PT2125794E - Compostos imidazolidinonilo aminopirimidina para o tratamento do cancro - Google Patents

Description

ΡΕ2125794 1 DESCRIÇÃO "COMPOSTOS IMIDAZOLIDINONILO AMINOPIRIMIDINA PARA O TRATAMENTO DO CANCRO"

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A Plkl pertence a uma pequena família de proteína quinases caracterizada por um domínio de fixação fosfo-serina/treonina conhecido como o domínio "polo-box". A Plkl desempenha um papel central na regulação do ciclo celular. De entre outras funções, pensa-se que a Plkl regula o início, a progressão, e a saída da mitose, o estádio em que as células cancerosas se dividem. Consequentemente, o bloquear da Plkl em células cancerosas previne a sua divisão ou mitose. Têm sido identificados agentes anticancerígenos potentes que interferem com a mitose, tais como os alcaloides da vinca (NAVELBINE®), taxóides (TAXOTERE®) e inibidores da topoisomerase II (ADRIAMICINA®) . 0 VELCADE® é um agente antineoplásico que inibe a proteosoma 26S. No entanto, estes fármacos causam consideráveis efeitos secundários em células normais, fora da fase de divisão. Os inibidores da Plkl alvejam especificamente células em divisão e podem ser capazes de evitar as toxicidades indesejáveis. 2 ΡΕ2125794

Os inibidores da Plkl são conhecidos na arte. Veja-se, por exemplo, a Patente WO 06/066172.

Adicionalmente, a Patente WO 06/021548 divulga certos análogos da di-hidropteridinona (por exemplo, Bi-2536) como inibidores da Plkl. Correntemente, a Bi-2536 está na fase II de ensaios clínicos mas tem uma taxa de depuração elevada (CL >1000 mL/min) e está limitada na dose pela mielossupressão no homem. Há ainda uma necessidade de outros compostos que inibam a Plkl que possuam potência ou propriedades farmacocinéticas melhoradas. Seria também vantajoso ter um inibidor da Plkl que pudesse ser doseado oralmente. A presente invenção proporciona novos compostos imidazolidinonilo aminopirimidina que se pensa terem utilização clínica para o tratamento do cancro através da inibição da Plkl. Acredita-se que alguns destes compostos têm uma potência melhorada em relação a compostos divulgados na Patente WO 06/066172. Adicionalmente, acredita-se que alguns destes compostos têm propriedades farmacociné-ticas melhoradas em relação à BI-2536. Além disso, devido à biodisponibilidade oral dos compostos da presente invenção que foram testados, acredita-se que alguns destes compostos poderão ser doseados oralmente.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção proporciona compostos com a fórmula (I): 3 ΡΕ2125794

Fórmula (I) em que: R1 é aminometilo, alquil (C1-C3) -aminometilo, di-alquil (Ci-C2) -aminometilo, N-etil-N-metil-aminometilo, 1-aminoetilo, 1-(alquil(Ci-C2)-amino)-etilo, 3,3,3-trifluoro-propilaminometilo, etinilo, 2-hidroxi-etoxilo, 2-hidroxi- etilaminometilo, 2-cianoetilaminometilo, morfolin-4-ilme-tilo, metoximetoximetilo, ciclopropilo, 1-azetidinil-meti-lo, 1-pirrolidinilmetilo, ou 1,3-dioxolan-2-ilo; R2 é hidrogénio ou halo; R3 é hidrogénio ou halo; com a condição de que pelo menos um de R2 e R3 seja hidrogénio; R4 é hidrogénio, metilo, ou halo; e é uma ligação simples que está tanto presente como ausente, ou 4 ΡΕ2125794 um seu sal farmaceuticamente aceitável. 0 presente requerimento divulga um método de tratamento do cancro seleccionado a partir do grupo consistindo de cancro do pulmão de não pequenas células, orofa-ringeo, esofágico, gástrico, melanoma, carcinoma epider-móide da pele, da mama, do ovário, do endométrio, colo-rectal, neuroglioma, glioblastoma, carcinoma da tiróide, cervical, pancreático, da próstata, hepatoblastoma e linfoma não-Hodgkin num mamífero, incluindo administrar a um mamífero, com necessidade de tal tratamento, uma quantidade eficaz de um composto com a fórmula (I) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável. A presente invenção também proporciona uma composição farmacêutica incluindo um composto com a fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um excipiente, veículo, ou diluente farmaceuticamente aceitável.

Esta invenção também proporciona um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização na preparação de um medicamento. Adicionalmente, esta invenção proporciona um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização na preparação de um medicamento para o tratamento do cancro em mamíferos, seleccionado a partir do grupo consistindo de cancro do pulmão de não pequenas 5 ΡΕ2125794 células, orofaríngeo, esofágico, gástrico, melanoma, carcinoma epidermóide da pele, da mama, do ovário, do endo-métrio, colo-rectal, neuroglioma, glioblastoma, carcinoma da tiróide, cervical, pancreático, da próstata, hepa-toblastoma e linfoma não-Hodgkin. Além disso, esta invenção proporciona uma composição adaptada para o tratamento de cancros seleccionados a partir do grupo consistindo de cancro do pulmão de não pequenas células, orofaringeo, esofágico, gástrico, melanoma, carcinoma epidermóide da pele, da mama, do ovário, do endométrio, colo-rectal, neuroglioma, glioblastoma, carcinoma da tiróide, cervical, pancreático, da próstata, hepatoblastoma e linfoma não-Hodgkin, incluindo um composto com a fórmula (I), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um ou mais excipientes, veiculos, ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis. A presente invenção também proporciona compostos com a fórmula:

em que: R1 é dimetilaminometilo, morfolinilmetilo, meto-ximetoximetilo, ciclopropilo, ou 1,3-dioxolan-2-ilo; 6 ΡΕ2125794 R2 é hidrogénio ou halo; R3 é hidrogénio ou halo; com a condição de que pelo menos um de R2 e R3 seja hidrogénio; R4 é hidrogénio, ou halo; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Os termos quimicos gerais utilizados nas fórmulas acima têm os seus significados usuais. Por exemplo, o termo "alquilo(C1-C3)" significa alquilos de cadeia linear ou ramificada tais como metilo, etilo, propilo, e isopropilo. "Alquilo(C1-C2)" está incluído no significado de "alquilo (C1-C3)" e significa metilo, e etilo. 0 termo "halo" significa fluoreto, cloreto, brometo, e iodeto.

Será entendido pelo leitor perito que a maioria ou todos os compostos da presente invenção são capazes de formar sais. Os compostos da presente invenção são aminas, e, concordantemente, reagem com qualquer um de numerosos ácidos inorgânicos e orgânicos para formarem sais por adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis. Tais sais por adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis e a 7 ΡΕ2125794 metodologia vulgar para os preparar são bem conhecidos na arte. Veja-se, por exemplo, P. Stahl, et al., HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2002); S. M. Berge, et al., "Pharma-ceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 66, N°. 1, Janeiro de 1997. São preferidos os compostos com a fórmula (I) em que: a) R1 é dimetilaminometilo; b) R1 é metilaminometilo; c) R1 é aminometilo; d) R2 é hidrogénio; e) R3 é halo; f) R3 é fluoreto; g) R4 é halo; h) R4 é fluoreto; i) R1 é dimetilaminometilo, R2 é hidrogénio, R3 é fluoreto, e R4 é fluoreto; ΡΕ2125794 j) R1 é metilaminometilo, R2 é hidrogénio; R3 é fluoreto, e R4 é fluoreto; e k) R1 é aminometilo, R2 é hidrogénio, R3 é fluoreto, e R4 é fluoreto.

ESQUEMAS

Um perito habilidoso compreenderá que nem todos os substituintes nos compostos da presente invenção tolerarão certas condições reaccionais empregues para sintetizar os compostos. Estas espécies podem ser introduzidas num ponto conveniente na síntese, ou podem ser protegidas e depois desprotegidas conforme o necessário ou desejado. 0 perito habilidoso reconhecerá que os grupos protectores podem ser removidos em qualquer ponto conveniente da síntese dos compostos da presente invenção. Os métodos para introduzir e para remover grupos protectores de azoto e de oxigénio são bem conhecidos na arte; veja-se, por exemplo, Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3a Edição, John Wiley and Sons, New York, Capítulo 7 (1999) . Além disso, o perito habilidoso reconhecerá que em muitas circunstâncias, a ordem pela qual as espécies são introduzidas não é crítica. A ordem particular dos passos necessários para produzir os compostos da presente invenção pode ser dependente do composto particular a ser sintetizado, do composto de partida, e da relativa instabilidade das espécies substituídas. 9 ΡΕ2125794

Nos esquemas abaixo, todos os substituintes, a menos que indicado de outra forma, são como previamente definido e os reaqentes são bem conhecidos e reconhecidos na arte, ou exemplificados nas preparações e exemplos.

E feito reagir um composto 2-halopirimidina (1) com 1-(2-aminoetil)-2-imidazolidinona (2) ou l-(2-amino-etilo)-1,3-di-hidro-2H-imidazol-2-ona (3) para dar o composto (4) por via de uma reacção de deslocamento nucleofí-lico. Tais reacções são levadas a cabo num solvente adequado, tal como n-butanol, dioxano, e semelhantes. Geralmente, as reacções são levadas a cabo a temperaturas de desde cerca de 120 °C a 150 °C, utilizando um banho de óleo ou um reactor de micro-ondas. A estequiometria tipica para esta reacção é de cerca de 2 equivalentes das aminas (2) ou (3) ou 1 equivalente de (2) ou (3) na presença de um excesso de removedores de ácido, tais como, trietilamina ou di-isopropiletilamina.

Num passo opcional, é formado um sal farmaceu 10 ΡΕ2125794 ticamente aceitável de um composto (4). A formação de tais sais é bem conhecida e reconhecida na arte.

Como será prontamente entendido, os compostos (1) podem ser prontamente preparados por métodos similares aos aqui descritos com procedimentos que são bem conhecidos e estabelecidos na arte. Por exemplo, o composto (1) é preparado pelo acoplamento de um composto piridinilo opcionalmente substituído com um composto benzotiofenilo opcionalmente substituído por métodos de acoplamento de Suzuki. O resultante adutor de Suzuki é boronilado por métodos bem conhecidos na arte e acoplado adicionalmente a um halogeneto de pirimidina opcionalmente substituído por via de métodos de acoplamento de Suzuki. Da mesma forma, é reconhecido que os passos necessários para preparar o composto (1) podem ser levados a cabo por qualquer ordem, incluindo a reacção de um intermediário do composto (1) com o composto (2) ou (3) de forma a que uma posterior formação da ligação carbono-carbono, reacção de acoplamento, etc., proporcionem o composto (4). A presente invenção é adicionalmente ilustrada pelos exemplos e preparações seguintes. Estes exemplos e preparações são apenas ilustrativos e não têm a intenção de limitarem a invenção em qualquer forma. Os termos utilizados nos exemplos e preparações têm os seus significados normais, a menos que designado de outra forma. Os compostos dos exemplos abaixo foram designados utilizando o ChemDraw®, Versão 10. ΡΕ2125794 11 PREPARAÇÕES Preparação 1 2-Benzo [b] tiofen-7-il-4,4,5, 5-tetrametil-[1,2,3]dioxaborolano.

Combinaram-se num balão 7-bromo-benzo[b]tiofeno (426 mg, 2 mmol), bis(pinacolato)diboro (756 mg, 3 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (1:1) (81 mg, 0,1 mmol), acetato de potássio (294 mg, 3 mmol) em dimetilsulfóxido (DMSO) (10 mL). Fez-se borbulhar azoto através da mistura durante 5 minutos. Selou-se o balão e pôs-se este num banho de óleo e aqueceu-se a 100 °C durante 4 horas. Diluiu-se a mistura com clorofórmio/isopropanol (3/1) . Lavou-se a solução com cloreto de sódio aquoso saturado. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um residuo escuro. Purificou-se por cromatografia em coluna (de hexano até 20% de acetato de etilo em hexano) para se obter o composto do titulo (342 mg, 66%) na forma de um sólido incolor. MS (ES) m/z 261 [M+l]+.

Preparação 2 Ácido benzo[b]tiofeno-7-borónico.

Combinaram-se, num balão de Morton de 12 L equipado com um agitador mecânico, 7-bromobenzo[b]tiofeno 12 ΡΕ2125794 (300 g, 1,41 mmol) e borato de tri-isopropilo (403,6 g, 2,15 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (THF) (4 000 mL), e arrefeceram-se sob azoto num banho de gelo seco/acetona até -70 °C. Adicionou-se gota a gota n-butil-lítio (a 1,6 M em hexano, 714 g, 1,68 mmol) a uma taxa de forma a manter a temperatura interna inferior a -67,5 °C. Após a adição estar completada, deixou-se a mistura reaccional sob agitação a esta temperatura durante 1 hora. Removeu-se o banho de arrefecimento e adicionaram-se lentamente 4 L de água. Em seguida, adicionou-se HC1 concentrado (75 mL) até que o pH da solução fosse de cerca de pH = 2. Deixou-se a suspensão espessa sob agitação durante 1 hora. Adicionou-se suficiente NaOH aquoso a 5 N para ajustar o pH da mistura até cerca de pH = 12. Separaram-se as fases e guardou-se a fase aquosa. Diluiu-se a fase orgânica com 4 L de éter metil-terc-butílico e extraiu-se com 1 L de NaOH aquoso a 5 N. Separaram-se as fases. Combinou-se a fase aquosa com o extracto aquoso anterior. Lavou-se a fase aquosa com éter metil-terc-butilico adicional (4 L) . Separaram-se as fases e transferiram-se as fases aquosas para um balão de fundo redondo com 3 tubuladuras de 12 L equipado com um agitador mecânico. Arrefeceu-se a solução até +5 °C com um banho de água gelada. Adicionou-se HC1 concentrado lentamente até que o pH da solução fosse de cerca de pH = 2. Agitou-se a mistura durante 30 minutos e recolheu-se, por filtração, o sólido resultante. Enxaguou-se o sólido no funil duas vezes com 2 L de água e deixou-se secar ao ar durante 30 minutos. 13 ΡΕ2125794

Colocou-se o sólido numa estufa de vácuo a 50 °C e secou-se sob vácuo de um dia para o outro. Removeu-se a cor amarela tornando numa suspensão espessa o sólido secado com 2 L de n-heptano durante 30 minutos. Recolheu-se de novo o sólido por filtração, secou-se ao ar durante 30 minutos, e secou-se sob vácuo a 40 °C de um dia para o outro para proporcionar o composto do titulo (188,8 g, 75%) na forma de um sólido branco. RMN de 1R (400 MHz, CD3OD) δ: 7,86 (d, J = 8 Hz, 1H), 7, 49-7, 57 (m, 2H) , 7, 30-7, 39 (m, 2H).

Preparação 3 5-Bromometil-2-fluoro-4-iodo-piridina.

