PT100314A

PT100314A - Compostos piridiniltiazolidina benzoilfenilicos como antagonistas da activacao das plaquetas

Info

Publication number: PT100314A
Application number: PT100314A
Authority: PT
Inventors: James B Summers; Paul D May; Denise E Guinn; Douglas H Steinman; Steven K Davidsen
Original assignee: Abbott Lab
Priority date: 1991-03-29
Filing date: 1992-03-27
Publication date: 1993-06-30
Also published as: US5120751A; IE920715A1; WO1992017476A1

Description

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Campo técnico

0 presente invento refere-se a compostos com actividade farmacológica, a uma composição contendo estes compostos e a um processo de tratamento empregando os compostos e as composições. Mais particularmente, este invento refere-se a certos compostos piridiniltiazolidina benzoilfenílicos e aos seus sais, que possuem uma actividade antagonista do factor de activação das plaquetas (PAF), a composições farmacêuticas contendo estes compostos, e a um processo de tratamento de desordens mediados por PAF.

Antecedentes do invento 0 factor de activação das plaquetas (PAF), é um fosfolipido libertado por células humanas e outras células animais e é um éter acetilglicerílico de fosforilcolina, tal como representado pela seguinte fórmula: CH20(CH2)nCH3 CH3C00—CH 0 CH20-P-O (CH2) 2-N+ (CH3 ) 3 0' onde n é um número inteiro de 15 a 17. 0 PAF é fisiologicamente activo e provoca contracção do músculo liso das vias aéreas, aumenta a permeabilidade vascular, a agregação de plaquetas, e a hipotensão e outros do género. É agora reconhecido como um poderoso intermediário da inflamação e pode desempenhar um papel fisiológico ou patobiológico numa variedade de condições clínicas, tais como, a asma e disfunção pulmonar, inflamação aguda, rejeição de orgãos transplantados,

4967.PG.01 -4— choques induzidos por endotoxina e IgG, tromboses, anafilaxia cardíaca, ulcera gastrintestinal, doenças alérgicas da pele, doenças da retina e da córnea, cirrose do fígado quimicamente induzida, e implantação de óvulos na gravidez.

Foram descritos vários antagonistas anti-PAF (p.e. Patente Americana 4 948 795, Pedido de Patente Europeia EP 279681 e Americana 4 786 645) mas nenhum teve aceitação alargada. Consequentemente, há uma contínua necessidade de desenvolvimento de antagonistas do PAF, potentes e oralmente activos, que tenham baixa toxicidade.

Sumário do invento 0 presente invento proporciona, como aspecto principal, compostos possuindo actividade antagonista do PAF e tendo a fórmula estrutural:

em que R-*- é hidrogénio ou alquilo, com um a seis átomos de carbono. R2 é um, dois ou três substituintes, seleccionados de entre hidrogénio, halogéneo ou alquilo com um a seis átomos de carbono. R3 é um, dois ou três substituintes seleccionados de entre hidrogénio, halogéneo ou alcoxilo com um a seis átomos de carbono. A é uma ligação de valência ou é seleccionado do grupo constituído por metileno e >NR4 em que R4 é hidrogénio ou alquilo

73 740 4967.PG.01 com um a seis átomos de carbono, com a condição de que quando X é >NH ou azoto substituído com alquilo com um a seis átomos de carbono, A não pode ser >NR4. X é enxofre ou >NR5 em que R5 é hidrogénio, alquilo com um a seis átomos de carbono, alcoílo com um a seis átomos de carbono, -C(0)-NR6R7, em que R6 e R7 são seleccionados independentemente de hidrogénio e alquilo com um a seis átomos de carbono, ou -C(0)0R8 em que R8 é um radical alquilo com um a seis átomos de carbono. Y é enxofre ou metileno.

Os compostos do presente invento contêm um ou mais átomos de carbono assimétricos, particularmente no local de ligação do grupo Y ao anel de cinco membros contendo X e Y, sendo deste modo capazes de existirem em formas estereoisoméricas. Os sais farmaceuticamente aceitáveis, e os estereoisómeros individuais dos compostos com a fórmula I estrutural anterior, assim como misturas destes, estão também contemplados como pertencendo ao âmbito do presente invento.

Num outro aspecto, o presente invento proporciona composições farmacêuticas úteis no tratamento de doenças mediadas por PAF, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto com a fórmula I anterior, em combinação com um portador farmaceuticamente aceitável.

Num outro aspecto, o presente invento proporciona um processo de inibição da actividade do PAF, por administração a um mamífero hospedeiro, necessitado desse tratamento, de uma quantidade inibidora eficaz do PAF, de um composto com a estrutura I anterior.

Ainda noutro aspecto do presente invento, é proporcionado um processo de tratamento de desordens mediadas por PAF, incluindo a asma, choque, sindroma de dificuldade respiratória, inflamação aguda, imunidade celular retardada, parto, maturação fetal dos 73 740 4967.PG.01 -6-

pulmões e diferenciação celular, por administração a um mamífero hospedeiro, que necessite desse tratamento, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto com a estrutura I anterior.

Descrição detalhada e concretizações preferidas

Numa concretização do presente invento, representada pela Fórmula II, A é uma ligação de valência, X é NH, Y é enxofre, e R1, R2 e R3 são definidos como anteriormente.

Os compostos de Fórmula II preferidos são aqueles em que R1 e R2 são hidrogénio ou alquilo inferior e R3 é hidrogénio ou alcoxilo pequeno. Os compostos de Fórmula II particularmente preferidos, são aqueles em que R1 é hidrogénio ou metilo, R2 é hidrogénio, e R3 é hidrogénio, 3,4-dimetoxilo, 3,5-dimetoxilo ou 3,4,5-trimetoxilo.

Noutra concretização, os compostos do presente invento são representados pela Fórmula III, em que A é uma ligação de valência, sendo ambos X e Y enxofre, e R1, R2 e R3 são definidos como anteriormente '

Os compostos preferidos de Fórmula III são aqueles em que R1

73 740 4967.PG.01 -7 e R2 são hidrogénio e R3 é hidrogénio ou um alcoxilo inferior. Os compostos de Fórmula III particularmente preferidos, são aqueles em que R1 e R2 são hidrogénio, e R3 é 3,4,5-trimetoxilo.

Ainda noutra concretização, os compostos do presente invento são representados pela Fórmula IV, em que A é >NH, sendo ambos X e Y enxofre, e R1, R2 e R3 são definidos tal como anteriormente.

Os compostos de Fórmula IV preferidos, são aqueles em que R3· e R2 são hidrogénio e R3 é hidrogénio ou um alcoxilo inferior. Os compostos de Fórmula IV particularmente preferidos, são aqueles em que R1 e R2 são hidrogénio, e R3 é 3,4,5-trimetoxilo.

Exemplos dos compostos contemplados como estando dentro do âmbito do presente invento, incluem, mas não estão necessariamente limitados a: N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarbonil-4--tiazolidinacarboxamida ? N-[3-(4-metoxibenzoil)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazolidina-carboxamida; N-[3-(3,4-dimetoxibenzoil)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazoli-dinacarboxamida ? N-[3-(3,5-dimetoxibenzoil)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida ; N-[3—(3,4,5-trimetoxibenzoil)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazo-lidinacarboxamida; N-(3-benzoilfenil)-N-metil-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacar-boxamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-formil-4-tiazolidina-carboxamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-(N-metilcarbamoíl-4-

73 740 4967.PG.01 -8 tiazolidinacarboxamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)tiazolid-4-ilacetamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-carbamoiltiazolid-4--ilacetamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarboniltia zolid-4-ilacetamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-4-ditiolanocarboxamida; N-[3-(3,4,5-trimetoxibenzoil)fenil]-2-(3-piridinil)-4-ditio lanocarboxamida; N-(3-benzoilfenil]-Ν'-[2-(3-piridinil)ditiolan-4-il]ureia; N-[3-(3,4,5-trimetoxibenzoil)fenil]-N'-[2-(3-piridinil)di· tiolan-4-il]ureia; N-metil-N-(3-benzoilfenil)-N/-[2-(3-piridinil)ditiolan-4--il]-ureia; N-metil-N-[3-(3,4,5-trimetoxibenzoil)fenil]-Ν'-[2-(3-piridi nil)ditiolan-4-il]ureia; e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Ao longo desta descrição e das reivindicações em apêndice, os termos seguintes têm atribuídos os significados descritos: 0 termo "alcoxilo" aqui usado, refere-se a um grupo alquilo inferior, tal como aqui definido, que está ligado à porção molecular mãe, através de um átomo de oxigénio. Exemplos representativos dos grupos alcoxilo incluem metoxilo, etoxilo, t--butoxilo e outros do género. 0 termo "alcoílo" aqui usado refere-se a formilo e radicais de estrutura -C(0)-alquilo, em que a porção alquilo é um grupo alquilo linear ou ramificado com um a seis átomos de carbono. Exemplos representativos de grupos alcoílo incluem formilo, acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, pivaloílo e outros do género. 0 termo "alquilo" aqui usado refere-se a radicais de cadeia linear ou ramificada, derivados de hidrocarbonetos saturados pela remoção de um átomo de hidrogénio. Exemplos representativos dos grupos alquilo incluem metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n- 73 740 4967.PG.01 -9- -butilo, sec-butilo, iso-butilo, terc-butilo, e outros do género. 0 termo "carbamoílo" é aqui usado para significar -C0NR6R7, em que R® e R7 são independentemente hidrogénio ou um radical alquilo inferior. Exemplos representativos de grupos carbamoílo, incluem carbamoílo, dimetilcarbamoílo, terc-butilcarbamoílo, metiletilcarbamoilo e outros do género.

0 termo "carboalcoxilo" é aqui usado para significar -C(0)0R8 em que R8 é um radical alquilo. Exemplos representativos dos grupos carboalcoxilo, incluem carbometoxilo, carboetoxilo, carboisopropoxilo, carbobutoxilo, carbo-sec-butoxilo? carbo-isobutoxilo; carbo-terc-butóxilo; e outros do género. 0 termo "halogéneo" refere-se a flúor, cloro ou bromo.

Os termos "desordens relacionadas com o PAF" e "desordens mediadas por PAF" são aqui usados para significar desordens relacionadas com o PAF ou mediadas por PAF, incluindo asma, choque, síndromas de dificuldade respiratória, inflamação aguda, imunidade celular retardada, parto, maturação fetal dos pulmões e diferenciação celular.

