PT1742926E - Derivados de benzeno-halogénio triméricos substituídos macrociclicamente - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO

"DERIVADOS DE BENZENO-HALOGÉNIO TRIMERICOS SUBSTITUÍDOS MACROCICLICAMENTE" A presente invenção refere-se aos objectos indicados nas reivindicações: Novos derivados tri-iodobenzeno e tribromobenzeno triméricos substituídos macrociclicamente, sua preparação e utilização como meio de contraste em diagnósticos por raios-x e TRM.

Durante o último século alcançaram-se progressos impressionantes em diagnósticos por imagiologia. As técnicas de imagiologia, tal como DAS, TC e TRM evoluíram para ferramentas normais e imprescindíveis no diagnóstico e radiologia de intervenção e oferecem actualmente uma resolução espacial de menos de 1 mm. As possibilidades de utilização destas técnicas aumentam ainda de forma decisiva por meio da utilização de meios de contraste. Esta ampla divulgação e aceitação actual do meio de contraste no diagnóstico com raios-x deve-se à introdução de compostos aromáticos tri-iodados, monoméricos, não iónicos nos anos 80, bem como aos compostos aromáticos iodados, diméricos, isoosmolares introduzidos nos anos 90. Graças a estas duas classes de compostos, a frequência de efeitos secundários induzidos pelos meios de contraste diminuiu para 2 a 4% (Bush W.H., Swanson D.P.: Acute reactions to intravascular contrast media: Types, risk factors, recognition and specific treatment. AJR 157, 1153-1161, 1991. Rydberg J., Charles J., Aspelin P.: Frequency of late allergy-like adverse reactions following injection of intravascular non-ionic contrast media. Acta Radiológica 39_, 219-222, 1998). A utilização do meio de contraste associado às técnicas de 2 imagiologia modernas alcança hoje desde a detecção de tumores até à representação de alta definição de vasos, até à determinação quantitativa de factores fisiológicos tais como a permeabilidade ou perfusão de órgãos. É decisiva para o contraste e sensibilidade a concentração do meio de contraste de raios-x (neste caso átomos de iodo). Apesar dos aperfeiçoamentos da técnica, não foi possível reduzir a concentração ou dose de aplicação necessária para um diagnóstico médico. Assim, num exame CT clássico injecta-se 100 g de substância ou mais por paciente.

Apesar ter sido melhorada a tolerância ao meio de contraste de raios-x, por meio da introdução de benzenos tri-iodados não iónicos, os efeitos secundários são ainda muitos. Devido aos números muito elevados de exames, da ordem dos vários milhões por ano em diagnóstico com raios-x, são afectados dezenas de milhar de pacientes. Os efeitos secundários induzidos pelos meios de contraste vão desde reacções ligeiras como náuseas, tonturas, vómitos, urticária até reacções graves como broncoespasmo, falha renal ou até mesmo reacções como choque ou mesmo morte. Afortunadamente, estes casos graves são muito raros e são observados com uma frequência de 1/200000 (Morcos S.K., Thomsen H.S.: Adverse reactions to iodinated contrast media. Eur Radiol _11, 1267-1275, 2001).

No entanto, a frequência destes efeitos secundários também observados como pseudoalérgicos induzidos pelo meio de contraste é por volta do factor 3 em pacientes atópicos e por volta do factor 5 em pacientes com uma anamnése de efeitos secundários induzidos pelo meio de contraste. A asma aumenta o risco de efeitos secundários induzidos pelo meio de contraste por volta do factor 6, no caso de meios 3 de contraste não iónicos (Thomsen H.S., Morcos S.K.: Radiographic contrast media. BJU 8_6 (Suppll), 1-10, 2000. Thomsen H.S., Dorph S.: High-osmolar and low-osmolar contrast media. An update on frequency of adverse drug reactions. Acta Radiol 34_, 205-209, 1993. Katayama H, Yamaguchi K., Kozuka T., Takashima T., Seez P., Matsuura K.: Adverse reactions to ionic and nonionic contrast media. Radiology 175, 621-628, 1990. Thomsen H.S., Bush Jr W.H.: Adverse effects on contrast media. Incidence, prevention and management. Drug Safety _19: 313-324, 1998) . Nestas situações, o investigador utiliza ultimamente, cada vez mais, quelatos Gd isentos de iodo em vez dos compostos aromáticos tri-iodados clássicos na tomografia computorizada, mas também na radiologia intervencionai bem como DSA (Gierada D.S., Bae K.T.: Gadolinium as CT contrast agent: Assessment in a porcine model. Radiology 210, 829-834, 1999. Spinosa D.J., Matsumoto A.H., Hagspiel K.D., Angle J.F., Hartwell G.D.:Gadolinium-based contrast agents in angiography and interventional radiology. AJR 173; 1403-1409, 1999. Spinosa D.J., Kaufmann J.A., Hartwell G.D. : Gadolinium chelates in angiography and interventional radiology: A useful alternative to iodinated contrast media for angiography. Radiology 223, 319-325, 2002) . Por um lado, esta opção fundamenta-se na muito boa tolerância dos quelatos metálicos utilizados em TRM, mas também no facto conhecido que os lantanideos são igualmente opacos aos raios-x. O gadolinio e outros lantanideos, apresentam em comparação com o iodo, em especial no caso dos níveis de tensão/energia elevados da radiação por raios-x, uma maior absorção que o iodo, de forma que são principalmente adequados como elementos de contraste para o diagnóstico por raios-x (Schmitz S., Wagner S., Schuhmann-Giampieri G., Wolf K.J.: Evaluation of gadobutrol in an rabbit model as a 4 new lanthanide contrast agent for Computer tomography. Invest. Radiol. 30(11) : 644-649, 1995).

Os compostos de quelatos com Gd utilizados originalmente na TRM mencionados, têm igualmente boa hidrossolúbilidade e destacam-se por uma excelente tolerância. Em comparação com os meios de contraste com iodo/não iónicos, a taxa de reacções pseudoalérgicas ligeiras diminui fortemente, a taxa de reacções fatais é muito rara e é reproduzida com 1/1000000 (Runge V.M.: Safety of approved MR contrast media for intravenous injection. J. Magn Reson Imaging 12_, 205-213, 2000) . As reacções pseudoalérgicas, ao contrário de outros efeitos secundários induzidos pelos meios de contraste, como p.ex. a tolerância renal, antes independentes da dose administrada. Assim, mesmo em pequenas doses podem activar uma reacção pseudoalérgica. São desejadas substâncias que reúnam as vantagens das duas classes de compostos quimicamente totalmente diferentes. A hidrofilia dos quelatos metálicos extraordinariamente elevada é responsável por uma taxa de tolerância reduzida. Os compostos aromáticos iodados têm uma lipofilia maior na ordem das 100 a 200 vezes (maior coeficiente de distribuição entre butanol/água) do que os quelatos metálicos.

Graças à menor concentração de substância e à pequena fracção especifica do metal reprodutor da imagem na molécula total, os quelatos metálicos conhecidos até agora não são óptimos para o diagnóstico por raios-x (Albrecht T., Dawson P.: Gadolinium-DTPA as X-ray contrast médium in clinicai studies. BJR 73, 878-882, 2000). Novas abordagens 5 para resolver este problema descrevem a preparação de conjugados de complexos metálicos em que estão ligados a um complexo metálico de cadeia aberta ou macrociclico compostos aromáticos tri-iodados covalentes (US 5 324 503, US 5 403 576, WO 93/16375, WO 00/75141, WO 97/01359, WO 00/71526, em especial a US 5 660 814) . Porém, devido à sua hidrofilia e elevada viscosidade estes não podem ser aplicados numa concentração suficiente e volume capaz.

Os compostos 3 do exemplo 3 e 4 do exemplo 4 divulgados pela US 5 660 814, do próximo estado da técnica, são em comparação com os compostos de acordo com a presente invenção 1) iónicos e têm assim uma osmolalidade maior numa ordem de 2 em comparação com os compostos neutros de acordo com a presente invenção, o que é especialmente negativo em doses elevadas, 2) são substancialmente mais lipófilos que os compostos de acordo com a presente invenção (observação na coluna 5/linha 29 da US 5 660 814, os compostos do estado da técnica são úteis como meio de contraste hepático), 3) as substâncias 3 e 4 da US 5 660 814 são substancialmente mais tóxicas que os compostos de acordo com a presente invenção (vide LD5o bem como coeficiente de distribuição) e 4) a relaxividade para a reprodução de imagem em RM é portanto pior. O objectivo reside na preparação de compostos com uma hidrofilia suficiente, em comparação com a dos quelatos de Gd e adicionalmente com uma elevada concentração de elementos de contraste. Seriam desejáveis valores, que são 6 nitidamente mais elevados do que os quelatos metálicos situados a cerca de 25 % (g/g). A uma concentração maior é necessário conferir ainda uma hidrossolubilidade muito boa. As soluções muito concentradas devem apresentar, a par das suas boas caracteristicas farmacológicas, uma viscosidade praticável e uma pressão osmótica reduzida.

Este objectivo foi atingido com a presente invenção.

