em contrário, todos os pesos de ingrediente activo são calculados como o composto mãe de fórmula (I); para os seus sais ou ésteres, os pesos aumentarão proporcionalmente. A dose desejada pode ser apresentada como uma, duas, três, quatro, cinco, seis ou mais sub-doses administradas em intervalos apropriados ao longo do dia. Em alguns casos, a dose desejada pode ser administrada em dias alternados. Estas sub-doses podem ser administradas em formas de dosagem unitária, por exemplo, contendo de 1 a 1000 mg, de 20 a 500 mg, de 10 a 500 mg, ou de 1 a 400 mg de ingrediente activo por forma de dosagem unitária.

Embora seja possivel para o ingrediente activo ser administrado sozinho, é preferível apresentá-lo como uma composição farmacêutica. As composições do presente invento 14 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ compreendem pelo menos um ingrediente activo, tal como definido acima, juntamente com um ou mais transportadores aceitáveis e opcionalmente outros agentes terapêuticos. Cada transportador deve ser aceitável no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da composição e não ser prejudicial para o doente.

As composições farmacêuticas incluem as adequadas para administração oral, rectal, nasal, tópica (incluindo transdérmica, bucal e sublingual), vaginal ou parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradérmica e intravítrea). As composições podem ser apresentadas convenientemente em forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por quaisquer métodos bem conhecidos na técnica farmacêutica. Tais métodos representam uma característica adicional do presente invento e incluem o passo de levar a associação os ingredientes activos com o transportador, que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Em geral, as composições são preparadas colocando uniforme e infimamente em associação os ingredientes activos com transportadores líquidos ou transportadores sólidos finamente divididos ou ambos, e então se necessário conformando o produto. O presente invento inclui adicionalmente uma composição farmacêutica como aqui anteriormente definida, em que um composto do presente invento ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um outro agente terapêutico são apresentados separadamente um do outro como um kit de partes.

As composições adequadas para administração transdérmica podem ser apresentadas como emplastros discretos adaptados para permanecer em contacto íntimo com a epiderme do destinatário durante um período de tempo prolongado. Tais emplastros contêm adequadamente o composto activo 1) numa solução aquosa opcionalmente tamponada, ou 2) dissolvido e/ou disperso num adesivo, ou 3) disperso num polímero. Uma concentração adequada do composto activo é de cerca de 1% a 25%, de preferência de cerca de 3% a 15%. Como possibilidade particular, o composto activo pode ser entregue a partir do emplastro por electrotransporte ou iontoforese, tal como genericamente descrito em Pharmaceutical Research 3(6), 318 (1986) . 15

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As composições farmacêuticas do presente invento adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas, tais como cápsulas, comprimidos revestidos, hóstias ou comprimidos, cada um contendo uma quantidade predeterminada dos ingredientes activos; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão num liquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão liquida de óleo-em-água ou uma emulsão liquida de água-em-óleo. O ingrediente activo também pode ser apresentado como um bólus, electuário ou pasta.

Um comprimido pode ser feito por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos prensados podem ser preparados por compressão numa máquina adequada dos ingredientes activos numa forma de escoamento livre tal como um pó ou grânulos, opcionalmente misturado com um ligante (por exemplo povidona, gelatina, hidroxipropilmetilcelulose), lubrificante, diluente inerte, conservante, desintegrante (por exemplo, amidoglicolato de sódio, povidona reticulada, carboximetilcelulose de sódio reticulada), um agente tensioactivo ou dispersante. Os comprimidos moldados podem ser feitos moldando uma mistura do composto em pó humedecido com um diluente liquido inerte numa máquina adequada. Os comprimidos podem opcionalmente ser revestidos ou marcados e podem ser formulados de modo a proporcionar a libertação lenta ou controlada dos ingredientes activos neles incluídos utilizando, por exemplo, hidroxipropilmetilcelulose em proporções variáveis para proporcionar o perfil de libertação desejado. Os comprimidos podem opcionalmente ser fornecidos com um revestimento entérico, para proporcionar libertação em partes do intestino que não o estômago.

As composições farmacêuticas adequadas para administração tópica na boca incluem pastilhas compreendendo os ingredientes activos numa base aromatizada, geralmente sacarose e goma arábica ou adragante; pastilhas compreendendo o ingrediente activo numa base inerte tal como gelatina e glicerina, ou sacarose e goma arábica; e elixires bucais que compreendem o ingrediente activo num transportador líquido adequado. 16 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

As composições farmacêuticas adequadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou sprays. As composições farmacêuticas podem conter, para além do ingrediente activo, transportadores reconhecidos na técnica como apropriados.

As composições farmacêuticas para administração rectal podem ser apresentadas como um supositório com um transportador apropriado compreendendo, por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato ou outros materiais vulgarmente utilizados na técnica. Os supositórios podem ser convenientemente formados por mistura da combinação activa com o transportador(es) amolecido ou derretido seguido por arrefecimento e conformação em moldes.

As composições farmacêuticas adequadas para administração parentérica incluem soluções aquosas e não aquosas isotónicas estéreis para injecção que podem conter anti-oxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a composição farmacêutica isotónica com o sangue do receptor pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas, que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes; e lipossomas ou outros sistemas de microparticulas que são concebidos para direccionar o composto para componentes do sangue ou um ou mais órgãos. As composições farmacêuticas podem ser apresentadas em recipientes selados de dose única ou multi-dose, por exemplo, ampolas e frascos, e podem ser armazenadas numa condição criodessecada (liofilizada) requerendo apenas a adição do transportador liquido estéril, por exemplo água para injecção, imediatamente antes da utilização. As soluções e suspensões para injecção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós estéreis, grânulos e comprimidos do tipo anteriormente descrito.

As composições farmacêuticas de dosagem unitária incluem os que contêm uma dose diária ou subdose diária dos ingredientes activos, tal como anteriormente referido, ou uma sua fracção apropriada.