0 termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se aos sais de adição de ácidos inorgânicos e orgânicos dos compostos do presente invento, relativamente não tóxicos. Estes sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação final dos compostos, ou reagindo separadamente o composto purificado na sua forma de base livre com o ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando o sal assim formado. Os sais representativos incluem os sais hidrobrometo, hidrocloreto, sulfato, bissulfato, fosfato, nitrato, acetato, oxalato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, borato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartarato, naftilato, mesilato, gluco-heptonato, lactiobionato, laurilsulfonato e outros do género (Ver, por exemplo S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sei.. 66:1-19 (1977) que é aqui incorporado como referência).

4967.PG.01 -10- 0 presente invento também proporciona composições farmacêuticas que compreendem um ou mais dos compostos de fórmula I anteriores, formulados conjuntamente com um ou mais portadores não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis. As composições farmacêuticas podem ser especialmente formuladas para administração oral em forma sólida ou líquida, para injecção parenteral, ou para administração rectal.

As composições farmacêuticas deste invento, podem ser administradas a seres humanos e outros animais, oralmente, rectalmente, parenteralmente, intracisternalmente, intravaginalmente, intraperitonealmente, topicamente (como pós, unguentos ou gotas), bucalmente ou como vaporizador oral ou nasal. 0 termo administração "parenteral" aqui usado, refere-se a tipos de administração que incluem a injecção e infusão intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intrasternal, subcutânea e intraarticular.

As composições farmacêuticas deste invento para injecção parenteral, compreendem soluções, dispersões, suspensões ou emulsões aquosas ou não aquosas, estéreis, farmaceuticamente aceitáveis, assim como pós estéreis para reconstituição em soluções ou dispersões estéreis injectáveis apenas antes de usar. Exemplos de portadores, diluentes, solventes ou veículos aquosos e não aquosos, incluem água, etanol, polióis (tais como o glicerol, propilenoglicol, polietilenoglicol e outros do género) e misturas adequadas destes, óleos vegetais (tais como o azeite), e ésteres orgânicos injectáveis tais como o oleato de etilo. A fluides conveniente, pode ser mantida, por exemplo, pela utilização de materiais de revestimento tais como a lecticina, através da manutenção do tamanho de partícula requerido, no caso das dispersões, e pelo uso de tensioactivos.

Estas composições podem também conter adjuvantes tais como agentes conservantes, molhantes, emulsionantes e de dispersão. A prevenção da acção de microorganismos, pode ser assegurada pela inclusão de vários agentes anti-bacterianos e anti-fúngicos, por exemplo, parabeno, clorobutanol, fenol, ácido sórbico e outros do

73 740 4967.PG.01 género. Pode também ser desejável incluir agentes isotónicos, tais como açúcares, cloreto de sódio e outros do género. A absorção prolongada da forma farmacêutica injectável pode ser conseguida pela inclusão de agentes que atrasem a absorção, tais como o monoestearato de alumínio e a gelatina.

Nalguns casos, para se prolongar o efeito da droga, é desejável retardar a absorção da droga da injecção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser conseguido com a utilização de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo, com fraca solubilidade em água. A taxa de absorção da droga, depende então da sua taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho dos cristais e da forma cristalina.

Alternativamente, a absorção retardada de uma droga administrada parenteralmente é conseguida por dissolução ou suspensão da droga num veículo oleoso.

As formas injectáveis de depósito são feitas por formação de matrizes de droga microcapsuladas em polímeros biodegradáveis, tais como polilactido-poliglicólido. Dependendo da razão da droga em relação ao polímero e da natureza do polímero particular empregue, a taxa de libertação de droga pode ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis, incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). As formulações injectáveis de depósito são também preparadas por aprisionamento da droga em lipossomas ou microemulsões que sejam compatíveis com os tecidos do corpo.

As formulações injectáveis podem ser esterilizadas, por exemplo, por filtração através de filtro de retenção de bactérias ou por incorporação de agentes de esterilização na forma de composições sólidas estéreis, que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estéril, ou em outros meios estéreis injectáveis, imediatamente antes do uso.

As formas de dosagem sólidas para adminstração oral, incluem, cápsulas, comprimidos, pílulas, pós e grânulos. Nestas

-12- 73 740 4967.PG.01 formas de dosagem sólidas, o composto activo é misturado com pelo menos um excipiente ou portador inerte, farmaceuticamente aceitável, tais como o citrato de sódio ou fosfato de dicálcio e/ou a) cargas ou diluentes tais como amidos, lactose, sacarose, glucose, manitol, e ácido silícico, b) ligantes tais como, por exemplo carboximetilcelulose, alginatos, gelatina, polivinil-pirrolidona, sucrose e goma de acácia, c) humectantes tais como o glicerol, d) agentes de desintegração tais como o ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, certos silicatos, e carbonato de sódio, e) agentes retardadores de solução tais como a parafina, f) aceleradores de absorção tais como os compostos de amónio quaternário, g) agentes molhantes tais como, por exemplo, o álcool cetílico e o monoestearato de glicerol, h) absorventes tais como caulino e argila bentonítica, e i) lubrificantes tais como o talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietilenoglicóis sólidos, laurilsulfato de sódio, e misturas destes. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, a forma de dosagem pode também conter agentes tampão (ou amortecedores).

As composições sólidas de tipo semelhante, podem também ser empregues como enchimentos em cápsulas duras ou macias de gelatina, usando excipientes como a lactose, ou açúcar lácteo assim como polietilenoglicoís de elevada massa molecular e outros do género.

As formas de dosagem sólidas em comprimidos, drageias, cápsulas, pílulas, e grânulos, podem ser preparadas com revestimentos e invólucros, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos da arte de formulação farmacêutica. Podem conter, opcionalmente, agentes opacificantes e podem também ter uma composição que liberte o(s) ingrediente(s) activo(s) apenas, ou preferivelmente, em certas partes do tracto intestinal, opcionalmente, de um modo retardado. Exemplos de composições de embutir que podem ser usadas, incluem substâncias poliméricas e ceras.

Os compostos activos podem também estar em forma -13- -13- 4967.PG.01 _4 microcapsulada, se apropriado, com um ou mais dos excipientes atrás mencionados.

As formas de dosagem líquida para administração oral, incluem emulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. Para além dos compostos activos, as formas de dosagem líquida podem conter diluentes inertes usualmente utilizados na arte, tais como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes de solubilização e emulsionantes, tais como o álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, álcool benzílico, benzoato de benzilo, propilenoglicol, 1,3-butilenoglicol, dimetil-formamida, óleos (em particular, de semente de algodão, de amendoim, de milho, de gérmen, de rícino, de sésamo e azeite), glicerol, álcool tetra-hidrofurfurílico, polietilenoglicóis e ésteres de ácidos gordos de sorbitan e misturas destes.

Para além de diluentes inertes, as composições orais podem também incluir adjuvantes, tais como agentes molhantes, emulsionantes e agentes de suspensão, adoçantes, saborizantes e perfumantes.

Para além dos compostos activos, as suspensões podem conter agentes de suspensão como, por exemplo, álcoois isoestearílicos etoxilados, polioxietilenosorbitol e ésteres de sorbitano, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio, bentonite, ágar-ágar e tragacanto, e misturas destes.

As composições para administração rectal ou vaginal são preferencialmente supositórios, que podem ser preparados através da mistura dos compostos deste invento, com excipientes ou portadores não irritantes adequados, tais como a manteiga de cacau, polietilenoglicol ou uma cera para supositórios, que são sólidos à temperatura ambiente mas líquido à temperatura do corpo e por isso fundem no recto ou na cavidade vaginal e libertam o composto activo.

Os compostos do presente invento podem também ser 73 740 4967.PG.01 -14-

administrados na forma de lipossomas. Tal como é conhecido na arte, os lipossomas são geralmente derivados de fosfolípidos ou outras substâncias lipídicas. Os lipossomas são formados por cristais líquidos hidratados mono ou multi-lameladas, que são dispersos num meio aquoso. Qualquer líquido não-tóxico, fisiologicamente aceitável e metabolizável, capaz de formar lipossomas, pode ser usado. As presentes composições, sob a forma de lipossoma podem conter, para além de um composto do presente invento, estabilizadores, conservantes, excipientes e outros do género. Os lípidos preferidos são os fosfolípidos e as fosfatidilcolinas (lecticinas), naturais e sintéticos.

Os métodos para a formação de lipossomas são conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Prescott, Ed., Methods in Cell Bioloayr Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), p. 33 et seq.

As formas de dosagem para administração tópica de um composto deste invento incluem pós, pulverizadores, unguentos e inaladores. 0 composto activo é, misturado, em condições estéreis, com um portador farmaceuticamente aceitável e quaisquer conservantes, tampões ou propulsores necessários que possam ser requeridos. As formulações oftálmicas, unguentos para o olho, pós e soluções estão também contempladas como pertencendo ao âmbito deste invento.

Os níveis reais de dosagem dos ingredientes activos nas composições farmacêuticas deste invento, podem ser diversos, de modo a obter-se uma quantidade do(s) composto(s) activo(s) que seja eficaz para se conseguir a resposta terapêutica desejada para um paciente, composições e modo de administração particulares. O nível de dosagem seleccionado, dependerá da actividade do composto particular, da via de administração, da gravidade da condição em tratamento, e da condição e história médica antecedente do paciente em tratamento. Contudo, está dentro dos conhecimentos da arte começar com doses do composto a níveis mais baixos do que os requeridos para alcançar o efeito terapêutico desejado e aumentar gradualmente a dosagem até ao efeito desejado ser alcançado. -15- 73 740 4967.PG.01

Geralmente, são administrados oralmente a um mamífero paciente, níveis de dosagem de cerca de 0,001 a cerca de 100, mais preferivelmente de cerca de 0,001 a 20 e muito preferivelmente cerca de 0,1 a cerca de 10 mg do composto activo, por kilograma de peso corporal, por dia. Se desejado, a dose diária eficaz pode ser dividida em doses múltiplas, para fins de administração, p.e. duas ou quatro doses separadas por dia.

Em geral, os compostos deste invento são sintetizados por reacções, cujos esquemas I a XII estão ilustrados a seguir. Deve-se entender que X, Y, A, R1 e R2 aqui usados correspodem aos grupos identificados na Fórmula I.

