Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych ureidocefalosporyn o szerokim zakresie dzialania zarówno przeciw Gram-dodatnim jak i Gram-ujemnym mikroorganizmom.Szereg antybiotyków z grupy cefalosporyn ma wazne znaczenie w leczeniu i zwalczaniu chorób zakaznych czlowieka* Ciagle poszukuje sie nowych antybiotyków cefa¬ losporyn o zwiekszonej aktywnosci antybiotycznej zwlaszcza o szerokim zakresie dzialania przeciw mikroorganizmom Gram-ujemnym.Cefalosporyny zawierajace podstawiona grupe a-aminowa w 7-aryloacetamidowym lancuchu bo¬ cznym sa znane. Na przyklad opis patentowy Sta¬ nów Zjednoczonych Ameryki nr 3 646 024 przedsta¬ wia pewne kwasy 7-fa-(3-imidoiloureido)-aryloace- tamido]-cefalosporanowe, a opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 3 673 183 dotyczy kwa¬ sów a-ureidofenyloacetamidocefalosporanowych.Zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalaz¬ ku róznia sie budowa od zwiazków dotychczas zna¬ nych, poniewaz ich pierscien dwuwodorotiazynowy jest podstawiony w polozeniu 3 grupa heterocykli- cznotiometylowa. Ponadto, antybiotyki cefalospory- nowe wytwarzane sposobem wedlug wynalazku wykazuja wysoka aktywnosc nie tylko przeciw mi¬ kroorganizmom Gram-dodatnim ale równiez prze¬ ciw mikroorganizmom Gram-ujemnym, której nie posiadaja znane dotad zwiazki.Sposobem wedlug wynalazku wytwarza sie nowe antybiotyki cefalosporyn o ogólnym wzorze 1, w którym Z oznacza atom tlenu, R' oznacza atom wodoru lub grupe metylowa, R oznacza grupe fe- nylowa, hydroksyfenylowa, chlorowoofenylowa, ewentualnie podstawiona grupa hydroksylowa lub grupe tienylowa, Ri oznacza grupe o wzorze 2 lub o wzorze 3, w których R* oznacza nizsza grupe al¬ kilowa o 1—4 atomach wegla, R2 oznacza atom wodoru, grupe indanylowa, ftalidylowa lub acylo- ksymetylowa o wzorze 4, w którynv pe alkilowa o 1—4 atomach wegla lub grupe feny- Iowa, a w przypadku gdy Rz oznacza atom wodo¬ ru farmaceutycznie dopuszczalne sole tych zwiaz¬ ków.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze po¬ chodna 7-glicyloamidocefalospóryny o wzorze 5, w którym R i Rj maja wyzej podane znaczenie, pod¬ daje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze 6, w któ¬ rym A oznacza grupe o wzorze —N=C=*0 lub grupe o wzorze 7 i ewentualnie otrzymany kwas przeprowadza sie w ester, w którym R2 ma inne znaczenie niz atom wodoru.We wzorze 1 okreslenie „grupa hydroksyfenylo- wa" dotyczy grup 3- i 4-hydroksyfenylowych.Okreslenie „grupa chlorowcofenylowa" oznacza grupe fluoro-, chloro- i bromofenylowa, taka jak 4-chlorofenylowa, 3-chlorofenylowa, 3,4-dwuchlow- fenylowa, 4-bromofenylowa Itfb 4-fluorofenylowa.Okreslenie ,^grupa chloTOwCoienylowa podstawio¬ na grupa hydroksylowa" oznacza grupe) 3-chloro- 95 5753 95 575 4 4-hydroksyfenylowa, 3,5-dwuchloro-4-hydroksyfe- nylowa lub 3,5-dwubromo-4-hydroksyfenylowa. O- kreslenie „grupa tienylowa" dotyczy odpowiednich 2- i 3-izomerów tej grupy. .Jak wspomniano powyzej, rodnik heterocyklicz¬ ny w polozeniu 3 pierscienia cefemowego jest pod¬ stawiony nizsza grupa alkilowa o 1—4 atomach wegla.Przykladem tych grup jest grupa 1-metylo-lH- -tetrazolilowa-5, l-etylo-lH-tetrazolilowa-5, 5-me- tylo-l,3,4-tiadiazolilowa-2, 5-izopropylo-l,3,4-tiadia- zolilowa-5, i podobne grupy