PT1506167E - Hydroxy tetrahydro-naphthalenylurea derivatives - Google Patents
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Description
DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE HIDROXI-TETRA-HIDRO-NAFTALENILUREIA"DESCRIPTION " HYDROXY-TETRA-HYDRO-NAFTALENILUREIA DERIVATIVES "
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃODETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
CAMPO TÉCNICO A presente invenção refere-se a derivados de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia que são úteis como um ingrediente activo de preparações farmacêuticas. Os derivados de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia da presente invenção apresentam actividade antagonista do receptor vanilóide (VR) e podem ser utilizados para a profilaxia e tratamento de doenças associadas com a actividade do VR1, em particular, para o tratamento de incontinência urinária de urgência, bexiga hiperactiva, dor crónica, dor neuropática, dor de pós-operatório, dor de artrite reumatóide, nevralgia, neuropatias, algesia, lesão do nervo, isquemia, neurodegeneração, acidente vascular cerebral, incontinência e/ou distúrbios inflamatórios, tais como asma e doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD). A incontinência urinária (UI) é a perda involuntária de urina. A incontinência urinária de urgência (UUI) é um dos tipos mais comuns de UI em conjunto com a incontinência urinária de stress (SUI), que é habitualmente provocada por um defeito no mecanismo de encerramento da uretra. A UUI é, muitas vezes, associada com distúrbios ou doenças neurológicas que causam danos neuronais, tais como demência, doença de Parkinson, 1 esclerose múltipla, acidente vascular cerebral e diabetes, embora também ocorra em indivíduos sem estes distúrbios. Uma das causas normais da UUI é a bexiga hiperactiva (OAB) que é uma patologia médica que se refere aos sintomas de frequência e urgência derivados de contracções anormais e instabilidade do músculo detrusor.TECHNICAL FIELD The present invention relates to hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivatives which are useful as an active ingredient of pharmaceutical preparations. The hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivatives of the present invention have vanilloid receptor (VR) antagonist activity and can be used for the prophylaxis and treatment of diseases associated with VR1 activity, in particular, for the treatment of urinary incontinence of urgency, overactive bladder, chronic pain, neuropathic pain, postoperative pain, rheumatoid arthritis pain, neuralgia, neuropathies, algesia, nerve damage, ischemia, neurodegeneration, stroke, incontinence and / or inflammatory disorders such as asthma and chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Urinary incontinence (UI) is the involuntary loss of urine. Urge incontinence (UUI) is one of the most common types of UI in conjunction with stress urinary incontinence (SUI), which is usually caused by a defect in the urethral closure mechanism. UUI is often associated with disorders or neurological diseases that cause neuronal damage, such as dementia, Parkinson's disease, multiple sclerosis, stroke and diabetes, although it also occurs in individuals without these disorders. One of the normal causes of UUI is overactive bladder (OAB), which is a medical condition that refers to the symptoms of frequency and urgency derived from abnormal contractions and instability of the detrusor muscle.
Actualmente, existem no mercado vários medicamentos para a incontinência urinária, principalmente, para auxiliar no tratamento da UUI. A terapia para OAB é focada em fármacos que afectam mecanismos de controlo neuronal periférico ou aqueles que actuam directamente na contracção do músculo liso do detrusor da bexiga, com maior ênfase no desenvolvimento de agentes anticolinérgicos. Estes agentes podem inibir os nervos parassimpáticos que controlam o esvaziamento da bexiga ou podem exercer um efeito espasmolítico directo no músculo detrusor da bexiga. Isto resulta numa diminuição na pressão intravesicular, um aumento na capacidade e uma redução na frequência da contracção da bexiga. Os fármacos anticolinérgicos orais activos, tais como propantelina (ProBanthine), tartarato de tolterodina (Detrol) e oxibutinina (Ditropan) são os fármacos mais habitualmente prescritos. No entanto, as suas desvantagens mais graves são efeitos secundários inaceitáveis, tais como boca seca, visões anormais, obstipação e perturbações no sistema nervoso central. Estes efeitos secundários conduzem a um fraco cumprimento pelos doentes. Só os sintomas de boca seca são responsáveis por uma taxa de não cumprimento pelo doente de 70% com a oxibutinina. As insuficiências das presentes terapias realçam a necessidade de novos fármacos eficazes, seguros e disponíveis oralmente que apresentem menos efeitos secundários. 2Currently, there are several medicines for urinary incontinence on the market, mainly to assist in the treatment of UUI. OAB therapy is focused on drugs that affect peripheral neuronal control mechanisms or those that act directly on bladder detrusor smooth muscle contraction, with greater emphasis on the development of anticholinergic agents. These agents may inhibit parasympathetic nerves that control bladder emptying or may exert a direct spasmolytic effect on the detrusor bladder muscle. This results in a decrease in intravesical pressure, an increase in capacity and a reduction in the frequency of bladder contraction. Active oral anticholinergic drugs such as propantheline (ProBanthine), tolterodine tartrate (Detrol) and oxybutynin (Ditropan) are the most commonly prescribed drugs. However, its most serious disadvantages are unacceptable side effects, such as dry mouth, abnormal vision, constipation and central nervous system disorders. These side effects lead to poor compliance by patients. Only the dry mouth symptoms are responsible for a patient's failure rate of 70% with oxybutynin. The shortcomings of the present therapies highlight the need for new effective, safe and orally available new drugs which have fewer side effects. 2
TÉCNICA ANTECEDENTEBACKGROUND TECHNIQUE
Os compostos vanilóides são caracterizados pela presença de um grupo vanililo ou um grupo funcionalmente equivalente. Exemplos de vários compostos vanilóides ou moduladores do receptor vanilóide são vanilina (4-hidroxi-3-metoxi-benzaldeído), guaiacol (2-metoxi-fenol), zingerona (4-/4-hidroxi-3-metoxifenil/-2-butanona), eugenol-(2-metoxi4-/2-propenil/fenol) e capsaicína (8-metil-N-vanilil-6-noneno-amida).Vanyloid compounds are characterized by the presence of a vanillyl group or a functionally equivalent group. Examples of various vanilloid compounds or vanilloid receptor modulators are vanillin (4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyde), guaiacol (2-methoxyphenol), zingerone (4-4-hydroxy-3-methoxyphenyl) -2-butanone ), eugenol- (2-methoxy4- / 2-propenyl / phenol) and capsaicin (8-methyl-N-vanillyl-6-nonene-amide).
Entre outros, a capsaicína, o ingrediente principal mais potente nas malaguetas "picantes", é uma neurotoxina específica que dessensibiliza os neurónios aferentes pelas fibras C. A capsaicína interage com os receptores vanilóides (VRl), que são, predominantemente, expressos em corpos celulares dos gânglios da raiz dorsal (DRG) ou terminações nervosas das fibras sensoriais aferentes, incluindo terminações nervosas das fibras C [Tominaga M, Caterina MJ, Malmberg AB, Rosen TA, Gilbert H, Skinner K, Raumann BE, Basbaum AI, Julius D: The cloned capsaicin receptor integrates multiple pain-producing stimuli. Neuron. 21: 531-543, 1998]. 0 receptor VRl foi recentemente clonado [Caterina MJ, Schumacher MA, Tominaga M, Rosen TA, Levine JD, Julius D: Nature 389:816-824, (1997)] e identificado com um canal catiónico não selectivo com seis domínios transmembranares que está estruturalmente relacionado com a família dos canais TRP (receptor de potencial transiente) . A ligação da capsaicína ao VRl permite a redução dos gradientes de concentração dos iões sódio, cálcio e, possivelmente, potássio, provocando a despolarização inicial e libertação dos neurotransmissores dos terminais nervosos. 0 VRl pode, por isso, ser encarado como um 3 integrante molecular do estimulo químico e físico que induz os sinais neuronais em doenças ou estados patológicos.Among others, capsaicin, the most potent main ingredient in hot peppers, is a specific neurotoxin that desensitizes afferent neurons by C fibers. Capsaicin interacts with vanyloid receptors (VIR), which are predominantly expressed in bodies dendritic cell ganglia (DRG) or nerve endings of afferent sensory fibers, including nerve endings of C fibers [Tominaga M, Caterina MJ, Malmberg AB, Rosen TA, Gilbert H, Skinner K, Raumann BE, Basbaum AI, Julius D : The cloned capsaicin receptor integrates multiple pain-producing stimuli. Neuron. 21: 531-543, 1998]. The VR1 receptor was recently cloned [Caterina MJ, Schumacher MA, Tominaga M, Rosen TA, Levine JD, Julius D: Nature 389: 816-824, (1997)] and identified with a non-selective cation channel with six transmembrane domains that is structurally related to the family of TRP (transient potential receptor) channels. The binding of capsaicin to the RVR allows the reduction of the concentration gradients of the sodium, calcium and possibly potassium ions, causing the initial depolarization and release of the neurotransmitters from the nerve terminals. VR1 can therefore be regarded as a molecular member of the chemical and physical stimulus that induces neuronal signals in diseases or disease states.
Existem muitas evidências, directas ou indirectas, que demonstram a relação entre a actividade do VRl e doenças, tais como dor, isquemia e inflamação (e. g., documentos wo 99/00115 e 00/50387). Além disso, foi demonstrado que o VRl traduz os sinais reflexos que estão envolvidos na bexiga hiperactiva de doentes que apresentam vias reflexas espinais anormais ou danificadas [De Groat WC: A neurologic basis for the overactive bladder. Urology 50 (Supl . 6A) : 36-52, 1997]. A dessensibilização dos nervos aferentes por depleção de neurotransmissores, utilizando agonistas de VRl, tal como a capsaicina, tem demonstrado proporcionar resultados promissores no tratamento de disfunção da bexiga associada com lesão na medula espinal e esclerose múltipla [(Maggi CA: Therapeutic potential of capsaicin-like molecules - Studies in animais and humans. Life Sciences 51: 1777-1781, 1992) e (DeRidder D; Chandiramani V; Dasgupta P; VanPoppel H; Baert L; Fowler CJ:Intravesical capsaicin as a treatment for refractory detrusor hyperreflexia: A dual center study with long-term followup. J. Urol. 158: 2087-2092, 1997)].There is much evidence, either direct or indirect, that demonstrates the relationship between IRR activity and diseases, such as pain, ischemia and inflammation (e.g., WO 99/00115 and 00/50387). In addition, it has been shown that VRl translates the reflex signals that are involved in the overactive bladder of patients who have abnormal or damaged spinal reflex pathways [De Groat WC: A neurologic basis for the overactive bladder. Urology 50 (Suppl 6A): 36-52, 1997]. Desensitization of afferent nerves by neurotransmitter depletion using RVR agonists such as capsaicin has been shown to provide promising results in the treatment of bladder dysfunction associated with spinal cord injury and multiple sclerosis (Maggi CA: Therapeutic potential of capsaicin- (Molecular Biology and Molecular Biology, University of California, Los Angeles, California, USA) and (DeRidder D, Chandiramani V, Dasgupta P, VanPoppel H, Baert L, Fowler CJ: Intravesical capsaicin as a treatment for refractory detrusor hyperreflexia: A dual center study with long-term followup J. Urol 158: 2087-2092 (1997)].
Prevê-se que o antagonismo do receptor VRl conduzirá ao bloqueio da libertação de neurotransmissores, resultando na profilaxia e tratamento da patologia e doenças associadas com a actividade de VRl. É, deste modo, esperado que os antagonistas do receptor VRl possam ser utilizados para a profilaxia e tratamento da patologia e doenças, incluindo dor crónica, dor neuropática, dor de pós-operatório, dor do tipo artrite reumatóide, nevralgia, 4 neuropatias, algesia, lesão do nervo, isquemia, neurodegeneração, acidente vascular cerebral, incontinência, distúrbios inflamatórios, tais como asma e CODP, incontinência urinária (UI), tais como incontinência urinária de urgência (UUI) e/ou bexiga hiperactiva. 0 documento WO 00/50387 revela os compostos tendo uma actividade agonista de vanilóide, representados pela fórmula geral:VR1 receptor antagonism is predicted to result in blocking the release of neurotransmitters, resulting in the prophylaxis and treatment of the pathology and diseases associated with the RVR activity. It is thus expected that the VR1 receptor antagonists may be used for the prophylaxis and treatment of pathology and diseases, including chronic pain, neuropathic pain, postoperative pain, rheumatoid arthritis type pain, neuralgia, neuropathies, algesia , nerve damage, ischemia, neurodegeneration, stroke, incontinence, inflammatory disorders such as asthma and CODP, urinary incontinence (UI), such as urge urinary incontinence (UUI) and / or overactive bladder. WO 00/50387 discloses the compounds having a vanilloid agonist activity represented by the general formula:
em que; XP é um átomo de oxigénio ou enxofre; AP é -nhch2- ou -ch2-;on what; XP is an oxygen or sulfur atom; AP is -nhch2- or -ch2-;
Ra é um grupo alquiloCi-4 substituído ou não substituído, ou RalCO-; em queRa is a substituted or unsubstituted C 1-4 alkyl group, or Ral CO-; on what
Ral é um grupo alquilo com 1 a 18 átomos de carbono, um grupo alcenilo com 2 a 18 átomos de carbono ou um grupo 5 arilo substituído ou não substituído com 6 a 10 átomos de carbono;Ral is an alkyl group having 1 to 18 carbon atoms, an alkenyl group having 2 to 18 carbon atoms or a substituted or unsubstituted aryl group having 6 to 10 carbon atoms;
Rb é um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, um grupo alcoxilo com 1 a 6 átomos de carbono, um grupo haloalquilo com 1 a 6 átomos de carbono ou um átomo de halogéneo;Rb is a hydrogen atom, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, a haloalkyl group having 1 to 6 carbon atoms or a halogen atom;
Rc é um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo com 1 a 4 átomos de carbono, um aminoalquilo, um monoéster de diácido ou ácido α-alquílico; e o asterisco * indica um átomo de carbono quiral, e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis. 0 documento WO 2000/61581 revela derivados amina representados pela fórmula geral: R’Rc is a hydrogen atom, an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms, an aminoalkyl, a diacid monoester or α-alkyl acid; and the asterisk * denotes a chiral carbon atom, and pharmaceutically acceptable salts thereof. WO 2000/61581 discloses amine derivatives represented by the general formula:
R"R "
NHNH
6 em que (R', R") representa (F, F), (CF3, H) ou (iPr, iPr) como agentes úteis para diabetes, hiperlipemia, arteriosclerose e cancro. 0 documento WO 00/75106 revela os compostos representados pela fórmula geral:(CF3, H) or (iPr, iPr) as useful agents for diabetes, hyperlipemia, arteriosclerosis and cancer. WO 00/75106 discloses the compounds represented by the general formula:
NH N-Z ,90NH N-Z, 90
em que Z representain which Z represents
OO
7 ο7 or
I OH (CH2) 1-6- ο» R»/Nr"ο nos quais R90 é hidrogénio, alquiloCi_i2, cicloalquiloC3-8 ou semelhantes, e R91 é amino-alquiloCi_6, aminocarbonil-alquiloCi_6 ou hidroxiaminocarbonilalquiloCi_6; e R90 e R91 são seleccionados, independentemente, do grupo consistindo de H, alquiloCi_6, alquilCi_6tio, alcoxiloCi_6, fluoro, cloro, bromo, iodo e nitro; como agentes úteis para o tratamento de doenças mediadas por MMP em mamíferos. 0 documento WO 00/55152 revela os compostos representados pela fórmula geral:In which R 90 is hydrogen, C 1-2 alkyl, C 3-8 cycloalkyl or the like, and R 91 is amino C 1-6 alkyl, aminocarbonyl-C 1-6 alkyl or hydroxyaminocarbonylC 1-6 alkyl; and R 90 and R 91 are independently selected from the group consisting of H, C 1-6 alkyl, C 1-6 alkylthio, C 1-6 alkoxy, fluoro, chloro, bromo, iodo and nitro; as useful agents for the treatment of MMP-mediated diseases in mammals. WO 00/55152 discloses the compounds represented by the general formula:
XX
Η H em queIn what
An é heterociclo; 8 é tetra-hidronaftilo; eAn is heterocycle; 8 is tetrahydronaphthyl; and
Ar2 L e Q são definidos nesta descrição; como agentes úteis para o tratamento de inflamação, doença imunitária relacionada, dor e diabetes.Ar 2 L and Q are defined in this description; as useful agents for the treatment of inflammation, related immune disease, pain and diabetes.
No entanto, nenhuma destas referências revela derivados de hidroxi-tetra-hidronaftenilureia simples com actividade antagonista de VRl. É desejado o desenvolvimento de um composto que apresente actividade antagonista de VRl eficaz e possa ser utilizado para a profilaxia e tratamento de doenças associadas com a actividade de VRl, em particular, para o tratamento de incontinência urinária, incontinência urinária de urgência, bexiga hiperactiva, bem como dor e/ou doenças inflamatórias, tais como asma e COPD.However, none of these references disclose single hydroxy-tetrahydronaphthenylurea derivatives with IRR antagonist activity. The development of a compound which exhibits effective RVR antagonist activity and may be used for the prophylaxis and treatment of diseases associated with RVR activity, in particular, for the treatment of urinary incontinence, urge incontinence, overactive bladder, as well as pain and / or inflammatory diseases such as asthma and COPD.
SUMÁRIO DA INVENÇÃOSUMMARY OF THE INVENTION
Esta invenção proporciona um derivado de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia da fórmula (I), a sua forma tautomérica e estereoisomérica e os seus sais: 9 em queThis invention provides a hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivative of the formula (I), its tautomeric and stereoisomeric form and salts thereof: wherein
ou nos quais: Y representa uma ligação directa,or in which: Y represents a direct bond,
R1, R2 e R3 representam, independentemente, hidrogénio, halogéneo, hidroxilo, nitro, carboxilo, amino, alquilCi_6amino, di (alquilCi_6) amino, cicloalquilC3_8amino, alcoxiCi_6carbonilo, fenilo, benzilo, sulfonamida, alcanoíloCi_6, alcanoilCi_6amino, carbamoilo, alquilCi-6carbamoílo, ciano, alquiloCi-6 opcionalmente substituído com ciano, 10 alcoxiCi-6carbonilo ou mono-, di- ou tri-halogéneo, alcoxiloCi-6 opcionalmente substituído com mono-, di- ou tri-halogéneo, fenoxilo opcionalmente substituído com halogéneo ou alquiloCi_6 ou alquilCi_6tio opcionalmente substituído com mono-, di- ou tri-halogéneo; R4, R5, R6 e R7 representam independentemente, alquiloCi_6 ou fenilo; Z1 representa hidrogénio ou alquiloCi-6; e Z2 representa hidrogénio, halogéneo ou alquiloCi_6·R1, R2 and R3 are independently hydrogen, halogen, hydroxy, nitro, carboxyl, amino, C1-6 alkylamino, di (C1-6 alkyl) amino, C3-8 cycloalkylamino, C1-6 alkoxycarbonyl, phenyl, benzyl, sulfonamide, C1-6 alkanoyl, C1-6 alkanoylamino, carbamoyl, C1-6 alkylcarbamoyl, cyano C 1-6 alkyl optionally substituted with cyano, C 1-6 alkoxycarbonyl or mono-, di- or trihalogen, C 1-6 alkoxy optionally substituted with mono-, di- or trihalogen, phenoxy optionally substituted with halo or C 1-6 alkyl or optionally substituted C 1-6 alkylthio substituted with mono-, di- or tri-halogen; R4, R5, R6 and R7 independently represent C1-6 alkyl or phenyl; Z 1 represents hydrogen or C 1-6 alkyl; and Z 2 represents hydrogen, halogen or C 1-6 alkyl
Os derivados de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia de fórmula (I), a sua forma tautomérica e estereoisomérica e os seus sais, apresentam, de um modo surpreendente, uma excelente actividade antagonista de VR1. São, por isso, especialmente adequados para a profilaxia e tratamento de doenças associadas com a actividade de VR1, em particular, para o tratamento de incontinência urinária de urgência e/ou bexiga hiperactiva.The hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivatives of formula (I), their tautomeric and stereoisomeric form and their salts, surprisingly exhibit excellent VR1 antagonist activity. They are therefore especially suitable for the prophylaxis and treatment of diseases associated with VR1 activity, in particular, for the treatment of urge urinary incontinence and / or overactive bladder.
De um modo preferido, os derivados de hidroxi-tetra-hidro-naf talenilureia de fórmula (I) são aqueles em que X representaPreferably, the hydroxy-tetrahydro-naphthalenyl urea derivatives of formula (I) are those wherein X represents
ou 11 nas quais Y representa uma ligação directa , ouor wherein Y represents a direct bond, or
R1, R2 e R3 representam, independentemente, hidrogénio, halogéneo, hidroxilo, nitro, carboxilo, amino, alquilCi_6amino, di (alquilCi-ê) amino, cicloalquilC3_8amino, alcoxiCi_6carbonilo, fenilo, benzilo, sulfonamida, alcanoíloCi-6, alcanoilCi_6amino, carbamoilo, alquilCi_6carbamoilo, ciano, alquiloCi_6 opcionalmente substituído com ciano, alcoxiCi_6carbonilo ou mono-, di- ou tri-halogéneo, alcoxiloCi-6 opcionalmente substituído com mono-, di- ou tri-halogéneo, fenoxilo opcionalmente substituído com halogéneo ou alquiloCi_6 ou alquilCi_6tio opcionalmente substituído com mono-, di- ou tri-halogéneo; R4 e R5 representam independentemente hidrogénio ou alquiloCi-6,· e Z1 e Z2 representam, cada, hidrogénio.R1, R2 and R3 are independently hydrogen, halogen, hydroxy, nitro, carboxyl, amino, C1 -C6 alkylamino, di (C1 -C6 alkyl) amino, C3 -C8 cycloalkylamino, C1-6 alkoxycarbonyl, phenyl, benzyl, sulfonamide, C1-6 alkanoyl, alkanoylC1-6 alkoxy, carbamoyl, C1-6 alkylcarbamoyl , cyano, C1-6 alkyl optionally substituted with cyano, C1-6 alkoxycarbonyl or mono-, di- or trihalogen, C1-6 alkoxy optionally substituted with mono-, di- or trihalogen, phenoxy optionally substituted with halogen or C1-6 alkyl or C1-6 alkylthio optionally substituted with mono -, di- or tri-halogen; R 4 and R 5 independently represent hydrogen or C 1-6 alkyl, and Z 1 and Z 2 each represent hydrogen.