Deve ser entendido que para além dos ingredientes particularmente mencionados acima, as composições 17 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ farmacêuticas deste invento podem incluir outros agentes convencionais na técnica, tendo em conta o tipo de composição farmacêutica em questão, por exemplo, os adequados para administração oral podem incluir tais agentes adicionais, tais como agentes edulcorantes, espessantes e aromatizantes.

Os compostos do presente invento podem ser preparados de acordo com os seguintes esquemas reaccionais e exemplos, ou suas modificações usando materiais de partida facilmente disponíveis, reagentes e procedimentos de síntese convencionais. Nestas reacções, é também possível fazer uso de variantes que são conhecidas das pessoas competentes na matéria. A (4R,12aS)-N-[(2,4-difluorofenil)metil]-7-hidroxi-4- metil-6, 8-dioxo-3,4,6,8,12, 12a-hexa-hidro-2íí-pirido [1' ,2' : 4, 5] — pirazino[2,1-b][1,3]oxazina-9-carboxamida pode ser preparada por métodos conhecidos pelos especialistas na matéria, incluindo os métodos descritos em WO 2006/116764.

Esquema 1

Cl'

0 Cl

R—OH

O

Nal 2a

O

2b base

Esquema 2 M,

o 1a M = H ibM- Na

O

2a X = CI 2bX = l

Catálise de transferência de fase

Esquema 3

o (ia) o (I) 18 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ Esquema 4 ΟΒπ

ΟΗ I

ί^ΟΒη 9' ΟΒη

1. desprotecção

μ,°Η 'θΜ 2. formação de sal

Esquema 5

ligação amina / R’ R-V°

L

O^O F

ligação álcool

Os exemplos que se seguem destinam-se apenas a servir como ilustração e não se pretende que limitem o âmbito do invento de qualquer modo.

Preparação_lj_(4.R, 12aS) -N- [ (2,4-dif luorofenil) metil] -7- hidroxi-4-metil-6, 8-dioxo-3, 4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2.H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,-fcj[1,3]oxazina-9-carboxamida, sal de sódio (composto lb, Esquema 2) 19

