PT101263B

PT101263B - Dispositivo de vacinacao de coelhos por via parenterica contra a doenca hemorragica viral do coelho e vacinas condicionadas para utilizacao nesse dispositivo

Info

Publication number: PT101263B
Application number: PT101263A
Authority: PT
Inventors: Dominique Francois Ed Fournier; Francois Xavier Le Gros; Marcel Joseph Wittmann
Original assignee: Merial Soc Par Actions Simplif
Priority date: 1992-05-06
Filing date: 1993-05-05
Publication date: 2000-09-29
Also published as: IT1271447B; PT101263A; ES2104491A1; ES2104491B1; ITMI930827A1; FR2690838A1; ITMI930827A0; FR2690838B1

Description

D E S C R 1 Ç Ã O

A presente vacinação de hemorrágica igualmente a doença hemorrágica virai.

invenção refere-se a um coelhos por via parentérica virai (VHD) do coelho, um processo de vacinação de dispositivo de contra

Ela coelhos a doença refere-se contra a

Λ doença hemorrágica virai do coelho é uma doença fortemente letal provocada por vírus de pequenas dimensões caliciforme designado VHD (Ohlinger et al., 1990). Provoca 80 a 100¾ de mortalidade nas instalações de cunicultura nos coelhos com idades a partir de 10 semanas.

Até ao presente já foi proposta a aplicação de um certo numero de vacinas constituídas por culturas tissulares (culturas em tecidos orgânicos) do vírus convenientemente inactivado com formol ou com -propiolactona e adjuvadas com hidróxido de alumínio, saponina ou um agente auxiliar oleoso. Estas vacinas são administradas por via subcutânea ou intramuscular com agulha da seringa, o que confere uma excelente protecção mas necessita uma mudança frequente de agulha para evitar a disseminação de outros agentes patogénicos. A vacinação é uma operação delicada e dispendiosa em mão-de-obra.

A fim de evitar estes inconvenientes, a requerente experimentou proceder a vacinações com auxilio de um aparelho clássico de injecçào por jacto sem utilização de agulha, equipado com uma cabeça que possui um canal de ejecçao; mas estes ensaios não obtiveram sucesso em virtude da incapacidade do aparelho para injectar correcLamente e de maneira repetitiva a dose mínima indispensável de vacina.

Por consequência, a invenção tem como finalidade proporcionar um dispositivo de vacinação que permite realizar a vacinação contra a doença virai hemorrágica do coelho, à escala industrial, de maneira eficaz e económica.

Outro objecto vacinaçao com da invenção consiste probabilidade protecção de cada animal.

A invenção tem como objecto um que permite parentérica contra base de cultura em em realizar essa uma extremamente elevada de dispositivo de realizar a vacinação de a doença hemorrágica virai do tecidos vacinação coelhos por via coelho, à caracterizado pelo facto do vir us inactivado e por administração intradérmica, individuais com um j acto adjuvada, de compreender um aparelho de preparado para a distribuição intermédio associado referida por com uma de vários volume da fonte de vacina condicionada no mencionado volume jactos, de doses ordem de 0,2 ml alimentação protector

Por título protector entende-se confere ao sistema imune resistência contra a que para apresentar de dose.

a quantidade dos coelhos de infecção pelos vírus de vacina, contém a um títuio vacina que tratados a responsáveis pela doença hemorrágica.

Λ dose, de uma da ordem de

0,2 ml de pode ou de varias vezes, sucessivos de vacina por da ordem de vacina, exemplo, em 0,1 ml.

Por aparelho aparelho que sem agulha, por formação de um jacto sob alta pressão, acordo com uma forma de administração permite fazer por a administração j acto entende-se um intradérmica, realização aperfeiçoada

particularmente eficaz da presente invenção, utiliza-se um aparelho que tem uma cabeça com canais múltiplos e permite a administração da dose por meio de vários jactos separados, sendo o número de jactos pelo menos preferivelmente igual a três dispositivo de vacinação de acordo com a presente invenção permite assim vacinar cada coelho no interior do pavilhão da orelha com uma cadência industrial.