Combinaram-se, num balão, 2-fluoro-4-iodo-picolina (10,0 g, 42,19 mmol), N-bromosuccinimida (9,76 g, 54, 85 mmol), 2,2'-azo-bis-isobutironitrilo (3,46 g, 21,10 mmol) e CC14 seco (100 mL). Aqueceram-se a 70 °C sob azoto durante 16 horas. Arrefeceram-se até à temperatura ambiente. Diluiram-se com diclorometano e lavaram-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separaram-se as fases e secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio. Concentraram-se in vacuo para darem o produto em bruto. Purificaram-se por cromatografia em coluna (de 1% a 15% de acetato de etilo em hexano) para proporcionarem o composto do titulo (8,27 g, 62%). MS (EI) m/z 315 M+. 14 ΡΕ2125794

Preparação 4 4-(6-Fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-morfolina.

Combinaram-se, num balão, 5-bromometil-2-fluoro-4-iodo-piridina (6,13 g, 19,40 mmol), morfolina (3,38 g, 38, 80 mmol) e CH3CN seco (100 mL) sob azoto. Adicionou-se N, N-di-isopropiletilamina (6,76 mL, 38, 80 mmol, solução em THF a 2 M). Aqueceu-se a 81 °C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Diluiu-se com diclorometano e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre sulfato de magnésio. Após filtração, concentrou-se in vacuo para dar o composto do titulo em bruto 6,23 g (99,7%). MS (ES) m/z 323 (M+l]+.

Sintetizaram-se os seguintes compostos utilizando um procedimento similar ao da 4-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-morfolina com a amina apropriada.

Prep. Nome do Composto GC m/z M+ Comentários 5 (6-Fluoro-4-iodo-piridin- 280 dimetilamina (solu- 3-ilmetil)-dimetilamina ção a 2 M em THF) 6 Dietil-(6-fluoro-4-iodo- 308 dietilamina piridin-3-ilmetil)-amina 7 (6-Fluoro-4-iodo-piridin- 294 propilamina 3-ilmetil)-propilamina 15 ΡΕ2125794 (continuação)

Prep. Nome do Composto GC m/z Comentários 8 Etil-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-amina 280 etilamina (solução a 2 M em THF) 9 Etil-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-metil-amina 294 N-etilmetil-amina 10 2-[(6-Fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-amino]-etanol 296 2-etanol-amina 11 2-Fluoro-4-iodo-5- pirrolidin-l-ilmetil- piridina 306 pirrolidina 12 5-Azetidin-l-ilmetil-2- fluoro-4-iodo-piridina 292 ciclobutil-amina 13 (6-Fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-metil-amina 266 Purificado em fase normal em sílica após protecção de BOC

Preparação 14 Éster terc-butílico do ácido (6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-(3,3,3-trifluoro-propil)-carbâmico.

Adicionou-se, gota a gota e à temperatura ambiente, uma solução de 5-bromometil-2-fluoro-4-iodo-piridina 16 ΡΕ2125794 (0,315 g, 997 μπιοί) em acetonitrilo (2 mL) a uma solução de cloridrato de 3,3,3-trifluoropropilamina (298 mg, 1,99 mmol) e di-isopropiletilamina (521 pL, 2,99 mmol) em acetonitrilo (2 mL). Agitou-se a mistura de um dia para o outro. Adicionou-se à mistura di-isopropiletilamina (522 pL, 2,99 mmol) e dicarbonato de di-terc-butilo (1,088 g, 4,99 mmol) e agitou-se à temperatura ambiente durante 6 horas. Concentrou-se e purificou-se o produto por cromatografia em coluna em 80 g de gel de silica, eluindo com um gradiente desde 1:1 de hexano/diclorometano a 50% de acetato de eti-lo/l:l de hexano:diclorometano para dar o composto do titulo (813 mg) na forma de uma mistura a 1 para 1 com éster terc-butílico do ácido (3,3,3-trifluoro-propil) -carbâmico. MS (ES) m/z, 449 [M+l]+.

Sintetizou-se o seguinte composto utilizando um procedimento similar ao do éster terc-butilico do ácido (6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-(3,3,3-trifluoro-propil)-carbâmico.

Prep. Nome do Composto GC m/z M+ Comentários 15 Éster terc-butilico do 405 3-amino- ácido (2-Ciano-etil)-(6- propionitrilo fluoro-4-iodo-piridin-3- ilmetil)-carbâmico 17 ΡΕ2125794

Preparação 16 Éster terc-butílico do ácido [6—fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-piridin-3-ilmetil]-(3,3,3-trifluoro-propil)-carbâmico.

Desgaseificou-se uma suspensão de éster terc-butílico do ácido (6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-(3,3,3-trifluoro-propil)-carbâmico (600 mg, 1,3 mmol), acetato de potássio (262,8 mg, 2,7 mmol), bis(pinacolato)-diboro (407,9 mg, 1,6 mmol), e [1,1'-bis(difenilfosfino}-ferroceno]dicloropaládio(II) CH2CI2 (109,2 mg, 133,9 pmol) em DMSO (5 mL) . Aqueceu-se a mistura a 80 °C num vaso selado durante 4 horas. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a solução orgânica com três porções de água e uma porção de uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se, e evaporou-se. Carregou-se o produto em bruto numa coluna de carga de gel de sílica de 25 g com diclorometano e eluiu-se numa coluna de gel de sílica de 40 g com um gradiente de hexano para diclorometano e depois de diclorometano para acetato de etilo, para dar o composto do título (600 mg) na forma de um óleo escuro. O produto ainda continha éster terc-butílico do ácido (3, 3,3-trifluoro-propil)-carbâmico proveniente do passo anterior. Foi utilizado a seguir sem purificação adicional. GC (EI) m/z 448 M+. 18 ΡΕ2125794

Preparação 17 2-Fluoro-5-metoximetoxi-piridina.

Adicionou-se 6-fluoro-piridin-3-ol (3,5 g, 30,95 mmol) a uma suspensão de hidreto de sódio (1,49 g, 37,14 mmol) em dimetilformamida (20 mL). Agitou-se a mistura durante 1 hora. Adicionou-se éter clorometil-metílico (2 g, 25,0 mmol). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo e água. Lavou-se a fase orgânica com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secou-se a mistura sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vácuo até um óleo castanho. Purificou-se por cromatografia em coluna (10% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o composto do titulo (4,30 g, 88,4%) na forma de um óleo amarelo. RMN de (400 MHz, CDC13) δ: 3,48 (s, 3H) , 5,15 (s, 2H) , 6,85 (dd, J= 3,6 Hz, J= 8,8 Hz, 1H) , 7,47 (m, 1H) , 7,96 (m, 1H) .

Preparação 18 2-Fluoro-4-iodo-5-metoximetoxi-piridina.

Arrefeceu-se uma solução de 2-fluoro-5-metoxi-metoxi-piridina (4,1 g, 26,1 mmol) em THF (60 mL) até -75 °C. Adicionou-se terc-butil-lítio (a 1,7 M em pentano, 30,4 19 ΡΕ2125794 mL, 51,66 mmol) ao longo de um período de 30 minutos. Agitou-se a mistura durante meia hora adicional. Adicionou-se iodo (9,8 g, 38,61 mmol, dissolvido em 60 mL de tetra-hidrofurano). Agitou-se durante 1 hora após a adição estar completada. Deixou-se a temperatura subir até à temperatura ambiente ao longo de 1 hora enquanto se mantinha a agitação. Tratou-se a mistura com água. Extraiu-se a solução com acetato de etilo três vezes. Lavou-se a fase orgânica com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secou-se a mistura sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um sólido castanho. Triturou-se o sólido castanho com hexano. Filtrou-se para proporcionar o composto do título (3,9 g, 52,8%) na forma de um sólido castanho. RMN de 1ii (400 MHz, CDC13) δ: 3,53 (s, 3H), 5,23 (5, 2H), 7,39 (d, J= 4,0 Hz, 1H), 7,96 (d, J= 1,6 Hz, 1H).

Preparação 19 6-Fluoro-4-iodo-piridin-3-ol.

Adicionou-se HC1 (a 3 M em água, 31 mL, 93,01 mmol) a uma solução de 2-fluoro-4-iodo-5-metoximetoxi-piridina (3,9 g, 13,78 mmol) em THF (20 mL) . Agitou-se a mistura a 60 °C durante 3 horas. Arrefeceu-se a mistura. Ajustou-se o pH até 7 com a adição lenta de uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Extraiu-se a solução com acetato de etilo três vezes. Lavou-se a fase 20 ΡΕ2125794 orgânica com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secou-se a mistura sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo para proporcionar o composto do titulo (3,2 g, 97,18%) na forma de um sólido amarelo. MS (EI) m/z 240 [M+l]+.

Preparação 20 2-Fluoro-4-iodo-5-[2-(tetra-hidro-piran-2-iloxi)-etoxi] - piridina.

Adicionou-se 6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ol (0,5 g, 2,09 mmol) a uma suspensão de hidreto de sódio (dispersão a 60% em óleo mineral, 0,1 g, 2,51 mmol) em dimetilformamida (6 mL) . Agitou-se a mistura durante 1 hora. Adicionou-se 2-(2-bromo-etoxi)-tetra-hidro-pirano (0,51 g, 2,34 mmol). Agitou-se a solução à temperatura ambiente de um dia para o outro. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo e água. Lavou-se a fase orgânica com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e água. Secou-se a mistura sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo para dar um óleo amarelo. Purificou-se o óleo por cromatografia em coluna (10% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o composto do título (0,58 g, 75,5%) na forma de um óleo amarelo claro. MS (EI) m/z 368 [M+l]+. 21 ΡΕ2125794

Preparação 21 4-Cloro-3-trimetilsililetinil-piridina.

Adicionou-se, a uma solução de 4-cloro-3-iodo-piridina (2,0 g, 8,3 mmol) em tolueno (20 mL), trife-nilfosfina (0,219 g, 0,83 mmol), iodeto de cobre (0,079 g, 0,41 mmol) e acetato de paládio(II) (0,093 g, 0,41 mmol), adicionou-se trietilamina (3,49 mL, 25 mmol) gota a gota à temperatura ambiente, seguida da adição de trimetilsilil-acetileno (1,65 mL, 11,69 mmol) à temperatura ambiente com agitação contínua. Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 2 horas. Concentrou-se a mistura reaccional pela evaporação do tolueno sob vácuo. Extraiu-se o composto (quase puro) triturando-o com hexano e depois decantando a fase de hexano 4 a 5 vezes. Evaporou-se o hexano sob vácuo e secou-se para se obter o composto puro (1,68 g, 96%) . RMN de (400 MHz, CDC13) δ: 8,677 (s, 1H), 8,418 (s, 1H) , 7,338 (d, J= 2,6 Hz, 1H), 0,286 (s, 9H). MS (ES) m/z 210 [M+l]\

Preparação 22 Éster terc-butílico do ácido (6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-metil-carbâmico.

Combinou-se a mistura em bruto de (6-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilmetil)-metil-amina (8 g, 30,07 mmol) com di-isopropiletilamina (10,49 mL, 60,14 mmol) em acetoni- 22 ΡΕ2125794 trilo seco (50 mL) sob azoto. Adicionou-se dicarbonato de di-terc-butilo (13,13 g, 60,14 mmol) e agitou-se de um dia para o outro. Lavou-se a mistura com bicarbonato saturado, com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre MgSC>4. Após filtração, removeu-se o solvente orgânico até à secura para dar um produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna com de 5% a 25% de acetato de etilo em hexanos para dar o composto do titulo (8,24 g, 75%). MS (ES) m/z 367 [M+l]\

Preparação 23 1-(6-Fluoro-piridin-3-il)-etanol.

Adicionou-se brometo de metilmagnésio (a 3 M em éter, 12 mL, 36 mmol) a 0 °C sob azoto a uma solução 6-fluoro-piridino-3-carbaldeido (3 g, 24 mmol) em THF (20 mL) . Continuou a agitar-se a mistura de um dia para o outro à temperatura ambiente. Hidrolisou-se a mistura com HC1 a 1 N e seguiu-se a basificação com hidróxido de amónio diluído até pH ~9. Separou-se o produto com clorofór-mio/álcool isopropilico (3/1). Secou-se sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo amarelo. Purificou-se por cromatografia em coluna (10% de metanol em diclorometano) para dar o produto na forma de um óleo incolor (2,3 g, 68%). MS (ES) m/z 142 [M+l]+. 23 ΡΕ2125794

Preparação 24 2-Fluoro-5-(1-metoximetoxi-etil)-piridina.

Adicionou-se N,N'~di-isopropiletilamina e cloro-metoximetano a uma solução 1-(6-fluoro-piridin-3-il)-etanol (3,0 g, 21,3 mmol) em diclorometano a 0 °C. Continuou-se a agitação da mistura durante 30 minutos a 0 °C, depois de um dia para o outro à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura com clorofórmio/álcool isopropilico (3/1). Lavou-se a solução com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Esta foi secada sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um resíduo escuro. Purificou-se por cromatografia em coluna (hexano -» 20% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o produto na forma de um sólido incolor (3 g, 66%). MS (ES) m/z 186 [M+l]+.

Preparação 25 5-Azidometil-2-fluoro-4-iodo-piridina.

Combinou-se, num balão de fundo redondo, 5-bromo-metil-2-fluoro-4-iodo-piridina (0,45 g, 1,4 mmol), azeto de sódio (370 mg, 5,7 mmol), e éter 18-coroa (45 mg, 0,17 mml) em dimetilformamida (10 mL) . Agitou-se a mistura durante 4 horas à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reac-cional com clorofórmio, e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a 24 ΡΕ2125794 fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre MgSCg. Após filtração, evaporou-se o solvente orgânico in vacuo para dar um produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna "flash" (eluindo com 20% de acetato de etilo em hexano) para dar o composto do titulo (óleo incolor, 0,032 g, 82%). MS (ES) m/z 279 [M+l]+.

Preparação 26 (4-Cloro-piridin-3-il)-morfolin-4-il-metanona.

Combinou-se ácido 4-cloronicotínico (0,10 g, 6.0 mmol) e 1,1'-carbonildi-imidazole (0,97 g, 6,0 mmol) em THF seco (15 mL) . Agitou-se à temperatura ambiente sob azoto durante 90 minutos. Adicionou-se morfolina (1,58 mL, 18.0 mmol) e agitou-se à temperatura ambiente sob azoto durante 15 horas. Diluiu-se com diclorometano, lavou-se com uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio, e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separaram-se as fases e secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio. Concentrou-se in vacuo. Purificou-se o resíduo em bruto por cromatograf ia em coluna [de 5% a 25% de (10% de uma solução a 2 M de amoníaco/metanol em diclorometano)/diclorometano] para dar o composto do título (1,]7 g, 86%). MS (ES) m/z 227 [M+l]+. 25 ΡΕ2125794

Preparação 27 4-(4-Cloro-piridin-3-ilmetil)-morfolina.