Noutra forma de realização, os derivados de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia de fórmula (I) podem ser aqueles em que 12In another embodiment, the hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivatives of formula (I) may be those wherein
X representaX represents
ou na qual Y representa uma ligação directa ouor in which Y represents a direct or
R1, R2 e R3 representam independentemente hidrogénio, halogéneo, hidroxilo, nitro, carboxilo, amino, alquilCi_6amino, di (alquilCi^) amino, cicloalquilC3_8amino, alcoxiCi_6carbonilo, fenilo, benzilo, sulfonamida, alcanoíloCi_6, alcanoilCi_6amino, carbamoilo, alquilCi_6carbamoilo, ciano, alquiloCi-6 opcionalmente substituído com ciano, alcoxiCi_6carbonilo ou mono-, di- ou tri-halogéneo, alcoxiloCi-6 opcionalmente substituído com mono-, di- ou tri-halogéneo, fenoxilo opcionalmente substituído por halogéneo ou alquiloCi_6 ou alquilCi_6tio opcionalmente substituído com mono-, di- ou tri-halogéneo; 13 R4 e R5 representam, cada, hidrogénio; e Z1 e Z2 representam, cada, hidrogénio.R1, R2 and R3 independently represent hydrogen, halogen, hydroxy, nitro, carboxyl, amino, C1-6 alkylamino, di (C1-5 alkyl) amino, C3-8 cycloalkylamino, C1-6 alkoxycarbonyl, phenyl, benzyl, sulfonamide, C1-6 alkanoyl, C1-6 alkanoylamino, carbamoyl, C1-6 alkylcarbamoyl, cyano, Optionally substituted with cyano, C 1-6 alkoxycarbonyl or mono-, di- or trihalogen, C 1-6 alkoxy optionally substituted with mono-, di- or trihalogen, phenoxy optionally substituted by halogen or C 1-6 alkyl or C 1-6 alkylthio optionally substituted with mono-, di - or tri-halogen; R 4 and R 5 each represent hydrogen; and Z 1 and Z 2 each represent hydrogen.
Noutra forma de realização, os derivados de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia de fórmula (I) podem ser aqueles em queIn another embodiment, the hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivatives of formula (I) may be those wherein
X representaX represents
na qual Y representa uma ligação directa ouin which Y represents a direct or
Rs R4 na qual R1 e R2 representam independentemente, hidrogénio, cloro, bromo, fluoro, ciclopentilamino, trifluorometilo ou trifluorometoxilo; R3, R4 e R5 representam, cada, hidrogénio; e 14 Z1 e Ζ2 representam, cada, hidrogénio.R4, R4, R4, R4, R4, R4, R4, R4, R4, R3, R4 and R5 each represent hydrogen; and Z1 and Ζ2 each represent hydrogen.
Noutra forma de realização, os derivados de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia de fórmula (I) podem ser aqueles em que X representaIn another embodiment, the hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivatives of formula (I) may be those wherein X represents
na qual Y representa uma ligação directa ou R5 R4 na qual R1 e R2 representam independentemente, hidrogénio, cloro, bromo, fluoro, ciclopentilamino, trifluorometilo ou trifluorometoxilo; R3, R4 e R5 representam, cada, hidrogénio; e Z1 e Z2 representam, cada, hidrogénio. 15in which Y represents a direct bond or R 5 R 4 in which R 1 and R 2 are independently hydrogen, chlorine, bromine, fluoro, cyclopentylamino, trifluoromethyl or trifluoromethoxy; R3, R4 and R5 each represent hydrogen; and Z 1 and Z 2 each represent hydrogen. 15
De um modo mais preferido, o referido derivado de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia da fórmula (I) é seleccionado do grupo consistindo de: N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-Ν'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureia; N-(3-clorofenil)-N'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-[3-(trifluorometil)fenil]ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-[4-(trifluorometil)fenil]ureia; 3-({[(7-Hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)amino]carbonil}amino)benzoato de etilo; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-(1-naftil)ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-(2-naftil)ureia; N-(3,4-diclorofenil)-N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naf talenil) ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-(4-isopropilfenil)ureia; 16 Ν-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-(4-fenoxifenil)ureia. N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-Ν'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]ureia; N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-Ν'-[(7S)-7-hidroxi- 5.6.7.8- tetra-hidro-l-naftalenil]ureia; N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-Ν'-[(7R)-7-hidroxi- 5.6.7.8- tetra-hidro-l-naftalenil]ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-1ΝΓ-fenilureia; N-(4-clorofenil)-Ν'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil) ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-[2-(trifluorometil)fenil]ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-[4-(trifluorometil)fenil]ureia; N-(3,4-diclorofenil)-N'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naf talenil ) ureia ; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-N'-[4-(trifluorometoxi)fenil]ureia; N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-N-[4-(trifluorometoxi)benzil]ureia; 17 Ν-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)-Ν'-(2,4,6-trimetoxibenzil)ureia; N-(2,6-difluorobenzil)-Ν'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-1-naftalenil)ureia; N-[(7R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-Ν'-[4-(trifluorometil)benzil]ureia; N-[(7S)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-N'-[4-(trifluorometil)-benzil]ureia; N-[(7R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-Ν'-[4-(trifluorometoxi)-benzil]ureia; N-[(7S)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-Ν'-[4-(trifluorometoxi)-benzil]ureia; N-[2-(4-clorofenil)etil]-N'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naf talenil) ureia; e N-[3-fluoro-4-(trifluorometil)benzil]-Ν'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureia.More preferably, said hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivative of the formula (I) is selected from the group consisting of: N- [4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl] -β- (7- hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea; N- (3-chlorophenyl) -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea; N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) -3 '- [3- (trifluoromethyl) phenyl] urea; N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) -3 '- [4- (trifluoromethyl) phenyl] urea; Ethyl 3 - ({[(7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) amino] carbonyl} amino) benzoate; N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) -N '- (1-naphthyl) urea; N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) -N '- (2-naphthyl) urea; N- (3,4-dichlorophenyl) -N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea; N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) -N '- (4-isopropylphenyl) urea; 16β- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) - (4-phenoxyphenyl) urea. N- [4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl] -β- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] urea; (trifluoromethyl) phenyl] - [(7S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] urea: N- [4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl] [(7R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] urea: N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) -1-phenylurea N - (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea; N- (7-hydroxy-5,6,7,8- tetrahydro-1-naphthalenyl) -N '- [2- (trifluoromethyl) phenyl] urea; N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) 4- (trifluoromethyl) phenyl] urea; N- (3,4-dichlorophenyl) -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea; -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) -N '- [4- (trifluoromethoxy) phenyl] urea; naphthalenyl) -N- [4- (trifluoromethoxy) benzyl] urea; 17β- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) 4,6-trimethoxybenzyl) urea; N- (2,6-difluorobenzyl) -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea; - [(7R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -3 '- [4- (trifluoromethyl) benzyl] urea; N - [(7S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -N '- [4- (trifluoromethyl) benzyl] urea; N - [(7R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -3 '- [4- (trifluoromethoxy) benzyl] urea; N - [(7S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -3 '- [4- (trifluoromethoxy) benzyl] urea; N- [2- (4-chlorophenyl) ethyl] -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea; and N- [3-fluoro-4- (trifluoromethyl) benzyl] -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea.
No contexto da presente invenção, os substituintes, se não for referido o contrário, apresentam, no geral, os seguintes significados: 0 Alquilo per se e "alc" e "alquil" no alcoxilo, alcanoilo, alquilamino, alquilaminocarbonilo, alquilaminossulfonilo, alquilsulfonilamino, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilamino e alcanoilamino representam um radical alquilo linear ou 18 ramificado com, de um modo geral, 1 a 6, de um modo preferido, 1 a 4 e, de um modo particularmente preferido, 1 a 3 átomos de carbono, representando, de um modo ilustrativo e preferido, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, terc-butilo, n-pentilo e n-hexilo. 0 alcoxilo representa, de um modo ilustrativo e preferido, metoxilo, etoxilo, n-propoxilo, isopropoxilo, terc-butoxilo, n-pentoxilo e n-hexoxilo. 0 alcanoilo representa, de um modo ilustrativo e preferido, acetilo e propanoilo. 0 alquilamino representa um radical alquilamino contendo um ou dois (independentemente seleccionados) substituintes alquilo, de um modo ilustrativo e preferido, representando metilamino, etilamino, n-propilamino, isopropilamino, terc-butilamino, n-pentilamino, n-hexil-amino, N,N-dimetilamino, N, N-dietilamino, N-etil-N-metilamino, N-metil-N-n-propilamino, N-isopropil-N-n-propilamino, N-t-butil-N-metilamino, N-etil-N-n-pentilamino e N-n-hexil-N-metilamino. 0 alquilaminocarbonilo ou alquilcarbamoilo representam um radical alquilaminocarbonilo com um ou dois (seleccionados independentemente) substituintes alquilo, representando, de um modo ilustrativo e preferido, metilaminocarbonilo, etilaminocarbonilo, n-propilaminocarbonilo, isopropilamino-carbonilo, terc-butilaminocarbonilo, n-pentilaminocarbonilo, n-hexilaminocarbonilo, N,N-dimetilaminocarbonilo, N,N-dietilaminocarbonilo, N-etil-N-metilaminocarbonilo, N-metil-N-n-propilaminocarbonilo, N-isopropil-N-n-propilaminocarbonilo, N-t-butil-N-metilaminocarbonilo, 19 N-etil-N-n-pentilaminocarbonilo e N-n-hexil-N- metilaminocarbonilo. 0 alcoxicarbonilo representa, de um modo ilustrativo e preferido, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, n-propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, terc-butoxicarbonilo, n-pentoxicarbonilo e n-hexoxicarbonilo. 0 alcoxicarbonilamino representa, de um modo ilustrativo e preferido, metoxicarbonilamino, etoxicarbonilamino, n-propoxicarbonilamino, isopropoxicarbonilamino, terc-butoxicarbonilamino, n-pentoxicarbonilamino e n-hexoxicarbonilamino. 0 alcanoilamino representa, de um modo ilustrativo e preferido, acetilamino e etilcarbonilamino. 0 cicloalquilo per se e em cicloalquilamino e em cicloalquilcarbonilo representa um grupo cicloalquilo com, geralmente, 3 a 8 e, de um modo preferido, 5 a 7 átomos de carbono representando, de um modo ilustrativo e preferido, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo e ciclo-heptilo. 0 cicloalquilamino representa um radical cicloalquilamino com um ou dois (seleccionados independentemente) substituintes cicloalquilo representando, de um modo ilustrativo e preferido, ciclopropilamino, ciclobutilamino, ciclopentilamino, ciclo-hexilamino e ciclo-heptilamino. 0 halogéneo representa flúor, cloro, bromo e iodo. 20In the context of the present invention, the substituents, unless otherwise noted, generally have the following meanings: Alkyl per se and " alc " and " alkyl " alkylaminocarbonyl, alkylaminosulfonyl, alkylsulfonylamino, alkoxycarbonyl, alkoxycarbonylamino and alkanoylamino groups represent a linear or branched alkyl radical with generally 1 to 6, preferably 1 to 4, and, in a preferred manner, particularly preferred, 1 to 3 carbon atoms, illustratively and preferably, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, tert-butyl, n-pentyl and n-hexyl. The alkoxy represents, in an illustrative and preferred manner, methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, tert-butoxy, n-pentoxy and n-hexoxy. The alkanoyl represents, in an illustrative and preferred manner, acetyl and propanoyl. The alkylamino represents an alkylamino radical containing one or two (independently selected) alkyl substituents, in an illustrative and preferred manner, representing methylamino, ethylamino, n-propylamino, isopropylamino, tert-butylamino, n-pentylamino, n-hexylamino, N , N-dimethylamino, N-diethylamino, N-ethyl-N-methylamino, N-methyl-N-propylamino, N-isopropyl-Nn-propylamino, Nt -butyl-N-methylamino, N-ethyl-Nn-pentylamino and N-hexyl-N-methylamino. The alkylaminocarbonyl or alkylcarbamoyl radicals represent an alkylaminocarbonyl radical having one or two (independently selected) alkyl substituents, illustratively and preferably methylaminocarbonyl, ethylaminocarbonyl, n-propylaminocarbonyl, isopropylaminocarbonyl, tert-butylaminocarbonyl, n-pentylaminocarbonyl, n- N-diethylaminocarbonyl, N-ethyl-N-methylaminocarbonyl, N-methyl-N-propylaminocarbonyl, N-isopropyl-N-propylaminocarbonyl, N-butyl-N-methylaminocarbonyl, N-ethyl- N-pentylaminocarbonyl and N-hexyl-N-methylaminocarbonyl. The alkoxycarbonyl represents, in an illustrative and preferred manner, methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, n-propoxycarbonyl, isopropoxycarbonyl, tert-butoxycarbonyl, n-pentoxycarbonyl and n-hexyloxycarbonyl. The alkoxycarbonylamino represents, in an illustrative and preferred manner, methoxycarbonylamino, ethoxycarbonylamino, n-propoxycarbonylamino, isopropoxycarbonylamino, tert-butoxycarbonylamino, n-pentoxycarbonylamino and n-hexyloxycarbonylamino. The alkanoylamino represents, in an illustrative and preferred manner, acetylamino and ethylcarbonylamino. The cycloalkyl per se and in cycloalkylamino and in cycloalkylcarbonyl represents a cycloalkyl group with generally 3 to 8 and preferably 5 to 7 carbon atoms, preferably cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclo cyclohexyl and cycloheptyl. The cycloalkylamino represents a cycloalkylamino radical with one or two (independently selected) cycloalkyl substituents representing, preferably cyclopropylamino, cyclobutylamino, cyclopentylamino, cyclohexylamino and cycloheptylamino. The halogen represents fluorine, chlorine, bromine and iodine. 20
De um modo preferido, o medicamento da presente invenção compreende, também, um ou mais veículos e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.Preferably, the medicament of the present invention also comprises one or more pharmaceutically acceptable carriers and / or excipients.
Os derivados de hidroxi-tetra-hidro-naftalenilureia da fórmula (I), a sua forma tautomérica e estereoisomérica e os seus sais são eficazes para o tratamento ou prevenção de uma doença seleccionada do grupo consistindo de incontinência urinária de urgência, bexiga hiperactiva, dor crónica, dor neuropática, dor de pós-operatório, dor de artrite reumatóide, nevralgia, neuropatias, algesia, lesão do nervo, isquemia, neurodegeneração e/ou acidente vascular cerebral, bem como doenças inflamatórias, tais como asma e COPD, uma vez que as doenças estão, também, relacionadas com a actividade de VRl.The hydroxy-tetrahydro-naphthalenylurea derivatives of the formula (I), their tautomeric and stereoisomeric form and their salts are effective for the treatment or prevention of a disease selected from the group consisting of urge urinary incontinence, overactive bladder, pain chronic pain, neuropathic pain, postoperative pain, rheumatoid arthritis pain, neuralgia, neuropathies, algesia, nerve damage, ischemia, neurodegeneration and / or stroke, as well as inflammatory diseases such as asthma and COPD, since the diseases are also related to the RVR activity.
Os compostos são, adicionalmente úteis no tratamento e profilaxia de dor neuropática, que é uma forma de dor, muitas vezes associada com herpes zoster e nevralgia pós-herpes, neuropatia diabética dolorosa, dor lombar neuropática, nevralgia pós-traumática e de pós-operatório, nevralgia devido à compressão do nervo e outras nevralgias, dor fantasma, síndromes de dor regional complexa, neuropatias infecciosas ou para-infecciosas, como as associadas com a infecção por VIH, dor associada com distúrbios do sistema nervoso central, como esclerose múltipla ou doença de Parkinson ou lesão na medula espinal ou lesão cerebral traumática e dor pós-acidente vascular cerebral.The compounds are further useful in the treatment and prophylaxis of neuropathic pain, which is a form of pain, often associated with herpes zoster and post-herpes neuralgia, painful diabetic neuropathy, neuropathic low back pain, post-traumatic and postoperative neuralgia , neuralgia due to nerve compression and other neuralgia, phantom pain, complex regional pain syndromes, infectious or para-infectious neuropathies such as those associated with HIV infection, pain associated with central nervous system disorders such as multiple sclerosis or disease of Parkinson's disease or spinal cord injury or traumatic brain injury and post-stroke pain.
Além disso, os compostos são úteis para o tratamento de dor músculo-esquelética, uma forma de dor muitas vezes associada com osteoartrite ou artrite reumatóide ou outras formas de artrite e dor nas costas. 21In addition, the compounds are useful for the treatment of musculoskeletal pain, a form of pain often associated with osteoarthritis or rheumatoid arthritis or other forms of arthritis and back pain. 21
Além disso, os compostos da presente invenção são úteis para o tratamento de dor associada com cancro, incluindo dor visceral ou neuropática associada com cancro ou tratamento de cancro.In addition, the compounds of the present invention are useful for the treatment of pain associated with cancer, including visceral or neuropathic pain associated with cancer or treatment of cancer.
Os compostos são, além disso, úteis para o tratamento de dor visceral, e. g., dor associada com a obstrução de vísceras ocas como a cólica biliar, dor associada com síndrome do intestino irritável, dor pélvica, vulvodínia, orquialgia ou prostatodínia.The compounds are furthermore useful for the treatment of visceral pain, e.g. pain associated with obstruction of hollow viscera such as biliary colic, pain associated with irritable bowel syndrome, pelvic pain, vulvodynia, orchitis, or prostatodynia.
Os compostos são, também, úteis para o tratamento de dor associada a lesões inflamatórias das articulações, pele, músculos ou nervos.The compounds are also useful for the treatment of pain associated with inflammatory lesions of the joints, skin, muscles or nerves.
Os compostos são de utilização para o tratamento de dor orofacial e enxaqueca, e. g., cefaleia ou enxaqueca do tipo tensão.The compounds are of use for the treatment of orofacial pain and migraine, e.g. headache or tension-type migraine.
FORMA DE REALIZAÇAO DA INVENÇÃO 0 composto da fórmula (I) da presente invenção pode ser, mas não limitado a, ser preparado pelos métodos [A], [B] , [C], [D], [E], [F] ou [G] abaixo. Nalgumas formas de realização, um ou mais dos substituintes, tais como grupo amino, grupo carboxilo e grupo hidroxilo dos compostos utilizados como materiais de partida ou intermediários, são vantajosamente protegidos por um grupo de protecção conhecido pelos especialista na técnica. Exemplos dos grupos de protecção estão descritos em "Protective Groups in Organic Synthesis 22 (3a Edição)" por Greene e Wuts, John Wiley and Sons, Nova Iorque 1999.The compound of the formula (I) of the present invention may be, but is not limited to, the preparation of the compounds [A], [B], [C], [D], [E], [F] or [G] below. In some embodiments, one or more of the substituents, such as amino group, carboxyl group and hydroxyl group of the compounds used as starting materials or intermediates, are advantageously protected by a protecting group known to those skilled in the art. Examples of the protecting groups are described in " Protective Groups in Organic Synthesis 22 (3rd Edition) " by Greene and Wuts, John Wiley and Sons, New York 1999.
[Método A][Method A]
0 composto de fórmula (I) (em que X, Z1 e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado através da reacção do composto de fórmula (II) (em que Z1 e Z2 são tal como definido acima) e isocianato (li) (em que X é tal como definido acima). A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, hidrocarbonetos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano; éteres, tais como éter dietilico, éter isopropílico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; nitrilos, tal como acetonitrilo; amidas, tais como N,N-dimetilformamida (DMF), N,N-dimetilacetamida (DMAC) e N-metilpirrolidona (NMP); ureia, tal como 1,3-dimetil-2-imidazolidinona (DMI); sulfóxidos, tal como dimetilsulfóxido (DMSO); e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados dois ou mais dos solventes seleccionados da lista acima. 23 A reacção pode ser efectuada na presença de base orgânica, tal como piridina ou trietilamina. A temperatura reaccional pode ser, opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não está limitada a, cerca da temperatura ambiente até 100 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 30 minutos a 48 horas e, de um modo preferido, 1 a 24 horas. O composto da fórmula (II) e isocianato (III) estão disponíveis comercialmente ou podem ser preparados através de técnicas conhecidas.The compound of formula (I) (wherein X, Z 1 and Z 2 are as defined above) may be prepared by the reaction of the compound of formula (II) (wherein Z 1 and Z 2 are as defined above) and isocyanato ) (wherein X is as defined above). The reaction may be carried out in a solvent, including, for example, halogenated hydrocarbons, such as dichloromethane, chloroform and 1,2-dichloroethane; ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; aromatic hydrocarbons, such as benzene, toluene and xylene; nitriles, such as acetonitrile; amides, such as N, N-dimethylformamide (DMF), N, N-dimethylacetamide (DMAC) and N-methylpyrrolidone (NMP); urea, such as 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone (DMI); sulfoxides, such as dimethylsulfoxide (DMSO); and others. Optionally, two or more of the solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction may be carried out in the presence of organic base, such as pyridine or triethylamine. The reaction temperature may optionally be set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually but not limited to at about room temperature to 100 ° C. The reaction may be effected for usually 30 minutes to 48 hours, and preferably 1 to 24 hours. The compound of formula (II) and isocyanate (III) are commercially available or can be prepared by known techniques.