Os aparelhos para administração de vacinas ou outras preparações medicamentosas por jactos são em si próprios conhecidos e os peritos no assunto podem facilmente procurá-los e adaptá-los para a realização prática da presente invenção.

Um aparelho útil é, por exemplo, o vendido pela sociedade Béarn Mécanique Aviation, Billere, França sob a marca Mésoflash ou a marca Sanijet.

A pressão dos jactos é, de preferência, da ordem de 90 a 110 bar.

Por volume da dose da ordem de 0,2 ml, entende-se um volume que de preferência é igual a 0,2 ml mas que de igual forma pode ser ligeiramente diferente e, por exemplo, estar compreendido entre 0,1 e 0,3 ml.

A invenção tem igualmente como objecto o referido dispositivo que possui um recipiente contendo doses múltiplas vacinas contra a doença hemorrágica virai do coelho, à base de uma cultura tissular inactivada do vírus VHD, compreendendo um título protector num volume da ordem de 0,2 ml (definido como anteriormente) e contendo de preferência um adjuvante de hidróxido de alumínio.

A vacina é preparada de modo preferência, da ordem de SDV a apresentar em 0,2 ml.

um título, como objecto um virai hemorrágica se administrar no de processo do coelho, pavilhão da

A invenção tem igualmente vacinação contra a doença caracterizado pelo facto de orelha de cada coelho, por via intradérmica sem utilização de agulha, uma dose de vacina da ordem de 0,2 ml por jacto e nomeadamente por pluralidade de jactos, de preferência, por três jactos, de uma vacina à base de cultura tissular de VHD, de preferência, adjuvada com hidróxido de alumínio.

presente inactivada invenção pode de VHD, outras

Assim, a vacina pode compreender nomeadamente a da mixomatose viva. É particularmente importante possível associar estas da mixomatose dissolvida

De maneira quantidade mixomatose vantajosa, conveniente com adjuvada.

E iqualmente intradérmica valência duas valências, sendo a va na valência de VHD líquida.

antes da injecção, retoma-se de vacina liofilizada contra um volume de vacina líquida contra o VHD se importante constatar obtém também a que, protecção por via contra a mixomatose.

A valência da mixomatose pode, valência de Shope por exemplo, ser vivo (estirpe vacinai heteróloga do vírus de Shope contra a mixomatose) ou entáo uma valência a partir de uma estirpe vacinai homóloga tal consti tuída pela como SG-. o .

•D J

Outras vantagens e características da invenção são evidentes depois da leitura da descrição seguinte, feita a título de exemplo não limitativo e com referência ao desenho anexo, no qual a figura única representa uma vista esquemática de um dispositivo de acordo com a presente invenção.

1®) Preparação da valência de HVD

Isolou-se a estirpe AG do vírus de HVD em Outubro de 1988 a partir de dois coelhos bravos da Borgonha atingidos pela doença hemorrágica virai. 0 lote de sementeira primária do vírus é distribuído por ampolas e conservado congelado a -70*C. Ividentemente, é possível obter outras estirpes de ví rus análogas sem dificuldade por recolha a partir de coelhos doentes.

vírus é inoculado em coelhos sensíveis por via subcutâ nea ou intramuscular na proporção de 100 DL

Depois da mani festação da sintomatologia específica da doença, recolhem-se os fígados de coelhos infectados, esmagam-se e suspendem-se num tampão de fosfato adicionado com antibióticos. A suspensão do produto esmagado é em seguida clarificada por centrifu gação e depois por peneiração. A inactivação efectua-se por adição de formaldeído. 0 produto, assim inactivado, forma o princípio activo e é misturado numa cuva com hidróxido de alú mínio no seio de tampão fisiológico contendo mercuriotiolato de sódio.