Os compostos de Fórmula (I-IV) podem ser preparados usando as reacções e as técnicas descritas nesta secção. As reacções são realizadas num solvente apropriado aos reagentes e materiais empregues e adequados à transformação a ser efectuada.

Os peritos na arte de síntese orgânica, entenderão que a funcionalidade presente no heterociclo e noutras partes da molécula, deve ser consistente com a transformação química proposta. Isto necessita frequentemente de bom senso na escolha dos passos de síntese, dos grupos protectores requeridos e nas condições de desprotecção.

Os estereoisómeros individuais dos compostos do presente invento são preparados, em casos apropriados, por utilização de sequências reaccionais estereoespecíficas, empregando materiais de partida resolvidos ou são preparados por reacções que produzem mistura dos enantiómeros, seguidas de separação dos estereoisómeros desejados por métodos bem conhecidos na arte. As misturas de diastereómeros, são separadas, por exemplo, por recristalização fraccionada ou por separação cromatográfica. Alternativamente, uma mistura de enantiómeros pode ser convertida numa mistura de sais diastereoméricos, por reacção de um centro básico da molécula com um determinado ácido. A mistura de diastereómeros é, então, separada por recristalização ou cromatografia, seguida de tratamento de cada um dos

73 740 4967.PG.01 diastereómeros separados com uma base, para recuperação do composto mãe no estado óptico resolvido. Noutro método alternativo, as misturas dos enantiómeros podem ser separadas por meios cromatográficos com um meio de absorção quiral, usando técnicas conhecidas na arte. o (segue Esquema) 73 740 4967.PG.01 -17- Esquema 1 yi

OHo=£ ’/ \ H,N SH

CHO s.N

O

U

OH (t-BuC0)20(5) *

ΓΛ O. N .S 1 0

R-NH2 (3) R-NH2 (3)

R’COCI ou (R’C0)20 HNo=0.

Base R· τ

R'NCO,

HN -R

-R

1 .Base 2. R'I

ou R’NCOCI

H +

21 14 73 740 4967.PG.01

Escruema 1

De acordo com o Esquema de reacção 1, anterior, a L-cisteína (1) é condensada com 3-piridina-aldeído para produzir ácido 2-(3--piridinil)-4-tiazolidinacarboxílico (2). O azoto da tiazolidina pode ser protegido com um grupo apropriado, preferencialmente carbo-tec-butoxilo (BOC) com dicarbonato de di-terc-butilo (5), para se obter 6. 0 ácido protegido é acoplado a uma amina (3), usando um agente de acoplamento tal como a diciclo-hexil-carbodiimida ou B0PC1 (cloreto bis(2-oxo-3-oxazolidi-nil)fosfínico) para originar a amida 7. 0 grupo protector é removido sob condições adequadas, tal como a utilização de HCl para remover o BOC, e é obtida a amida 4. Alternativamente, 2 pode ser acoplado com 3, da maneira descrita acima, para se obter 4 sem proteger o azoto da tiazolidina. A amida 7 pode ainda ser tratada com uma base forte, tal como o hexametildissilazida de lítio, seguida de um halogeneto de alquilo, para se obter a amida alquilada 20. O grupo protector BOC é removido com ácido para originar 21. A 2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida (4) pode ainda ser tratada com um cloreto de ácido, anidrido de ácido ou outro derivado de ácido activado, na presença de uma base tal como a trietilamina, para originar 13. De modo semelhante, 4 pode ser tratado com um isocianato ou um cloreto de carbamoílo para originar a ureia 14. (segue Esquema)

73 740 4967.PG.01 -19-

Esguema 2 OCH,

HS SH 9 CHO OCH,

OH 0^ Br Br 8

1. NaSH 2. H+ CH30H HN'R OH "S^ RNH2 (3) - 0=V. c Q s s BOPC1 Ύ l2A (C2H5)3N λ 11

Esauema 2

De acordo com o Esquema de reacção 2, anterior, o ácido 2-(3-dibromopropiónico (8) é tratado com bissulfito de sódio (NaSH), seguido de esterificação com HC1 em metanol para dar 2,3-dimercaptopropenoato de metilo (9). Este ditiol (9) é condensado com 3-piridinacarboxaldeído, na presença de um catalisador ácido, preferencialmente ácido p-toluenossulfónico, para originar 2-(3-piridinil)-4-ditiolanocarboxilato de metilo (10) . O éster de ditiolano, é hidrolisado no ácido correspondente (11) , por tratamento com uma base aquosa, preferencialmente hidróxido de lítio. Este ácido é acoplado com uma amina (3), usando um agente de acoplamento tal como a diciclo-hexil-carbodiimida ou BOPC1 (cloreto bis (2-oxo-3-oxazolidi-nil)fosfínico), para dar origem à amida 12. (segue Esquema) 7^¾ -20- 73 740 4967.PG.01

Esquema 3

Ag(C6HsCOO)

OCII3 ΓΛ

Base

Escruema 3

De acordo com o Esquema de reacção 3, anterior, um ácido 2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxilico protegido, tal como o BOC protegido 6 (preparado tal como descrito no Esquema 1), é activado (por exemplo como um anidrido misto com cloroformato de isobutilo) e então tratado com diazometano, para originar a diazocetona 15. A reacção com o benzoato de prata em metanol, resulta num rearranjo para produzir o éster 16, que é hidrolisado com base, preferencialmente hidróxido de lítio, para originar o ácido 17. Este ácido é acoplado com a amina (3) usando um agente de acoplamento tal como a diciclo-hexilcarbodiimida ou o B0PC1 (cloreto bis(2-oxo-3-oxazolidinil)fosfínico) para originar a amida 18. Finalmente, o grupo protector é removido sob condições apropriadas, tal como na utilização de HC1 para remover o grupo BOC e originar 19. <ér —

73 740 4967.PG.01 -21-

Esquema 4

1. (C6h5)2pon3 2. RNH2

Esquema 4

De acordo com o Esquema de reacção 4, anterior, o ácido ditiolano 10 é aquecido com difenilfosforilazida, seguido de reacção com uma amina (3) para produzir 22.

Esquema 5

De acordo com o Esquema de reacção 5, anterior, o ácido di--hidro-2-(3-piridil)-5-pirrolidinacarboxílico, 23, é acoplado com uma amina 3, usando um agente de acoplamento tal como a diciclo-hexilcarbodiimida ou BOPC1 para originar 24. Este é reduzido com hidrogénio, na presença de catalisadores de paládio ou platina, para dar origem à pirrolidina. 73 740 4967.PG.01 -22-

Actividade inibidora do PAF dos compostos do presente invento A capacidade de inibir a actividade do PAF dos compostos representativos do presente invento, foi determinada num teste in vitro. usando o seguinte método.

Sangue completo de coelho, citrado, foi obtido em Pel-Freez (Rogers, AR). As plaquetas de coelho foram preparadas por centrifugação e lavagem. As plaquetas foram lisadas por congelação-descongelação e sonicação; as membranas das plaquetas foram preparadas por centrifugação e lavagem. As preparações finais das membranas foram armazenadas congeladas em Tris 10 mM/MgCl2 5 mM/EDTA 2 mM (tampão TME, pH 7,0) com 0,25 M de sacarose, adicionada para estabilização das membranas. 0 ensaio de ligação do receptor PAF padrão, continha 10 /ig de proteínas das membranas das plaquetas, 0,6 nM[3H]C18-PAF (da Amersham ou New England Nuclear; actividade específica 120-180 Ci/mmol), com e sem composto de teste, em "tampão de ligação" constituído por TME com adição de 0,25% de albumina do soro de bovino (Sigma, grau RIA). 0 volume final do ensaio foi 100 μΐ. O ensaio foi conduzido em placas de filtração Millititre-GV® (Millipore Corp.)? o tempo de incubação foi de 60 minutos à temperatura ambiente (22-23’C. A "ligação específica" foi operacionalmente definida como a diferença aritmética entre a "ligação total" de [3H]C18-PAF 0,6 nM (na ausência do PAF adicionado) e a "ligação não específica" (na presença de PAF ΙμΜ). Após a incubação prescrita, as membranas das plaquetas foram filtradas sob vácuo e lavadas com 1 mililitro de "tampão de ligação". Os filtros foram secos e removidos. A radioactividade ligada foi quantificada com um Berthold TLC-Linear Analyzer modelo LB2842.

As curvas dose-resposta da inibição da ligação específica [3H]C18-PAF por compostos de teste, foram realizadas em triplicado, com pelo menos quatro doses cobrindo a gama activa. As experiências foram repetidas pelo menos uma vez. Os valores de IC50 (concentração para produzir 50% de inibição) foram -23- 4967.PG.01 determinados por avaliação ponto por ponto. Os valores de Ki das constantes de ligação inibidora foram calculados de acordo com o método de Cheng e Prusoff [Biochem. Pharmacol. 22 (1973) 3099--3108] de acordo com

Ki ~ 1 + ([[3H]PAF]/Kd['3H]PAF) IC50 1 + (0,6 nM/0,6 nM) _ ÍÇ50 “ 2

Os valores de para os compostos representativos do presente invento aparecem na Tabela 1.

Tabela 1

Actividade de ligação do receptor PÃF

Exemplo Ki(nM) Exemplo Ki(nM) Exemplo %(ηΜ) 1 5 8 6 15 620 2 100 000 9 23 16 2 600 3 5 10 570 17a 1 300 17b 260 4 1 11 500 18a 650 18b 35 5 34 12 700 19a 2 900 19b 7 000 6 33 13 5,800 20a 260 20b 2 200 7 2 14 150 21 780 0 anterior pode ser melhor compreendido a partir dos seguintes exemplos, que são apresentados com o propósito de ilustrar e não se pretende que limitem o âmbito do invento, tal como é definido pelas revindicações em anexo.

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Exemplo 1

Preparação da N-(3-benzoilfenil)-2-(3-PÍridinil)-4-tiazolidina carboxamida

Passo 1. Ácido 2-(3-plridinil)-4-tiazolidinacarboxílico

Cisteína (24,2 g, 0,2 mole) e 3-piridinacarboxaldeído (21,4 g, 0,2 mmole) foram suspensos numa solução aquosa de etanol a 60% (400 ml), e a mistura foi aquecida a 100°C durante 5 horas. A mistura reaccional foi então arrefecida e a maior parte do solvente foi removida sob vácuo. A pasta resultante foi lavada com etanol e filtrada. Este material foi seco durante a noite sob vácuo a 50°C para se obter o ácido tiazolidínico (34 g, 81%).