[Método B][Method B]
fosgénio, difosgénio, +trifoegénio, + CDI ou CDT h2n (IV)phosgene, diphosgene, + triphosgene, + CDI or CDT h2n (IV)
O composto de fórmula (I) (em que X, Z1 e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado através da reacção do composto de fórmula (II) (em que Z1 e Z2 são tal como definido acima) com fosgénio, difosgénio, trifosgénio, 1,1-carbonildiimidazole (CDI) ou 1,1'-carbonildi(1,2,4- 24 triazole)(CDT) e, depois, adição do composto de fórmula (IV) (em que X é tal como definido acima) à mistura reaccional. A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, hidrocarbonetos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano; éteres, tais como éter dietilico, éter isopropilico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; nitrilos, tal como acetonitrilo; amidas, tais como N, N-dimetilformamida (DMF), N,N-dimetilacetamida (DMAC) e N-metilpirrolidona (NMP); ureia, tal como 1,3-dimetil-2-imidazolidinona (DMI); e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados dois ou mais dos solventes seleccionados da lista acima. A temperatura reaccional pode ser opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não está limitada a, cerca de 20 °C até 50 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 30 minutos a 10 horas e, de um modo preferido, 1 a 24 horas. O fosgénio, difosgénio, trifosgénio, CDI, CDT estão disponíveis comercialmente e o composto da fórmula (IV) está comercialmente disponível ou pode ser preparado através da utilização de técnicas conhecidas. 25 [Método C]The compound of formula (I) (wherein X, Z 1 and Z 2 are as defined above) can be prepared by reacting the compound of formula (II) (wherein Z 1 and Z 2 are as defined above) with phosgene, diphosgene , triphosgene, 1,1-carbonyldiimidazole (CDI) or 1,1'-carbonyldi (1,2,4-triazole) (CDT), and then addition of the compound of formula (IV) (wherein X is such as defined above) to the reaction mixture. The reaction may be carried out in a solvent, including, for example, halogenated hydrocarbons, such as dichloromethane, chloroform and 1,2-dichloroethane; ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; aromatic hydrocarbons, such as benzene, toluene and xylene; nitriles, such as acetonitrile; amides, such as N, N-dimethylformamide (DMF), N, N-dimethylacetamide (DMAC) and N-methylpyrrolidone (NMP); urea, such as 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone (DMI); and others. Optionally, two or more of the solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may be optionally set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually, but not limited to, about 20 ° C to 50 ° C. The reaction may be effected for usually 30 minutes to 10 hours, and preferably 1 to 24 hours. Phosgene, diphosgene, triphosgene, CDI, CDT are commercially available and the compound of formula (IV) is commercially available or can be prepared by the use of known techniques. 25 [Method C]
0 composto de fórmula (I) (em que X, Z1 e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado através da reacção do composto de fórmula (II) (em que Z1 e Z2 são tal como definido acima) e o composto de fórmula (V) (em que Li representa um átomo de halogéneo, tais como átomo de cloro, bromo ou iodo) e, depois, adicionado o composto de fórmula (IV) (em que X é tal como definido acima) à mistura reaccional. A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, hidrocarbonetos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano; éteres, tais como éter dietilico, éter isopropilico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; nitrilos, tal como acetonitrilo; amidas, tais como N,N-dimetilformamida (DMF), N,N-dimetilacetamida (DMAC) e N-metilpirrolidona (NMP); ureia, tal como 1,3-dimetil-2-imidazolidinona (DMI); e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados dois ou mais dos solventes seleccionados da lista acima. A temperatura reaccional pode ser opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer 26 reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não está limitada a, cerca de 30 °C a 120 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente 1 hora a 48 horas e, de um modo preferido, 2 a 24 horas. A reacção pode ser efectuada, de um modo vantajoso, na presença de uma base incluindo, por exemplo, aminas orgânicas, tais como piridina, trietilamina e N,N-diisopropiletilamina, dimetilanilina, dietilanilina, 4-dimetilaminopiridina e outros. 0 composto (V) está disponível comercialmente ou pode ser preparado pela utilização de técnicas conhecidas.The compound of formula (I) (wherein X, Z 1 and Z 2 are as defined above) can be prepared by the reaction of the compound of formula (II) (wherein Z 1 and Z 2 are as defined above) and the compound of formula formula (V) (wherein Li represents a halogen atom such as chlorine, bromine or iodine), and then the compound of formula (IV) (wherein X is as defined above) is added to the reaction mixture. The reaction may be carried out in a solvent, including, for example, halogenated hydrocarbons, such as dichloromethane, chloroform and 1,2-dichloroethane; ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; aromatic hydrocarbons, such as benzene, toluene and xylene; nitriles, such as acetonitrile; amides, such as N, N-dimethylformamide (DMF), N, N-dimethylacetamide (DMAC) and N-methylpyrrolidone (NMP); urea, such as 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone (DMI); and others. Optionally, two or more of the solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may be optionally set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually, but not limited to, about 30 ° C to 120 ° C. The reaction may be effected for, usually 1 hour to 48 hours, and preferably 2 to 24 hours. The reaction may advantageously be carried out in the presence of a base including, for example, organic amines, such as pyridine, triethylamine and N, N-diisopropylethylamine, dimethylaniline, diethylaniline, 4-dimethylaminopyridine and the like. Compound (V) is commercially available or can be prepared by the use of known techniques.
[Método D][Method D]
O composto de fórmula (I) (em que X, Z1 e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado através da reacção do composto de fórmula (IV) (em que X é tal como definido acima) com fosgénio, difosgénio, trifosgénio, 1,1-carbonildiimidazole 27 (GDI) ou 1,1'-carbonildi(1,2,4-triazole) (CDT) e, depois, adicionado o composto de fórmula (II) (em que Z1 e Z2 são tal como definido acima) à mistura reaccional. A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, hidrocarbonetos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano; éteres, tais como éter dietílico, éter isopropilico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; nitrilos, tal como acetonitrilo; amidas, tais como N, N-dimetilformamida (DMF), N,N-dimetilacetamida (DMAC) e N-metilpirrolidona (NMP); ureia, tal como 1,3-dimetil-2-imidazolidinona (DMI); sulfóxidos, tal como dimetilsulfóxido (DMSO); e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados dois ou mais dos solventes seleccionados da lista acima. A temperatura reaccional pode ser, opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não está limitada a, cerca de 30 °C a 100 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 30 minutos a 40 horas e, de um modo preferido, 1 a 24 horas. 28 [Método E] NH2 h2nThe compound of formula (I) (wherein X, Z 1 and Z 2 are as defined above) may be prepared by reacting the compound of formula (IV) (wherein X is as defined above) with phosgene, diphosgene, triphosgene , 1,1-carbonyldiimidazole 27 (GDI) or 1,1'-carbonyldi (1,2,4-triazole) (CDT) and then added the compound of formula (II) (wherein Z 1 and Z 2 are as defined above) defined above) to the reaction mixture. The reaction may be carried out in a solvent, including, for example, halogenated hydrocarbons, such as dichloromethane, chloroform and 1,2-dichloroethane; ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; aromatic hydrocarbons, such as benzene, toluene and xylene; nitriles, such as acetonitrile; amides, such as N, N-dimethylformamide (DMF), N, N-dimethylacetamide (DMAC) and N-methylpyrrolidone (NMP); urea, such as 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone (DMI); sulfoxides, such as dimethylsulfoxide (DMSO); and others. Optionally, two or more of the solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may optionally be set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually, but not limited to, about 30 ° C to 100 ° C. The reaction may be effected for usually 30 minutes to 40 hours, and preferably 1 to 24 hours. 28 [Method E] NH 2 h 2n
(V) t (IV) 0) 0 composto de fórmula (I) (em que X, Z1 e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado através da reacção do composto de fórmula (IV) (em que X é tal como definido acima) e o composto de fórmula (V) (em que Lx representa um átomo de halogéneo, tal como átomo de cloro, bromo ou iodo) e, depois, adicionado o composto de fórmula (li) (em que z1 e z2 são tal como definido acima) à mistura reaccional. A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, hidrocarbonetos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano; éteres, tais como éter dietilico, éter isopropilico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; nitrilos, tal como acetonitrilo; amidas, tais como N, N-dimetilformamida (DMF), Ν,Ν-dimetilacetamida (DMAC) e N-metilpirrolidona (NMP); ureia, tal como 1,3-dimetil-2-imidazolidinona (DMI); e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados dois ou mais dos solventes seleccionados da lista acima. 29 A temperatura reaccional pode ser opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não está limitada a, cerca de 30 °C a 120 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 1 hora a 48 horas e, de um modo preferido, 2 a 24 horas. A reacção pode ser efectuada, de um modo vantajoso, na presença de uma base incluindo, por exemplo, aminas orgânicas, tais como piridina, trietilamina e N, N-diisopropiletilamina, dimetilanilina, dietilanilina, 4-dimetilaminopiridina e outras.(Wherein X, Z 1 and Z 2 are as defined above) can be prepared by the reaction of the compound of formula (IV) (wherein X is as defined above) defined above) and the compound of formula (V) (wherein L x represents a halogen atom, such as a chlorine, bromine or iodine atom), and then the compound of formula (II) (wherein z 1 and z 2 are as defined above) to the reaction mixture. The reaction may be carried out in a solvent, including, for example, halogenated hydrocarbons, such as dichloromethane, chloroform and 1,2-dichloroethane; ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; aromatic hydrocarbons, such as benzene, toluene and xylene; nitriles, such as acetonitrile; amides, such as N, N-dimethylformamide (DMF), Ν, Ν-dimethylacetamide (DMAC) and N-methylpyrrolidone (NMP); urea, such as 1,3-dimethyl-2-imidazolidinone (DMI); and others. Optionally, two or more of the solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may optionally be set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually, but not limited to, about 30 ° C to 120 ° C. The reaction may be effected for usually 1 hour to 48 hours, and preferably 2 to 24 hours. The reaction may advantageously be carried out in the presence of a base including, for example, organic amines, such as pyridine, triethylamine and N, N-diisopropylethylamine, dimethylaniline, diethylaniline, 4-dimethylaminopyridine and the like.
[Método F][Method F]
Passo F-l O Processo semelhante ao descrito no Método [λ] [E], utilizando (VI) em vez de (II)Step F-1 The procedure similar to that described in Method [λ] [E], using (VI) instead of (II)
Passo F-2Step F-2
(VIII) (0(VIII) (0
Passo F-4Step F-4
HC ZHC Z
30 0 composto de fórmula (I') (em que X e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado através dos seguintes processos;The compound of formula (I ') (wherein X and Z 2 are as defined above) can be prepared by the following processes;
No Passo F-l, o composto de fórmula (VII) (em que X e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado, de modo semelhante, ao descrito no Método [A], [B], [C], [D] ou [E] para a preparação do composto de fórmula (I), através da utilização de um composto de fórmula (VI) (em que Z2 é tal como definido acima) em vez de um composto de fórmula (II).In Step F, the compound of formula (VII) (wherein X and Z 2 are as defined above) can be prepared, similarly to that described in Method [A], [B], [C], [D] or [E] for the preparation of the compound of formula (I), by use of a compound of formula (VI) (wherein Z 2 is as defined above) instead of a compound of formula (II).
No Passo F-2, o composto de fórmula (vni) (em que X e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado por reacção do composto de fórmula (VII) (em que X e Z2 são tal como definido acima) com um ácido, tal como ácido clorídrico. A reacção pode ser efectuada num solvente incluindo, por exemplo, hidrocarbonetos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio e 1,2-dicloroetano; éteres, tais como éter dietilico, éter isopropilico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; álcoois, tais como metanol, etanol; água e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados dois ou mais solventes seleccionados da lista acima. A temperatura reaccional pode ser, opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmento, mas não limitada a, cerca de 20 °C a 100 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 30 minutos a 10 horas e, de um modo preferido, 1 a 24 horas. 31In Step F-2, the compound of formula (VIII) (wherein X and Z 2 are as defined above) can be prepared by reacting the compound of formula (VII) (wherein X and Z 2 are as defined above) with an acid, such as hydrochloric acid. The reaction may be carried out in a solvent including, for example, halogenated hydrocarbons, such as dichloromethane, chloroform and 1,2-dichloroethane; ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; alcohols, such as methanol, ethanol; water and others. Optionally, two or more solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may optionally be set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is customary, but not limited to, about 20 ° C to 100 ° C. The reaction may be effected for usually 30 minutes to 10 hours, and preferably 1 to 24 hours. 31
No Passo F-3, o composto de fórmula (I') (em que X e Z2 são tal como definido acima) pode ser preparado através da reacção do composto de fórmula (VIII) (em que X e Z2 são tal como definido acima) com agente de redução, tais como boro-hidreto de sódio ou hidreto de alumínio e lítio. A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, éteres, tais como éter dietílico, éter isopropílico, dioxano e tetra-hidrofurano (thf) e 1,2-dimetoxietano; álcoois, tais como metanol, etanol, isopropanol e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados, dois ou mais solventes seleccionados da lista acima. A temperatura reaccional pode ser opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não limitada a, cerca de -20 °C a 50 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 30 minutos a 10 horas e, de um modo preferido, 1 a 24 horas. O composto de fórmula (I'') (em que X e Z2 são tal como definido acima e Z1 é alquiloCi_6) pode ser preparado através dos seguintes processos, em dois passos.In Step F-3, the compound of formula (I ') (wherein X and Z 2 are as defined above) can be prepared by the reaction of the compound of formula (VIII) (wherein X and Z 2 are as defined above ) with reducing agent such as sodium borohydride or lithium aluminum hydride. The reaction may be carried out in a solvent, including, for example, ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (thf) and 1,2-dimethoxyethane; alcohols, such as methanol, ethanol, isopropanol and the like. Optionally, two or more solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may be optionally set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually, but not limited to, about -20 ° C to 50 ° C. The reaction may be effected for usually 30 minutes to 10 hours, and preferably 1 to 24 hours. The compound of formula (I ") (wherein X and Z 2 are as defined above and Z 1 is C 1-6 alkyl) may be prepared by the following processes, in two steps.
No Passo F-4, o composto de fórmula (IX) (em que X e Z2 são tal como definido acima e Z3 é hidrogénio ou alquiloCi_5) pode ser preparado por reacção do composto de fórmula (VIII) (em que X e Z2 são tal como definido acima) com sal de tri (alquilCi_6) oxossulfónio, tal como iodeto de trimetiloxossulfónio. 32 A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, éteres, tais como éter dietílico, éter isopropílico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbonetos alifáticos, tais como n-hexano, ciclo-hexano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados, dois ou mais solventes seleccionados da lista acima. A temperatura reaccional pode ser opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não limitada a, cerca de -20 °C a 50 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 30 minutos a 10 horas e, de um modo preferido, 1 a 24 horas.In Step F-4, the compound of formula (IX) (wherein X and Z 2 are as defined above and Z 3 is hydrogen or C 1-5 alkyl) may be prepared by reaction of the compound of formula (VIII) (wherein X and Z 2 are as defined above) with tri (C1-6 alkyl) oxosulfonium salt, such as trimethyloxosulfonium iodide. The reaction can be carried out in a solvent, including, for example, ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; aliphatic hydrocarbons, such as n-hexane, cyclohexane; aromatic hydrocarbons, such as benzene, toluene and xylene; and others. Optionally, two or more solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may be optionally set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually, but not limited to, about -20 ° C to 50 ° C. The reaction may be effected for usually 30 minutes to 10 hours, and preferably 1 to 24 hours.
No Passo F-5, o composto de fórmula (I'') (em que X e Z2 são tal como definido acima e Z1 é alquiloCi-6) pode ser preparado por reacção do composto de fórmula (IX) (em que X e Z2 são tal como definido acima e Z3 é hidrogénio ou alquiloCi_5) com agente de redução, tal como boro-hidreto de sódio ou hidreto de alumínio e lítio. A reacção pode ser efectuada num solvente, incluindo, por exemplo, éteres, tais como éter dietílico, éter isopropílico, dioxano e tetra-hidrofurano (THF) e 1,2-dimetoxietano; hidrocarbonetos alifáticos, tais como n-hexano, ciclo-hexano; hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; e outros. Opcionalmente, podem ser misturados e utilizados, dois ou mais solventes seleccionados da lista acima. 33 A temperatura reaccional pode ser, opcionalmente estabelecida dependendo dos compostos que se pretende fazer reagir. A temperatura reaccional é, habitualmente, mas não limitada a, cerca de 20 °C a 50 °C. A reacção pode ser efectuada durante, habitualmente, 30 minutos a 10 horas e, de um modo preferido, 1 a 24 horas. O composto (VI) está disponível comercialmente ou pode ser preparado através da utilização de técnicas conhecidas.In Step F-5, the compound of formula (I ") (wherein X and Z 2 are as defined above and Z 1 is C 1-6 alkyl) may be prepared by reacting the compound of formula (IX) (wherein X is Z 2 are as defined above and Z 3 is hydrogen or C 1-5 alkyl) with reducing agent such as sodium borohydride or lithium aluminum hydride. The reaction may be carried out in a solvent, including, for example, ethers, such as diethyl ether, isopropyl ether, dioxane and tetrahydrofuran (THF) and 1,2-dimethoxyethane; aliphatic hydrocarbons, such as n-hexane, cyclohexane; aromatic hydrocarbons, such as benzene, toluene and xylene; and others. Optionally, two or more solvents selected from the above list may be mixed and used. The reaction temperature may optionally be set depending on the compounds to be reacted. The reaction temperature is usually, but not limited to, about 20 ° C to 50 ° C. The reaction may be effected for usually 30 minutes to 10 hours, and preferably 1 to 24 hours. The compound (VI) is commercially available or can be prepared by the use of known techniques.
[Método G][Method G]
Processo semelhante ao descrito no Método [A] - [Ξ], utilizando (II-a') em vez de (II) ->- processo semelhante ao descrito no Método [A] - [Ξ], utilizando (ΙΙ-a) em vez de (II) ->-A procedure similar to that described in Method [A] - [Ξ], using (II-a ') instead of (II) -> ) instead of (II) ->
A forma estereoisomérica do composto (I), forma R (I-a) forma R (I-a) (em que X, Z2e Z2 são tal como definido acima) pode 34 ser preparada, de modo semelhante ao descrito no Método [A] , [B] , [C], [D] ou [E] para a preparação do composto de fórmula (I), utilizando um composto de fórmula (Il-a) (em que Z1 e Z2 são tal como definido acima) em vez do composto de fórmula (II). A forma estereoisomérica do composto (I), forma S (i-a') (em que X, Z1 e Z2 são tal com definido acima) pode ser preparada, de modo semelhante ao descrito no Método [A], [B], [C] , [D] ou [E] para a preparação do composto de fórmula (I), por utilização de um composto de fórmula (ii-a') (em que Z1 e Z2 são tal como definido acima) em vez do composto de fórmula (II). 0 composto (II-a) ou (li-a') pode ser preparado pela utilização de técnicas conhecidas.The stereoisomeric form of the compound (I), form R (Ia) form R (Ia) (wherein X, Z 2 and Z 2 are as defined above) may be prepared, in a manner similar to that described in Method [A], [B ], [C], [D] or [E] for the preparation of the compound of formula (I), using a compound of formula (II-a) (wherein Z 1 and Z 2 are as defined above) of formula (II). The stereoisomeric form of the compound (I), form S (i-a ') (wherein X, Z 1 and Z 2 are as defined above) can be prepared, in a manner similar to that described in Method [A], [B], [C], [D] or [E] for the preparation of the compound of formula (I), by use of a compound of formula (ii-a ') (wherein Z 1 and Z 2 are as defined above) compound of formula (II). The compound (II-a) or (II-a ') may be prepared by the use of known techniques.
Quando o composto representado pela fórmula (I) ou um seu sal apresenta um carbono assimétrico na estrutura, os seus compostos opticamente activos e misturas racémicas estão também incluídas no âmbito da presente invenção.When the compound represented by formula (I) or a salt thereof has an asymmetric carbon in the structure, its optically active compounds and racemic mixtures are also included within the scope of the present invention.
Os sais típicos do composto representado pela fórmula (I) incluem sais preparados pela reacção dos compostos da presente invenção com um ácido orgânico ou mineral, ou uma base orgânica ou inorgânica. Tais sais são conhecidos como sais de adição de ácido e de adição de base, respectivamente.Typical salts of the compound represented by formula (I) include salts prepared by the reaction of the compounds of the present invention with an organic or mineral acid, or an organic or inorganic base. Such salts are known as acid addition and base addition salts, respectively.
Os ácidos para formar sais de adição de ácido incluem ácidos inorgânicos, tais como, sem limitação, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido hidriodíco e semelhantes e ácidos orgânicos, tais como, sem limitação, ácido p-toluenossulfónico, ácido metanossulfónico, ácido oxálico, ácido p-bromofenilsulfónico, ácido carbónico, 35 ácido succínico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido acético e semelhantes.Acids for forming acid addition salts include inorganic acids such as, without limitation, sulfuric acid, phosphoric acid, hydrochloric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid and the like and organic acids, such as, without limitation, p-toluenesulfonic acid, methanesulfonic acid, oxalic acid, p-bromophenylsulfonic acid, carbonic acid, succinic acid, citric acid, benzoic acid, acetic acid and the like.
Os sais de adição de base incluem aqueles derivados de bases inorgânicas, tais como, sem limitação, hidróxido de amónio, hidróxido de metal alcalino, hidróxidos de metal alcalino terroso, carbonatos, bicarbonatos e semelhantes, e bases orgânicas, tais como, sem limitação, etanolamina, trietilamina, tris(hidroximetil)aminometano e semelhantes. Exemplos de bases inorgânicas incluem hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de potássio, carbonato de sódio, bicarbonato de sódio, bicarbonato de potássio, hidróxido de cálcio, carbonato de cálcio e semelhantes. 0 composto da presente invenção ou um seu sal, dependendo dos seus substituintes, pode ser modificado para formar ésteres de alquilo inferior ou outros ésteres conhecidos; e/ou hidratos ou outros solvatos. Esses ésteres, hidratos e solvatos estão incluídos no âmbito da presente invenção. 0 composto da presente invenção pode ser administrado em formas orais, tais como, sem limitação, comprimidos normais ou revestidos entericamente, cápsulas, pílulas, pós, grânulos, elixires, tinturas, solução, suspensões, xaropes, aerossóis sólidos e líquidos e emulsões. Este pode, também, ser administrado em formas parentéricas, tais como, sem limitação, intravenosa, intraperitoneal, subcutânea, intramuscular e formas semelhantes, bem conhecidas para os especialistas na técnica farmacêutica. Os compostos da presente invenção podem ser administrados na forma intranasal via utilização tópica de veículos intranasais adequados ou através de vias transdérmicas, 36 utilizando sistemas de distribuição transdérmica, bem conhecidos para os especialistas na técnica. 0 regime de dosagem com a utilização dos compostos da presente invenção é seleccionado por um especialista na técnica, tendo em conta vários factores, incluindo, sem limitação, idade, peso, sexo e condição médica do receptor, a gravidade da patologia a ser tratada, a via de administração, o nivel da função metabólica e de excreção do receptor, a forma de dosagem empregue, o composto em particular e o seu sal empregues.The base addition salts include those derived from inorganic bases, such as, without limitation, ammonium hydroxide, alkali metal hydroxide, alkaline earth metal hydroxides, carbonates, bicarbonates and the like, and organic bases, such as, without limitation, ethanolamine, triethylamine, tris (hydroxymethyl) aminomethane and the like. Examples of inorganic bases include sodium hydroxide, potassium hydroxide, potassium carbonate, sodium carbonate, sodium bicarbonate, potassium bicarbonate, calcium hydroxide, calcium carbonate and the like. The compound of the present invention or a salt thereof, depending on the substituents thereof, may be modified to form lower alkyl esters or other known esters; and / or hydrates or other solvates. Such esters, hydrates and solvates are included within the scope of the present invention. The compound of the present invention may be administered in oral forms, such as, without limitation, normal or enteric coated tablets, capsules, pills, powders, granules, elixirs, tinctures, solution, suspensions, syrups, solid and liquid aerosols and emulsions. It may also be administered in parenteral forms, such as, without limitation, intravenously, intraperitoneally, subcutaneously, intramuscularly and the like, well known to those skilled in the pharmaceutical art. The compounds of the present invention may be administered in intranasal form via topical use of suitable intranasal vehicles or through transdermal routes using transdermal delivery systems well known to those skilled in the art. The dosage regimen with the use of the compounds of the present invention is selected by a person skilled in the art, taking into account various factors including, without limitation, age, weight, sex and medical condition of the recipient, severity of the condition being treated, the route of administration, the level of metabolic function and excretion of the receptor, the dosage form employed, the particular compound and its salt employed.
Os compostos da presente invenção são, de um modo preferido, formulados antes da administração em associação com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Os excipientes são substâncias inertes tais como, sem limitação, veiculos, diluentes, agentes aromatizantes, adoçantes, lubrificantes, solubilizantes, agentes de suspensão, ligantes, agentes de desintegração de comprimido e material encapsulante.The compounds of the present invention are preferably formulated prior to administration in combination with one or more pharmaceutically acceptable excipients. Excipients are inert substances such as, but not limited to, vehicles, diluents, flavoring agents, sweeteners, lubricants, solubilizers, suspending agents, binders, tablet disintegrating agents and encapsulating material.
