PT101026A - 6-fenil-5-amino-4-hidroxi-hexanoil-valil-guanidinas substituidas como inibidores da protease de hiv - Google Patents

Description

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MEMÓRIA DESCRITIVA

Campo do Invento 0 presente invento refere-se a inibidores de proteases codificadas em retrovírus, em particular, a inibidores da protease do vírus da Imunodeficiência Humana, codificada viralmente.

Antecedentes

Os retrovírus, isto é, os vírus da família Retroviridae, são uma classe de vírus que transportam o seu material genético como ácido ribonucleico e não como ácido desoxirribonucleicò. Também conhecidos como vírus de tumor de ARN, a sua presença tem sido associada a uma grande variedade de doenças em humanos e em animais. Crê-se que são os agentes causadores em estados patológicos associados a infecções pelo vírus do sarcoma de Rous (RSV), vírus da leucemia de murino (MLV), vírus do tumor mamário de ratinho (MMTV), vírus de leucemia de felino (FeLV), vírus da leucemia de bovino (BLV), vírus de macaco Mason-Pfizer (MPMV), vírus do sarcoma de símio (SSV), vírus da imunodeficiência adquirida de símio (SIDAS), vírus T-linfotrópico de humano (HTLV-I, -II) e vírus da imunodeficiência humana (HIV-1, HIV-2), que é o agente etiológico da SIDA (síndroma da imunodeficiência adquirida) e de complexos relacionados com a SIDA, e muitos outros. Ainda que, em muitos destes casos, os patogénios tenham sido isolados, ainda não foi desenvolvido qualquer método eficaz para o tratamento deste tipo de infecção.

De um modo geral, os tratamentos correntes para doenças re-trovirais envolvem a administração de compostos que inibem a transcriptase inversa, tais como a 3/-azido-3/-desoxitimidina e a 2',3'-didesoxicitidina. Estes tratamentos têm provado ser úteis na redução dos títulos virais e no retardamento do processo da doença mas, de um modo geral, não têm provado ser úteis na paragem ou na inversão da doença. Adicionalmente, podem ter efeitos secundários adversos e perdem a sua eficácia com o decorrer do tempo. Deste modo, são necessários novos tratamentos para doenças virais. 74 528

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Em muitos retrovírus, as proteases codificadas virafmente actuam hidrolisando os precursores de poliproteína virai e daí resultam proteínas virais funcionais. A actividade proteolítica, proporcionada pela protease codificada viralmente, no processamento das poliproteínas, não pode ser proporcionada pelo hospedeiro e é essencial ao ciclo de vida do retrovírus. Foi demonstrado que os retrovírus que não possuem uma protease ou que contêm uma sua forma mutada, carecem de infectividade. Ver Katoh et al.# Virology, 145, 280-92 (1985), Crawford et al., J. Virol., 53, 899-907 (1985) e Debouck et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 84, 8903-6 (1987). Deste modo, a inibição da protease retroviral constitui um método de terapia para doenças retrovirais. Já foram descritos métodos para exprimir proteases retrovirais em E. coli por Debouck et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 8903-06 (1987) e Graves et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 85, 2449-53 (1988) para o vírus HIV-1. A estrutura cristalina de uma protease de HIV-1 foi descrita por Miller et al., Science, 246, 1149 (1989). 0 método da substituição isostérica foi descrito como uma estratégia para o desenvolvimento de inibidores de protease para o HIV-1. Os pedidos de Patente Europeia publicados EP-A 337 714, EP-A 352 000 e EP-A 357 332, EP-A 346 847, EP-A 342 541 e EP-A 393 445 são representativos. Estratégias similares têm também sido descritas para a inibição da renina nas Patentes dos U.S. 4 713 445 e 4 661 473. Na EP-A 402 646 são descritos outros inibidores da protease de HIV que contêm um isostero simétrico. Persiste a necessidade de compostos inibidores de protease que possuam um equilíbrio favorável de potência e de propriedades farmacocinéticas.

Sumário do Invento 0 presente invento compreende compostos, que aqui depois se representam pela fórmula (I), que inibem a protease retroviral de HIV-1, e que são úteis no tratamento de infecções pelo vírus da imunodeficiência humana e no tratamento da Síndroma da Imunodeficiência adquirida (SIDA). 74 528 Ρ50043-1 -3- ///,éÀ O presente invento é também uma composição farmacêutica que compreende um composto com a fórmula (I) e um transportador far-maceuticamente aceitável. 0 presente invento constitui, adicionalmente, um método para o tratamento de uma doença retroviral, que compreende a administração, a um mamífero que o necessite, de uma quantidade eficaz de um composto com a fórmula (I).

Descrição detalhada do invento Os compostos do presente invento são representados péla fórmula (I): A-D1-D2-M —"N R’ Z Λ •R1 (I) onde R1 é R7, R7CO, R70C0 OU R7OCH(R8)CO; Z é O ou N-R2, onde R2 é H, CN ou R'CO; R5 D«l e D2 são ® ou estão ausentes; J·^ e J2 são NH, CH2 ou 0;

'J2^Sí^ E é ° Q1/ Q2 © Q3 são H, NH2 ou 0H; V é N ou C; Y é N, 0 ou S; R3 e R4 são H ou alquiloC-^g, alceniloC2_g/ cicloalquilo-C3_7, T, T-alquiloC^_6, T-alceniloC2_6 ou T-cicloalquiloC3_7,

74 528 Ρ50043—1 opcionalmente substituídos com R16; T é Ar, Het ou cicloalquiloC3_7? R5 e R6 São alquiloC]^, (CHR')n“T ou (CH2)p-U, onde U é CONH27 R7 e R8 são, independentemente, H, alquiloC1_6, cicloalqui-loC3_7, T-(CHR13)m-, T-(CH2)mCH(T)(CH2)m; R9 é 0, S ou (H, H); R' é H, alquiloC·^ ou CH2Ph; m é 0-6? n é 0-2? p é 1-4: A é H ou Ar, Het, R10 (R11R12C) m, Ar-W, Het-W ou Rl0(r1IrI2C)m-W, opcionalmente substituído por um a três grupos escolhidos de entre R13 ou alquiloC^.g-R13; W é 0=0, 00(=0), NR'C(=0), SC(=0), NR'C(=S), SO, S02, NR8S02 ou P(=0)(OR15)? R10, R11 e R12 são, independentemente: i) H, R13 ou alqui-loCi-4, alceniloC2_6/ fenilo, naftilo, cicloalquiloC3.6 ou Het, cada um opcionalmente substituído por um a três grupos R13 ou R13-alquiloC1_6, ou ii) R10 é definido como anteriormente e (R11R12C) estão ligados para formar um anel fenilo, naftilo, ci-cloalquiloC3_6 ou Het, ou iii) R10 é definido como anteriormente e R11 e R12 são, em conjunto, =0? R13 é H, nitro, alcoxiC-j^/ alquiltioC1_6/ 0(C=0)R14, C=0R15, C02R15, CON(R14)2, N(R15)2, NHC(=N)NH-A, I, Br, Cl, F, OR7 ou OH desde que, quando R13 é um substituinte do carbono adjacente a W, R13 não seja halogéneo ou OH quando W é 0C(=0) ou NHCO; R14 é H ou 3^^1003^.6? R·^ é H, alquiloC·]^ / fenilo ou fenilalquiloC^.^7 R16 é -X'-R#, -X'-(CH2)qNR17R18, X"[((CH2)r0)s]R19, CH2X"[((CH2)r0)s]R19 ou benzofurilo, indolilo, azacicloalquilo, azabiciclo-cicloalquiloC7_-j^ ou benzopiperidinilo, opcionalmente substituído com alquiloC·]^; q é 2-5? s é 1-6 e r é 1-3 em cada unidade de repetição s? X' é CH2, 0, S ou NH? X” é CH2, NR', O, S, SO ou so2? ,v -5- ,v -5- 74 528 Ρ50043-1 ,17 ___ .Jlal'»'··4»· -jf R·17 e R18 são i) alquiloC^g, opcionalmente substituído por OH, alcoxiCj.g, ou N(R7)2, ii) iguais ou diferentes e formam juntos um heterociclo de 5-7 membros contendo até dois heteroá-tomos adicionais seleccionados de entre NR, O, S, SO, S02, es- tando o referido heterociclo opcionalmente substituído com al-quiloC-i^, iii) heterociclo aromático, opcionalmente substituído com alquiloC·]^ ou N(R7)2; R" é H ou alquiloC^.^; R19 é H, alquiloC1_4, C(=0)R20, C(=0)U[(CH2)m0]nR7, P(=0) (OM*) 2, C02R20, C(=0)NR20R21, onde M* é um ião metálico mono ou divalente, e U é NR7 ou 0; R20 é alquiloC-^g ou Ar, opcionalmente substituído com um ou mais hidroxi, carboxi, halo, alcoxiC-j^, CONR72# NR72, COR7, S02NR72, CH2NR2, NR7C0R7, NR7S02R7, X"[(CH2)r0]sR7 ou CH2X"[(CH2)rO]sR7; e r21 é H, alquiloCj.g ou, em conjunto com R28, forma um heterociclo de 5-7 membros ou um heterociclo de 6 membros contendo um heteroátomo seleccionado de entre N, O e S; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Adequadamente, Z é NH. R3 0

VfE· OH R4

Adequadamente, M é

Adequadamente, R1 é H, R7C0 ou R70C0.

Adequadamente, R7 é alquiloC-^.g ou Ar-CH2 ou Het-CH2. Em particular, R·*· é H, piridilmetiloxicarbonilo, benziloxicarbonilo ou butiloxicarbonilo.

Adequadamente, R3 e R4 são alquiloC1_6, Ar-alquiloC1_4, Ar--alceniloC2_4 ou Ar-alciniloC2_4, opcionalmente substituído por R13. Preferivelmente, R3 e R4 são benzilo.

Adequadamente, R5 é alquiloC1_6 e é NH. Adequadamente, é Ala. Preferivelmente D-l e D2 estão ausentes. -6- 74 528 Ρ50043-1 $

Jl: í.'S

Preferivelmente, R6 é alquiloC^g e J2 é NH. Muito favoravelmente, E é (S)-Val.

Preferivelmente, Q1 é OH. Adequadamente, Q2 ou Q3 é H. Preferivelmente, Q2 e Q3 são ambos H.

Adequadamente, A é H ou R10(R11R12C)m-W, opcionalmente substituído por um a três grupos escolhidos de entre R3-3 ou al-quiloC^g-R13, e W é 0 ou OCO. Por exemplo, A é H, metilo, ace-tilo, benzoílo, butiloxicarbonilo, benziloxicarbonilo, 3-quino-linilmetiloxicarbonilo ou piridinilmetiloxicarbonilo. Preferivelmente, A é butiloxicarbonilo ou benziloxicarbonilo.

Compostos representativos do presente invento são: N-benziloxicarbonil,N'-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t--butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina ? N-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil)-amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina; N-acetil,N'-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil )amino-6-fenil-hexanoil-valil]-guanidina; N-t-butiloxicarbonil,Ν'-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t--butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina; N-metoxicarbonil,N'-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-bu tiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina; N-(4-piridilJmetiloxicarbonil,N'-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4--hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(s)-valil]--guanidina; N-benziloxicarbonil,N7-[(2R,4S,5S)-2-metil-4-hidroxi-5-(t-buti loxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina; e N-benziloxicarbonil,Ν'-[(2R,4S,5S)-2-propil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil )amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina.

Os compostos preferidos são a N-benziloxicarbonil,N'-[(2R, 4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil)amino-6-fe-nil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina e N-(4-piridil)metiloxicarbo-nil,N'-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil )amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina. 74 528 - 7 /7 P50043-1 V '

De acordo com o presente invento, verificou-se que uma porção com a fórmula -NH-C(=N-Z)NHR1 constitui um substituinte surpreendentemente útil para incorporação em inibidores da pro-tease de HIV-1 baseados no conceito de isostero dipéptido não hidrolisável. Quando este substituinte está localizado na posição P3’ num mimético de um substrato peptídico para a enzima protease de HIV-1 consegue-se uma potência grandemente melhorada. Os compostos do presente invento possuem propriedades farmacocinéticas favoráveis e são úteis, em particular, para o tratamento de infecções pelo vírus da imunodeficiência humana.