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a) Síntese de 2-metil-3-[ (fenilmetil) oxi]-4A-piran-4-ona (composto P-2). A uma suspensão de 2,000 g de composto P-l (1,0 eq.) em 14,0 L de MeCN foram adicionados 2,848 g de brometo de benzilo (1,05 eq.) e 2,630 g de K2C03 (1,2 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 5 h e arrefecida a 13°C. O precipitado foi filtrado e lavado com 5,0 L de MeCN. O filtrado foi concentrado e juntaram-se 3,0 L de THF ao resíduo. A solução 20 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ de THF foi concentrada para originar 3,585 g do composto P—2 em bruto como um óleo. Sem purificação ulterior, o composto P-2 foi utilizado no passo seguinte. ΤΗ RMN (300 MHz, CDC13) 7, 60 (d*r=5, 7Hz, 1H) , 7,4-7,3(m, 5H), 6,3 7(d, J=5,7Hz, 1H), 5,17(s, 2H), 2,09(s, 3H) . b) Síntese de 2-(2-hidroxi-2-feniletil)-3-[(fenilmetil)oxi]-4H-piran-4-ona (composto P-3) . A 904 g do composto P-2 em bruto adicionaram-se 5,88 L de THF e a solução foi arrefecida a -60°C. Juntaram-se 5,00 L de bis (trimetilsililamida) 1,0M em THF (1,25 eq.) gota a gota durante 2 h à solução do composto 2 a -60°C. Depois juntou-se uma solução de 509 g de benzaldeído (1,2 eq. ) em 800 mL de THF a -60°C e a mistura reaccional foi maturada a -60°C durante 1 h. A solução de THF foi vertida numa mistura de 1,21 L de HC1 conc., 8,14 L de água gelada e 4,52 L de EtOAc a menos de 2°C. A camada orgânica foi lavada com 2,71 L de salmoura (duas vezes) e a camada aquosa foi extraída com 3,98 L de EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas. À mistura juntaram-se 1,63 L de tolueno e concentrou-se (duas vezes) para proporcionar uma lama de tolueno do composto P-3. Por filtração, lavagem com 0,90 L de tolueno frio e secagem produziram-se 955 g do composto P-3 (74% de rendimento a partir do composto P-l) como um sólido. 1h RMN (300 MHz, CDC13) 7,62 (d>7=5, 7Hz, 1H) , 7,5-7,2 (m, 10H), 6,3 8(d, J=5,7 Η z, 1H) , 5,16(d, J=ll,4Hz, 1H) , 5,09(d, J=11,4 Η z, 1H), 4,95(dd, J=4,8, 9,0Hz, 1H) , 3,01(dd, J=9,0, 14,1Hz, 1H), 2,84(dd, J=4,8, 14,1Hz, 1H). c) Síntese de 2-[{E)-2-feniletenil]-3-[(fenilmetil)oxi]-4H-piran-4-ona (Composto P-4). A uma solução de 882 g de composto P-3 (1,0 eq.) em 8,82 L de THF foram adicionados 416 g de Et3N (1,5 eq.) e 408 g de cloreto de metanossulfonilo (1,3 eq.) a menos de 30°C. Após confirmação do desaparecimento do composto P-3, juntaram-se 440 mL de NMP e 1,167 g de DBU (2,8 eq.) à mistura reaccional a menos de 30°C e a mistura reaccional foi maturada durante 30 min. A mistura foi neutralizada com 1,76 L de ácido sulfúrico a 16% e a camada orgânica foi lavada com 1, 76 L de Na2S03 aq. a 2%. Após concentração da camada orgânica juntaram-se 4,41 L de tolueno e a mistura foi concentrada (três vezes). Após adição de 4,67 L de hexano, a mistura foi 21 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ arrefecida num banho de gelo. Por filtração, lavagem com 1,77 L de hexano e secagem proporcionaram-se 780 g do composto P—4 (94% de rendimento) como um sólido. ΤΗ RMN (300 MHz, CDC13) 7, 69 (d>7=5, 7Hz, 1H) , 7, 50-7, 25(m, 10H), 7,22(d, J=16,2 Hz, 1H), 7,03(d, J=16,2 Hz, 1H) , 6,41(d, J=5,7Hz, 1H), 5,27 (s, 2H). d) Síntese de 4-oxo-3-[ (fenilmetil) oxi] -4fí-piran-2-carboxílico (composto P-5). A uma mistura de 822 g do composto P—4 (1,0 eq.) e 11,2 g de RuC13-NH20 (0,02 eq.) em 2,47 L de MeCN, 2,47 L de EtOAc e 2,47 L de H20 adicionaram-se 2,310 g de NaIC>4 (4,0 eq.) a menos de 25°C. Depois de maturação durante 1 h, juntaram-se 733 g de NaC102 (3,0 eq.) à mistura a menos de 25°C. Após maturação durante 1 h, o precipitado foi filtrado e lavado com 8,22 L de EtOAc. Ao filtrado juntaram-se 1,64 L de Na2S203 aq. a 50%, 822 mL de H20 e 630 mL de HC1 conc. . A camada aquosa foi extraída com 4,11 L de EtOAc e as camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. Ao resíduo juntaram-se 4 L de tolueno e a mistura foi concentrada e arrefecida num banho de gelo. Por filtração, lavagem com 1 L de tolueno e secagem, proporcionaram-se 372 g do composto P-5 (56% de rendimento) como um sólido. ΤΗ RMN (300 MHz, CDC13) 7, 78 (dy7=5, 7Hz, 1H) , 7, 54-7, 46 (m, 2H), 7, 40-7, 26 (m, 3H), 6,48(d, J=5,7Hz, 1H), 5,6(s largo, 1H), 5,31 (s, 2H) . e) Síntese de ácido 1-(2,3-di-hidroxipropil)-4-oxo-3-[(fenil metil) oxi]-1,4-di-hidro-2-piridinacarboxílico (Composto P-6). Uma mistura de 509 g do composto P—5 (1,0 eq.) e 407 g de 3-amino-propano-l, 2-diol (2,5 eq.) em 1,53 L de EtOH foi agitada a 65°C durante 1 h e a 80°C durante 6 h. Após a adição de 18,8 g de 3-amino-propano-l, 2-diol (0,1 eq.) em 200 mL de EtOH, a mistura foi agitada a 80°C durante 1 h. Após a adição de 18,8 g de 3-amino-propano-l,2-diol (0,1 eq.) em 200 mL de EtOH, a mistura foi agitada a 80°C durante 30 min. Após arrefecimento e adição de 509 mL de H20, a mistura foi concentrada. Ao resíduo juntaram-se 2,54 L de H20 e 2,54 L de AcOEt. Após separação, a camada aquosa foi lavada com 1,02 L de EtOAc. À fase aquosa juntaram-se 2,03 L de ácido sulfúrico a 12% a menos do que 12°C para originar cristais do composto P—6. Por filtração, lavagem com 1,53 L de H20 fria e 22 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ secagem, proporcionaram-se 576 g de composto P-6 (83% de rendimento) como um sólido. XH RMN (300 MHz, DMSO-d6) 7, 67 (dj=l, 5Hz, 1H) , 7, 5-7, 2 (m, 5H), 6,40(d, J=7, 5Hz, 1H), 5,07(s, 2H), 4,2-4,0(m, 1H), 3,9-3,6(m, 2H), 3,38(dd, J=4,2, 10,8Hz, 1H) , 3,27(dd, J=6,0, 10,8Hz, 1H). f) Sintese de 1-(2,3-di-hidroxipropil)-4-oxo-3-[(fenilmetil)-oxi]-1,4-di-hidro-2-piridinacarboxilato de metilo (composto P-7). A uma suspensão de 576 g de composto P-6 (1,0 eq., continha 5,8% de H2O) em 2,88 L de NMP foram adicionados 431 g de NaHCCh (3,0 eq. ) e 160 mL de iodeto de metilo (1,5 eq.) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. Após arrefecimento a 5°C, adicionaram-se à mistura 1, 71 L de HC1 2N e 1,15 L de NaCl aq a 20% a menos de 10°C, para originar cristais do composto 7. Por filtração, lavagem com 1,73 L de H20 e secagem, proporcionaram-se 507 g de composto P—7 (89% de rendimento) como um sólido. 1R RMN (300 MHz, DMSO-d6) 7,59 (d,J=7, 5Hz, 1H) , 7,40- 7,28(m, 5H), 6,28(d, J=7,5Hz, 1H), 5,21(d, J=5,4Hz, 1H), 5,12(d, J=10,8Hz, 1H), 5,07(d, J=10,8Hz, 1H) , 4,83(t, J= 5,7 Η z, 1H), 3,9 7(dd, J=2,4, 14,1Hz, 1H), 3,79(s, 3H), 3,70(dd, J= 9,0, 14,4Hz, 1H) , 3,65-3,50(m, 1H) , 3,40-3,28 (m, 1H), 3,26-3,14(m, 1H). g) Sintese de 1-(2,2-di-hidroxietil)-4-oxo-3-[(fenilmetil)-oxi]-1,4-di-hidro-2-piridinocarboxilato de metilo (composto P-8). A uma mistura de 507 g do composto P-7 (1,0 eq.) em 5,07 L de MeCN, 5,07 L de H20 e 9,13 g de AcOH (0,1 eq.) adicionaram-se 390 g de NaI04 (1,2 eq.) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h. Após adição de 1,52 L de Na2S203 aq. a 10%, a mistura foi concentrada e arrefecida a 10°C. Por filtração, lavagem com H20 e secagem, proporcionaram-se 386 g de composto P-8 (80% de rendimento) como um sólido. ΤΗ RMN (300 MHz, DMSO-d6) 7,62 (d<7=7,5Hz, 1H) , 7,42-7,30 (m, 5H), 6,33(d, J= 6,0 Η z, 2H), 6,29(d, J=7,5Hz, 1H), 5,08(s, 2H), 4,95-4,85(m, 1H), 3,80(s, 3H), 3,74(d, J=5,l Hz, 2H). h) Sintese de (4R,12aS)-4-metil-7-[(fenilmetil)oxi]-3,4,12,12a-tetra-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b]-[1,3]oxazina-6,8-diona (Composto P-9).