Os complexos metálicos de acordo com a presente invenção da fórmula geral I

Hal (I) em que

Hal representa bromo ou iodo, A1 representa um resíduo -CONR1- (CH2)n-NR2- (CO-CHZ1-NH)mCO-CHZ2-K, A2 representa o resíduo -NR1-CO-CHZ2-K, em que R1 e R2 representam independentemente um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo-Ci-C2 ou um grupo alquilo-Ci-C2-mono-hidroxi,

Z1 e Z2 independentemente um do outro, representam um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, n representa os números 2 a 4, m representa os números 0 ou 1 e K representa um macrociclo da fórmula IA 7coox r

coox k coox (Ia) com X a significar um átomo de hidrogénio ou um equivalente ião metálico com número atómico 20 a 29, 39, 42, 44 ou 57 a 83, desde que pelo menos dois X representem equivalentes iões metálicos e eventualmente os grupos carboxi livres existentes estejam presentes como sais de bases ou aminoácidos orgânicos e/ou inorgânicos ou amidas de aminoácidos, apresentam uma solubilidade muito boa e um coeficiente de distribuição comparável à com quelatos Gd. Além disso, os novos compostos apresentam um elevado teor específico de elementos de contraste, uma baixa viscosidade e osmolalidade e, portanto, uma tolerância/compatibilidade de forma que são extraordinariamente adequados como meio de contraste para a imagiologia com rais-x e RM.

De preferência, Hal representa iodo, R1 e R2 representam hidrogénio e o grupo metilo, m representa o número 0 e n representa o número 2.

Os resíduos A1 mencionados a título de exemplo são: -CONH (CH2) 2;3NHCOCH2NHCOCH (CH3) -K, -CONH (CH2) 2;3NHCOCH2NHCOCH2-K, -CONH (CH2) 2;3NHCOCH2-K, -CONH (CH2) 2;3NHCOCH (CH3) -K, -CON (CH2CH2OH (CH2) 2nhcoch2-k os resíduos A2 mencionados a título de exemplo são: -NHCOCH (CH3) -K, -NHCOCH2-K, -N(CH3)COCH2-K, -N(CH3)COCH(CH)3-K, -N(CH2CH2OH)COCH2-K, -N (CH2CH2OH) COCH (CH3) -k.

Os compostos de acordo com a presente invenção da fórmula geral I podem ser preparados segundo processos conhecidos dos especialistas, fazendo-se reagir um composto aromático tri-iodado ou tribromado da fórmula geral II

(II)

de um modo conhecido com um macrociclo da fórmula geral III

em que W representa um grupo de protecção ou um grupo -CH2COOX' com X' a significar X ou um grupo de protecção e A1' a significar -CO-NR1- (CH2) n-NR2- (CO-CHZ^NH) m-CO-CHZ2-Hal' e A2' a representar -NR1-CO-CHZ2-Hal' com Hal' a significar cloro ou bromo e em seguida eventualmente se remover o grupo de protecção W e se introduzir os resíduos CH2COOX de um modo conhecido em si ou se remover o grupo de protecção representado eventualmente por X' e em seguida, de um modo 9 conhecido em si, se fazer reagir com um óxido metálico ou sal metálico de um elemento com número atómico 20 a 29, 39, 42, 44 ou 57 a 83.

Como grupos de protecção amino W são habituais para o especialista grupos benziloxicarbonilo, butoxicarbonilo terciário, trifluoracetilo, fluorenilmetoxicarbonilo, benzilo, formilo, 4-metoxibenzilo, 2,2,2— tricloretoxicarbonilo, ftaloilo, 1,2-oxazolino, tosilo, ditiasuccinoilo, aliloxicabonilo, sulfato, pent-4-encarbonilo, 2-cloracetoximetilo (ou 2-cloracetoxietilo) benzoilo, tetracloroftaloilo, alquiloxicarbonilo [Th. W. Greene, P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Syntheses, 2nd ed, John Wiley and Sons (1991), S. 309 -385; E. Meinjohanns et al, J. Chem. Soc. Pekin Trans 1, 1995, 405; U. Ellensik et al, Carbohydrate Research 280, 1996, 251; R. Madsen et al, J. Org. Chem. _60_, 1995, 7920; R.R. Schmidt, Tetrahedron Letters 1995, 5343]. A cisão dos grupos de protecção é realizada de acordo com processo conhecido do especialista (vide p.ex. E. Wunsch, Methoden der Org. Chemie, Houben-Weyl, vol XV/1, 4a edição 1974, p. 315), por exemplo por meio de hidrólise, hidrogenólise, saponificação alcalina do éster com alcali em solução aquosa-alcoólica a temperaturas entre 0 °C e 50 °C, saponificação ácida com ácidos minerais ou, no caso de grupos Boc, com auxilio de ácido trifluoroacético.

Se X representar um grupo de protecção ácido então interessam grupos alquilo, arilo e aralquilo inferiores, por exemplo o grupo metilo, etilo, propilo, butilo, fenilo, benzilo, difenilmetilo, trifenilmetilo, bis-(p-nitrofenil)-metilo, bem como grupos trialquilsililo. 10 São preferidos os grupos t-butilo e benzilo. A cisão dos grupos de protecção é realizada de acordo com o processo conhecido do especialista (vide p.ex. E. Wunsch, Methoden der Org. Chemie, Houben-Weyl, vol XV/1, 4a edição 1974, p. 315), por exemplo por meio de hidrólise, hidrogenólise, saponificaçâo alcalina do éster em solução aquosa-alcoólica a temperaturas entre 0 °C e 50 °C, saponificaçâo ácida com ácidos minerais ou, no caso de ésteres terc.-butilicos, com auxilio de ácido trifluoroacético (Protective Groups in Organic Synthesis, 2a Edição, T.W. Greene e P.G.M.Wuts, John Wiley and Sons Inc., New York, 1991). A introdução dos iões metálicos desejados pode ser realizada da forma divulgada nas patentes EP 71564, EP 130934 e DE-OS 34 01 052. Para este fim, o óxido metálico ou um sal metálico (por exemplo um cloreto, nitrato, acetato, carbonato ou sulfato) do elemento desejado é dissolvido ou suspenso em água e/ou um álcool inferior (como metanol, etanol ou isopropanol) e feito reagir com a solução ou suspensão da quantidade equivalente do complexante. A neutralização de grupos carboxi eventualmente ainda existentes tem lugar com auxilio de bases inorgânicas (p.ex. hidróxidos, carbonatos ou bicarbonatos) p.ex. sódio, potássio, litio, magnésio ou cálcio e/ou bases orgânicas como entre outras aminas primárias, secundárias e terciárias, como p.ex. etanolamina, morfolina, glucamina, N-metilglucamina e Ν,Ν-dimetilglucamina, bem como aminoácidos básicos, como p.ex. lisina, arginina e ornitina ou amidas de aminoácidos originalmente neutros ou ácidos. 11

Para a preparação de compostos complexos neutros pode-se adicionar a sais complexos ácido em solução ou suspensão aquosa tanta base desejada até atingir o ponto neutro. A solução obtida pode depois ser concentrada sob vácuo até à secura. Frequentemente é vantajoso fazer precipitar os sais neutros formados por meio da adição de solventes misciveis em água, como p.ex. álcoois inferiores (metanol, etanol, isopropanol e outros), cetonas inferiores (acetona e outras), éteres polares (tetra-hidrofurano, dioxano, 1,2-dimetoxietano e outros) para se obter cristais fáceis de isolar e de fácil limpeza. Constatou-se ser especialmente vantajoso adicionar a base desejada logo durante a formação do complexo da mistura reaccional e poupar assim uma etapa do processo. A purificação dos complexos obtidos desta forma é realizada eventualmente depois do ajuste do valor do pH por meio da adição de um ácido ou base até ao pH 6 a 8, de preferência cerca de 7, de preferência por meio de ultrafiltração com membranas de dimensão de poro adequada (p.ex. Amicon®YMl, Amicon®YM3), filtração em gel em p.ex. géis de Sephadex® adequados ou por meio de HPLC sobre gel de sílica ou material de fase inversa.

Uma purificação pode também ter lugar por meio de cristalização a partir de solventes como metanol, etanol, i-propanol, acetona ou outras misturas com água.

No caso de compostos complexos neutros é frequentemente vantajoso fornecer os complexos oligoméricos por um permutador de aniões, por exemplo IRA 67 (forma OH") e eventualmente ainda por um permutador de catiões por 12 exemplo IRC 50 (forma H+) para separação de componentes iónicos. A preparação dos compostos de acordo com a presente invenção da fórmula geral I pode ser realizada tal como anteriormente indicado: A reacção de compostos aromáticos tri-iodados ou tribromados da fórmula geral II com compostos da fórmula geral III é realizada de acordo com o processo conhecido do especialista da alquilação de macrociclos com N. Desta forma são alquilados compostos da fórmula geral II, em que A1' representa -CO-NR1- (CH2) n-NR2- (CO-CHZ^NH) m-CO-CHZ2Hal' e A2' representa -NR1-CO-CHZ2Hal', com Hal' a significar cloro ou bromo, com a amina livre de III, fazendo-se reagir em solventes apróticos como acetonitrilo, cloreto de etileno, clorofórmio, DMF, DMA, THF, dioxano ou tolueno a temperaturas entre 0° e 80°C, eventualmente com adição de uma base orgânica ou inorgânica como NEt3, piridina, DMAP, base de Hunig, Na2CC>3, CaCC>3. A preparação de compostos da fórmula geral II, em que A1' representa -CO-NR1-(CH2) n-NR2-(CO-CHZ^NH) m-CO-CHZ2Hal' e A2' representa -NR1-CO-CHZ2Hal', com Hal' a significar cloro ou bromo, é realizada segundo processos conhecidos dos especialistas de acilação das aminas da fórmula geral II em que A1' representa -CO-NR1- (CH2) n-NR2- (CO-CHZ^NH) mH e A2' representa -NR1!!, com cloreto de cloroacetilo, brometo de cloroacetilo, brometo de bromoacetilo, brometo de 2-bromopropionilo, cloreto de 2-bromopropionilo ou cloreto de 2-cloropripionilo em solventes apróticos como acetonitrilo, cloreto de metileno, clorofórmio, DMF, DMA, THF, dioxano ou tolueno a temperaturas entre 0o e 40°C, eventualmente com 13 adição de uma base orgânica ou inorgânica como NEt3, piridina, DMAP, base de Hunig, Na2C03, CaCC>3.

