PL90102B1 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- PL90102B1 PL90102B1 PL17106974A PL17106974A PL90102B1 PL 90102 B1 PL90102 B1 PL 90102B1 PL 17106974 A PL17106974 A PL 17106974A PL 17106974 A PL17106974 A PL 17106974A PL 90102 B1 PL90102 B1 PL 90102B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- mutants
- strain
- asporogenic
- action
- mutagenic
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 30
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 claims description 11
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 4
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 claims description 4
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 claims description 4
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 claims 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims 1
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 9
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 8
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 6
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 6
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 6
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 3
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000007362 sporulation medium Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 241000907663 Siproeta stelenes Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004566 building material Substances 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000022912 endospore formation Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 235000021384 green leafy vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- FDZZZRQASAIRJF-UHFFFAOYSA-M malachite green Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)=C1C=CC(=[N+](C)C)C=C1 FDZZZRQASAIRJF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940107698 malachite green Drugs 0.000 description 1
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical class ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest prosty sposób otrzymywania mutantów o zwiekszonej zdolnosci do biosynte¬ zy antybiotyków polipeptydowych,w szczególnosci wysokoaktywnych mutantów drobnoustrojów tworzacych endospory (przetrwalniki). , W opisie patentowym nr 66255 podany jest sposób otrzymywania mutantów o zwiekszonej zdolnosci wytwarzania antybiotyków z grupy polipeptydów, polegajacy na selekcji mutantów, niezdolnych do asymilacji aminokwasów, bioracych udzial w syntezie antybiotyku. Istota tego wynalazku pologa na uszkodzeniu w komór¬ kach drobnoustroju, na drodze indukowanej mutacji, ukladów enzymatycznych, odpowiadajacych za przemiane kataboliczna aminokwasów, tworzacych czasteczke antybiotyku oraz na prostym sposobie róznicowania poszukiwanych mutantów.Obecnie stwierdzono, ze w przypadku bakterii przetrwalnikujacych, opierajac sie na innych niz wyzej wymienione kryteriach, mozna otrzymywac w prosty i szybki sposób mutanty o wysokiej zdolnosci wytwarzania antybiotyków polipeptydowych.Biosynteza antybiotyków polipeptydowych rozpoczyna sie po zakonczeniu fazy logarytmicznego wzrostu drobnoustroju i maksymalne jej nasilenie przypada na faze stacjonarna wzrostu. W tej samej fazie wzrostu i w tych samych warunkach drobnoustroje przetrwalnikujace przechodza w stadium sporogenezy, konczace sie uksztaltowaniem endospory (przetrwalnika).Wedlug dotychczasowego pismiennictwa naukowego przyjmuje sie, ze istnieje scisly zwiazek miedzy biosynteza antybiotyków polipeptydowych i sporogeneza.Wtoku badan wlasnych nad biosynteza antybiotyków polipeptydowych, wytwarzanych przez szczepy z rodzaju Bacillus, stwierdzono, ze aktywnosc antybiotyczna szczepów nie jest zalezna od wytwarzania endospor.Stwierdzenie tego faktu, przyczynilo sie do opracowania prostego i szybkiego sposobu selekcji wysokoaktyw¬ nych mutantów, wytwarzajacych antybiotyki polipeptydowe, opierajacego sie na racjonalnej ingerencji w procesy komórkowe drobnoustroju.2 90102 W sposobie wedlug wynalazku wydziela sie sposród duzej liczby komórek indukowane mutanty z blokiem genetycznym na szlaku sporulacji. W biosyntezie antybiotyków polipeptydowych i sporogenezie istotne znacze¬ nie maja aminokwasy, z których tworzy sie czasteczka antybiotyku i które sa podstawowym skladnikiem w procesie tworzenia endospory (np. plaszcz endospory sklada sie z kilku warstw bialkowych). Obydwa procesy, przebiegajac w tej samej fazie wzrostu, czerpia material budulcowy z tej samej puli metabolicznej aminokwasów. Indukcja bloku genetycznego, wyrazajacego sie zahamowaniem procesu sporulacji, stwarza korzystne warunki do zwiekszenia puli aminokwasowej w komórce drobnoustroju i tym samym sprzyja intensyfikacji biosyntezy antybiotyku polipeptydowego.