Dissolveu-se (4-cloro-piridin-3-il)-morfolin-4-il-metanona (1,17 g, 5,17 mmol) em THF seco (10 mL) . Adicionou-se uma solução de BH3-Me2-S/THF (5 mL, 31,0 mmol) gota a gota, à temperatura ambiente sob azoto. Agitou-se à temperatura ambiente durante 15 horas sob azoto. Adicionou-se metanol (11,0 mL) muito lentamente, gota a gota. Aqueceu-se a 60 °C durante 3 horas, e arrefeceu-se até à temperatura ambiente in vacuo para proporcionar o composto do titulo (1,1 g, 100%). MS (ES) m/z 213 [M+l]+.

Preparação 28 5- [1,3]Dioxolan-2-il-2-fluoro-piridina.

Combinou-se, num recipiente pressurizado, 6-fluo-ro-piridino-3-carbaldeido (4 g, 32 mmol), etilenoglicol (3 g, 48 mmol), cloreto de cobre(II) di-hidratado (0,56 g, 3,2 mmol) e THF (10 mL) . Aqueceu-se a mistura a 100 °C durante 1 hora. Diluiu-se a mistura com clorofórmio-isopropanol (3:1, 100 mL) . Lavou-se a fase orgânica com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e com água. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo castanho. Purificou-se por cromatografia em coluna (20% de acetato de etilo em hexano) 26 ΡΕ2125794 para proporcionar o composto do título (2,1 g, 39%) na forma de um óleo amarelo pálido. MS (ES) m/z 170 [M+l]+.

Preparação 29 5 - [ 1,3]Dioxolan-2-il-2-fluoro-3-iodo-piridina.

Arrefeceu-se uma solução de 5-[1,3]dioxolan-2-il-2-fluoro-piridina (2,0 g, 11,8 mmol) em THF (20 mL) até -75 °C. Adicionou-se di-isopropilamida de lítio (solução a 2 M em THF, 6 mL, 12 mmol) ao longo de 30 minutos. Agitou-se a mistura durante 3 horas adicionais. Adicionou-se iodo (3,0 g, 11,8 mmol, dissolvido em 100 mL de THF). Agitou-se durante 2 horas após a adição estar completada. Adicionou-se água (100 mL) à mistura e deixou-se a temperatura subir até à temperatura ambiente ao longo de 1 hora enquanto se agitava. Tratou-se a mistura com uma solução aquosa saturada de tiossulfato de sódio (50 mL). Extraiu-se a solução com éter. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo castanho. Purificou-se por cromatografia em coluna (de hexano a 20% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o composto do título (2,1 g, 60%) na forma de um óleo amarelo. MS (ES) m/z 296 [M+l]+.

Sintetizou-se o composto seguinte utilizando um procedimento similar ao da 5-[1,3]dioxolan-2-il-2-fluoro-3-iodo-piridina. 27 ΡΕ2125794

Prep. Nome do Composto MS (ES) [M+l] + 30 2-Fluoro-3-iodo-5-(1-metoximetoxi-etil)-piridina 312

Preparação 31 5- [1,3]Dioxolan-2-il-2-fluoro-4-iodo-piridina.

Arrefeceu-se uma solução de 5-[1,3]dioxolan-2-il-2-fluoro-3-iodo-piridina (2,0 g, 6,8 mmol) em THF (20 mL) até -75 °C. Adicionou-se di-isopropilamida de lítio (a 2 M em THF, 3,4 mL, 6,8 mmol) ao longo de um período de 30 minutos. Agitou-se a mistura durante 3 horas adicionais. Adicionou-se água (100 mL) e deixou-se a temperatura subir até à temperatura ambiente ao longo de 1 hora enquanto se agitava. Extraiu-se a solução com éter. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo castanho. Purificou-se por cromatografia em coluna (de hexano a 15% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o composto do titulo (1,03 g, 51%) na forma de um óleo amarelo. MS (ES) m/z 296 [M+l]+.

Sintetizou-se o composto seguinte utilizando um procedimento similar ao da 5-[1,3]dioxolan-2-il-2-fluoro-4-iodo-piridina.

Prep. Nome do Composto MS (ES) [M+l]+ 32 2-Fluoro-4-iodo-5-(1-metoximetoxi-etil)-piridina 312 28 ΡΕ2125794

Preparação 33 1-(6-Fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-etanol.

Adicionou-se HC1 a 1 N (5 mL) a uma solução de 2-fluoro-4-iodo-5-(1-metoximetoxi-etil)-piridina (1 g, 3,2 mmol) em metanol (10 mL). Agitou-se a mistura de um dia para o outro. Diluiu-se a mistura reaccional com carbonato de sódio a 2 N. Separou-se o produto em clorofórmio. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo para dar o produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna (10% de metanol em diclorometano) para proporcionar o produto na forma de um sólido branco (0,75 g, 87%). MS (ES) m/z 268 [M+l]\

Preparação 34 5-(1-Azido-etil)-2-fluoro-4-iodo-piridina.

Adicionou-se azida de tetra-17-butilamónio a uma solução de trifenilfosfina (11 g, 42 mmol) e 1,4-ciclo-hexadieno-2,2-dicarbonitrilo,4,5-dicloro-3,6-dioxo- (9 g, 40 mmol) em diclorometano (150 mL) sob arrefecimento num banho de gelo. Adicionou-se depois 1-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-il}-etanol (6,7 g, 25,1 mmol) à solução acima. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Concentrou-se a mistura in vacuo até cerca de 50 mL. 29 ΡΕ2125794

Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna "flash" (de hexano a 20% de acetato de etilo em hexano como gradiente) para dar o produto alvejado na forma de um óleo incolor (5,7 g, 78%). MS (ES) m/z 293 [M+l]+.

Preparação 35 R-5-(1-Azido-etil)-2-fluoro-4-iodo-piridina.

Separou-se 5-(1-azido-etil)-2-fluoro-4-iodo-piri-dina (11,7 g) por cromatografia quiral (coluna Chiralpak® AS-H, 15:85 de álcool isopropílico/C7 a 270 nm) para dar R-1-(1-azido-etil)-4-fluoro-2-iodo-benzeno (3,82 g, 33%).

Preparação 36 1- (6-Cloro-piridin-3-il)-etilamina.

Agitou-se uma mistura de 1-(6-cloro-piridin-3-il)-etanona (5 g, 32,14 mmol) em tetra(isopropóxido) de titânio (18,27 g, 64,27 mmol) e amoníaco (160,7 mmol, a 2 M em MeOH) sob N2 durante 6 horas, à temperatura ambiente. Adicionou-se a esta mistura tetra-hidroborato de sódio (1,82 g, 48,21 mmol) e agitou-se de um dia para o outro. Parou-se a reacção com hidróxido de amónio e filtrou-se a mistura. Removeu-se o solvente do filtrado e extraiu-se o resíduo com diclorometano, lavou-se com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre Na2S04, 30 ΡΕ2125794 filtrou-se e removeu-se o solvente para se obter um óleo amarelo escuro (4,2 g) . MS (ES) m/z 157 [M+l]+.

Preparação 37 Éster terc-butílico do ácido [1-(6-cloro-piridin-3-il)- etil]-carbâmico.

Adicionou-se, a uma solução de l-(6-cloro-piridin-3-il)-etilamina (4,2 g, 26,82 mmol) em acetonitrilo (50 mL), di-isopropiletilamina (5,2 g, 40,23 mmol) e dicarbonato de di-terc-butilo (7,02 g, 32,18 mmol) e agitou-se a mistura de um dia para o outro. Lavou-se a mistura com NaHCCb saturado (200 mL) e extraiu-se em diclorometano, lavou-se com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secou-se sobre Na2S04. Purificou-se por cromatografia em coluna (de 5% a 20% de acetato de etilo em hexanos) para se obter um sólido branco (5,1 g). MS (ES) m/z 257 [M+l]+.

Preparação 38 Éster terc-butilico do ácido [1-(6-cloro-4-iodo-piridin-3- il)-etil]-carbâmico.

Adicionou-se terc-butil-lítio (35 mL, 59,6 mmol) a uma solução de éster terc-butilico do ácido [l-(6-cloro-piridin-3-il)-etil]-carbâmico (5,1 g, 19,87 mmol) em THF 31 ΡΕ2125794 (60 mL) sob N2 a -78 °C. Após 30 minutos, adicionou-se iodo (7,6 g, 29,8 mmol) em THF (20 mL) ao longo de 30 minutos a -78 °C. Agitou-se durante 1 hora e então amornou-se até à temperatura ambiente. Parou-se a reacção com água, extraiu-se em acetato de etilo com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre Na2S04. Purificou-se por cromatografia em coluna (de 5% a 20% de acetato de etilo em hexanos) para se obter 0 produto (1 g). MS (ES) m/z 383 [M+l]+.

Preparação 39 5- (1-Azido-etil)-2-fluoro-piridina.

Adicionou-se, num balão de 1 L mantido frio num banho de gelo, trifenilfosfina (27,9 g, 106,3 mmol), 1,4-ciclo-hexadieno-l,2-dicarbonitrilo, 4,5-dicloro-3,6-dioxo- (24,12 g, 106,3 mmol). Adicionou-se diclorometano lentamente com agitação (150 mL) . Adicionou-se à solução escura azida de tetra-N-butilamónio (30,23 g, 106,3 mmol) lentamente, seguida de 1-(6-fluoro-piridin-3-il)-etanol (10 g, 70,85 mmol) dissolvido em diclorometano (10 mL). Removeu-se o balão do banho de gelo e agitou-se à temperatura ambiente durante 1 hora. Removeu-se o solvente num evaporador rotativo e purificou-se por cromatografia em fase normal (de 5% a 20% de acetato de etilo em hexanos) para se obter 0 produto na forma de um óleo incolor (7,75 g) . GCMS (EI) m/z 166 M+. 32 ΡΕ2125794

Preparação 40 1-(6-Fluoro-piridin-3-il)-etilamina.

Hidrogenou-se 5-(1-azido-etil)-2-fluoro-piridina (4,09 g, 24,59 mmol) sob uma pressão de 60 psi em etanol (200 mL) na presença de Pt02 (a 6% p/p). Filtrou-se a mistura após 4 horas, removeu-se o solvente num evaporador rotativo, e secou-se o óleo resultante sob vácuo para se obter o produto (3,149 g) . GCMS (EI) m/z 140 M+.

Preparação 41 Éster terc-butilico do ácido (1-(6-fluoro-piridin-3-il)- etil]-carbâmico.

Adicionou-se di-isopropiletilamina (37 mL, 212 mmol) e dicarbonato de di-terc-butilo (46,27 g, 212 mmo) a uma solução de 1-(6-fluoro-piridin-3-il)-etilamina (14,86 g, 106,01 mmol) em acetonitrilo (100 mL) . Agitou-se a mistura de um dia para o outro. Lavou-se com NaHC03 saturado, extraiu-se em diclorometano, lavou-se com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, e secou-se sobre Na2S04. Purificou-se por cromatografia em coluna (de 10% a 70% de acetato de etilo em hexanos) para se obter o produto na forma de um sólido branco (20 g). MS (ES) m/z 241 [M+l]\ 33 ΡΕ2125794

Preparação 42 Éster terc-butílico do ácido [1-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3- il)-etil]-carbâmico.

Adicionou-se uma solução de éster terc-butilico do ácido [1-(6-fluoro-piridin-3-il)-etil]-carbâmico (9,3 g, 38,8 mmol) em THF seco (90 mL) a terc-butil-litio (68,4 mL, 116,3 mmol, solução a 1,7 M em pentano) em THF seco (70 mL) ao longo de 15 minutos sob N2 a -78 °C. Agitou-se a -78 °C durante 1 hora. Adicionou-se uma solução de iodo (14,8 g, 58,2 mmol) em THF seco (90 mL) ao longo de 15 minutos. Agitou-se a -78 °C durante 2 horas. Amornou-se até 0 °C. Adicionou-se água. Amornou-se até à temperatura ambiente. Extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com uma solução de Na2C03, com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, e secou-se sobre MgS04. Após filtração, concentrou-se e purificou-se o produto em bruto por cromatografia "flash" (de 5% a 20% de acetato de etilo/hexano). Proporcionou-se o produto desejado, éster terc-butílico do ácido [1-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-etil]-carbâmico (2,8 g, 20%). MS (ES) m/z 367 [M+l]+.

Preparação 43 Éster terc-butílico do ácido etil-[1-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-etil]-carbâmico.

Adicionou-se hidreto de sódio (84,0 mg, 2,1 mmol 34 ΡΕ2125794 dispersão a 60% em óleo mineral) a uma solução de éster terc-butilico do ácido (1-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-etil]-carbâmico (0,37 g, 1,0 mmol) em dimetilformamida (10 mL) . Agitou-se à temperatura ambiente durante 30 minutos. Adicionou-se iodoetano (0,2 mL, 2,1 mmol). Agitou-se durante 1 hora. Parou-se a reacção com água. Extraiu-se com CH2C12. Lavou-se a fase orgânica com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secou-se sobre MgS04. Após filtração, proporcionou-se o produto em bruto, éster terc-butilico do ácido etil-[1-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-etil]-carbâmico (0,4 g, 97%) com 90% de pureza por HPLC. MS (ES) m/z 395 [M+l]+.

Preparou-se o composto seguinte com procedimentos similares ao do éster terc-butilico do ácido etil-[1-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-etil]-carbâmico.

Prep. Nome do Composto MS (ES) [M+l]+ 44 Éster terc-butilico do ácido l-(6-fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-etil]-metil-carbâmico 381

Preparação 45 2-Fluoro-4-iodo-3-metboximetoximetil-piridina.

Adicionou-se éter clorometil-metilico (2 g 35 ΡΕ2125794 25,0 mmol) gradualmente a uma solução de 2-fluoro-4-iodo-piridin-3-il)-metanol (1,0 g, 3,95 mmol) e N,N-di-iso-propiletilamina (5 g, 39 mmol) em diclorometano (5 mL). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro. Diluiu-se a mistura com clorofórmio. Lavou-se a fase orgânica com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e com água. Secou-se a mistura sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo castanho. Purificou-se por cromatografia em coluna (10% de metanol em diclorometano) para proporcionar o composto do titulo (0,90 g, 71%) na forma de um óleo amarelo. MS (ES) m/z 298 [M+l]+.

Preparação 46 5-Ciclopropil-2-fluoro-piridina.