A preparação de compostos da fórmula geral II, em que A1' representa -CO-NR1- (CH2) n-NR^CO-CHZ^NHU-H e A2' representa -NR^, é realizada por meio de reacções de compostos da fórmula geral IV

Com diaminas da fórmula geral A HNR1- (CH2)n-NR2H (A) ,

Em que C*0 representa um grupo -COOH- ou carboxilo activado e Hal, R1, R2, n têm o significado anteriormente indicado, segundo os métodos conhecidos dos especialistas de formação de amida (vide acima) num solvente aprótico como DMF, DMA, THF, dioxano, 1,2-dicloroetano, clorofórmio, diclorometano ou tolueno, eventualmente com adição de uma base orgânica ou inorgânica como NEt3, piridina, DMAP, base de Hunig, Na2C03, K2C03, CaC03 a temperaturas entre 0o C e 100° C.

Nalguns casos, revelou-se ser vantajoso utilizar o próprio diaurin como solvente. Por vezes poderá ser vantajoso utilizar um dos dois grupos amino terminais sob forma protegida (p.ex. mono-Boc, mono-Z) e após acoplagem com êxito cindir este grupo de protecção segundo os métodos conhecidos dos especialistas (T.W. Greene, vide acima). 14

As diaminas ou as diaminas monoprotegidas são conhecidas da literatura e podem ser obtidas no comércio (p.ex. ALdrich, Fluka). De preferência, são utilizados os cloretos de ácidos de compostos da fórmula geral IV. A preparação do composto

COCI

é descrito na DE 2943777. A preparação do composto

COCI

é descrito na EP 0033426. A preparação dos compostos tribromados correspondentes é realizada de uma forma análoga à descrita na EP 0073715.

Os compostos da fórmula geral III, como p.ex. ciclos tri-Boc, ciclos tri-Z, ciclos-tri-TFA ou tris-terc-butil-D03A são conhecidos da literatura.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser utilizados tanto em diagnósticos por raios-x como em diagnósticos por RM. 15 A elevada densidade aos raios-x a par com a sua boa hidrossolubilidade do meio de contraste de raios-x halogenado é associada à evidente hidrofilia dos quelatos metálicos e boa compatibilidade intrínseca numa molécula. A hidrofilia muito elevada dos novos compostos leva ainda a que o perfil dos efeitos secundários corresponda ao dos compostos de Gd muito bem tolerados, tal como são utilizados em imagiologia por RM. Esta característica torna-a especialmente adequada para utilização em pacientes com uma alergia comprovada aos compostos iodados ou no caso de atopia existente. Em especial, a incidência dos efeitos secundários mais graves, tal como broncoespasmo e choque ou mesmo morte baixa para o nível mais baixo do meio de contraste de RM. A reduzida osmolalidade das formulações é indício de uma tolerância geral muito boa dos novos compostos. Por esse motivo são especialmente adequados para aplicação intravasal (parentérica).

Conforme a formulação farmacêutica, os meios de contraste podem ser utilizados exclusivamente para diagnósticos por raios-x (complexos tri-halogenados com metais diamagnéticos) mas também simultaneamente para diagnósticos por raios-x e TRM (complexos tri-halogenados com átomos para magnéticos, de preferência GD). Muito vantajosamente os compostos podem ser utilizados, p.ex. na urografia, tomografia computorizada, angiografia, gastrografia, mamografia, cardiologia e neuroradiologia. Mesmo na radioterapia os complexos utilizados são vantajosos. Os compostos são adequados para todas as medições com perfusão. É possível uma diferenciação de áreas bem irrigada com sangue e áreas isquémicas após injecção 16 intravasal. Em geral, estes compostos podem ser empregues em todas as indicações em que são aplicados os meios de contraste convencionais em diagnósticos por raios-x ou RM.

Os novos meios de contraste podem ainda ser utilizados para a técnica de transferência da magnetização (vide p.ex. Journ. Chem.Phys. 39(11), 2892(1963), bem como WO 03/013616), desde que contenham protões móveis na sua estrutura química.

Como diagnóstico é especialmente valioso o contraste de embolias cerebrais e tumores do fígado ou processos compressivos no fígado bem como tumores do abdómen (inclusive rins) e do sistema músculo-esquelético. Devido à reduzida pressão osmótica, são induzíves com especial vantagem os vasos sanguíneos após injecção intra-arterial mas também intravenosa.

Se o composto de acordo com a presente invenção for destinado ao diagnóstico por RM, é necessário que os iões metálicos do grupo emissor do sinal sejam paramagnéticos. Estes são especialmente os iões divalentes e trivalentes dos elementos com os números atómicos 21 a 29, 42, 44 e 58 a 70. Os iões adequados são por exemplo o ião crómio(III), ferro(II), cobalto(II), níquel(II), cobre(II), praseodímio(III) , neodímio(III), samário(III) e itérbio(III). Graças ao seu forte momento magnético são preferidos os iões de gadolínio(III), térbio(III), disprósio(III), hólmio(III), érbio(III), ferro(III) e manganês(II), com especial preferência os iões de gadolínio(III) e manganês(II). 17

Se o composto de acordo com a presente invenção for destinado ao diagnóstico por raios-x, então o ião metálico deriva de preferência de um elemento com um número atómico maior a fim de atingir uma absorção suficiente dos raios-x. Descobriu-se que são apropriados para este fim os meios de diagnóstico que contêm um sal complexo fisiologicamente aceitável com iões metálicos de elementos com números atómicos 25, 26 e 39, bem como 57 a 83. São preferidos os iões de manganês(II), ferro(II), ferro(III), praseodimio(III), neodimio(III), samário(III), gadolinio(III), itérbio(III) ou bismuto(III), em especial iões de disprósio(III) e iões de itérbio(III). A preparação do agente farmacêutico de acordo com a presente invenção é realizada de um modo conhecido em si, suspendendo-se ou dissolvendo-se os compostos complexos de acordo com a presente invenção, eventualmente com adição de aditivos habituais na área de farmácia, em meio aquoso e depois esterilizando-se eventualmente a suspensão ou solução. Os aditivos adequado são, por exemplo, tampões fisiologicamente inofensivos (como por exemplo trometamina) , aditivos de complexantes ou complexos fracos (como por exemplo ácido dietilentriaminpentaacético ou os complexos Ca correspondentes aos complexos metálicos de acordo com a presente invenção) ou, se necessário, electrólitos como por exemplo cloreto de sódio ou, se necessário, antioxidantes como por exemplo ácido ascórbico.

Caso se desejar, para a administração entérica ou parentérica ou outros fins, suspensões ou soluções dos agentes de acordo com a presente invenção em água ou solução salina fisiológica, estes com um ou vários 18 adjuvante(s) habituais na área de farmácia [por exemplo metilcelulose, lactose, manitol] e/ou substância(s) tensioactiva(s) [por exemplo lecitina, Tween®, Myrj®] e/ou aromatizante(s) para correcção do sabor [por exemplo óleos essenciais].

Principalmente, é também possível a preparação do agente farmacêutico de acordo com a presente invenção sem isolamento dos complexos. Em qualquer dos casos, deve-se ter muito cuidado em executar a formação dos quelatos de forma que os complexos de acordo com a presente invenção seja praticamente isentos de iões metálicos com efeitos tóxicos, não complexados.

Tal pode ser conseguido por exemplo com auxílio de indicadores de cor como laranja de xilenol por meio de titulações de controlo durante o processo de preparação. Por conseguinte, a presente invenção refere-se também a um processo para a preparação de dos compostos complexos e seus sais. Como última segurança resta uma purificação do complexo isolado.

No caso da aplicação in-vivo dos agentes de acordo com a presente invenção, estes podem ser administrados juntamente com um suporte adequado, como por exemplo soro ou solução salina fisiológica e em conjunto com uma outra proteína, como por exemplo albumina de soro humana (HSA).

Os agentes de acordo com a presente invenção são aplicados habitualmente por via parentérica, de preferência i.v. Podem também ser aplicados por via intra-arterial ou intersticial/intracutânea, conforme se pretende contrastar um vaso/órgão selectivamente (p.ex. representação das 19 artérias coronárias na sequência de uma injecção intra-arterial) ou tecidos ou patologias (p.ex. diagnóstico de tumores cerebrais na sequência de injecção intravenosa) .

Os agentes farmacêuticos de acordo com a presente invenção contêm de preferência 0,001 a 1 mol/1 do composto mencionado e são normalmente doseados em quantidades de 0,001 a 5 mmol/kg.