No presente invento incluem-se também sais de adição farma-ceuticamente aceitáveis, complexos ou pró-drogas dos compostos do presente invento. Considera-se que as pró-drogas são quaisquer transportadores ligados covalentemente que libertam a droga activa original, de acordo com a fórmula (I), in vivo. A definição de qualquer porção substituinte que pode ocorrer mais do que uma vez na fórmula (I) é independente de qualquer outra ocorrência. Pretende-se que a fórmula (I) inclua todos os estereoisómeros não racémicos únicos, que podem ocorrer , devido à presença de átomos de carbono assimétricos na molécula.

Ar, ou arilo, tal como é aqui usado, designa fenilo ou naf-tilo, ou fenilo ou naftilo, substituídos por um a três substitu-intes alquiloC^.^j, alcoxiC^_4, al<juiltioC1_4, trifluoroalquilo, guanidino, amidino, hidroxialquiloC1_4, amino, mono ou dialquil-Ci„4-amin°, carboxi, aminoalquiloC1_4, alcoxicarboniloC^.g aminocarbonilo, carboxialquiloC^.g, aminocarbonilalquiloC^g, alcoxicarbonilalquiloC1_6, Het-alcoxiC1_4, Het-alquiloC1_4, OH, Cl, Br ou I.

Het, ou heteroarilo, indica um anel de cinco membros contendo 0-2 ligações duplas, ou um anel de seis membros contendo 0-3 ligações duplas, ou um anel de nove membros contendo 0-4 ligações duplas ou um anel de dez membros contendo 0-5 ligações duplas, possuindo cada anel um a três heteroátomos escolhidos entre o grupo consistindo em azoto, oxigénio e enxofre, que são -8-

-8- W 74 528 Ρ50043-1 ~ 'J;·. Cj estáveis e estão disponíveis por síntese química convencional. Heterociclos ilustrativos incluem morfolina, tetrazolo, imida-zolo, benzimidazolo, pirrolo, indolo, piridina, pirimidina, pi-rimidona, quinolina, benzofurano, furano, benzotiofeno ou tiofe-no. O anel Het pode estar opcionalmente substituído no carbono ou no heteroátomo por um a três grupos alquiloC1_4, alceniloC2_4, alcoxiC^..^, alquiltioC^.^, trifluoroalquilo, guanidino, amidino, amino, mono- ou dialquilC1_4-amino, aminoalquiloC*!^, hidroxialquiloC1_4, aminocarbonilo, alcoxi-carboniloC-j^g, carboxi, carboxialquiloC1_6, aminocarbonil-alquiloC^g, alcoxicarbonilalquiloC-L-g, ou um grupo fenilalquiloC1_6, substituído por um a três grupos alquiloC1_4, alcoxiC1_4, alquiltioC1_4, trifluoroalquilo, OH, F, Cl, Br ou I.

CicloalquiloC3_7 inclui ciclopropilo, ciclobutilo, ciclo-pentilo, ciclo-hexilo e ciclo-heptilo. O anel cicloalquilo pode estar opcionalmente substituído por um a três grupos alquiloC1_4, alcoxiC1_4, alquiltioC1_4, trifluoroalquilo, guanidino, amidino, hidroxialquiloC1_4, amino, mono- ou dialquilC1_4-amino, carboxi, aminoalquiloC-L^, alcoxicarbo-niloC^_g, aminocarbonilo, carboxialquiloC1_g, aminocarbonil-alquiloC^g, alcoxicarbonilalquiloC-L.g, Ar-alquiloC-j^g, Het-alcoxiC1_4, Het-alquiloC1_4, OH, Cl, Br ou I.

No âmbito do presente invento é abrangida qualquer combinação acessível de até três substituintes no anel fenilo, naftilo, cicloalquiloC3_g ou Het, que seja acessível por síntese química convencional e que seja estável.

AlquiloC-L_4, tal como é aqui usado, designa metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo. AlquiloC-j^g inclui, adicionalmente, pentilo, isopentilo e hexi-lo, iso-hexilo, 3-metilpentilo, 2-metilpentilo, 1-metilpentilo, 2-etilbutilo e 1-etilbutilo.

AlceniloC2_6, tal como é aqui usado, designa alquiloC2_6 onde uma ligação simples carbono-carbono está substituída por uma ligação dupla carbono-carbono. AlceniloC2_g inclui etenilo, -9- -9- 74 528 Ρ50043-1 € //_ propenilo, butenilo, pentenilo, hexenilo e os seus isómeros.

AlciniloC2_5 designa um grupo alquilo com 2 a 6 átomos carbono onde uma ligação simples carbono-carbono está substituída por uma ligação tripla carbono-carbono. AlciniloC2_6 inclui acetileno, propino, butino, pentino, hexino e os seus isómeros.

Ar-alquiloC^g, Ar-alceniloC2_6 e Ar-alciniloC1-6 designam alquiloC^.g, alceniloC2_6 ou alciniloC1_6 onde uma ligação carbono-hidrogénio está substituída por uma ligação carbono-Ar. Het-alquiloC-j^g, Het-alceniloC2_6 e Het-alciniloC^_g designam alquiloC-j^g, alceniloC2_6 e alciniloC1_6 onde uma ligação carbono-hidrogénio está substituída por uma ligação carbono-Het.

Halogéneo representa um átomo de fluor, cloro, bromo e iodo. M* representa um ião mono- ou divalente de metal alcalino ou alcalino-terroso tal como potássio, sódio, lítio, cálcio ou magnésio.

Azacicloalquilo designa um grupo cicloalquiloC3_7 onde um átomo de carbono está substituído por um átomo de azoto tal como aziridina, azetidina, pirrolidina, piperidina ou tetra-hidroaze-pina. Azabiciclo-cicloalquiloC^-Q designa um grupo cicloalqui-1oC7_-q onde um dos átomos de carbono é substituído por um átomo de azoto. CicloalquiloC7_11 designa um anel mono- ou biciclico estável de 7 a 11 átomos de carbono, que pode estar saturado ou não saturado, e que pode estar substituído com um a três grupos alquiloC]^, alcoxiC1_4, alquiltioC1_4, trifluoroalquilo, guani-dino, amidino, OH, NR'2, Cl, Br ou I. CicloalquiloC-j.,-^ inclui ciclo-heptilo, ciclo-octilo, tetralinilo, indanilo, fenilo e naftilo.

Aminoácido designa o isómero D ou L da alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, glutamina, ácido glutâmi-co, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina ou 74 528 Ρ50043-1

-10- valina. Tipicamente, Dx e D2, se presentes, e E, podem ser aminoácidos. Usualmente, preferem-se aminoácidos lipofílicos com a configuração L, por exemplo, Ala e Vai. De um modo geral, as abreviaturas de aminoácidos seguem a Nomenclatura em Bioquímica da Comissão Conjunta IUPAC-IUB, tal como se descreve em Eur. J. Biochem., 158, 9 (1984). Quando E é um aminoácido, este está ligado ao carbonilo do isostero através do seu terminal amino. Quando D·^ é um aminoácido, este está ligado ao grupo amino do isostero através do seu terminal carboxilo.

Boc refere-se ao radical t-butiloxicarbonilo, Cbz refere-se ao radical benziloxicarbonilo, Bzl refere-se ao radical benzilo, Ac refere-se a acetilo, Ph refere-se a fenilo, EDTA é o ácido etilenodiaminatetraacético, DIEA é diisopropiletilamina, DBU é l,8-diazobiciclo[5.4.0]undec-7-eno, DMSO é dimetilsulfóxido, DMF é dimetilformamida, MeOH é metanol, pir é piridina, DMAPEC é hi-drocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida, DMAP é 4-dimetilaminopiridina, DTT é ditiotreitol, HOBT é N-hidroxi--benzotriazolo, reagente de Lawesson é 2,4-bis(4-metoxifenil)--l,3-ditia-2,4-difosfetano-2,4-dissulfureto, NMM é N-metilmorfo-lina, TBAF é fluoreto de tetrabutilamónio e THF é tetra-hidrofurano. DCC refere-se a diciclo-hexilcarbodiimida, BOP refere-se a hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxi-tris(dimetilamino)fosfónio, PPA refere-se ao anidrido cíclico do ácido 1-propanofosfónico e EDC refere-se a N-etil-N/-(dime-tilaminopropil)-carbodiimida.

Quando se administram compostos com a fórmula (I) a um animal infectado ou potencialmente infectado por um vírus, que depende de uma protease codificada viralmente para o processamento de poliproteínas virais, a replicação virai é inibida e, deste modo, retarda-se a progressão da doença.

Os compostos do presente invento são preparados por processos convencionais da química orgânica.

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Os compostos com a fórmula (I):

Z

X A-Di-Do-M —N N-R1 R’ (I) podem ser preparados por: 1) reacção de um composto com a fórmula a-d1-d2-m-oh (II) onde A, , D2 e M são definidos como para a fórmula (I)/ com quaisquer grupos reactivos protegidos, com um composto cora fórmula: H2NC(=Z)NR/-R:l onde Z, R' e R1 são definidos como para a fórmula (I), e com um reagente de acoplamento e, opcionalmente, remoção de quaisquer grupos protectores, ou 2) reacção de um composto com a fórmula: H-D χ “D 2 -M-NR ' C (=Z)NR/R1 onde , D2, Μ, Z, R' e R1 são definidos como para a fórmula (I), com quaisquer grupos reactivos protegidos, com um composto com a fórmula: A-L' onde A é definido como para a fórmula (I) e L' é um grupo que se despede, tal como halogéneo ou OH e, se necessário, com um reagente de acoplamento e, opcionalmente, remoção de quaisquer grupos protectores. São bem conhecidos na arte reagentes de acoplamento que são usados para acoplar um grupo amino com um grupo carboxilo, tais como DCC e outras carbodiimidas, DMAPEC, BOP e PPA, e estes podem ser usados opcionalmente com outros reagentes, tais como HOBT, NMM e DMAP, que podem facilitar a reacção. Os reagentes de acoplamento podem também ser reagentes que são usados para converter um grupo pobremente rejeitável, tal como OH, num éster activado ou num halogéneo. Podem-se usar cloreto ou brometo de tionilo, cloreto de oxalilo ou oxicloreto fosforoso para formar um grupo de halogéneo que se despede e podem-se usar nitrofenol, N-hidroxissuccinimida e HOBT para formar um éster activado.

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Grupos protectores adequados para os grupos amino e hidro-xilo, e reagentes para desprotecção destes grupos funcionais são descritos em Greene et al.f PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHE-SIS, Second Edition, John Wiley and Sons, New York, 1991. A desprotecção implica a remoção do grupo protector e a substituição com um átomo de hidrogénio. Em particular grupos acetilo e sililo, adequadamente substituídos, são úteis para a protecção do grupo hidroxilo. 0 grupo acetilo é normalmente removido por reacção do composto com uma base, tal como um hidróxido de metal alcalino, numa mistura de um álcool e água. O grupo sililo, tal como trimetilsililo, dimetil-t-butilsililo e t-butildifenilsill-lo, pode ser removido por um agente de fluoreto, tal como fluo-reto de tetra-alquilamónio ou por hidrólise ácida.

Grupos protectores adequados para o grupo amino são os descritos por Greene et al., como anteriormente se referiu. Os grupos' benziloxicarbonilo e t-butoxicarbonilo são grupos protectores de amino especialmente úteis. Se o grupo protector não é o grupo R-*- desejado, o grupo protector pode ser removido e o grupo amino pode ser alquilado ou acilado para conter o grupo desejado como aqui depois se descreve.

R' Q1 R4

Os grupos com a fórmula (II), onde M é ' são preparados de acordo com o Esquema 1, quer por reacção de um composto com a fórmula (IV) com um composto com a fórmula (V) e com um reagente de acoplamento; quer por reacção de um composto com a fórmula (VI) com um composto com a fórmula (VII) e com um reagente de acoplamento, onde A, D^, D2, É, Q1, Q2, Q3, R3 e R4 são definidos como na fórmula (I), com quaisquer grupos reacti-vos protegidos, e J2 é NH ou o.

