PT1553950E

PT1553950E - Tratamento terapêutico

Info

Publication number: PT1553950E
Application number: PT03751038T
Authority: PT
Inventors: Francis Thomas Boyle; Jon Owen Curwen; Neil James Gallagher; Ursula Joy Hancox; Andrew Mark Hughes; Donna Johnstone; Sian Tomiko Taylor; David William Tonge
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 2002-10-12
Filing date: 2003-10-07
Publication date: 2007-09-26
Also published as: EP1553950B1; DE60315490D1; AU2003269259B2; BR0315140A; DE60315490T2; UA82492C2; JP2006510605A; CA2501959A1; DK1553950T3; IS2473B; ZA200502874B; NZ539137A; MXPA05003808A; GB0223854D0; PL375584A1; NO20051658L; TW200412971A; UY28017A1; ATE369136T1; CN100342853C

Description

DESCRIÇÃO "TRATAMENTO TERAPÊUTICO" A presente invenção refere-se a uma combinação compreendendo um antagonista do receptor de endotelina ZD4054, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um inibidor tirosina cinase (TKI) do receptor do factor de crescimento epidérmico (EGFR), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Esta combinação é útil num novo método para o tratamento ou profilaxia do cancro. A invenção também se refere a uma composição farmacêutica compreendendo essa combinação e com a sua utilização no fabrico de um medicamento para utilização no tratamento ou profilaxia do cancro, particularmente cancro da próstata.

Estima-se que o cancro afecta 10 milhões de pessoas a nivel mundial. Este número inclui incidência, prevalência e mortalidade. Mais de 4,4 milhões de casos de cancro descritos provêm da Ásia, incluindo 2,5 milhões de casos da Ásia Oriental, que tem a taxa de incidência mais elevada do mundo. Em comparação, a Europa tem 2,8 milhões de casos, a América do Norte 1,4 milhões de casos e a África 627000 casos.

No Reino Unido e nos Estados Unidos da América, por exemplo, mais do que uma em três pessoas virá a desenvolver cancro nalguma altura da vida. Calcula-se que a mortalidade devida a cancro nos E.U.A. é responsável por cerca de 600000 mortes por ano, cerca de uma em cada quatro mortes, logo a seguir à doença cardiaca em percentagem relativamente a todas as mortes, e em segundo lugar a seguir a acidentes como causa da 1 morte de crianças com 1-14 anos de idade. Estima-se que a incidência de cancro nos E.U.A. é agora de 1380000 novos casos anualmente, excluindo os cerca de 900000 casos de cancro da pele não melanótico (células basais e escamosas). O cancro também é a principal causa de morbidez no Reino Unido com praticamente 260000 novos casos (excluindo cancro da pele não melanoma) registados em 1997. O cancro é uma doença que afecta principalmente as pessoas mais velhas, com 65% dos casos a ocorrer nos que têm mais de 65 anos. Uma vez que a esperança de vida média no Reino Unido praticamente duplicou desde meados do século dezanove, aumentou a população em risco de cancro. As taxas de mortalidade por outras causas de morte, tais como doença cardíaca, diminuíram em anos recentes enquanto que as mortes por cancro permaneceram relativamente estáveis. O resultado é que 1 em 3 pessoas virá ser diagnosticada com cancro durante a sua vida e 1 em 4 pessoas virá a morrer de cancro. Em pessoas com menos de 75 anos, as mortes por cancro ultrapassam as mortes por doenças do sistema circulatório, incluindo doença cardíaca isquémica e acidente vascular cerebral. Em 2000, houve 151200 mortes por cancro. Mais de um quinto (22 por cento) destas foram de cancro do pulmão e um quarto (26 por cento) de cancros do intestino grosso, mama e próstata. A nível mundial, as taxas de incidência e mortalidade de certos tipos de cancro (do estômago, mama, próstata, pele e assim por diante) têm amplas diferenças geográficas que são atribuídas a influências raciais, culturais e especialmente ambientais. Há mais de 200 tipos diferentes de cancro mas os quatro tipos principais, pulmão, mama, próstata e colorrectal, são responsáveis por mais de metade de todos os casos diagnosticados no Reino Unido e nos E.U.A. O cancro da próstata é a quarta doença maligna mais comum entre os homens a nível mundial, com uma estimativa de 400000 novos casos diagnosticados 2 anualmente, responsáveis por 3,9 por cento de todos os novos casos de cancro.

As opções actuais para tratamento de cancros incluem ressecção cirúrgica, terapia com feixes de radiação externa e/ou quimioterapia sistémica. Estes têm êxito parcial em algumas formas de cancro, mas não têm êxito noutras. Há uma clara necessidade de novos tratamentos terapêuticos.