Os agentes de acordo com a presente invenção preenchem os múltiplos requisitos para a sua elegibilidade como meio de contraste para a tomografia por ressonância magnética. Assim, são principalmente adequados para melhorar o poder de uma imagem obtida por tomografia RM por meio do aumento da intensidade de sinal, após aplicação por via oral ou parentérica. Além disso, apresentam uma grande eficácia que é necessária para sobrecarregar o corpo com a menor quantidade possivel de substâncias estranhas, e uma boa tolerância que é necessária para sustentar o carácter não invasivo das análises. É de grande vantagem para a utilização na tomografia por ressonância magnética a elevada eficácia (relaxividade) dos compostos paramagnéticos de acordo com a presente invenção. Assim, a relaxividade (L/mmor-1. sec-1 de compostos que contêm gadolinio é normalmente duas a quatro vezes maior do que os complexos de Gd vulgares (p.ex. Gadobutrol). A boa hidrossolubilidade e baixa osmolalidade do agente de acordo com a presente invenção permite a preparação de soluções muito concentrada a fim de manter a compressão da circulação sanguínea dentro de limites capazes e compensar a diluição pelos fluidos corporais. Além disso, os agentes de acordo com a presente invenção apresentam não só uma 20 elevada estabilidade in vitro como também uma surpreendente estabilidade in vivo, de forma que a libertação ou uma permuta dos iões fixos nos complexos, tóxicos em si, tem lugar com extrema lentidão no espaço de tempo em os novos meios de contraste ficam de novo completamente separados.

Em geral, os agentes de acordo com a presente invenção, para serem utilizados como meio de diagnóstico para TRM, são doseados em quantidades entre 0,001 a 5 mMol Gd/kg, de preferência 0,005 a 0,5 mMol Gd/kg.

Os agentes de acordo com a presente invenção são adequados principalmente como meios de contraste em raios-x, sendo de realçar em especial que não se encontrou em análises bioquímicas-farmacológicas nenhum sinal das reacções anafiláticas conhecidas dos meios de contraste iodados. No caso da absorção forte de raios-x, são especialmente eficazes a níveis superiores de tensão nos tubos (p.ex. CT e DSA).

Em geral, os agentes de acordo com a presente invenção são doseados para aplicação como meio de contraste em raios-x, de forma análoga por exemplo diatrizoato de meglumina em quantidades entre 0,01 e 5 mMol/kg, de preferência 0,02 a 1 mMol de substância/kg, que, no caso de p.ex. compostos de iodo Dy corresponde a 0,06 a 6 mMol (l+Dy)/kg. Conforme as dúvidas que se pretende esclarecer com fins de diagnóstico pode-se optar por formulações que podem ser utilizadas tanto num diagnóstico por raios-x como também por RM. A fim de conseguir resultados óptimos para as duas modalidades de imagiologia, poderá ser vantajoso escolher formulações em que percentagem de iões paramagnéticos é reduzida, visto que para muitas aplicações do diagnóstico por RM uma 21 percentagem demasiado elevada de iões para magnéticos não permite mais nenhum ganho.

Para uma utilização dual podem-se utilizar formulações em que a fracção percentual de substâncias paramagnéticas (p.ex. Gd) é reduzida para 0,05 a 50, de preferência 2 a 20 %. Como exemplo pode-se apontar uma aplicação em diagnósticos de problemas cardíacos. Para investigação utiliza-se uma formulação constituída pelas substâncias de acordo com a presente invenção numa concentração total de p.ex. 0,25 mol/L. A fracção de complexo que contem Gd é 20 %, os 80 % restantes dos metais são p.ex. átomos de Dy. No caso de uma angiografia às coronárias por raios-x, na sequência de administração intra-arterial ou intravenosa utiliza-se p.ex. 50 ml, isto é 0,18 mMol de substância por kg de peso corporal, num paciente com 70 kg de peso. Pouco tempo depois de uma imagem por raios-x com êxito das coronárias associa-se-lhe uma análise RM do coração para diferenciar áreas do miocárdio vitais ou necróticas. A quantidade anteriormente aplicada antes da análise, de cerca de 110 pmol Gd/kg é óptima para este fim.

Exemplos

Exemplo 1 a) amida do ácido Ν,Ν-Bis-(2-aminoetil)-5-(metilamino)- 2.4.6- tri-iodisoftálico

Uma solução de 10 g (16,4 mmol) de dicloridrato do ácido 2.4.6- tiiodo-5-(metilamino)-isoftálico (EP 0033426, Sovak, 1/80 US) em 100 ml de tetra-hidrofurano foi adicionada gota a gota a 26,7 ml (399 mmol) de etilenodiamina durante 1 h à temperatura ambiente e agitou-se durante 14 h. O sólido 22 precipitado foi separado por filtração, lavado com etanol, retomado com 100 ml de água e com uma solução de 1M de hidróxido de litio ajustou-se o pH a 8,0. Após concentração por evaporação sob vácuo recristalizou-se a partir de etanol.

Rendimento: 8,7 g (81 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 23,77 H 2,76 N 10,66 I 57,94

Enc.: C 23,98 H 2,71 N 10,62 I 57,68 b) amida do ácido N,N-Bis-[2-(2-brompropionilamino)etil)-5-[(2-brompropionil)metilamino)2,4,6-tri-iodisoftálico 50 g (76,1 mmol) de ) N,N-Bis-(2-aminoetil)-5-(metilamino)-2,4,6-tri-iodisoftálico são dissolvidos em 500 ml de dimetilacetamida e adicionados gota a gota a 0 °C a 75,5 g (350 mmol) de brometo do ácido 2-bromopropiónico (Aldrich) ao longo de 15 min. Em seguida agita-se durante 20 h a 40 °C. A mistura reaccional é vertida em 4 000 ml de água gelada, o sólido precipitado é separado por filtração, dissolvido em 800 ml de acetato de etilo e extraído por três vezes com 250 ml de água de cada vez. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio, o solvente é concentrado até à secura. O produto em bruto é recristalizado a partir de éter metil-terc-butílico.

Rendimento: 57 g (71 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale. : C 24,88 H 2,56 N 6,60

Enc.: C 25,21 H 2,63 N 6,71 c) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2—{10-[1,4,1-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-propionil)metilaminoisoftálico-N/N-jbis- (3-aza-5-metil- 23 4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,1-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) 111,6 g (194,2 mmol) 1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetrazaciclododecan (Delaney et al. , J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1991, 3329) são dissolvidos em 800 ml de acetonitrilo e misturados com 53,7 g (388,4 mmol) de carbonato de sódio. Em seguida, sob forte agitação, são adicionados 55 g (51,8 mmol) de amida do ácido N,N-bis[2-(2-bromopropionilamino)etil)-5- [ (2- bromopropionil)metilamino]-2,4,6-tri-iodisoftálico e aquecidos durante 20 h sob refluxo. Removem-se os componentes insolúveis por filtração, concentra-se até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica (eluente diclorometano/metanol 20:1). As fracções que contêm o produto são reunidas e concentradas por evaporação.

Rendimento: 51,1 g (39 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale. : C 55,73 H 5, 47 N 9,36 I 14,97 Enc. : C 55,91 H 5, 44 N 9,38 I 14,89 d) amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo- 5- [2- tetraazaciclo- dodecanil)propionil]metilaminoisoftálico-Ν,Ν-bis-[3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-il)] 50 g (19,7 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-(2—{10— [1,4,Ί-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10- tetraazaciclododecanil] } propionil) me tilaminoisof tálico-U,!/-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4, l-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclodo-decanil]}) são 24 cuidadosamente misturados entre 0 e 5 °C com 500 ml de HBr/AcOH (33%) e são agitados durante 3 h à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura reaccional é vertida em 2500 ml de éter dietilico, é aspirado o sólido precipitado e é lavado por várias vezes com éter dietilico. O resíduo é dissolvido em 300 ml de água e 300 ml de diclorometano, sob agitação intensa adiciona-se 32% de solução de NaOH até atingir um valor de pH de 10. A fase orgânica é separada, a fase aquosa é extraída por três vezes com 150 ml de diclorometano de cada vez, as fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e concentradas até à secura.

Rendimento: 24,4 g (93 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 41,36 H 6,34 N 17,82 I 28,50

Enc.: C 41,49 H 6,37 N 17,76 I 28,39 e) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2—{10-[1,4,l-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil)metilaminoisoftálico-N,. N-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4, l-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) 23,8 g (17,8 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-[2-(1,4,7,10-tetraazaciclo-dodecanil)propionil]-metilaminoisoftálico-N,N-bis-[3-aza-5-metil-4-oxopentan-1,5-di-il-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-il)] são dissolvidos em 200 ml de água, acrescentam-se 25,7 g (272,7 mmol) de ácido cloroacético por volta de 60 °C com ajusta-se NaOH a 32% a um valor de pH de 9,5. Aquece-se durante 10 h a 70 °C, mantendo-se continuamente o valor de pH da mistura reaccional a 9,5. Após o arrefecimento à temperatura ambiente, ajusta-se com HC1 conc. a um valor de 25 pH de 1 e concentra-se a solução por evaporação sob vácuo. 0 resíduo é agitado com 300 ml de metanol, separam-se os componentes insolúveis por filtração e concentra-se o filtrado por evaporação. O resíduo é dissolvido em 200 ml de água e coloca-se numa coluna permutadora de iões (1.200 ml, IV 120, forma H+-) . Em seguida, lava-se com 5 1 de água e concentra-se o eluído ácido por evaporação. O resíduo é dissolvido em 150 ml de metanol e adicionado gota a gota a 2500 ml de éter dietílico, o sólido precipitado é aspirado, lavado por várias vezes com éter dietílico e seco sob vácuo.