tetrazolowe i tiadiazo- lowe podstawione nizszymi grupami alkilowymi.Zwiazki o wzorze 1, w którym R' oznacza atom wodoru, wytwarza sie na drodze reakcji 3-tetrazo- lilotiometylo— lub tiadiazolilotiometylocefalospory- ny zawierajacej ewentualnie podstawiona grupe 7-fenyloglicyloamidowa z izocyjanianem furoilu wedlug schematu przedstawionego na rysunku. We wzorztclf wystepujacych w tym schemacie R, Ri i Z maja wyzej podane znaczenie.Zwiazki o wzorze 1, w których R' oznacza grupe metylowa wytwarza sie na drodze acylowania zwiazku o wzorze 5 chlorkiem N-( tylokarbamylu o wzorze 8.Chlorek karbamylu wytwarza sie w reakcji N- -metylo-2-furamidu z n-butylolitem w temperatu¬ rze —78°C, do wytworzenia soli litowej, która na¬ stepnie poddaje sie reakcji z fosgenem. Reakcje prowadzi sie podczas chlodzenia (w temperaturze —78°C) w obojetnym rozpuszczalniku, takim jak czterowodorofuran.Acylowanie glicyloamiblocefalosporyny o wzorze chlorkiem karbamylu prowadzi sie w obojetnym rozpuszczalniku w temperaturze od —15 do +10°C w obecnosci akceptora chlorowcowodoru.Jako obojetny rozpuszczalnik stosuje sie aceto- nitryl i czterowodorofuran. Jako akceptor chloro¬ wcowodoru stosuje sie trzeciorzedowe aminy, trój- etyloamine i pirydyne oraz tlenki alkilenu, takie jak tlenek propylenu i tlenek butylenu. Zwiazek wyjsciowy i chlorek karbamylu stosuje sie w ilos¬ ciach równomolowych.Na przyklad w celu wytworzenia zwiazku o wzorze 1, w którym R' oznacza grupe metylowa, z kwasu 7-(D-fenyloglicyloamido(-3-[l-metylo-lH- -tetrazolilo-5)tiometylo]-cefemo-3-karboksylowego- - -4 sporzadza sie zawiesine w bezwodnym cztero- wodorofuranie i rozpuszcza przez dodanie dwu- (trójmetylosililo)acetamidu. Roztwór chlodzi sie do temperatury okolo 0°C i dodaje równomolowa ilosc eLlorku N-(a-furoilo)-N-metylokarbamylu w czte- rowodorofuranie. Mieszanine miesza sie podczas chlodzenia w ciagu 2 godzin i pozostawia do ogrza¬ nia do temperatury pokojowej. Otrzymany produkt ekstrahuje sie rozpuszczalnikiem organicznym, ta¬ kim jak octan etylu. - . Wyjsciowe 7-tienyloglicyloamido-, 7-fenyloglicy- loamido- i 7-podstawione fenyloglicyloamidocefalo- sporyny, podstawione w polozenie 3 grupa hetero- cyklicznotiometylowa, o wzorze 5 wytwarza sie przez acylowanie 7-amino-3-heterocyklicznotiome- tylocefalosporyny aktywna pochodna fenyloglicyny lub podstawiona fenyloglicyna, na przyklad chlor¬ kiem kwasowym, w obecnosci akceptora chlorow¬ cowodoru, takiego jak trójetyloamina lub weglan sodu.Reakcje wyjsciowego zwiazku o wzorze 5 z izo¬ cyjanianem furoilu przeprowadza sie w sposób o- pisany ponizej. Z wyjsciowego zwiazku o wzorze 5 wytwarza sie zawiesine w obojetnym rozpuszczal¬ niku w temperaturze okolo 20—25°C i dodaje sro¬ dek sililujacy, taki jak dwu-(trójmetylosililo)-ace- tamid (BSA) lub sililoacetamid (MSA), w nadmia- *o rze, w celu otrzymania jednorodnego roztworu. Ja¬ ko obojetne rozpuszczalniki stosuje sie czterowodo¬ rofuran, dwuchlorometan, chloroform lub dioksan.Po otrzymaniu roztworu sililowanej pochodnej zwiazku wyjsciowego mieszanine reakcyjna chlodzi sie na lazni suchy lód — aceton w temperaturze okolo —70 do —80°C.Do zimnego roztworu dodaje sie izocyjanian w nadmiarze. Mieszanine reakcyjna miesza sie pod¬ czas chlodzenia w ciagu 3 godzin