Ainda outra forma de realização da presente invenção é a formulação farmacêutica compreendendo um composto da invenção e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis, que são compatíveis com os outros ingredientes da formulação e não são prejudiciais para o seu recipiente. As formulações farmacêuticas da invenção são preparadas por combinação de uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos da invenção em conjunto com um ou mais destes excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Na preparação das composições da presente invenção, o ingrediente activo pode ser misturado com um diluente ou encapsulado no interior de um veículo que pode estar na forma de uma cápsula, saqueta, papel ou outro receptor. 0 veículo pode funcionar como um diluente, que pode ser um material sólido, semi-sólido ou líquido que actua como um veículo ou pode estar 37 na forma de comprimidos, pílulas, pós, pastilhas, elixires, suspensões, emulsões, soluções, xaropes, aerossóis, unguentos, contendo, por exemplo, até 10% em peso do composto activo, cápsulas de gelatina dura e mole, supositórios, soluções injectáveis estéreis e pós embalados estéreis.Yet another embodiment of the present invention is the pharmaceutical formulation comprising a compound of the invention and one or more pharmaceutically acceptable excipients which are compatible with the other ingredients of the formulation and are not detrimental to its recipient. The pharmaceutical formulations of the invention are prepared by combining a therapeutically effective amount of the compounds of the invention together with one or more of these pharmaceutically acceptable excipients. In preparing the compositions of the present invention, the active ingredient may be mixed with a diluent or encapsulated within a carrier which may be in the form of a capsule, sachet, paper or other receptor. The carrier may function as a diluent, which may be a solid, semi-solid or liquid material which acts as a carrier or may be in the form of tablets, pills, powders, lozenges, elixirs, suspensions, emulsions, solutions, syrups, aerosols, ointments, containing, for example, up to 10% by weight of the active compound, hard and soft gelatin capsules, suppositories, sterile injectable solutions and sterile packaged powders.
Para administração oral, o ingrediente activo pode ser combinado com um veículo farmaceuticamente aceitável oral e não tóxico, tais como, sem limitação, lactose, amido, sacarose, glucose, carbonato de sódio, manitol, sorbitol, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, sulfato de cálcio, metilcelulose e semelhantes; em conjunto com, opcionalmente, agentes desintegrantes, tais como, sem limitação, milho, amido, metilcelulose, agar, bentonite, goma de xantano, ácido algínico e semelhantes; e, opcionalmente, agentes de ligação, por exemplo, sem limitação, gelatina, açúcares naturais, beta-lactose, adoçantes de milho, gomas naturais e sintéticas, acácia, tragacanto, alginato de sódio, carboximetilcelulose, polietilenoglicol, ceras e semelhantes; e, opcionalmente, agentes de lubrificação, por exemplo, sem limitação, estearato de magnésio, estearato de sódio, ácido esteárico, oleato de sódio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio, talco e semelhantes.For oral administration, the active ingredient may be combined with an oral and non-toxic pharmaceutically acceptable carrier, such as, without limitation, lactose, starch, sucrose, glucose, sodium carbonate, mannitol, sorbitol, calcium carbonate, calcium phosphate, calcium sulfate, methylcellulose and the like; together with, optionally, disintegrating agents, such as, without limitation, corn, starch, methylcellulose, agar, bentonite, xanthan gum, alginic acid and the like; and optionally binding agents, for example, without limitation, gelatin, natural sugars, beta-lactose, corn sweeteners, natural and synthetic gums, acacia, tragacanth, sodium alginate, carboxymethylcellulose, polyethylene glycol, waxes and the like; and optionally lubricating agents, for example, without limitation, magnesium stearate, sodium stearate, stearic acid, sodium oleate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride, talc and the like.
Nas formas de pó, o veículo pode ser um sólido finamente dividido que está misturado com o ingrediente activo finamente dividido. O ingrediente activo pode ser misturado com um veículo com propriedades de ligação, em proporções adequadas, e compactado na forma e tamanho desejado, para produzir comprimidos. Os pós e comprimidos contêm, de um modo preferido, desde cerca de 1 a cerca de 99 porcento em peso do ingrediente activo que é a nova composição da presente invenção. Os veículos 38 sólidos adequados são carboximetilcelulose de magnésio, ceras de baixa fusão e manteiga de cacau.In the powder forms, the carrier may be a finely divided solid which is mixed with the finely divided active ingredient. The active ingredient may be mixed with a carrier having binding properties, in suitable proportions, and compacted in the desired shape and size, to produce tablets. The powders and tablets preferably contain from about 1 to about 99 percent by weight of the active ingredient which is the novel composition of the present invention. Suitable solid carriers are magnesium carboxymethylcellulose, low melting waxes and cocoa butter.
As formulações líquidas estéreis incluem suspensões, emulsões, xaropes e elixires. 0 ingrediente activo pode ser dissolvido ou suspenso em veículos farmaceuticamente activos, tais como água estéril, solvente orgânico estéril ou uma mistura de ambos, água estéril e solvente orgânico estéril. 0 ingrediente activo pode também ser dissolvido num solvente orgânico adequado, por exemplo, propilenoglicol aquoso. Podem ser preparadas outras composições por dispersão do ingrediente activo finamente dividido em amido aquoso ou solução de carboximetilcelulose de sódio ou num óleo adequado. A formulação pode estar na forma de dosagem unitária, que é uma unidade fisicamente discreta contendo uma dose única, adequada para administração em humanos ou outros mamíferos. Uma forma de dosagem unitária pode ser uma cápsula ou comprimidos ou várias cápsulas ou comprimidos. Uma "dose unitária" é uma quantidade pré-determinada do composto activo da presente invenção, calculada para produzir o efeito terapêutico desejado, em associação com um ou mais excipientes. A quantidade do ingrediente activo numa dose unitária pode ser variada ou ajustada desde cerca de 0,1 a cerca de 1000 miligramas ou mais, de acordo com o tratamento particular envolvido.Sterile liquid formulations include suspensions, emulsions, syrups and elixirs. The active ingredient may be dissolved or suspended in pharmaceutically active carriers, such as sterile water, sterile organic solvent or a mixture of both, sterile water and sterile organic solvent. The active ingredient may also be dissolved in a suitable organic solvent, for example, aqueous propylene glycol. Other compositions may be prepared by dispersing the finely divided active ingredient in aqueous starch or sodium carboxymethylcellulose solution or in a suitable oil. The formulation may be in unit dosage form, which is a physically discrete unit containing a single dose, suitable for administration to humans or other mammals. A unit dosage form may be a capsule or tablets or several capsules or tablets. A " unit dose " is a predetermined amount of the active compound of the present invention, calculated to produce the desired therapeutic effect, in association with one or more excipients. The amount of the active ingredient in a unit dose can be varied or adjusted from about 0.1 to about 1000 milligrams or more, according to the particular treatment involved.
As dosagens orais típicas da presente invenção, quando utilizadas para os efeitos indicados, irão variar desde cerca de 0,01 mg/kg/dia a cerca de 100 mg/kg/dia, de um modo preferido, desde 0,1 mg/kg/dia a 30 mg/kg/dias e, de um modo muito preferido, desde cerca de 0,5 mg/kg/dia a cerca desde 10 39 tem sido mg/kg/dia. No caso da administração parentérica, provado que, geralmente, é vantajoso administrar quantidade de cerca de 0,001 a 100 mg/kg/dia, de um modo preferido, de 0,01 mg/kg/dia a 1 mg/kg/dia. Os compostos da presente invenção podem ser administrados numa dose diária individual ou a dose diária total pode ser administrada em doses divididas, duas, três ou mais vezes por dia. Quando a distribuição é via formas transdérmicas, com certeza, a administração é continua.Typical oral dosages of the present invention, when used for the indicated effects, will range from about 0.01 mg / kg / day to about 100 mg / kg / day, preferably from 0.1 mg / kg / day to 30 mg / kg / day, and most preferably from about 0.5 mg / kg / day to about 10 mg / kg / day. In the case of parenteral administration, it has generally been found to be advantageous to administer an amount of about 0.001 to 100 mg / kg / day, preferably from 0.01 mg / kg / day to 1 mg / kg / day. The compounds of the present invention may be administered in a single daily dose or the total daily dose may be administered in divided doses two, three or more times per day. When the delivery is via transdermal forms, of course, administration is continuous.
EXEMPLOS A presente invenção irá ser descrita na forma de exemplos, mas não deverão ser entendidos, de modo algum, como definindo objectivos e limites da presente invenção.EXAMPLES The present invention will be described in the form of examples, but should not be understood in any way as defining objectives and limits of the present invention.
Nos exemplos abaixo, todos os dados quantitativos, se não for afirmado de outro modo, referem-se a percentagens em peso.In the examples below, all quantitative data, if not stated otherwise, refer to percentages by weight.
Os espectros de massa foram obtidos utilizando técnicas de ionização por electrovaporização (ES) (micromass Platform LC) . Os pontos de fusão não estão corrigidos. Os dados de Cromatografia Liquida - Espectroscopia de massa (LC-MS) foram registados num Micromass Platform LC com coluna Shimadzu Phenomenex ODS (4,6 ιηιηφ X 30 mm) com eluição com uma mistura de acetonitrilo-água (9:1 a 1:9) a 1 mL/min de caudal. A TLC foi efectuada numa placa de silica pré-revestida (silica gel Merck 60 F-254). A silica gel (WAKO-gel C-200 (75-150 pm) ) foi utilizada para todas as separações por cromatografia em coluna. Todos os produtos quimicos foram de grau reagente e foram adquiridos da Sigma-Aldrich, Wako pure Chemical industries, Ltd., Tokyo-kasei kogyo Co., Ltd., Arch Corporation. 40Mass spectra were obtained using electrospray ionization (ES) techniques (micromass Platform LC). The melting points are not corrected. Liquid Chromatography Mass Spectroscopy (LC-MS) data were recorded on a Micromass Platform LC with Shimadzu Phenomenex ODS column (4.6 ιηιηφ X 30 mm) eluting with a mixture of acetonitrile-water (9: 1 to 1: 9) at 1 mL / min of flow rate. TLC was performed on a precoated silica plate (Merck silica gel 60 F-254). Silica gel (WAKO-gel C-200 (75-150 Âμm)) was used for all separations by column chromatography. All chemicals were reagent grade and were purchased from Sigma-Aldrich, Wako pure Chemical Industries, Ltd., Tokyo-kasei kogyo Co., Ltd., Arch Corporation. 40
Todos os materiais de partida estão disponíveis comercialmente ou podem ser preparados utilizando métodos citados na literatura. 0 efeito dos presentes compostos foi avaliado através dos seguintes ensaios e testes farmacológicos.All starting materials are commercially available or can be prepared using methods cited in the literature. The effect of the present compounds was evaluated by the following pharmacological tests and tests.
[Determinação do influxo de Ca2+ induzido pela capsaícina na linha celular CHO transfectada com VRl humano] (Ensaio 1) (1) Estabelecimento da linha celular VRl-CH01uc9aeq humana[Determination of capsaicin-induced Ca2 + influx in the human VR1 transfected CHO cell line] (Assay 1) (1) Establishment of the human VR1-CH01uc9aeq cell line
Foi clonado ADNc de receptor vanilóide humano (hVRl) de bibliotecas de gânglios da raiz dorsal axotomizados (documento WO 00/29577). O ADNc de hVRl clonado foi construído com vector pcDNA3 e transfectado para uma linha celular CH01uc9aeq. A linha celular contém genes repórter de aequorin e CRE-luciferase como sinais de leitura. Os transfectados foram clonados por diluição limite em meio de selecção (meio DMEM/F12 (Gibco BRL) suplementado com FCS a 10%, Piruvato de sódio 1,4 mM, HEPES 20 mM, Bicarbonato de sódio a 0,15%, 100 U/mL de penicilina, 100 pg/mL de estreptomicina, glutamina 2 mM, aminoácidos não essenciais e 2 mg/mL de G418). O influxo de Ca2+ foi avaliado nos clones estimulados com capsaícina. Foi seleccionado um clone de resposta elevada e utilizado para outras experiências no projecto. As células VRl-CH01uc9aeq humanas foram mantidas no meio de selecção e passadas a cada 3-4 dias a l-2,5xl05 células/frasco (75 mm2). 41 (2) Determinação do influxo de Ca2+ utilizando FDSS-3000Human vanilloid receptor cDNA (hVR1) was cloned from axotomized dorsal root ganglion libraries (WO 00/29577). The cloned hVR1 cDNA was constructed with pcDNA3 vector and transfected into a CH01uc9aq cell line. The cell line contains reporter genes from aequorin and CRE-luciferase as read signals. Transfected were cloned by limiting dilution in selection medium (DMEM / F12 medium (Gibco BRL) supplemented with 10% FCS, 1.4 mM Sodium Pyruvate, 20 mM HEPES, 0.15% Sodium Bicarbonate, 100 U / ml penicillin, 100 pg / ml streptomycin, 2 mM glutamine, non-essential amino acids and 2 mg / ml G418). The Ca2 + influx was evaluated in the capsaicin-stimulated clones. A high response clone was selected and used for other experiments in the project. Human VR1-CH01uc9aq cells were maintained in the selection medium and passed every 3-4 days at 1 - 2.5 x 10 5 cells / vial (75 mm 2). 41 (2) Determination of the Ca 2+ influx using FDSS-3000
As células VRl-CH01uc9aeq humanas foram suspensas num meio de cultura que é igual ao meio de selecção, excepto para o G418, e semeadas a uma densidade de 1000 células por poço em placas de 384 poços (black walled clear-base/Nalge Nunc International). Após cultura durante 48 horas, o meio foi alterado para Fluo-3 AM 2 μΜ (Molecular Probes) e Puronic F-127 a 0,02% em tampão de ensaio (solução salina equilibrada de Hank (HESS), HEPES 17 mM (pH 7,4), Probenecid 1 mM, BSA a 0,1%) e as células foram incubadas durante 60 min a 25 °C. Após lavagem duas vezes com o tampão do ensaio, as células foram incubadas com um composto de teste ou veiculo durante 20 min a 25 °C. A mobilização do Ca2+ citoplasmático foi determinada por FDSS-3000 (λΘΧ=488 nm, Àem=540 nm/Hamamatsu Photonics) durante 60 seg após o estimulo com capsaicina 10 nM. Foi calculado o R Integral e comparado com os controlos.Human VR1-CH01uc9aq cells were suspended in a culture medium which is the same as the selection medium except for G418 and seeded at a density of 1000 cells per well in 384-well black walled clear-base / Nalge Nunc International ). After culture for 48 hours, the medium was changed to 2 μM Fluo-3 AM (Molecular Probes) and 0.02% Puronic F-127 in assay buffer (Hank Balanced Salt Solution (HESS), 17 mM HEPES (pH 7.4), 1 mM Probenecid, 0.1% BSA) and the cells were incubated for 60 min at 25 ° C. After washing twice with the assay buffer, the cells were incubated with a test compound or vehicle for 20 min at 25 ° C. Mobilization of cytoplasmic Ca2 + was determined by FDSS-3000 (λΘΧ = 488 nm, νma = 540 nm / Hamamatsu Photonics) for 60 sec after the stimulation with 10 nM capsaicin. The Integral R was calculated and compared to the controls.
[Determinação do influxo de Ca2+ induzido pela capsaicina em neurónios do gânglio da raiz dorsal de ratos, de cultura primária] (Ensaio 2) (1) Preparação dos neurónios do gânglio da raiz dorsal de ratos[Determination of capsaicin-induced Ca2 + influx in rat primary dorsal root ganglion neurons] (Assay 2) (1) Preparation of rat dorsal root ganglion neurons
Os ratos Wister recém-nascidos (5-11 dias) foram sacrificados e foi removido o gânglio da raiz dorsal (DRG). O DRG foi incubado com tripsina a 0,1% (Gibco BRL) em PBS(-) (Gibco BRL) durante 30 min a 37 °C, depois foi adicionado metade do volume de soro bovino fetálico (FCS) e as células foram centrifugadas. As células neuronais do DRG foram ressuspensas em 42Newborn Wister rats (5-11 days) were sacrificed and the dorsal root ganglion (DRG) was removed. The DRG was incubated with 0.1% trypsin (Gibco BRL) in PBS (-) (Gibco BRL) for 30 min at 37 ° C, then half the volume of fetal bovine serum (FCS) was added and the cells were centrifuged . DRG neuronal cells were resuspended in 42
Ham F12/FCS a 5%/soro de cavalo a 5% (Gibco BRL) e dispersas por pipetagem repetitiva e passagem através de uma rede de malha de 70 pm (Falcon). A placa de cultura foi incubada durante 3 horas a 37 °C para remover as células Schwann de contaminação. As células não aderentes foram recuperadas e, depois, cultivadas em placas de 384 poços revestidas com laminina (Nunc) a lxlO4 células/50 pL/poço, durante 2 dias, na presença de 50 ng/mL de NGF de rato recombinante (Sigma) e 5-fluorodesoxiuridina 50 pM (Sigma). (2) Ensaio de mobilização de Ca2+Ham F12 / 5% FCS / 5% horse serum (Gibco BRL) and dispersed by repetitive pipetting and passing through a 70 pm mesh network (Falcon). The culture dish was incubated for 3 hours at 37 ° C to remove Schwann cells from contamination. Non-adherent cells were recovered and then cultured in laminin-coated 384 wells (Nunc) at 1 x 104 cells / 50 μl / well for 2 days in the presence of 50 ng / ml recombinant mouse NGF (Sigma) and 50 pM 5-fluorodeoxyuridine (Sigma). (2) Ca2 + mobilization assay
As células neuronais de drg foram lavadas duas vezes com HBSS suplementado com HEPES 17 mM (pH 7,4) e BSA 0,1%. Após incubação com fluo-3AM 2 pM (Molecular Probe), PF127 a 0,02% (Gibco BRL) e probenecid 1 mM (Sigma) durante 40 min a 37 °C, as células foram lavadas 3 vezes. As células foram incubadas com antagonistas de VRl ou veiculo (dimetilsulfóxido) e, depois, com capsaicina 1 pM em FDSS-6000 (Aex=480 nm, Àem=520 nm/HamamatsuThe drg neuronal cells were washed twice with HBSS supplemented with 17 mM HEPES (pH 7.4) and 0.1% BSA. After incubation with 2 ÂμM fluo-3AM (Molecular Probe), 0.02% PF127 (Gibco BRL) and 1 mM probenecid (Sigma) for 40 min at 37Â ° C, the cells were washed 3 times. Cells were incubated with RVR or vehicle (dimethylsulfoxide) antagonists and then with 1 pM capsaicin on FDSS-6000 (Aex = 480 nm, λmax = 520 nm / Hamamatsu
Photonics). As alterações na fluorescência a 480 nm foram monitorizadas durante 2,5 min. Foi calculado o R integral e comparado com os controlos.Photonics). Changes in fluorescence at 480 nm were monitored for 2.5 min. The integral R was calculated and compared to the controls.
[Ensaio de banho de órgão para determinar a contracçao da bexiga induzida por capsaicina] (Ensaio 3)[Organ bath assay to determine capsaicin-induced bladder contraction] (Assay 3)
Os ratos Wistar machos (10 semanas de idade) foram anestesiados com éter e sacrificados por deslocação dos pescoços. Foi extraída a bexiga na totalidade e colocada em solução de Krebs-Henseleit Modificada oxigenada (pH 7,4) com a 43 seguinte composição (NaCl 112 mM, KC1 5,9 mM, MgCl2 1,2 mM, NaH2P04 1,2 mM, CaCl2 2 mM, NaHC03 2,5 mM, glucose 12 mM) . As respostas de contracção da bexiga urinária foram estudadas como descrito previamente [Maggi CA et al.: Br.J.Pharmacol. 108: 801-805, 1993]. A tensão isométrica foi registada sob uma carga de 1 g, utilizando tiras longitudinais de músculo detrusor de rato. As tiras de bexiga foram equilibradas durante 60 min antes de cada estimulo. A resposta de contracção a KC1 80 mM foi determinada em intervalos de 15 min até serem obtidas respostas reprodutíveis. A resposta ao KC1 foi utilizada como um padrão interno para avaliar a resposta máxima à capsaicina. Os efeitos dos compostos foram investigados por incubação das tiras com os compostos durante 30 min antes do estimulo com capsaicina 1 μΜ (veículo: solução salina a 80%, EtOH a 10% e Tween 80 a 10%). Uma das preparações obtidas do mesmo animal serviu como um controlo, enquanto as outras foram utilizadas para avaliar os compostos. Foi calculada a proporção de cada contracção induzida por capsaicina em relação ao padrão interno (i. e., contracção induzida por KC1) e foram avaliados os efeitos dos compostos de teste na contracção induzida por capsaicina.Male Wistar rats (10 weeks old) were anesthetized with ether and sacrificed by displacement of the necks. The whole bladder was removed and placed in oxygenated Modified Krebs-Henseleit solution (pH 7.4) with the following composition (112 mM NaCl, 5.9 mM KCl, 1.2 mM MgCl2, 1.2 mM NaH2 PO4, 2 mM CaCl2, 2.5 mM NaHC03, 12 mM glucose). Urinary bladder contraction responses were studied as previously described [Maggi CA et al .: Br.J.Pharmacol. 108: 801-805, 1993]. The isometric tension was recorded under a load of 1 g using longitudinal strips of rat detrusor muscle. The bladder strips were equilibrated for 60 min before each stimulation. The contraction response at 80 mM KCl was determined at 15 min intervals until reproducible responses were obtained. The response to KCl was used as an internal standard to assess maximal response to capsaicin. The effects of the compounds were investigated by incubating the strips with the compounds for 30 min prior to stimulation with 1 μ capsaicin (vehicle: 80% saline, 10% EtOH and 10% Tween 80). One of the preparations obtained from the same animal served as a control, while the others were used to evaluate the compounds. The ratio of each capsaicin-induced contraction to the internal standard (i.e., KC1 induced contraction) was calculated and the effects of the test compounds on capsaicin-induced contraction were evaluated.