Rendimento: 24,1 g (73 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 41,37 H 5,53 N 12,81 I 20,49

Enc.: C 41,54 H 5,57 N 12,77 I 20,31 f) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2—{10—[1,4, l-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil, complexo Gd)metilaminoisoftálico-W,N-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1, 4,1-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil, complexo Gd]}) 12,8 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10-[1,4,1-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil)metilaminoisoftálico-N,N-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,Ί-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 3,7 g (10,4 mmol) de óxido de gadolínio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificação ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: 26 diclorometano/metanol/amoníaco: 10/10/1). As fracções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de permutador de iões (IV 267 forma H“) durante 2 h e separa- se por filtração, depois agita-se com 10 g de permutador de iões (IRA 67 forma OH~) durante 2 h, filtra-se, mistura-se com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se.

Rendimento: 9,9 g (58 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 6,4 %

Análise elementar (relativamente à substância anidra): Cale.: C 33,12 H 4,04 N 10,26 I 16,40 Gd 20,33

Enc.: C 33,31 H 4,08 N 10,23 I 16,31 Gd 20,27

Exemplo 2 amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2—{10—[1,4,1-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-propionil, complexo Dy)metilaminoisoftálico-./V, N-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil, complexo Dy]}) 12,8 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil ] }-propionil)metilaminoisoftálico-N,N-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) (composto em epígrafe le) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 3,9 g (10,4 mmol) de óxido de disprósio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificação ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: diclorometano/metanol/amoníaco: 10/10/1). As fracções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de 27 permutador de iões (IV 267 forma H") durante 2 h e separa-se por filtração, depois agita-se com 10 g de permutador de iões (IRA 67 forma OH”) durante 2 h, filtra-se, mistura-se com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se. Rendimento: 11,2 g (64 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 7,5 %

Análise elementar (relativamente à substância anidra) : Cale.: C 32,90 H 4,01 N 10,19 I 16,29 Dy 20,86

Enc.: C 33,03 H 4,05 N 10,17 I 16,22 Dy 20,65

Exemplo 3 amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2—{10—[1,4,l-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-propionil, complexo Yb)metilaminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[l,4,1-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil, complexo Yb]}) 12,8 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil)metilaminoisoftálico-NfN-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) (composto em epígrafe le) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 4,1 g (10,4 mmol) de óxido de itérbio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificação ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: diclorometano/metanol/amoníaco: 10/10/1) .

As fraeções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de permutador de iões (IV 267 forma H”) durante 2 28 h e separa-se por filtração, depois agita-se com 10 g de permutador de iões (IRA 67 forma OH") durante 2 h, filtra-se, mistura-se com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se.

Rendimento: 9,5 g (54 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 6,7 %

Análise elementar (relativamente à substância anidra): Cale.: C 32,46 H 3,96 N 10,05 I 16,07 Yb 21,92

Enc.: C 32,61 H 4,00 N 9,97 I 15,98 Yb 21,79

Exemplo 4 amida de ácido 2, 4,6-tri-iodo-5-(2—{10—[1,4,1-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-propionil, complexo Y)metilaminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[l,4,Ί-tris-(carboximetil) -1,4,7,10-tetraazaciclododecanil, complexo Y]}) 12,8 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10 - [1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil)metilaminoisoftálico-NfN-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) (composto em epígrafe le) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 2,35 g (10,4 mmol) de óxido de ítrio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificação ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: diclorometano/metanol/amoníaco: 10/10/1). As fraeções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de permutador de iões (IV 267 forma H") durante 2 h e separa-se por filtração, depois agita-se com 10 g de permutador de iões (IRA 67 forma OH") durante 2 h, filtra-se, mistura-se 29 com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se. Rendimento: 7,8 g (50 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 5,9

Análise elementar (relativamente à substância anidra): Cale.: C 36,33 H 4,43 N 11,25 I 17,99 Y 12,60

Enc.: C 36,52 H 4,49 N 11,28 I 17,81 Y 12,40

Exemplo 5 a) amida do ácido N,N-Bis-[2-(bromacetilamino)etil)-5-[(bromacetil)metilamino]-2,4,6-tri-iodisoftálico 50 g (76,1 mmol) de Ν,Ν-Bis-(2-aminoetil)-5-(metilamino)-2,4,6-tri-iodisoftálico (composto em epígrafe la) são dissolvidos em 500 ml de dimetilacetamida e adicionados gota a gota a 0 °C a 70,6 g (350 mmol) de brometo bromacetilo (Aldrich) ao longo de 15 min. Em seguida agita-se durante 20 h a 40 °C. A mistura reaccional é vertida em 4.000 ml de água gelada, o sólido precipitado é separado por filtração, dissolvido em 800 ml de acetato de etilo e extraído por três vezes com 250 ml de água de cada vez. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio, o solvente é concentrado até à secura. O produto em bruto é recristalizado a partir de éter metil-terc-butílico. Rendimento: 60 g (77 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 22, 38 H 2,08 N 6,87 Enc. : C 22, 63 H 2,21 N 6,75 b) amida de ácido 2,4,6-tri- •iodo- (benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-acetil)metilaminoisoftálico-N,N-bis- (3-aza-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[1,4,7-tris- (benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) 30 122,5 g (213,2 mmol) de 1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetrazaciclododecan (Delaney et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1991, 3329) são dissolvidos em 800 ml de acetonitrilo e misturados com 60 g (426,4 mmol) de carbonato de sódio. Em seguida, sob forte agitação, são adicionados 58 g (56,9 mmol) de amida do ácido N,N-bis[2-(bromacetilamino)etil)-5-[(bromacetil)metilamino]—2,4,6— tri-iodisoftálico e aquecidos durante 20 h sob refluxo. Removem-se os componentes insolúveis por filtração, concentra-se até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica (eluente diclorometano/metanol 20:1). As fracções que contêm o produto são reunidas e concentradas por evaporação. Rendimento: 142 g (54 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 55,23 H 5,32 N 9,52 I 15,22

Enc.: C 55,41 H 5,35 N 9,48 I 15,13 c) amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-[(1,4,7,10-tetraazaciclododecanil)acetil]metilaminoisoftálico-Ν,Ν-bis-[3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-(l,4,7,10-tetraazaciclododecan-il)] 100 g (40 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-({10-[1, 4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}acetil)metilaminoisoftálico-N,N-bis-(3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-{10- [1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) são cuidadosamente misturados entre 0 e 5 °C com 800 ml de HBr/AcOH (33%) e são agitados durante 3 h à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura reaccional é vertida em 4.000 ml de éter dietílico, é aspirado o sólido precipitado e é lavado por várias vezes com éter dietílico. O resíduo é 31 dissolvido em 500 ml de água e 500 ml de diclorometano, sob agitação intensa adiciona-se 32% de solução de NaOH até atingir um valor de pH de 10. A fase orgânica é separada, a fase aquosa é extraida por três vezes com 250 ml de diclorometano de cada vez, as fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e concentradas até à secura. Rendimento: 48,7 g (94 % do teórico) de um sólido incolor

Análise elementar:

Cale.: C 39,92 H 6,08 N 18,40 I 29,42

Enc.: C 40,19 H 6,13 N 18,36 I 29,27 d) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-({10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-acetil)metilaminoisoftálico-N,IV-bis- (3-aza-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[l,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) 45 g (34,8 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-[(1,4,7,10-tetraazaciclododecanil) acetil]metilaminoisoftálico-Ν,Ν-bis-[3-aza-4-oxopentan-1,5-di-il-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-il)] são dissolvidos em 400 ml de água, acrescentam-se 50,2 g (532,8 mmol) de ácido cloroacético e a cerca de 60 °C ajusta-se com NaOH a 32% a um valor de pH de 9,5. Aquece-se durante 10 h a 70 °C, mantendo-se continuamente o valor de pH da mistura reaccional a 9,5. Após o arrefecimento à temperatura ambiente, ajusta-se com HC1 conc. a um valor de pH de 1 e concentra-se a solução por evaporação sob vácuo. O resíduo é agitado com 300 ml de metanol, separam-se os componentes insolúveis por filtração e concentra-se o filtrado por evaporação. O resíduo é dissolvido em 300 ml de água e coloca-se numa coluna permutadora de iões (1.200 32 ml, IV 120, forma H+) . Em seguida, lava-se com 5 1 de água e concentra-se o eluído ácido por evaporação. O resíduo é dissolvido em 250 ml de metanol e adicionado gota a gota a 4.500 ml de éter dietílico, o sólido precipitado é aspirado, lavado por várias vezes com éter dietílico e seco sob vácuo.

Rendimento: 49,9 g (79 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 40,34 H 5,33 N 13,11 I 20,96 Enc.: C 40,57 H 5,34 N 13,07 I 20,77 e) amida de ácido 2,4,6-tri- -iodo-5-({10-[1,4,7-tris (carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-acetil, complexo Gd)metilaminoisoftálico-I'//N-bis- (3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1, 4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil, complexo Gd]}) 12,5 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-({10— [1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10- tetraazaciclododecanil] } -acetil) metilaminoisoftálico-N,iV-bis-(3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 3,7 g (10,4 mmol) de óxido de gadolínio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificação ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: diclorometano/metanol/amoníaco: 10/10/1). As fracções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de permutador de iões (IV 267 forma H") durante 2 h e separa-se por filtração, depois agita-se com 10 g de permutador de iões (IRA 67 forma OH") durante 2 h, filtra- 33 se, mistura-se com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se.