Passo 2. N-f3-benzoilfenil^-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxa-mida.

Foi adicionada diciclo-hexilcarbodiimida (DCC, 3,4 g, 16,7 mmole) a uma solução do ácido tiazolidínico preparado tal como descrito anteriormente no passo 1 (2,3 g, 11 mmole), 3-aminobenzofenona (2,2 g, 11 mmole), e hidrato de l-hidroxi-benzotriazolo (HOBT, 1,5 g, 11 mmole), em dimetilformamida (25 ml). A mistura reaccional foi agitada durante 20 horas à temperatura ambiente e então adicionou-se água (5 ml) para extinguir o excesso de DCC. Vinte minutos depois, foi adicionado acetato de etilo e a mistura foi filtrada para remover a diciclo--hexilureia. 0 filtrado foi lavado com bicarbonato de sódio saturado, água e cloreto de sódio saturado e seco sobre sulfato de magnésio. O solvente foi removido sob vácuo e o residuo cromatografado em 200 g de sílica-gel e eluíndo com 5% de metanol em cloreto de metileno, para originar o produto desejado (1,7 g, 40%). EM (DCI-NH3)m/e:386 (M+l)+; 1RMN (CDCI3) d 3,43-3,62 (c, 1,5H), 3,82 (dd,0,5 H, J=4,5, 12), 4,20-4,30 (C, 0,5H), 4,54 (m, 0,5 H, J=4,0), 4,98 (d, 0,5H, J=12), 5,72 (bs, 0,5H), 7,32-7,62 (C, 7H), 7,76-8,05 (c, 6H), 8,53 (dd, 0,5H, J-2,5), 8,62 (dd, 0,5H, J=2,5), 8,80 (b s, 0,5H), 9,28 (s, 0,5 H). 73 740 4967.PG.01 -25-

Exemplo 2

Preparação da N-f3-benzoilfenil)-2-f3-piridinil)-3-terc-bu-toxicarbonil-4-tiazolidinacarboxamida

Passo l. Ácido 2-f3-PÍridiniH-3-terc-butoxicarbonil-4-tiazoli-dinacarboxílico

Uma pasta do ácido 2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxílico (7/0 g; 33/3 mmol)/ preparada tal como no Exemplo 1/ Passo 1, em dioxano (40 ml) a 0°C, foi adicionado NaOH aquoso (60 ml, 1M), seguido de uma solução de bicarbonato de di-terc-butilo (1,5 eq.; 10,9 g) e dioxano (20 ml) numa porção. A solução amarelada resultante, foi agitada enquanto aqueceu até à temperatura ambiente, durante um período de 19 horas. A solução resultante, foi concentrada num evaporador rotativo e o resíduo foi então submetido a partição entre acetato de etilo (100 ml) e água (100 ml). A fase aquosa foi lavada com acetato de etilo e então acidificada a pH 4 com ácido clorídrico aquoso a 0°C. Esta solução foi então extractada com acetato de etilo e seca sobre sulfato de magnésio, para originar ácido 2-(3-piridinil)--3-terc-butoxicarbonil-4-tiazolidinacarboxílico (8,27 g, rendimento de 80%) sob a forma de um sólido branco.

Passo 2. N-f3-benzoilfenil^-2-(3-piridinil^-3-terc-butoxicarbo-nil-4-tiazolidinacarboxamida A uma solução de ácido 2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarbo-nil-4-tiazolidinacarboxílico (944 mg; 1,2 eq.; 3,05 mmol), preparado tal como descrito atrás, e 3-aminobenzofenona (500 mg; 2,54 mmol) em cloreto de metileno (0,15 M) foi adicionada trietilamina (0,46 ml) à temperatura ambiente, sob azoto, com agitação, seguido de adição de cloreto bis(2-oxo-3-oxozo-lidinil)fosfínico (773 mg; 1,2 eq.) e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente, durante 16 horas. A mistura foi concentrada até ficar um óleo, num evaporador rotativo, tendo sido submetido a partição entre acetato de etilo (30 ml) e bicarbonato de sódio (30 ml). A fase aquosa foi extractada duas vezes com acetato de etilo e as resultantes camadas orgânicas

. 73 740 4967.PG.01 -26-combinadas, foram lavadas com salmoura e secas com sulfato de magnésio. Após a filtragem, o solvente foi removido para originar o composto do titulo (1,43 g) sob a forma de um óleo laranja espesso, o composto foi ainda purificado por cromatografia flash em sílica-gel para originar 1010 mg (rendimento de 82%) de N- (3-benzoilf enil) -2- (3-piridinil) -3-terc-butoxicarbonil-4-tiazo-lidinacarboxamida, sob a forma de uma espuma branca.

Exemplo 3

Preparação do di-hidrocloreto de N-f3-benzoilfenil)-2-(3-PÍridi-nil)-4-tiazolidinacarboxamida A N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarbonil--4-tiazolidinacarboxamida (1000 mg; 2,05 mmol), preparada tal como descrito no Exemplo 2, foi misturada com uma solução de ácido clorídrico em dioxano (15 ml de 4M), sob azoto, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, seguido de concentração num evaporador rotativo e partição do resíduo entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Foi adicionado bicarbonato de sódio sólido à mistura das duas fases, até o pH ser maior do que 8. As camadas foram então separadas, sendo a fase aquosa extractada com acetato de etilo e a camada orgânica resultante seca sobre sulfato de magnésio. A mistura foi então filtrada e concentrada até ficar um óleo amarelado. 0 óleo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel para originar 732 mg (92%) de tiazolidinacarboxamida, sob a forma de uma espuma branca. 0 material foi retomado em dioxano e agitado à temperatura ambiente com HC1 em dioxano (2 ml de 4M), adicionado gota a gota. A mistura reaccional heterogénea foi então agitada à temperatura ambiente, durante 5 minutos e concentrada sob vácuo, para originar di-hidrocloreto de N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida, sob a forma de um sólido branco (800 mg). EM (DCI-NH3)m/e:386 (M+l)+; 1RMN (CDCI3) δ 3,43-3,62 (c, 1,5H), 3,82 (dd,0,5 H, J=4,5, 12), 4,20-4,30 (c, 0,5H), 4,54 (m, 0,5 H, J=4,0), 4,98 (d, 0,5H, J=12), 5,72 (bs, 0,5H), 7,32-7,62 (c, 7H), 7,76-8,05 (c, 6H), 8,53 (dd, 0,5H, J=2,5), 8,62 (dd, 0,5H, J=2,5), 8,80 (b S, 0,5H), 9,28 (s, 0,5 H).

73 740 4967.PG.01 -27-

Exemplo 4

Preparação do di-hidrocloreto de N-Γ3-(3,4,5-trimetoxiben-zoil)fenil1-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida

Passo 1. N-terc-butilcarbonil-3-iodoanilina A 3-iodoanilina (25 g; 114,13 mmol) e o dicarbonato de di--terc-butilo 24,89 g) foram misturados em dicloreto de metileno, à temperatura ambiente e com agitação. A dimetilaminopiridina (50 mg), foi então adicionada e a mistura agitada à temperatura ambiente, durante a noite. A mistura foi vertida em HC1 0,1N e a fase orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi evaporado. 0 material foi purificado por cromatografia em sílica-gel e o resíduo resultante foi recristalizado a partir de acetato de etilo/hexano para originar 26,11 g (75%) de N-terc-butilcarbonil-3-iodoanilina, sob a forma de um sólido branco.

Passo 2. N-terc-butilcarbonil-3-tributil-estanho-anilina A N-terc-butilcarbonil-3-iodoanilina (28,2 g; 92,5 mmol), preparada tal como descrito atrás, hexabutil-di-estanho (46,7 ml; 92,5 mmol) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (2,13 g) em tolueno, foram misturados a 80°C durante um período de 48 horas. A mistura foi agitada com uma mistura acetato de etilo-água, a camada orgânica foi separada e o solvente evaporado. Adicionou-se hexano ao resíduo e a mistura foi filtrada através de Celite. 0 filtrado foi evaporado até um volume de 40 ml e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel, para se obter N-terc-butilcarbonil-3-tributil-estanho-anilina (22,6 g, 51%).

Passo 3. N-terc-butilcarbonil-3-(3.4.5-trimetoxibenzoil)anilina N-terc-butilcarbonil-3-tributil-estanho-anilina (18,6 g? 38,58 mmol) e cloreto de 3,4,5-trimetoxibenzoílo (8,81 g; 38,19 mmol) foram adicionados a cloreto de benziltetra-quis(trifenil-fosfina)paládio (155 mg) em tetra-hidrofurano, com agitação e aquecimento a 65"C durante 16 horas. Foi adicionado 73 740 4967.PG.01 -28-

acetato de etilo (250 ml) e a camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de sódio. O material foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel, originando 7,12 g (49,68%) de N-terc-butilcarbonil-3-(3,4,5-trimetoxibenzoil)anilina.

Passo 4. 3-(3.4.5-trimetoxibenzoil)anilina A N-terc-butilcarbonil-3-(3,4,5-trimetoxibenzoil)anilina (7,10 g, 18,92 mmol), preparada tal como descrito atrás, foi dissolvida em ácido acético (125 ml, 1,4 N) à temperatura ambiente. Foi adicionada uma solução de ácido clorídrico/ácido acético (20 ml) e a mistura foi deixada repousar durante 45 minutos. Foi adicionado éter dietílico (800 ml) e o precipitado resultante foi filtrado e seco para originar 3- (3,4,5-trimetoxibenzoil)anilina (5,24 g; 85,7%), sob a forma de um sólido cor de couro.