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Esauema 1 R3 0*0 D2-NHJvY^Vf^0H R6 + H-Ja^COaR31 Q1 R4 (IV) (V) ^ R3 Q* 0 HaN^V^f^E-OR31 A-DrD2-0H + (VI) Q1 R4 (VII) (II)

Os adutos isosteros (IV) e (VII) são preparados de um modo similar, por reacções de acoplamento, para adicionar as porções A-D*l-D2- e -E, respectivamente. São bem conhecidos na arte, processos de preparação do isostero (VIII),

Q1 R4 (VIII) onde R30 e R31 são H, ou grupos protectores de amino e carboxi-lo, respectivamente, são bem conhecidos na arte.

Por exemplo, descrevem-se processos para a preparação de ésteres e de ácidos de 5-amino-4-hidroxi-2,5-dissubstituídos--pentanoato protegidos com a estrutura geral (IX), e das -lactonas correspondentes (X),

em Szelke et al., Patente U.s. 4 713 455; Boger et al., Patente U.S. 4 661 473; Dreyer et al., EP-A 0 352 000; Evans et al., J. Org. Chem., 50, 4615 (1985); Kempf, J. Org. Chem., 51, 3921 (1986); Fray et al., J. Org. Chem., 51, 4828 (1986); Halladay et al., Tett. Lett., 24, 4401 (1983); Wuts et -14- Ρ50043—1 al., J. Org. Chem., 53, 4503 (1988); e Szelke et al., WO 84/03044, que são aqui incorporadas como referência.

Foram descritos processos para a preparação de ésteres e ácidos de 5-amino-3,4-di-hidroxi-2,5-dissubstituídos-pentanoato protegidos, com a estrutura geral (XI),

R3 OH OH R4 (XI) por exemplo, por Thaisrivongs et al., J. Med. Chem., 30, 976 (1987), WO 87/05302 e WO 89/01488, que são aqui incorporadas como referência.

Foram descritos processos para a preparação de ésteres e ácidos de 5-amino-2,4-hidroxi-2,5-substituídos protegidos com a fórmula geral (XII), R3 ^ΗΝ^νΫ00^' OH R4 (XII) em Mettemich et al., Tet. Lett., 29, 3923 (1988), e Dellaria et al., WO 87/04349, que são aqui incorporados como referência.

Foram descritos processos para a preparação de ácidos e ésteres de 4,5-diamino-2,5-dissubstituídos protegidos com a fórmula geral (XIII), R3

(XIII) R^HN f em WO 87/02986 e WO 89/0374 que são aqui incorporadas como referência. Os compostos onde Q1 é amino podem também ser preparados a partir do intermediário 4-hidroxi correspondente, por processos comuns na arte para a conversão de um grupo hidroxilo -15- 74 528 Ρ50043-1

num grupo amino, tal como por oxidação do grupo hidroxilo, e aminação redutiva subsequente. Por exemplo, o álcool pode ser oxidado pelo método de Swern, com DMSO anidrido trifluoroacético e trietilamina, em solução de diclorometano, e a cetona correspondente é reduzida com cianoboro-hidreto de sódio e brometo de amónio, numa solução de álcool/água. v

Os compostos com a fórmula (II) onde M é são preparados a partir do composto correspondente (XIV): 0

Q1 R4 (XIV) onde o anel heterocíclico é derivado do grupo carboxilo do isos-tero (IX), que anteriormente se descreveu.

Por exemplo, um isostero de hidroxietileno com a fórmula (X) ou (XI) anteriores, pode ser convertido num heterociclo através de uma tioamida, que pode ser preparada de acordo com o Esquema 2.

Escruema 2 R3 (X) OH R4"Yt^' (xi) R30, OR"

NH3 MeOH R30, R3 O•jrVA*

(CH3C0)20 DMAP OH R4 pyrCH2CI2 (XX) R30, R3 0'sW' NHn OAc R4

Reagente de Lawesson PhH, 80°C R30,

R3 S OAc R4 (XXI) (XXII) 74 528 Ρ50043-1

-16-

Para preparar um tiazolo, onde W é S e V é C, pode-se fazer reagir a tioamida de acordo com o Esquema 3.

Esauema 3 R30. R3 S•nV/"* (CH3)2NCH(OCH3)2 OAc R4 R3 S R3°n N N=CHN(CH3)2 H OAc R4 (XXII) (XXIII)

X-CH2COR

COR N(CH3)2

R3 N

Deste modo, faz-se reagir a tioamida (XXII) com dimetilace-tal de N,N-dimetilformamida para se obter o intermediário de ti-oamidino (XXIII). Subsequentemente, faz-se reagir este intermediário com um reagente de halometilcarbonilo, adequadamente substituído, com a fórmula RCO-CH2-X, onde X é um grupo deslocável tal como um halogéneo, e R é um éster de carboxilato ou um grupo que pode ser convertido, por processos comuns de síntese, num ácido carboxílico, para se obter o 5-aciltiazolo correspondente. Se R30 é um grupo protector, mas não é o substi-tuinte desejado A-D^-D2, R30 pode ser removido e pode-se ligar o substituinte desejado por processos comuns de acilação ou alquilação como aqui depois se descreve. Reagentes de halometilcarbonilo típicos, úteis na reacção são cloroacetaldeído, iodoa-cetamida, 3-bromopiruvato de metilo e outros. Por hidrólise ou oxidação, conforme apropriado, obtém-se o ácido tiazolocarboxí-lico correspondente. Os compostos de halometilcarbonilo, RCO-CH2-X, do presente invento estão disponíveis comercialmente

- 74 528 Ρ50043-1 -17- ou podem ser obtidos por processos comuns de síntese

Os compostos com a fórmula (XIV), onde W é N-R' e V é CH, são imidazolos e são preparados de acordo com o Esquema 4.

Esquema 4 R30^ π sirW-

NH-R22 CH3-I R30s OAc R4 (XXV)

R3 S-Λ H JL_ L S-Me NR22 NH4*OAc

(XXVII)

BrCH2C0C02R31 CHCI3l Δ OAc R4 (XXVI)

(XXVIII) A preparação da tioamida substituída (XXV) é realizada de acordo com o Esquema 3, onde R^ 2 é um grupo protector ou um substituinte imidazolo incipiente. Trata-se a tioamida (XXV) com um agente de alquilação, tal como iodeto de metilo, para se obter uma tio-imida (XXVI) que se faz reagir adicionalmente com acetato de amónio para se obter a amidina substituída (XXVII). A reacção da amidina com uma halometilacetona com a fórmula R-CO--CH2--X, onde X é um grupo deslocável adequado e R é um éster de carboxilato ou um grupo que pode ser convertido num ácido carboxílico por processos comuns de síntese, provoca a ciclização para se obter o anel imidazolo. O 3-bromopiruvato de metilo é um reagente adequado para a produção do imidazolo 4--substituído que pode ser hidrolisado para se obter um ácido carboxílico.

No esquema 5 apresenta-se um processo alternativo para a preparação de imidazolos com a fórmula (XIV). -18- 74 528 Ρ50043-1

Esauema 5

H2 ι3 λ

-R3°VN acoplamen- h to de di--imida (X) (XXXI) (XXXII)

NaOH

Pd/C H

Um isostero de amino protegido e de hidroxilo protegido, tal como o isostero de hidroxietileno (X), é acoplado a um 4-amino-isoxazolo substituído na posição 3 (XXXI) para se obter um acilamino-isoxazolo (XXXII), onde R24 é hidrogénio ou um substituinte acilo incipiente capaz de ser convertido num ácido carboxílico, e R2^ é um grupo protector de hidroxilo, tal como o grupo t-butildimetilsililo. Por hidrogenação do isoxazolo obtém--se uma iminocetona que pode ser ciclizada sob condições básicas para se obter um acilimidazolo. Se R24 é um substituinte tal como hidrogénio, o produto é um 3-formil-imidazolo, que pode ser oxidado num ácido carboxílico, e opcionalmente protegido, para se obter um composto com a fórmula (XXXIV).

Um composto com a fórmula (III) onde WéNHeVéN, éum triazolo e é preparado de acordo com o Esquema 6. (segue Esquema 6) -19- Ρ50043-1

Esauema 6 R3 0

nh2 (XL) R3 0 (CH3)2NCHR5(OCH3)2 r30v

(XLI) (xxi)

(XLII) H2NNH2

AcOH, Δ

Trata-se a carboxamida (XXI), preparada como se descreveu no Esquema 2, com um dimetilacetal de dimetilamida substituído (XL), onde R25 é um substituinte que pode ser convertido num ácido carboxílico para se obter o carboximidato (XLI). Subsequentemente, trata-se o carboximidato com hidrazina que, na presença de um ácido, cicliza obtendo-se o anel de triazina. A conversão do substituinte R25 num ácido carboxílico completa a preparação de um composto de fórmula (XIV), onde V e Y são azoto.

Se se deseja um grupo que não o grupo protector para a porção A-D-L-D2-, então remove-se o grupo protector R30 e faz-se reagir o grupo amino com um reagente de alquilação ou de acilação apropriado. Para este propósito são úteis halogenetos de alquilo, halogenetos de acilo, halogenetos de sulfonilo, ani-dridos, ésteres activados e semelhantes, do grupo apropriado A, A-D1 ou A-D1-D2· Alternativamente, pode-se também usar um ácido carboxílico adequado com um reagente de acoplamento apropriado.

Se um composto final (I) do presente invento contém um grupo básico, pode-se preparar um sal de adição de ácido. Os sais de adição de ácido dos compostos são preparados de um modo convencional , num solvente adequado, a partir do composto original e de um excesso de um ácido tal como o ácido clorídrico, bromídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, maleico, succínico ou metanossulfónico. A forma do sal de acetato é especialmente -20- 74 528 Ρ50043-1 útil. Se o composto final contém um grupo ácido, podem-se preparar sais catiónicos. Tipicamente, trata-se o composto original com um excesso de um reagente alcalino, tal como um hidróxido, carbonato ou alcóxido, contendo o catião apropriado. Catiões tais como Na+, K+, Ca++ e NH4+ são exemplos de catiões presentes em sais farmaceuticamente aceitáveis. Alguns dos compostos formam sais internos ou zwiteriões que podem ser também aceitáveis.

Os compostos com a fórmula (I) são usados na preparação de um medicamente para induzir actividade antiviral em pacientes infectados com vírus susceptíveis e que requerem um tal tratamento. 0 processo de tratamento compreende a administração oral, parentérica, bucal, transdérmica, intravaginal, rectal ou por insuflação, de uma quantidade eficaz do composto escolhido, preferivelmente, disperso num transportador farmacêutico. As unidades de dosagem do ingrediente activo são seleccionadas, geralmente, na gama de 0,1 a 25 mg/kg, mas serão facilmente determinadas por um perito na arte, dependendo da via de administração, idade e condição do paciente. Estas unidades de dosagem podem ser administradas uma a dez vezes ao dia para uma infecção aguda ou crónica. Os compostos do presente invento são particularmente úteis para o tratamento do HIV-1. Não são de esperar efeitos toxicológicos inaceitáveis quando se administram compostos do invento de acordo com o presente invento.

As composições farmacêuticas dos compostos do presente invento, ou dos seus derivados, podem ser formulados na forma de soluções ou de pós liofilizados para administração parentérica. Os pós podem ser reconstituídos antes do uso pela adição de um diluente adequado ou de outro transportador farmaceuticamente aceitável. De um modo geral, a formulação líquida é uma solução aquosa, isotónica, tamponada. Exemplos de diluentes adequados são a solução salina, isotónica, normal, solução padrão de dex-trose, a 5%, em água, ou solução tamponada de acetato de sódio ou de amónio. Este tipo de formulação é especialmente adequado para administração parentérica, mas pode também ser usada para administração oral e pode ser usada num inalador ou nebulizador de dose controlada para insuflação. Pode ser desejável adicionar 74 528 Ρ50043-1

.// -21- excipientes tais como polivinilpirrolidona, gelatina, hidroxice-lulose, goma arábica, polietilenoglicol, manitol, cloreto de sódio ou citrato de sódio.