Após a dissolução de uma mistura de 378 g do composto P-8 23 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ (1,0 eq.) em 3,78 L de MeOH por aquecimento, a solução foi concentrada. Ao resíduo juntaram-se 1,51 L de tolueno e a mistura foi concentrada. Ao resíduo juntaram-se 1,89 L de tolueno, 378 mL de AcOH e 137 g de (R) -3-amino-butan-l-ol (1,3 eq.) e a mistura foi aquecida a 90°C, agitada a 90°C durante 2,5 h e concentrada. Ao resíduo juntaram-se 1,89 L de tolueno e a mistura foi concentrada. O resíduo foi extraído com 3,78 L e 1,89 L de CHCI3 e lavou-se com 2x1,89 L de H2O. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. Ao resíduo juntaram-se 1,89 L de EtOAc e a mistura foi concentrada. Após adição de 1,89 L de EtOAc, por filtração, lavagem com 1,13 L de EtOAc e secagem, proporcionaram-se 335 g de composto P-9 (83% de rendimento) como um sólido. RMN (300 MHz, CDCI3) 7, 70-7 ,58(m, 2H) > O 1 CM m, 3H) 7, 14 (d, J=7,5Hz, 2H), 6, 47 (d, <7=7, 5Hz, 1H), 5,35(d, J=10 , 2Hz, 1H ) , 5 >,28 (d, J= dO, 2Hz, 1H) , 5, 12(dd, J= 3 ,9, 6, 3Hz, 1H) , 5, 05-4, 90 (m, 1H) , 4,07 (dd, J= =3,9, 13,5Hz, 1H), 4, O O 1 U) > 86 (m, 3H) , 2 ,23-2,06(m, 1H), 1,48 ( [ddd, J=2,4, 4 ,5, 13, , 8Hz, 1H) , 1, 30 (d, J= 6,9Hz, 3H) . i) Síntese de (4R,12aS)-9-bromo-4-metil-7-[(fenilmetil)oxi]-3, 4, 12,12-tetra-hidro-2fí-pirido [1' ,2' : 4, 5]pirazino [2,2b]-[l, 3] -oxazina-6,8-diona (Composto P-10). A uma suspensão de 332 g de composto P-9 (1,0 eq.) em 1,66 L de NMP adicionaram-se 191 g de NBS (1,1 eq.) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h. Após adição de 1,26 L de H2O, a mistura foi agitada durante 30 min. Após adição de 5,38 L de H2O e maturação da mistura a 10°C durante 30 min e a 5°C durante 1 h, por filtração, lavagem com 1,33 L de H20 fria e secagem, proporcionaram-se 362 g de composto P-10 (89% de rendimento) como um sólido. ΤΗ RMN (300 MHz, CDCI3) 7,69-7, 63 (m,2H), 7,59(s, 1H) , 7,38 7,24(m, 3H), 5,33(d, J=10,2Hz, 1H) , 5,25(d, J=9,9Hz, 1H) , 5,12(dd, J=3,9, 5,7Hz, 1H), 5,05-4,90(m, 1H), 4,ll(dd, J=3,9, 13,2Hz, 1H), 4, 02-3,88 (m, 3H) , 2,21-2,06(m, 1H) , l,49(ddd, J= 2,4, 4,5, 14,1Hz, 1H), l,31(d, J=6,9Hz, 3H) . j) Síntese de (4R,12aS)-IV-[(2,4-difluorofenil)metil]-4-metil-6,8-dioxo-7-[(fenilmetil)oxi]-3,4,6,8,12,12-hexa-hidro-2H-pirido[l' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazina-9-carboxamida (Composto P-ll).

Sob atmosfera de monóxido de carbono, uma mistura de 33,5 g 24 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ de composto Ρ-10 (1,0 eq.), 34,8 mL de i-Pr2NEt (2,5 eq.), 14.3 mL de 2,4-difluorobenzilamina (1,5 eq.) e 4,62 g de Pd(PPh3)4 (0,05 eq.) em 335 mL de DMSO foi agitada a 90°C durante 5,5 h. Após arrefecimento, o precipitado foi filtrado e lavado com 50 mL de 2-propanol. Após adição de 502 mL de H2O e 670 mL de AcOEt ao filtrado, a camada orgânica foi lavada com 335 mL de HC1 aq. 0,5N e 335 mL de H2O e a camada aquosa foi extraída com 335 mL de AcOEt. As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. Ao resíduo juntaram-se 150 ml de 2-propanol e a mistura foi concentrada. Após a adição de 150 mL de 2-propanol, por concentração, arrefecimento a 20°C e filtração, obtiveram-se cristais brutos do composto P—11. Após dissolução dos cristais brutos em 380 ml de acetona por aquecimento, o precipitado foi filtrado e o filtrado foi concentrado. Após adição de 200 mL de EtOH, por concentração, adição de 150 mL de EtOH, concentração, arrefecimento e filtração, obtiveram-se cristais brutos do composto P—11. Após dissolução dos cristais brutos em 450 ml de acetona por aquecimento, a solução foi concentrada. Ao resíduo juntaram-se 150 ml de 2-propanol e a mistura foi concentrada (duas vezes). Após arrefecimento do resíduo, por filtração, lavagem com 2-propanol e secagem, proporcionaram-se 34.3 g do composto P-ll (84% de rendimento) como um sólido. ΧΗ RMN (300 MHz, CDC13) 10,40 (t»T=6, 0Hz, 1H) , 8,35(s, 1H) , 7,66-7,58(m, 2H), 7,42-7,24(m, 5H), 6,78-6,74(m, 2H), 5,30(d, J= 9,9Ηz, 1H), 5,26(d, J=10,2Hz, 1H) , 5,15 (dd, J=3,9, 5,7Hz, 1H), 5, 05-4, 90 (m, 1H), 4,64(d, J=5,4Hz, 2H) , 4,22(dd, J=3,9, 13,5, 1H), 4,0 9(dd, J=6,0, 13,2Hz, 1H) , 4, 02-3, 88(m, 2H) , 2,24-1,86(m, 1H), l,50(ddd, J=2,4, 4,5, 14,1Hz, 1H), l,33(d, J=7,2Hz, 3H). k) Síntese de (4.R, 12aS)-N-[(2,4-difluorofenil)metil]-7-hidroxi-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4, 5] — pirazino[2,1-b][1,3]oxazina-9-carboxamida (Composto la).