£°!BE2sÍ£ào_da valência__de__VHD

Cada dose da vacina de valência VHD contém:

- Virus VHD inactivado, estirpe Αΰθθ...... q. s. para se obter no mínimo 5 DV90

- Al ^{+ + +} (sob a forma de hidróxilo)....... 0,35 mg- 0,7 mg

- Mercúrio ti o 1 ato de sódio, no máximo..............0,02 mg

- Formaldeído livre, no máximo.....................0,075 mg

-Kanamicina, no máximo

0,30 mg

- Vancomicina, no máximo

0,03 mg

- Polimixina, no máximo

0,06 mg

- Tampão fisiológico, q. s. para

.................0,2 ml

i

2°) Preparação da valência de Shope '

A estirpe de fibroma da Shope sofreu passagens sucessivas de amplificação sobre a derme de coelho e depois passagens i de adaptação sobre células IDL7 (células de derme de j láparos). 0 lote de semente primária de vírus é !

distribuído por ampolas e depois estas são liofilizadas e conservadas a baixa temperatura, inferior a 40° C.

O vírus é multiplicado sobre células IDL7 (células de derme de láparo). Efectua-se a recolha quatro dias mais tarde.

A valência é liofilizada.

Composição da valência de Shope

Cada dose de vacina da valência de Shope contém:

- Vírus de Shope, titulando após a reconstituição com a valência de VHD, no máximo .................10^2,7DICC50

- Sacorose, no máximo .........................7,5mg

- Albumina bovina, no máximo...................1,0mg

- Kanamicina, no máximo .......................0,05mg

- Polimixina, no máximo .......................0,015mg

3^β) P££Ea£a£ào_da_val_ênci_a da mixomatose de

SG vírus SG33 é proveniente de uma estirpe de fibroma da mixomatose isolada num coelho doente com mixomatose. Foi submetido a passagens através de coelhos e depois através de ovos embrionários, através de células de rins de coelho aj. temperaturas decrescentes até 33®C e finalmente através de células de embriões de galinha. A estirpe foi seguidamente submetida a passagens suplementares através de células de embriões de galinha EOP§. 0 lote de semente primária virai é distribuído por ampolas e depois liofilizado e armazenado a a - 40»C.

Composição da valência de SG„„

Cada doee de vacina contém:

Vírue SG^com um lência de VHD, é título que, após reconstituição com a va2 0 igual a, no máximo ...........10 * DICC50

Sacarose, no máximo

8,2 mg

Albumina bovina, no máximo

1,1 mg

Kanamicina, no máximo

0,055 mg

Vancomicina, no máximo .5,5 pg

4S ) Dispos£t£vo_de_acordo_com_a_£nven£ão dispositivo de acordo com a presente invenção compreende, por um lado, um aparelho de administração por jacto e, por outro lado, uma fonte para alimentação de vacina no referido aparelho.

aparelho de administração por jacto, de tipo completamente clássico, compreende uma pega (1) por cima da qual está instalado um corpo (2) em cuja extremidade anterior se encontra colocada numa câmara (3) com um volume igual a 0,2 ml A câmara (3) prolonga-se através dum filtro (4) até uma pluralidade de canais de ejecção (5) extremamente finos que atravessam a cabeça de injecção múltipla (6) do aparelho. Ó mecanismo que permite ejectar a dose contida na câmara e que forma os jactos de alta pressão compreende um êmbolo (8) que penetra na câmara, e pode ser dé um tipo qualquer, tendo sido descritoB na técnica anterior mecanismos de vários tipos.

Os mecanismos deste género compreendem geralmente 'uma mola que empurra o êmbolo (7) para diante e um meio motor, electrico, pneumático ou manual que permite puxar o êmbolo para trás para uma posição em que fica bloqueado para ser libertado quando se faz actuar um gatilho (8).

A alimentação de vacina à câmara do aparelho efectua-se com o auxílio de um recipiente contendo doses múltiplas (9) fixado na parte superior do aparelho e ligado com a câmara (3Ϊ por intermédio de um canal conveniente de tal maneira que, quando se realiza o movimento de expulsão do êmbolo (7) para diante, se interrompe a comunicação com esta fonte ao mesmo tempo que o conteúdo de 0,2 ml da câmara é expulso sob a forme de três jartos enquanto que, pelo contrário, o retorno do êmbolo para trás, depois da administração da dose, provoca a

aspiração e o enchimento da câmara com a vacina proveniente do recipiente (9). A pressão do Jacto é da ordem de 100 bar.