Alternativamente, estes compostos podem ser capsulados, comprimidos ou preparados na forma de uma emulsão ou xarope para administração oral. Podem-se adicionar transportadores, sólidos ou líquidos, farmaceuticamente aceitáveis, para melhorar ou estabilizar a composição, ou para facilitar a preparação da composição. Transportadores líquidos incluem xarope, óleo de amendoim, azeite, glicerina, solução salina, álcoois e água. Podem-se adicionar também agentes solubilizantes tais como dimetilsulfó-xido, etanol ou formamida. Os transportadores tais como óleos, opcionalmente com excipientes de solubilização, são especialmente adequados. Os óleos incluem qualquer líquido imiscível com água, não iónico, natural ou sintético, ou um sólido de baixo ponto de fusão, que seja capaz de dissolver compostos lipofíli-cos. Os óleos naturais tais como os triglicéridos, são representativos .

Transportadores sólidos incluem amido, lactose, sulfato de cálcio di-hidratado, terra alba, estearato de magnésio ou ácido esteárico, talco, pectina, goma arábica, ágar ou gelatina. O transportador pode também incluir um material de libertação retardada tal como monoestearato de glicerilo ou diestearato de glicerilo, sozinho ou com uma cera. A quantidade de transportador sólido varia mas, preferivelmente, estará compreendida entre cerca de 20 mg a cerca de 1 g por unidade de dosagem. As preparações farmacêuticas são preparadas de acordo com as técnicas convencionais da farmácia envolvendo trituração, mistura, granulação e prensagem, conforme necessário para formas de comprimido; ou trituração, mistura e enchimento para formas de cápsula de gelatina dura. Quando se usa um transportador líquido, a preparação estará na forma de um xarope, elixir, emulsão, ou na forma de uma suspensão aquosa ou não aquosa. Esta formulação líquida pode ser administrada directamente p.o., ou pode ser usada para encher uma cápsula de gelatina mole. .// # f-V r f"'_' ' - - Λ?.’ 74 528 Ρ50043-1 -22- S/r.

:V

Pode-se preparar uma forma de dosagem adequada para actmx-nistração oral por dissolução do péptido do Exemplo 1 (312,5 mg) em dimetilsulfóxido (1 ml) e diluição até uma concentração de 12,5 mg/ml com óleo de soja. Pode-se preparar uma forma de dosagem, adequada para administração intravenosa, por dissolução do composto do Exemplo 1 (0,02 g) em dimetilsulfóxido (1 ml) e diluição até 20 ml com uma solução de 70% de propilenoglicol/30% de etanol. 0 doseamento pode ser ajustado variando o volume administrado ou a quantidade inicial da droga dissolvida no transportador.

Para administração intravaginal ou rectal, pode-se combinar um pó pulverizado dos compostos do presente invento, com excipi-entes tais como manteiga de cacau, glicerina, gelatina ou polie-tilenoglicois e molda-se na forma de um supositório. Os pós pulverizados podem também ser formulados com uma preparação oleosa, gel, creme ou emulsão, tamponada ou não tamponada, e administrados através de um emplastro transdérmico. Estas e outras formulações farmaceuticamente aceitáveis podem ser encontradas em KE-MINGTON^S PHARMACEUTICAL SCIENCES, 18th Edition, Alfonso R. Gen-naro (ed.), Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania, E.U.A. (1990).

Podem-se conseguir efeitos benéficos por co-administração, individualmente ou em combinação, de outros agentes antivirais com os compostos inibidores de protease do presente invento. Exemplos de agentes antivirais incluem análogos de nucleósido, fosfonoformato, rifabutina, ribavirano, fosfonotionato, oligode-soxinucleótidos, castanospermina, sulfato de dextrano, in-terferão-alfa e ampligénio. Os análogos de nucleósido, que são inibidores da transcriptase inversa e que incluem a 2* ,3'-didesoxicitidina (ddC), a 2',3*-didesoxiadenina (ddA) e a 3,-azido-2/,37-didesoxitimida (AZT), são especialmente úteis. O AZT é um agente preferido. Adequadamente, as composições farmacêuticas compreendem um agente anti-viral, um composto inibidor de protease do presente invento e um transportador farmaceuticamente aceitável. -23- 74 528 Ρ50043-1 C.J// /ϊ’..

Ks' -Λ

As propriedades de inibição de protease dos compostos do presente invento são demonstradas pela sua capacidade de inibirem a hidrólise de um substrato peptídico por protease de rHIV, na gama de cerca de 1 a 1000 nM, preferivelmente menos do que 100 nM. O composto do exemplo 1 mostra um valor de IC50 menor do que 10 nM.

Os Exemplos que se seguem servem para ilustrar o presente invento. Não se pretende que os Exemplos limitem de modo algum o presente invento, mas são apresentados para mostrar como se preparam e usam os compostos do presente invento.

ACTIVIDADE ENZIMÁTICA A capacidade dos compostos do presente invento para inibirem a enzima protease de HIV-1 pode ser demonstrada usando o ensaio descrito por Dreyer et al., Proc. Natl. Acad. Sei., U.S.A., 86, 9752 (1989), Grant et al., Biochemistry, 30 8441 (1992), e EP-A 352 000. Os valores de para os compostos do presente invento estão na gama de cerca de 0,1 nM a cerca de 2,5 μΜ. Os compostos preferidos têm valores de menores do que 0,5 jtiM. Compostos preferidos têm valores de menores do que 1 nM.

INFECTIVIDADE A capacidade dos compostos do presente invento para entrarem em células infectadas com o vírus da imunodeficiência humana e para inibirem a replicação virai in vitro. pode ser demonstrada usando o ensaio descrito por Meek et al., Nature, 343, 90 (1990) e Petteway et al., Trends Pharmacol. Sei, 12, 28 (1991). Valores de IC50 representativos para os compostos do presente invento estão na gama de cerca de 1 nM a cerca de 20 μΜ. Os compostos preferidos possuem valores de TC^q menores do que 20 nM.

Os Exemplos que se seguem servem para ilustrar adicionalmente o presente invento. Não se pretende que os Exemplos limitem de modo algum o âmbito do presente invento mas são apresentados para mostrar como se preparam e usam os compostos do presente invento. -24- 74 528 Ρ50043-1

Nos Exemplos, todas as temperaturas estão em graus centígrado. indica temperatura ambiente. FAB indica espectro- metria de massa por bombardeamento com átomos rápidos. ESMS indica espectrometria de massa por ionização com pulverização com electrões. Os espectros de RMN foram registados a 250 MHz usando um espectrómetro Bruker AM 250. Celiteí^ é um auxiliar de filtração que é composto de sílica de diatomáceas lavada com ácido e é uma marca registada da Mansville Corp., Denver, Colorado. ODS refere-se a um suporte cromatográfico de sílica-gel tratado com octadecilsililo. Microsorb é um enchimento de sílica-gel preparado por Rainin Instruments Co, Woburn, Mass., possuindo um tamanho de partícula nominal de 5 μ. Zorbax é uma sílica-gel ou um enchimento de sílica-gel de octadecilsililo, possuindo um tamanho de partícula nominal de 5 μ, preparado pela DuPont Corp., Wilmington, Delaware. As multiplicidades para os espectros de RMN são indicadas como s=singuleto, d=dupleto, t-tripleto, q=quarteto, m=multipleto, dd=dupleto de dupletos, dt=dupleto de tripletos, etc., e br indica um sinal largo.

PREPARAÇÃO DE INTERMEDIÁRIOS

Preparação 1

Preparação do ácido (2R.4S.5S)-2-propil-4-(t-butildimetil)silo-xi-5-ft-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanóico a) t-butiloxicarbonilfenilalanina-N.O-dimetil-hidroxilamida

Através de um tubo de carga, adicionou-se N-metilpiperidina (24,4 ml, 0,206 mol) a uma suspensão agitada de hidrocloreto de N,0-dimetil-hidroxilamina (19,56 g, 0,2 mol) em diclorometano (118 ml) a 0°C, formando-se uma solução límpida, A. Combinaram-se Boc-fenilalanina (53 g, 0,2 mol), THF (230 ml) e diclorometano (900 ml) e arrefeceu-se até -20°C, e adicionou-se, gota a gota, com agitação, N-metilpiperidina (24,4 ml). Depois, adicionou-se, rapidamente, com agitação, através do tubo de carga, cloroformato de metilo (15,5 ml, 0,2 mol), mantendo-se a temperatura abaixo de -10’C. Adicionou-se a solução A anterior dois minutos mais tarde. Deixou-se a solução, aquecer até à temperatura ambiente com agitação, de um dia para o outro. Arrefeceu-se a 74 528 Ρ50043-1 ,-Ί >. -y_ -25- mistura até 5°C e extractou-se com duas porções de 250 ml de HC1 0,2 N frio, duas porções de 250 ml de NaOH 0,5 N e 250 ml de salmoura, secou-se a solução sobre MgS04 e concentrou-se obtendo-se o composto do título (60,37 g). [¢)1355 =31° (c = 0,958, etanol; 20°C). b) t-butiloxicarbonilfenilalanal A uma suspensão fina de LiAlH4 (0,912 g, 24,0 mmol) em éter (80 ml), a -45°C, sob Ar, adicionou-se uma solução da amida da Preparação 1 (a) (6,16 g, 20,0 mmol) em éter (20 ml) numa corrente estacionária. Após 5 min, deixou-se a mistura aquecer até +10°C durante 30 min, depois arrefeceu-se de novo até -45°C e adicionou-se, cuidadosamente, com agitação, uma solução de KHS04 (5,30 g, 39 mmol) em água (15 ml). Removeu-se o banho de arrefecimento e agitou-se a mistura espessa durante 30 min. Adicionaram-se éter (100 ml) e diclorometano (100 ml), filtrou-se a mistura através de Celit^ e lavou-se o bolo de filtração com 100 ml de éter e com 100 ml de diclorometano. Lavou-se o filtrado com três porções de 50 ml de HC1 1 N, gelado, depois secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se por evaporação rotativa a 30°C, obtendo-se o composto do título na forma de um sólido branco (4,18 g, 84%). p.f. 82-83,5°C; [a]D = +35,3° (c=l,oo, CH2C12, 25°c); RMN (CDCI3): $ 9,62 (1H, s), 7,33-7,17 (5H, m), 5,07 (1H, br), 4,42 (1H, q), 3,12 (2H, d), 1,45 (9H, s). c) (5RS. 6S^-7-fenil-6-fterc-butiloxicarbonilamino^-5-hidroxi--heot-l-eno

Carregou-se um balão de 200 ml provido de um condensador de refluxo, sob Ar, com éter seco (35 ml) e com aparas de Mg (2,16 g, 90 mmol). Adicionou-se 4-bromo-l-buteno (7,61 ml, 75 mmol) durante 25 min., a uma suspensão agitada de Mg o que causou um refluxo vigoroso. Após o refluxo ter abrandado, aqueceu-se a mistura com um refluxo ligeira durante mais 20 min. e depois arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se durante 10 min. uma solução do aldeído da Preparação 1 (b) (5,26 g, 21,1 mmol) em tolueno seco (40 ml). Após 1,5 h a 0°C extinguiu-se a mistura reaccional, homogénea límpida, cuidadosamente com HC1 3 N. Separou-se a fase de éter, extractou-se uma vez a fase aquosa com acetato de 26- // 74 528 Ρ50043-1 fr! C‘: .. etilo, lavaram-se as fases orgânicas combinadas com água e concentraram-se. Dissolveu-se o sólido amarelo resultante em metanol (50 ml) e agitou-se com NaBH4 (200 mg) durante 10 min. Diluiu-se a mistura com HC1 3 N e com água, extractou-se com diclorometano e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo num volume mínimo de diclorometano e purificou-se por cromatografia flash (150 g de sílica-gel, 20%-40% de acetato de etilo/hexano) obtendo-se o composto do título na forma de um sólido branco (5,03 g, 78%). d) (5S)-((l/SWf t-butiloxicarbonil)amino-2/-feniletil)-tetra-Ri-drofuran-2-ona A uma solução dos álcoois da Preparação 1 (c) (5,00 g, 16,4 mmol) em acetato de etilo (50 ml), adicionaram-se trietilamina (4,56 ml, 32,8 mmol), anidrido acético (3,09 ml, 32,8 mmol) e 4--dimetilaminopiridina (50 mg, 0,41 mmol). Após 3 h adicionou-se um excesso de etanol e, vários minutos mais tarde, lavou-se a mistura com HC1 3 N, NaHC03 a 5% e água, e concentrou-se até se obter um resíduo espesso. Dissolveram-se os acetatos em bruto em benzeno (35 ml) e agitou-se rapidamente, a 0°C, com água (35 ml) e ácido acético (7 ml). Adicionaram-se brometo de tetra-n-buti-lamónio (160 mg, 0,5 mmol) e KMn04 (7,9 g, 50 mmol). Deixou-se a mistura aquecer até à temperatura ambiente com agitação vigorosa e arrefecimento intermitente. Após 2 h, arrefeceu-se a mistura escura espessa até 0°C e adicionou-se solução aquosa saturada de NaHS03 (75 ml). Após 15 min de agitação, filtrou-se a mistura branca resultante através de Celit^S), separou-se a fase aquosa e extractou-se com éter. Lavaram-se com água as fases orgânicas combinadas e concentraram-se até se- obter uma espuma (6,9 g). Dissolveram-se os ácidos 4-acetoxi, em bruto, resultantes, em 100 ml de metanol e adicionou-se metóxido de sódio (ca. 10 g). Agitou-se a mistura a 25“C durante dois dias e, depois, a 60eC durante 18 h. Concentrou-se a mistura espessa, diluiu-se com diclorometano e extractou-se com HC1 a 10%. Extractaram-se as fases aquosas com diclorometano, lavaram-se com água, secaram-se sobre MgS04 e filtraram-se. Agitou-se a solução resultante dos ácidos 4-hidroxi, com ácido p-toluenossulfónico (80 mg) e com várias gramas de peneiros moleculares de 3 Â, durante 24 h. -27- 74 528 Ρ50043-1