Rendimento: 8,7 g (52 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 5,8 %

Análise elementar (relativamente à substância anidra): Cale.: C 32,15 H 3,85 N 10,45 I 16,71 Gd 20,70

Enc.: C 32,39 H 3,88 N 10,51 I 16,59 Gd 20,51

Exemplo 6 a) amida do ácido Ν,Ν-Bis-(2-aminoetil)-5-amino-2,4,6-tri-iodisoftálico

Uma solução de 10 g (16,8 mmol) de dicloridrato do ácido 5-amino-2,4,6-tiiodoisoftálico (DE 2943777, Schering AG, (Prioridade: 26.10.79)) em 100 ml de tetra-hidrofurano foi adicionada gota a gota a 26,7 ml (399 mmol) de etilenodiamina durante 1 h à temperatura ambiente e agitou-se durante 14 h. O sólido precipitado foi separado por filtração, lavado com etanol, retomado com 100 ml de água e com uma solução de hidróxido de litio 1M ajustou-se o pH a 8,0. Após concentração por evaporação sob vácuo recristalizou-se a partir de etanol.

Rendimento: 8,3 g (77 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 22,42 H 2,51 N 10,89 I 59,21

Enc.: C 22,84 H 2,62 N 10,99 I 58,89 b) amida do ácido Ν,Ν-Bis-[2-(2-brompropionilamino)etil)-5-[(2-brompropionil)amino)2,4,6-tri-iodisoftálico 50 g (77,8 mmol) de ) Ν,Ν-Bis-(2-aminoetil)-5-amino-2,4,6-tri-iodisoftálico são dissolvidos em 500 ml de dimetilacetamida e adicionados gota a gota a 0 °C a 75,5 g 34 (350 mmol) de brometo do ácido 2-bromopropiónico (Aldrich) ao longo de 15 min. Em seguida agita-se durante 20 h a 40 °C. A mistura reaccional é vertida em 4.000 ml de água gelada, o sólido precipitado é separado por filtração, dissolvido em 800 ml de acetato de etilo e extraído por três vezes com 250 ml de água de cada vez. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio, o solvente é concentrado até à secura. O produto em bruto é recristalizado a partir de éter metil-terc-butílico.

Rendimento: 45 g (55 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 24,07 H 2,40 N 6,68

Enc.: C 24,29 H 2,46 N 6,58 c) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10-[1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-propionil)aminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[l,4,7-tris- (benziloxicarbo-nil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) 90,5 g (157,5 mmol) de 1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,40,7,10-tetrazaciclododecan (Delaney et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1991, 3329) são dissolvidos em 800 ml de acetonitrilo e misturados com 43,6 g (315 mmol) de carbonato de sódio. Em seguida, sob forte agitação, são adicionados 44 g (42 mmol) de amida do ácido Ν,Ν-bis-[2-(2-bromopropionilamino)etil)-5-[(2-bromopropionil)amino]-2,4,6-tri-iodisoftálico e aquecidos durante 20 h sob refluxo. Removem-se os componentes insolúveis por filtração, concentra-se até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica (eluente diclorometano/metanol 20:1). As fraeções que contêm o produto são reunidas e concentradas por evaporação. 35

Rendimento: 48,9 g (46 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale. : C 55,56 H 5,42 N 9,41 I 14,05 Enc. : C 55,72 H 5,44 N 9,32 I 13,96 d) amida do ácido 2,4,6-Tri- -iodo-5-[2 tetraazaciclododecanil) propionil] aminoisoftálico-N,!'/-jbis-[3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il- (1,4,7,10-tetraazaciclododecan-il)] 48 g (19 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-(2—{10— [1, 4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclodo-decanil]Ipropionil)aminoisoítálico-N,N-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclodo-decanil]}) são cuidadosamente misturados entre 0 e 5 °C com 500 ml de HBr/AcOH (33%) e são agitados durante 3 h à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura reaccional é vertida em 2.500 ml de éter dietilico, é aspirado o sólido precipitado e é lavado por várias vezes com éter dietilico. O resíduo é dissolvido em 300 ml de água e 300 ml de diclorometano, sob agitação intensa adiciona-se 32% de solução de NaOH até atingir um valor de pH de 10. A fase orgânica é separada, a fase aquosa é extraída por três vezes com 150 ml de diclorometano de cada vez, as fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e concentradas até à secura. Rendimento: 24,3 g (97 % do teórico) de um sólido incolor

Análise elementar: N 18,01 I 28,80 N 17,96 I 28,63 C 40,89 H 6,25 C 41,04 H 6,27

Cale.:

Enc. : 36 e) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil)aminoisoftálico-N,N-bis-(3-aza-5-metil-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) 20 g (15,1 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-[2-(1, 4,7,10-tetraazaciclo-dodecanil)propionil]aminoisoftá-lico-Ν,Ν-bis-[3-aza-4-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-(1,4,7,10-tetraazaciclododecanil)] são dissolvidos em 200 ml de água, acrescentam-se 21,8 g (231,8 mmol) de ácido cloroacético e a cerca de 60 °C ajusta-se com NaOH a 32% a um valor de pH de 9,5. Aquece-se durante 10 h a 70 °C, mantendo-se continuamente o valor de pH da mistura reaccional a 9,5. Após o arrefecimento à temperatura ambiente, ajusta-se com HC1 conc. a um valor de pH de 1 e concentra-se a solução por evaporação sob vácuo. O resíduo é agitado com 300 ml de metanol, separam-se os componentes insolúveis por filtração e concentra-se o filtrado por evaporação. O resíduo é dissolvido em 200 ml de água e coloca-se numa coluna permutadora de iões (1.200 ml, IV 120, forma H+) . Em seguida, lava-se com 5 1 de água e concentra-se o eluído ácido por evaporação. O resíduo é dissolvido em 150 ml de metanol e adicionado gota a gota a 2.500 ml de éter dietílico, o sólido precipitado é aspirado, lavado por várias vezes com éter dietílico e seco sob vácuo.

Rendimento: 18,7 g (67 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 41,03 H 5,47 N 12,91 I 20,64

Enc.: C 41,27 H 5,52 N 12,88 I 20,55 37 f) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-propionil, complexo Gd)aminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-5-metil-4- oxopentan-1,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)- 1.4.7.10- tetraazaciclododecanil, complexo Gd]}) 12,7 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10- [1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil)metilaminoisoftálico-iV,N-bis- (3-aza-5-metil-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)- 1.4.7.10- tetraazaciclododecanil]}) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 3,7 g (10,4 mmol) de óxido de gadolinio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificaçâo ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: diclorometano/metanol/amoníaco: 10/10/1) . As fracções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de permutador de iões (IV 267 forma H") durante 2 h e separa-se por filtração, depois agita-se com 10 g de permutador de iões (IRA 67 forma OH") durante 2 h, filtra-se, mistura-se com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se.

Rendimento: 11 g (64 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 7,3 %

Análise elementar (relativamente à substância anidra): Cale.: C 32,80 H 3,98 N 10,32 1 16,50 Gd 20,45

Enc.: C 33,02 H 4,00 N 10,28 1 16,43 Gd 20,31

Exemplo 7 a) amida do ácido Ν,Ν-Bis-[2-(bromacetilamino)etil)-5-[(bromacetil)amino]-2,4,6-tri-iodisoftálico 38 50 g (77,8 mmol) de Ν,Ν-Bis-(2-aminoetil)-5-amino-2,4,6-tri-iodisoftálico (composto em epígrafe 6a) são dissolvidos em 500 ml de dimetilacetamida e adicionados gota a gota a 0 °C a 70,6 g (350 mmol) de brometo bromacetil (Aldrich) ao longo de 15 min. Em seguida agita-se durante 20 ha 40 °C. A mistura reaccional é vertida em 4.000 ml de água gelada, o sólido precipitado é separado por filtração, dissolvido em 800 ml de acetato de etilo e extraído por três vezes com 250 ml de água de cada vez. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio, o solvente é concentrado até à secura. O produto em bruto é recristalizado a partir de éter metil-terc-butílico.

Rendimento: 60 g (77 % do teórico) de um sólido incolor Rendimento: 33,1 g (42 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale . : C i—1 CM 50 H 1,90 N 6,96 Enc. : C 27, 72 H 1,97 N 6,86 b) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-({10-[1,4,7-tris (benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-acetil)aminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-{10- [1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }) 68,5 g (199,2 mmol) de 1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,40,7,10-tetrazaciclododecan (Delaney et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1991, 3329) são dissolvidos em 500 ml de acetonitrilo e misturados com 33,5 g (238,4 mmol) de carbonato de sódio. Em seguida, sob forte agitação, são adicionados 32 g (31,8 mmol) de amida do ácido N,N-bis[2-bromacetilamino)etil)5-[(bromacetil)amino]-2,4,6-tri-iodisoftálico e aquecidos durante 20 h sob refluxo. Removem-se os componentes insolúveis por filtração, 39 concentra-se até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica (eluente diclorometano/metanol 20:1). As fracções que contêm o produto são reunidas e concentradas por evaporação.