Passo 5. Di-hidrocloreto de N-r3-(3.4,5-trimetoxibenzoil)fe-nil1-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida 0 material desejado foi preparado utilizando o processo do Exemplo 3, com a excepção de se ter usado 3-(3,4,5-trimetoxi-benzoil)anilina em vez da 3-aminobenzofenona. RMN (CDC13, 300 MHz): 8 3,18-3,55 (m, 2H), 3,75-3,85 (m, 9H) , 4,31 (m, 1H), 5,91 (S,. 33H), 6,05 (s,. 66H), 7,06 (m, 2H), 7,49-7,59 (m, 2H), 7,85-8,02 (m, 2H), 8,12 (br s,. 33H), 8,18 (br s,. 66H), 8,55-8,67 (m, 1H), 8,78-8,83 (m, 1H), 8,96 (d, .66H), 9,07 (d, .33H). Espectro de Massa (FAB: 480 (M+l)+

Exemplo 5

Preparação do di-hidrocloreto de N- Γ 3- (4-metoxibenzoil) fenil ~) -2--(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida 0 material desejado foi preparado usando o processo do Exemplo 4, com a excepção de se ter usado o cloreto de 4- metoxibenzoílo em vez do cloreto de 3,4,5-trimetoxibenzoílo. RMN (DMSO-dg, 300 MHz): 8 3,15-3,32 (c, 1H), 3,45-3,55 (c, 1H), 3,88 (S, 1H), 4,25-4,36 (c, 1H), 5,92 (S, 0,33H), 6,05 (S,

73 740 4967.PG.01 -29-0,67η), 7,12 (d, 2H, J=8Hz), 7,38-7,45 (C, 1H), 7,49-7,56 (C, 1H), 7,75 (d, 2H, J=8Hz), 7,83-8,10 (c, 3H), 8,55 (bd, 0,67H, J=7,5Hz), 8,62 (bd, 0,33H, J=7,0Hz), 8,78-8,82 (m, 1H), 8,90 (d, 2H, J=3Hz), 9,06 (d, 2H, J“3Hz), 10,66 (bs, 0,33H), 10,78 (bs, o,67H). Espectro de Massa (dci/NH3): 420 (M+l)+

Exemplo 6

Preparação do di-hidrocloreto de Ν-Γ3-(3.4-metilenodioxiben-zoil)fenill-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida O material desejado foi preparado usando o processo do Exemplo 4, com a excepção de se ter usado o cloreto de 3,4-me-tilenodioxibenzoilo, em vez do cloreto de 3,4,5-trime-toxibenzoílo. RMN (CDCI3, 300 MHz): S 3,18 (m, 1H), 3,44 (c, 1H), 4,28 (m, 1H), 5,91 (s, 0,3 3H) , 6,50 (s, 0,67H), 6,19 (s, 2H), 7,09 (d, 1H,J=8HZ), 7,28-7,33 (C, 2H), 7,36-7,45 (c, 1H) , 7,48-7,55 (c, 1H), 7,85-8,09 (c, 3H), 8,55-8,68 (c, 1H), 8,79-8,85 (m, 1H) , 8,98 (d, 0,67H), 9,08 (d, 0,33H), 10,69 (bs, 0,33H), 10,71 (bs, 0,67H). Espectro de Massa (DCI/NH3): 433 (M+l)+

Exemplo 7

Preoaracão do di-hidrocloreto de N-(3-(3.5-dimetoxibenzoil^fe-nill-2-í 3-Piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida 0 material desejado foi preparado usando o processo do Exemplo 4, com a excepção de se ter usado o cloreto de 3,5-dimetoxibenzoílo em vez de cloreto de 3,4,5-trime-toxibenzoílo. RMN (CDCI3, 300 MHz): S 3,16-3,31 (c, 1H), 3,45-3,55 (m, 1H) , 3,30 (S, 6H), 4,28-4,35 (m, 1H), 5,92 (s, 0,33H), 6,05 (s, 0,67H), 6,79-6,85 (c, 3H), 7,45-7,59 (m, 2H), 7,88-8,01 (m, 2H) , 8,01-8,15 (m, 1H), 8,56-9,36 (c, 3H), 10,73 (bs, 1H). Espectro de Massa (DCI/NH3): 450 (M+l)+.

73 740 4967.PG.01 -30-

Exemplo 8

Preparação do di-hidrocloreto de N-T3-f3.4-dimetoxibenzoil)fe-nil1-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida O material desejado foi preparado usando o processo do Exemplo 4, com a excepção de se ter usado cloreto de 3,4-dimetoxibenzoílo em vez de cloreto de 3,4,5-trimetoxi-benzoílo. RMN (CDC13, 300 MHz): 6 3,10-3,50 (m, 2H), 3,82 (S, 3H), 3,88 (s, 3H), 4,28 (m, 1H), 5,89 (s, 0,67H), 6,02 (s, 0,33H), 7,12 (d, 1H), 7,31-7,59 (c, 4H), 7,82-8,12 (c, 3H), 8,43-8,61 (c, 1H) , 8,78-9,12 (c, 2H), 10,12 (s, 0,33H), 10,61 (s, 0,67H). Espectro de Massa (DCI/NH3: 450 (M+l)+.

Exemplo 9

Preoaracão da N-f3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-4-ditiolano-carboxamida

Passo 1. 2.3 —Dimercaptopropenato de metilo

Num balão de três tubuladuras, de 1 litro, seco à chama, foram deitados 30 g, (1,25 mol? 5,8 eq) de esferas de sódio (passadas por hexano). O balão foi equipado com um funil para adição e um condensador de refluxo. Foi adicionado metanol anidro (400 ml) ao sódio metálico, através do funil de adição, gota a gota (exotérmicai) a um caudal tal que se mantenha um refluxo suave durante a adição. Após todo o sódio estar em solução (aproximadamente 45 minutos), a reacção foi arrefecida a oeC e saturada com H2S gasoso, durante 1 h. Durante o decurso da adição, o excesso de H2S foi neutralizado por borbulhamento da linha de purga através de uma ratoeira contendo uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 10%. Uma solução de 50,0 g (0,22 mol, 1 eq.) de ácido 2,3-dibromopropiónico, dissolvido em 100 ml de metanol, foi adicionada à mistura reaccional através do funil de adição com um gotejamento rápido. A solução foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e foi agitada durante mais 18 h. 73 740 4967.PG.01 -31- Λ ^ .

A reacção foi então acidificada até pH=2 por adição gota a gota inicial de 100 ml de HC1 metanólico saturado (observada libertação de H2S), seguido de borbulhamento de HC1 gasoso na mistura reaccional, até se obter o pH desejado. Neste ponto surgiu um precipitado branco espesso. A solução foi deixada em agitação durante mais 4 horas e então foi concentrada no evaporador rotativo, para remoção do metanol. O resíduo pastoso resultante foi submetido a partição entre 300 ml de água e 300 ml de éter etílico. A fase aquosa foi extractada com éter etílico (2 x) e os extractos orgânicos combinados foram lavados uma vez com salmoura e secos sobre sulfato de magnésio. 0 agente de secagem foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob vácuo. Rendimento: 28,5 g, 86,5% óleo amarelo claro.

Passo 2. 2-(3-piridinil^-4-ditiolanocarboxilato de metilo A um balão de fundo redondo com três tubuladuras, equipado com uma ratoeira de Dean Stark e um funil de adição de caudal constante, foi adicionado 7,05 g (65,7 mmol; 1,0 eq.) de 3--piridinaldeído e 15,0 g (78,9 mmol; 1,2 eq.) de ácido p-toluenossulfónico, em 350 ml de tolueno, 25 ml de 2-butanol, e 15 ml de 1-butanol. A solução foi aquecida em refluxo, após o que 10,0 g (65,7 mmol, 1 eq.) do material, preparado tal como no passo 1, acima em 30 ml de tolueno, foram adicionados gota a gota, durante 90 minutos, à mistura reaccional em refluxo, através do funil de adição. A reacção foi deixada em refluxo durante a noite e no dia seguinte arrefecida até à temperatura ambiente e foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi submetido a partição entre uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e acetato de etilo (requer agitação durante >30 min). A fase aquosa foi extractada mais uma vez com acetato de etilo. Os extractos orgânicos combinados foram então sucessivamente lavados com uma solução aquosa saturada de bissulfito de sódio (x 2), solução aquosa de hidróxido de sódio 1M (x 2) e salmoura saturada (x 1), secos sob sulfato de sódio, filtrado e concentrado sob vácuo para originar 18,57 g (117% de rendimento bruto) de um óleo castanho. A TLC mostrou predominantemente o material desejado, com algum nicotinaldeído e com uma impureza

73 740 4967.PG.01 -32-muito menos polar. O óleo foi purificado por cromatografia flash (Si02, 80:20 hexanos:acetato de etilo). O ditiolano desejado foi isolado nas fracções 85-195 sob a forma de um óleo laranja, 8,03 g (50,6% de rendimento). RMN δ (CDC13) 3,45 (dd, 0,5H), 3,6 (dd, 0,5H), 3,65 (dd, 0,5H), 3,7 (dd, 0,5H), 3,8 (s, 1,5H), 3,82 (s, 1,5H) 4,5 (t, 0,5H), 4,65 (t, 0,5H), 5,65 (s, 0,5H), 5,75 (s, 0,5H), 7,3 (dd, 1H), 7,95 (ddt, 1H), 8,5 (td, 1H), 8,7 (dd, 1H).

Passo 3. Ácido 2-(3-PÍridiniH-4-ditiolanocarboxílico O éster ditiolano (2 g, 8,3 mmol, l eq.), preparado tal como no passo 2 acima, foi dissolvido numa solução 3:1 (v/v) de THF e H20, e adicionou-se de uma vez 432 mg de hidróxido de lítio hidratado (10 mmol; 1,2 eq.). A reacção assume imediatamente uma côr laranja. Após 10 min., verificou-se por TLC um consumo completo do éster de partida. A reacção foi concentrada in vacuo para remoção do THF, e a solução aquosa resultante foi extractada com éter (2 x) para remover quaisquer impurezas. A fase aquosa foi acidificada a pH=4 com solução aquosa de HC1 IN e concentrada in vácuo. 0 resíduo oleoso resultante foi então ultrassonicado com THF e etanol, e filtrado sob vácuo. 0 filtrado foi concentrado in vacuo e tratado (chased) duas vezes com tolueno, para originar 1,6 g (85% de rendimento) de um sólido amarelo.