Recentemente, os antagonistas do receptor de endotelina A foram identificados como potencialmente valiosos no tratamento de cancro (Câncer Research, 56, 663-668, 15 de Fevereiro de 1996 e Nature Medicine, Volume 1, número 9, Setembro de 1999, 944-949).

As endotelinas são uma familia de péptidos de 21 aminoácidos endógenos compreendendo três isoformas, endotelina-1 (ET-1), endotelina-2 e endotelina-3. As endotelinas são formadas por clivagem da ligação Trp21-Val22 das suas correspondentes proendotelinas, por uma enzima de conversão da endotelina. As endotelinas estão entre os vasoconstritores mais potentes conhecidos. Apresentam uma gama ampla de outras actividades incluindo estimulação da proliferação celular e mitogénese, inibição da apoptose, extravazamento e quimiotaxia, e também interactuam com vários outros agentes vasoactivos.

As endotelinas são libertadas de uma variedade de fontes tecidulares e celulares incluindo endotélio vascular, músculo liso vascular, rim, fígado, útero, vias aéreas, intestino e leucócitos. A libertação pode ser estimulada por hipoxia, tensão forte, lesão física e uma ampla gama de hormonas e citocinas. Foram encontrados níveis elevados de endotelinas em vários dos estados patológicos do homem, incluindo cancros. 3

Em anos recentes foi descoberto que certas enzimas tirosina cinases de factores de crescimento são importantes na transmissão de sinais bioquímicos que iniciam a replicação celular. São proteínas grandes que abrangem a membrana celular e possuem um domínio de ligação extracelular para factores de crescimento, tal como o factor de crescimento epidérmico (EGF) e uma porção intracelular que funciona como uma cinase para fosforilar aminoácidos de tirosina em proteínas e, assim, influenciar a proliferação celular. São conhecidas várias classes de tirosina cinases receptoras (Wilks, Advances in Câncer Research, 1993, 60, 43-73) baseadas em famílias de factores de crescimento que se ligam a diferentes tirosina cinases receptoras. A classificação inclui tirosina cinases receptoras da Classe I compreendendo a família EGF de tirosina cinases receptoras, tais como receptores de EGF, TGFa, NEU, erbB, Xmrk, HER e let23, tirosina cinases receptoras da Classe II compreendendo a família da insulina de tirosina cinases receptoras tais como os receptores de insulina e IGF1 e o receptor relacionado com insulina (IRR) e as tirosina cinases receptoras da Classe III compreendendo a família de tirosina cinases receptoras da família do factor de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) tais como os receptores PDGFa, PDGFP e de factor 1 de estimulação de colónias (CSF1).

Sabe-se que as cinases da Classe I, tal como a família EGF de tirosina cinases receptoras estão frequentemente presentes em cancros epiteliais humanos comuns, tal como o cancro da próstata (Visakorpi et al., Histochem. J., 1992, 24, 481). Assim, foi reconhecido que um inibidor de tirosina cinases receptoras deve ter valor como inibidor selectivo do crescimento de certos carcinomas. 4

Foi anteriormente demonstrado que a estimulação de células fibroblastos de rato 1 com endotelina 1 resultaram na transactivaçâo do EGFR in vitro (Daub, H. et al., Nature, 1996, 379:557). Uma vez que tanto a endotelina como os sistemas EGFR desempenham um papel na carcinogénese, os presentes inventores investigaram o potencial da utilização da combinação de antagonistas de endotelinas e TKIs de EGFR para o tratamento de cancro. Os presentes inventores inesperadamente verificaram que a utilização em combinação de antagonistas de receptores de endotelinas específicos, ou dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis, e TKIs de EGFR específicos, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, pode ter um efeito sinérgico ou aditivo no tratamento de cancro.

Portanto, de acordo com a presente invenção, é proporcionada uma combinação, compreendendo um antagonista do receptor de endotelina ZD4054, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Aqui, quando se utiliza o termo "combinação" é para ser entendido que se refere a administração simultânea, separada ou sequencial. Num aspecto da invenção "combinação" refere-se a administração simultânea. Noutro aspecto da invenção "combinação" refere-se a administração separada. Ainda noutro aspecto da invenção "combinação" refere-se a administração sequencial. Quando a administração é sequencial ou separada, o compasso de espera na administração do segundo componente não deve ser de molde a que se perca o benefício do efeito sinérgico e/ou aditivo da combinação.

Num aspecto, quando é referido um composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, isso refere-se apenas ao composto. Noutro aspecto, isso refere-se a um sal farmaceuticamente 5 aceitável do composto.