i pozostawia do ogrzania do temperatury pokojowej. Nastepnie do¬ daje sie metanol w nadmiarze w celu .rozlozenia nadmiaru srodka sililujacego, po czym mieszanine reakcyjna odparowuje sie pod zmniejszonym cis¬ nieniem w celu usuniecia lotnego rozpuszczalnika.Produkt ekstrahuje sie z pozostalosci octanem ety¬ lu, przemywa kwasem i zasada oraz oczyszcza przez rekrystalizacje.Opisanym powyzej sposobem kwas 7-amino-3- ^[i(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiometylo]-cefemo-3- so -karboksylowy-4 acyluje sie chlorkiem fenyloglicy- lowym w postaci chlorowodorku w obecnosci we¬ glanu sodu. Acylowany produkt poddaje sie reakcji z izocyjanianem furoilu przez rozpuszczenie acylo- wanego produktu w czterowodorofuranie z MSA.Otrzymuje sie zwiazek o wzorze 1, w którym R oznacza grupe fenylowa, Ri oznacza podstawnik 1-metylo-lH-tetrazolowy, R' oznacza atom H, a R2 oznacza atom wodoru.Zwiazki o wzorze 1, w którym R2 oznacza grupe 40 acyloksymetylowa, wytwarza sie przez reakcje soli, na przyklad soli metalu alkalicznego wolnego kwa¬ su o wzorze 1 z halogenkiem nizszego alkanoilo- ksymetylu lub benzoesanem chlorowcometylowym.Jako halogenki nizszego alkanoiloksymetylu stosuje 45 sie, na przyklad octan chlorometylowy, propionian chlorometylowy, octan bromometylowy, maslan bromometylowy, piwalonian chlorometylowy i po¬ dobne estry chlorowcometylowe nizszych alkilo¬ wych kwasów karboksylowych o lancuchu prostym so lub rozgalezionym, o 1—4 atomach wegla.Jezeli Y oznacza grupe fenylowa, do wytwarza¬ nia estru benzoiloksymetylowego mozna analogicz¬ nie uzyc benzoesan bromo- lub chlorometylowy.Reakcje przeprowadza sie poddajac sól kwasu 55 cefalosporanowego o wzorze 1, na przyklad sól so¬ dowa lub potasowa dzialaniu estru chlorowcomety- lowego w obojetnym rozpuszczalniku w tempera¬ turze okolo 20—55°C. Jako obojetny rozpuszczal¬ nik stosuje sie, na przyklad dwumetyloformamid «o (DMF), dwumetyloacetamid (DMAC), czterowodoro¬ furan i dioksan. Na przyklad, w celu otrzymania estru acetoksymetylowego kwasu cefalosporanowe- go sól sodowa kwasu 7^[a-«(3-furoilo-l-ureido)feny- loacetamido]-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiomety- 65 lo]cefemo-3-karboksylowego-4 poddaje sie reakcji5 j z octanem chlorometylowym w wodnym roztworze DMF.Estry indanylowe o wzorze 1 wytwarza sie przez estryfikacje kwasu cefalosporynowego indanolem-5.Estry indanylowe wytwarza sie znanym sposobem s stosowanym do wytwarzania estrów kwasów kar- boksylowych z fenolami. Na przyklad aktywna po¬ chodna kwasu cefalosporanowego, otrzymana z chloromrówczanu etylowego, poddaje sie reakcji « indanolem-5. lp v Estry flaidylowe o wzorze 1 wytwarza sie przez reakcje bromoftalidu z sola kwasu cefalosporyny, na przyklad sola sodowa lub potasowa. Bromo- ftalid o wzorze 9 wytwarza sie znanym sposobem przez reakcje ftalidu z N-bromosukcynimidem. lg Estry acyloksymetylowe o wzorze 1 sa skutecz¬ nymi doustnie postaciami kwasów antybiotyków.Farmaceutycznie dopuszczalne sole zwiazków o wzorze 1 wytwarza sie znanymi metodami. Repre¬ zentatywne farmaceutycznie dopuszczalne sole 20 obejmuja sole metali alkalicznych, na przyklad so¬ le sodu, litu i potasu, sól wapnia, sól amonu, sole amoniowe z nizszymi rodnikami alifatycznymi na przyklad