Passo 4. N-(3-benzoilfenil^-2-(3-piridinil)-4-ditiolanocarboxami-da 0 material desejado foi preparado usando o processo do Exemplo 1, com a excepção de se ter usado ácido (3-piri-dinil)-4-ditiolanocarboxílico, preparado tal como descrito no passo 3 anterior, em vez de ácido 2-(3-piridinil)-4-tia-zolidinacarfooxílico. KMN (CDC13, 300 MHz): δ 4,0 (dd, 0,5H, J=3, 13 Hz), 4,17 (dd, 0,5H, J=2, 13 Hz), 4,55 (dd, 0,5H, J=2, 6Hz), 4,73 (dd, 0,5H, J=3, 6Hz), 5,79 (s, 1H), 7,3 (m, 1H), 7,45-7,65 (c, 5H), 7,8-7,95 (c, 5H), 8,55 (d, 1H, J=5 Hz), 8,7 (d, 1H, J=3 Hz), 8,97 (br d, 1H, J=7 Hz). IV (CDC13): 3700, 3320, 1680, 1660, 1600, 1590, 1530. Espectro de massa (DCI/NH3): 407 (M+l)+, 423 (M+NH4)+.

73 740 4967.PG.01

Exemplo 10

Preparação da Ν-Γ3-Γ3,4,5-trimetoxibenzoil)fenil1-2-(3-piridi-nil)-4-ditiolanocarboxamida 0 material desejado foi preparado pelo procedimento do Exemplo 9, com a excepção de se ter usado 3-(3,4,5-trime-toxibenzoíl)anilina, preparada tal como descrito no exemplo 4, em vez de 3-benzoil-anilina. RMN (CDC13, 300 MHz): δ 3,55 (dd, 0,66Ή, J=5, 14 Hz), 3,63 (dd, 0,33H, J=5, 13 Hz), 3,85 (s, 6H), 3,95 (s, 3H), 4,0 (dd, 0,33H, J=3, 12Hz), 4,15 (dd, 0,66H, J=3, 12 Hz), 4,55 (dd, 0,66H, J=3, 6 Hz), 4,75 (dd, 0,33H, J=3, 6 Hz), 5,77 (s, 0,66H), 5,78 (s, 0,33H), 7,1 (d, 2H, J=3 Hz), 7,3 (m, 1H), 7,45-7,6 (m, 2H), 7,75-8,0 (c, 3H), 8,55 (m, 1H), 8,73 (m, 1H), IV (CDCI3): 3400, 2900, 1690, 1650, 1580, 1530, 1330, 1130. Espectro de massa (DCI/NH3): 497 (M+NH4)+.

Exemplo 11

Preparação da N-í3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-formil-4-tia zolidinacarboxamida 0 material desejado foi preparado usando o processo do Exemplo 2, com a excepção de se ter usado o anidrido fórmico acético em vez do dicarbonato de di-terc-butilo. RMN (CDC13, 300 MHz): δ 3,33 (dd, 1H, J=8,5, 11,0), 3,86 (dd, 1H, J=6,0, 12,5), 5,16 (dd, 1H, J=4,5, 7,0), 6,16 (S, 1H), 7,28 (dd, 1H, J=4,0, 8,5), 7,31-7,62 (c, 6H), 7,76-7,92 (c, 4H), 8,38 (s, 1H), 8,56 (dd, 1H, J=1,5, 4,5), 8,68 (s, 1H), 9,21 (s, 1H). IV (CDCI3): 1695, 1655. Espectro de massa (DCI/NH3): 418 (M+NH4)+.

Exemplo 12

Preparação da N-(3-benzoilfenil)-2-( 3-pjridinil)-3-(N-metilcarba-moil)-4-tiazolidinacarboxamida 0 material desejado foi preparado usando o processo do Exemplo 2, com a excepção de se ter usado isocianato de metilo em vez de dicarbonato de di-terc-butilo. RMN (CDCI3, 300 MHz): δ 2,69-2,76 (c, 1-1/2H), 2,82 (d, 1-1/2H, J=4,5Hz), 3,28 (dd, 1H, J=6Hz, 12HZ), 3,67 (d, 1/2H, J=4,5HZ), 3,71 (d, 1/2H, J=4,5HZ),

73 740 4967.PG.01 -34-4,58 (d, 1/2H, J=4,5HZ), 4,66 (d, 1/2H, J=4,5Hz), 5,21 (dd, 1H, J=l,5Hz, 4,5Hz), 5,95 (s, 1/2H), 6,11 (s, 1/2H), 7,28-7,65 (c, 7H), 7,76-7,85 (C, 2H), 7,89-7,95 (C, 2H), 8,50-8,61 (c, 1H) , 8,68 (d, 1H, J—1,5HZ), 9,51 (S, 1/2H). 9,60 (S, 1/2H). IV (CDC13): 1535(br), 1660(s), 1690(s), 3300(br), 3460(w). Espectro de massa (DCI/NH3): 447 (M+H)+, 390, 250, 198.

Exemplo 13

Preparação da N-f3-benzoilfenil^-2-f3-piridinil)-tiazolid-4-il-acetamida

Passo 1. 2-(3-piridinil)-3-(terc-butoxicarbonil\-tiazolid-4- -il-diazometilcetona. A N-metilmorfolina (0,89 ml) foi adicionada a uma solução de ácido 2-(3-piridinil)-3-(terc-butoxicarbonil)-4-tiazolidinacarbo-xilico, preparado tal como no exemplo 2, passo 1 (2,52 g, 8,1 mmol), em THF seco (50 ml) a 0°C. O cloroformato de isobutilo (1,1 ml) foi então adicionado. A mistura foi agitada durante 15 minutos e então filtrada e o sólido lavado com THF (2 x 25 ml), o filtrado cor-de-rosa foi adicionado a uma solução de diazometano (~0,3 M, 250 ml) a 0°C. A solução laranja foi deixada com agitação durante mais 10 minutos e então o banho de arrefecimento foi removido, de modo a que a mistura aquecesse até à temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi purgada com azoto e então o solvente foi removido in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica-gel, eluindo com acetato de etilo:hexanos (1:1) para originar o material desejado sob a forma de um óleo laranja espesso (52%; 1,4 g).

Passo 2. Γ2—f3-piridinil)-3-terc-butoxicarbonintiazolid-4-ilace-tato de metilo.

Uma solução de benzoato de prata (1,0 g em 10 ml de trieti-lamina) foi adicionada a uma solução de 2-(3-piridinil)-3-(terc--butoxicarbonil)-tiazolid-4-ildiazometilcetona (1,4 g; 4,2 mmol) em metanol (50 ml). A mistura foi agitada durante 2 horas e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi submetido a

73 740 4967.PG.01 -35- partição entre acetato de etilo e água. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada. 0 resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel, eluindo com hexano:acetato de etilo (3:1), para originar 0,78 g (55%) do produto desejado.

Passo 3. Ácido r2-(3-PÍridinil)-3-terc-butoxicarbonil1tiazolid-4--ilacético.

Hidróxido de lítio mono-hidratado (90 mg; 1,1 eq.) foi adicionado a uma solução de [ 2-(3-piridinil)-3-terc--butoxicarbonil]tiazolid-4-ilacetato de metilo (0,66 g; 1,95 mmol) em metanol (8 ml) e água (2 ml) e a mistura foi deixada com agitação à temperatura ambiente, durante 4 horas. O solvente foi removido e o resíduo submetido a partição entre água e acetato de etilo. A fase aquosa foi lavada com acetato de etilo e acidificada até pH~4 com HC1 2M. Foi adicionado clorofórmio:isopropanol (9:1). A fase orgânica foi concentrada para originar 0,6 g do material desejado.

Passo 4. N-f3-benzoilfenil^-2—(3-piridinil^-3-terc—butoxicarbo-niltiazolid—4—ilacetamida. N-metilmorfolina (0,4 ml) e cloroformato de isobutilo (0,25 ml) foram adicionados a um solução de ácido [2-(3-piridinil)-3--terc-butoxicarbonil]tiazolid-4-ilacético (0,57 g; 1,76 mmol) em DMF (6 ml) e cloreto de metileno (15 ml) a 0°C. A mistura foi agitada durante 10 minutos e então foram adicionados hidrocloreto de 3-aminobenzofenona (0,45 g) e N-metilmorfolina (0,2 ml) em cloreto de metileno (5 ml). A mistura foi deixada com agitação durante 23 horas e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi submetido a partição entre água e acetato de etilo. A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e salmoura e então seca sobre sulfato de magnésio, o solvente foi removido e o resíduo cromatografado em sílica-gel, eluindo com acetato de etilo:hexano (6:4) para se obter o material desejado (66%). 73 740 4967.PG.01 -36-

Passo 5: N-( 3-benzoilfenil)-2-( 3-piridin.il) -tiazolid-4-ilacetami-da

Foi adicionado ácido clorídrico em dioxano (4 M; 10 ml) a N--(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarboniltiazolid-4--ilacetamida e a mistura foi agitada a 0°C durante 2 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi submetido a partição entre água e éter. A fase aquosa foi basifiçada com carbonato de sódio e extractada com cloreto de metileno. Esta fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e o solvente foi evaporado, o material foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel, eluindo com clorofórmio:metanol (95:5) para originar 0,177 g (87%) do composto desejado. RMN (CDCI3, 300 MHz): δ 2,68 (dd, 1H, J=5,0, 15,0), 2,76 (dd, 1H, J=7,0, 15,0), 2,84-2,93 (C, 2H), 3,36 (m, 1H), 3,71 (m, 0,5H), 4,01 (m, 0,5H), 5,62 (s, 0,5H), 5,73 (5, 0,5H), 7,30 (m, 1H), 7,49-7,61 (c, 5H), 7,77-7,92 (c, 5H), 8,56 (dd, 0,5H, J=1,0, 5,0), 8,59 (dd, 0,5H, J=1,0, 5,0), 8,78 (m, 1H), 9,05 (bs, 0,5H), 9,35 (bs, 0,5H). IV (CDCI3): 1685, 1660. Espectro de massa (DCI/NH3): 404 (M+H)+.