Quando se faz referência a cancro, refere-se particularmente a cancro do esófago, mieloma, cancro hepatocelular, do pâncreas, cervical, tumor de Ewing, neuroblastoma, sarcoma de Kaposi, cancro do ovário, cancro da mama, cancro colorrectal, cancro da próstata, cancro da bexiga, melanoma, cancro do pulmão - cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) e cancro do pulmão de células pequenas (SCLC), cancro gástrico, cancro da cabeça e pescoço, cancro do cérebro, cancro renal, linfoma e leucemia. Mais particularmente refere-se a cancro da próstata. Além disso, mais particularmente refere-se a SCLC, NSCLC, cancro colorrectal, cancro do ovário e/ou cancro da mama. Mais particularmente refere-se a SCLC. Mais particularmente refere-se a NSCLC. Mais particularmente refere-se a cancro colorrectal. Além disso, mais particularmente refere-se a cancro do ovário. Mais particularmente refere-se a cancro da mama. Mais particularmente refere-se a cancro renal. Além disso, mais particularmente refere-se a cancro da bexiga, cancro do esófago, cancro gástrico, melanoma, cancro cervical e/ou cancro renal. Além disso refere-se a cancro do endométrio, fígado, estômago, tiróide, recto e/ou cérebro. Noutro aspecto da invenção, o cancro não é um melanoma. Noutra forma de realização da invenção, particularmente, o cancro está num estado metastático e, mais particularmente, o cancro produz metástases nos ossos. Numa forma de realização adicional da invenção, particularmente, o cancro está num estado metastático e, mais particularmente, o cancro produz metástases da pele. Numa forma de realização adicional da invenção, particularmente, o cancro está num estado metastático e mais particularmente, o cancro produz metástases linfáticas. Em mais uma forma de realização da invenção, o cancro está num estado não metastático.

Quando se faz referência a tratamento do cancro, 6 particularmente, trata-se do tratamento de tumores cancerosos que exprimem endotelina A e EGFR. Este tratamento é em termos de um ou mais de extensão da resposta, a velocidade da resposta, o tempo até à progressão da doença e a taxa de sobrevivência. Espera-se ainda que a utilização em combinação dos antagonistas de receptores de endotelina específicos, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, e particular TKIs de EGFR particulares, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, vão ter um efeito vantajoso na prevenção da instalação de cancro em animais de sangue quente, tal como o homem.

Os compostos, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, que possuem actividade antagonista do receptor de endotelina estão descritos em WO 96/40681, WO 95/26716, WO 95/26360, WO 95/26957, WO 95/22748, WO 95/33752, WO 95/35107, WO 96/04905, WO 96/06095, WO 96/07653, WO 96/08483, WO 96/08486, WO 96/08487, WO 96/09818, WO 96/11914, WO 96/11927, WO 96/12706, WO 96/15109, WO 96/19455, WO 96/19459, WO 96/22978, WO 96/23773, WO 96/30358, WO 96/31492, WO 96/33170, WO 96/33190, WO 96/40681, WO 97/30045, WO 98/09953, WO 95/08550, WO 98/49162, WO 99/06397, WO 01/49685, WO 02/64573, EP 436189, EP 496452, EP 510526, EP 526708, EP 552417, EP 555537, EP 601386, EP 617001, EP 628569, BP 633259, EP 658548, EP 682016, EP 713875, EP 702012, EP 733626, EP 743307, EP 749964, GB2266890, GB 2275926, GB 2276383, GB 2277446, GB 2295616, DE 4341663, JP 6256261, JP 6122625, JP 7330622, JP 7133254, JP 8059635, JP 7316188 e JP 7258098 e os antagonistas de receptores aqui descritos, particularmente os descritos na reivindicação 1 e nos exemplos designados, das patentes e pedidos acima referidos, que aqui são incorporados por referência.

Compostos adequados adicionais, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, possuindo actividade antagonista do receptor de endotelina incluem os descritos nos artigos de 7 J. Med. Chem. 1996, 39, 2123-2128; 1997, 40, 3, 322-330; 2001, 44, 1211-1216; 2001, 44, 3978-3984 e os antagonistas do receptor de endotelina aí descritos também são aqui incorporados por referência.

Mais compostos adicionais, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, possuindo actividade antagonista do receptor de endotelina incluem A-127722, atrasentan (ABT-627), BQ-123, BQ-788, BMS 182874, feloprentan, BSF 420627, FR139317, IPI-950, L-749,329, L-754,142, LU 110896, LU 110897, PD 156707, PD 155080, Ro 46-2005, bosentan (Ro 47-0203), SB 217242, SB 209670, TAK-044, YM598, sitaxsentan (TBC11251), ambrisentan, tezosentan, darusentan, N-[[2'-[[(4,5-dimetil-3-isoxazolil)ami-no]sulfonil]-4-(2-oxazolil) [1,1'-bifenil]—2 — il]metil]-N,3,3--trimetil-butanamida, ZD1611 e 17-(3-metoxi-5-metilpirazin-2-il) --2-(4-[1,3,4-oxadiazol-2-il]fenil)piridino-3-sulfonamida (ZD4054) .