Combinaram-se, num balão, 2-fluoro-5-iodo-piri-dina (1,12 g, 5 mmol), ácido ciclopropilborónico (645 mg, 7,5 mmol), acetato de paládio (56 mg, 0,25 mmol), fosfato de potássio (32 g, 15 mmol), e tolueno-água (a 20:1, 21 mL). Aqueceu-se a mistura a 100 °C durante 4 horas. Diluiu-se a mistura com clorofórmio-isopropanol (a 3:1, 100 mL) . Lavou-se a fase orgânica com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e com água. Secou-se a mistura sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo castanho. Purificou-se por cromatografia em coluna (20% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o 36 ΡΕ2125794 composto do título (430 mg, 63%) na forma de um óleo amarelo pálido. RMN de XH (400 MHz, CDC13) δ: 7,99 (d, J= 3 Hz, 1H) , 7,39 (td, J= 3,5 Hz, 1H), 6,79 (dd, J= 3,8 Hz, 1H) , 0,96-1,02 (m, 2H), 0,63-0,69 (m, 2H).

Preparação 47 5-Ciclopropil-2-fluoro-3-iodo-piridina.

Arrefeceu-se uma solução de 5-ciclopropil-2-fluoro-piridina (1,3 g, 9,5 mmol) em THF (20 mL) até -75 °C num banho de gelo seco-acetona sob azoto. Adicionou-se di-isopropilamida de lítio (a 2 M em THF, 6 mL, 12 mmol) ao longo de um período de 30 minutos. Agitou-se a mistura durante 3 horas adicionais. Adicionou-se iodo (2,9 g, 11,4 mmol, dissolvido em 50 mL de THF) e agitou-se a mistura durante 2 horas. Adicionou-se água (100 mL) e deixou-se a temperatura subir até à temperatura ambiente ao longo de 1 hora enquanto se agitava. Tratou-se a mistura com uma solução aquosa saturada de tiossulfato de sódio (50 mL) . Extraiu-se a solução com éter. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo castanho. Purificou-se por cromatografia em coluna (de hexano até 20% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o composto do título (1,7 g, 68%) na forma de um óleo amarelo. RMN de (400 MHz, CDC13) δ: 8,03 (dd, J = 3,8 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 0,91-1,00 (m, 2H), 0,71-0,78 (m, 2H). 37 ΡΕ2125794

Preparação 48 5-Ciclopropil-2-fluoro-4-iodo-piridina.

Arrefeceu-se uma solução de 5-ciclopropil-2-fluoro-3-iodo-piridina (1,7 g, 6,5 mmol) em THF (20 mL) até -75 °C em num banho de gelo seco-acetona sob azoto. Adicionou-se di-isopropilamida de lítio (a 2 M em THF, 3,9 mL, 7,8 mmol) durante um período de 30 minutos. Agitou-se a mistura durante outras 3 horas antes de se adicionar água (100 mL). Deixou-se então a temperatura subir até à temperatura ambiente durante 1 hora sob agitação. Extraiu-se a solução com éter. Concentrou-se a solução in vácuo até um óleo castanho. Purificou-se o óleo por cromatografia em coluna (hexano —> 15% de acetato de etilo em hexano) para proporcionar o produto na forma de um óleo amarelo (1,1 g, 65%).

Preparação 49 4-(4-Benzo[b]tiofen-7-il-6-fluoro-piridin-3-ilmetil)- morfolina.

Combinaram-se 4-(β-fluoro-4-iodo-piridin-3-ilme-til)-morfolina (0,48 g, 1,5 mmol), 2-benzo[b]tiofen-7-il-4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolano (0,47 g, 1,8 mmol) e carbonato de sódio (0,39 g, 3,75 mmol) em CH3CN (8 mL) e água (4 mL). Purgou-se a mistura com azoto durante 5 minutos. Adicionou-se [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (a 1:1) 38 ΡΕ2125794 (5,0 mg, 0,6 mmol) e purgou-se com azoto durante 5 minutos adicionais. Agueceu-se a mistura a 120 °C durante 10 minutos num reactor de micro-ondas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo, lavou-se esta com água e uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica e secou-se sobre sulfato de magnésio. Filtrou-se e concentrou-se in vácuo para dar uma mistura em bruto. Purificou-se por cromatografia em coluna (de 0,1% a 1% de amoníaco em metanol a 2 M/diclorometano) para proporcionar o composto do título (0,43 g, 87%). MS (ES) m/z 329 [M+l]+.

Prepararam-se os compostos seguintes, utilizando o procedimento da 4-(4-benzo [b] tiofen-7-il-6-fluoro-piridin-3-ilmetil)-morfolina utilizando o material de partida apropriado.

Prep. Nome do Composto Dados Físicos MS (ES) m/z [M+l] + 50 1—(2—{4—[7-(5-Dimetilaminometil-2-fluoro-piridin-4-il)-benzol[b]tiofen-2-il]-5-fluoro-pirimidin-2-ilamino}-etil)imi-dazolidin-2-ona; composto com metano 287 51 4-(4-Benzo[b]tiofen-7-il-piridin-3-ilmetil)-morfolina 311 52 4-Benzo[b]tiofen-7-il-5-[1,3]dioxolan-2-il-2-fluoro-piridina 302 39 ΡΕ2125794 (continuação)

Prep. Nome do Composto Dados Físicos MS (ES) m/z [M+l]+ 53 4-Benzo [£>] tiofen-7-il-2-fluoro-3-metoximetoximetil-piridina 304 54 4-Benzo[b]tiofen-7-il-5-ciclopropil-2-fluoro-piridina 270 55 Éster terc-butílico do ácido (4-Benzo-[b]tiofen-7-i1-6-fluoro-piridin-3-ilme-til)-metil-carbâmico 373 56 R-5- (1-Azido-etil) -4-benzo [£>] tiofen-7-il- 2-fluoro-piridina 299

Preparação 57 1-(4-Benzo [b]tiofen-7-il-6-fluoro-piridin-3-il)-etilamina.

Adicionou-se a uma solução de f?-5-(1-azido-etil) -4-benzo[b]tiofen-7-il-2-fluoro-piridina (580 mg, 1,9 mmol) em etanol (10 mL), num balão de fundo redondo, sal hidra-zina do ácido fórmico (1:1) e 0,5 g de níquel de Raney. Agitou-se a mistura durante 3 horas à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reaccional sobre uma solução diluída de carbonato de sódio. Separou-se o produto em clorofórmio, e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre Na2S04. Após filtração, evaporou-se o solvente orgânico in vacuo para dar o produto desejado na forma de uma sólido amarelo (530 mg, 100%). MS (ES) m/z 273 (M+l]+. 40 ΡΕ2125794

Preparação 58 Éster terc-butílico do ácido [1-(4-Benzo[b]tiofen-7-il-6-fluoro-piridin-3-il)-etil]-carbâmico.

Adicionou-se, a uma solução de 1-(4-benzo[b]-tiofen-7-il-6-fluoro-piridin-3-il)-etilamina (530 mg, 1,9 mmol) em dioxano (30 mL) e água (10 mL) num balão de fundo redondo, dicarbonato de di-terc-butilo (647 mg, 2,9 mmol). Agitou-se a mistura durante 2 horas à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reaccional para clorofórmio, e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre Na2S04. Após filtração, evaporou-se o solvente orgânico in vacuo para dar o produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia "flash" (de hexano a 20% de acetato de etilo em hexano) para dar o produto desejado na forma de um sólido branco (550 mg, 76%). MS (ES) m/z 373 [M+l]+.

Preparação 59 4-Benzo[b]tiofen-7-trimetilsililetinil-l-piridina.

Adicionou-se 4-cloro-3-trimetilsililetinil-piri-dina (1,0 g, 4,78 mmol) a uma solução de THF:H20, adicionou-se carbonato de potássio (1,97 g, 14,3 mmol) e 2-ben- 41 ΡΕ2125794 zo[jb]tiofen-7-il-4,4,5,5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolano (1,49 g, 5,72 mmol). Desgaseificou-se a mistura reaccional durante 30 minutos. Adicionou-se catalizador de Pd (0,218 g, 0,2 mmol) e tetrafluoroborato de tri(terc-butilfosfina) (0,120 g, 0,4 mmol) sob uma atmosfera de N2. Aqueceu-se a mistura reaccional a 80 °C durante 2 horas. Evaporou-se todo o THF sob vácuo, diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, extraiu-se a fase orgânica e secou-se sobre Na2S04. Filtrou-se e concentrou-se sob vácuo, passou-se o produto em bruto através de uma coluna de gel de silica (malha de 60-120) para ter o composto puro. Rendimento (0,7 g, 48%) . MS (ES) m/z 308 [M+l]\

Preparação 60 4 — { 4— [2— (2-Cloro-pirimidin-4-il) -benzo [£>] tiofen-7-il] - 6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-morfolina.

Solução A: Combinou-se 4-(4-benzo [£>] tiofen-7-il-6-fluoro-piridin-3-ilmetil)-morfolina (0,43 g, 1,31 mmol) e borato de tri-isopropilo (0,43 g, 2,63 mmol) em THF seco (5 mL) a -78 °C sob azoto. Adicionou-se di-isopropilamida de litio a 1,5 M mono(THF) em ciclo-hexano (2,2 mL, 3,28 mmol) sob azoto. Agitou-se sob azoto a -78 °C durante 1 hora e amornou-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente. 42 ΡΕ2125794

Solução B: Combinou-se 2,4-dicloropirimidina (0,29 g, 1,97 mmol), 2-(di-terc-butilfosfo)bifenilo (0,01 g, 0,04 mmol) e carbonato de sódio (0,42 g, 3,94 mmol) em THF (7 mL) e água (3 mL) . Purgou-se com azoto durante 5 minutos. Adicionou-se [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]diclo-ropaládio(II), complexo com diclorometano (a 1:1) (0,05 g, 0,07 mmol). Aqueceu-se a mistura a 60 °C sob azoto.

Adicionou-se a solução A à solução B gota a gota através de uma seringa ao longo de 20 minutos. Aqueceu-se a mistura reaccional durante 1 hora a 60 °C sob azoto e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo, lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica e secou-se sobre sulfato de magnésio. Filtrou-se e concentrou-se in vacuo para dar o produto em bruto. Purificou-se por cromatografia em coluna (de 0,1% a 1% de amoníaco em metanol a 2M/diclorometano) para proporcionar o composto do título (0,42 g, 73%). MS (ES) m/z 441 [M+l]\

Prepararam-se os compostos seguintes essencialmente de acordo com a preparação da 4-{4-[2-(2-cloro-pirimidin-4-il)-benzo[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-morfolina utilizando o material de partida apropriado : 43 ΡΕ2125794

Prep. Nome do Composto MS (ES) m/z [M+l]+ 61 {4-[2-(2-Cloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-dimetil-amina 417 62 4-{4 - [2-(2-Cloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-morfolina 459 63 {4-[2-(2-Cloro-pirimidin-4-il)- benzo[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3- ilmetil}-dimetil-amina 399 6 4 4-{4 - [2-(2-Cloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo[b]tiofen-7-il]-piridin-3-ilmetil}-morfolina 441 65 2-Cloro-4-[7-(2-fluoro-5-metil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidina 432 66 5-Cloro-5-fluoro-4-[7-(2-fluoro-3-metoximetoximetil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidina 434 67 2-Cloro-4-[7-(2-ciclopropil-5-fluoro-fenil)-benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoro-pirimidina 400 68 Éster terc-butilico do ácido (l—{4—[2—(2— oloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo-[jb]tiofen-7-il] -6-f luoro-piridin-3-il} -etil)-carbâmico 503 69 Éster terc-butilico do ácido {4— [2—(2 — cloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo-[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-metil-carbâmico 503 44 ΡΕ2125794

Prep. Nome do Composto MS (ES) m/z [M+l]+ 70 Éster terc-butilico do ácido {4— [2—(2 — cloro-5-metil-pirimidin-4-il)-benzo-[io] tiofen-7-il] -6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-metil-carbâmico 500 71 4- (7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-2-cloro- 5- fluoro-pirimidina 476 72 4- (7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-2-cloro- 5- cloro-pirimidina 361 73 4-(7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-2-cloro- 340 GCMS 5-metil-pirimidina (EI) M+ 74 4-(7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-2-cloro-pirimidina 327

Preparação 75 Éster terc-butílico do ácido (2-azidocarbonil-etil) - carbâmico.

Adicionou-se cloroformato de etilo (2,52 g, 23, 25 mmol) gota a gota a uma solução de ácido 3-terc-butoxicarbonilamino-propiónico (4 g, 21,14 mmol) e 4-metil-morfolina (2,35 g, 23,25 mmol) em THF (60 mL) a -20 °C. Após 40 minutos, amornou-se a suspensão até -5 °C e adicionou-se gota a gota uma solução de azeto de sódio (3,44 45 ΡΕ2125794 g, 52, 85 mmol) em água (10 mL) . Após 10 minutos, diluiu-se a mistura com acetato de etilo (60 mL) e lavou-se com água, e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, e secou-se sobre MgS04. Após filtração, removeu-se o solvente orgânico para proporcionar o produto na forma de um óleo límpido (4,3 g, 95%). RMN de (DMSO-de) δ: 6,91 (largo s, 1H), 3,18 (q, J= 6,4 Hz, 2H), 2,51-2,48 (m, 2H), 1,37 (s, 9H).

Preparação 76 Éster terc-butílico do ácido (2-Isocianato-etil)-carbâmico.

Agitou-se uma solução de éster terc-butílico do ácido (2-azidocarbonil-etil)-carbâmico (4,3 g, 20,07 mmol) em tolueno (50 mL) a 65 °C durante 25 minutos, até que a libertação de N2 gasoso terminasse. Arrefeceu-se a solução. RMN de XH (DMSO-de) δ: 7,06 (largo s, 1H) , 3,33-3,29 (m, 2H), 3,12 (q, J= 5,8 Hz, 2H), 1,39 (s, 9H).

Preparação 77 Éster terc-butílico do ácido {2-[3-(2,2-dietoxi-etil)-ureído]-etil}-carbâmico.

Adicionou-se 2,2-dietoxi-etanamina (3,33 g, 25,04 mmol) a uma solução de éster terc-butílico do ácido (2-isocianato-etil)-carbâmico (3,73 g, 20,03 mmol) em 46 ΡΕ2125794 tolueno (50 mL). Após 1 hora, concentrou-se a mistura para proporcionar um sólido branco (6,39 g). RMN de XH (DMSO- de) δ : 6,74 (t, J = 5 Hz , 1H), 6,03 (t, J = 5,6 Hz , 1H) , 5,85 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 4,39 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 3, 61- 3,55 (m, 2H), 3,48 -3, 42 (m, 2H), 3,06 (t, J = 5, 7 Hz, 2H), 3,01 (q, J = 6,2 Hz , 2H), 2,92 (q, J = 6,2 Hz, 2H), 1,37 (s, 9H), 1,11 (t, J = 6, 4 Hz , 6H)

Preparação 78 Éster terc-butilico do ácido [2-(2-oxo-2,3-di-hidro-imidazol-l-il)-etil]-carbâmico.