Exemplo 14

Preparação da N-f3-benzoilfenil^-2-(3-piridinil)-3-carbamoiltia-zolid-4-ilacetamida A uma solução de N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-tiazo-lid-4-ilacetamida (108 mg, 0,26 mmol) preparada tal como descrito no exemplo 13, em dioxano (2,6 ml), foi adicionado isocianato de trimetilsililo (128 jitl, 85%) à temperatura ambiente e sob azoto. Esta solução, foi então aquecida a 60°C durante 6 horas, e em seguida arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionada uma porção de isocianato de trimetilsililo. Esta solução foi de novo aquecida a 60°C, durante 6 horas e em seguida arrefecida até à temperatura ambiente e submetida a partição entre acetato de etilo (10 ml) e salmoura (5 ml). A fase aquosa foi extractada com acetato de etilo e então as camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de magnésio. Esta solução foi filtrada e concentrada para originar um óleo laranja, que foi purificado por cromatografia flash em sílica-gel, eluindo

73 740 4967.PG.01 -37- com clorofórmio:metanol 95:5. O material desejado foi obtido sob a forma de uma espuma branca. EMN δ (CDC13): 2,80 (dd, 1H, J=4,5, 13,0), 2,93 (dd, J=1,0, 13,0), 3,07 (dd, 1H, J=8,0, 12,0), 3,41 (dd, 1H, J=6,0, 11,0), 5,08 (m, 1H), 5,35 (bs, 2H), 6,41 (s, 1H), 7,20 (dd, 1H, J=6,0, 9,0), 7,38-7,52 (C, 4H), 7,58 (tt, 1H, J=0,5, 6,0), 7,71 (d, 1H, J=8,0), 7,78-7,88 (c, 3H), 8,37 (bs, 1H), 8,48 (d, 1H, J=3,0), 8,70 (d, 1H, J=2,0). IV (CHCl3) 1660, 1595. Espectro de massa (DCI-NH3): 447 (M+H)+ 404. Massa exacta 447, 148 (Experimental); 447, 149 (Teórica).

Exemplo 15

Preparação do di-hidrocloreto de N-f3-benzoilfenil)-N-metil-2--(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida.

Passo 1. N-f3-benzoilfenil^-N-metil-2-f3-piridinil)-3-terc-bu-toxicarbonil-4-tiazolidinacarboxamida

Foi adicionado hexametildissilazida de lítio (0,6 ml; 1,04 M em hexanos) a 0°C, sob azoto, a uma solução de N-(3-benzoil-fenil)-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarbonil-4-tiazolidinacarboxa-mida, preparada tal como descrito no exemplo 2 (202 mg; 0,41 mmol), em THF seco (4 ml; 0,1 mmol). A mistura foi agitada durante 20 minutos e então adicionou-se iodeto de metilo (25 μΐ) e a mistura foi agitada durante mais 8 horas. A mistura reaccional foi submetida a partição entre acetato de etilo e uma solução saturada de bicarbonato de sódio. A fase orgânica foi seca sobre sulfatado de magnésio e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash, eluindo com hexanos:acetato de etilo (12:3), para originar o produto desejado (0,53 g; 45%).

Passo 2. Di-hidrocloreto de N-(3-benzoilfenil)-N-metil-2-(3-pi-ridinil)-4-tiazolidinacarboxamida

Foi adicionado ácido clorídrico em dioxano (4 M; 10 ml) a N--(3-benzoilfenil)-N-metil-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarbonil-4--tiazolidinacarboxamida (0,64 g) em dioxano (3 ml). A mistura reaccional foi concentrada e o resíduo foi submetido a partição entre -38 73 740 4967.PG.01 ^ v^í.' ··- , .·/ ,- y 5>v; sjlifSsr, acetato de etilo e uma solução aquosa saturada de carbonato de sódio. A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de carbonato de sódio e seca sobre sulfato de magnésio. 0 solvente foi removido sob vácuo e o resíduo cromatografado em sílica-gel, eluindo com acetato de etilo, para originar o composto desejado sob a forma de um óleo incolor (417 mg; 81%). Este foi convertido no sal di-hidrocloreto usando o processo do exemplo 3. RMN (CDCI3 300 MHZ): 5 2,72-3,28 (C, 3H) , 3,42-3,97 (c, 4H), 5,57 (s, 0,6H), 5,61 (s, 0,4H), 7,21-7,48 (c, 6H), 7,81 (m, 1H), 8,51 (dd, 0,4H, J=1,0, 8,0), 8,56 (dd, 0,6H, J=1,0, 8,0), 8,72 (m, 1H). Espectro de massa (DCI/NH3): 286 (M+H)+.

Exemplo 16

Hidrocloreto de N-T3-Í 3.4.5-trimetoxibenzoiHfenil]-N-metil-2-f 3--piridinil^-4-ditiolanocarboxamida O material desejado foi preparado de acordo com o processo do Exemplo 15, com a excepção de se ter usado N-[3-(3,4,5-tri-metoxibenzoíl)fenil]-2-(3-piridinil)-4-ditiolanocarboxamida, preparada tal como descrito no exemplo 9, em vez da N-(3-ben-zoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarbonil-4-tiazolidina-carboxamida. RMN (CDCI3, 300 MHz): δ 3,35 (s, 3H), 3,45 (m, 2H), 3,85 (d, 6H), 3,95 (d, 3H), 4,35 (m, 0,5H), 4,5 (t, 0,5H), 5,29 (s, 1H), 7,05 (d, 2H, J=6Hz), 7,23 (m, 1H), 7,3 (m, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,73 (bs, 1H), 7,80 (m, 1H), 8,52 (d, 1H, J=6Hz), 8,64 (d, 1H, J=12Hz). Espectro de massa (DCI/NH3): 511 (M+H)+.

Exemplo 17

Preparação da N-(3-benzoilfenil)-N/-r2-(3-piridinil)ditiolan-4--illureia A difenilfosforilazida (0,46 ml); 2,1 mmol foi adicionada a uma solução de N-metilmorfolina (2,1 mmol) e ácido 2-(3--piridinil)-4-ditiolanocarboxílico, preparado tal como descrito no exemplo 9 (0,44 g; 1,95 mmole), em THF (20 ml). A mistura foi aquecida a 70°C durante 1 hora e então adicionou-se a 3-aminobenzofenona (0,58 g; 2,93 mmole). A mistura foi aquecida a 73 740 4967.PG.01 «r -39 70°C durante mais 90 min. e em seguida arrefecida até à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e o resíduo dissolvido em acetato de etilo. Esta solução foi lavada com bicarbonato de sódio, seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido sob vácuo. 0 resíduo foi cromatografado por cromatografia flash eluindo com acetato de etilo:hexano (7:3) para originar dois produtos separáveis, correspondendo à substituição cis e trans do anel do material desejado (atribuição desconhecida). RMN (cdci3, 300 MHz): δ 3,36 (dd, 1H, J = 1,0, 11,5), 3,48 (dd, 1H, J = 4,5, 11,5), 5,61 (s, 1H), 6,13 (ddd, 1H, J = 1,0, 4,5, 9,0), 6,30 (b d, 1H, J = 9,0), 7,21 (dd, 1H, J = 5,0, 9,0), 7,37-7,67 (c, 6H), 7,76-7,84 (c, 5H), 8,50 (dd, 1H, J = 1,0, 6,0), 8,78 (d, 1H), J = 1,0. Espectro de massa (DCI/NH3):422 (M+H)+, 241, 199. KMN (CDCI3, 300 MHz): δ 3,28 (d, 1H, J = 12,0), 3,52 (b d, 1H, J = 12,0), 5,55 (s, 1H), 6,29 (b S, 2H), 7,26 (m, 1H), 7,36-7,51 (C, 4H), 7,58 (m, 1H), 7,69 (d, 1H, J = 11,0), 7-72-7-88 (c, 5H), 8,50 (dd, 1H), 1,5, 6,0), 8,59 (d, 1H, J = 1,5). Espectro de massa (DCI/NH3):422 (M+H)+, 241, 199.

Exemplo 18

Preparação da N-Γ3-(3,4,5-trimetoxibenzoil)fenil-)-N/-f2-(3--piridinil^ ditiolan-4-il1ureia.

0 material desejado foi preparado de acordo com o processo do Exemplo 17, com a excepção de se ter usado 3-(3,4,5-trimetoxibenzoil) anilina, preparada tal como descrito no exemplo 4, em vez da 3-benzoilanilina. RMN (CDC13, 300 MHz): δ 3,37 (b d, 1H, J = 12 / 5) , 3,50 (dd, 1H, J = 4,0, 12,5), 3,86 (s, 6H), 3,94 (S, 3H), 5,62 (S, 1H), 6,11-6,19 (C, 2H), 7, 09 (S, 2H), 7,22 (dd, 1H, J = 5,0, 9,0), 7,38-7,46 (c , 3H) , 7,55 (bs, 1H), 7,69 -7,73 (C/ 2H), 7,81 (dt, 1H, J = 1,5, 9,0) , 8,51 (dd, 1H, 3 ' = 1 /5, 4 /5), 8,79 (d, : LH, J = 1,5) Espectro de massa (FAB): 512 (M+l) + • RMN (CDC1 3, 300 MHz): 6 3,3C 1 (dd. , 1H, J ' = 2, C 1, 12, .0), 3,52 (dd, 1H, J = 4 ,5, 12,0), 3,88 (s, 6H), 3,96 ( S, 3H) 5,59 (S, 1H), 6,06 (<*/ 1H, J + 9,0), 6,28 (dq, 1H, J = 2,0, 9/0), 7,10 (S/ 2H), 7,28 (dd, 1H, J = 6,0, 8,0), 7,38 (bs, 1H), 7,40-7,48 (c, 3H), 7,69--7,77 (c, 2H), 7,81 (dt, 1H, J = 1,5, 8,0), 8,51 (dd, 1H, J = = 1,0, 6,0), 8,62 (d, 1H, J = 2,0). Espectro de massa (DCI/NH3): 73 740 4967.PG.01 -40-

512 (M+l)+, 314.

Exemplo 19

Preparação da N-metil-N-f 3-benzoilfeniH-N#-r2-f 3-plridiniHdi-tiolan-4-il1ureia.

Passo 1. N-terc-butoxicarbonil-N--metil-3-aminobenzofenona

Foi adicionada N-terc-butoxicarbonil-3-aminobenzofenona (2 g; 6,7 mmol) em DMF (15 ml) a uma suspensão de hidreto de sódio (0,54 g; 13,5 mmol) em DMF (70 ml) e a mistura foi agitada a 0°C durante 40 minutos. Foi adicionado sulfato dimetílico (1,3 ml; 13,5 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 15 horas. A mistura foi submetida a partição entre acetato de etilo e solução saturada de NaCl. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo, para originar o material desejado sob a forma de um óleo laranja.