[Determinação de influxo de Ca2+ na linha celular CHO transfectada com P2X1 humano] (1) Preparação da linha celular CH01uc9aeq transfectada com P2X1 humano A linha celular CH01uc9aeq transfectada com P2xl humano foi estabelecida e mantida em meio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM/F12), suplementado com FCS a 7,5%, HEPES-KOH 20 mM (pH 7,4), piruvato de sódio 1,4 mM, 100 U/mL de penicilina, 44 100 pg/mL de estreptomicina, glutamina 2 mM (Gibco BRL) e 0,5 Unidades/mL de apirase (grau I, Sigma). As células em suspensão foram semeadas em cada poço das placas pretas de fundo óptico de 384 poços (Nalge Nunc International) a 3 x 103/50 pL/poço. As células foram cultivadas durante as seguintes 48 horas para aderirem às placas. (2) Determinação dos níveis intracelulares de Ca2+[Determination of Ca2 + influx in human P2X1 transfected CHO cell line] (1) Preparation of human P2X1 transfected CH01uc9aeq cell line The human P2x1 transfected CH01uc9aeq cell line was established and maintained in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM / F12) , supplemented with 7.5% FCS, 20 mM HEPES-KOH (pH 7.4), 1.4 mM sodium pyruvate, 100 U / ml penicillin, 44 100 pg / ml streptomycin, 2 mM glutamine (Gibco BRL) and 0.5 Units / mL of apyrase (grade I, Sigma). Suspension cells were seeded into each well of the 384-well black bottom plates (Nalge Nunc International) at 3 x 103/50 μl / well. Cells were cultured for 48 hours to adhere to the plates. (2) Determination of intracellular levels of Ca2 +
Os aumentos mediados por agonista do receptor P2X1 nos níveis citosólicos de Ca2+ foram determinados utilizando um corante quelante de Ca2+ fluorescente, Fluo-3 AM (Molecular Probes). As células ligadas às placas foram lavadas duas vezes com tampão de lavagem (HBSS, HEPES-KOH 17 mM (pH 7,4), BSA a 0,1% e 0,5 unidades/mL de apirase) e incubadas em 40 pL do tampão de carga (Fluo-3 AM 1 pM, probenecid 1 mM, ciclosporina A a 1 pM, pluronic a 0,01% (Molecular Probes) em tampão de lavagem) durante 1 hora num local escuro. As placas foram lavadas duas vezes com 40 pL de tampão de lavagem e foram adicionados 35 pL de tampão de lavagem a cada poço com 5 pL dos compostos de teste ou 5'-trifosfato de 2', 3'-o-(2,4,6-trinitrofenil)adenosina (Molecular Probes) como uma referência. Após outra incubação durante 10 minutos no escuro, foi adicionado agonista a, β-metileno ATP 200 nM para iniciar a mobilização do Ca2+. A intensidade da fluorescência foi determinada por FDSS-6000 (Àex=-410 mn, Aem=510 nm/Hamamatsu Photonics) a intervalos de 250 mseg. As proporções integrais foram calculadas a partir dos dados e comparadas com as obtidas de um controlo. 45 [Determinação da contracção da bexiga induzida por capsaicina em ratos anestesiados] (Ensaio 4) (1) AnimaisP2X1 receptor agonist-mediated increases in cytosolic Ca2 + levels were determined using a Fluo-3 AM fluorescent Ca 2+ chelating dye (Molecular Probes). The cells attached to the plates were washed twice with wash buffer (HBSS, 17 mM HEPES-KOH (pH 7.4), 0.1% BSA and 0.5 units / ml of apyrase) and incubated in 40 æl of the loading buffer (1 μM Fluo-3 AM, 1 mM probenecid, 1 μM cyclosporin A, 0.01% pluronic (Molecular Probes) in wash buffer) for 1 hour in a dark place. The plates were washed twice with 40 μl of wash buffer and 35 μl of wash buffer were added to each well with 5 μl of the test compounds or 2 ', 3'-o- (2,4- , 6-trinitrophenyl) adenosine (Molecular Probes) as a reference. After another incubation for 10 minutes in the dark, 200 nM β-methylene ATP agonist was added to initiate Ca2 + mobilization. The fluorescence intensity was determined by FDSS-6000 (Àex = -410 nm, Aem = 510 nm / Hamamatsu Photonics) at 250 msec intervals. The integral proportions were calculated from the data and compared with those obtained from a control. 45 [Determination of capsaicin-induced bladder contraction in anesthetized rats] (Assay 4) (1) Animals
Foram utilizados ratos Sprague-Dawley fêmeas (200-250 g/Charles River Japan). (2) Implantação do cateterFemale Sprague-Dawley rats (200-250 g / Charles River Japan) were used. (2) Implantation of the catheter
Os ratos foram anestesiados por administração intraperitoneal de uretano (Sigma) a 1,2 g/kg. O abdómen foi aberto através de uma incisão na linha média e foi implantado um cateter de polietileno (BECTON DICKINSON, PE50) na bexiga, através da cúpula. Em paralelo, foi efectuada uma incisão na região inguinal e foi inserido um catéter de polietileno (Hibiki, tamanho 5) cheio com 2 iu/mL de heparina (Novo Heparin, Aventis Pharma) em solução salina (Otsuka) numa artéria iliaca comum. (3) Investigação Cistométrica O catéter da bexiga foi conectado via um tubo em T a um tradutor de pressão (Viggo-Spectramed Pte Ltd, DT-XXAD) e uma bomba de microinjecção (TERUMO). A solução salina foi administrada por infusão à temperatura ambiente na bexiga, a uma taxa de 2,4 mL/h. A pressão intravesical foi registada continuamente num gravador de caneta gráfica (Yokogawa). Foram registados, pelo menos, três ciclos de micção reprodutíveis, correspondendo a um período de 20 minutos, antes da 46 administração do composto de teste e utilizados como valores de linha de base. (4) Administração dos compostos de teste e estimulo da bexiga com capsaícina A infusão salina foi interrompida antes da administração dos compostos. Foi administrado intra-arterialmente um composto de teste dissolvido na mistura de etanol, Tween 80 (ICN Biomedicals Inc.) e solução salina (1:1:8, v/v/v) a 10 mg/kg. Foram administradas intra-arterialmente 10 pg de capsaícina (Nacalai Tesque) dissolvidas em etanol 2 min após a administração do composto. (5) Análise dos parâmetros cistométricosRats were anesthetized by intraperitoneal administration of urethane (Sigma) at 1.2 g / kg. The abdomen was opened through a midline incision and a polyethylene catheter (BECTON DICKINSON, PE50) was implanted into the bladder through the dome. In parallel, an incision was made in the inguinal region and a polyethylene catheter (Hibiki, size 5) filled with 2u / ml heparin (Novo Heparin, Aventis Pharma) in saline solution (Otsuka) was inserted into a common iliac artery. (3) Cystometric Investigation The bladder catheter was connected via a T-tube to a pressure translator (Viggo-Spectramed Pte Ltd, DT-XXAD) and a micro-injection pump (TERUMO). The saline solution was infused at room temperature into the bladder at a rate of 2.4 mL / hr. The intravesical pressure was continuously recorded on a graphic pen recorder (Yokogawa). At least three reproducible micturition cycles, corresponding to a period of 20 minutes, were recorded prior to administration of the test compound and used as baseline values. (4) Administration of test compounds and bladder stimulation with capsaicin Saline infusion was discontinued prior to administration of the compounds. A test compound dissolved in the ethanol mixture, Tween 80 (ICN Biomedicals Inc.) and saline (1: 1: 8, v / v / v) at 10 mg / kg was administered intraarterially. 10æg of capsaicin (Nacalai Tesque) dissolved in ethanol was administered intra-arterially 2 min after administration of the compound. (5) Analysis of cystometric parameters
Foram analisados aumentos relativos na pressão intravesical induzidos por capsaícina a partir dos dados de cistometria. As pressões na bexiga induzidas por capsaícina foram comparadas com a pressão máxima na bexiga durante a micção sem o estímulo com capsaícina. A inibição mediada pelos compostos de teste nas pressões aumentadas na bexiga foram avaliadas utilizando o teste t de Student. Foi aceite como diferença significativa um nível de probabilidade inferior a 5%. 47 [Determinação da bexiga hiperactiva em ratos císticos anestesiados] (Ensaio 5) (1) AnimaisRelative increases in intravesical pressure induced by capsaicin from cystometry data were analyzed. Capsaicin-induced pressures in the bladder were compared to maximal bladder pressure during urination without capsaicin stimulation. Inhibition mediated by test compounds at increased pressures in the bladder were evaluated using Student's t-test. A level of probability of less than 5% was accepted as significant difference. 47 [Determination of overactive bladder in anesthetized cystic rats] (Assay 5) (1) Animals
Foram utilizados ratos Sprague-Dawley fêmeas (180~250 g/Charles River Japan). Foi administrada intraperitonealmente ciclofosfamida (CYP) dissolvida em solução salina a 150 mg/kg, 48 horas antes da experiência. (2) Implantação do cateterFemale Sprague-Dawley rats (180 ~ 250 g / Charles River Japan) were used. Cyclophosphamide (CYP) dissolved in saline at 150 mg / kg was administered intraperitoneally 48 hours prior to the experiment. (2) Implantation of the catheter
Os ratos foram anestesiados por administração intraperitoneal de uretano (Sigma) a 1,25 g/kg. O abdómen foi aberto através de uma incisão na linha média e, foi implantado um cateter de polietileno (BECTON DICKINSON, PE50) na bexiga através da cúpula. Em paralelo, foi feita uma incisão na região inguinal e foi inserido um cateter de polietileno (BECTON DICKINSON, PE50) cheio com solução salina (Otsuka) na veia femoral. Após a bexiga estar vazia, os ratos foram deixados 1 hora, para recuperarem da operação. (3) Investigação Cistométrica O cateter da bexiga foi ligado via um tubo em T a um tradutor de pressão (Viggo-Spectramed Pte Ltd, DT-XXAD) e uma bomba de microinjecção (TERUMO). Foi administrada, por infusão, uma solução salina à temperatura ambiente na bexiga a uma taxa de 3,6 mL/h durante 20 min. A pressão intravesicular foi registada continuamente num aparelho de registo de caneta 48 gráfica (Yokogawa). Foram registados, pelo menos, três ciclos de micção reprodutíveis, correspondendo a um período de 20 minutos, antes da administração de um composto de teste. (4) Administração dos compostos de testeRats were anesthetized by intraperitoneal administration of urethane (Sigma) at 1.25 g / kg. The abdomen was opened through a midline incision and a polyethylene catheter (BECTON DICKINSON, PE50) was implanted into the bladder through the dome. In parallel, an incision was made in the inguinal region and a polyethylene catheter (BECTON DICKINSON, PE50) filled with saline solution (Otsuka) was inserted into the femoral vein. After the bladder was empty, the mice were allowed 1 hour to recover from the operation. (3) Cystometric Investigation The bladder catheter was connected via a T-tube to a pressure translator (Viggo-Spectramed Pte Ltd, DT-XXAD) and a micro-injection pump (TERUMO). Infusion was administered saline at room temperature in the bladder at a rate of 3.6 mL / hr for 20 min. The intravesicular pressure was continuously recorded on a graphical pen recording apparatus 48 (Yokogawa). At least three reproducible urination cycles were recorded, corresponding to a period of 20 minutes, prior to administration of a test compound. (4) Administration of Test Compounds
Foi administrado, intravenosamente, um composto de teste dissolvido na mistura de etanol, Tween 80 (ICN Biomedicals Inc.) e solução salina (1:1:8, v/v/v), a 0,05 mg/kg, 0,5 mg/kg ou 5 mg/kg. 3 min após a administração do composto, foi administrada por, infusão, solução salina (Nacalai Tesque) à temperatura ambiente na bexiga, a uma taxa de 3,6 mL/h. (5) Análise dos parâmetros cistométricoA test compound dissolved in the ethanol mixture, Tween 80 (ICN Biomedicals Inc.) and saline (1: 1: 8, v / v / v), was administered intravenously at 0.05 mg / kg, 5 mg / kg or 5 mg / kg. 3 min after compound administration, was administered by infusing saline solution (Nacalai Tesque) at room temperature into the bladder at a rate of 3.6 mL / hr. (5) Analysis of cystometric parameters
Os parâmetros cistométricos foram analisados como descrito previamente [Lecci A et al.: Eur. J. Pharmacol. 259: 129-135, 1994]. Foram analisadas a partir de dados de cistometria, a frequência de micção calculada a partir de um intervalo de micção e a capacidade da bexiga calculada a partir de um volume de solução salina introduzida, por infusão, até à primeira micção. A inibição da frequência mediada pelos compostos de teste e o aumento da capacidade da bexiga mediada pelos compostos de teste foram avaliados utilizando o teste t de Student não enparelhado. Um nível de probabilidade inferior a 5% foi aceite como diferença significativa. Os dados foram analisados como a média ± SEM de 4-7 ratos. 49 [Determinação de Dor Aguda] A dor aguda é determinada numa placa quente, principalmente em ratos. São utilizadas duas variantes do teste em placa quente: Na variante clássica, os animais são colocados numa superfície quente (52 a 56 °C) e o tempo de latência é determinado até os animais demonstrarem um comportamento nocifensivo, tal como levantar ou lamber a pata. A outra variante é um aumento da temperatura da placa quente, onde os animais da experiência são colocados numa superfície de temperatura neutra. Subsequentemente, esta superfície é aquecida continuamente, mas lentamente, até os animais começarem a lamber a pata posterior. A temperatura que é atingida quando o animal começa a lamber a pata posterior é uma medida do limiar da dor.Cystometric parameters were analyzed as described previously [Lecci A et al .: Eur. J. Pharmacol. 259: 129-135, 1994]. The frequency of urination calculated from a micturition interval and the capacity of the bladder calculated from a volume of saline solution infused up to the first micturition were analyzed from cystometry data. Inhibition of the test compound-mediated frequency and increase in bladder capacity mediated by test compounds were assessed using the unpaired Student's t-test. A probability level of less than 5% was accepted as a significant difference. Data were analyzed as mean ± SEM of 4-7 rats. 49 [Determination of Acute Pain] Acute pain is determined on a hot plate, especially in rats. Two variants of the hot plate test are used: In the classical variant, the animals are placed on a warm surface (52 to 56 ° C) and the latency time is determined until the animals demonstrate nociceptive behavior, such as raising or licking the paw . The other variant is an increase in the temperature of the hot plate, where animals of the experiment are placed on a surface of neutral temperature. Subsequently, this surface is heated continuously, but slowly, until the animals begin to lick the hind paw. The temperature that is reached when the animal begins to lick the hind paw is a measure of the pain threshold.
Os compostos são testados contra um grupo de controlo tratado com veículo. A aplicação da substância é efectuada a pontos de tempo diferentes via diferentes vias de aplicação, (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradérmica, transdérmica) antes do teste de dor.The compounds are tested against a vehicle treated control group. Application of the substance is effected at different time points via different routes of application (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradermal, transdermal) prior to the pain test.
[Determinação da Dor Persistente] A dor persistente é determinada com o teste da formalina ou capsaícina, principalmente em ratos. É injectada uma solução de formalina a 1 a 5% ou 10 a 100 pg de capsaícina, numa das patas posteriores do animal da experiência. Após a aplicação da formalina ou capsaícina, os animais demonstraram reacções nocifensivas como tremuras, lamber e morder a pata afectada. O número de reacções nocifensivas dentro de uma grelha de tempo de até 90 minutos é uma medida para a intensidade da dor. 50[Persistent Pain Determination] Persistent pain is determined with the formalin or capsaicin test, especially in rats. A 1 to 5% formalin solution or 10 to 100æg capsaicin is injected into one of the hind paws of the experiment animal. After application of formalin or capsaicin, the animals demonstrated nociceptive reactions such as tremors, licking and biting the affected paw. The number of nociceptive reactions within a time frame of up to 90 minutes is a measure of the intensity of the pain. 50
Os compostos são testados contra um grupo de controlo tratado com veículo. A aplicação da substância é efectuada a diferentes pontos de tempo via diferentes vias de aplicação (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradérmica, transdérmica) antes da administração da formalina ou capsaícina.The compounds are tested against a vehicle treated control group. The application of the substance is carried out at different time points via different routes of application (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradermal, transdermal) prior to formalin or capsaicin administration.
[Determinação da Dor Neuropática] A dor neuropática é induzida através de diferentes variantes de lesão do nervo ciático unilateral, principalmente em ratos. A operação é efectuada sob anestesia. A primeira variante da lesão do nervo ciático é produzida por colocação de ligaduras de constrição folgadamente à volta do nervo ciático comum (Bennett e Xie, Pain 33 (1988): 87-107). A segunda variante é a ligação apertada de cerca de metade do diâmetro do nervo ciático comum (Seltzer et al., Pain 43 (1990): 205-218).[Determination of Neuropathic Pain] Neuropathic pain is induced through different variants of unilateral sciatic nerve injury, especially in rats. The operation is performed under anesthesia. The first variant of sciatic nerve injury is produced by placing constrictive ligatures loosely around the common sciatic nerve (Bennett and Xie, Pain 33 (1988): 87-107). The second variant is the tight bond of about half the diameter of the common sciatic nerve (Seltzer et al., Pain 43 (1990): 205-218).
Na outra variante, é utilizado um grupo de modelos, nos guais são efectuadas ligações ou transecções apertadas dos nervos L5 e L6 da medula espinal ou apenas do nervo L5 da medula espinal (KIM SH; CHUNG JM, AN EXPERIMENTAL-MODEL FOR PERIPHERAL NEUROPATHY PRODUCED BY SEGMENTAL SPINAL NERVE LIGATION IN THE RA, PAIN 50 (3) (1992): 355-363). A guarta variante envolve uma axotomia de duas das três ramificações terminais do nervo ciático (nervos tibial e peronial comum) deixando o restante nervo sural intacto, enquanto que a última variante compreende a axotomia de apenas a ramificação tibial, deixando os nervos, sural e comum, não danificados. Os animais controlo são tratados com uma operação simulada. 51 Pós-operação, os animais com lesão no nervo desenvolvem uma alodinia mecânica crónica, alodinia fria, bem com uma hiperalgesia térmica. A alodinia mecânica é determinada através de um tradutor de pressão (Anestesiómetro electrónico von Frey, IITC Inc.-Life Science Instruments, Woodland Hills, SA, EUA; Electronic von Frey System, Somedic Sales AB, Hõrby, Suécia). A hiperalgesia térmica é determinada através de uma fonte térmica radiante (Plantar Test, Ugo Basile, Comerio, Itália) ou através de uma placa fria de 5 a 10 °C, onde as reacções nocifensivas da pata posterior afectada são contadas como uma medida da intensidade da dor. Um outro teste para dor induzida por frio é a contagem das reacções ou duração das respostas nocifensivas após administração plantar de acetona no membro posterior afectado. A dor crónica é, geralmente, avaliada por registo dos ritmos circadianos na actividade (Surjo e Arndt, Universitát zu Kõln, Colónia, Alemanha) e por diferenças na pontuação do caminhar (foot print patterns; FOOTPRINTS program, Klapdor et al., 1997. Um método de baixo custo para analisar os padrões de pegadas. J. Neurosci. Methods 75, 49-54).In the other variant, a group of models is used, in which the connections are made or tight transections of the L5 and L6 nerves of the spinal cord or only the L5 nerve of the spinal cord (KIM SH; CHUNG JM, AN EXPERIMENTAL-MODEL FOR PERIPHERAL NEUROPATHY PRODUCED BY SEGMENTAL SPINAL NERVE LIGATION IN THE RA, PAIN 50 (3) (1992): 355-363). The fourth variant involves an axotomy of two of the three terminal branches of the sciatic nerve (common tibial and peroneal nerves) leaving the remaining sural nerve intact, whereas the latter variant comprises axotomy of only the tibial branch, leaving the nerves, sural and common , not damaged. Control animals are treated with a simulated operation. 51 Post-operation, animals with nerve damage develop chronic mechanical allodynia, cold allodynia, as well as thermal hyperalgesia. Mechanical allodynia is determined by a pressure translator (von Frey Electronic Anesthesiometer, IITC Inc.-Life Science Instruments, Woodland Hills, SA, USA, Electronic von Frey System, Somedic Sales AB, Herrby, Sweden). Thermal hyperalgesia is determined by a radiant heat source (Plantar Test, Ugo Basile, Comerio, Italy) or by a cold plate at 5 to 10 ° C where the nocifensive reactions of the affected hind paw are counted as a measure of the intensity of pain. Another test for cold induced pain is the counting of reactions or duration of nocifensive responses following plantar administration of acetone to the affected hind limb. Chronic pain is usually assessed by recording the circadian rhythms in the activity (Surjo and Arndt, Universitát zu Kõln, Cologne, Germany) and by differences in foot print patterns (FOOTPRINTS program, Klapdor et al., 1997. A Low-Cost Method for Analyzing Footprint Patterns, J. Neurosci, Methods 75, 49-54).
Os compostos são testados contra grupos de controlo tratados com veiculo e grupos de operação simulada. A aplicação da substância é efectuada a diferentes pontos de tempo, via diferentes vias de aplicação (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradérmica, transdérmica) antes do teste de dor.The compounds are tested against vehicle-treated control groups and mock operation groups. The application of the substance is carried out at different time points via different routes of application (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradermal, transdermal) prior to the pain test.
[Determinação da Dor Inflamatória] A dor inflamatória é induzida, principalmente em ratos, através de injecção de 0,75 mg de carragenano ou adjuvante de Freund completo numa pata posterior. Os animais desenvolveram um 52 edema com alodínia mecânica, bem como hiperalgesia térmica. A alodinia mecânica é determinada através de um tradutor de pressão (Anestesiométro electrónico von Frey, IITC Inc.-Life Science Instruments, Woodland Hills, SA, EUA). A hiperalgesia térmica é determinada através de uma fonte térmica radiante (Plantar Test, Ugo Basile, Comerio, Itália, Paw thermal stimulator, G. Ozaki, University of Califórnia, EUA). Para a determinação do edema são utilizados dois métodos. No primeiro método, os animais são sacrificados e as patas posteriores afectadas seccionadas e pesadas. 0 segundo método compreende diferenças no volume da pata através da determinação do deslocamento de água num pletismómetro (Ugo Basile, Comerio, Itália).[Determination of Inflammatory Pain] Inflammatory pain is induced, especially in rats, by injection of 0.75 mg carrageenan or complete Freund's adjuvant into a hind paw. The animals developed edema with mechanical allodynia as well as thermal hyperalgesia. Mechanical allodynia is determined by a pressure translator (von Frey Electronic Anesthesiometer, IITC Inc.-Life Science Instruments, Woodland Hills, SA, USA). Thermal hyperalgesia is determined by a radiant heat source (Plantar Test, Ugo Basile, Comerio, Italy, Paw thermal stimulator, G. Ozaki, University of California, USA). Two methods are used to determine edema. In the first method, the animals are sacrificed and the affected hind legs sectioned and weighed. The second method comprises differences in paw volume by determining the water displacement in a plethysmometer (Ugo Basile, Comerio, Italy).
Os compostos são testados contra os grupos de controlo tratados com veiculo ou grupos não inflamados. A aplicação da substância é efectuada a diferentes pontos de tempo via, diferentes vias de administração (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradérmica, transdérmica) antes do teste de dor.The compounds are tested against vehicle-treated control groups or non-inflamed groups. Application of the substance is effected at different time points via different routes of administration (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradermal, transdermal) prior to the pain test.
[Determinação da Dor Neuropática Diabética][Determination of Diabetic Neuropathic Pain]
Os ratos tratados com uma única injecção intraperitoneal de 50 a 80 mg/kg de estreptozotocina, desenvolvem uma hiperglicemia profunda e alodinia mecânica no periodo de 1 a 3 semanas. A alodinia mecânica é determinada através de um tradutor de pressão (Anestesiómetro electrónico von Frey, IITC Inc.-Life Science Instruments, Woodland Hills, SA, EUA). Os compostos são testados contra os grupos de controlo diabéticos e não diabéticos tratados com veiculo. A aplicação da substância é efectuada a diferentes pontos de tempo, via diferentes vias de 53 administração (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradérmica, transdérmica) antes do teste de dor.Rats treated with a single intraperitoneal injection of 50 to 80 mg / kg streptozotocin, develop deep hyperglycemia and mechanical allodynia over the period of 1 to 3 weeks. Mechanical allodynia is determined by a pressure translator (von Frey Electronic Anesthesiometer, IITC Inc.-Life Science Instruments, Woodland Hills, SA, USA). The compounds are tested against vehicle-treated diabetic and non-diabetic control groups. Application of the substance is effected at different time points via different routes of administration (i.v., i.p., p.o., i.t., i.c.v., s.c., intradermal, transdermal) prior to the pain test.