Dissolveu-se éster terc-butilico do ácido {2—[3— (2,2-dietoxi-etil)-ureido]-etil}-carbâmico (6,5 g, 20,35 mmol) em metanol (75 mL) e água (40 mL) . Adicionou-se à mistura reaccional HC1 (a 0,4 N, 50 mL) gota a gota ao longo de 30 minutos. Agitou-se a mistura de um dia para o outro e neutralizou-se pela adição de KOH (a 0,4 M, 50 mL), e concentrou-se in vacuo. Extraiu-se o resíduo em clorofórmio e lavou-se com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e remo-veu-se o solvente num evaporador rotativo para dar um sólido branco em bruto. Purificou-se por cromatografia em coluna (de 1% a 10% de MeOH em diclorometano) para proporcionar o produto puro na forma de um sólido branco (2,53 g, 11,13 mmol). GCMS (EI) m/z 227 M+. 47 ΡΕ2125794

Preparação 79 1-(2-Amino-etil)-1,3-di-hidro-imidazol-2-ona; composto com ácido trifluoro-acético.

Adicionou-se ácido trifluoroacético (10 mL) a uma solução de éster terc-butílico do ácido [2-(2-oxo-2,3-di-hidro-imidazol-l-il)-etil]-carbâmico (2,5 g, 11 mmol) em diclorometano (10 mL). Agitou-se a mistura durante 3 horas. Removeu-se a maioria do solvente e do ácido trifluoro-acético num evaporador rotativo e secou-se o óleo amarelado espesso sob vácuo para se obter o produto. GCMS (EI) m/z 127 M+.

Preparação 80 Éster terc-butilico do ácido {1-[6-fluoro-4-(2-{5-fluoro-2-[2-(2-oxo-2,3-di-hidro-imidazol-l-il)-etilamino)-pirimidin-4-il}-benzo[b]tiofen-7-il)-piridin-3-il]-etil}-carbâmico.

Combinou-se éster terc-butilico do ácido (1—{4— [2-(2-cloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3-il}-etil)-carbâmico (150 mg, 0,3 mmol), 1—(2—amino—etil)-1,3 —di—hidro—imidaz ol—2 —ona (70 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (80 mg, 0,8 mmol) em N-metilpir-rolidona (1,0 mL) num tubo pressurizado. Aqueceu-se a mistura reaccional a 130 °C durante 1 hora num reactor de micro-ondas e depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo, 48 ΡΕ2125794 e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre MgSCg. Após filtração, evaporou-se o solvente orgânico para dar o produto em bruto. Purificou-se 0 produto em bruto por cromatografia em coluna (10% de metanol em diclorometano) para proporcionar o produto desejado (80 mg, 74%). MS (ES) m/z 538 [M+t-But]+, 494 [M-Bocr, 616 [M+Na] + .

Preparação 81 2-Cloro-4-[7-(3-trimetilsilaniletinil-piridin-4-il)-benzo[b]-tiofen-2-il]-pirimidina.

Adicionou-se 2,4-dicloro pirimidina (0,29 g, 1 mmol) e carbonato de sódio (a 2,0 M, 0,273 g, 2,6 mmol) à solução de THF num balão de fundo redondo. Desgaseificou-se a mistura reaccional durante 30 minutos e adicionou-se o catalisador Pd (0,053 g, 0,06 mmol) e então sujeitou-se a refluxo a mistura reaccional durante 1,5 horas. Simultaneamente, num outro balão de fundo redondo, adicionou-se 4-benzo[b]tiofen-7-trimetilsililetinil-l-piridina (0,40 g, 1,3 mmol) sob uma atmosfera de N2, adicionou-se borato de tris-isopropilo (0,59 mL, 2,5 mmol) à temperatura ambiente. Adicionou-se di-isopropilamida de litio (1,9 mL, 3,8 mmol) a -78 °C gota a gota. Agitou-se a solução durante 1,5 horas a -78 °C. Após 1,5 horas adicionou-se a solução acima à primeira mistura reaccional sob refluxo. De novo, sujeitou-se a mistura reaccional a refluxo, durante mais 2 horas. 49 ΡΕ2125794

Evaporou-se todo o THF sob vácuo e extraiu-se a mistura reaccional tomando-a em acetato de etilo e lavando-a com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secou-se a fase orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se sob vácuo para dar o composto em bruto. Passou-se o produto em bruto através de uma coluna de gel de sílica (malha 60-120) para eluir o composto puro. Rendimento: (0,180 g, 33%). RMN de XH (400 MHz, CDC13) δ: 8,863 (s, 1H), 8, 663 (d, J = 4,8 Hz, 1Hz), 8,621 (d, J = 5,6 Hz, 1H) , 8,207 (s, 1H), 7,832 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 7,595 (t, J= 5,6 Hz, 3H), 7,508 (t, J= 7,6 Hz, 1H), 0,286 (s, 9H) ; MS(ES) m/z 420,17 [M+l]+.

Preparou-se o intermediário seguinte com procedimentos similares aos utilizados para a 2-cloro-4-[7-(3-trimetililaniletinil-piridin-4-il) -benzo [b] -tiofen-2-il] -pirimidina.

Prep. Nome do Composto MS (ES) [M+l] + 82 2-Cloro-4-[7-(3-trimetilsilaniletinil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoro-pirimidina 438

Prepararam-se os intermediários seguintes essencialmente de acordo com a preparação da 1— (2 — {4—[7—(5 — dimetilaminometil-2-fluoro-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il] -5-fluoro-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona abaixo, utilizando o material de partida apropriado. 50 ΡΕ2125794

Prep. Nome do Composto Dados Físicos MS (ES) m/z [M+l]+ 83 Éster terc-butílico do ácido [6-fluoro-4-(2-{5-metil-2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il) -etilamino] -pirimidin-4-il}-benzo [b] -tiofen-7-il)-piridin-3-ilmetil]-metil-carbâmico 592 84 Éster terc-butílico do ácido [6-fluoro-4-(2 —{5-fluoro-2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il) -etilamino]-pirimidin-4-il}-benzo[b]-tiofen-7-il)-piridin-3-imetil]-(3,3,3-trifluoro-propil)-carbâmico 678 85 Éster terc-butílico do ácido (2-ciano-etil)- [6-fluoro-4-(2-{5-fluoro-2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il)-etilamino]-piri-midin-4-il} -benzo [£>]tiofen-7-il) -piridin-3-ilmetil}-carbâmico 635 86 1-{2-[4-(7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-5-fluoro-pirimidin-2-ilamino]-etil}-imida-zolidin-2-ona 436 87 1—{2—[4—(7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-5-cloro-pirimidin-2-ilamino]-etil}-imida-zolidin-2-ona 454 88 1-{2-[4-(7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-5-metil-pirimidin-2-ilamino]-etil}-imida-zolidin-2-ona 434 51 ΡΕ2125794 (continuação)

Prep. Nome do Composto Dados Físicos MS (ES) m/z [M+l]+ 89 1— {2—[4—(7-Bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-pirimidin-2-ilamino]-etil}-imidazolidin- 2- ona 420 90 1 — {2—[5-Fluor0-4-(7-{2-fluoro-5-[2 —(tetra—hidro—piran—2—iloxi )-etoxi]-piridin-4-il}-benzo[b]tiofen-2-il)-pirimidin-2-ilamino]-etil}-imidazolidin-2-ona 619

Preparação 91 1— (2— [4—[7—(3-Trimetilsilaniletinil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-il-amino)-etil)-imidazolidin-2-ona.

Adicionou-se 2-cloro-4-[7-(3-trimetilsilanileti-nil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidina (0,180 g, 0,4 mmol) a um tubo selado e adicionou-se a esta n-butanol (2 mL) . Adicionou-se f/-2-amino-etil-imidazolidin-2-ona (0,103 g, 0,8 mmol). Selou-se o tubo e aqueceu-se num banho de óleo durante 4-5 horas a 120 °C. Concentrou-se a mistura reaccional sob pressão reduzida e purificou-se o produto em bruto através de cromatografia em coluna. Rendimento (0,1 g, 49%). RMN de (400 MHz, DMSO-cfe) δ: 8, 832 (s, 1H), 8,725 (d, J= 5,2 Hz, 1H), 8,394 (s, 1H) , 8,369 (s, 1H), 8,015 (d, 52 ΡΕ2125794 00 II h> 8 Hz , 1H), 7,711 (d, J= 5,2 Hz, 1H), 7,552 (m, 2H), 7,356 (s, 1H), 7,272 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 6,288 (s, 1H), 3,185 (m, 4H), 0,286 (s, 9H). MS (ES) m/z 513 [M+l]+.

Preparou-se o intermediário seguinte com procedimentos similares aos utilizados para a 1—(2— [4—[7—(3 — trimetilsilaniletinil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-il-amino)-etil-imidazolidin-2-ona.

Prep. Nome do Composto Dados Físicos MS (ES) [M+l]+ 92 1- (2-[4-[7-(3-Trimetilsilaniletinil-piri-din-4-il) -benzo [i>] tiofen-2-il] -pirimidin- 2- il-amino]-etil)-imidazolidin-2-ona 531

Preparação 93 1-(2-{5-Fluoro—4—[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3, 2]dioxaborolan-2-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona.

Combinaram-se, num balão, 7-l-{2-[4-(7-bromo-benzo[b]tiofen-2-il)-5-fluoro-pirimidin-2-ilamino]-etil}-imidazolidin-2-ona (5,5 g, 12,6 mmol), bis(pinacolato)di-boro (3,84 g, 15,3 mmol), (1,1'-bis(difenilfosfino)-ferro-ceno)dicloropaládio(II) (1,0 g, 1,3 mmol), acetato de po tássio (2,5 g, 25 mmol) em DMSO (80 mL) . Fez-se borbulhar 53 ΡΕ2125794 azoto através da mistura durante 10 minutos. Selou-se o balão e pôs-se este num banho de óleo para o aquecer até 85°C de um dia para o outro. Diluiu-se a mistura com clorofórmio/álcool isopropilico (a 3/1). Lavou-se a solução com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secou-se esta sobre sulfato de sódio. Concentrou-se a solução in vacuo até um resíduo escuro. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna (de hexano -» acetato de etilo a 20% em hexano -» metanol a 10% em diclorometano) para proporcionar o produto na forma de um sólido castanho (5 g, 82%) . MS (ES) m/z 484 [M+l]+.

Prepararam-se os compostos seguintes, com procedimentos similares aos descritos para a 1-(2-{5-fluoro-4-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzo[b]-tiofen-2-il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona.

Prep. Nome do Composto Dados Físicos MS (ES) m/z [M+l]+ 94 1- (2-{5-Metil-4-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzo[£>]tiofen- 2- il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imida-zolidin-2-ona 500 95 1- (2-{5-Cloro-4-[7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioxaborolan-2-il) -benzo [£>]tiofen- 2- il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imida-zolidin-2-ona 480 54 ΡΕ2125794 (continuação)

Prep. Nome do Composto Dados Físicos MS (ES) m/z [M+l]+ 96 1- (2-(4-[7-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]di-oxaborolan-2-il) -benzo [£>] tiofen-2-il] -pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin- 2- ona 466

Preparação 97 1— (2 — {4— [7—(5-Azidometil-2-fluoro-piridin-4-il) -benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoro-pirimidin-2-ilamino}-etil)- imidazolidin-2-ona.

Combinou-se 5-azidometil-2-fluoro-4-iodo-piridina (70 mg, 0,25 mmol) e 1-(2-{5-fluoro-4-[7-(4,4,5,5-tetra-metil- [1,3,2] dioxaborolan-2-il) -benzo [£>] tiofen-2-il] -piri-midin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona (100 mg, 0,21 mmol), bis(difenilfosfino)ferroceno)dicloro-paládio (8,5 mg, 0,01 mmol) e NaHC03 (35 mg, 0,41 mmol) em DMSO (87 mL) e água (3 mL). Purgou-se a mistura através de azoto durante 5 minutos duas vezes. Aqueceu-se a mistura a 85 °C durante 1 hora num banho de óleo. Arrefeceu-se até À temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reaccional com clorofór-mio/álcool isopropilico (a 93/1), e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre sulfato de sódio. Após filtração, removeu-se o solvente orgânico para dar uma mistura em bruto. Purificou-se a mistura em bruto 55 ΡΕ2125794 por cromatografia em coluna (10% de metanol em diclorome-tano) para proporcionar o composto do titulo (105 mg, 100%) . MS (ES) m/z 508 [M+l]\

Prepararam-se os intermediários seguintes com procedimentos similares aos descritos para a 1-(2-(4-[7-(5-azidometil-2-fluoro-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoro-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona.

Prep. Nome do Composto MS (ES) [M+l] + Comentários 98 1-[2-(4-{7-[5-(l-Azido-etil)-2-fluoro-piridin-4-il]-benzo[b]-tiofen-2-il}-5-fluoro-pirimi-din-2-ilamino)-etil]-imidazo-lidin-2-ona 522 99 Éster terc-butilico do ácido [4-(2-{5-fluoro-2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il)-etilamino]-pirimidin-4-il}-benzo[b]tiofen-7-il)-6-fluoro-piridin-3-ilmetil]-metil-carbâmico 596 100 Éster terc-butilico do ácido [4-(2-{5-cloro-2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il)-etilamino]-pirimidin-4-il}-benzo[b]tiofen-7-il)-6-fluoro-piridin-3-ilmetil]-metil-carbâmico 613 NaHCOs utilizado como base 56 ΡΕ2125794 (continuação)

Prep. Nome do Composto MS(ES) [M+l] + Comentários 101 Éster terc-butilico do ácido [6-fluoro-4-(2-{2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il)-etilamino]-pirimidin-4-il} -benzo [£>] tiof en-7-il)-piridin-3-ilmetil] -metil-carbâmico 578 NaHCOs utilizado como base

Preparação 102 1-(6-Cloro-4-(2-(5-fluoro-2-(2-(2-oxoimidazolidin-l-il)etilamino)pirimidin-4-il)benzo[d]tiofen-7-il)piridin-3-il)etilcarbamato de terc-butilo.

Combinaram-se, num balão para micro-ondas, éster terc-butilico do ácido (1-(6-cloro-4-iodo-piridin-3-il)-etil]-carbâmico (250 mg, 0,65 mmol) e 1-(2-{5-fluoro-4-[7-(4, 4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzo[b]tio-fen-2-il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona (380 mg, 0,78 mmol}, bis(difenilfosfino)ferroceno)dicloro-paládio (53 mg, 0,07 mmol) e NaHCCb (110 mg, 1,31 mmol) em acetonitrilo (7 mL) e água (3 mL). Purgou-se a mistura com azoto durante 5 minutos. Aqueceu-se a mistura a 100 °C durante 15 minutos num micro-ondas. Removeu-se o solvente num evaporador rotativo. Purificou-se por cromatografia em 57 ΡΕ2125794 coluna de fase normal utilizando de 0,5% a 5% de MeOH em diclorometano para se retirar o produto na forma de um sólido branco (220 mg). MS (ES) m/z 612 [M+l]\

Preparação 103 (6-Fluoro-4- (2- (5-fluoro-2- (2- (2-oxo-2, 3-di-hidro-lfí-imidazol-l-il)etilamino)pirimidin-4-il)benzo[b]tiofen-7-il)-piridin-3-il)metil(metil)carbamato de terc-butilo.