Filtrou-se a mistura através de Celite'*» e concentrou-se até se obter um óleo espesso. Por cromatografia flash (sílica-gel, 20%-30% de acetato de etilo/hexano) obteve-se a lactona do título (2,59 g, 52% de rendimento). RMN (CDC13) S 7,25 (5H, m), 4,68 (1H, d; J = 9,7 Hz), 4,47 (1H, dt), 4,01 (1H, q), 2,91 (2H, m), 2,51 (2H, m), 2,14 (2H, m), 1,38 (9H, s). e) (3R.5S)-(fl/S)-ft-butiloxicarbonil)amino-2/-feniletil)-3--alil-tetra-hidrofuran-2-ona A uma solução de diisopropilamideto de lítio (1,2 ml, solução 1,5 M) em tetra-hidrofurano (1 ml) adicionou-se “a lactona da Preparação 1 (d) (0,250 g, 0,82 mmol) em THF anidro (2 ml) a -78°C. Após agitação durante 15 min. a -78°C, adicionou-se hexametilfosforamida (0,285 ml, 1,64 mmol) à solução. Agitou-se a solução durante vários minutos e adicionou-se brometo de alilo (0,142 ml, 1,8 mmol). Após 2 h, extinguiu-se a mistura reaccional com uma solução a 10% de HC1 e extractou-se com éter dietílico. Combinaram-se os extractos orgânicos e evaporaram-se até se obter um óleo límpido. Cromatografou-se o óleo (sílica-gel, hexano:acetato de etilo 4:1) obtendo-se o composto do título na forma de uma espuma branca (0,175 g, 62%). RMN (CDC13) S 7,35-7,10 (5H, m) , 5,80-5,55 (1H, m), 5,09 (1H, d), 5,00 (1H, s), 4,62 (1H, d(br)), 4,45 (1H, dd), 3,95 (1H, dd), 2,87 (2H, d), 2,70 (1H, m), 2,46 (1H, m), 2,21 (2H, m), 1,90 (1H, m), 1,31 (9H, s); EM (DCI/NH3) m/Z [M+NH4]+ 363,3; 307,2; 290,2; 246,2; 154,1; 120,1. f) (3R,5S)-f (l'SW t-butiloxicarbonil)amino-2/-feniletil)-3-propiltetra-hidrofuran-2-ona A uma solução da lactona da Preparação 1 (e) (0,175 g, 0,507 mmol) em metanol (5 ml) adicionou-se 10% de Pd sobre carvão activado (0,020 g). Fez-se borbulhar hidrogénio gasoso através da solução durante lhe, depois, manteve-se a solução sob uma atmosfera de hidrogénio durante 12 h. Filtrou-se a mistura através de um leito de Celitd®, com metanol, e evaporaram--se os solventes obtendo-se o composto do título na forma de um sólido branco (0,166 g, 94%). RMN (CDC13): δ 7,20-7,05 (5H, m), 5,37 (1H, d), 4,35 (1H, dd), 3,70 (1H, dd), 2,73 (2H, d), 2,48 -28- /sf c- 74 528 Ρ50043-1 (1H, m), 2,15 (lHf m)f 1,76 (1H, m), 1,58 (1H, m), 1,41-1,05 (12H, m), 0,72 (3H, t). q) ácido (2R,4S.5S)-2-propil-4-ft-butildimetil)siloxi-5-(t-buti-loxicarbonil)amino-6-fenil-hexanóico

Dissolveu-se a lactona da Preparação 1 (f) (0,166 g, 0,45 mmol) em 1,4-dioxano (2 ml) e água destilada (1 ml). A esta solução turva adicionou-se NaOH 1 N (0,523 ml, 1,1 eq.), gota a gota durante 5 min. A solução ficou límpida após a adição e, após 30 min, extinguiu-se a reacção com uma solução de ácido cítrico a 10%. Extractou-se a solução com éter dietílicò e lavaram-se os extractos orgânicos combinados com água, secaram-se sobre sulfato de magnésio, filtraram-se e evaporaram-se até se obter uma espuma branca (0,197 g).

Agitou-se a espuma branca em dimetilformamida (1,5 ml) a 25°C e adicionaram-se dimetilsililcloreto de terc-butilo (0,407 g, 5 eq.) e imidazolo (0,367 g, 10 eq.). Agitou-se a mistura sob árgon durante 16 h, diluiu-se com ácido cítrico aquoso a 10% e extractou-se com éter dietílicò. Lavaram-se os extractos orgânicos combinados com água, secaram-se sobre sulfato de magnésio, filtraram-se e evaporaram-se até se obter um óleo.

Agitou-se o óleo resultante em tetra-hidrofurano (9 ml), ácido acético (9 ml) e água (3 ml) durante 3 h. Evaporou-se o THF in vacuo e diluiu-se a solução restante com água e extractou-se com éter dietílicò. Secaram-se os extractos orgânicos combinados sobre sulfato de magnésio, filtraram-se e evaporaram-se obtendo-se uma espuma branca que foi cromatografada (sílica-gel, diclorometano:metanol 50:1). 0 composto do título foi isolado na forma de um sólido branco (0,135 g, 59%). RMN (CDC13): δ 7,35-7,08 (5H, m), 4,70 (1H, d), 3,91 (1H, dd), 3,70 (2H, m) , 2,95-2,60 (2H, m) , 2,42 (2H, m), o H (1H, m), 1,51 (2H, m), 1,35-1,10 (12H, m), 0,90 (9H, s), 0,79 (3H, t), 0,07 (6H, d); EM (DCI/NH3): (M+H)+ 480,4 ; 441,3; 424,3; 380,3; 362,3; 322,2; 248,2. 74 528 Ρ50043-1

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Preparação 2

Pelo procedimento que se descreveu na Preparação 1, com a excepção de se ter substituído o brometo de alilo no passo 1 (e) por: (a) iodeto de metilo, (b) brometo de benzilo, (c) brometo de metalilo, (d) brometo de isobutilo ou (e) brometo de n-propilo, prepararam-se os compostos seguintes: (a) ácido (2R,4S,5S)-2-metil-4-(terc-butildimetilsililoxi)--5-(terc-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanóico; (b) ácido (2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-(terc-butildimetilsili-loxi)-5-(terc-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanóico; (c) ácido (2R,43,53)-2-metalil-4-(terc-butildimetilsililò-xi)-5-(terc-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanóico; (d) ácido (2R,4S,5S)-2-isobutil-4-(terc-butildimetilsililo-xi)-5-(terc-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanóico; e (e) ácido (2R,4S,5S)-2-propil-4-(terc-butildimetilsililo-xi)-5-(terc-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanóico

Preparação 3

Preparação do éster de metilo da (2R.4S,5S)-2-fenilmetil-4--(terc-butildimetilsililoxi)-5-(t-butiloxicarbonilamino)-6--fenil-hexanoil-valina A uma solução de ácido (2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-(terc--butildimetilsililoxi)-5-(terc-butiloxicarbonil)amino-6-fenil--hexanóico (0,167 mmol) em tetra-hidrofurano (1 ml), a -40“C sob árgon, adicionou-se N-metilmorfolina (0,027 ml, 0,25 mmol) e cloroformato de isobutilo (0,022 ml, 0,167 mmol). Após agitação durante 15 min. a -40°C, adicionaram-se N-metilmorfolina (0,027 ml, 0,25 mmol) e hidrocloreto do éster de metilo de valina (0,049 g, 0,183 mmol). Aqueceu-se a mistura a 25°C e agitou-se sob árgon durante 14 h.

Diluiu-se a mistura com acetato de etilo e lavou-se suces-sivamente com HC1 a 5%, solução aquosa de bicarbonato de sódio a 5% e com solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e evaporou--se até se obter um resíduo semi-sólido. Cromatografou-se o resíduo (sílica-gel, diclorometano:metanol) obtendo-se o composto do título. 74 528 Ρ50043-1 -30-

EXEMPLOS c Λ/' «V <9'··7

Exemplo 1 v

Preparação da N-benziloxicarbonil,Ν'-Γ(2R.4S.5S)-2-fenilmetil-4--hidroxi-5-f t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-va-lill cruanidina (2R.4S.5S)-2-fenilmetil-4-(t-butildimetilsililoxi)-5-(t-buti-loxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoilvalina A uma solução de (2R,4S,5S)-2-4-(t-butildimetilsililoxi)-5--(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-valina (0,183 g, 0,285 mmol) (1) em MeOHí^O 1:1 (7 ml), adicionou-se NaOH 2,5 "M (0,120 ml). Agitou-se a mistura reaccional durante 20 h à Tamb>. Concentrou-se a solução in vacuo até se obter um sólido húmido e adicionou-se HCl 0,05 N. Extractou-se a mistura com acetato de etilo e lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se sobre MgS04 e concentrou-se até se obter um óleo incolor (0,175 g, 98%). b) N-benziloxicarbonil,N7-r(2R.4S,5S)-2-fenilmetil-4-ft-butil-dimetilsililoxi)-5-f t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-valil 1 cruanidina A uma solução do composto do Exemplo 1 (a) (0,175 g, 0,28 mmol) em diclorometano (10 ml) adicionou-se Cbz-guanidina (0,065 g, 0,335 mmol), HOBt (0,010 g) e hidrocloreto de l-(3-dimetila-minopropil)-3-etilcarbodiimida (0,065 g, 0,335 mmol). Agitou-se a mistura reaccional durante 20 h à , depois diluiu-se com diclorometano e lavou-se com NaHC03 e salmoura, secou-se sobre K2C03 e concentrou-se até se obter um óleo incolor. Por cromato-grafia (sílica-gel, hexano:acetato de etilo 2:1) obteve-se o composto do título na forma de um óleo incolor (0,18 g, 80%). RMN-H1 (250 MHz, CDC13) S 0,1 (S, 6H), 0,82 (d, J=2,6 Hz, 3H), 0,89 (d, J=2,6 Hz, 3H), 0,93 (s, 9H), 1,31 (s, 9H), 1,4-2,1 (m, 4H), 2,4-2,95 (m, 4H), 3,7 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 5,17 (S, 2H), 6,19 (m, 1H), 6,95-7,4 (m, 15H). c) N-benziloxicarbonil,N/-f(2R.4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-- (t-butiloxicarbonil) amino-6-f enil-hexanoilvalill cruanidina A uma solução do composto do Exemplo 1 (b) (0,117 g, 0,146 74 528 Ρ50043-1 σ. Jy·- ./¾ Cfc '* ;

-31-mmol) em THF (7 ml), adicionou-se TBAF (1,0 M em THF, 0,17 ml). Aqueceu-se suavemente a mistura reaccional a 50°C durante 5 h e, depois, arrefeceu-se até à Tamb. e agitou-se à Tamt)e durante 20 h. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se com água/ salmoura, secou-se sobre K2C03 e concentrou-se obtendo-se um óleo incolor. Este foi cromatografado (sílica-gel, 3% de MeOH/CH2Cl2) obtendo-se o composto do titulo na forma de um sólido branco (0,032 g, 35%). EM m/e 688 [M+H]+; jRMN-H1 (250 MHZ, CDC13) δ 0,8 (t, J=2,5 HZ, 6H), 1,38 (S, 9H), 1,5-2,2 (m, 4H), 2,55-3,0 (m, 4H), 3,55 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 4,29 (m, 1H) , 4,93 (m, 1H), 5,13 (s, 2H), 6,09 (m, 1H), 6,9-7,35 (m, 15H), 8,7 (br m, 1H).