sól utworzona z metyloamina, dwumety- loamina, dwuetyloamina lub dwu-n-propyloamina 25 oraz sole hydroksyalkiloamoniowe, utworzone na przyklad z etarioloamina lub dwuetanoloamina.Korzystnie farmakologicznie dopuszczalne sole sta¬ nowia sole rnetali alkalicznych, na przyklad sole sodowe i potasowe. Farmakologicznie dopuszczalne 30 sole zwiazków o wzorce 1, wytwarza sie metodami znanymi w syntezie cefalosporyn. Na przyklad an¬ tybiotyk w postaci wolnego kwasu zobojetnia sie wodorotlenkiem metalu alkalicznego, weglanem, wodorotlenkiem amonu, alkiloamina lub etanola- 85 mina. ' Przykladami zwiazków o wzorze 1 sa nastepu¬ jace pocnodne: kwas 7-i[a-(3-a-furoilo-l-ureido)-a-fenyloacetami- do]-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiometylo]-cefemo- • 40 . -3-karboksylowy-4, kwas 7-[ -a^(4-hydroksyfenylo)-acetamido] -3-.[(5-metylo-1,3,4 -tiadiazolilo-2(tiometylo] cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7-[a-(3-a-furoilo)-a-(a-tienylo)acetamido] -3- [(l-etylo-lH-tetrazolilo-5(tiometyk] -cefemo-3-karbo- 45 ksylowy-4, kwas 7-[a-(3-a-furoilo-l-ureido)-a-(3- chloro-4-hydroksyfenylo(acetamido]-3^[(l-metylo- lH-tetrazolilo-5)-tiometylo(-cefemo-3-karboksylowy -4, kwas 7-[a-(3-a-iuroilo-l-ureido)-a-(3-hydroksyfe- ^ nylo) acetamido]-3-[(5-metylo-l,3,4-tiadiazolilo-2) tiometylo]cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7^[a-(3-a-fuixilo-l-ureido)-a^4-chlorofeny- lo)acetamido]-3-[(5-metylo-l,3,4-tiadiazolilo-2)tiome- tylo] -cefemo-3-karboksylowy-4, 55 kwas 7-[a-(3-a-furoilo-l-ureido)-a-(3,5-dwuchlo- ro-4-hydroksyfenylo)acetamido]-3H[(l-metylo-lH-te- trazolilo-5)tiometylo]cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7-i[a-i(3-a-furoilo-l-ureido)-a^(3-bromofeny- lo)-acetamido]-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiome- 60 tylo]-cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7^[a-(3-a-furoilo-3-metylo-l-ureido)-a-feny- loacetamido]-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiomety- lo]-cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7^[a-(3-a-furoilo-3-metylo-l-ureido)-a-(a- 65 6 -tienylo)-acetamido]-3-(5-metylo-l,3,4-tiadiazolilo-2) tiometylo]-cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7^[a-(3-a-furoilo-3-metylo-l-ureido)-a-(3- chloro-4-hydroksyfenylo)-acetamido]-3-[(l-metylo- lH-tetrazplilo-5)tiometylo]-cefemo-3-karboksylowy- 4 kwas 7^[a^3-a-furoilo-3-metylo-l-ureido)-a7(4- -hydroksyfenylo(-acetamido]-3-[(5-metylo-l,3,4-tia- diazolilo-2(tiometylo]cefemo-3-karboksylowy-4 oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne, nietoksyczne sole.Zwiazki o wzorze 1 i ich farmaceutycznie dopusz¬ czalne sole hamuja .wzrost mikroorganizmów cho¬ robotwórczych w stosunku do zwierzat i ludzi. W szczególnosci zwiazki te hamuja w szerokim zakre¬ sie rozwój mikroorganizmów Gram-ujemnych i Gram-dodatnich.Zwiazki te hamuja równiez rozwój mikroorga¬ nizmów typu Staphylococcus odpornych na dziala¬ nie penicyliny. W zwiazku z powyzszym zwiazki wytworzone sposobem wedlug wynalazku zwalcza¬ ja infekcje u ludzi i zwierzat wywolana mikro¬ organizmami Gram-dodatnimi i Gram-ujemnymi.Furoilowe pochodne cefalosporyny sa szczególnie uzyteczne przeciw mikroorganizmom Gram-ujem- nym o odczynie indolododatnim i indolo-ujemnym, takim jak