Sob atmosfera de hidrogénio, uma mistura de 28,0 g de composto P-ll (1,0 eq.) e 5,6 g de Pd-C a 10% em 252 mL de THF e 28 mL de MeOH foi agitada durante 1 h. Depois, o precipitado (Pd-C) foi filtrado e lavado com 45 mL de THF, juntaram-se 5,6 g de Pd-C a 10% e a mistura foi agitada durante 1,5 h sob atmosfera de hidrogénio. Depois o Pd-C foi separado por filtração e lavado com 150 mL de CHCls/MeOH (9/1) e o filtrado foi concentrado. Após dissolução do 25 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ resíduo em 1,38 L de EtOH por aquecimento, a solução foi gradualmente arrefecida até temperatura ambiente. Após filtração, o filtrado foi concentrado e arrefecido. Por filtração, lavagem com EtOH e secagem, proporcionaram-se 21,2 g do composto la (92% de rendimento) como um sólido. RMN (300 MHz, DMS0-d6) 12,51(s, 1H) , 10,36 (t</=5, 7Hz, 1H) , 8,50 (s, 1H), 7,39(td, J=8,7, 6,3Hz, 1H) , 7,24(ddd, J=2,6, 9,5, 10,8Hz, 1H), 7,12-7,00(m, 1H) , 5,44(dd, J=3,9, 5,7Hz, 1H), 4, 90-4, 70 (m, 1H), 4,65-4,50 (m, 1H), 4,54 (d, J=5,lHz, 2H), 4,35(dd, J=6,0, 13,8Hz, 1H), 4,10-3,98(m, 1H), 3,96-3,86(m, 1H), 2,10-1,94(m, 1H), l,60-l,48(m, 1H), l,33(d, J=6,9Hz, 3H). 1) Síntese de ( 4R, 12aS) -N- [ (2,4-dif luorof enil) metil ]-7-hidroxi-4-metil-6, 8-dioxo-3, 4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2i7-pirido [1' , 2 ' : 4, 5] — pirazino[2,1-b][1,3]oxazina-9-carboxamida, sal de sódio (Composto lb).

Após dissolução de 18,0 g de composto la (1,0 eq.) em 54 mL de EtOH por aquecimento, seguido de filtração, juntaram-se 21,5 mL de NaOH aq. 2N (1,0 eq.) à solução a 80°C. A solução foi gradualmente arrefecida até temperatura ambiente. Por filtração, lavagem com 80 mL de EtOH e secagem, proporcionaram-se 18,8 g do composto lb (99% de rendimento) como um sólido. XH RMN (300 MHz, DMSO-d6) 10, 70 (ty7=6, 0Hz, 1H) , 7,89(s, 1H), 7, 40-7,30 (m, 1H) , 7,25-7,16(m, 1H) , 7, 06-6, 98 (m, 1H) , 5,22-5,12(m, 1H), 4, 87-4, 74(m, 1H) , 4,51(d, J=5,4Hz, 2H), 4, 35-4, 25(m, 1H) , 4,16(dd, J=l,8, 14,1Hz, 1H) , 4, 05-3,90 (m, 1H), 3,86-3, 74 (m, 1H) , 2,00-l,72(m, 1H) , 1,44-1,32(m, 1H) , 1,24(d, J=6,9Hz, 3H).

Exemplo 1: metilcarbonato de {[(4R, 12aS)-9-({[(4-difluoro-fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6, 8-dioxo-3, 4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' ;4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo

a) Metilcarbonato de clorometilo. 26 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

Cloridocarbonato de clorometilo (3 ml, 33,7 mmol) foi dissolvido em diclorometano (10 mL) e arrefecido a 0°C. Juntou-se metanol (1,36 ml, 33,7 mmol) gota a gota, seguido de piridina (2,73 mL, 33,7 mmol) gota a gota. A suspensão branca foi agitada a 0°C, deixou-se aquecer até temperatura ambiente e agitou-se durante 14 horas. A suspensão foi neutralizada com água, diluida com ácido cítrico aquoso, extraída com diclorometano, lavada com bicarbonato de sódio, salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar metilcarbonato de clorometilo como um óleo incolor límpido. ΤΗ RMN (CDC13) 5, 72 (s, 2H) , 3,96(s, 3H) . b) Metilcarbonato de iodometilo.