Os resultados de IC50 do influxo de Ca2+ induzido por capsaicina na linha celular CHO transfectada com VRl humano são apresentados nos Exemplos e tabelas dos Exemplos abaixo. Os dados correspondem aos compostos, como proporcionados pela síntese de fase sólida e, deste modo, a níveis de pureza de cerca de 40 a 90%. Por razões práticas, os compostos são agrupados em quatro classes de actividade como se segue:The IC50 results of capsaicin-induced Ca2 + influx in the human VR1 transfected CHO cell line are presented in the Examples and tables of the Examples below. The data correspond to the compounds as provided by the solid phase synthesis and thus at purity levels of about 40 to 90%. For practical reasons, the compounds are grouped into four classes of activity as follows:
IC50 = A(< ou =)0,1 μΜ<Β(< ou =)0,5 jiM<C(< ou =) 1 pM<DIC50 = A (<or =) 0.1 μΜ <Β (<or =) 0.5 μM <C (<or =) 1 pM <D
Os compostos da presente invenção apresentam, também, uma excelente selectividade e forte actividade noutros ensaios (2)-(5) descritos acima. Método de preparação dos compostos de partida [Composto de partida A]The compounds of the present invention also exhibit excellent selectivity and strong activity in other (2) - (5) assays described above. Method of preparation of the starting compounds [Starting compound A]
54 A uma solução agitada de 8-amino-2-naftol (50,0 g, 314 mmol) em tetra-hidrofurano (1000 mL), foi adicionado di-t-butildicarbonato (68,6 g, 314 mmol). A mistura foi agitada a 70 °C durante 18 horas. Após a mistura arrefecer até à temperatura ambiente, o solvente foi removido sob pressão reduzida. Ao resíduo, foi adicionado acetato de etilo e lavado com solução aquosa saturada de carbonato de sódio e, depois, com água. A camada orgânica extraída foi seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo obtido foi adicionado éter diisopropílico e o precipitado foi filtrado e seco para proporcionar N-t-butoxicarbonil-8-amino-2-naftol (64,2 g, rendimento de 79%). MS (ESI) m/z 259 [M]+ RMN de ΧΗ (DMSO-CÍ6) δ 1,48 (s, 9H), 7,07 (dd, J - 2,2 Hz e 8,85 Hz, 1H), 7,20 (t, J - = 7,9 Hz , 1H), 7,24 (d, J = = 2,2 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 7,25 Hz, 1H), 7, 60 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,8 Hz, 1H) , 8,92 (s, 1H) .To a stirred solution of 8-amino-2-naphthol (50.0 g, 314 mmol) in tetrahydrofuran (1000 mL) was added di-t-butyldicarbonate (68.6 g, 314 mmol). The mixture was stirred at 70 ° C for 18 hours. After the mixture cooled to room temperature, the solvent was removed under reduced pressure. To the residue, ethyl acetate was added and washed with saturated aqueous sodium carbonate solution and then with water. The extracted organic layer was dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure. To the obtained residue was added diisopropyl ether and the precipitate was filtered and dried to provide N-t-butoxycarbonyl-8-amino-2-naphthol (64.2 g, yield 79%). NMR (DMSO-d6) δ 1.48 (s, 9H), 7.07 (dd, J = 2.2 Hz and 8.85 Hz, 1H) , 7.20 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.25 Hz, 1H) , 7.60 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.92 (s, 1H).
De seguida, a uma mistura de N-t-butoxicarbonil-8-amino-2-naftol (64,0 g, 247 mmol) e carbonato de césio (161 g, 493 mmol) em 300 mL de DMF anidro, foi adicionado iodoetano (42,3 g, 272 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 60 °C durante 2 horas. Foi adicionado água à mistura e o produto foi extraído com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com água e solução salina saturada, seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo obtido foi adicionado éter diisopropílico e o precipitado foi recolhido e seco para proporcionar éster t-butílico do ácido (7-etoxi-l-naftalen-l-il)-carbâmico (47,9 g, rendimento de 67,5%). 55 MS (ESI) m/z 287[M] RMN de 1h (DMSO-CÍ6) δ 1, 41 (t, J = 6,95 Hz, 3H), 1,50 (s, 9H), 4,16 (q, J = 6,95 Hz, 2H), 7,15 (dd, J = 2, ,55 e 8,8 Hz, 1H), 7,28 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,25 Hz, 1H), 7,6. 1 (d, J = 8,2,Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8, 85 Hz, 1H), 9,12 (S, 1H) .Then, to a mixture of Nt-butoxycarbonyl-8-amino-2-naphthol (64.0 g, 247 mmol) and cesium carbonate (161 g, 493 mmol) in 300 mL of anhydrous DMF was added iodoethane , 3 g, 272 mmol) at room temperature. The mixture was stirred at 60 ° C for 2 hours. Water was added to the mixture and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with water and brine, dried over Na 2 SO 4, filtered and concentrated under reduced pressure. To the obtained residue was added diisopropyl ether and the precipitate was collected and dried to afford (7-ethoxy-1-naphthalen-1-yl) -carbamic acid t-butyl ester (47.9 g, 67.5% yield) . 1 H NMR (DMSO-d 6) δ 1.41 (t, J = 6.95 Hz, 3H), 1.50 (s, 9H), 4.16 (m, q, J = 6.95 Hz, 2H), 7.15 (dd, J = 2.5,5 and 8.8 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 7 , 36 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 7.25 Hz, 1H), 7.6. 1 (d, J = 8.2, Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8, 85 Hz, 1H), 9.12 (s, 1H).
De seguida, a uma solução de éster t-butílico do ácido (7-etoxi-l-naftalen-l-il)-carbâmico (47,9 g, 167 mmol) em 100 mL de 1,4-dioxano anidro foi adicionado HC1 4 N em 1,4-dioxano (100 mL) a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Foi adicionado éter diisopropilico à mistura reaccional e o precipitado foi filtrado. Ao sólido obtido foi adicionado bicarbonato de sódio saturado e o produto foi extraído com acetato de etilo. A camada orgânica foi seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar (7-etoxi-l-naftil)amina (27,0 g, rendimento de 86,3%) . MS (ESI) m/z 187 [M]+ RMN de (DMSO-d6) δ 1,39 (t, J = 11,3 Hz, 3H), 4,15 (q, J= 11,3 Hz, 2H), 5,52 (s(br), 2H) , 6,64 (dd, J= 3,75 e 10,05 Hz, 1H), 7,01-7,07 (m, 3H), 7,39 (d, J= 3,8 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 14,45 Hz, 1H).Then, to a solution of (7-ethoxy-1-naphthalen-1-yl) -carbamic acid t-butyl ester (47.9 g, 167 mmol) in 100 mL of anhydrous 1,4-dioxane was added HCl 4 N in 1,4-dioxane (100 mL) at 0 ° C. The mixture was stirred at room temperature for 2 hours. Diisopropyl ether was added to the reaction mixture and the precipitate was filtered. To the obtained solid was added saturated sodium bicarbonate and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure to afford (7-ethoxy-1-naphthyl) amine (27.0 g, 86.3% yield). NMR (DMSO-d 6) [delta] 1.39 (t, J = 11.3 Hz, 3H), 4.15 (q, J = 11.3 Hz, 2H ), 5.52 (s (br), 2H), 6.64 (dd, J = 3.75 and 10.05 Hz, 1H), 7.01-7.07 (m, 3H), 7.39 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 14.45 Hz, 1H).
De seguida, foi recolhida amónia líquida (300 mL) a -78 °C para um frasco contendo uma mistura de 7-etoxi-l-naftalen-l-ilamina (1,80 g, 9,61 mmol) e t-butanol (2,13 g, 28,8 mmol) em tetra-hidrofurano (20 mL). À mistura, foi adicionado lítio (0, 200 g, 28,8 mmol) durante 30 minutos e agitada a -78 °C 56 durante 1 hora. Foi adicionado metanol e água e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas para permitir a evaporação da amónia. Ao resíduo obtido foi adicionado acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com água, seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para proporcionar 7-etoxi-5,8-di-hidronaftaleno-l-ilamina (1,37 g, rendimento de 76%) .Thereafter, liquid ammonia (300 mL) was collected at -78 ° C into a flask containing a mixture of 7-ethoxy-1-naphthalen-1-ylamine (1.80 g, 9.61 mmol) and t-butanol ( 2.13 g, 28.8 mmol) in tetrahydrofuran (20 mL). To the mixture, lithium (0, 200 g, 28.8 mmol) was added over 30 minutes and stirred at -78 ° C for 1 hour. Methanol and water were added and the mixture was stirred at room temperature for 16 hours to allow evaporation of the ammonia. To the obtained residue was added ethyl acetate. The organic layer was washed with water, dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure to provide 7-ethoxy-5,8-dihydronaphthalene-1-ylamine (1.37 g, 76% yield).
[Composto de partida B][Starting compound B]
A uma solução agitada de 7-etoxi-5,8-di-hidronaftalen-l-ilamina (1,07 g, 5,65 mmol) em tetra-hidrofurano (30 mL), foi adicionada uma solução aquosa de HC1 2 N (10 mL) e agitada a 40 °C durante 1 hora. A mistura foi neutralizada com adição de bicarbonato de sódio e o produto foi extraído com acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com água, seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para proporcionar 8-amino-3,4-di-hidro-lH-naftalen-2-ona (0,71 g, rendimento de 78%) . MS (ESI) m/z 162 [M+H]+ RMN de XH (CDC13) δ 2, 62-2, 65 (m, 2H), 3,07 (t, J= 7,25 Hz, 2H), 3,34 (s, 2H), 6,65 (d, J= 7,85, 1H), 6,70 (d, J= 7,25 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,55 Hz, 1H). 57To a stirred solution of 7-ethoxy-5,8-dihydronaphthalen-1-ylamine (1.07 g, 5.65 mmol) in tetrahydrofuran (30 mL) was added an aqueous solution of 2N HCl ( 10 mL) and stirred at 40 ° C for 1 hour. The mixture was neutralized with addition of sodium bicarbonate and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with water, dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure to provide 8-amino-3,4-dihydro-1H-naphthalen-2-one (0.71 g, yield 78% ). MS (ESI) m / z 162 [M + H] + 1 H NMR (CDCl 3) δ 2.62-2.65 (m, 2H), 3.07 (t, J = 7.25 Hz, 2H), J = 7.85, 1H), 6.70 (d, J = 7.25 Hz, 1H), 7.07 (t, J = 7, 55 Hz, 1H). 57
De seguida, a 8-amino-3,4-di-hidro-lH-naftalen-2-ona (0,050 g, 0,318 mmol) em metanol (10 mL), foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,030 g, 0,175 mmol) a 0 °C e a mistura foi agitada durante 1 hora. A mistura foi vertida em água e o produto foi extraído com acetato de etilo. A camada orgânica foi seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para proporcionar 8-amino-l, 2,3,4-tetra-hidro-naftalen-2-ol (0,037 g, rendimento de 71%). MS (ESI) m/z 163 [M]+ RMN de 1H (DMSO- -d6) δ 1,53-1,57 (m, 1H), 1,81-1, 85 (m, 1H), 2,16 (dd, J = 7,7 e 16,4 Hz, 1H) , 2,61-2,74 (m, 3H), 3,89- -3,90 (m, 1H), 4, 65 (s, 2H), 4,72 (d, J = 4,1 Hz , 1H), 6,28 (d, J = 7, 45 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 7,45 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,76 (t, J = 7, 55 Hz, 1H).Then 8-amino-3,4-dihydro-1H-naphthalen-2-one (0.050 g, 0.318 mmol) in methanol (10 mL) was added sodium borohydride (0.030 g, 0.175 mmol ) at 0 ° C and the mixture was stirred for 1 hour. The mixture was poured into water and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was dried over Na 2 SO 4, filtered and concentrated under reduced pressure to provide 8-amino-1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-2-ol (0.037 g, 71% yield). MS (ESI) m / z 163 [M] + 1 H NMR (DMSO- d 6) δ 1.53-1.57 (m, 1H), 1.81-1.85 (m, 1H) 16 (dd, J = 7.7 and 16.4 Hz, 1H), 2.61-2.74 (m, 3H), 3.89-3.90 (m, 1H), 4.65 (s 2H), 4.72 (d, J = 4.1Hz, 1H), 6.28 (d, J = 7.45Hz, 1H), 6.28 (d, J = 7.45Hz, 1H) ), 6.41 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.76 (t, J = 7.55 Hz, 1H).
[Composto de partida C][Starting compound C]
Uma solução agitada de dímero de cloreto de benzenoruténio(II) (3,10 mg, 0,006 mmol) e (IS, 2R)-(-)-cis-1-amino-2-indanol (3,7 mg, 0,025 mmol) em isopropanol desgaseif içado, foi aquecida a 80 °C durante 20 minutos sob árgon. A mistura foi adicionada à solução de 8-amino-3,4-di-hidro-lH-naftalen-2-ona (50 mg, 0,310 mmol) em isopropanol 58 (3 mL) à temperatura ambiente. Foi adicionada uma solução de hidróxido de potássio (3,48 mg, 0,062 mmol) em isopropanol (1 mL) e a mistura foi agitada a 45 °C durante 1 hora. A mistura foi passada através de silica gel e lavada com acetato de etilo. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para proporcionar o enantiómero quiral 8-amino-l,2,3,4-tetra-hidro-naftalen-2-ol (33,0 mg, rendimento de 65%). MS (ESI) m/z 163 [M]+ RMN de (DMS0-d6) δ 1,53-1,57 (m, 1H), 1,81-1,85 (m, 1H), 2,16 (dd, J = 7,7 e 16,4 Hz, 1H), 2,61-2,74 (m, 3H), 3,89-3, 90 (m, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,72 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 7,45 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 7,45 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,76 (t, J = 7,55 Hz, 1H).A stirred solution of benzene (II) chloride dimer (3.10 mg, 0.006 mmol) and (1S, 2R) - (-) - cis-1-amino-2-indanol (3.7 mg, 0.025 mmol) in degassed isopropanol was heated at 80 ° C for 20 minutes under argon. The mixture was added to the solution of 8-amino-3,4-dihydro-1H-naphthalen-2-one (50 mg, 0.310 mmol) in isopropanol (3 mL) at ambient temperature. A solution of potassium hydroxide (3.48 mg, 0.062 mmol) in isopropanol (1 mL) was added and the mixture was stirred at 45 ° C for 1 hour. The mixture was passed through silica gel and washed with ethyl acetate. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give the chiral enantiomer 8-amino-1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-2-ol (33.0 mg, yield 65%). MS (ESI) m / z 163 [M] + NMR of (DMSOd 6) δ 1.53-1.57 (m, 1H), 1.81-1.85 (m, 1H), 2.16 (m, dd, J = 7.7 and 16.4 Hz, 1H), 2.61-2.74 (m, 3H), 3.89-3.90 (m, 1H), 4.65 (s, 2H) , 4.72 (d, J = 4.1Hz, 1H), 6.28 (d, J = 7.45Hz, 1H), 6.28 (d, J = 7.45Hz, 1H), 6 , 41 (d, J = 7.7 Hz, 1 H), 6.76 (t, J = 7.55 Hz, 1 H).
[Composto de partida D][Starting compound D]
Uma solução agitada de dímero de cloreto de benzenorruténio(II) (1,55 g) e (IS, 2R)-(-)-cis-l-amino-2-indanol (1,85 g) em isopropanol desgaseifiçado (500 mL) foi aquecida a 80 °C durante 20 minutos sob árgon e, depois, arrefecida para a temperatura ambiente. A mistura foi adicionada à solução de 8-amino-3,4-di-hidro-lH-naftalen-2-ona (25,0 g) em isopropanol 59 (700 mL) à temperatura ambiente, seguida pela solução de hidróxido de potássio preparada (1,74 g) em 300 mL de isopropanol (pré-preparada a 45 °C para dissolver e depois arrefecida para a temperatura ambiente) . Após agitação a 45 °C durante 30 minutos, a mistura foi arrefecida para a temperatura ambiente e foi passada através de uma almofada de sílica gel e lavada com acetato de etilo. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o sólido obtido dissolvido em diclorometano e tratado com carvão activado durante 10 minutes. Após filtração através de uma almofada de sílica gel, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O produto obtido foi recristalizado a partir de diclorometano para proporcionar cristais vermelhos de (R)-8-amino-l,2,3,4-tetra-hidronaftalen-2-ol (14 g, rendimento de 56%) . MS (ESI) m/z 163 [M] RMN i de 1h (DMSO- d6) δ 1,53-1, 57 (m, 1H), 1,81-1,85 (m, 1H), 2,16 (dd, J = 1,1 e 16,4 Hz, 1H) r 2, 61- -2,74 (m, 3H) , 3,89 -3,90 (m, 1H), 4, 65 (s, 2H), 4,72 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 7, 45 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 7,45 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 7,7 Hz , 1H), 6,76 (t, J = 7, 55 Hz, 1H). A utilização de (IR, 2S) -( + )-cis-l-amino-2-indanol resultou em (S)-8-amino-l,2,3,4-tetra-hidro-naftalen-2-ol.A stirred solution of benzenorhutene (II) chloride dimer (1.55 g) and (1S, 2R) - (-) - cis-1-amino-2-indanol (1.85 g) in degasified isopropanol (500 mL ) was heated at 80 ° C for 20 minutes under argon and then cooled to room temperature. The mixture was added to the solution of 8-amino-3,4-dihydro-1H-naphthalen-2-one (25.0 g) in isopropanol (700 mL) at room temperature followed by potassium hydroxide solution (1.74 g) in 300 ml of isopropanol (pre-prepared at 45 ° C to dissolve and then cooled to room temperature). After stirring at 45 ° C for 30 minutes, the mixture was cooled to room temperature and passed through a pad of silica gel and washed with ethyl acetate. The filtrate was concentrated under reduced pressure and the solid obtained dissolved in dichloromethane and treated with activated charcoal for 10 minutes. After filtration through a pad of silica gel, the mixture was concentrated under reduced pressure. The product obtained was recrystallized from dichloromethane to give (R) -8-amino-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-ol red crystals (14 g, 56% yield). MS (ESI) m / z 163 1 H-NMR (DMSO-d 6) δ 1.53-1.57 (m, 1H), 1.81-1.85 (m, 1H), 2.16 (m, 3H), 3.89-3.90 (m, 1H), 4.65 (s, 3H) 2H), 4.72 (d, J = 4.1Hz, 1H), 6.28 (d, J = 7.45Hz, 1H), 6.28 (d, J = 7.45Hz, 1H) , 6.41 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.76 (t, J = 7.55 Hz, 1H). The use of (1R, 2S) - (+) - cis-1-amino-2-indanol resulted in (S) -8-amino-1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-2-ol.
De seguida, a solução de (R)-8-amino-l,2,3,4-tetra-hidronaf talen-2-ol (36,2 g) e piridina (18,8 mL) em THF (850 mL) arrefecida a 0 °C foi adicionado cloroformato de fenilo (28,8 mL) . A mistura foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente e, depois, vertida em acetato de etilo. A mistura foi lavada com solução aquosa de NH4C1 e, depois, com água, a camada 60 orgânica foi seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo obtido foi adicionado acetonitrilo e os precipitados foram recolhidos e lavados com uma mistura de acetonitrilo e éter diisopropílico (2:3), para obter Éster fenílico do ácido {(R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-1-il}-carbâmico (33,0 g). MS (ESI) m/z 284 [M+H]+ RMN de :Η (DMSO- d6) δ 1,59-1 , 64 (m, 1H) , 1,83- -1,89 (m, 1H), 2,68- -2,99 (m, 4H) , 3 ,90- -3,92 (m, 1H) , 4, 84 (dd, J = 3,8 Hz e 29, 9 Hz, 1H), 6, 75 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7, 07- -7,25 (m, 6H), 7, 42 (t, J = 7,85 Hz, 1H) , 9,29 (s, 1H) ,Then the solution of (R) -8-amino-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-ol (36.2 g) and pyridine (18.8 mL) in THF (850 mL) cooled to 0 ° C was added phenyl chloroformate (28.8 mL). The mixture was stirred for 3 hours at room temperature and then poured into ethyl acetate. The mixture was washed with aqueous NH 4 Cl and then, with water, the organic layer was dried over Na 2 SO 4, filtered and concentrated under reduced pressure. To the obtained residue was added acetonitrile and the precipitates were collected and washed with a mixture of acetonitrile and diisopropyl ether (2: 3) to give {(R) -7-hydroxy-5,6,7,8- tetrahydro-naphthalen-1-yl} -carbamic acid tert-butyl ester (33.0 g). NMR (DMSO-d 6) δ 1.59-1.64 (m, 1H), 1.83-1.89 (m, 1H) , 2.68-2.99 (m, 4H), 3.90-3.92 (m, 1H), 4.84 (dd, J = 3.8 Hz and 29.9 Hz, 1H), J = 7.9 Hz, 1H), 7.07-7.25 (m, 6H), 7.42 (t, J = 7.85 Hz, 1H), 9.29 (d, s, 1H);
Exemplo 1-1 N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-Ν'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureiaExample 1-1 N- [4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl] -Î ± - (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral F. A uma solução agitada de 7-etoxi-5,8-di-hidronaftalen-1-ilamina (0,16 g, 0,84 mmol) em tetra-hidrofurano (15 mL), foi adicionado 4-cloro-3-trifluorometilfenilisocianato (0,22 g, 61 1,0 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas e foi vertida em água. O produto foi extraído com acetato de etilo e a camada orgânica foi seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para proporcionar N-(4-cloro-3-trifluorometil-fenil)-Ν'-(7-etoxi-5,8-di-hidro-naftalen-l-il)ureia (0,31 g, rendimento de 89%). De seguida, a uma solução de N-(4-cloro-3-trifluorometil-fenil)-Ν'-(7-etoxi-5,8-di-hidro-naftalen-l-il)-ureia (0,21 g, 0,51 mmol) em tetra-hidrofurano (20 mL), foi adicionada uma solução aquosa de ácido clorídrico 1 N (5 mL) e a mistura foi agitada a 40 °C durante 45 minutos. A mistura foi neutralizada com adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio a 10% e extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar N-(4-cloro-3-trifluorometilfenil)-Ν'-(7-oxo-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il) ureia (0,16 g, rendimento de 85%). De seguida, a N-(4-cloro-3-trifluorometilfenil)-Ν'-(7-oxo-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-1-il)ureia (0,07 g, 0,18 mmol) em metanol (10 mL), foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,04 g, 0,09 mmol) a 0 °C e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A mistura foi vertida em água e o produto foi extraído com acetato de etilo. A camada orgânica foi seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida e o produto obtido foi recristalizado a partir de uma mistura de solução de acetato de etilo/hexano (1/2), para proporcionar N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-Ν'-(7-hidroxi-5, 6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureia (41 mg, rendimento de 59%) RMN de XH (DMSO-d6) δ 1,57-1,58 (m, 1H), 1,87-1,90 (m, 1H), 2,36-2,42 (m, 1H) , 2,63-2,76 (m, 1H), 2,83-2,87 (m, 2H) , 3,91-3,96 (m, 1H), 4,87 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 7,6 Hz, 1H) , 7,06 (t, J = 7, 6 Hz, 1H) , 7,58 (d, J = 7,6 Hz, 62 1Μ), 7,61-7,62 (m, 2H), 7,93 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 9,47 (s, 1H).This example was performed according to general method F. To a stirred solution of 7-ethoxy-5,8-dihydronaphthalen-1-ylamine (0.16 g, 0.84 mmol) in tetrahydrofuran (15 mL ), 4-chloro-3-trifluoromethylphenylisocyanate (0.22 g, 61.0 mmol) was added. The mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours and poured into water. The product was extracted with ethyl acetate and the organic layer was dried over Na 2 SO 4, filtered and concentrated under reduced pressure to provide N- (4-chloro-3-trifluoromethyl-phenyl) -α- (7-ethoxy- 8-dihydro-naphthalen-1-yl) urea (0.31 g, 89% yield). Then to a solution of N- (4-chloro-3-trifluoromethyl-phenyl) -α- (7-ethoxy-5,8-dihydro-naphthalen-1-yl) -urea (0.21 g , 0.51 mmol) in tetrahydrofuran (20 mL) was added 1N aqueous hydrochloric acid solution (5 mL) and the mixture was stirred at 40 ° C for 45 minutes. The mixture was neutralized with the addition of 10% aqueous sodium bicarbonate solution and extracted with ethyl acetate. The organic layer was dried over Na 2 SO 4, filtered and concentrated under reduced pressure to provide N- (4-chloro-3-trifluoromethylphenyl) -N '- (7-oxo-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen- 1-yl) urea (0.16 g, 85% yield). Then, N- (4-chloro-3-trifluoromethylphenyl) -Î ± - (7-oxo-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) urea (0.07 g, , 18 mmol) in methanol (10 mL) was added sodium borohydride (0.04 g, 0.09 mmol) at 0 ° C and the mixture was stirred for 30 minutes. The mixture was poured into water and the product was extracted with ethyl acetate. The organic layer was dried over Na 2 SO 4, filtered and concentrated under reduced pressure and the product obtained was recrystallized from a mixture of ethyl acetate / hexane (1/2) solution, to give N- [4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl] -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea (41 mg, 59% yield) 1 H-NMR (DMSO- d 6) δ 1 (M, 1H), 2.36-2.42 (m, 1H), 2.63-2.76 (m, 1H) , 2.83-2.87 (m, 2H), 3.91-3.96 (m, 1H), 4.87 (d, J = 4.1Hz, 1H), 6.82 (d, J = = 7.6 Hz, 1H), 7.06 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 7.6 Hz, 6H), 7.61-7.62 ( m, 2H), 7.93 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 9.47 (s, 1H).