Proteus sp., Aerobacter sp., Pseuplomo- nas, Enterobacter sp., Serratia, na przyklad S. marcescens, Escherichia coli i Klebsiella. Ponadto wykazuja one równiez wysoka skutecznosc dziala¬ nia przeciw bakteriom z grupy Streptococcus D jak równiez Staphylococcus aureus i szczepom Sta¬ phylococcus odpornym na dzialanie penicyliny.Zwiazki o wzorze 1 moga byc podawane pacjen¬ tom pozajelitowo, na przyklad dozylnie lub do¬ miesniowo. Przy podawaniu nietoksycznych dawek stosuje sie okolo 25—1000 mg na'lkg wagi ciala pacjenta. Dawki te sa skuteczne do zwalczania za¬ równo miknoorganizmów Gram-dodatnich jak i Gram-ujemnych.Zwiazki wytworzone sposobem wedlug wynalazku mozna przygotowywac w postaci preparatów far¬ maceutycznych takich jak roztwory wodne lub in¬ ne roztwory odpowiednie do wstrzykiwania. Na przyklad zwiazki w postaci soli metali alkalicznych moga byc stosowane jako sterylne zawiesiny w obojetnym farmaceutycznie nosniku do wstrzyki¬ wania. Przy podawaniu dozylnym stosuje sie sole zwiazków wytworzonych sposobem wedlug wyna¬ lazku, na przyklad sól sodowa, która moze byc rozpuszczona w standardowych klinicznych roz¬ tworach I. V., takich jak dekstraza LV. do poda¬ wania w postaci kroplówki dozylnej.Korzystnie stosuje sie zwiazki o wzorze 1, w którym R oznacza grupe fenylowa, hydroksyfeny- lowa, chlorowcofenylowa, chlorowcofenylowa pod¬ stawiona grupa hydroksylowa lub grupe tienylowa.Szczególnie korzystna grupe stanowia zwiazki o wzorze 1, w którym R oznacza grupe fenylowa, hydroksyfenylowa lub chlorowcofenylowa podsta¬ wiona grupa hydroksylowa, zwlaszcza chlorofe»y- lowa podstawiona grupa hydroksylowa i ich &rr- maceutycznie dopuszczalne nietoksyczne sole.Przedstawicielami tej grupy zwiazków sa naste¬ pujace pochodne:7 kwas 7^[a-(3-a-furoUo-l-ureido)-a-fenyloacetami- do]-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-*5)tiometylo]cefemo-3 -karboksylowy-4, kwas 7w[a-(3-a-furoilo-l-ureido)-a-(4-hydrQksyfe- nylo) acetamido]-3-[(5-metylo-l,3,4-tiadiazolilo-2)tio- metylo]-cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7^[(H3^-furoilo-l-ureido)-a-(3-hydroksyfe- nylo)-acetamidol-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5(tio- metylo]cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7-[a-(3-a-furoilo-l-ureido)-a-(3-chloro-4-hy- droksyfenylo)-acetamido]-3-(l-metylo-lH-tetrazol-5- ilotiometylo)-cefemokarboksylowy-4, kwas 7-i[a-(3-a-furoUo-l-ureido)-a-(3,5-dwuchloro -4-hydroksyfenylo)-acetamido]-3-[(5-metylo-l,3,4- ^. -tiadiazoltto-2(tiometylo]cefemo-3-karboksylowy-4, kwas 7-[a-(3-a-furoUo-3-metylo-l-ureido)-a-(4-hy- droksyfenylo)-acetamido]-3-[(l-metylo-lH-tetrazoli- lo-5)tiometylo]cefemo-3-karboksylowy-4 i ich far¬ maceutycznie dopuszczalne nietoksyczne sole.Aktywnosc antybiotyczna zwiazków o wzorze 1 zilustrowano danymi otrzymanymi in vitro, sa one przedstawione w tablicy I i II.W tablicach tych minimalne stezenie hamujace (MIC) badanych zwiazków wskazuje na dzialanie zarówno na mikroorganizmy Gram-dodatnie jak i Gram-ujemne, WartoscMIC okreslano metoda plyt¬ kowa ^opisana przez Boryson'a i Szybalskfego w Sience", 116, 45-46 (1962).Tablica I ilustruje dzialanie antybiotyczne bada¬ nych zwiazków przeciw reprezentatywnym mikro¬ organizmom Gram-ujemnym. 