Combinou-se éster terc-butilico do ácido {4— [2— (2-cloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-metil-carbâmico (0,52 g, 1,04 mmol) e trietilamina (0,87 mL, 6,24 mmol) em n-butanol (10,0 mL) . Adicionou-se 1-(2-amino-etil)-1,3-di-hidro-imidazol-2-ona; composto com ácido trifluoroacético (0,75 g, 3,12 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a 120 °C durante 54 horas para a reacção ficar completada, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Removeu-se o solvente num evaporador rotativo para se obter o produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna (de 0,5% a 6% de NH3 numa solução a 2 M em metanol em diclorometano) para proporcionar o produto desejado (0,28 g). MS (ES) m/z 594 [M+l]+. 58 ΡΕ2125794 EXEMPLOS Exemplo 1 1-(2—{4—[7-(5-((Dimetilamino)metil)-2-fluoro-piridin-4-il) benzo [£>] tiof en-2-il] -5-fluoropirimidin-2-ilaminojetil)imidazolidin-2-ona.

Combinou-se {4-[2-(2-cloro-5-fluoro-pirimidin-4-il)-benzo[b]tiofen-7-il]-6-fluoro-piridin-3-ilmetil}-dimetil-amina (0,25 g, 0,59 mmol) e trietilamina (0,25 mL, 1,78 mmol) em n-butanol (8,0 mL). Adicionou-se 1—(2— aminoetil)imidazolidin-2-ona (0,23 g, 1,78 mmol). Aqueceu-se a mistura reaccional a 120 °C de um dia para o outro (15 horas), depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo, e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre MgSC>4. Após filtração, removeu-se o solvente orgânico para dar um produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna (de 0,5% a 10% de NH3 numa solução a 2 N em metanol/diclorometano) para proporcionar o composto do título (0,19 g, 63%). MS (ES) m/z 510 [M+l]\ 59 ΡΕ2125794

Prepararam-se os compostos seguintes essencialmente de acordo com a preparação da 1—(2 — {4 — [7— (5 — ( (dime ti lamino) me til) - 2-f luoro-piridin-4-il) benzo[b]tiofen-2—i1]-5-fluoropirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona utilizando o material de partida apropriado.

Ex. Nome do Composto Estrutura Dados Físicos MS(ES) m/z [M+l]+ 2 1— (2—{4—[7—(2-Fluoro-5-(morfolinometil)-piri-din-4-il)benzo[bjtiofen- 2— i1]pirimidin-2-ilamino} etil)imidazolidin-2-ona À yvj rrrt S/N 534 3 1- (2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-(morfolinometil ) piridin-4-il)benzo-[b]tiofen-2-il]-pirimi-din-2-ilamino}etil) imidazolidin-2-ona Ol t: 552 4 1-(2-(4-[7-(5-((Dimetil-amino)metil)-2-fluoro-piridin-4-il)benzo[b]-tiofen-2-il]pirimidin-2-ilamino}etil)imidazo-lidin-2-ona υΛ..... 492 60 ΡΕ2125794 (continuação)

Ex. Nome do Composto Estrutura Dados Físicos MS(ES) m/z [M+l]+ 5 1- (2-{5-Fluor0-4-[7—(3— (morfolinometil)-piri-din-4-il)benzo[b]tiofen- 2— i1]pirimidin-2-ilami-nojetil)imidazolidin-2-ona O M 534 6 1—(2—{4—[7—(5—(1,3—Dio— xolan-2-il)-2-fluoropi-ridin-4-il)benzo[b]tio-fen-2-il]-5-fluoropiri-midin-2-ilamino} etil)-imidazolidin-2-ona rw/H ^ VS 525 7 1-(2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-3-((metoximeto-xi)metil)-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]pi-rimidin-2-ilamino}etil)-imidazolidin-2-ona 0 l\ 1 f;-"a j r' 'V' 527 8 1— (2—{4—[7—(5-Ciclopro-pil-2-fluoropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoropirimidin-2-il-aminojetil)imidazolidin- 2- ona o • „ _ A íí / ': N Λ N /' AJ Çcx3 "tX ’ N1 Ύ 493 61 ΡΕ2125794

Prepararam-se os exemplos seguintes com procedimentos similares aos descritos para a 1—(2—{4—[7—(5— azidometil-2-fluoro-piridin-4-il) -benzo [£>] tiofen-2-il) -5-fluoro-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona.

Ex. Nome do Composto Estrutura MS(ES) [M+l]+ 9 1- (2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-(pirrolidin-1-ilmetil)piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]pi-rimidin-2-ilamino}etil)-imidazolidin-2-ona o ^ v " VJ W YrY 536 10 1—(2-{4-[7-(5-(Azetidin- 1- ilmetil)-2-fluoropiri-din-4-il)benzo[b]tiofen- 2— i1]-5-fluoropirimidin-2-ilamino}etil)imida-zolidin-2-ona o mj·', " n/'-/ u sA 522 11 1-(2-(5-Cloro-4-[7-(5-((dimetilamino)metil)-2-fluoropiridin-4-il)benzo [b]tiofen-2-il] pirimi-din-2-ilamino}etil)imi-dazolidin-2-ona ./ s t>= 527 12 1—{2—[5-Fluor0-4-(7—{2— fluoro-5-[(2-hidroxi-etilamino)-metil]piridin-4-il}benzo [£>] tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino]-etil}imidazolidin-2-ona o κ ÇL>-p iY) V >v N í 526 62 ΡΕ2125794 (continuação)

Ex. Nome do Composto Estrutura MS(ES) [M+l]+ 13 1- (2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-((propilamino) metil)piridin-4-il)benzo [jb]tiofen-2-il] pirimi-din-2-ilamino}etil)-imidazolidin-2-ona gl, Λ \ ''-J (pp· 'ζχ-^'Γ 524 14 1- (2-(4-(7-(5-((Etilami-no)metil)-2-fluoropiri-din-4-il)benzo[b]tiofen- 2- il)-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil)imida-zolidin-2-ona o : í À., N-./ * * H xx. N f 510 15 1— {2—[4—(7—{5—[(Etil(metil) amino)-metil]-2- fluoropiridin-4-il}-benzo[b]tiofen-2-il)-5-fluoropirimidin-2-il-amino]etil}imidazolidin- 2- ona O ji N r .. V -V V sí\vH Ιχ/χ/ ^—' : 524 16 1—(2—{4—[7—(5—((Dietil-amino)metil)-2-fluoropi-ridin-4-il)benzo[£>] tio-fen-2-il]-5-fluoropiri-midin-2-ilamino} etil)-imidazolidin-2-ona 0 k V-J J νί. 538 63 ΡΕ2125794 (continuação)

Ex. Nome do Composto Estrutura MS(ES) [M+l]+ 17 1-(2-{4-[7-(5-((Dimetil-amino)metil)-2-fluoropi-ridin-4-il)-benzo[b]tio-fen-2-il]-5-metilpirimi-din-2-ilamino}etil)-imidazolidin-2-ona : c s / 506

Exemplo 18 1-(2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-((metilamino)metil)piridin-4-il) benzo [£>] tiof en-2-il] -pirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona. o

Dissolveu-se éster tercbutilico do ácido [4— (2 — {5-fluoro-2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il)-etilamino]-pirimidin-4-il}-benzo[b]tiofen-7-il)-6-fluoro-piridin-3-ilmetil]-metil-carbâmico (0,19 g, 0,32 mmol) em CH2CI2 seco (1,4 mL) e CF3COOH (1,4 mL) . Agitou-se à temperatura ambiente durante 1 hora. Removeu-se completamente o solvente. Diluiu-se o sal do ácido trifluoro-acético com CH2C12. Lavou-se com uma solução saturada de NaHC03, com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. 64 ΡΕ2125794

Secou-se com MgS04. Após filtração, removeu-se o solvente. Secou-se in vácuo de um dia para o outro para proporcionar o composto do título (0,12 g, 78%). MS (ES) m/z 495 [M+l]+.

Prepararam-se os exemplos seguintes com procedimentos similares aos descritos para a 1-(2-{5-fluoro-4-[7-(2—fluoro-5-metilaminometil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona.

Ex. Nome do Composto Estrutura MS(ES) [M+l]+ 19 1—(2—{4—[7—(2-Fluor0-5-((metilamino)metil)pi-ridin-4-il) benzo [£>] tio-fen-2-il]-5-metilpiri-midin-2-ilamino} etil)-imidazolidin-2-ona I vj V;' 492 20 1- (2-{5-Cloro-4-[7-(2-fluoro-5-((metilamino)-metil)-piridin-4-il)benzo [b]tiofen-2-il]pirimi-din-2-ilamino}etil)-imidazolidin-2-ona I rVA M. v'j Wl o/ N F 512 21 1—(2—{4—[7—(2-Fluor0-5-((metilamino)metil)-pi-ridin-4-il)benzo[b]tio-fen-2-il]pirimidin-2-ilamino}etil)imidazo-lidin-2-ona c==<^ S r 478 65 ΡΕ2125794 (continuação)

Ex. Nome do Composto Estrutura MS(ES) [M+1 ]+ 22 1- [ 2-(4-(7-[5-(1-Amino-etil)-2-fluoropiridin-4-il]benzo[b]tiofen-2-il}-5-fluoropirimidin-2-il-amino)etil]imidazolidin- 2- ona O JL/vS U-M-/ V T F M;S íí! 494

Exemplo 23 1-(2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-((metilamino)metil)piridin-4-il)benzo[b] tiofen-2-il] pirimidin-2-ilamino}etil) -lif- imidazol-2(3H)-ona.

Adicionou-se ácido trifluoroacético (1 mL) a uma solução de éster terc-butílico do ácido [6-fluoro-4-(2—{5— fluoro-2-[2-(2-oxo-2,3-di-hidro-imidazol-l-il)-etilamino]-pirimidin-4-il}-benzo[b]tiofen-7-il)-piridin-3-ilmetil]-metil-carbâmico (280 mg, 0,47 mmol) em diclorometano (1 mL) . Agitou-se durante 1 hora e removeu-se o solvente num evaporador rotativo. Lavou-se com NaHC03 saturado e extraiu-se em diclorometano, lavou-se com uma solução aquo- 66 ΡΕ2125794 sa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre Na2S04, e filtrou-se. Removeu-se o solvente num evaporador rotativo para se obter o sólido e secou-se sob vácuo para proporcionar o produto (196 mg). MS (ES) m/z 494 [M+l]+.

Exemplo 24 1—{2— [5-Fluor0-4-(7-{2-fluoro-5-[(3,3,3-trifluoro-propilamino) -metil] -piridin-4-il}benzo [£>] tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino]etil}imidazolidin-2-ona.

Adicionou-se cloreto de hidrogénio (2 mL, a 1 M em éter dietilico) a uma solução de éster terc-butilico do ácido [6—fluoro-4-(2-{5-fluoro-2-[2-(2-oxo-imidazolidin-l-il) -etilamino] -pirimidin-4-il}-benzo [£>] tiofen-7-il) -piri-din-3-ilmetil]-(3,3,3-trifluoro-propil)carbâmico (0,136 g, 200,68 pmol) em diclorometano (3 mL) . Agitou-se a mistura de um dia para o outro à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente e suspendeu-se o sólido resultante em diclorometano e tratou-se com uma solução aquosa de carbonato de potássio a 30%. Lavou-se a fase orgânica com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e carregou-se a solução orgânica numa coluna de carga de 25 g de gel de silica com 67 ΡΕ2125794 diclorometano e eluiu-se numa coluna de gel de sílica de 40 g com um gradiente de diclorometano para acetato de etilo e depois de acetato de etilo para metanol a 10% em acetato de etilo para dar o composto do titulo. Purificou-se o material adicionalmente por HPLC (condições da HPLC: 38-42% de CH3CN/NH4HCO3 a 10 mM, pH = 10 a 20 mL/minuto em XBride® MS Cis 19 x 100 mm). Recolheram-se as fracções apropriadas e concentraram-se. Co-evaporou-se o resíduo com duas porções de etanol absoluto, uma porção de tolueno, e trans-feriu-se para um balão de fundo redondo de 10 mL com diclorometano. Converteu-se o material num sólido utilizando co-evaporação de diclorometano hexano para dar o composto do título 45 mg (39%) na forma de um sólido amarelo. MS (ES) m/z 578 [M+l]+.

Preparou-se 0 exemplo seguinte com procedimentos similares aos descritos para a l-{2-[5-fluoro-4-(7-{2-fluoro-5-[(3,3,3-trifluoro-propilamino)-metil]-piridin-4-il}benzo [Jb] tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino] etil}imida-zolidin-2-ona.

Ex. Nome do Composto Estrutura MS(ES) [M+l]+ 25 3-{[6-Fluoro-4-(2 —{5 — fluoro-2-[2-(2-oxoimida-zolidin-l-il)etilamino]-pirimidin-4-il}benzo [£>] -tiofen-7-il)piridin-3-il]metilamino}-propano-nitrilo ' kA 535 68 ΡΕ2125794

Exemplo 26 1- (2 — {4—[7-(5-(Aminometil)-2-fluoropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoropirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona.

Adicionou-se, a uma solução de 1—(2—{4—[7—(5— azidometil-2-fluoro-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il] -5-fluoro-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona (105 mg, 0,3 mmol) em etanol (10 mL) num balão de fundo redondo, 2 g do sal hidrazina do ácido fórmico (1:1) e 0,5 g de níquel de Raney. Agitou-se a mistura durante 3 horas à temperatura ambiente. Verteu-se a mistura reac-cional para uma solução diluída de carbonato de sódio. Separou-se o produto em clorofórmio, e lavou-se com água e com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Separou-se a fase orgânica da fase aquosa e secou-se sobre Na2S04. Após filtração, evaporou-se o solvente orgânico in vacuo para dar um produto em bruto. Purificou-se o produto em bruto por cromatografia em coluna "flash" (cloro-fórmio/metanol/hidróxido de amónio, 7/3/0,05) para dar o 69 ΡΕ2125794 composto do título na forma de um sólido amarelo (0,50 mg, 53%) . MS (ES) m/z 482 [M+l]+.

Exemplos 27 e 28 R-l-[2—(4—{7—[5—(1-Aminoetil)-2-fluoropiridin-4-il]benzo[b]tiofen-2-il}-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil]imidazolidin-2-ona e S-l-[2-(4 — {7-[5-(1-Aminoetil)-2-fluoropiridin-4-il]benzo[b]tiofen-2-il}-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil]imidazolidin-2-ona.