Peso molecular: 384,8 MS (M+H): 384 pf: 227-228 °CMolecular weight: 384.8 MS (M + H): 384 mp: 227-228 ° C
Classe de actividade in vitro: AIn vitro activity class: A
Exemplo 1-2 N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-N-{(R)-7-hidroxi-5,6,7, 8-tetra-hidro-l-naftalenil}ureiaExample 1-2 N- [4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl] -N - {(R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl} urea
Uma mistura racémica de N-[4-cloro-3-A racemic mixture of N- [4-chloro-3-
(trifluorometil)fenil]-N'-(7-hidroxi-5, 6,7, 8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureia (30,0 mg) foi separada por HPLC quiral (coluna Daicel OD, n-hexano:2-propanol = 98:2) no isómero R correspondente (8,3 mg). O isómero R foi detectado por HPLC quiral (coluna ChiralCel OD 0,49 cm x 25 cm, n-hexano/etanol = 97/3, 1,5 mL/min de fluxo) aos 20,1 minutos. 63(trifluoromethyl) phenyl] -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea (30.0 mg) was separated by chiral HPLC (Daicel OD column, n-hexane : 2-propanol = 98: 2) in the corresponding R-isomer (8.3 mg). The R-isomer was detected by chiral HPLC (ChiralCel OD column 0.49 cm x 25 cm, n-hexane / ethanol = 97/3, 1.5 mL / min flow) at 20.1 minutes. 63
Peso molecular: 384,8 MS (M+H): 384Molecular weight: 384.8 MS (M + H): 384
Exemplo 1-3 N-[4-cloro-3-(trifluorometil)fenil]-N'-{(S)-7-hidroxi-5,6,7, 8-tetra-hidro-l-naftalenil}ureiaExample 1-3 N- [4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl] -N '- {(S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl} urea
FF
FF
Uma mistura racémica de N-[4-cloro-3-A racemic mixture of N- [4-chloro-3-
(trifluorometil)fenil]-N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naf talenil ) ureia (30,0 mg) foi separada por HPLC quiral (coluna Daicel OD column, n-hexano:2-propanol = 98:2) no isómero S correspondente (2,2 mg). O isómero S foi detectado por HPLC quiral (coluna ChiralCel OD 0,49 cm x 25 cm, n-hexano/etanol = 97/3, 1,5 mL/min de fluxo) aos 17,6 minutos.(trifluoromethyl) phenyl] -N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea (30.0 mg) was separated by chiral HPLC (Daicel OD column, n- hexane: 2-propanol = 98: 2) in the corresponding S-isomer (2.2 mg). S-isomer was detected by chiral HPLC (ChiralCel OD column 0.49 cm x 25 cm, n-hexane / ethanol = 97/3, 1.5 mL / min flow) at 17.6 minutes.
Peso molecular: 384,8 MS (M+H): 384 64Molecular weight: 384.8 MS (M + H): 384 64
Exemplo 2-1 N-fenil-N'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureiaExample 2-1 N-Phenyl-N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral A. A uma solução de 8-amino-l,2,3,4-tetra-hidro-naftalen-2-ol (20,0 mg, 0,123 mmol) em 1,4-dioxano (1,0 mL), foi adicionado isocianato de fenilo (14,6 mg, 0,123 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 16 horas e, depois, adicionado éter diisopropílico e hexano. O precipitado foi filtrado e seco para proporcionar N-fenil-N'-(7-hidroxi-5,6, 7, 8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureia (17,8 mg, rendimento de 51%).This example was carried out according to general method A. To a solution of 8-amino-1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-2-ol (20.0 mg, 0.123 mmol) in 1,4 (1.0 mL) was added phenyl isocyanate (14.6 mg, 0.123 mmol) at room temperature. The mixture was stirred for 16 hours and then diisopropyl ether and hexane added. The precipitate was filtered and dried to provide N-phenyl-N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea (17.8 mg, 51% yield).
Peso molecular: 282,3 MS (M+H): 283Molecular weight: 282.3 MS (M + H): 283
pf: 198-199 °Cmp: 198-199 ° C
Classe de actividade: CActivity class: C
Os compostos no Exemplo 2-2 a 2-41 foram sintetizados e testados com a utilização do material de partida B e de acordo com processos semelhantes aos exemplos 2-1 acima. 65The compounds in Example 2-2 to 2-41 were synthesized and tested using the starting material B and according to similar procedures to examples 2-1 above. 65
Tabela 1Table 1
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-2 N X0 Xò 316,79024 317 197-199 B 2-3 A rAo XÒ 316,79024 317 216-218 A 2-4. A N^O XÓ 316,79024 317 229-231 A LO 1 Os] A A 04 xò 312,3717 313 187-189 B 66 (Continuação)Ex n ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-2 N X0 X0 316.79024 317 197-199 B 2-3 A rAo XÒ 316.79024 317 216-218 A 2-4. A No. 316,79024 317,229-231 A LO 1 A A 04 x 312.3717 313 187-189 B 66 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-6 XX N^O XÒ 312,3717 313 213-215 D 2-7 ;λ0 N ^ N^O Xó 350,34359 351 217-219 C 2-8 Λ F XÓ 350,34359 351 227-228 A 2-9 N^o Xó 350,34359 351 222-224 A 67 (Continuação)Ex n ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-6 XX N OO XÒ 312.3717 313 213-215 D 2-7; λ0 N N N OO Xó 350.34359 351 217-219 C 2-8 Λ F XO 350.34359 351 227-228 A 2-9 N o X 350.34359 351 222-224 A 67 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-10 óo N^O XÓ 354,40934 355 178-180 D 2-11 Λ 0 tò 354,40934 355 176-178 A 2-12 XÓ, Λ xó 354,40934 355 204-206 A 2-13 xó 332,40575 333 250-252 A 68 (Continuação)Ex n ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-10 ° C 354,40934 355 178-180 D 2-11 Λ 0 tò 354,40934 355 176-178 A 2-12 XO, 354, 40934 355 204-206 A 2-13 x 332,40575 333 250-252 A 68 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-14 XÓ 332,40575 333 212-214 A 2-15 XX’ lAo XÒ 300,33564 301 214-216 B 2-16 xr N^O xò 361,24124 362 237-239 A 2-17 XX N^O xò 351,23527 352 234-235 A 69 (Continuação)Ex n ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-14 X0 332,40575 333 212-214 A 2-15 XX 'lOo X 300.33564 301 214-216 B 2-16 xr N O O x 361,24124 362 237-239 A 2-17 XX No. 35 352.23527 352 234-235 A 69 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-18 Λ XÓ 296,3723 297 198-200 B 2-19 Xo Oò 324,42648 325 186-188 A 2-20 iXo XÓ 374,44339 375 188-190 A 2-21 hXo XÓ 325,41406 326 206-207 D 2-22 Xo 296,3723 297 198-200 B 70 (Continuação)Ex n ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-18 Λ XÓ 296,3723 297 198-200 B 2-19 Xo Oò 324,42648 325 186-188 A 2-20 iXo XÓ 374,44339 375 188-190 A 2-21 hXo X6 325.41406 326 206-207 D 2-22 Xo 296.3723 297 198-200 B 70 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-23 OH, £0 Xó 310,39939 311 224-226 B 2-24 H0n ,0? co 310,39939 311 194-196 B 2-26 AO, XÓ 310,39939 311 230-232 A 2-27 hon XÓ 314,36273 315 184-187 B 2-28 XÇ XÓ ’ 314,36273 315 193-194 B 71 (Continuação)Ex n ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-23 OH, £ 0 X 310.39939 311 224-226 B 2-24 H0n, 0? 310.39939 311 194-196 B 2-26 AO, X6 310.39939 311 230-232 A 2-27 hon X0 314.36273 315 184-187 B 2-28 XC X 314.36273 315 193-194 B 71 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-29 "oí"0. 314,36273 315 218-221 A 2-30 xô XÓ 330,81733 331 213-215 B 2-31 xo, XÓ ' 326,39879 327 209-211 B 2-32 xo 1A0 Xó 310,39939 311 161-163 c 2-33 N^CH, Λ wYyK \Λ/ 234,30061 235 216-217 D 72 (Continuação)Ex n ° PM MOLECULAR STRUCTURE IN PF activity class 2-29 " o " 0. 314.36273 315 218-221 A 2-30 X0 330.81733 331 213-215 B 2-31 xo, X0 '326.39879 327 209-211 B 2-32 xo 1A0 Xo 310.39939 311 161-163 c 2-33 N CH CH, Λ wYy Λ / 234.30061 235 216-217 D 72 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-34 .X) N^O Xó 282,34521 283 198-199 C 2-35 fi N x0 XÓ 316,79024 317 197-199 B 2-36 XC Λ xó 330,81733 331 >180Z A 2-37 lAo Xó 342,39819 343 >150Z A 2-38 Br 463,68465 464 234-235 A 73 (Continuação)Ex. N ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-34 .X) N α O X 282.34521 283 198-199 C 2-35% N x0 X 316.79024 317 197-199 B 2-36 XC% 330.81733 331> 180Z A 2-37 1 X X 342.39819 343> 150Z A 2-38 Br 463.68465 464 234-235 A 73 (Continued)
Ex n° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM PF classe de actividade 2-39 xoç CH, 398,81 399 219-220 A 2-40 jOÇ hanA0 Ff "OÒ 398,81571 399 136-137 B 2-41 Ί0Ο 398,81571 399 213 BEx. N ° MOLECULAR STRUCTURE PM IN PF activity class 2-39 ° C, 398.81 399 219-220 A 2-40% haA0 Ff " OÒ 398.81571 399 136-137 B 2-41 Ί0Ο 398.81571 399 213 B
Exemplo 3-1Example 3-1
Enantiómero quiral N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-Ν'-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureiaChiral enantiomer N- (4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl) -N '- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral G. A uma solução de enantiómero 8-amino-l, 2,3,4-tetra-hidro-naftalen-2-ol quiral (33,0 mg, 0,202 mmol) em 1,4-dioxano (3,0 mL), foi adicionado 4-cloro-3-trifluorometil-fenilisocianato (44,8 mg, 0,202 mmol) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 16 horas e, depois, adicionado éter diisopropilico e hexano. O precipitado foi filtrado e seco para proporcionar N-(4-cloro-3-(trifluorometil)fenil)-Ν'-(7-hidroxi- 74 5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil)ureia quiral (54, 0 mg, rendimento de 69%). 0 excesso enantiomérico (% ee) foi determinado por utilização de coluna Chiral Cel OD (15% de isopropanol em hexano como eluente, com 1 mL por minuto). Peso molecular: 384,8This example was performed according to general method G. To a solution of 8-amino-1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-2-ol enantiomer (33.0 mg, 0.202 mmol) in 1 , 4-dioxane (3.0 mL) was added 4-chloro-3-trifluoromethyl-phenylisocyanate (44.8 mg, 0.202 mmol) at room temperature. The mixture was stirred for 16 hours and then diisopropyl ether and hexane added. The precipitate was filtered and dried to provide chiral N- (4-chloro-3- (trifluoromethyl) phenyl) -β- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl) (54.0 mg, 69% yield). The enantiomeric excess (% ee) was determined using Chiral Cel OD column (15% isopropanol in hexane as eluent, with 1 mL per minute). Molecular weight: 384.8
MS (M+H): 384 pf: 227-228 °CMS (M + H): 384 mp: 227-228 ° C
Classe de actividade in vitro: AIn vitro activity class: A
Exemplo 4-1 N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-Ν'-(4-trifluorometoxibenzil)-ureiaExample 4-1 N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -α- (4-trifluoromethoxybenzyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral C.This example was carried out according to general method C.
Uma mistura de éster fenilico do ácido 7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-carbâmico (30,0 mg, 0,11 mmol) e 4-trifluorometoxi-benzilamina (21,3 mg, 0,11 mmol) em DMSO (1,0 mL) foi agitada a 100 °C durante 17 horas. - A mistura 75 reaccional foi arrefecida para a temperatura ambiente e foi adicionada água. Os precipitados foram filtrados e lavados com água e, depois, com acetonitrilo, para obter N-(7-hidroxi- 5,6,7, 8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-Ν'-(4-trifluorometoxi-benzil)-ureia (6,70 mg, rendimento de 17%). RMN de XH (DMSO-d6) δ 1,54-1.65 (m, 1H), 1,81-1,92 (m, lH),-2,25- 2,38 (m, 1H), 2, 68-2, 88 (m, 3H), 3, 86-3, 98 (m, 1H), 4,32 (d, J= 6,0 Hz, 2H), 4,85 (d, J= 4,1 Hz, 1H), 6,72 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,06 (t, J = 6,0 Hz, 1H) , 7,34 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,63 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,5 (s, 1H). Peso molecular: 380,36 MS (M+H): 381A mixture of 7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -carbamic acid phenyl ester (30.0 mg, 0.11 mmol) and 4-trifluoromethoxybenzylamine (21 , 3 mg, 0.11 mmol) in DMSO (1.0 mL) was stirred at 100 ° C for 17 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and water was added. The precipitates were filtered and washed with water and then with acetonitrile to give N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -N '- (4-trifluoromethoxy benzyl) -urea (6.70 mg, 17% yield). 1 H-NMR (DMSOd 6) δ 1.54-1.65 (m, 1H), 1.81-1.92 (m, 1H), 2.25-2.38 (m, 1H), 2.68 (M, 1H), 4.32 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.85 (d, J = 4.1 J = 7.5 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.06 (t, J = 6.0 Hz, 7.43 (d, J = 8.3 Hz, 2 H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1 H) , 7.5 (s, 1H). Molecular weight: 380.36 MS (M + H): 381
pf: 213 °Cmp: 213 ° C
Classe de actividade in vitro: A Exemplo 4-2 N-{(R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il}-Ν' -(4-trifluorometoxibenzil)-ureiaIn vitro activity class: A Example 4-2 N - {(R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl} -Î ± - (4-trifluoromethoxybenzyl) - urea
OO
7676
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral C.This example was carried out according to general method C.
Uma mistura de éster fenilico do ácido (R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-carbâmico (147,3 mg, 0,52 mmol) e 4-trifluorometoxi-benzilamina (99,4 mg, 0,52 mmol) em DMSO (1,5 mL), foi agitada a 150 °C durante 1,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida para a temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etilo e água. A camada orgânica extraída foi lavada com água e, depois, solução salina saturada, seca sob Na2SC>4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi triturado com diclorometano e hexano para obter N-{(R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-l-il}-N'-(4-trifluorometoxi-benzil)-ureia (168,0 mg, rendimento de 85%). RMN XH ( DMSO- -de) δ 1, 54- -1,65 (m, 1H), 1, 81 -1,92 (m, 1H), 2,25 -2, 38 (m, 1H) , 2, 68- -2, 88 (m, , 3H) , 3,86 -3,98 (m, 1H), 4,32 (d, J = 6,0 Hz, 2H) f 4, 85 (d , J = 4,1 Hz, 1H), 6, 72 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6, , 98 (t / J = 7, 5 Hz, 1H), 7, 06 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7, 34 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7, 43 (d, J = 8, 3 Hz, 2H), 7,63 (d, J = 7, 5 Hz , 1H) , 7, r 5 (s , 1H) . Peso Molecular: 380,36 MS (M+H):381A mixture of (R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -carbamic acid phenyl ester (147.3 mg, 0.52 mmol) and 4-trifluoromethoxy (99.4 mg, 0.52 mmol) in DMSO (1.5 mL) was stirred at 150 ° C for 1.5 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and ethyl acetate and water were added. The extracted organic layer was washed with water and then brine, dried over Na2 SO4, filtered, and concentrated under reduced pressure. The obtained residue was triturated with dichloromethane and hexane to give N - {(R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydronaphthalen-1-yl} -N '- (4-trifluoromethoxy-benzyl) - urea (168.0 mg, 85% yield). NMR (DMSO-d6) δ1.54-1.65 (m, 1H), 1.81-1.92 (m, 1H), 2.25-2.38 (m, 1H), 2. (D, J = 6.0 Hz, 2H), 4.85 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.86-3.98 J = 7.5 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.06 (t, J = (D, J = 8.3 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H). Molecular Weight: 380.36 MS (M + H): 381
Classe de actividade in vitro: A O isómero R foi detectado por HPLC quiral (coluna ChiralCel AD 0,49 cm x 25 cm, n-hexano/etanol = 90/10, 1,5 mL/min de fluxo) a 17,7 minutos. 77Class of in vitro activity: The R-isomer was detected by chiral HPLC (ChiralCel AD column 0.49 cm x 25 cm, n-hexane / ethanol = 90/10, 1.5 ml / min flow) at 17.7 minutes . 77
Exemplo 4-3 N-{(S)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-ilJ-N'-(4-trifluorometoxibenzil)-ureiaExample 4-3 N - ((S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -N '- (4-trifluoromethoxybenzyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral C.This example was carried out according to general method C.
Uma mistura de éster fenilico do ácido (S)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-carbâmico (85,0 mg, 0,30 mmol) e 4-trifluorometoxi-benzilamina (57,4 mg, 0,30 mmol) em DMSO (1,0 mL), foi agitada a 150 °C durante 1,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida para a temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etilo e água. A camada orgânica extraída foi lavada com água e, depois, solução salina saturada, seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi triturado com diclorometano e hexano para obter N-{(S)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-l-il}-N'-(4-trifluorometoxi-benzil)-ureia (95,0 mg, rendimento de 83%). RMN de 1ti (DMSO-d6) δ 1,54-1, 65 (m, 1H), 1,81-1,92 (m, 1H), 2,25-2,38 (m, 1H), 2, 68-2,88 (m, 3H), 3,86-3,98 (m, 1H), 4,32 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 4,85 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,98 (t, J= 7,5 Hz, 1H) , 7,06 (t, J= 6,0 Hz, 1H) , 78 7,34 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,63 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,5 (s, 1H).A mixture of (S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -carbamic acid phenyl ester (85.0 mg, 0.30 mmol) and 4-trifluoromethoxy (57.4 mg, 0.30 mmol) in DMSO (1.0 mL) was stirred at 150 ° C for 1.5 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and ethyl acetate and water were added. The extracted organic layer was washed with water and then brine, dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure. The residue obtained was triturated with dichloromethane and hexane to give N - {(S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydronaphthalen-1-yl} -N '- (4-trifluoromethoxy-benzyl) - urea (95.0 mg, yield 83%). 1 H-NMR (DMSOd 6) δ 1.54-1.65 (m, 1H), 1.81-1.92 (m, 1H), 2.25-2.38 (m, 1H) (D, J = 6.0 Hz, 2H), 4.85 (d, J = 4, 1Hz, 1H), 6.72 (d, J = 7.5Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.5Hz, 1H), 7.06 (t, J = 6.0Hz , 7.63 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.5 (s, 1H).
Peso molecular: 380,36 MS (M+H): 381Molecular weight: 380.36 MS (M + H): 381
Classe de actividade in vitro: A O isómero S foi detectado por HPLC quiral (coluna ChiralCel ad 0,49 cm x 25 cm, n-hexano/etanol= 90/10, 1,5 mL/min de fluxo) aos 13,2 minutos.Class of in vitro activity: The S-isomer was detected by chiral HPLC (ChiralCel ad 0.49 cm x 25 cm column, n-hexane / ethanol = 90/10, 1.5 mL / min flow) at 13.2 minutes .
Exemplo 4-4 N-{(R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il}-N'-(4-trifluorometilbenzil)-ureiaExample 4-4 N - {(R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl} -N '- (4-trifluoromethylbenzyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral C.This example was carried out according to general method C.