7- Tablica II ilustruje dzialanie hamujace okreslone wartoscia MIC przeciw klinicznie wyizolowanym odpornym na dzialanie penicyliny mikroorganiz¬ mom Staphylocoecus w obecnosci i pod nieobec¬ nosc Surowicy.'Tablica I Aktywnosc antybiotyczna 7-[a-(3-furoilo-l-ure- ido)-fenylo-(hydroksyfenylo)acetamidpcefalospo- ryn przeciw mikroorganizmom Gram-ujemnym Badany mikroorganizm Shigella sp.Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Aerobacter aerogenes Salmonella Heidelberg Pseudomonas aerugi- J nosa 1 Serratia marcescens l MIC/fig/nH/ Badany zwiazek A1 . 6,5 7,0 ,0 7,5 6,8 12,3 19,5 1 B' .5,5 ;¦"¦ ,8 M 6,5 ,8 ,7 14,5 | 1 Badany zwiazek A oznacza jfcwas 7-[a-(3-a^furoilo-l-ure- ido)-«-fenyloacetamldol-3-[ tylo]cefemo-3-karboksylowy-4.* Badany zwiazek B oznacza kwas 7-[a-(3-a-furoilo-l-ure- ido)-a-(4-hydroksyfenylo)acetamido] -3-[(1-metylo-lH-tetra- ioIllo-5(tiometylo] ceferno-3~karboksylowy-4.Jak wykazuja dane in vitro przedstawione w obydwu tablicach furoiloureidocefalosporyny opi¬ sane powyzej sa odporne na dzialanie enzymów, penicylinazy i cefalosporynazy wytwarzanych od¬ powiednio przez odporne na dzialanie penicyliny Staphylococci i organizmy Gram-ujemne. 575 8 ! Tablica II Aktywnosc antybiotyczna 7^[a-(3-furoilo-l-ure- • ido)-hydroksyfenylo] -acetamidocefalosporyn przeciw Staphylocoecus odpornym na dzialanie | penicyliny Staphyloco¬ ecus V-41 V-32 X-100 V-84 Xi,l MlC/^g/ml/ Badany zwiazek A NS2 3,0 •4,5 20 0,4 0,4 S3 8,0 8,0 20 1.0 1.0 ] NS ,0 13,7 20 1,0 1,0 B S 20 20 20 1,0 1,0 1 Badane zwiazki A i B sa takie same jak okreslono dla tablicy 1,. 1 zwiazki badane pod nieobecnosc surowicy.* Zwiazki badane w obecnosci surowicy.Ponizsze przyklady ilustruja przedmiot wynalaz¬ ku, nie ograniczajac jego zakresu.Przyklad! Do zawiesiny 0,6693g kwasu 7-fe- nyloglicyloamido-3^[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tio- metylo]cefemo-3-karboksylowego-4w 100 ml bez¬ wodnego czterowodorofuranu dodaje sie nadmiar sililoacetamidu, w celu otrzymania Roztworu. Na- sttHnie dodaje sie sito molekularne Linde 4A i mieszanine reakcyjna chlodzi sie na lazni suchy lód — aceton.Do mieszaniny reakcyjnej podczas chlodzenia dodaje sie nadmiar izocyjanianu furoilu. Miesza- nie kontynuuje sie, podczas chlodzenia w ciagu 2 godzin, po czym pozostawia do ogrzania do tempe¬ ratury pokojowej. Do mieszaniny dodaje sie 5 ml metanolu, po czym saczy. Przesacz odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem, do usuniecia lotnych 40 rozpuszczalników. Pozostalosc rozpuszcza sie w roztworze wodnym kwasnego weglanu sodu i roz¬ twór ekstrahuje sie octanem etylu. Faze wodna za¬ kwasza sie do wartosci pH 1,5-2,0 rozcienczonym kwasem solnym i ekstrahuje octanem etylu. Ek- 45 strakt zateza sie, rozciencza równa objetoscia eteru naftowego, przy czym jako produkt wysacza sie kwas 7-4[a-(3-a-furoilo-l-ureido)-a-fenyloacetamidoJ -3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiometylo]-cefemQ-3- karboksylowy-4. 