Compostos adequados adicionais, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, possuindo actividade antagonista do receptor de endotelina incluem A-104029, A-158112, A-182086, A-192621, A-201661, A-203719, A-206377, A-207508, A-308165, ABT-306552, ABT-546, BE-18257B, BQ-017, BQ-145, BQ-238, BQ-518, BQ-928, J-104121, J-104132, J-112287, BSF-461314, BMS-187308, BMS-193884, cdonentan, IRL-1543, IRL-1722, IRL-1841, TBC-10662, TBC-11040, TBC-11299, TBC-3711, Ro-48-5694, Ro-61790C, VML-588, FR-901367, FR-901533, Ro-46-8443, IPI-616, LU-127043, K-8794, RES 1214-1, RES-1149-1, RES-701-1, RES-701-2, BQ-153, BQ-485, BQ-610, L-744453, L-746072.

Compostos adequados, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, que têm actividade de TKI de EGFR incluem os descritos em EP 0566226, EP 0787722, WO 96/30347, WO 96/33980, WO 97/02266, WO 97/30034, WO 97/38983, WO 98/50038, WO99/09016, WO 99/24037, WO 99/55683, Nature Medicine, 2000, 6, 1024-1028 e US 6 002 008 e estes TKls de EGFR, particularmente os da reivindicação 1 e dos exemplos designados destas patentes.

Classes especificas de TKls de EGFR são as quinazolinas, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Compostos específicos, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, possuindo actividade TKI de EGFR incluem: N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3--morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (ZD1839); N-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietoxi)quinazolin-4-amina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável (ligados aos números de código CP 358774 e OSI-774 (o sal monometanossulfonato)); 6-acrilamido-W-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolino--propoxi)quinazolin-4-amina (ligada aos números de código PD 183805 e Cl 1033); 4-[(IR)-1-feniletilamino]-6-(4-hidroxifenil)-7H- -pirrolo[2,3-d]pirimidina (ligada aos números de código PKI-166, CGP 75166 e CGP 59326); N-[4-(3-bromoanilino)quinazolin-6-il]but-2-inamida (ligada aos números de código CL-387785 e EKB-785); e 4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-3-ciano-6-(4-dimetilaminobut--2(E)-enamido)-7-etoxiquinolina (EKB-569) . 9

Compostos específicos adicionais, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, que têm actividade de TKI de EGFR incluem ZD1839, CP 358774, Cl 1033, PKI-166, CL-387785 e EKB-569. Em particular o composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, possuindo actividade de TKI de EGFR é ZD1839 ou CP 358774. Mais particularmente o composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, possuindo actividade de TKI de EGFR é ZD1839. Compostos específicos adicionais, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, possuindo actividade de TKI de EGFR incluem BE-23372M, derivados Banyu de BE-23372M, BIBX-1382, BBR-1611, naamidina A, AS-23, DAB-720, ADL-681, CGP-52411, CGP-60261, série CGP-62706, cetuximab, PKI-166, CP-292597, erlotinib, PD-0158780, toxina de hbEGF, Prizm, RG-13022, RG-14620, RG-50875, AG-1478, VRCTC-310, SU-5271.

Combinações específicas da presente invenção incluem: • ZD4054, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e ZD1839, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; • ZD4054, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e CP 358774, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável;

Em qualquer das combinações aqui descritas, incluindo a utilização destas combinações, kits ou formulações que as contêm, etc., pode estar opcionalmente presente um composto ou compostos adicionais (ver adiante). A combinação de um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pode opcionalmente ser administrada em combinação adicional com: i) um análogo de LHRH; e/ou 10 ii) um bisfosfonato.

Aqui quando se utiliza o termo "análogo de LHRH" entende-se que se refere a qualquer composto químico, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, incluindo moléculas pequenas e péptidos, que actua como um agonista ou antagonista no receptor LHRH, seja por interacção com o sítio de ligação a LHRH seja por um mecanismo alostérico, í. e. actua numa posição no receptor LHRH diferente do sítio de ligação a LHRH. Num aspecto da invenção um "análogo de LHRH" refere-se a um antagonista de LHRH ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Num aspecto da invenção um "análogo de LHRH" refere-se a um agonista de LHRH ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Num aspecto adicional da invenção um "análogo de LHRH" refere-se a uma combinação de um antagonista de LHRH ou um seu sal farmaceuticamente aceitável e um agonista de LHRH ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Compostos específicos, ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis possuindo actividade de análogos de LHRH incluem Azalina B, A-198401, A-75998, A-76154, A-84861, abarelix, AN-152, AN-207, Antide, avorelina, cetrorelix, D-21775, D-23487, D-26344, D-63153, D-85108, degarelix, deslorelina, detirelix, FE 200486, ganirelix, gonadimune, goserelina, histrelina, leuprolido, leuprorelina, metarelina, nafarelina, NBI-42902 (Neurocrine), Org-30850, PH-45 (Pherin Corp), PTL-03001, ramorelix, RWJ-47428-021, SPD-424, surfagon, T-66 (Matrix

Therapeutics Ltd), TAK-013, TAK-810, teverelix, acetato de triptorelina, pamoato de triptorelina, vomeroferina ou ZK-157348.