Exemplo 2

Preparação da N-f(2R.4S.5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-ft-butilo-xicarbonil) amino-6-fenil-hexanoil-(S) -valil 1 -cruanidina (5) A uma solução do composto do Exemplo 1 (c) (0,015 g, 0,0218 mmol) em etanol (2 ml), adicionou-se 10% Pd/C (0,015 g). Colocou-se a mistura reaccional sob H2 num balão sob pressão e agitou-se de um dia para o outro à Τ&Βιρ. . Filtrou-se a mistura através de Celite ® e concentrou-se até se obter um sólido branco (0,01 g, 82%). Purificou-se o composto do título por HPLC preparativa (Microsorb Sio2, gradiente, 0%-25% isopropanol/di-clorometano). EMN-H1 (250 MHz, CDCI3) δ 0,62 (d, J=2,8 Hz, 3H), 0,76 (d, J=2,8 HZ, 3H), 1,36 (S, 9H), 1,7 (m, 2H), 2,05 (m, 1H), 2,8 (4H), 3,7 (m, 3H), 4,08 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 7,2 (m, 10H).

Exemplo 3

Preparação da N-acetil.N*-Γ(2R.4S.5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5--(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil1-quanidina a) N- Γ(2R. 4S,5S)-2-fenilmetil-4-t-butildimetilsiloxi-5-(t-buti-loxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-valill-quanidina A uma solução do Composto do Exemplo 1 (b) (0,57 g, 0,71 mmol) em EtOAc, adicionou-se Pd/C (10%, 0,5 g). Colocou-se a mistura sob uma atmosfera de hidrogénio e agitou-se durante 20 h à TaMb>. Filtrou-se a mistura através de Celit^Se concentrou-se até se obter um óleo incolor. Usou-se o óleo sem qualquer puri- -32- 74 528 Ρ50043-1 ficação adicional. b) N-acetil.N#-r(2R,4S.5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxi-carbonil) amino-6-fenil-hexanoil-valil 1 -cruanidina A uma solução do composto do Exemplo 3 (a) (0,115 g, 0,17 mmol) em CH2Cl2, adicionou-se trietilamina (0,019 g, 0,19 mmol) e anidrido acético (0,019 g, 0,19 mmol). Agitou-se a mistura reaccional durante 2 h à Tamfc>.· Diluiu-se a mistura com CH2C12, lavou-se com NaHC03, água e salmoura. Còncentrou-se esta solução e cromatografou-se (sílica-gel, hexano:EtOAc 2:1) obtendo-se duas fracções. A fracção de Rf mais elevado continha uma mistura e a fracção de Rf mais baixo era constituída por mais do que 95% de um único isómero, tal como foi determinado por HPLC e por RMN.

Tratou-se o isómero de Rf mais baixo (0,035 g, 0,049 mmol) com TBAF (1 M em THF, l ml) e agitou-se durante 4 h à . Di-luiu-se a mistura com CH2C12, lavou-se com água e com salmoura, secou-se sobre K2C03 e concentrou-se até se obter um sólido esbranquiçado. Cromatografou-se o sólido (sílica-gel, gradiente em degrau, hexanotEtOAc 2:1, EtOAc), obtendo-se o composto do título (0,015 g). A pureza isomérica por HPLC e RMN é superior a 95% (Microsorb 0DS, 20% de água/metanol). RMN-H1 (250 MHz, CDC13) δ 0,81 (d, J=2,8 Hz, 3H), 0,88 (d, J=2,8 Hz, 3H), 1,38 (S, 9H), 1,8 (m, 1H), 2,2 (m, 4H), 2,8 (4H), 3,7 (m, 3H), 4,47 (m, 1H), 4,96 (m, 1H), 6,37 (m, 1H), 7,2 (m, 10H)? EM m/e 596,4 [M+H]+.

Exemnlo 4

Preparação da N-t-butiloxicarbonil,Ν/-Γ(2R.4S,5S^-2-fenilmetil--4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(R)-vali 1 1 -cruanidina; e N-t-butiloxicarbonil.Ν/-Γ(2R.4S.5S^-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t--butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valill-cmanidina A uma solução do composto do Exemplo 3 (a) (0,045 g, 0,0674 mmol) em THF, adicionou-se pirocarbonato de t-butiloxicarbonilo (0,015 g, 0,07 mmol) e agitou-se durante 6 h à Tamb<. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com NaHC03 e com salmoura, secou- -33- 74 528 Ρ50043-1 -se sobre K2C03 e concentrou-se até se obter um óleo. Cromato-grafou-se o óleo (sílica-gel, hexano:EtOAc 4:1) e concentrou-se. Depois, tratou-se o óleo resultante com TBAF (l M em THF, 1 ml) e agitou-se durante 2 h à TaTTlh . Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água e com salmoura, secou-se sobre K2C03 e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo em MeOH e filtrou-se através de uma coluna de octadecil-sílica-gel e concentrou-se. Cromatogra-fou-se o resíduo (CCF) preparativa de sílica-gel, hexano:EtOAc 1:1) obtendo-se 2 fracções. A fracção com o valor de Rf mais elevado corresponde à R-valina e a fracção com o Rf mais baixo à S-valina (esteroquímica absoluta da posição valina atribuída como tentativa). A análise por HPLC mostra que cada isómero tem uma pureza superior a 95% (Zorbax ODS, 25% de água/metanol). Isómero 1 (R-Val): RMN-H1 (250 MHz, CDC13) δ 0,52 (d, J=2,8 Hz, 3H), 0,55 (d, J=2,8 Hz, 3H), 1,39 (s, 9H), 1,43 (s, 9H), 1,58 (m, 2H), 2,25 (m, 1H), 2,8 (4H), 3,5-3,8 (m, 2H), 4,33 (m, 1H), 4,97 (m, 1H), 5,58 (m, 1H), 7,2 (m, 10H).

Isómero 2 (S-Val): RMN-H1 (250 MHz, CDCl3) δ 0,75 (d, J=2,8 Hz, 3H), 0,85 (d, J=2,8 HZ, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,52 (s, 9H), 1,7 (m, 2H), 2,15 (m, 1H), 2,8 (4H), 3,6-3,8 (m, 2H), 4,25 (m, 1H), 4,95 (rn, 1H), 6,12 (m, 1H), 7,2 (m, 10H). A atribuição estereoquímica é uma tentativa com base na bioactividade, presumindo-se que o isómero mais activo tem a configuração S.

Exemplo 5

Preparação da N-metoxicarbonil.Ν'-Γ(2R,4S.5S\-2-fenilmetil-4-hi-droxi-5-(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-f S)-valil1--cruanidina; e N-metoxicarbonil.Ν'-f(2R.4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil ^amino-6-f enil-hexanoil- (R^ -valil ] -cruanidina A uma solução do composto do Exemplo 3 (a) (0,049 g, 0,073 mmol) em CH2C12 adicionou-se trietilamina (0,007 g, 0,07 mmol) seguida de cloroformato de metilo (0,007 g, 0,07 mmol) e agitou--se a mistura durante 2 h à Tamb>. Diluiu-se a mistura com CH2C12, lavou-se com NaHC03 e com salmoura, secou-se sobre K2C03 e concentrou-se até se obter um óleo. Cromatografou-se o óleo (sílica-gel, hexano:EtOAc 2:1) e concentrou-se. Tratou-se o óleo 74 528 Ρ50043-1 -34-

resultante com TBAF (1 M em THF, 1 ml) e agitou-se durante 2 h à Tamb. Diluiu-se a mistura com CH2C12, lavou-se com água e com salmoura, secou-se sobre K2CC>3 e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo em MeOHf filtrou-se através de uma coluna de octadecil-sílica-gel e concentrou-se. Cromatografou-se o resíduo (CCF preparativa de sílica-gel, hexano:EtOAc 1:1) obtendo-se 2 fracções. A fracção com o valor de Rf mais elevado corresponde à R-valina e a fracção com Rf mais baixo à S-valina (estereoquí-mica absoluta da posição valina atribuída como tentativa). A análise por HPLC mostra que cada isómero tem uma pureza superior a 95% (Zorbax ODS, 25% de água/metanol).

Isómero 1 (R-Vl): RMN-H1 (250 MHz, CDCI3) S 0,46 (d, J=2,8 Hz, 3H), 0,59 (d, J=2,8 Hz, 3H), 1,32 (s, 9H), 1,55 (m, 2H), 2,25 (m, 1H), 2,8 (4H), 3,6-3,9 (m, 3H), 3,69 (s, 3H), 4,32 (m, 1H), 5,00 (m, 1H), 5,43 (m, 1H), 7,2 (m, 10H); EM i/e 612,4 [M+H] + . Isómero 2 (S-Val): RMN-H1 (250 MHz, CDCI3) δ 0,8 (d, J=2,8 Hz, 3H), 0,82 (d, J=2,8 Hz, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,9 (m, 2H), 2,2 (m, 1H), 2,8 (4H), 3,6-3,9 (m, 3H), 3,75 (S, 3H), 4,37 (m, 1H), 4,9 (m, 1H), 6,00 (m, 1H), 7,2 (m, 10H); EM m/e 612,4 [M+H] + . A atribuição estereoquímica é uma tentativa com base na bioacti-vidade, presumindo-se que o isómero mais activo tem a configuração S.

Exemplo 6

Preparação da N-(4-PÍridil^metiloxicarbonil.Ν'-Γ(2R.4S,5S)-2-fe-nilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil--fR^-valill-quanidina; e N-(4-PÍridil^metiloxicarbonil,Ν'-f(2R.4S,5S)-2-fenilmetil-4-hi-droxi-5-(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil1--cruanidina A uma solução do composto do Exemplo 3 (a) (0,061 g, 0,0913 mmol) em CH2C12 adicionou-se O-piridil-O-(p-nitrofenil)carbonato (0,038 g, 0,0913 mmol) e trietilamina (0,0092 g, 0,0913 mmol). Agitou-se a mistura reaccional de um dia para o outro à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reaccional com CH2C12 e la-vou-se com NaHC03, água e salmoura, e secou-se sobre K2C03. Concentrou-se até se obter um óleo e cromatografou-se (sílica-gel, CH2Cl2/MeOH 95:5) obtendo-se um óleo incolor. A este óleo 74 528 Ρ50043-1

ÓI // 7f -35- adicionou-se THF (2 ml) e TBAF em THF (2 ml de uma solução 1 M). Agitou-se a mistura reaccional durante 4 h e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a solução com NaHC03, com água e com salmoura, secou-se sobre K2C03 e concentrou-se até se obter um óleo amarelo. Por cromatografia (CCF preparativa em sílica-gel, CH2C12: :MeOH 95:5) obteve-se um óleo incolor. Depois, purificou-se este material por HPLC preparativa (ultrasphere ODS, 22% de água/ /metanol). A concentração das fracções apropriadas originou dois compostos, ambos sólidos brancos.

Isómero 1 (S-Val): RMN-H1 (250 MHz, CDC13) 8 0,8 (m, 6H), 1,27 (s, 9H), 1,68 (m, 2H), 1,95 (m, 1H), 2,5-3,0 (m, 5H), 3,58 (m, 2H), 4,08 (m, 1H), 5,13 (S, 2H), 7,1 (m, 10H), 7,32 (d, J=6Hz, 2H), 8,38 (d, J=6HZ, 2H); EM m/e 689,2 [M+H]+.