Passo 2. N-metil-3-aminobenzofenona

Foi adicionado ácido clorídrico em dioxanos (4 M, 7 ml) a uma solução de N-terc-butoxicarbonil-N-metil-3-aminobenzofenona (2,2 g; 7,4 mmol) em cloreto de metileno (5 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e depois concentrada. 0 resíduo foi submetido a partição entre clorofórmio e solução saturada de bicarbonato de sódio, e a camada orgânica foi lavada com solução saturada de cloreto de sódio e seca sobre sulfato de sódio. 0 solvente foi removido sob vácuo para originar o produto desejado.

Passo 3. N-metil-N-fS-benzoilfeniD-N'Γ2-(3-PÍridinil)ditiolan-4--illureia. O material desejado foi preparado usando o processo do exemplo 17, com a excepção de se ter usado N-metil-3-amino-benzofenona em vez da 3-aminobenzofenona. RMN (CDCI3, 300 MHz): δ 3,2 (dd, 1H, J = 3, 13 Hz), 3,35 (s, 3H), 3,45 (dd, 1H, J = 4, 13 HZ), 5,32 (br d, 1H, J = 9HZ), 5,55 (S, 1H0, 6,23 (ddd, 1H, J =

73 740 4967.PG.01 -41- 2, 4, 9 HZ), 7,25 (dd, 1H, J = 5,8 Hz), 7,5-7,85 (C, 10H), 8,5 (dd, 1H, J = 2,5 Hz), 8,63 (d, 1H, J = 3 Hz). IV (CDCI3): 1660, 1490. Espectro de massa (DCI/NH3): 436 (M+l)+, 330, 298. RMN (CDCI3, 300 MHZ): δ 3,32 (dd, 1H, J = 1,8 Hz), 3,37 (S, 3H), 3,45 (dd, 1H, J = 2, 8 Hz), 5,33 (dd, 1H, J = 6Hz), 5,6 (s, 1H), (s, 1H), (ddd, 1H, J = 1, 2, 6 Hz), 7,2 (dd, 1H, J = 2,5 Hz), 7,5 (dd, 2H, J = 5, 5 Hz), 7,55 (m, 1H), 7,63 (br dd, 3H, J = 5, 5 Hz), 7,8 (dd, 4H, J = 5 Hz), 8,5 (td, 1H, J = 1, 3 Hz), 8,57 (d, 1H, J = 1 Hz). IV (CDCI3): 300 (fraco), 1660, 1420. Espectro de massa (DCI/NH3): 436 (M+l)+, 238.

Exemplo 20

Preparação da N-metil-N-Γ 3-(3,4,5-trimetoxibenzoil)fenil1-Ν7-Γ2--(3-piridinil^ditiolan-4-il1ureia. O material desejado foi preparado de acordo com o processo do Exemplo 19, com a excepção de se ter usado N-terc-butoxi-carbonil-3-(3,4,5-trimetoxi)benzoilanilina em vez da 3-amino-benzofenona. RMN (CDC13, 300 MHz): 6 3,29 (dd, 1H, J = 3 Hz, J = 15 HZ), 3,37 (S, 3H), 3,45 (dd, 1H, J = 6 Hz, J = 21 Hz), 3,85 (s, 6H), 3,95 (s, 3H), 5,33 (d, 1H, J = 15 Hz), 5,6 (s, 1H), 6,08 (ddd, 1H, J = 3 Hz, J = 6 HZ, J = 12 Hz), 7,05 (S, 2H), 7,23 (m, 1H), 7,52 (dd, 1H, J = 9 Hz), 7,62 (m, 2H), 7,75 (d, 2H), 8,49 (d, 1H, J = 6 Hz), 8,57 (s, 1H). IV (CDCI3): 1660 (C=0, cetona), 1580, 1500. Espectro de massa (DCI/NH3): 526 (M+H) + . RMN (CDCI3, 300 MHz): 5 3,23 (dd, 1H, J = 3 Hz, J = 12 Hz), 3,35 (S, 3H), 3,45 (dd, 1H, J = 6 Hz), 3,88 (s, 6H), 3,97 (s, 3H), 5,33 (d, 1H, J = 12 Hz), 5,59 (s, 1H), 6,62 (ddd, 1H, J = 3 Hz, J = 7 HZ, J = 10 Hz), , 7,1 (s, 2H), 7,30 (m, 1H), 7,51 (d, 1H, J = 10 HZ), 7,59 (t, 1H, J = 6 Hz, J = 15 Hz), 7,72 (d, 1H, J = 10 Hz), 7,85 (d, 1H, J = 7 Hz), 8,5 (d, 1H, J = 6 Hz), 8,67 (s, 1H). IV (CDCI3): 1660 (C=o, cetona), 1580, 1500. Espectro de massa (DCI/NH3): 526 (M+H)+.

Exemplo 21

Preparação da N-(3-benzoilfenil)-2-13-piridil)-5-PÍrrolidina-carboxamida.

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Passo 1. Ácido 2,3-desidro-2-f 3-piridil)-5-pirrolidinacarboxí i j co 0 material do título foi preparado tal como descrito por Abbaspour, Hecht, Hoffman, J. Org. Chem. 1987, 52, 3474-3477.

Passo 2. N-(3-benzoilfenil)-2,3-desidro-2-f3-piridil^-5-pirroli-dinacarhnyamí da O material do título foi preparado de acordo com o processo do Exemplo 1, com a excepção de se ter usado o material preparado no passo 1 anterior, em vez do ácido 2-(3-piridi-nil)-4-tiazolidinacarboxílico.

Passo 3. N-(3-benzoilfenil)-2-(3-niridil)-5-pirrolidinacarboxa-mida 0 material preparado de acordo com o passo 2 foi reduzido com hidrogénio e 10% de paládio em carbono, para originar o produto desejado. RMN (CDC13, 300 MHz): δ 2,45 (m, 1H), 2,65 (m, 3H), 4,8 (dd, 1H, J = 4,5 Hz, J = 10,5 Hz), 5,15 (dd, 1H, J = 7,5 Hz, J = 12,0 HZ), 7,55 (m, 4H), 7,65 (m, 1H), 7,80 (m, 2H), 7,90 (m, 1H), 8,2 (m, 2H), 8,95 (m, 2H), 9,2 (s, 1H). Espectro de massa (DCI/NH3): 372 (M+H)+, 147.

Claims

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73 740 4967.PG.01 -43- REIVINDICACÕES 1 - Composto, uma sua forma estereoisomérica separada ou suas misturas, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, carac-terizado por o referido composto possuir a fórmula

em que A é .seleccionado do grupo constituído por (a) uma ligação de valência (b) metileno, e (c) >NR4 em que R4 é hidrogénio ou alquilo com um a seis átomos de carbono; X é enxofre ou >NR5 em que R^ é seleccionado do grupo constituído por hidrogénio, alquilo com um a seis átomos de carbono, alcoilo com um a seis átomos de carbono, -C(0)-NR6R7 onde R6 e R7 são seleccionados independentemente de hidrogénio e alquilo com um a seis átomos de carbono, e -C(0)0R8 em que R8 é um radical alquilo com um a seis átomos de carbono? Y é seleccionado do grupo constituído por enxofre, e metileno; R1 é seleccionado do grupo constituído por: (a) hidrogénio, e (b) alquilo com um a seis átomos de carbono; R2 é um, dois ou três substituintes seleccionados do grupo constituído por: (a) hidrogénio; (b) halogéneo; e (c) alquilo com um a seis átomos de carbono;

73 740 4967.PG.01 -44- R3 é um, dois ou três substituintes seleccionados do grupo constituído por: (a) hidrogénio; (b) halogéneo; e (c) alcoxilo com um a seis átomos de carbono; tudo o que se afirmou anteriormente com a condição de que quando X é NH ou azoto substituído com alquilo com um a seis átomos de carbono, A não pode ser NR4.
2 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ter a fórmula:

em que R1, R2 e R3 são definidos como anteriormente.
3 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ter a fórmula:

em que R1, R2 e R3 são definidos como anteriormente.
4 - Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ter a fórmula: (segue Fórmula) 4 Φ :5

‘.Λ 73 740 4967.PG.01 -45-

em que R1, R2 e R3 são definidos como anteriormente.
5 - Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por R1 e R2 serem seleccionados independentemente de hidrogénio e alquilo com um a seis átomos de carbono e R3 ser hidrogénio ou alcoxilo com um a seis átomos de carbono, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
6 - Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por ser seleccionado do grupo constituído por: N- (3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-terc-butoxicarbonil-4- -tiazolidinacarboxamida; N-[3-(4-metoxibenzoí1)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida; N-[3-(3,4-dimetoxibenzoí1)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida ; N-[3-(3,5-dimetoxibenzoí1)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida ; N-[3-(3,4,5-trimetoxibenzoí1)fenil]-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacarboxamida ; N-(3-benzoilfenil)-N-metil-2-(3-piridinil)-4-tiazolidinacar-boxamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-formil-4-tiazolidina-carboxamida; N-(3-benzoilfenil)-2-(3-piridinil)-3-(N-metilcarbamoí1-4-tiazolidinacarboxamida; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
7 - Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado -46- 73 740 4967.PG.01 por ser seleccionado do grupo constituído por: N-[(3-benzoilfenilJpiridinil]-4-ditiolanocarboxamida; N- [ 3- (3,4,5-triicietoxibenzoí 1) f enil ] -2- (3-piridinil) -4-ditio-lanocarboxamida? ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
8 - Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por ser seleccionado do grupo constituído por: N-(3-benzoilfenil)-N'-[2-(3-piridinil)ditiolan-4-il]ureia; N-[3-(3,4,5-trimetoxibenzoí1)fenil]-Ν'-[2-(3-piridinil)di-tiolan-4-il]ureia ? N-metil-N-(3-benzoilfenil)-Ν'-[2-(3-piridinil)ditiolan-4--il]ureia; N-metil-N-[3-(3,4/5-trimetoxibenzoí1)fenil]-N'-[2-(3-piridi-nil)-ditiolan-4-il]ureia; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.
9 - Composição farmacêutica, útil para inibição do PAF (factor de activação de plaquetas), num mamífero que necessite desse tratamento, caracterizada por compreender uma quantidade inibidora de PAF eficaz, de um composto tal como definido na reivindicação l, em combinação com um portador farmaceuticamente aceitável. Lisboa, ·£! ^ Por ABBOTT LABORATORIES =0 AGENTE 0FICIAL=