Separou-se 1-[2-(4—{7-[5-(1-aminoetil)-2-fluoro-piridin-4-il]benzo[b]tiofen-2-il}-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil]imidazolidin-2-ona (180 mg, 0,36 mmol) por HPLC quiral (Chiralpak® AD-H, 9/1 EtOH/acetonitrilo, 0,2% 70 ΡΕ2125794 de Ν,Ν-dimetiletanolamina, 1 mL/minuto, 225 nm) para dar a primeira fracção como o enantiómero S (50 mg, 28%) e a segunda fracção como o enantiómero R (51 mg, 28%). MS (ES) m/z 496 [M+l]\

Exemplo 29 1-(2-(5-Fluoro-4-{7-[2-fluoro-5-(2-hidroxietoxi)piridin-4-il]benzo[b]tiofen-2-il}pirimidin-2-ilamino)etil]imidazolidin-2-ona.

Adicionou-se p-toluenossulfonato de piridínio (4,3 mg, 0,02 mmol) a uma solução de 1—(2—[5-fluoro-4-(7-(2-fluoro-5-[2-(tetra-hidro-piran-2-iloxi)-etoxi]-piridin-4-il}-benzo[b]tiofen-2-il)-pirimidin-2-ilamino]-etil}-imidazolidin-2-ona (100 mg, 0,17 mmol) em etanol (4 mL) . Agitou-se a mistura a 55 °C de um dia para o outro. Arrefeceu-se a solução. Concentrou-se a solução in vacuo até um óleo amarelo. Purificou-se o óleo por cromatografia em coluna (de diclorometano para metanol a 10% em diclorome-tano) para proporcionar o composto do título (75 mg, 87%) na forma de um sólido amarelo. MS (ES) m/z 513 [M+l]+. ΡΕ2125794 71

Exemplo 30 1-(2-(4-(7-(3-Etinilpiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona.

Adicionou-se 1—(2—[4—[7—(3-trimetilsilaniletinil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-il-amino]-etil)-imidazolidin-2-ona (0,1 g, 0,19 mmol) em metanol num balão de fundo redondo. Adicionou-se carbonato de potássio (0,053 g, 0,38 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente durante 20 minutos. Evaporou-se todo o solvente sob vácuo. Extraiu-se o composto diluindo com diclorometano e lavando com água. Secou-se o composto sob vácuo (0,083 g, 40%). MS (ES) m/z 441,26 [M+l]+.

Preparou-se o exemplo seguinte com procedimentos similares aos utilizados para a 1-(2-(4-(7-(3-etinil-piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona. 72 ΡΕ2125794

Ex. Nome do Composto Estrutura MS(ES) [M+l]+ 31 1-(2-(4-(7-(3-Etinilpi-ridin-4-il)benzo[b]tio-fen-2-il)-5-fluoropiri-midin-2-ilamino)etil)-imidazolidin-2-ona 0 1 1 / V 459

Exemplo 32 1-(2-(4-(7-(5-(1-Aminoetil)-2-cloropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il) -5-f luoropirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona.

Adicionou-se ácido trifluoroacético (1 mL) a uma solução de 1-(6-cloro-4-(2-(5-fluoro-2-(2-(2-oxoimidazo-lidin-l-il)etilamino)pirimidin-4-il)benzo[b]tiofen-7-il)-piridin-3-il)etilcarbamato de terc-butilo (220 mg, 0,36 mmol) em diclorometano (1 mL) . Agitou-se durante 1 hora e removeu-se o solvente num evaporador rotativo. Lavou-se com NaHC03 saturado e extraiu-se em diclorometano, lavou-se com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secou-se sobre Na2S04, e filtrou-se. Removeu-se o solvente num 73 ΡΕ2125794 evaporador rotativo para se obter o sólido e secou-se sob vácuo para proporcionar o produto (158 mg). MS (ES) m/z 512 [M+l]\

Separou-se o produto (90 mg, 0,18 mmol) por HPLC quiral (Chiralpak® AS-H, 100% de MeOH/0,02% de dimetil-etanolamina\C02, 5 mL/minuto, 225 nm) para se obter o primeiro isómero eluído (39 mg). MS (ES) m/z 512 [M+l]+.

Exemplo 33 e 34 S-l-(2-(4-(7-(5-(1-(Etilamino)etil)-2-fluoropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)-5-fluoropirimidin-2-ilamino) etil) imidazolidin-2-ona e f?-l-(2-(4-(7-(5-(1-(Etilamino)etil)-2-fluoropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona.

74 ΡΕ2125794

Separou-se a 1-(2-(4-(7-(5-(1-(etilamino)etil)-2-f luoropiridin-4-il) benzo [£>]tiofen-2-il) -5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona (150 mg, 0,29 mmol) por HPLC quiral (Chiralpak® AD-H, 30% de MeOH/0,2% de isopro-pilamina/C02 5 mL/minuto, 225 nm) para dar a primeira fracção como o enantiómero S (58,4 mg, 38%) e a segunda fracção como o enantiómero R (58,4 mg, 38%). MS (ES) m/z 524 [M+l]\

Exemplo 35 e 36 5-1-(2-(5-Fluoro-4-(7-(2—fluoro-5-(1-(metilami-no)etil)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona e R-l-(2-(5-Fluoro-4-(7-(2-fluoro-5-(1-(metilamino)etil)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona.

75 ΡΕ2125794

Preparou-se 1-(2-(5-fluoro-4-(7-(2-fluoro-5-(1-(metilamino)etil)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)pirimi-din-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona com procedimentos similares aos descritos para a 1-(2-{5-fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-metilaminometil-piridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)-imidazolidin-2-ona.

Separou-se a 1-(2-(5-fluoro-4-(7-(2-fluoro-5-(1-(metilamino)etil)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)piri-midin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona (196 mg, 0,38 mmol) por HPLC quiral (Chiralpak® AD-H, 40% de EtOH (0,2% de isopropilamina)/C02, 5 mL/minuto, 225 nm) para dar a primeira fracção como o enantiómero S (60,2 mg, 31%) e a segunda fracção como o enantiómero R (58,9 mg, 30%). MS (ES) m/z 510 [M+l]+.

Ensaios

Tem-se mostrado que a Plkl é sobre-expressa em vários tumores humanos, tais como os cancros do pulmão de não pequenas células, orofaringeo, esofágico, gástrico, melanoma, da mama, do ovário, do endométrio, colo-rectal, glioblastoma, papilar, pancreático, da próstata, hepato-blastoma e linfoma não-Hodgkin. Adicionalmente, a expressão da Plkl tem importância no prognóstico nos cancros do pulmão de não pequenas células, orofaringeo, esofágico, melanoma, colo-rectal, hepatoblastoma e linfoma não-Hodgkin (Strebhardt, K. e A. uilrich, Nature Reviews Câncer 6(4): 321-30 (2006)). Os substratos fosforilados da Plkl regulam 76 ΡΕ2125794 a progressão da mitose pela coordenação da maturação do centrossoma, a entrada na mitose, a separação de croma-tídeos irmãos e citocinese (Eckerdt and Strebhardt 2006; Strebhardt and Ullrich 2006; van de Weerdt, B. C. and R. H. Medema, Cell Cycle 5(8): 853-64 (2006)). A inibição da função da Plkl utilizando a injecção de anticorpos, a expressão de uma Plkl negativa dominante, e a redução do ARNm anti-sentido produz fusos monopolares e a paragem da anafase conduzindo à morte da célula mitótica em linhagens celulares tumorais mas à paragem do G2 reversível em linhagens celulares primárias não transformadas normais.

Adicionalmente, tem sido relatado que a Plk pode ser útil no tratamento de tumores rabdóides, (Morozov A., et al., Clinicai Câncer Research, 13(16):4721-30, (15 de Agosto de 2007) . O BI-2536 tem demonstrado actividade em modelos pré-clínicos utilizando xenoenxertos murinos HCT116, A549 e NCIH460 (Baum, A., P. Garin-Chesa, et al., (2006), #C191 In vivo activity of BI 2536, a potent and selective inhibitor of the mitotic kinase PLK 1, in a range of câncer xenoqrafts. AACR-NCI-EORTC International Conference on "Molecular Targets and Câncer Therapeutics", Filadélfia, PA) .

Os resultados dos ensaios seguintes demonstram evidência de que os compostos da presente invenção são úteis como agentes anticancerígenos. 77 ΡΕ2125794

Expressão e purificação da Plkl. 0 ADNc da Plkl humana, que pode ser obtido a partir de um número de fontes, tais como a Incyte (número de acesso: NM_005030), pode ser directamente fixado num dos seus termindores com uma sequência polinucleotidica exprimindo um marcador da His6, tal como o marcador FLAG-HÍS6 C-terminal, e inserido num vector de expressão apropriado, tal como um vector pFastBac™ (Invitrogen) e transfectado num sistema apropriado, tal como um baculovírus similar ao que tem sido relatado por Yue-Wei Qian, et al., Science, 282, 1701 (1998) para xPlkkl. Se for utilizado um sistema de expressão virai, então o virus (por exemplo, baculovírus contendo um constructo polinucleo-tídico do marcador da Plkl-Flag-His6) é infectado numa cultura de células hospedeiras adequadas, tais como as células Sf9. Quando quantidades suficientes das proteínas de fusão do marcador Plkl-Flag-HiS6 tenham sido expressas, por exemplo, a cerca de 46 horas após a infecção, a cultura deverá ser tratada com ácido ocadáico (0,1 μΜ) durante um período de tempo suficiente (por exemplo, 3 horas). A fusão do marcador Plkl-Flag-His6 é purificada a partir dos agregados celulares utilizando uma resina com afinidade para metais, tais como a TALON (Clontech, Numero de Catálogo 635503) utilizando métodos bem conhecidos na arte. A fusão do marcador Plkl-Flag-His6 purificada é armazenada num meio adequado, tal como o HEPES a 10 mM, NaCl a 150 mM, TRITON® X-100 a 0,01%, ditiotreitol a 1 mM (DTT), glicerol a 10%, pH =7,5, a -80 °C em pequenas aliquotas até à sua 78 ΡΕ2125794 utilização. A identidade da proteína de fusão do marcador da Plkl-Flag-HiS6 purificada foi confirmada por MALDI (Ionização/Dessorção a Laser Assistida por Matriz).

Expressão e purificação do GST-Cdc25C(1-206). O ADNc do Cdc25C humano, que pode ser obtido a partir de qualquer fonte adequada, tal como a incyte (Número de acesso: AY 497474), pode ser expresso em quaquer sistema de expressão conveniente, após o qual a sua purificação é efectuada por métodos bem conhecidos similares aos descritos por Bin Ouyang et al, Oncogene, 18, 6029-6036 (1999) . Um sistema conveniente envolve o crescimento de um dia para o outro a 18 °C de E. coli BL21 transformada com o vector pGEX-2T (Amersham) no qual o ADNc do Cds25C humano tenha sido trabalhado para a expressão induzida utilizando o isopropil-beta-D-tiogalactopiranosídeo a 1 mM. O GST-Cdc25C(1-206) expresso, o substrato para a Plkl, pode ser purificado por GLUTATHIONE SEPHAROSE® 4B e armazenado numa solução apropriada, tal como HEPES a 10 mM, NaCl a 100 mM, pH = 7,5, em pequenas alíquotas a -80 °C.

Ensaio de Inibição da Plkl.

As soluções reaccionais de quinase Plkl continham a enzima de fusão do marcador Plkl-Flag-His6 (0,2 ng/pL) num tampão contendo HEPES a 50 mM, pH = 7,3, ditiotreitol a 1,0 mM, ATP a 5,0 μΜ, MgCl2 a 10 mM, TRITON® X-100 a 0,01%, 33P-ATP a 0,4 pCi, e 0,06 pg/pL de péptido GST- 79 ΡΕ2125794

Cdc25c(1-206). Os compostos foram disponibilizados na forma de lotes a 10 mM em DMSO. Os compostos foram diluídos em séries a 1:3 em DMSO a 20% para criar uma curva concentração-resposta de 10 pontos e subsequentemente diluídos a 1:5 (de 20 μΜ a 0,001 μΜ final numa concentração final de DMSO de 4%) na mistura reaccional para determinar a actividade do composto. A reacção foi levada a cabo à temperatura ambiente durante 60 minutos e depois parada pela adição de 60 pL de H3PO4 a 10,0%. A mistura reaccional (85 pL) foi transferida para uma placa de filtro de fosfocelulose de 96 poços pré-humedecida com 30 pL de H3P04 a 10,0%, incubada à temperatura ambiente durante 20-30 minutos e então lavada 3x com H3P04 a 0,5%. Os poços foram secados antes da adição de 40 pL de MicroScint™ 20 (Packard) e então contados num Wallac MICROBETA® Jet. Os valores da percentagem de inibição provenientes dos dados da resposta-concentração de 10 pontos foram subsequentemente analisados, por exemplo, utilizando a aplicação ACTIVITY BASE™ (IDBS), utilizando uma equação logística de 4 parâmetros. Os valores absolutos de IC50 foram calculados a partir do resultante ajustamento à curva. Todos os compostos exemplificados tinham um IC50 menor do que 100 nM com uma taxa significativa mínima (MSR) de 3,6. Por exemplo, o Exemplo 4 tinha um IC50 de cerca de 25 nM.

Ensaios de conteúdo em ADN, células mitóticas e de pHH3(S10).