Análogos de LHRH específicos são péptidos ou derivados de péptidos.

Exemplos de agonistas de LHRH específicos incluem, mas não 11 estão limitados a: i) buserelina (Patente US 4024248) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bu^)6-Leu-Arg-Pro-NHCH2CH3 ii) triptorelina (Patente US 4010125) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 iii) leuprorelina (Patente US 4005063) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Leu-Leu-Arg-Pro-NHCH2CH3 iv) goserelina (Patente US 4100274) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bu^ ^-Leu-Arg-Pro-(Azygly) NH2 v) deslorelina (Patente US 4659695) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-NH-CH2-CH2-NH2 vi) histerelina (Patente US 4244946) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-His(Bzl)-Leu-Arg-Pro-NH-CHz-CH3 vii) avorelina (documento US 5668254) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp(2-Me)-Leu-Arg-Pro-NH-CH2-CH3 viii) nafarelina (Patente US 4234571) (pyr)Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Nal(2)-Leu-Arg-Pro-NH-CH2-CH3; lutrelina, cistorelina, gonadorelina ou detirelix.

Particularmente o agonista de LHRH é seleccionado de leuprorelina, buserelina, triptorelina e goserelina. Mais particularmente o agonista de LHRH é goserelina.

Exemplos de antagonistas de LHRH adequados incluem, mas não 12 estão limitados a antide, abarelix, antarelix, cetrorelix, azalina, ganirelix e os descritos nas Patentes US 5470947 (Folkers); 5413990 e 5300492 (Haviv); 5371070 (Koerber); 5296468 (Hoeger); 5171635 (Janaky); 5003011 e 4431635 (Coy); 4992421 (De); 4801577 (Nestor); e 4851385, 4689396 e 5843901 (Roeske).

Exemplos adicionais de antagonistas de LHRH adequados incluem, mas não estão limitados aos compostos descritos em WO 02/066477, WO 02066478, WO 02/066459, WO 02/092565, PCT/GB03/003603 e PCT/GB03/003606, e os compostos descritos nestes pedidos, particularmente os compostos da reivindicação 1 e dos exemplos designados.

Um "bisfosfonato" é um composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, capaz de regular o teor de catiões metálicos (especialmente o teor de cálcio) em humanos e é um composto contendo duas ligações carbono-fósforo. Para explicação adicional do termo "bisfosfonato" chama-se a atenção do leitor para Endocrine Reviews, 1998, 19(1):80-100, cujo teor aqui é incorporado por referência.

Bisfosfonatos específicos para utilização na presente invenção são seleccionados de ácido tiludrónico, ácido ibandrónico, ácido incadrónico, ácido risedrónico, ácido zoledrónico, ácido clodrónico, ácido neridrónico, ácido pamidrónico, ácido alendrónico, ácido minodrónico, ácido olpadrónico, TRK 530, CGP 47072, clodronato de cálcio ou EB 1053. Bisfosfonatos específicos adicionais para utilização na presente invenção são seleccionados de ácido etidrónico, PNU-91638, NE-21650, NE-58025, NE-10790 ou NE-10446.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem, por exemplo, sais com metais alcalinos (tais como sódio, potássio ou lítio), com metais alcalino-terrosos (tais como cálcio ou 13 magnésio), sais de amónio e sais com bases orgânicas que dão catiões fisiologicamente aceitáveis, tais como sais com metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina e morfolina. Além disso, para os compostos que são suficientemente básicos, os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis com halogenetos de hidrogénio, ácido sulfúrico, ácido fosfórico e com ácidos orgânicos tais como ácido cítrico, ácido maleico, ácido metanossulfónico e ácido p-toluenossulfónico. Alternativamente, os compostos podem existir em forma zwitteriónica. 0 efeito terapêutico (por exemplo efeitos sobre a proliferação celular e/ou o efeito sobre a sobrevivência celular ou indução de uma resposta apoptótica) da combinação pode ser testado ín vitro pela aplicação de um antagonista do receptor de endotelinas e um TKI de EGFR a culturas de células de carcinoma humano que exprimem tanto endotelina A como EGFR.