Metilcarbonato de clorometilo (2,05 g, 16,46 mmol) foi dissolvido em acetona, juntou-se iodeto de sódio (3,70 g, 24,69 mmol) e a reacção foi aquecida a 40°C durante 15 horas. A suspensão amarela foi deixada a arrefecer até temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida, diluída com água e tiossulfato de sódio aquoso, extraída com diclorometano, lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio, e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar metilcarbonato de iodometilo como um óleo amarelo límpido. 1R RMN (CDCI3) 5, 92 (s, 2H) , 3,93(s, 3H) . c) Metilcarbonato de {[(4R, 12aS)-9-({[(2, 4-difluorofenil)-metil]-amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[l' ,2' : 4,5]pirazino [2,1-b] [1, 3] oxazin-7-il]xi)}metilo. (4R,12aS)-N-[(2,4-difluorofenil)metil]-7-hidroxi-4-metil-6,8-dioxo-3,4, 6,8,12,12a-hexa-hidro-2fí-pirido [1' ,2' : 4, 5] pirazino-[2,1-jb] [ 1,3] oxazina-9-carboxamida, sal de sódio (100 mg, 0,227 mmol) e carbonato de potássio (94 mg, 0,680 mmol) foram suspensos em água e juntou-se hidrogenossulfato de tetra-butilamónio (77 mg, 0,227 mmol) seguido de diclorometano. A agitação durante 5 min proporcionou uma solução bifásica límpida. Juntou-se metilcarbonato de iodometilo (196 mg, 0,906 mmol) como uma solução em diclorometano. A agitação durante 3 horas proporcionou uma reacção completa. A mistura reaccional foi diluída com água, diclorometano, extraída com diclorometano, lavada com bicarbonato de sódio, salmoura, seca sobre sulfato de sódio e purificada por cromatografia em sílica-gel (gradiente de eluição de 1-12% de metanol/dicloro- 27 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ metano). Ο isolado foi redissolvido em acetato de etilo e lavado quatro vezes com água e duas vezes com salmoura, e seco sobre sulfato de sódio. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto em titulo como um sólido branco. ΧΗ RMN (CDC13) 10,2 4 (m, 1H) , 8,38(s, 1H) , 7,28(m, 1H) , 6,77 (m, 2H), 5,79(m, 2H) , 5,16(m, 1H) , 4,97(m, 1H) , 4,56(d, J=6Hz, 2H), 4,25(dd, J=13,2, 3,6Hz, 1H), 4,13(m, 1H), 3,92(m, 2H), 3, 76 (s, 3H) , 2, 13 (m, 1H) , l,46(m, 1H) , l,29(d, J=7,2Hz, 3H). ES+MS: 508 (M+l).

Exemplo 2: 2-(metiloxi)etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9- ({[(2,4-difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4, 6,8, 12,12a-hexa-hidro-2H-pirido [1' ,2' : 4, 5] piráiao [2,1-b] - [l,3]oxazin-7-il]oxi}metilo

O composto em titulo foi preparado a partir de 2-(metiloxi)etilcarbonato de iodometilo (59 mg, 0,227 mmol) (preparado de maneira similar à do Exemplo 1), (4R, 12aS)-N- [(2,4-difluorofenil)metil]-7-hidroxi-4-metil-6,8-dioxo-3, 4, 6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido [1' ,2' : 4, 5]pirazino [2, lj-b [1,3]oxazina-9-carboxamida, sal de sódio (50 mg, 0,113 mmol), carbonato de potássio (47 mg, 0,340 mmol) e hidrogenossulfato de tetrabutilamónio (39 mg, 0,113 mmol), utilizando um processo similar ao descrito no Exemplo 1. ΧΗ RMN (CDCI3) 10,32 (m, 1H) , 8,37(s, 1H) , 7,31(m, 1H) , 6,77(m, 2H), 5,83(m, 2H) , 5,16(m, 1H) , 4,92(m, 1H) , 4,57(d, J=6Hz, 2H), 4,29-4,23(m, 3H), 4,16(m, 1H), 3,93(m, 2H), 3,62-3,57(m, 2H), 3,32(s, 3H) , 2,13(m, 1H) , l,46(m, 1H) , l,30(d, J=7,2Hz, 3H). ES+MS: 552 (M+l).

Exemplo 3: 2-hidroxietilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[ (2,4- difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo- 3,4, 6,8, 12,12a-hexa-hidro-2H-pirido [1' ,2' : 4, 5]piráiao [2,1-b] - [1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo 28 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ

a) 2-[(fenilmetil)oxi]etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({ [ (2,4-difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo- 3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' : 4,5] pirazino [2, lj-k [1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo. O composto em titulo foi preparado a partir de 2-[(fenil-metil)oxi]etilcarbonato de iodometilo (314 mg, 0,933 mmol) (preparado de maneira similar à do Exemplo 1), (4R,12aS)-N- [(2,4-difluorofenil)metil]-7-hidroxi-4-metil-6,8-dioxo-3,4, 6,8, 12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' : 4, 5]piràiao [2,1-b] -[ 1,3]oxazina-9-carboxamida, sal de sódio (103 mg, 0,233 mmol), carbonato de potássio (97 mg, 0,700 mmol), e hidrogenossulfato de tetrabutilamónio (79 mg, 0,233 mmol), utilizando um processo similar ao descrito no Exemplo 1. ΧΗ RMN (CDCls) 10,23(m, 1H) , 8,36(s, 1H) , 7, 33-7, 23(m, 6H) , 6,78(m, 2H), 5,84(m, 2H) , 5,13(m, 1H) , 4,88(m, 1H) , 4,57- 4,51(m, 4H) , 4,3 0(m, 2H), 4,21(m, 1H) , 4,10(m, 1H) , 3,88(m, 2H), 3, 72-3,66 (m, 2H) , 2,08(m, 1H) , l,40(m, 1H) , l,25(d, J=6,8Hz, 3H) . ES+MS: 628 (M+l). b) 2-hidroxietilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluoro- fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7- il]oxi}metilo. 0 produto preparado tal como descrito no passo (a) acima (125 mg, 0,199 mmol) foi dissolvido numa mistura de acetato de metanol/acetato de etilo e juntou-se paládio sobre carbono a 10% em peso (85 mg) sob uma atmosfera de azoto. A mistura reaccional foi agitada a 1 atm de hidrogénio e depois a 60 psi de hidrogénio durante 14 horas. Juntou-se ácido acético (1 mL) e a mistura reaccional foi agitada a 45 psi durante 8 horas. A mistura foi filtrada através de celite e concentrou-se sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em gel de sílica proporcionou o composto em titulo como um sólido branco. 29

ΕΡ 2 320 908/PT

1,49(m, 1H), 1,33(d, J=7,2Hz, 3H). ES+MS: 538 (M+l).

Exemplo 4: 2-(fosfonooxi)etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9- ({[(2,4-difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3, 4, 6, 8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido [1' ,2' : 4, 5] piráiao [2,1-b] -[1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo

a) 2-({bis[(fenilmetil)oxi]fosforil}oxi)etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]— pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo.