Isómero 2 (R-Val); RMN-H1 (250 MHz, CDC13) 8 0,6 (m, 6H), 1,23 (s, 9H), 1,55 (m, 1H), 1,69 (m, 1H), 1,92 (m, 1H), 2,5-3,0 (m, 5H), 3,43 (m, 1H), 3,6 (m, 1H), 4,08 (m, 1H), 5,14 (s, 2H) , 7,1 (m, 10H), 7,35 (d, J=5,4Hz, 2H), 8,41 (d, J=5,4Hz, 2H). A atribuição estereoquímica é uma tentativa com base na bioacti-vidade, presumindo-se que o isómero mais activo tem a configuração S.

Exemplo 7

Preparação da N-benziloxicarbonil,Ν/-Γ(2R.4S.5S)-2-metil-4-hi-droxi-5-f t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-fS)-valill--cnianidina; e N-benziloxicarbonil ,N# - Γ (2R. 4S. 5S Ϊ -2-metil-4-hidroxi-5- (t-butiloxicarbonil ) amino-6-fenil-hexanoil-f R) -valill -cnianidina a) éster de metilo da (2R.4S.5S)-2-metil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil )amino-6-fenil-hexanoil-(R)-valina O composto da Preparação 2 (a) (136,0 mg, 0,3 mmol) foi dissolvido em DMF seca e tratado sucessivamente com l-hidroxibenzotriazolo (44,6 mg, 0,33 mmol), hidrocloreto do éster de L-valina-O-metilo (50,3 mg, 0,3 mmol) hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (57,5 mg, 0,3 mmol) e N,N-diisopropiletilamina (38,8 mg, 0,3 mmol). Agitou-se a mistura reaccional de um dia para o outro à temperatura ambiente sob árgon. Removeu-se a DMF in vacuo e dissolveu-se o resíduo em 74 528 Ρ50043-1 -36- dv:,/......'-

EtOAc, lavou-se com H20, HC1 1 N, H20, NaHC03 a 5% e solução saturada de NaCl, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se até se obter um resíduo sólido, amarelo, pegajoso. Purificou-se o resíduo por cromatografia flash (sílica-gel, hexano:EtOAc 4:1) obtendo-se o composto do título na formá de um sólido branco pegajoso (65,0 mg, 39%). RMN-H1 (CDC13, 250 MHz) 5 7,35-7,15 (m, 5H), 6,15 (d, 1H), 4,7 (d, 1H), 4,45 (m, 1H), 3,95 (br m, 1H), 3,7 (S, 3H), 2,8 (d, 2H), 2,45 (br m, 1H), 2,1 (m, 1H), 1,8 (m, 2H), 1,55 (m, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,25 (d, 3H), 0,95 (s, 9H) , 0,85 (2d, 6H), 0,1 (d, 6H)? CCP Rf 0,23 (hexano:EtOAc 4:1). b) (2R.4S.5S}-2-metil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil^amino-6--fenil-hexanoil-(R)-valina

Dissolveu-se o composto do Exemplo 7 (a) (65,0 mg, 0,115 mmol) em MeOH (4,0 ml) e a esta solução adicionou-se 0,18 ml de NaOH 2,5 N (18,4 mg, 0,46 mmol). Agitou-se a mistura reaccional de um dia para o outro à TamtK e concentrou-se até se obter um semi-sólido branco. Redissolveu-se o semi-sólido em H20, acidi-ficou-se até pH 3,5 com HC1 3,0 N, extractou-se com EtOAc, lavou-se com solução saturada de NaCl, secou-se sobre MgSO^, filtrou-se e concentrou-se até se obter um sólido branco (64,6 mg, 100%). RMN-H1 (CDCI3, 250 MHz) 57,5 (d, 1H), 7,35-7,15 (m, 5H), 5,15 (d, 1H), 4,7 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 2,7 (m, 1H), 2,25 (br m, 2H), 1,7 (m, 1H), 1,6 (m, 1H), 1,35 (S, 9H), 1,2 (d, 3H), 0,95 (s, 9H), 0,85 (d, 3H), 0,75 (d, 3H), 0,1 (d, 6H). c^ N-benziloxicarbonil,Ν#-Γ(2R.4S,5S^-2-pronil-4-hidroxi-5-(t--butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-fR.S)-valil1-cmanidina

Dissolveu-se o composto do Exemplo 7 (b) (64,6 mg, 0,117 mmol) em DMF seca e tratou-se sucessivamente com 1-hidroxibenzotriazolo (19,0 mg, 0,14 mmol), hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (22,7 mg, 0,117 mmol), carbobenziloxiguanidina (22,6 mg, 0,117 mmol) e N,N-diisopropiletilamina (15,1 mg, 0,117 mmol). Agitou-se a mistura reaccional de um dia para o outro à temperatura ambiente sob árgon. Removeu-se a DMF in vacuo e dissolveu-se o resíduo em EtOAc, lavou-se com H20, HC1 1,0 N, H20, NaHC03 a 5% e solução -37- 74 528 Ρ50043-1 saturada de NaCl, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se até se obter um sólido branco (70f2 mg, 83%). RMN-H1 (CDC13, 250 MHz) 5 7,4-7,05 (m, 10H), 6,45 (d, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,8 (m, 1H), 4,4 (br i, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 2,8 (d, 2H), 2,5 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 1,85 (m, 1H), 1,55 (m, 1H), 1,30 (s, 9H), 1,25 (d, 3H), 0,95 (s, 9H), 0,9 (d, 3H), 0,85 (d, 3H), 0,1 (d, 6H), CCF RE 0,65 (hexano:EtOAc 1:1). d) N-benziloxicarbonil.N/-r(2R.4S.5S)-2-metil-4-hidroxi-5-(t-bu-tiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-S-valil'| -cruanidina; e N-benziloxicarbonil, N* - Γ (2R. 4S, 5S) -2-metil-4-hidroxi-5-(t-buti-' loxicarbonil) amino-6-f enil-hexanoil- (R) -valil ~| -guanidina

Dissolveu-se o composto do Exemplo 7 (c) (70,2 mg, 0,097 mmol) em THF (2,0 ml) e tratou-se com fluoreto de tetrabutilamó-nio (1 M em THF, 2 ml, 2,0 mmol). Agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente, de um dia para o outro, sob árgon. Di-luiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com NaHC03 a 5%, H20 e solução saturada de NaCl, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se até se obter um sólido ligeiramente corado. Puri ficou-se o resíduo por cromatografia flash (sílica-gel 4% de CH30H/CH2Cl2) obtendo-se o composto diastereomérico do título. Isómero 1: RMN-H1 (CDC13, 250 MHz) S 7,35-7,1 (m, 10H), 7,05 (m, 2H), 6,0 (m, 1H), 5,1 (d, 2H), 4,95 (d, 1H), 4,5 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 2,7 (m, 2H), 2,45 (br, 1H), 1,75 (m, 1H), 1,55 (br, 1H), 1,3 (s, 9H), 1,25 (d, 2H), 1,15 (d, 3H), 1,0 (d, 3H), 0,9 (d, 3H); CCF Rf 0,57 (5% CH30H: CH2C12); EM m/e 612 [M+H]+. Isómero 2: RMN-H1 (CDC13, 250 MHz) S 7,4-7,05 (m, 10H), 6,3 (br s, 1H), 5,1 (d, 2H), 5,0 (d, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,7 (m, 2H), 2,8 (d, 1H), 2,7 (m, 2H), 2,3 (m, 1H) , 2,0 (m, 1H), 1,65 (m, 2H) , 1,4 (s, 9H), 1,15 (d, 3H), 0,95 (d, 3H), 0,9 (d, 3H); CCF Rf 0,41 (5% CH30H/CH2C12); EM m/e 612 [M+H]+.

As atribuições estereoquímicas são feitas com base na bioactivi-dade, presumindo-se que o isómero mais potente é o isómero S--Val. -38- Ρ50043-1

Exemplo 8 \

Preparação da N-benziloxicarbonil,Ν'-Γf2R.4S.SS^^-propil-^r-hi-droxi-S- (t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil1--cruanidina; e N-benziloxicarbonil.Ν'-Γ f 2R.4S.5S)-2-propil-4-hidroxi-5-(t-buti-loxicarbonil) amino-6-f enil-hexanoil- -valil ~) -cmanidina a) éster de metilo de (2R.4S,5S)-2-propil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil )amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valina O composto da preparação 2 (e) (136,6 mg, 0,285 mmol) foi dissolvido em DMF seca e tratado, sucessivamente, cfõm 1-hidroxibenzotriazolo (46,2 mg, 0,342 mmol), hidrocloreto do éster de L-valina-O-metilo (47,8 mg, 0,285 mol), hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (54,7 mg, 0,285 mmol) e N,N-diisopropiletilamina (36,8 mg, 0,285 mmol). Agitou-se a mistura reaccional de um dia para o outro à temperatura ambiente sob árgon. Removeu-se a DMF in vacuo e dissolveu-se o resíduo em EtOAc, lavou-se com H20, NH4C1 1,0 M, H20, NaHC03 a 5% e solução saturada de NaCl, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se obtendo-se um sólido. Purificou-se o sólido branco por cromatografia flash (sílica-gel, hexano:EtOAc 4:1) obtendo-se o composto do título na forma de um sólido branco (36,7 mg, 22%). EMN-H1 (CDC13, 250 MHz) δ 7,35-7,1 (m, 5H), 6,05 (d, 1H), 4,75 (d, 1H), 4,5 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,7 (s, 3H), 2,8 (m, 2H), 2,25 (m, 1H), 2,1 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 1,6 (m, 1H), 1,35 (S, 9H), 1,3 (m, 3H), 1,1 (m, 2H), 0,95 (s, 9H), 0,9 (d, 2H), 0,85 (d, 3H), 0,8 (t, 3H), 0,15 (d, 6H); CCF Rf = 0,32 (hexano:EtOAc 4:1). b^ (2R.4S,5S^—2—propil—4—hidroxi—5—(t-butiloxicarbonillamino—6— —fenil-hexanoil—f S)-valina

Dissolveu-se o composto do Exemplo 8 (a) (33,0 mg, 0,056 mmol) em MeOH (3,0 ml) e a esta solução adicionaram-se 0,09 ml de NaOH 2,5 N (8,9 mg, 0,22 mmol). Agitou-se a mistura reaccional, de um dia para o outro, à temperatura ambiente, e concentrou-se até se obter um sólido branco. Dissolveu-se o sólido em água, acidificou-se até pH = 3,5 com NH4C1 3,0 M, extractou-se com EtOAc, lavou-se com solução saturada de NaCl, secou-se sobre -39- 74 528 Ρ50043-1

MgS04, filtrou-se e concentrou-se obtendo-se o composto do título na forma de um sólido branco (29,5 mg, 92%). RMN-H1 (CDC13, 250 MHZ) δ 7,5 (d, 1H), 7,35-7,1 (m, 5H), 5,2 (d, 1H), 4,7 (m, 1H), 3,9 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 2,7 (m, 1H), 2,2 (m, 2H), 1,6 (m, 2H), 1,35 (s, 9H), 1,3 (m, 3H), 1,1 (m, 2H), 0,95 (S, 9H), 0,9 (d, 3H), 0,8 (d, 3H), 0,65 (m, 3H), 0,15 (d, 6H). c^ N-benziloxicarbonil.NW(2R.4S,5S)-2-propil-4-hidroxi-5-ft--butiloxicarbonil) amino-6-fenil-hexanoil-(R,S) -valill -cruanidina 0 composto do Exemplo 8 (b) (29,5 mg, 0,05 mmol) foi dissolvido em DMF seca e tratado, sucessivamente, com 1-hidroxibenzotriazolo (8,1 mg, 0,06 mmol), hidrocloreto de l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (9,6 mg, 0,05 mmol), carbobenziloxiguanidina (9,7 mg, 0,05 mmol), e N,N-diiso-propiletilamina (6,5 mg, 0,05 mmol). Agitou-se a mistura reaccional de um dia para o outro à temperatura ambiente, sob árgon. Removeu-se a DMF in vacuo e dissolveu-se o resíduo em EtOAc, lavou-se com H20, NH4Cl 1,0 M, H20, NaHC03 a 5% e solução saturada de NaCl, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se obtendo-se o composto do título na forma de um sólido branco (25,0 mg, 66%). RMN-H1 (CDCI3, 250 MHz) δ 7,4-7,1 (m, 10H), 6,4 (m, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,8 (d, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 2,75 (m, 2H), 2,35-2,05 (m, 2H), 1,8 (m, 1H), 1,55 (m, 1H), 1,35 (d, 9H), 1,25 (m, 3H), 1,05 (m, 2H), 0,90-0,85 (m, 6H), 0,8 (m, 3H), 0,1 (d, 6H); CCF Rf 0,71 (hexano:EtOAc 1:1). d) N-benziloxicarbonil,Ν'-Γ(2R.4S.5S>-2-propil-4-hidroxi-5-(t--butiloxicarbonil) amino-6-f enil-hexanoil) - (S) -valil 1 -cruanidina ? e N-benziloxicarbonil.N/-r(2Rr4S.5S)-2-propil-4-hidroxi-5-(t-bu-tiloxicarbonil ^amino-6-f enil-hexanoil-f R) -valill cruanidina

Dissolveu-se o composto do Exemplo 8 (c) (25,0 mg, 0,033 mmol) em THF (1,5 ml) e tratou-se com 1,5 ml de fluoreto de te-trabutilamónio 1,0 M (392,0 mg, 1,5 mmol). Agitou-se a mistura reaccional, à temperatura ambiente, de um dia para o outro, sob árgon. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com NaHC03 a 5%, -40- 74 528 Ρ50043-1 H20 e solução saturada de NaCl, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se até se obter um sólido cor de couro. Purificou-se o sólido por cromatografia flash (sílica-gel, 4% de CH3OH/CH2CI2) obtendo-se os diastereómeros do titulo na forma de compostos puros.