Rendimento: 60,7 g (77 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 55,05 H 5,27 N 9,57 I 15,31

Enc.: C 55,22 H 5,24 N 9,51 I 15,23 c) amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-[ (1,4,7,10-tetraazaciclododecanil)acetil]aminoisoftálico-N,N-bis- [3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-(1,4, 7,10-tetra-azaciclododecan-il)] 60 g (24,1 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-({10— [1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclodo-decanil] Jacetil)aminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-{10-[l,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) são cuidadosamente misturados entre 0 e 5 °C com 500 ml de HBr/AcOH (33%) e são agitados durante 3 h à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura reaccional é vertida em 2.500 ml de éter dietílico, é aspirado o sólido precipitado e é lavado por várias vezes com éter dietílico. O resíduo é dissolvido em 300 ml de água e 300 ml de diclorometano, sob agitação intensa adiciona-se 32% de solução de NaOH até atingir um valor de pH de 10. A fase orgânica é separada, a fase aquosa é extraída por três vezes com 150 ml de diclorometano de cada vez, as fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e concentradas até à secura. Rendimento: 29,4 g (95 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 39,41 H 5,99 N 18,60 I 29,75 40

Enc.: C 39,65 H 6,04 N 18,55 I 29,63 d) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-({10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-acetil)aminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-4-oxopentan-l, 5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }) 28 g (21,7 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-[(1,4,7,10-tetraazaciclo-dodecanil)acetil]aminoisoftálico-Ν,Ν-bis-[3-aza-4-oxopentan-l,5-di-il-(1,4,7,10-tetraazaciclododecanil) ] são dissolvidos em 300 ml de água, acrescentam-se 31,3 g (332,3 mmol) de ácido cloroacético e a cerca de 60 °C ajusta-se com NaOH a 32% a um valor de pH de 9,5. Aquece-se durante 10 h a 70 °C, mantendo-se continuamente o valor de pH da mistura reaccional a 9,5. Após o arrefecimento à temperatura ambiente, ajusta-se com HC1 conc. a um valor de pH de 1 e concentra-se a solução por evaporação sob vácuo. O residuo é agitado com 200 ml de metanol, separam-se os componentes insolúveis por filtração e concentra-se o filtrado por evaporação. O residuo é dissolvido em 300 ml de água e coloca-se numa coluna permutadora de iões (1.200 ml, IV 120, forma H+) . Em seguida, lava-se com 5 1 de água e concentra-se o eluido ácido por evaporação. O residuo é dissolvido em 150 ml de metanol e adicionado gota a gota a 3.000 ml de éter dietilico, o sólido precipitado é aspirado, lavado por várias vezes com éter dietilico e seco sob vácuo. Rendimento: 28,6 g (73 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 39,99 H 5,26 N 13,21 I 20,42

Enc.: C 40,21 H 5,31 N 13,19 I 20,28 41 e) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-({10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-acetil, complexo Gd) aminoisoftálico-A^N-jbis- (3-aza-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil, complexo Gd]}) 12,4 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-({10— [1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-acetil)aminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3-aza-4-oxopentan-1,5-di-il-{10-[1, 4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 3,7 g (10,4 mmol) de óxido de gadolinio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificação ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: diclorometano/metanol/amoníaco: 10/10/1). As fracções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de permutador de iões (IV 267 forma H”) durante 2 h e separa-se por filtração, depois agita-se com 10 g de permutador de iões (IRA 67 forma OH”) durante 2 h, filtra-se, mistura-se com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se.

Rendimento: 8,1 g (48 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 6,9 %

Análise elementar (relativamente à substância anidra):

Cale.: C 32,81 H 3,78 N 10,51 I 16,81 Gd 20,83 Enc. : C 32,99 H 3,81 N 10,49 I 16,75 Gd 20,69

Exemplo 8 a) amida do ácido NfN-Bis-[2-terc- butoxicarbonilaminoacetil-(2-aminoetil)]-5-(metilamino)-2,4, 6-tri-iodisoftálico 42

Uma solução de 10 g (16,4 mmol) de dicloridrato do ácido 2,4,6-tiiodo-5-(metilamino)-isoftálico (EP 0033426, Sovak, 1/80 US) em 100 ml de tetra-hidrofurano foi adicionada a uma solução de 7,82 g (36 mmol) de [ (2-aminoetilcarbamoil)metil]carbamato de terc-butilo (Sobirov et al., Russ. J. Bioorg. Chem. (Engl. Transi.) 1994, 397) e 10 ml de trietilamina em 200 ml de tetra-hidrofurano durante 1 h à temperatura ambiente e agitou-se durante 14 h. Removem-se os componentes insolúveis por filtração, concentra-se até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica (eluente acetato de etilo/hexano 1:1). As fracções que contêm o produto são reunidas e concentradas por evaporação.

Rendimento: 13,5 g (85 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 34,69 H 4,37 N 10,11 I 39,27 Enc. : C 24,91 H co 03 o \—1 s LO I 39,04 b) amida do ácido N, N-Bis-[2-(2-aminoacetilamino)etil)-5 (metilamino)2,4,6-triiodisoftálico 13 g (13,4 mmol) de amida do ácido N,N-Bis-[2-terc-butoxicarbonilaminoacetil-(2-aminoetil)]-5-(metilamino)-2,4,6-triiodisoftálico são cuidadosamente misturados entre 0 e 5 °C com 100 ml de ácido trifluoroacético e agitados durante 3 h à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura reaccional é vertida em 1.500 ml de éter dietílico, é aspirado o sólido precipitado e é lavado por várias vezes com éter dietílico. O resíduo é dissolvido em 200 ml de água e 200 ml de diclorometano, sob agitação intensa adiciona-se 32% de solução de NaOH até atingir um valor de pH de 10. A fase orgânica é separada, a fase aquosa é extraída por três vezes com 100 ml de diclorometano de cada 43 vez, as fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e concentradas até à secura.

Rendimento: 9,9 g (96 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 26,48 H 3,14 N 12,71 I 49,37 Enc. : C 26,64 H 3,12 N 12,76 I 49,19 c) amida do ácido N, brompropionilaminoacetilamino)etil)-5-[(2-brompropionil)metilamino]-2,4,6-triiodisoftálico 57,8 g (75 mmol) de N,N-Bis-[2-(2-aminoacetilamido)etil]-5-(metilamino)-2,4,6-tri-iodisoftálico são dissolvidos em 500 ml de dimetilacetamida e adicionados gota a gota a 0 °C a 75,5 g (350 mmol) de brometo do ácido 2-bromopropiónico (Aldrich) ao longo de 15 min. Em seguida agita-se durante 20 h a 40 °C. A mistura reaccional é vertida em 4.000 ml de água gelada, o sólido precipitado é separado por filtração, dissolvido em 800 ml de acetato de etilo e extraído por três vezes com 250 ml de água de cada vez. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio, o solvente é concentrado até à secura. O produto em bruto é recristalizado a partir de éter metil-terc-butílico.

Rendimento: 54,8 g (62 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 26,55 H 2,83 N 8,34

Enc. : C 26,77 H 2,86 N 8,21 d) amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2—{10-[1,4,l-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}-propionil)metilaminoisoftálico-N,N-bis-(3,6-aza-4,7-dioxo-8-metiloctan-l,5-di-il-{10-[1, 4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil]}) 44 98,9 g (172,1 mmol) de 1,4,7-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetrazaciclododecan (Delaney et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1991, 3329) são dissolvidos em 800 ml de acetonitrilo e misturados com 47,6 g (344,3 mmol) de carbonato de sódio. Em seguida, sob forte agitação, são adicionados 54 g (45,9 mmol) de amida do ácido N,N-bis-[2-(2-bromopropionilaminoacetilamino)etil)-5-[(2-bromopropionil)metilamino]-2,4,6-tri-iodisoftálico e aquecidos durante 20 h sob refluxo. Removem-se os componentes insolúveis por filtração, concentra-se até à secura e cromatografa-se o resíduo sobre gel de sílica (eluente diclorometano/metanol 20:1). As fracções que contêm o produto são reunidas e concentradas por evaporação.

Rendimento: 52,6 g (43 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale. : C 55,14 H 5,46 N 10,01 I 14,33 Enc. : C 55,27 H 5,44 N 9,98 I 14,21 e) amida do ácido 2,4,6-Tri- -iodo-5-[2 tetraazaciclododecanil)propionil]metilaminoisoftálico -Ν,Ν-bis-[3,6-diaza-4,7-dioxo-8-metiloctan-l, 5-di-il-(1,4,7,10-tetraazaciclododecan-il)] 51,5 g (19,4 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-(2-{10—[1,4, Ί-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }propionil)metilaminoisoftálico-N,N-bis-(3,6— diaza-4,7-dioxo-8-metiloctan-l,5-di-il-{10-[1, 4,1-tris-(benziloxicarbonil)-1,4,7,10-tetraazaciclodo-decanil]}) são cuidadosamente misturados entre 0 e 5 °C com 500 ml de HBr/AcOH (33%) e são agitados durante 3 h à temperatura ambiente. Em seguida, a mistura reaccional é vertida em 2.500 ml de éter dietílico, é aspirado o sólido precipitado 45 e é lavado por várias vezes com éter dietílico. 0 resíduo é dissolvido em 300 ml de água e 300 ml de diclorometano, sob agitação intensa adiciona-se 32% de solução de NaOH até atingir um valor de pH de 10. A fase orgânica é separada, a fase aquosa é extraída por três vezes com 150 ml de diclorometano de cada vez, as fases orgânicas reunidas são secas sobre sulfato de magnésio e concentradas até à secura. Rendimento: 26,7 g (95 % do teórico) de um sólido incolor

Análise elementar:

Cale.: C 41,41 H 6,26 N 18,35 I 26,25

Enc.: C 41,57 H 6,28 N 17,29 I 26,09 f) amida de ácido 2,4, 6-tri-iodo-5-(2—{10—[1,4,l-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil)metilaminoisoftálico-Ν,Ν-bis-(3, 6-diaza-4,7-dioxo-8-metiloctan-l, 5—di—il—{10—[1, 4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }) 25,8 g (17,8 mmol) de amida do ácido 2,4,6-Tri-iodo-5-[2-(1,4,7,10-tetraazaciclododecanil)-propionil]metilamino-isoftálico-Ν,Ν-bis-[3,6-diaza-4,7-dioxo-8-metil-octan-l,5-di-il-(1,4,7,10-tetraazaciclododecanil)] são dissolvidos em 200 ml de água, acrescentam-se 25,7 g (272,7 mmol) de ácido cloroacético e por volta de 60 °C, ajusta-se com NaOH a 32% a um valor de pH de 9,5. Aquece-se durante 10 h a 70 °C, mantendo-se continuamente o valor de pH da mistura reaccional a 9,5. Após o arrefecimento à temperatura ambiente, ajusta-se com HC1 conc. a um valor de pH de 1 e concentra-se a solução por evaporação sob vácuo. O resíduo é agitado com 300 ml de metanol, separam-se os componentes insolúveis por filtração e concentra-se o filtrado por evaporação. O resíduo é dissolvido em 200 ml de água e 46 coloca-se numa coluna permutadora de iões (1.200 ml, IV 120, forma H+~) . Em seguida, lava-se com 5 1 de água e concentra-se o eluido ácido por evaporação. O resíduo é dissolvido em 150 ml de metanol e adicionado gota a gota a 2.500 ml de éter dietílico, o sólido precipitado é aspirado, lavado por várias vezes com éter dietílico e seco sob vácuo.