Portanto de acordo com a presente invenção, é proporcionada uma combinação, compreendendo um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável para utilização como medicamento.

De acordo com outro aspecto da invenção é proporcionada uma composição farmacêutica que compreende um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em associação com um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

De acordo com mais um aspecto da invenção é proporcionada uma composição farmacêutica que compreende um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente 14 aceitável, em associação com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável, em combinação com uma composição farmacêutica que compreende um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em associação com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.

Assim de acordo com a presente invenção, é proporcionado um método de tratamento de cancro, num animal de sangue quente, tal como o homem, necessitado desse tratamento que compreende a administração ao referido animal de uma quantidade eficaz de um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável em combinação com uma quantidade eficaz de um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Para evitar dúvidas, quando é referido tratamento de cancro deve entender-se que isso também se refere à prevenção de metástases e ao tratamento de metástases, i. e. disseminação do cancro. Portanto a combinação da presente invenção poderia ser utilizada para tratar um doente que não tem metástases para impedir que ocorram, ou para aumentar o periodo de tempo antes que ocorram, e num doente que já tem metástases para tratar as próprias metástases. Além disso o tratamento de cancro também se refere ao tratamento de um tumor ou tumores primários instalados e tumor ou tumores primários em desenvolvimento. Num aspecto da invenção o tratamento de cancro relaciona-se com a prevenção de metástases. Noutro aspecto da invenção o tratamento de cancro refere-se ao tratamento de metástases. Noutro aspecto da invenção o tratamento de cancro refere-se ao tratamento de um tumor ou tumores primários instalados ou tumor ou tumores primários em desenvolvimento. Aqui o tratamento de cancro também se refere à prevenção do cancro per se.

Além disso o tratamento de cancro também se refere à 15 produção de um efeito anti-angiogénico num animal de sangue quente.

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é proporcionado um kit compreendendo um antagonista do receptor de endotelina ZD4054, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; opcionalmente com instruções de utilização.

De acordo com mais um aspecto da presente invenção é proporcionado um kit compreendendo: a) um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, numa primeira forma de dosagem unitária; b) um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; numa segunda forma de dosagem unitária; e c) meio de recipiente para conter as referidas primeira e segunda formas de dosagem; e opcionalmente d) com instruções de utilização.

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é proporcionado um kit compreendendo: a) um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, conjuntamente com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável, numa primeira forma de dosagem unitária; b) um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, numa segunda forma de dosagem unitária; e 16 c) meio de recipiente para conter as referidas primeira e segunda formas de dosagem; e opcionalmente d) com instruções de utilização.

De acordo com um aspecto adicional da invenção é proporcionada uma composição farmacêutica que compreende um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em associação com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de cancro.

De acordo com outro aspecto da invenção é proporcionada uma composição farmacêutica que compreende um antagonista do receptor de endotelina ZD4054 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em associação com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável, em combinação com uma composição farmacêutica que compreende um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em associação com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável para utilização no tratamento de cancro.

As composições farmacêuticas podem estar numa forma adequada para administração oral, por exemplo como um comprimido ou cápsula, para injecção parentérica (incluindo injecção intravenosa, subcutânea, intramuscular, intravascular ou perfusão) como uma solução, suspensão ou emulsão estéril, para administração tópica como uma pomada ou creme ou para administração rectal como um supositório. Em geral as composições acima referidas podem ser preparadas do modo convencional utilizando excipientes convencionais.

Por exemplo o ZD4054 pode ser formulada como um comprimido utilizando os seguintes excipientes: 17 Z D 4 Ο 5 4 ;

Mono-hidrato de lactose (carga);

Croscarmelose de sódio (desintegrante);

Povidona (aglutinante);

Estearato de magnésio (lubrificante);

Hipromelose (componente da pelicula de revestimento); Polietilenoglicol 300 (componente da película de revestimento); e

Dióxido de titânio (componente da película de revestimento).

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é proporcionado um kit compreendendo um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; opcionalmente com instruções de utilização; para utilização no tratamento de cancro.

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é proporcionado um kit compreendendo: a) um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, numa primeira forma de dosagem unitária; b) um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; numa segunda forma de dosagem unitária; e c) meio de recipiente para conter as referidas primeira e segunda formas de dosagem; e opcionalmente d) com instruções de utilização; para utilização no tratamento de cancro. 18

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é proporcionado um kit compreendendo: a) um antagonista do receptor de endotelina ZD4054, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, conjuntamente com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável, numa primeira forma de dosagem unitária; b) um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, numa segunda forma de dosagem unitária; e c) meio de recipiente para conter as referidas primeira e segunda formas de dosagem; e opcionalmente d) com instruções de utilização; para utilização no tratamento de cancro.