Adicionou-se N,N-diisopropil-fosforamidite de dibenzilo a uma mistura de 2-hidroxietilcarbonato de {[(4R,12aS)—9—({ [ (2,4 — difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4, 6,8, 12,12a-hexa-hidro-2H-pirido [1' ,2' :4,5]piráno[2,1-b]-[1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo (Exemplo 3) (43 mg, 0,080 mmol) e tetrazole (67 mg, 0,960 mmol) em diclorometano à temperatura ambiente e agitou-se durante 14 horas. A mistura reaccional foi arrefecida num banho de gelo-água, juntou-se m-CPBA (110 mg, 0,640 mmol) cuidadosamente e a mistura foi agitada durante 30 minutos deixando o banho de gelo expirar. Juntou-se uma solução de tiossulfato de sódio, e a mistura foi extraída com diclorometano, lavada com solução de bicarbonato de sódio e salmoura, e seca sobre sulfato de sódio. A purificação por cromatografia em gel de sílica produziu o composto em título como um sólido branco.

30 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ b) 2-(fosfonooxi)etilcarbonato de { [(4R,12aS)-9-({ [ (2,4- difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3, 4, 6,8, 12, 12a-hexa-hidro-2H-pirido [ 1' ,2' : 4,5] pirazino [2, ljb [1.3] oxazin-7-il]oxi}metilo. 0 produto preparado tal como descrito no passo (a) acima (52 mg, 0,065 mmol) foi dissolvido em metanol e juntou-se paládio sobre carbono a 10% em peso (25 mg) e a mistura reaccional foi agitada sob 1 atm de hidrogénio durante 30 minutos. A mistura foi filtrada através de celite e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar o composto em título como um sólido branco. ΤΗ RMN (metanol-d4/CDCl3) 10,19(s largo, 1H) , 8,28(s largo, 1H) , 7,32(m, 1H) , 6,70(m, 2H) , 5,64(s largo, 2H) , 5,13(s largo, 1H) , 4,81(s largo, 1H) , 4, 48-3, 40(m, 10H) , 2,03(m, 1H), 1,40(m, 1H), l,21(m, 3H). ES~MS: 616 (M-l).

Exemplo 5: 2-(4-morfolinil)etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9- ({[(2,4-difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]piràno[2,1-b]- [1.3] oxazin-7-il]oxi}metilo, sal de ácido clorídrico r?

a) 4-nitrofenilcarbonato de clorometilo.

Juntou-se N-metil-morfolina (1,24 mL, 11,24 mmol) gota a gota a uma solução de 4-nitrofenol (1,56 g, 11,24 mmol) em diclorometano a 0°C, seguido de adição gota a gota de cloridocarbonato de clorometilo (1 mL, 11,24 mmol) e a mistura foi agitada durante 14 horas a temperatura ambiente. A mistura reaccional foi diluída com uma solução de ácido cítrico, extraiu-se com diclorometano, lavou-se com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio, salmoura, e secou-se sobre sulfato de sódio, para se obter o composto em título como um óleo amarelo. ΤΗ RMN (CDC13) 8,29 (m, 2H) , 7, 40 (m, 2H) , 5,82(s, 2H) . 31

ΕΡ 2 320 908/PT b) 4-nitrofenilcarbonato de iodometilo.

Suspenderam-se 4-nitrofenilcarbonato de clorometilo (2,47 g, 10,67 mmol) e iodeto de sódio (1,76 g, 11,73 mmol) em acetona e aqueceu-se durante a noite a 45°C. A suspensão amarela foi deixada arrefecer até temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida, diluída com água e tiossulfato de sódio aquoso, extraída com diclorometano, lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida para obter o composto em título como um óleo amarelo límpido. 1R RMN (CDC13) 8,30 (ddy7=7, 2, 2,4Hz, 2H) , 7,42(dd, J= 6,8, 2Hz, 2H), 6,06(s, 2H) . c) 4-nitrofenilcarbonato de { [(4R, 12aS)-9-({[(2,4-difluoro-fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi Jmetilo. O composto em título foi preparado a partir de (4R,12aS)-N-[(2,4-difluorofenil)metil]-7-hidroxi-4-metil-6,8-dioxo-3, 4, 6, 8, 12, 12a-hexa-hidro-2H-pirido [1' ,2' : 4, 5] piráiao [2, 1-b] -[1,3]oxazina-9-carboxamida, sal de sódio (1,8 g, 4,29 mmol), 4-nitrofenilcarbonato de iodometilo (2,77 g, 8,58 mmol), carbonato de potássio (1,78 g, 12,88 mmol) e hidrogenossulfato de tetrabutilamónio (1,46 g, 4,29 mmol) de um modo similar ao descrito no Exemplo 1, etapa c. RMN (CDC1 3) 10,17(m, \—1 8,37(s, 1H) , 7, 40(m, 2H) 7, 30 (m, 1H) , 6, 78 ( m, 2H), 5,97 (d , J= 6,4 Hz, 1H) , 5, 92(d, J= 6,4Hz, n 5-1 ΟΊ \—1 LO m, 2H), 4 ,89(m, 2H), 4, 59 (m, 2H) , 4,22(m, 1H :), 4, 13 (m, \—1 3,93(m, CM \—1 , 12(m, \—1 1, 40 (m, 1H), 1, 29 (m, 3H) . ES+MS: 615 (M+l) • d) 2-(4 t-morf olinil )etilcarbonato de {[(4R,12a 00 1 LO -({[(2,4- difluorofenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo- 3,4, 6,8, 12,12a-hexa-hidro-2H-pirido [1' , 2 ' : 4, 5]piráiao [2, 1-b] - [1,3]oxazin-7-il]oxiJmetilo, sal de ácido clorídrico.