Rendimento: 23,2 g (66 % do teórico) de um sólido incolor Análise elementar:

Cale.: C 41,41 H 5,52 N 13,49 I 19,30

Enc.: C 41,62 H 5,53 N 13,37 I 19,13 g) amida de ácido 2, 4,6-tri-iodo-5-(2—{10-[1,4,l-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }-propionil, complexo Gd)metilaminoisoftálico-N,N-bis-(3,6-diaza-4,7-dioxo-8-metiloctan-l, 5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclodo-decanil, complexo Gd]}) 13,6 g (6,9 mmol) de amida de ácido 2,4,6-tri-iodo-5-(2-{10-[1,4,Ί-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclodode-canil]}-propionil)metilaminoisoftálico-N,N-bis-(3,6-diaza-4,7-dioxo-8-metiloctan-l,5-di-il-{10-[1,4,7-tris-(carboximetil)-1,4,7,10-tetraazaciclododecanil] }) são dissolvidos em 100 ml de água e acidificados por meio da adição de 3 ml de ácido acético. Adicionam-se 3,7 g (10,4 mmol) de óxido de gadolínio e aquece-se durante 6 h sob refluxo. Uma vez terminada a complexificação ajusta-se o pH a 7,4 com amoníaco e cromatografa-se em gel de sílica (eluente: diclorometano/metanol/amoniaco: 10/10/1). As fraeções que contêm o produto são reunidas e agitadas com 10 g de permutador de iões (IV 267 forma H~) durante 2 h e separa-se por filtração, depois agita-se com 10 g de 47 permutador de iões (IRA 67 forma OH-) durante 2 h, filtra-se, mistura-se com 2 g de carbono activado, aquece-se durante 2 h a 60 °C, filtra-se e liofiliza-se. Rendimento: 11,1 g (61 % do teórico) de um sólido incolor Teor de água (Karl-Fischer): 7,5 %

Análise elementar (relativamente à substância anidra): Cale.: C 33,54 H 4,10 N 10,93 I 15,63 Gd 19,37

Enc.: C 33,71 H 4,08 N 10,88 I 15,49 Gd 19,21

Exemplo 9

Exemplo comparativo

Os compostos 3 do exemplo 3 e 4 do exemplo 4 divulgados na US 5 660 814, do próximo estado da técnica, são em comparação com os compostos de acordo com a presente invenção 5) iónicos e têm assim uma osmolalidade maior numa ordem de 2 em comparação com os compostos neutros de acordo com a presente invenção, o que é especialmente negativo em doses elevadas , 6) são substancialmente mais lipófilos que os compostos de acordo com a presente invenção (observação na coluna 5/linha 29 da US 5.660.814, os compostos do estado da técnica são úteis como meio de contraste hepático), 7) as substâncias 3 e 4 da US 5.660.814 são substancialmente mais tóxicas que os compostos de acordo com a presente invenção (vide LD50 bem como coeficiente de distribuição) e 8) a relaxividade para a reprodução de imagem em RM é portanto pior. 48

Exemplo 1 Exemplo 5 Exemplo 7 Exemplo 8 Exemplo 3 dos EU 5 660 814 Exemplo 4 dos EU 5 660 814 A Osmolalidade 200 mg(I+Gd) /ml [mosmol/1] 358 371 334 346 ~ 750 que sal Na ~ 730 que sal Na Coeficiente de distribuição Bu0H/H20 0,00005 0,00006 0,00005 0,00005 0,007 0,01 Relaxividade TI em H20 9,8 10,1 10,3 10,0 6,3 7,2 LD50 (ratinho) >12,0 g >12,0 g >12,0 g >12,0 g >2,0 g >2,0 g (I + Gd) (I + Gd) (I + Gd) (I + Gd) (I + Gd) (I + Gd) /kg /kg /kg /kg /kg /kg

Lisboa, 11 de Setembro de 2007

Claims (13)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Complexos metálicos da fórmula geral I Hal A

A

Hal (I) em que Hal representa bromo ou iodo, A1 representa um resíduo -CONR1- (CH2) n-NR2- (CO-CHZ1-NH)m-CO-CHZ2-K, A2 representa o resíduo -NR1-CO-CHZ2-K, em que R1 e R2 representam independentemente um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo-Ci-C2 ou um grupo alquilo-Ci-C2-mono-hidroxi, Z1 e Z2, independentemente um do outro, representam um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo, n representa os números 2 a 4, m representa os números 0 ou 1 e K representa um macrociclo da fórmula IA coox

coox (Ia) com X a significar um átomo de hidrogénio ou um equivalente ião metálico com número atómico 20 a 29, 39, 42, 44 ou 57 a 83, desde que pelo menos dois X representem equivalentes iões metálicos e os grupos carboxi livres eventualmente existentes estejam presentes como sais de bases ou 2 aminoácidos orgânicos e/ou inorgânicos ou amidas de aminoácidos.

2. Complexos metálicos de acordo com a reivindicação 1, caracterizados por A1 representarem grupos -CONH (CH2) 2;3NHCOCH2NHCOCH (CH3) -K, -CONH (CH2) 2;3NHCOCH2NHCOCH2-K, -CONH (CH2) 2;3NHCOCH2-K, -CONH (CH2) 2;3NHCOCH (CH3) -K, -CON (CH2CH2OH (CH2) 2NHCOCH2-K

3. Complexos metálicos de acordo com a reivindicação 1, caracterizados por A2 representarem -NHCOCH (CH3) -K, -nhcoch2-k, -N(CH3)COCH2-K, -N(CH3)COCH(CH)3-K, -N (CH2CH2OH) coch2-k, -N (CH2CH2OH) COCH (CH3) -k.

4. Complexos metálicos de acordo com a reivindicação 1, caracterizados por X representar um equivalente de iões metálicos com os números atómicos 21 a 29, 42, 44, 58 a 70.

5. Complexos metálicos de acordo com a reivindicação 4, caracterizados por X representar um equivalente de iões metálicos dos iões gadolinio(III), disprósio(III), európio (III), ferro(III) ou manganês(II) .

6. Agente farmacêutico que contém pelo menos um complexo metálico da fórmula geral I de acordo com a reivindicação 1, eventualmente com os aditivos habituais em farmácia. 3

7. Utilização de pelo menos um complexo metálico de acordo com a reivindicação 1 para a preparação de agentes para o diagnóstico por raios-x.

8. Utilização de pelo menos um complexo metálico de acordo com a reivindicação 4 para a preparação de agentes para o diagnóstico por TRM.

9. Agente farmacêutico que contém cada complexo metálico de acordo com a reivindicação 1 e 4 numa proporção molar de 2000:1 a 1:1, de preferência 49:1 a 4:1.

10. Agente farmacêutico de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por o(s) complexo(s) metálico(s) dissolvido(s) ou suspenso(s) em água ou solução salina fisiológica ter(em) uma concentração de 0,001 a 1 mol/1.

11. Utilização de pelo menos um complexo metálico de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de agentes para o diagnóstico por raios-x e RM de infartes cerebrais e tumores do figado ou processos compressivos compressivos no fígado bem como tumores do abdómen (inclusive rins) e do sistema musculo-esquelético e para a representação de vasos sanguíneos na sequência de injecção intra-arterial ou intravenosa.

12. Processo para a preparação de complexos metálicos da fórmula geral I de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se fazer reagir compostos aromáticos tri-iodados ou tribromados da fórmula geral II 4

de um modo conhecido com um macrociclo da fórmula geral III

(III) em que W representa um grupo de protecção ou um grupo -CH2COOX' com X' a significar X ou um grupo de protecção e Ar a significar -CO-NR1-(CH2) n-NR2-(CO-CHZ^NH) m-CO-CHZ2-Hal' e A2' a representar -NR1-CO-CHZ2-Hal ’ com Hal' a significar cloro ou bromo e em seguida eventualmente se remover o grupo de protecção W e se introduzir os residuos CH2COOX de um modo conhecido em si ou se remover o grupo de protecção representado eventualmente por X' e em seguida, de um modo conhecido em si, se fazer reagir com um óxido metálico ou sal metálico de um elemento com número atómico 20 a 29, 39, 42, 44 ou 57 a 83.

13. Processo para a preparação do agente farmacêutico de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por se transformar o composto complexo dissolvido ou suspenso em água ou solução salina, eventualmente com os aditivos habituais em farmácia, numa formar adequada para aplicação por via entérica ou parentérica. Lisboa, 11 de Setembro de 2007