5^fi) Utilização do recipiente do dispositivo de acordo com a presente invenção contendo apenas a valência de_VHD

Constituem-se dois grupos de coelhos:

- grupo 1 : 10 coelhos

- grupo 2 : 3 coelhos

Cada coelho do primeiro grupo recebe uma dose de 0,2 ml por via intradérmica no pavilhão de uma das orelhas graças a dois movimentos do gatilho que aplicam 0,1 ml em dois locais de injecção âlferentes e provocam uma distribuição lntradérmlca da dose de 0,2 ml em seis pontos de injecção.

Sete dias depois da vacinação, os coelhos dos grupos e 2 recebem, cada um, por via intramuscular 10 DL__n da estirpe de vírus a ensaiar.

Os coelhos são observados quotidianamente. São autopsiados ao fim de sete dias depois do ensaio. Os critérios anatômico-patolégicos tomafios em consideração são: hepatite, pneumonia hemorrágica e hipertrofia do timo. A presença do vírus ensaiado é investigada nos fígados por hemaglutínação.

Os dez coelhos do grupo 1 mantiveram-se de perfeita saúde e não apresentaram nem sintomas nem lesões ao fim dos sete dais após a infecção, enquanto os três coelhos utilizados como testemunhas do grupo 2 morrreram ao fim de três dias após a inoculação do vírus. A investigação da presença de vírus nos dez coelhos do grupo 1 revelou-se negativa.

6²) Preparação_e_estudo_de_uma_vacina_bivalente

Associa-se um volume de dose da valência de VHD, preparada de acordo com o Exemplo 1, com uma dose da valência de Shope preparada de acordo com o Exemplo 2. A associação efectua-se retomando a valência de Shope liofilizada no meio líquido da valência de VHD. A valência de Shope poderia, ser substituída pela valência de SG^g·

A administração realiza-se exactamente da mesma maneira que no Exemplo 5.

Claims

REIVINDICAÇÕES:

la. Dispositivo de vacinação parentérica, caracterizado pelo facto de compreender um aparelho de administração por jacto (6) adequado para a distribuição intradérmica, por meio de vários jactos separados (5), de doses individuais de vacina com um volume da ordem de grandeza de 0,2 ml, compreendendo uma fonte de alimentação (9) que contém a referida vacina condicionada de modo que cada volume da vacina possui o título protector.
2a. Dispositivo de acordo com a reivindicação I, caracterizado pelo facto de ser apropriado para injectar a dose em dois tempos, mediante aplicação de dois volumes sucessivos da ordem de grandeza de 0,1 ml de vacina cada um.
3a. Dispositivo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 e 2, caracterizado pelo facto de distribuir a vacina sob a forma de, pelo menos, três j actos.
4a. Dispositivo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo facto de a pressão dos jactos estar compreendida entre cerca de 90 e 110 bar.

Lisboa,

Propriedade

Industrial ahêríco 0Λ «· ^5ωΤ·ί^ν cultura tissular do vírus VHD inactivada, caracterizada pelo facto de possuir um título protector num volume da ordem de grandeza de 0,2 ml.
6a. Vacina de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo facto de a substância veicular auxiliar ser hidróxido de alumínio.
7a. Vacina de acordo com uma qualquer das reivindicações 5 ou 6, caracterizada pelo facto de a dose possuir um título da ordem de SDV 90 num volume igual a 0,2 ml.
8a. Vacina de acordo com uma qualquer das reivindicações 5 a 7, caracterizada pelo facto de compreender, pelo menos, uma outra valência virai ou bacteriana.
9a. Vacina de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo facto de, no meio liquido da valência VHD, compreender uma valência de misomatose e, nomeadamente, a valência de Shope vivo ou uma valência homóloga, tal como