Isómero 1 (S-Val): RMN-H1 (CDC13/ 250 MHz) δ 7,4-7,1 (m, 10H), 6,3 (d, 1H), 5,15 (d, 2H), 5,0 (d, 1H) , 4,4 (m, 1H)., 3,65 (d, 2H), 2,85 (d, 2H), 2,55 (m, 1H), 2,25 (m, 1H), 1,85 (m, 1H) , 1,65 (m, 1H), 1,35 (S, 9H), 1,35-1,15 (m, 5H), 0,95 (d, 3H), 0,90 (d, 3H), 0,85 (t, 3H); CCF Rf 0,43 (sílica-gel, 4% de CH30H/CH2C12); EM m/e 640 [M+H]+.

Isómero 2 (R-Val): RMN-H1 (CDCI3, 250 MHz) δ 7,4-7,1 (m, 10H), 7,0 (m, 2H), 5,95 (m, 1H), 5,1 (m, 2H), 4,85 (d, 1H), 4,6 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 2,75 (d, 2H), 2,5 (m, 2H), 1,75 (m, 1H) , 1,6 (m, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,25 (m, 2H), 1,0 (d, 3H), 0,95 (d, 3H), 0,9 (t, 3H); CCF Rf 0,56 (sílica-gel, 4% de CH3OH/CH2Cl2); EM m/e 640 [M+H]+.

As atribuições estereoquímicas foram feitas com base na bioacti-vidade, presumindo-se que o isómero mais potente é o isómero S--Val.

Exemplo 9

Composição de unidade de dosagem parentérica Uma composição que contém 25 mg de um composto do presente invento é preparada como se segue: dissolvem-se 25 mg do composto em 15 ml de água destilada. Filtra-se a solução, sob condições assépticas para uma ampola multi-dose de 25 ml e liofiliza-se. Reconstitui-se o pó pela adição de 20 ml de dextrose a 5% em água (D5W) para injecção intravenosa ou intramuscular. Deste modo, a dosagem é determinada pelo volume da injecção. Esta solução é também adequada para uso noutros métodos de administração, tais como a adição a um frasco ou saco para infusão IV, gota a gota.

Exemplo 10

Composição de unidade de dosagem oral Prepara-se uma cápsula para administração oral por mistura e trituração de 200 mg do composto com 450 mg de lactose e 30 mg -41- 74 528 Ρ50043-1 de estearato de magnésio. Peneira-se o pó resultante e usa-se para encher uma cápsula de gelatina dura. A descrição anterior descreve detalhadamente como realizar e usar o presente invento. Contudo, o presente invento não se limita às concretizações precisas aqui descritas, mas abrange todas as modificações no âmbito das reivindicações que se seguem.

Lisboa, 30. OtJT. 19°

Por SMITHKLINE BEECHAM CORPORATION =0 AGENTE 0FICIAL=

Claims (13)

1. -1- -1- -a 74 528 Ρ50043-1 REIVINDICAÇÕES 1 - Composto caracterizado por ter a fórmula: A-D1-D2-M —N R· Z Λ N-R1 R' (I) na qual R1 é R7, R7C0, R7OCO ou R7OCH(R8)CO; Z é O ou N-R2, onde R2 é H, CN ou ROO; R5 D-l e D2 são ® ou estão ausentes; J-L e J2 são NH, CH2 ou 0; M é

   ou nVt R· Q1 R4 R9 R6 Eé ° '· Q1, Q2 e Q3 são H, NH2 ou OH; V é N ou C; ϊ é N, O ou S; R3 e R4 são H ou alquiloC-j^g, alceniloC2_6, cicloalquiloC3_7, T, T-alquiloC1_6, T-alceniloC2_g ou T---cicloalquiloC3_7, opcionalmente substituído com R3-6; T é Ar, Het ou cicloalquiloC3_7; R5 e R6 são alquiloC1_6, (CHR')n-T ou (CH2)p-u, onde U é C0NH2; R7 e R8 são, independentemente um do outro, H, alquiloC1-6, cicloalquiloC3_7, T-(CHR13)m-, T-(CH2)mÇH(T)(CH2)m; R9 é 0, S ou (H,H); -2- 74 528 Ρ50043-1 C

   R' é H, alquiloC-j^ ou CH2Ph; m é 0-6; n é 0-2; p é 1-4; A é H ou Ar, Het, r10(R11R12CAr-W, Het-W ou R10(R11R12C)m-W/ opcionalmente substituído com um a três grupos escolhidos de entre R13 ou alquiloC^g-R13; adequadamente R13 é OH; W é C=0, 00(=0), NR'C(=0), SC(=0), NR'C(=S), S0# S02, NR8S02 ou P(=0)(0R15); R10, R11 e R12 são, independentemente uns dos outros: i) H, R13 ou alquiloC1_4, alceniloC2_6, fenilo, naftilo, cicloalquiloC3_g ou Het, cada um opcionalmente substituído com um a três grupos R-*-3 ou R-^-alquiloC^.g, ou ii) R^8 é definido como anteriormente e R11R12C estão ligados em conjunto para formar um anel fenilo, naftilo, cicloalquiloC3_g ou Het, ou iii) R10 é definido como anteriormente é R11 e R12 são, em conjunto, =0; R13 é H, nitro, alcoxiC^.g, alquiltioC^.g, 0(C=0)R14, C=0R15, C02R15, CON(R14)2, N(R15)2, NHC(=N)NH-A, I, Br, Cl, F, 0R7 ou 0H, com a condição de, quando R13 é um substituinte do carbono adjacente a W, R13 não é halogéneo ou 0H quando W é 0C(=0) ou NHC0; R14 é H ou alquilo^.g; R15 é H, alquiloC-L.g, fenilo ou fenil-alquiloC-j^; R16 é -Χ'-R', -X/-(CH2)qNR17R18, X"[((CH2)r0)g]R19, CH2X"[((CH2)r0)s]R19, ou benzofurilo, indolilo, azacicloalquilo, azabiciclo-cicloalquiloCy.^ ou benzopiperidinilo, opcionalmente substituído com alquiloC1_4; q é 2-5; s é 1-6 e r é 1-3 em cada unidade de repetição s; X' é CH2, 0, S ou NH; X" é CH2, NR', O, S, SO ou so2; R17 e R18 são i) alquiloC-L.g, opcionalmente substituído por OH, alcoxiC1-3 ou N(R')2, ii) iguais ou diferentes e ligados em conjunto para formar um heterociclo de 5-7 membros contendo até dois heteroátomos adicionais seleccionados de entre NR, 0, S, S0, S02, estando o referido heterociclo opcionalmente 74 528 Ρ50043-1

   -3- substituído com alquiloC1_4, iii) heterociclo aromático opcionalmente substituído com alquiloC1_4 ou N(R/)27 R" é H ou alquiloC^.^; R19 é H, alquiloC1_4, C(=0)R20, C(=0)U[(CH2)m0]nR', P(=0)(OM*)2# C02R20/ C(=O)NR20R21# onde M* é um ião metálico mono ou divalente, e U é NR' ou O? R20 é alquiloC-L.g ou Ar, opcionalmente substituído com um ou mais hidroxi, carboxi, halo, alcoxiC1_3, CONR'2, NR'2, C02R', S02NR/2, CH2NR2, NROOR', NR,S02R/, X" [ (CH2)rO]sR/ ou COi2X"C(CH2)rO]sR/; e R21 é H, alquiloC^g ou, em conjunto com R20, forma um heterociclo com 5-7 membros ou um heterociclo de 6 membros contendo um heteroátomo seleccionado de entre N, O e S; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
2. 2 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Z ser NH.
3. 3 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R1 ser H, R7CO ou R7OCO.
4. 4 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por m ser R3 O

   i H

   V/ OH R4
5. 5 - Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por R-* ser benzilo e R^ ser alquiloC-^.g, Ar-alquiloC^_4, Ar--alceniloC2_4 ou Ar-alciniloC2_4/ opcionalmente substituído com R13.
6. 6 - Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por E ser Vai.
7. 7 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser: N-benziloxicarbonil,N7-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t--butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S) -valil]-guanidina; N- [(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicarbonil)-amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina; N-acetil,N,-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-butiloxicar- /.., 74 528 Ρ50043-1 -4-

   bonil)amino-6-fenil-hexanoil-valil]-guanidina; N-t-butiloxicarbonil,Ν'-[(2R,4S,5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t--butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina; N-metoxicarbonil,N'-[(2R,4S f 5S)-2-fenilmetil-4-hidroxi-5-(t-bu-tiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(s)-valil]-guanidina; N-(4—piridil)metiloxicarbonil-[(2R, 4S,5S)-2-fenilmetil-4-hi-droxi-5-(t-butiloxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]--guanidina; N-benziloxicarbonil,N'-[(2R,4S,5S)-2-metil-4-hidroxi-5-(t-buti-loxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina; ou N-benziloxicarbonil,N'-[(2R,4S,5S)-2-propil-4-hidroxi-5-(t-buti-loxicarbonil)amino-6-fenil-hexanoil-(S)-valil]-guanidina.
8. 8 - Composição farmacêutica caracterizada por compreender um composto de acordo com a reivindicação 1 e um transportador farmaceuticamente aceitável.
9. 9 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado por ser usado no tratmento de uma infecção por um retrovírus.
10. 10 - Composto de acordo com a reivindicação 1# caracteri-zado por ser usado no tratamento de uma infecção por HIV.
11. 11 - Composto de acordo com a reivindicação l em conjunto com um inibidor da transcriptase inversa, caracterizado por ser usado no tratamento de uma infecção por HIV.
12. 12 - Processo de preparação de um composto de fórmula: Z

    (I) na qual A, Dl7 D2, Μ, Z, R' e R1 são definidos como na reivindicação 1, caracterizado por compreender: (1) a reacção de um composto de fórmula: a-d1-d2-m-oh na qual A, Dlf D2, e M são definidos como para a fórmula (I), com quaisquer grupos reactivos protegidos, com um composto de fórmula: 74 528 Ρ50043-1 -5- H2NC(=Z)NR/-R1 na qual Z, Rf e R1 são definidos como na reivindicação 1 e com um agente de acoplamento, e, opcionalmente, a remoção de quaisquer grupos protectores, ou (2) a reacção de um composto com a fórmula: H-D1-D2-M-NR/C ( =Z) NR^1 na qual D2, Μ, Z, R' e R^· são definidos como para a fórmula (I), com quaisquer grupos reactivos protegidos, com um composto de fórmula: A-L' na qual A é definido como na reivindicação 1 e 1/ é um grupo que se despede e, se necessário, com um agente de acoplamento, e, opcionalmente, a remoção de quaisquer grupos protectores. Lisboa, Por SMITHKLINE BEECHAM CORPORATION
13. 30. QiJT .tf