50 Widmo magnetycznego rezonansu jadrowego pro¬ duktu otrzymane w deuterowanym dwumetylosul- fotlenku bylo zgodne wykazujac piki przy naste¬ pujacych wartosciach 6: ,10 i 5,70 dla protonów C6 i C7 (Maktamu, multi- 55 piety przy 4,328 i 3,656 dla protonów metylenów oraz singlet przy 4,008 dla protonów N-metyleno- wych grupy tetrazolowej.Przyklad II. Do zawiesiny 0,955 g kwasu 7- (4-hydroksyfenyloglicyloamido)3-[(l-metylo-lH-te- 80 trazolilo~5)tiometylo-5]-cefemo-3~karboksylowego-4 w 100 ml czterowodorofuranu dodaje sie nadmiar sililoacetamidu. Do roztworu dodaje sie sito mole¬ kularne Linde 4A i mieszanine chlodzi sie na lazni suchy lód — aceton. Nastepnie podczas mieszania 65 dodaje sie izocyjanian furoilu w malym nadmiarze9 95 575 i miesza sie podczas chlodzenia w ciagu 3 godzin, po czym pozostawia do ogrzania do temperatury pokojowej. ~Do mieszaniny reakcyjnej dodaje sie 100 ml metanolu i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem, usuwajac lotny rozpuszczalnik. Pozo¬ stalosc rozpuszcza sie w roztworze wodnym kwas¬ nego weglanu sodu i roztwór przemywa octanem etylu. Nastepnie roztwór zakwasza sie rozcienczo¬ nym kwasem solnym do wartosci pH2 i ekstra¬ huje octanem etylu. Ekstrakty zateza sie i rozcien¬ cza eterem naftowym, przy czym jako produkt wytraca sie kwas 7-[a-(3-furoilo-l-ureido)-4-hydro- ksyfenyloacetamido]-3- [(l-metylo-lH-tetrazolilo-5) tiometylo]cefemo-3-karboksylowy-4.Produkt oczyszcza sie przez krystalizacje z mie¬ szaniny metanol-eter etylowy-pentan (Skelly-sol- ve-B); Przyklad III. Postepujac w sposób analogicz¬ ny do opisanego w przykladzie I, izocyjanian furo- ilu poddaje sie reakcji z kwasem 7-fenyloglicylo- amido-3^[(5-metylo-l,3,4-tiadiazolilo-2)tiometylo)] - -cefemo-3-karboksylowym'-4. Otrzymuje sie kwas 7-[cK3-a-furoilo-l-ureido)-a-fenyloacetamido]-3-[(5- -metylo-l,3,4-tiadiazolilo-2)tiometylo]cefemo-3-kar- boksylowy-4.Przyklad IV. Kwas 7-[a-(3-a-furoilo-l-ureido) -a-(3-chloro-4-hydroksyfenylo)-acetamido]-3-[(1-me¬ tylo-lH-tetrazolilo-5-tiometylo] cefemo-3-karboksy- lowy-4 wytwarza sie w reakcji izocyjanianu furo- ilu z kwasem 7-(3-chloro-4-hydroksyfenyloglicylo- amido)-3^[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiometylo)]ce- femo-3-karboksylowego-4.Przyklad V. Do zawiesiny 401 mg kwasu 7- -fenyloglicyloamido-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5) tiometylo]cefemo-3-karboksylowego-4 w 8 ml bez¬ wodnego acetonitrylu zawierajacego -2 ml tlenku propylenu dodaje sie, podczas mieszania, 1 ml dwu -(trójmetylosililo)acetamidu (BSA). Otrzymany roz¬ twór koloru pomaranczowego chlodzi sie do tem¬ peratury 0°C i dodaje maly nadmiar chlorku N- (2-furoilo)-N-metylokarbamylu w 2 ml bezwodnego acetonitrylu.Mieszanine reakcyjna saczy sie i dodaje metanol w celu zwiazania nadmiaru obecnego BSA. Prze¬ sacz odparowuje sie i pozostalosc rozpuszcza *sie w mieszaninie, octanu etylu i wody. Odczyn mie¬ szaniny reakcyjnej doprowadza sie do pH o war¬ tosci 2, oddziela warstwe organiczna, przemywa woda, suszy i odparowuje, otrzymujac kwas 7-[a- -(3-a-furoilo-3-metylo-l-ureido)-a-fenyloacetamido] -3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiometylo(cefemo-3- -karboksylowy-4.Po krystalizacji z mieszaniny aceton-eter otrzy¬ muje sie 156 mg oczyszczonego produktu.Przyklad VI. Do roztworu 511 mg kwasu 7- -(3-chloro-4-hydroksyfenyloglicyloamido)-3^[(l-me- tylo-lH-tetrazolilo-5)-tiometylo]cefemo-3-karboksy- lowego-4 w 1 ml czterowodorofuranu i 1 ml dwu- (trójmetylosililo)acetamidu dodaje sie roztwór 2 ml tlenku propylenu w 8 ml acetonitrylu. Otrzymany