De acordo com outra caracteristica da invenção é proporcionada a utilização de um antagonista do receptor de endotelina ZD0454, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, no fabrico de um medicamento para utilização no tratamento de cancro, num animal de sangue quente, tal como o homem.

De acordo com outra caracteristica da invenção é proporcionada a utilização de um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, no tratamento de cancro, num animal de sangue quente, tal como o homem.

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é 19 proporcionada uma combinação compreendendo um antagonista do receptor de endotelina ZD4054, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento de cancro.

De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é proporcionada um tratamento de combinação compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, opcionalmente conjuntamente com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável, em combinação com uma quantidade eficaz de um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, opcionalmente conjuntamente com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável a um animal de sangue quente, tal como o homem, necessitado desse tratamento terapêutico para utilização no tratamento de cancro. 0 antagonista do receptor de endotelina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, será normalmente administrado a um animal de sangue quente numa dose unitária de 1 g ou menos diariamente, mas mais do que 2,5 mg e prevê-se que esta proporcione uma dose terapeuticamente eficaz. Contudo a dose diária será variada dependendo do hospedeiro tratado, da via de administração especifica, e da gravidade da doença a ser tratada. Em conformidade a dosagem óptima pode ser determinada pelo médico assistente que está a tratar um dado doente. Particularmente o antagonista de endotelina pode ser administrado a um animal de sangue quente, num dose unitária inferior a 250 mg por dia. Noutro aspecto da invenção, o antagonista de endotelina podia ser administrado a um animal de sangue quente numa dose unitária inferior a 130 mg por dia. Num aspecto adicional da invenção, o antagonista de endotelina podia ser administrado a um animal de sangue quente numa dose unitária inferior a 50 mg por dia. 20 Ο ΤΚΙ de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, normalmente será administrado a um animal de sangue quente numa dose unitária de, por exemplo, desde cerca de 20 mg a 1 g de ingrediente activo. Quando o TKI de EGFR é ZD1839, pode utilizar-se uma formulação para comprimidos convencional para administração oral contendo 50 mg, 100 mg, 250 mg ou 500 mg de ingrediente activo. Com vantagem a dose oral diária de ZD1839 está acima de 150 mg, por exemplo, na gama de 150 a 750 mg, de um modo preferido na gama de 200 a 500 mg. Para uma forma de dosagem individual, os ingredientes activos podem ser compostos com uma quantidade apropriada e conveniente de excipientes que podem variar desde cerca de 5 a cerca de 98 porcento em peso da composição total. As formas unitárias de dosagem geralmente conterão cerca de 20 mg a cerca de 500 mg de cada ingrediente activo. Contudo a dose diária irá necessariamente ser variada dependendo do hospedeiro tratado, da via de administração especifica, e da gravidade da doença a ser tratada. Em conformidade a dosagem óptima pode ser determinada pelo médico assistente que está a tratar um doente específico. A dosagem de cada um dos dois fármacos e as suas proporções têm de ser compostos de modo a que venham a cumprir os melhores efeitos de tratamento possíveis, de acordo com orientações nacionais e internacionais (que são periodicamente revistas e redefinidas) .

Legendas das Figuras

Figura 1: Trata-se de uma demonstração por Transferência de Western de que ET-1 estimula a fosforilaçâo de MC-3T3.El/Jlp44/42MAPK 21

Figura 2: Trata-se de uma demonstração por Transferência de que EGF estimula a fosforilação de MC-3T3.E1/J1 EGFRtyr1173

Figura 3: Trata-se de uma demonstração por Transferência de Western de que EGF estimula a fosforilação de MC-3T3.E1/J1 AKT e p44/42 MAPK.

Parte Experimental

Realizou-se o seguinte estudo para demonstrar o envolvimento de MAPK nas vias de sinalização osteoblásticas de ET-1 e EGF. 22

Metodologia A linha celular MC3T3.E1/J1 foi isolada de uma linha celular parental, MC3T3-E1 (disponível de Invitrogen), que por sua vez tinha sido derivada de calvária de murganho C57BL/6 recém-nascido. A linha MC3T3 El/Jl está descrita como uma linha osteoblástica. Toma-se cuidado na cultura para não usar um meio com pH superior a 7,5 ou permitir que as células se tornem confluentes, uma vez que isso causa uma des-diferenciação para formar um fenotipo fibroblástico. Esta inversão para um fenotipo fibroblástico é uma característica comum de culturas de células osteoblásticas.

As células MC3T3.El/Jl foram mantidas em rotina em meio completo (meio Eagle essencial mínimo α-modificado + soro fetal de vitelo a 10% + glutamina a 1% + Ml a 10%) . As células MC3T3.El/Jl foram plaqueadas a 1,7 x 104 células/poço (placas com 24 poços) em meio completo e incubadas a 37 °C em 5% de C02 durante 48 horas. As células foram lavadas duas vezes com soro fisiológico tamponado com fosfato e de novo incubadas durante aproximadamente 17 horas em meio sem em soro (meio Eagle essencial mínimo α-modificado + glutamina a 1%) .