Foram colocadas em microplacas de cultura células 80 ΡΕ2125794

HeLa provenientes da American Type Culture Collection (ATCC) a 200 células/poço em microplacas de 96 poços Beckman Dickinson BIOCOAT , e foram incubadas em MEM (Meio Mínimo Essencial, por exemplo, GIBCO, número de catálogo 11095) com SFB a 10% (Soro Bovino Fetal) a 37 °C, com C02 a 5%, durante 24 horas. As células foram tratadas adicionando composto ao meio (em DMSO a 0,25%), doseando em 10 pontos ao longo da gama de 0,5 μΜ a 0, 0098 μΜ. Após 23 horas de exposição aos compostos, as células foram fixadas, por exemplo com o fixador PREFER™ [Anatech LTD, Número de Catálogo 414] durante 30 minutos, depois foram permeabi-lizadas com TRITON® X-100 a 0,1% numa solução tampão salina de fosfato (PBS) durante 15 minutos. As células foram lavadas 3 vezes com PBS e depois digeridas com 50 pg/mL de RNAse. Foi adicionado às células anticorpo primário, fosfo-histona H3 (Upstate Número de Catálogo 06-570), a 1:500 em PBS com 1% de albumina do soro bovino (BSA) de um dia para o outro a 4 °C. Após 3 lavagens com PBS, as células foram incubadas com anticorpo secundário marcado Alexa488 (Invi-trogen Número de Catálogo A11008) durante 1 hora à temperatura ambiente. Elas foram de novo lavadas 3 vezes com PBS, e então foi-lhes adicionado iodeto de propídio a 15 μΜ (Molecular Probes Número de Catálogo P3566) durante 30 minutos para tingir o núcleo. Foi efectuado o varrimento das Placas de Fluorescência com um ACUMEN EXPLORER™ [citómetro de microplacas de fluorescência de varrimento por laser (incluindo a excitação por laser dos iões de árgon a 488 nm e a múltipla detecção por tubo fotomultiplicador), fabricado por TTP LABTECH LTD) para 81 ΡΕ2125794 medir a fosfo-histona H3, o conteúdo em ADN e as células mitóticas foram medidas por condensação de ADN. A análise de imagens foi baseada em sinais de fluorescência celular para identificar células em diferentes subpopulações. As células positivas pHH3(S10) foram identificadas por meio da intensidade a 500-530 nm acima do limiar. Foi utilizada a intensidade total a 655-705 nm a partir de iodeto de propídio/ADN para identificar células individuais (células com um conteúdo em ADN de 2 N a 4 N) e subpopulações no ciclo celular (células 2N, células 4N) . A intensidade do pico a 575-640 nm foi utilizada para identificar a condensação do ADN que foi utilizado como marcador para identificar células mitóticas de entre as células 4N. Os resultados dos ensaios são a percentagem de cada subpopulação identificada, %pHH3, %2N, %4N, %mitóticas e número total de células. O EC50 foi determinado por ajustamento a uma curva logística de quatro parâmetros para cada resultado utilizando a aplicação ACTIVITY BASE™. Os valores resultantes de EC50 para pHH3(slO), conteúdo em ADN, e mitóticas tinham um MSR de 2,6, 2,4 e 2,5, res-pectivamente. Por exemplo, o Exemplo 4 tinha, para pH3 (slO), um EC50 = 24 nM (n = 1), para o conteúdo em ADN EC50 = 35 nM (n = 2) e para as mitóticas EC50 = 22 nM (n = 1).

Ensaio antiproliferativo.

Os efeitos dos compostos sobre a proliferação celular podem ser determinados utilizando células e métodos de proliferação celular bem conhecidos na arte (Robert C. 82 ΡΕ2125794

Squatrito et al., Gynecological Oncology, 58, 101-105, (1995)). Por exemplo, células HCT116, que podem ser obtidas a partir da American Type Culture Collection, podem ser semeadas a -2000 células/poço em microplacas de 96 poços e deixadas ligarem-se de um dia para o outro num incubador humidificado com C02 a 37 °C. A seguir à incubação de 20-24 horas, são adicionados os compostos diluídos em séries semi-logarítmicas e as placas voltam para o incubador. Após uma duração de exposição apropriada (por exemplo, 72 horas), é estimada a proliferação celular utilizando métodos bem conhecidos. Num método, são adicionados às placas com as células 10 pL de um sal tetrazólio, tal como Alamar Blue™. Após uma exposição apropriada ao corante, é determinada a fluorescência (excitação a 530 nm, emissão a 580 nm) . 0 IC50 resultante tinha um MSR de 3,1. Por exemplo, o Exemplo 4 tinha um IC50 de 44 nM (n = 3).

Os compostos da presente invenção são formulados preferencialmente na forma de composições farmacêuticas administradas por uma variedade de vias. Com a máxima preferência, tais composições são para administração oral. Tais composições farmacêuticas e processos para as preparar são bem conhecidos na arte. Veja-se, por exemplo, REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (A. Gennaro, et al., eds., 19a ed., Mack Publishing Co., 1995).

Os compostos com a fórmula (I) são geralmente eficazes dentro de uma larga gama de dosagem. Por exemplo, as dosagens diárias caem normalmente dentro da gama de 83 ΡΕ2125794 cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 20 mg/kg de peso corporal, preferencialmente de 0,1 mg/kg a cerca de 20 mg/kg de peso corporal. Em alguns casos, podem ser mais do que adequados níveis de dosagem abaixo do limite inferior da gama acima mencionada, enquanto que noutros casos poderão ser empregues doses ainda maiores sem causarem qualquer efeito secundário prejudicial, e, portanto, a gama de dosagem acima não tem a intenção de limitar o objectivo da invenção em qualquer forma. Será entendido que a quantidade do composto realmente administrada será determinada pelo médico, à luz das circunstâncias relevantes, incluindo a condição a ser tratada, da via de administração escolhida, do composto ou compostos realmente administrados, da idade, peso, e resposta do paciente individual, e da gravidade dos sintomas do paciente.

Lisboa, 3 de Janeiro de 2011

Claims (10)

1. ΡΕ2125794 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto com a fórmula:

   em que: R1 é aminometilo, alquil (C1-C3) -aminometilo, di-alquil (C1-C2) -aminometilo, N-etil-N-metil-aminometilo, 1-aminoetilo, 1-(alquil(Ci—C2)-amino)-etilo, 3,3,3-trifluoro-propilaminometilo, etinilo, 2-hidroxi-etoxilo, 2-hidroxi-etilaminometilo, 2-cianoetilaminometilo, morfolin-4-il-metilo, metoximetoximetilo, ciclopropilo, 1-azetidinil-metilo, 1-pirrolidinilmetilo, ou 1,3-dioxolan-2-ilo; R2 é hidrogénio ou halo; R3 é hidrogénio ou halo; com a condição de que pelo menos um de R2 e R3 seja hidrogénio; R4 é hidrogénio, metilo, ou halo; e 2 ΡΕ2125794 ----- é uma ligação simples que está tanto presente como ausente, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
2. 2. Composto da Reivindicação 1, em que: R2 é hidrogénio ou fluoreto; R3 é hidrogénio, cloreto, ou fluoreto; com a condição de que pelo menos um de R2 e R3 é hidrogénio; e R4 é hidrogénio, metilo, cloreto, ou fluoreto; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
3. 3. Composto da Reivindicação 1, em que: R1 é dimetilaminometilo, metilaminometilo ou aminometilo; R2 é hidrogénio ou fluoreto; R3 é hidrogénio, cloreto, ou fluoreto; com a condição de que pelo menos um de R2 e R3 seja hidrogénio; e R4 é hidrogénio, metilo, cloreto, ou fluoreto; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 3 ΡΕ2125794
4. 4. Composto da Reivindicação 1, em que R1 é dimetilaminometilo, R2 é hidrogénio, R3 é fluoreto, e R4 é fluoreto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
5. 5. Composto da Reivindicação 1, em que R1 é metilaminometilo, R2 é hidrogénio, R3 é fluoreto, e R4 é fluoreto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
6. 6. Composto da Reivindicação 1, em que R1 é aminometilo, R2 é hidrogénio, R3 é halo, e R4 é halo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7. 7. Composto seleccionado a partir do grupo consistindo de: 1—(2—{4—[7—(5—((Dimetilamino)metil)-2-fluoro-piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoropirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona, 1—(2—{4—[7—(2-Fluoro-5-(morfolinometil)-piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]pirimidin-2-ilamino}etil)imida-zolidin-2-ona, 1-(2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-(morfolinometil)-piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-ilamino}-etil)imidazolidin-2-ona, 4 ΡΕ2125794 1—(2 — {4—[7—(5—((Dimetilamino)metil)-2-fluoropiri-din-4-il)benzo[b]tiofen-2-il] pirimidin-2-ilamino }etil)-imidazolidin-2-ona, 1-(2-{5-Fluoro-4-[7-(3-(morfolinometil)-piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]pirimidin-2-ilamino}etil)imida-zolidin-2-ona, 1— (2 — {4—[7—(5—(1,3-Dioxolan-2-il)-2-fluoropiri-din-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoropirimidin-2-ilami-nojetil)imidazolidin-2-ona, 1- (2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-3-((metoximetoxi)-metil)-piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]pirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona, 1— (2 — {4—[7—(5-Ciclopropil-2-fluoropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoropirimidin-2-ilamino}-etil)imidazolidin-2-ona, 1-(2-(5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-(pirrolidin-1-ilmetil)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]pirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona, 1-(2-(4-(7-(5-(Azetidin-l-ilmetil)-2-fluoropi-ridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-5-fluoropirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona, 5 ΡΕ2125794 1— (2 — {5—Cloro—4—[7—(5—((dimetilamino)metil)-2-f luoropiridin-4-il) benzo [b]tiofen-2-il] pirimidin-2-ilamino}etil)imidazolidin-2-ona, 1—{2—[5-Fluor0-4-(7-{2-fluoro-5-[(2-hidroxi-eti lamino) -me til] piridin-4-il} benzo [£>]tiofen-2-il)piri-midin-2-ilamino]-etil}imidazolidin-2-ona, 1- (2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-((propilamino)me til)piridin-4-il)benzo[jb]tiofen-2-il] pirimidin-2-i lamino} -etil)imidazolidin-2-ona, 1-(2-(4-(7-(5-((Etilamino)metil)-2-fluoropiridin 4-il) benzo [£>]tiofen-2-il) - 5-fluoropirimidin-2-i lamino) -etil)imidazolidin-2-ona, 1—{2—[4—(7—{5—[(Etil(metil)amino)-metil]-2-f luoropiridin-4-il jbenzo [b] tiofen-2-il) -5-fluoropirimidin-2-ilamino]etil}imidazolidin-2-ona, 1—(2—{4—[7—(5—((Dietilamino)metil)-2-fluoropiri-din-4-il)benzo[jb]tiofen-2-il] -5-f luoropirimidin-2-ilami-nojetil)imidazolidin-2-ona, 1— (2 — {4—[7—(5—((Dimetilamino)metil)-2-fluoropi-ridin-4-il)-benzo[b]tiofen-2-il]-5-metilpirimidin-2-il-amino}etil)imidazolidin-2-ona, 6 ΡΕ2125794 1- (2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-((metilamino)me til)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-pirimidin-2-ilami-no}etil)imidazolidin-2-ona, 1—(2—{4—[7—(2-Fluor0-5-((metilamino)metil)piri-din-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]-5-metilpirimidin-2-ilami-nojetil)imidazolidin-2-ona, 1- (2-{5-Cloro-4-[7-(2-fluoro-5-((metilamino)me-til)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]pirimidin-2-ilami-nojetil)imidazolidin-2-ona, 1-(2—{4—[7-(2-Fluoro-5-((metilamino)metil)-piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]pirimidin-2-ilamino}-etil)imidazolidin-2-ona, 1—[2—(4—{7—[5—(1-Aminoetil)-2-fluoropiridin-4-il]benzo[b]tiofen-2-il}-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil] imidazolidin-2-ona, 1-(2-{5-Fluoro-4-[7-(2-fluoro-5-((metilamino)-metil)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il]pirimidin-2-ilamino}etil) -lií-imidazol-2 (3H) -ona, 1—{2—[5-Fluor0-4-(7-{2-fluoro-5-[(3,3,3-trifluo ro-propilamino)-metil]-piridin-4-il}benzo[b]tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino]etil}imidazolidin-2-ona, 7 ΡΕ2125794 3-{ [6-Fluor0-4-(2-{5-fluoro-2-[2-(2-oxoimida-zolidin-l-il) etilamino] pirimidin-4-il} benzo [b]tiofen-7-il)piridin-3-il]metilamino}-propanonitrilo, 1- (2—{4—[7-(5-(Aminometil)-2-fluoropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il] -5-f luoropirimidin-2-i lamino} etil) imidazolidin-2-ona, A?— 1— [2— (4 — {7— [5— (1-Aminoetil) -2-fluoropiridin-4 il]benzo[bJtiofen-2-il}-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil] imidazolidin-2-ona, S—1—[2—(4—{7—[5—(1-Aminoetil)-2-fluoropiridin-4 il]benzo[b]tiofen-2-il}-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil] imidazolidin-2-ona, 1- [2-(5-Fluor0-4-{7-[2-fluoro-5-(2-hidroxieto-xi)piridin-4-il]benzo[b]tiofen-2-il}pirimidin-2-ilamino)-etil]imidazolidin-2-ona, 1-(2-(4-(7-(3-Etinilpiridin-4-il)benzo[b]tiofen 2-il)pirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona, 1-(2-(4-(7-(3-Etinilpiridin-4-il)benzo[£>] tiof en 2-il)-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona 1-(2-(4-(7-(5-(1-Aminoetil)-2-cloropiridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)-5-fluoropirimidin-2-ilamino)-etil)imidazolidin-2-ona, 8 ΡΕ2125794 5-1-(2-(4-(7-(5-(1-(Etilamino)etil)-2-fluoropi-ridin-4-il) benzo [b]tiofen-2-il) -5-f luoropirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona, R-1-(2-(4-(7-(5-(1-(Etilamino)etil)-2-fluoropi-ridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)-5-fluoropirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona, S-l-(2-(5-Fluor0-4-(7-(2-fluoro-5-(1-(metil-amino)etil)piridin-4-il)benzo[ Jb]tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona, e R-1-(2-(5-Fluoro-4-(7-(2-fluoro-5-(1-(metil-amino)etil)piridin-4-il)benzo[b]tiofen-2-il)pirimidin-2-ilamino)etil)imidazolidin-2-ona; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
8. 8. Composição farmacêutica incluindo um composto das Reivindicações 1-7 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um veiculo, diluente ou exci-piente farmaceuticamente aceitável.
9. 9. Composto de qualquer uma das Reivindicações 1-7 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para utilização em terapia. 9 ΡΕ2125794
10. 10. Composto de qualquer uma das Reivindicações 1-7 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de um cancro seleccionado a partir do grupo consistindo de cancro do pulmão de não pequenas células, orofaríngeo, esofágico, gástrico, melanoma, carcinoma epidermóide da pele, da mama, do ovário, do endométrio, colo-rectal, neuroglioma, glioblastoma, carcinoma da tiróide, cervical, pancreático, da próstata, hepatoblastoma e linfoma não-Hodgkin num mamífero. Lisboa, 3 de Janeiro de 2011 1 ΡΕ2125794 REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento da patente Europeia. Ainda que tenha sido tomado o devido cuidado ao compilar as referências, podem não estar excluídos erros ou omissões e o IEP declina quaisquer responsabilidades a esse respeito. Documentos de patentes citadas na Descrição VSOOÊG6S172A mst&smmk Literatura que não é de patentes citada na Descrição P. Stahfetaí. H ft^DBDOKOFPHASMACELíTíCAL 51LTS· PROP£RTi£S>. SSEGTK3& AND «SE V CHA 'Wiíey-V ΠΗ, * S,SS, Baígé «i StSafe .d&xssssá‘ fe JsíisaE 1ST?V voi «t * vas1 d»W«e«E B. C.; $LH, Medarcia. gísâ-mt:<1à. msyÁizi^ ·1 sfc ^seém, ·§§§. wA m, um * Bí» Sssaag st aL Om0tm, 1SS9, fe. íS. &32S-S:3;36 1 Sfseres; W»ta. PíotssSse G?í&psís Orçsfe &fí-• tvsas. ífcim.waejf and Sass 139S * StrsfeSwdtK.: A. UBrish, •$QQ6. δ i4>. S»-SS;