Uma mistura de éster fenilico do ácido (R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-carbâmico (150,0 mg,A mixture of (R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -carbamic acid phenyl ester (150.0 mg,
0,53 mmol) e 4-trifluorometil-benzilamina (92,7 mg, 0,53 mmol) em DMSO (2,0 mL), foi agitada a 100 °C durante 1,5 horas. A 79 mistura reaccional foi arrefecida para a temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etilo e água. A camada orgânica extraída foi lavada com água e, depois, solução salina saturada, seca sob Na2SC>4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo obtido foi triturado com diclorometano e hexano, para obter N-{(R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-l-il}-N' - (4-trifluorometil-benzil)-ureia (156 mg, rendimento de 81%). RMN de ΧΗ (DMS0-d6) δ 1, 58-1,59 (m, 1H), 1,85-1, 86 (m, 1H), 2,33-2,85 (m, 4H), 3,91-3,92 (m, 1H), 4,39 (d, J= 5,7 Hz, 2H), 4,84 (d, J = 4,1 Hz, 1H) , 6,72 (d, J = 7,25 Hz, 1H), 6,98 (t, J= 7,9 Hz, 1H), 7,12 (t, J= 6,0 Hz, 1H), 7,51-7,71 (m, 6H).0.53 mmol) and 4-trifluoromethyl-benzylamine (92.7 mg, 0.53 mmol) in DMSO (2.0 mL) was stirred at 100 ° C for 1.5 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and ethyl acetate and water were added. The extracted organic layer was washed with water and then brine, dried over Na2 SO4, filtered, and concentrated under reduced pressure. The residue obtained was triturated with dichloromethane and hexane to give N - {(R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydronaphthalen-1-yl} -N '- (4-trifluoromethyl-benzyl) (156 mg, 81% yield). NMR (DMSO-d 6) δ1.58-1.59 (m, 1H), 1.85-1.86 (m, 1H), 2.33-2.85 (m, 4H) (D, J = 5.7 Hz, 2H), 4.84 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = = 7.25 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.51-7.71 , 6H).
Peso molecular: 364,37 MS (M+H): 366Molecular weight: 364.37 MS (M + H): 366
pf: 204,3 °Cmp: 204.3 ° C
Classe de actividade in vitro: A O isómero R foi detectado por HPLC quiral (coluna ChiralCel AD 0,49 cm x 25 cm, n-hexano/etanol = 90/10, 1,5 mL/min de fluxo) aos 16,2 minutos. 80Class of in vitro activity: The R-isomer was detected by chiral HPLC (ChiralCel AD column 0.49 cm x 25 cm, n-hexane / ethanol = 90/10, 1.5 ml / min flow) at 16.2 minutes . 80
Exemplo 4-5 N-{(S)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-ilJ-N'-(4-trifluorometilbenzil)-ureiaExample 4-5 N - {(S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -N '- (4-trifluoromethylbenzyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral C.This example was carried out according to general method C.
Uma mistura de éster fenílico do ácido (S)-7-hidroxi-5,6,7, 8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-carbâmico (100,0 mg, 0,35 mmol) e 4-trifluorometil-benzilamina (61,8 mg, 0,35 mmol) em DMSO (1,5 mL), foi agitada a 100 °C durante 1,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida para a temperatura ambiente e foi adicionado acetato de etilo e água. A camada orgânica extraida foi lavada com água e solução salina saturada, seca sob Na2S04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi triturado com diclorometano e éter diisopropilico para obter N-{ (S)-7-hidroxi-5, 6,7,8-tetra-hidronaftalen-l-il}- Ν' -( 4-trifluorornetil- benzi D- ureia (109 mg, rendimento de 85% ) . RMN de :Η (DMSO- -d6) δ 1 , 58 -1,59 (m, 1H) , i, , 85- -1,86 (m, 1H) 2, 33 -2,85 ( m, 4H) , 3, 91-3 ,92 (m, 1H), 4,39 (d, J = 5,7 Hz, 2H) 4, 84 (d, J = 4,1 Hz, 1H) , 6 ,72 (d, J = 7 ,25 Hz, 1H), 6,98 (t J = 7,9 Hz, 1H), 7, 12 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,51 -7, 71 (m, 6H) .A mixture of (S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -carbamic acid phenyl ester (100.0 mg, 0.35 mmol) and 4-trifluoromethyl (61.8 mg, 0.35 mmol) in DMSO (1.5 mL) was stirred at 100 ° C for 1.5 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and ethyl acetate and water were added. The extracted organic layer was washed with water and brine, dried over Na2SO4, filtered and concentrated under reduced pressure. The residue obtained was triturated with dichloromethane and diisopropyl ether to give N - {(S) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydronaphthalen-1-yl} - [4- (4-trifluoromethyl-benzyl) 1 H NMR (DMSO-d 6) δ1.59 - 1.59 (m, 1H), 1.85-1.86 (m, 1H) 2.33-2.85 (m, 4H), 3.91-3.92 (m, 1H), 4.39 (d, J = 5.7 Hz, 2H) 4.84 (d, J = 4) (D, J = 7, 25 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 6.0 Hz , 1H), 7.51-7.71 (m, 6H).
Peso molecular: 364,37 81 MS (M+H): 366Molecular weight: 364.37 MS (M + H): 366
Classe de actividade in vitro: A 0 isómero S foi detectado por HPLC quiral (coluna ChiralCel AD 0,49 cm x 25 cm, n-hexano/etanol = 90/10, 1,5 mL/min de fluxo) aos 11,7 minutos.Class of in vitro activity: The S-isomer was detected by chiral HPLC (ChiralCel AD column 0.49 cm x 25 cm, n-hexane / ethanol = 90/10, 1.5 ml / min flow) at 11.7 minutes.
De um modo semelhante, de acordo com o Exemplo 4-1, 4-2, 4-3, 4-4 e 4-5 acima, foram sintetizados os compostos do Exemplo 4-6 a 4-54. 82In a similar manner, according to Example 4-1, 4-2, 4-3, 4-4 and 4-5 above, the compounds of Example 4-6 to 4-54 were synthesized. 82
Tabela 2Table 2
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-6 XO xó 296,3723 297 198-200 B 4-7 XX Xó 375,26833 376 220,5-222 A 1 co R/F 1 F xw OH 364,37068 365 186-187 A 4-9 XU.J OH 330,81733 331 235 Z A 4-10 xo* xó 364,37068 365 169,9 A 83 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-6 XO x 296.3723 297 198-200 B 4-7 XX X 375.26833 376 220.5-222 A 1 co R / F 1 F xw OH 364.37068 365 186-187 A 4-9 XU.J OH 330.81733 331 235 ZA 4-10 x 364.37068 365 169.9 A 83 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-11 0'“· XÓ Xó 326,39879 327 196 B 4-12 xa; xó 332,35316 333 193, 4 A 4-13 /-V ^ [ΎΥ CH, xó”" 326,39879 327 171,3 B 4-14 xcr Xó 330,81733 331 188, 7 A 4-15 a n^A N/k0 XÓ 365,26236 366 212, 7 A 84 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE MW MS (M + H) PF activity class 4-11 0 · 0 · X6 326.39879 327 196 B 4-12 x a; 332.35316 333 193, 4 A 4-13 / -V ^ [ΎΥ CH, xó "" 326.39879 327 171.3 B 4-14 x CR X X 330.81733 331 188.7 A 4-15 N / A N / A X 365.26236 366 212.7 A 84 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-16 xox xó ** 352,48066 353 199, 9 A 4-17 ΧΟχ XÓ 380,37008 381 213 A 4-18 xo: XÓ 365,26236 366 201, 4 A 4-19 XÒ 364,37068 365 218, 6 A 4-20 xó. XÓ " 356,42528 357 212 B 85 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-16 xoxo ** 352.48066 353 199.9 A 4-17 ΧΟχ X0 380.37008 381 213 A 4-18 x0: X3 365.26236 366 201.4 A 4-19 X 364.37068 365 218.6 A 4-20. XÓ " 356.42528 357 212 B 85 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-21 XÓ "tò 375,26833 376 206,4 A 4-22 XV xò ' 354,40934 355 210, 9 A 4-23 O"01* ; ^ 1Λ0 xò 386,45117 387 175, 4 C 4-24 XO* VÒ 375,26833 376 164,2 A 4-25 .XX *CÓ 341,36983 342 216,3 A 86 (Continuação) N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-26 XÓ + 432,36906 433 200,3 A 4-27 ίΎΥ0^”3 Ao ^A> xó " 356,42528 357 219, 7 C 4-28 ?* N^O Τύ 332,35316 333 140,2 C 4-29 aQX χύ 380,37008 381 149 A 4-30 ΧΟγ- Xó · 340,38225 341 278,5 c 87 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-21 X0 " t 375.26833 376 206.4 A 4-22 XV x 354,40934 355 210.9 A 4-23 O " 01 *; ^ 1Λ0 x0 386,45117 387 175.4 C 4-24 XO * VÒ 375.26833 376 164.2 A 4-25 .XX * CO 3 341.36983 342 216.3 A 86 PM NO MOLECULAR STRUCTURE (M + H) PF class of activity 4-26 X + 432.36906 433 200.3 A 4-27 (M + H) xó " 356.42528 357 219.7 C 4-28? N? O 332.35316 333 140.2 C 4-29 aQX? 380.37008 381 149 A 4-30? -X? 340.38225 341 278.5 c 87 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-31 XO, XÓ 311,38697 312 223 C 4-32 NHj Xà XÓ 311,38697 312 132,5 C 4-33 ΧΠΤ Α> Χό 368,43643 369 209,5 B 4-34 xó 11 339,44115 340 197,7-199,5 A 4-35 0 xó Γ F 398,81571 399 187,5 A 4-36 344,84442 345 >200 A 88 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-31 XO, X 311.38697 312 223 C 4-32 NH4 Xa X0 311.38697 312 132.5 C 4-33 ΧΠΤ Α > Χ 36 368.43643 369 209.5 B 4-34 x 11 339.44115 340 197.7-199.5 A 4-35 0 x Γ F 398.81571 399 187.5 A 4-36 344.84442 345 > 200 A 88 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-37 0 xó W 382,36111 383 174 A 4-38 xm, HN^O "CÓ 388,47048 389 181-183 A 4-39 jnx HN^O Xò 408,88842 409 199-201 A 4-40 JUCrV· Xo' 366,34299 367 198-200 A 4-41 CH3 "CÓ 328,38982 329 163-164 B 89 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-37 0x W 382.36111 383 174 A 4-38xm, HNO O " CO 388.47048 389 181-183 A 4-39 jnx HN-O-X0 408.88842 409 199-201 A 4-40 JUCrV · Xo '366,34299 367 198-200 A 4-41 CH3 " CO 328,38982 329 163-164 B 89 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-42 CHj HN^O Xó 389,29542 389- 391 174 A 4-43 mn' r^i) AU HN X XÓ 372,47108 373 205-206 C 4-44 358,87151 359 140-141 B 1 CHj ΗΝ'Χ XÓ 4-45 .aX "tó 396,43468 397 209,1 A 4-46 nN-vV hiA ^ Xó 346,43284 347 221,1 A 90 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-42 CH3 HN3 O X6 389.29542 389-391 174 A 4-43 m H 2 X 3 372.47108 373 205- 206 C 4-44 358.87151 359 140-141 B 1 CH 3 ΗΝ 4 X 4 4-45 a.a. > 396.43468 397 209.1 A 4-46 nN-vV hiA4 X6 346.43284 347 221, 1 A 90 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-47 JX'· HN^O XÓ 321,38218 322 147 decomp. B 4-48 ch3 xo "ού 310,39039 311 169, 6 B 4-49 CH, HN ΙΙΊ hiAo ^ XÓ 360,45993 361 137, 4 A 4-50 -tóH 375,44977 376 >200 decomp. c 4-51 0 1 Λ Λ η°ν/\ΑΗ yA/11 kA) q/NH f f 447,50486 448 159 A 91 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-47 JX '· HNO O XO 321.38218 322 147 decomp. B 4-48 ch3 xo " ○ 310.39039 311 169.6 B 4-49 CH, HN ΙΙΊ hiA02 X3 360.45993 361 137.4 A 4-50 -toH 375.44977 376 > 200 decomp. c 4-51 0 1 Λ Λ η ° ν / ΑΗ yA / 11 kA) q / NH f 447.50486 448 159 A 91 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 4-52 0 hn^n^N^5] hYyS irk q^nh f CIH 483,96583 448 83 A 4-53 HN^O 'to 344,84442 345 173, 9 A 4-54 ^.ekal HN^O rjó 344,84442 345 159,3 ANo. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 4-52 (M + H) IR (KBr): 483.96583 448 83 A 4-53 HN + O 344, 84442 345 173.9 A 4-54% NaHCO 3 344.84442 345 159.3 A
Exemplo 4-48 N-[(7R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-Ν'-{2-[4-(trifluorometil)fenil]-etiljureiaExample 4-48 N - [(7R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -N '- {2- [4- (trifluoromethyl) phenyl] ethyl] urea
9292
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral C.This example was carried out according to general method C.
Uma mistura de éster fenílico do ácido 7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-carbâmico (100,0 mg, 0,35 mmol) e 2-(4-trifluorometil-fenil)etilamina (66,7 mg, 0,35 mmol) em DMSO (1,0 mL), foi agitada a 60 °C durante 3 horas. A mistura reaccional foi arrefecida para a temperatura ambiente e a mistura foi particionada entre água e acetato de etilo. A camada orgânica foi seca sob Na2S04 e evaporada até à secura. O material em bruto foi agitado com éter dietílico e o precipitado foi filtrado e seco in vácuo, para proporcionar N-[(7R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-N'-{2- [4-(trifluorometil)fenil]etil}ureia (125 mg, rendimento de 94%). RMN de XH (DMSO-d6) δ 1,45-1,68 (dd, 1H), 2,65-2, 93 (m, 5H), 3, 4,88 (d, 1H), 6,57 (t, 1H), 7,42-7,75 (m, 6 H). Peso molecular: 378,39 (m, 1H) , 1,78-1,93 (m, 1H), 2,29 39 (dt, 2H), 3,80-4,00 (m, 1H), 6, 70 (d, 1H), 6,98 (t, 1H), MS (M+H): 379 93A mixture of 7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -carbamic acid phenyl ester (100.0 mg, 0.35 mmol) and 2- (4-trifluoromethyl- phenyl) ethylamine (66.7 mg, 0.35 mmol) in DMSO (1.0 mL) was stirred at 60 ° C for 3 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and the mixture partitioned between water and ethyl acetate. The organic layer was dried over Na 2 SO 4 and evaporated to dryness. The crude material was stirred with diethyl ether and the precipitate was filtered and dried in vacuo to provide N - [(7R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -N- '- {2- [4- (trifluoromethyl) phenyl] ethyl} urea (125 mg, 94% yield). 1 H NMR (DMSOd 6) δ 1.45-1.68 (dd, 1H), 2.65-2.93 (m, 5H), 3.88 (d, 1H), 6.57 ( t, 1H), 7.42-7.75 (m, 6 H). Molecular weight: 378.39 (m, 1H), 1.78-1.93 (m, 1H), 2.29 (dt, 2H), 3.80-4.00 (m, 1H) (D, 1H), 6.98 (t, 1H), MS (M + H): 379
Exemplo 4-49 N-[(7R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-Ν'-{2-[4-(trifluorometoxi)fenil]-etil}ureiaExample 4-49 N - [(7R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -N '- {2- [4- (trifluoromethoxy) phenyl] ethyl} urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral C.This example was carried out according to general method C.
Uma mistura de éster fenílico do ácido 7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-carbâmico (100 mg, 0,35 mmol) e 2-(4-trifluorometoxi-fenil)etilamina (72,4 mg, 0,35 mmol) em DMSO (1,0 mL) foi agitada a 60 °C durante 2,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida para a temperatura ambiente e a mistura foi particionada entre água e acetato de etilo. A camada orgânica foi seca sob Na2SC>4 e evaporada até à secura. A matéria prima foi agitada com éter dietilico e o precipitado foi filtrado e seco in vacuo para proporcionar N- [(7R)-7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-l-naftalenil]-N'-{2 - [4- (trifluorometoxi)fenil]etiljureia (109 mg, rendimento de 79%). RMN de 1H (DMSO-d6) δ 1,50-1,65 (m, 1H), 1,80-1,91 (m, 1H), 2,30 (dd, 1H), 2, 60-2, 88 (m, 5H), 3,34 (dt, 2H), 3, 85-3,97 (m, 1H), 4,81 (d, 1H), 6,55 (t, 1H), 6,70 (d, 1H), 6,98 (t, 1H), 7,30 (d, 2H), 7,38 (d, 2H) , 7,50 (s, 1H) , 7,59 (d, 1H) .A mixture of 7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -carbamic acid phenyl ester (100 mg, 0.35 mmol) and 2- (4-trifluoromethoxy-phenyl) ethylamine (72.4 mg, 0.35 mmol) in DMSO (1.0 mL) was stirred at 60 ° C for 2.5 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and the mixture partitioned between water and ethyl acetate. The organic layer was dried over Na2 SO4 and evaporated to dryness. The starting material was stirred with diethyl ether and the precipitate was filtered and dried in vacuo to afford N - [(7R) -7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-1-naphthalenyl] -N'- {2- [4- (trifluoromethoxy) phenyl] ethyl] urea (109 mg, yield 79%). 1 H-NMR (DMSOd 6) δ 1.50-1.65 (m, 1H), 1.80-1.91 (m, 1H), 2.30 (dd, 1H), 2.60-2, (M, 5H), 3.34 (dt, 2H), 3.85-3.97 (m, 1H), 4.81 (d, 1H), 6.55 (t, 1H), 6.70 (d, 1H), 6.98 (t, 1H), 7.30 (d, 2H), 7.38 (d, 2H), 7.50 (s, 1H) .
Peso molecular: 394,39 94 MS (M+H): 395Molecular weight: 394.39 94 MS (M + H): 395
Tabela 3Table 3
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade CN 1 LO H° 0 ΓΊ Λ(/γ xA F \Ast? 300,336 301 C 5-3 AA XÓ 300,336 301 204-205 B 1 LO H0n xç có * 361,241 362 196-197 B LO 1 LO ΑΛ Xó 361,241 362 A 95 (continuação)MOLECULAR STRUCTURE PM EM (M + H) PF activity class CN 1 LO H ° 0 ΓΊ Λ (/ γ xA F \ Ast? 300.336 301 C 5-3 AA X 300.336 301 204-205 B 1 LO H0n * 361,241 362 196-197 B LO 1 LO ΑΛ X 361,241 362 A 95 (continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 5-6 xo XÒ 01 296,372 297 223 C 5-7 xí' 296,372 297 B oo 1 LO xó ' 324,426 325 A CJ3 1 LO ,W" XÓ 338,454 339 A 5-10 ΛΑ xó ò 374,443 375 194-195 A 96 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 5-6 x 10 X 296,372 297 223 C 5-7 x 296,372 297 B oo 1 LOx 324.426 325 A C3 H3 LO, W " X0 338,454 339 A 5-10 ΛΑ x 374,443 375 194-195 A 96 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 5-11 aA XÒ " 0 —F 366,343 367 203-204 A 5-12 0^ A-dy XÒ 380,37 381 A 5-13 X> N^O xò N 408,242 409 226-228 A 5-14 (ί^γ0s/*1» Λο "oò 326,399 327 >192Z A 5-15 XX> n\ XÒ 328,371 329 >82Z C 97 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 5-11 aA XÒ " 0 -F 366,343 367 203-204 A 5-12 0 ^ A-dy XÒ 380.37 381 A 5-13 X> N-OXO N 408,242 409 226-228 A 5-14 (γ-γ0s / * 1) Î »326,399 327> 192Z A 5-15 XX> 328,371 329> 82Z C97 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 5-16 xf- XÒ 328,436 329 >186Z B 5-17 XXX N^O XÓ 330,362 331 >185Z A 5-18 XO lAo xó 342,398 343 203-212 B 5-19 XX fAo Xó 346,817 347 >200Z A 5-20 XT fAo Xó 298,348 299 >202Z C 98 (Continuação)No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 5-16 x F- X 328,436 329> 186Z B 5-17 XXX NOR O 330,362 331> 185Z A 5-18 XO 34 343 333 343 203 -212 B 5-19 XX fOo X6 346,817 347> 200Z A 5-20 XT f Xo 298,348 299> 202Z C 98 (Continued)
N° ESTRUTURA MOLECULAR PM EM (M+H) PF classe de actividade 5-21 A Λ XÓ 310,399 311 >223Z A 5-22 xc Λ XÓ 310,399 311 >197Z A 5-23 aA Λο Xó 310,399 311 >142Z A 5-24 χχ; Λ Xó 314,363 315 >197Z A 99No. MOLECULAR STRUCTURE PM MS (M + H) PF activity class 5-21 A Λ X0 310,399 311> 223Z A 5-22 xc Λ X0 310,399 311> 197Z A 5-23 aA Λ X 310,399 311> 142Z A 5-24 χχ; Λ X 314,363 315> 197Z A 99
Exemplo 5-1 N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il)-Ν'-(4-trifluorometoxifenil)-ureiaExample 5-1 N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) - (4-trifluoromethoxyphenyl) urea
Este exemplo foi efectuado de acordo com o método geral E.This example was carried out according to the general method E.
Uma mistura de 8-amino-l,2,3,4-tetra-hidro-naftalen-2-ol (32,6 mg, 0,20 mmol) e éster fenilico do ácido (4-trifluorometoxi-fenil)-carbâmico (59,5 mg, 0,20 mmol) em DMSO (1,0 mL), foi agitada a 100 °C durante 1,5 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e, depois, purificada por HPLC preparativa para obter N-(7-hidroxi-5,6,7,8-tetra-hidro-naftalen-l-il) -Ν'-(4-trifluorometoxi-fenil)-ureia (15,5 mg, rendimento de 21%). RMN de 1H (DMSO-dé') δ 1,61 (m, 1H) / i co (m, 1H), 2,40 (m, 1H), 2, 85 (m, 2H), 3,96 (m, 1H), 4,88 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,05 (t, J = 7,2 Hz, 1H) , 7, 28 (d, J II co Hz, 2H), 7,55 (d, J = 9,3 Hz, 2H) , 7, 63 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7, 85 (s, 1H), 9,24 (s, 1H). Peso molecular: 366,34 MS (M+H): 367 100A mixture of 8-amino-1,2,3,4-tetrahydro-naphthalen-2-ol (32.6 mg, 0.20 mmol) and (4-trifluoromethoxy-phenyl) -carbamic acid phenyl ester 59.5 mg, 0.20 mmol) in DMSO (1.0 mL) was stirred at 100 ° C for 1.5 hours. The mixture was concentrated under reduced pressure and then purified by preparative HPLC to obtain N- (7-hydroxy-5,6,7,8-tetrahydro-naphthalen-1-yl) -N '- (4-trifluoromethoxy -phenyl) -urea (15.5 mg, yield 21%). 1 H-NMR (DMSO-d 6) δ 1.61 (m, 1H), 1.40 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 2.85 (m, 2H), 3.96 1H), 4.88 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.05 (t, J = 7.2 Hz, 1H) (D, J = 7.2 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 9 Hz, 2H) 85 (s, 1H), 9.24 (s, 1H). Molecular weight: 366.34 MS (M + H): 367 100
pf: 198-200 °Cmp: 198-200 ° C
Classe de actividade in vitro: A.Class of in vitro activity: A.
De um modo semelhante, de acordo com o Exemplo 5-1 acima, foram sintetizados os compostos do Exemplo 5-2 a 5-24.In a similar manner, according to Example 5-1 above, the compounds of Example 5-2 to 5-24 were synthesized.
Lisboa, 27 de Novembro de 2007 101Lisbon, November 27, 2007 101
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