As células foram, então, estimuladas com factor de crescimento (ET-1 ou EGF) durante 3 minutos. Todo o meio foi, então, removido e as células lisadas em 2 x tampão de laemli. Após electroforese e transferência de Western, as membranas foram sondadas com anticorpos específicos de proteína cinase activada com mitogénio fosfo-p44/42 (MAPK) (Thr 202/204), fosfor-AKT(Ser 473) e Receptor de fosfo-EGF(tyr 11731. 23

Resultados

Ver Figuras anexas.

Conclusão

Demonstrou-se que o EGF estimula as mesmas vias proliferativas e de sobrevivência no osteoblasto que ET-1. Demonstrou-se que MAPK está envolvida na estimulação da proliferação do osteoblasto, bem como na estimulação da produção de factores de crescimento que ajudam a sobrevivência de células tumorais em osso(1,2). Os antagonistas de endotelina são inibidores eficazes da activação mediada por ET-1 de MAPK no osteoblasto. Portanto, uma terapia de combinação de antagonista de endotelina e TKI de EGFR deve ter um efeito benéfico na prevenção de alterações patológicas da densidade óssea. 1 Kawamura et al. (1999). "Involvement of p42/p44 MAP kinase in endothelin-l-induced interleukin-6 synthesis in osteoblast-like cells" Bone 24:315-320 2 Gonzalez, E. et al. (1996). "Retinoids Modulate the effect of PTH and Calcitriol on EGF Receptor Expression in UMR 106-01 Cells". Calcif. Tissuelnt. 58(6):429-434.

Lisboa, 13 de Setembro de 2007 24

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Combinação, compreendendo N- (3-metoxi-5-metil-pirazin-2-il)-2-(4-[1,3,4-oxadiazol-2-il]fenil)piridino-3-sulfonamida (ZD4054), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um TKI de EGFR, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
2. Combinação de acordo com a reivindicação 1 em que o TKI de EGFR é seleccionado de: N- (3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3--morfolinopropoxi)-quinazolin-4-amina (ZD1839); N- (3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietoxi)quinazolin-4--amina, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável (ligadas aos números de código CP 358774 e OSI-774 (o sal monometanossulfonato)); 6-acrilamido-W-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolino--propoxi)quinazolin-4-amina (ligada aos números de código PD 183805 e Cl 1033); 4-[(IR)-1-feniletilamino]-6-(4-hidroxifenil)-7H--pirrolo[2,3-d]pirimidina (ligada aos números de código PKI-166, CGP 75166 e CGP 59326); N- [4-(3-bromoanilino)quinazolin-6-il]but-2-inamida (ligada aos números de código CL-387785 e EKB-785); e 4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-3-ciano-6-(4-dimetilaminobut--2(E)-enamido)-7-etoxiquinolina (EKB-569); 1 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
3. Combinação de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que o TKI de EGFR é seleccionado de ZD1839, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
4. Combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 para utilização como medicamento.
5. Composição farmacêutica compreendendo uma combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 - 3, em associação com um diluente ou veiculo farmaceuticamente aceitável.
6. Utilização de uma combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 - 3 no fabrico de um medicamento para o tratamento de cancro num animal de sangue quente, tal como o homem.
7. Utilização de acordo com a reivindicação 6 em que o cancro é cancro do esófago, mieloma, cancro hepatocelular, do pâncreas, cervical, tumor de Ewing, neuroblastoma, sarcoma de Kaposi, cancro do ovário, cancro da mama, cancro colorrectal, cancro da próstata, cancro da bexiga, melanoma, cancro do pulmão - cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) e cancro do pulmão de células pequenas (SCLC), cancro gástrico, cancro da cabeça e pescoço, cancro do cérebro, cancro renal, linfoma e leucemia.
8. Utilização da combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 no fabrico de um medicamento para utilização na produção de um efeito anti-angiogénico, num animal de sangue quente, tal como o homem.
9. Utilização de acordo com a reivindicação 7, em que o cancro 2 é cancro da próstata.
10. Utilização de acordo com a reivindicação 7, em que o cancro é NSCLC.
11. Utilização de acordo com a reivindicação 7, em que o cancro está num estado metastático.
12. Utilização de acordo com a reivindicação 7, em que o cancro está num estado não metastático.
13. Utilização de acordo com a reivindicação 7, em que o cancro é um cancro renal, da tiróide, do pulmão, da mama ou da próstata que produz metástases ósseas. Lisboa, 13 de Setembro de 2007 3