roztwór chlodzi sie do temperatury 0°C i dodaje roztwór 2 #ml chlorku N-(2-furoilo)-N-metylo-kar- bamylu w 2 ml acetonitrylu. Mieszanine reakcyjna koloru ciemnego miesza sie w temperaturze 0°C w ciagu 2 godz. i pozostawia do ogrzania do tem¬ peratury pokojowej.Mieszanine saczy sie i dodaje 3 ml metanolu w celu zwiazania nadmiaru pochodnej sililowej. Prze- sacz odparowuje sie, a pozostalosc rozpuszcza w mieszaninie octan etylu z woda. Podczas miesza¬ nia, mieszanine zakwasza sie rozcienczonym kwa¬ sem solnym do pH o wartosci 2. Faze organiczna oddziela sie, przemywa woda, suszy i odparowuje sie pod zmniejszonym cisnieniem. Po krystalizacji z mieszaniny octan etylu ^— eter etylowy — eter naftowy otrzymuje sie 74 mg kwasu 7-{a-(2-a-fu- roilo-3-metylo-l-ureido)-a-(3-chloro-4-hydroksyfe- nylo)-acetamido]-3-[(l-metylo-lH-tetrazblilo-5)tio- metylo]cefemo-3-karboksylowego-4.Przyklad VII. Kwas 7-[a-(3-a-furoilo-l-urei- do)-a-(a-tienylo)-acetamido]-3h[(1-metylo-lH-tetra- zolilo-5)-tiometylo]cefemo-3-karboksylowy-4.Do zawiesiny 467 mg kwasu 7^[a(a-tienylu)-a- aminoacetamido]-3-[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tió- metylol-cefemo-3-karboksylowego-4 w 100 ml bez¬ wodnego THF dodaje sie 2g jedno-(trójmetylosili- lo)acetamidu (MSA). Po rozpuszczeniu dodaje sie mala ilosc sita molekularnego do osuszenia i roz¬ twór chlodzi sie do temperatury 0°C. Do zimnego roztworu dodaje sie nadmiar izocyjanianu furoilu w 2 ml THF. Mieszanine reakcyjna miesza sie w temperaturze 0°C w ciagu 3 godzin i pozostawia do ogrzania do temperatury pokojowej. Przesacz od¬ parowuje sie, a pozostalosc przemywa sie octanem etylu i woda. Faze wodna zakwasza sie rozcien¬ czonym kwasem solnym pHo wartosci 2.Warstwe organiczna traktuje sie rozcienczonym roztworem kwasnego weglanu sodu do uzyskania pH 7,2. Warstwe wodna oddziela sie i zakwasza do pH 2 rozcienczonym kwasem solnym, w tempera¬ turze lazni lodowej. Zakwaszony roztwór ekstrahuje sie octanem etylu. Ekstrakt suszy sie i odparowu¬ je, a pozostalosc rekrystalizuje z mieszaniny ace¬ ton-eter etylowy — eter naftowy otrzymujac w pierwszym rzucie 45 mg produktu, w drugim rzu¬ cie otrzymuje sie 83 mg produktu i dodatkowo 24 mg produktu z przesaczu.Przyklad VIII. Kwas 7-[a-(3-a-furoilo-3-me- tylo-l-ureido)-a-(2-tienylo)acetamido]-3-[(l-metylo- -lH-tetrazolilo-5)tiometylo]cefemo-3-karboksylowy- -4.Zawiesine 234 mg kwasu 7-[(a-amino-a-)a-tieny- lo)-acetamido]-3H[(l-metylo-lH-tetrazolilo-5)tiome- tylo]cefemo-3-karboksylowego-4 w 50 ml bezwod¬ nego acetonitrylu rozpuszcza sie 5 ml BSA i roz¬ twór koloru blado-pomaranczowego chlodzi sie do temperatury 0°C. Do zimnego roztworu dodaje sie 2 ml tlenku propylenu i stechiometryczny nadmiar chlorku -N(a-furoilo)-N-metylokarbamylu. Miesza¬ nine reakcyjna miesza sie w ciagu 2 godzin w temperaturze 0°C, jedna godzine w temperaturze pokojowej i dodaje metanol w celu rozlozenia srodka sililujacego. Mieszanine odparowuje sie, a pozostalosc ekstrahuje sie octanem etylu przy war¬ tosci pH 2. Ekstrakt przemy\pa sie woda, suszy i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem. Sucha pozostalosc rekrystalizuje sie z mieszaniny aceton — eter etylowy — eter naftowy, otrzymujac 114 mg produktu. 40 45 50 55 6095 575 li 12 PL