Uma mistura do intermediário preparado conforme descrito no passo b (425 mg, 0,692 mmol), 2-(4-morfolinil)etanol (excesso), trietilamina (0,29 mL, 2,08 mmol) e DMAP (84 mg, 0,692 mmol) em acetonitrilo foi agitada a refluxo durante várias horas. A mistura reaccional foi arrefecida e concentrada sob pressão reduzida, diluída com água e diclorometano, e extraída. Os extractos orgânicos combinados foram lavados com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio, 32 ΕΡ 2 320 908/ΡΤ salmoura, e secos sobre sulfato de sódio. A purificação por HPLC de fase inversa proporcionou o composto em epígrafe como sal de ácido trifluoroacético. Redissolveu-se o isolado em diclorometano e lavou-se a camada orgânica com uma solução de bicarbonato de sódio. Secou-se sobre sulfato de sódio e concentrou-se sob pressão reduzida. O intermediário preparado como acima descrito (124 mg, 0,204 mmol) foi dissolvido em dioxano e colocado num banho de gelo-água. Juntou-se ácido clorídrico (0,2 mL, solução IN) e a mistura reaccional foi agitada durante 15 minutos a temperatura ambiente. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para proporcionar o composto em título como um sólido branco. ΤΗ RMN (metanol-d4/ CDC13) 13,6 0 (m, 1H), 10,ll(m, 1H) , 8,36(s, 1H) , 7,32(m, 1H), 6,79 (m, 2H) , 5,84(m, 2H) , 5,18(m, 1H) , 4,91(m, 1H) , 4,74 (m, 1H) , 4,60 (m, 2H) , 4,35-4,10(m, 4H) , 3, 97-3,93 (m, 3H) , 3,51(m, 2H), 3,36(m, 2H), 3,04(m, 2H), 2,14(m, 1H), l,49(m, 1H), 1,35(m, 3H). ES+MS: 607 (M+l).

Exemplo 6: Farmacocinética em ratos

Ratos CD machos em jejum receberam o composto do Exemplo 2 como uma dose de suspensão oral (5 mg do equivalente de origem/kg em hidroxipropilmetilcelulose a 0,l%/Tween-80 a 0,1%) administrada através de uma agulha de entubação oral. As amostras de sangue (0,2 ml cada) foram retiradas a partir de uma cânula cirurgicamente implantada na veia femural, a intervalos de tempo de 24 h após administração da dose; todas as amostras foram retiradas usando seringas tratadas com EDTA. Cada amostra de sangue foi combinada com 0,02 ml de uma solução de inibidor de protease [ácido e-amino-n-capróico, benzamida.HC1 e fluoreto de 4-(2-aminoetil)benzenossulfonilo. HC1 em água] para inibir a conversão ex vivo do pró-fármaco para o equivalente de origem, sujeita a vórtice para mistura e centrifugada (4000xg, 4°C, 20 min) para colheita de plasma. As concentrações de pró-fármaco e composto de origem nas amostras de plasma foram quantificadas por análise LC/MS/MS. A área sob a curva de concentração plasmática-tempo foi estimada utilizando métodos de análise não compartimentais (WinNonlin Professional 4.1)

Lisboa, 2014-02-26

Claims

ΕΡ 2 320 908/PT 1/3 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula (I): oK·*'

em que: R1 é alquiloCi-Cs ou LR2; L é alquileno; R2 é a) hidroxi; b) alcoxi; c) OR3 em que R3 é P(O)(OH)2 ou alcoxi; d) heterociclilo opcionalmente substituído com oxo ou alquiloCi-Cs; e) C (O) OR1 em que R1 é H, alquiloCi-C8, ou XR2 em que X é alquileno e R2 é ariloC6-Ci0, heterociclilo, ou NR3R7 em que R3 e R7 são seleccionados independentemente a partir do grupo que consiste em H e alquiloCi-Cs; ou f) C (0) R10 em que R10 é heterociclilo opcionalmente substituído com XR11 em que R11 é heterociclilo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
2. Composto de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é alquiloCi-s·
3. Composto de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é LR2 em que L é alquilenoCi_8 e R2 é hidroxi ou alcoxi. 1 Composto de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 2 1, em que R1 é LR2 em que L é alquilenoCi-s e R2 é -OP(O) (OH)2 3 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
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5. Composto de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é LR2 em que L é alquilenoCi-s e R2 é heterociclilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
6. Composto de acordo com a reivindicação 1, seleccionado a partir do grupo que consiste em: metilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluorofenil)-metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]-oxi}metilo; 2-(metiloxi)etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluoro-fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo; 2-hidroxietilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluoro-fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3, 4,6, 8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo; 2-(fosfonooxi)etilcarbonato de {[(4R,12aS)-9-({[(2,4-difluoro-fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7-il]oxi}metilo; 2-(4-morfolinil)etilcarbonato de {[(4R, 12aS)-9-({[(2,4-difluoro-fenil)metil]amino}carbonil)-4-metil-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexa-hidro-2H-pirido[1' ,2' :4,5]pirazino[2,1-b][1,3]oxazin-7- il]oxi}metilo; e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
7. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 6, em que o sal f armaceuticamente aceitável é um sal cloridrato.
8. Composto como definido em qualquer das reivindicações 1 a 7, para utilização em terapia médica. ΕΡ 2 320 908/ΡΤ 3/3
9. Composto como definido em qualquer das reivindicações 1 a 7 para utilização no tratamento de uma infecção virai.
10. Composto para uso de acordo com a reivindicação 9, em que a infecção virai é uma infecção por HIV.
11. Utilização de um composto como definido em qualquer das reivindicações 1 a 7, no fabrico de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de uma infecção por vírus.
12. Utilização de acordo com a reivindicação 11, em que a infecção virai é uma infecção por HIV.
13. Composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto tal como definido em qualquer das reivindicações 1 a 7 juntamente com um transportador farmaceuticamente aceitável.
14. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 13, sob a forma de um comprimido, cápsula, líquido ou suspensão.
15. Composto para uso de acordo com a reivindicação 9 ou 10, o qual é administrado com outro agente terapêutico para tratar a infecção por HIV. Lisboa, 2014-02-26