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze komórki drobnoustroju poddaje sie dzialaniu czynnika mutagennego (np. promieni nadfioletowych, nitrozoguanidyny, iperytu azotowego;, celem wywolania mutacji genów kontrolujacych proces sporulacji, po czym wysiewa sie zawiesine na plytki Petri'ego z agarem hodowlanym tak, aby wystapil wzrost w postaci pojedynczych kolonii, inkubuje w termostacie i sposród wyroslych kolonii selekcjonuje mutanty sporulacyjne metoda makroskopowa, mikroskopowa lub metoda wysiewu po uprzednim ogrzaniu hodowli w kapieli wodnej o temperaturze 70°C w ciagu 20 minut.W wyniku tak przeprowadzonej selekcji otrzymuje sie mala grupe populacji, stanowiaca drobny odsetek (rzedu okolo 10"3) kolonii, wyroslych z komórek, poddanych dzialaniu mutagenu. Wyizolowane mutanty poddaje sie dalszej selekcji, polegajacej na ocenie ich zdolnosci do biosyntezy antybiotyku metoda fermentacji w kolbach na trzesawce.Róznicowanie mutantów sporulacyjnyeh (asporogennych i oligosporogennych), stanowiacych potencjalne zródlo szczepów o zwiekszonej zdolnosci wytwarzania antybiotyków polipeptydowych, mozna przeprowadzac róznymi sposobami. U wiekszosci szczepów rodzaju Bacillus, które wytwarzaja wiekszosc poznanych antybioty¬ ków polipeptydowych, skuteczna jest metoda makroskopowa, polegajaca na obserwacji wygladu kolonii. Mutanty sporulacyjne na agarze hodowlanym tworza kolonie przezroczyste i bezbarwne, istotnie rózniace sie od kolonii szczepu wyjsciowego.W przypadku drobnoustrojów, u których nie obserwuje sie zróznicowania morfologicznego kolonii, izoluje sie pojedyncze kolonie do plynnej pozywki sporulacyjnej i po 48—72 godzinnej inkubacji ogrzewa sie hodowle w kapieli wodnej o temperaturze okolo 70°C calem zabicia komórek wegetatywnych i nastepnie wysiewa sie na agar odzywczy. Te populacje, które nie wyrastaja w ogóle po ogrzaniu lub tworza nieliczne kolonie, poddaje sie dalszej selekcji. Korzystnym wariantem tej metody jest wstepna ocena zdolnosci sporulacji poszczególnych kolonii, dokonywana na podstawie obrazu mikroskopowego preparatów, barwionych zielenia malachitowa (na endospory).Wysokoaktywne mutanty, wytwarzajace antybiotyki z grupy polipeptydów, otrzymane sposobem wedlug wynalazku wykazuja stabilnosc pod wzgledem cechy wytwarzania antybiotyku, latwa jest ich hodowla i sa uzyteczne w procesie produkcji antybiotyków polipeptydowych. Kilkakrotne pasazowanie i przechowywanie hodowli na agarze wciagu kilku tygodni w temperaturze 2°—4°C, jak równiez przechowywanie w postaci zliofilizowanej, nie wplywalo na obnizenie aktywnosci antybiotycznej wyizolowanych wysokoaktywnych mutantów.Dalsze szczególy, dotyczace sposobu postepowania znajduja sie w przykladach, które sluza do objasnienia, ale nie ograniczaja wynalazku.Przyklad I. Otrzymywanie mutantów szczepu Bacillus licheniformis NCIB 8874 o zwiekszonej zdolnosci wytwarzania bacytracyny.Selekcji poddano aktywny szczep Bacilfus licheniformis, który w hodowli trzesawkowej wytwarzal okolo 230 j/ml (1 j = « 20 meg) bacytracyny.W celu otrzymania poszukiwanych mutantów zawiesine szczepu wyjsciowego poddaje sie dzialaniu promieni nadfioletowych w dawce, wywolujacej inaktywacje komórek w 99,0—99,9%. Zawiesine bakterii przygotowuje sie z hodowli na bulionie, bedacej w fazie logarytmicznego wzrostu. Osad bakterii, zebrany przez odwirowanie, przemywa sie trzykrotnie jalowym 0,9% roztworem NaCI. Po dokladnym zhomogenizowaniu zawiesine, zawierajaca okolo 108 komórek/ml stosuje sie do doswiadczenia.Naswietlona zawiesine wysiewa sie na plytki Petri'ego z agarem zwyklym w takim rozcienczeniu, aby po 72 godzinnej inkubacji w temperaturze 36°C wystapil wzrost w postaci pojedynczych kolonii. Po tym czasie obserwuje sie na plytkach zróznicowanie kolonii. Poszukiwane mutanty tworza kolonie bezbarwne i przezroczys¬ te, natomiast kolonie szczepu wyjsciowego sa nieprzezroczyste i bezowe. Z plytek izoluje sie kolonie przezro¬ czyste na agary skosne, inkubuje w 34°C w ciagu 42 godzin i nastepnie okresla sie ich aktywnosc antybiotyczna i zdolnosc do sporulacji wedlug nizej podanych schematów.Okreslenie aktywnosci antybiotycznej. Aktywnosc antybiotyczna otrzymanych mutantów sprawdza sie metoda fermentacji w kolbach na trzesawce. Wszystkie doswiadczenia przeprowadza sie w tych samych90 102 3 warunkach, w ten sam sposób i na pozywkach o jednakowym skladzie. W kazdej serii doswiadczen prowadzi sie fermentacje kontrolna przy uzyciu szczepu wyjsciowego, co pozwala na dokladne porównanie aktywnosci badanych mutantów z aktywnoscia szczepu wyjsciowego.Sprawdzenie zdolnosci sporulacji. Wyizolowanymi populacjami szczepi sie plynne podloze sporulacyjne i inkubuje 48-72 godzin w temperaturze 36°C. Otrzymane hodowle ogrzewa sie w kapieli wodnej o temperatu¬ rze 70°C wciagu 20 minut i nastepnie wysiewa na podloze agarowe. Mutanty asporogenne po ogrzaniu nie wyrastaja w ogóle, a mutanty oligosporogenne wykazuja wzrost w postaci nielicznych kolonii.Postepujac wedlug opisanego schematu wyizolowano 32 mutanty sporulacyjne, wsród których znaleziono 4 mutanty (3 asporogenne i 1 oligosporogenny), wytwarzajace od 50 do 75% wiecej bacytracyny w porównaniu ze szczepem wyjsciowym.Przyklad II. Otrzymywanie mutantów Bacillus subtilis o zwiekszonej zdolnosci wytwarzania bacytra¬ cyny.Do selekcji uzyto aktywnego szczepu Bacillus subtilis I A— L, wytwarzajacego w hodowli na trzesawce okolo 250 j/ml bacytracyny.Mloda szesciogodzinna hodowle na bulionie szczepu Bacillus subtilis odwirowuje sie, trzykrotnie przemy¬ wa sie jalowym 0,9% roztworem NaCI i otrzymany osad bakteryjny zawiesza w jalowym buforze tris (2-amino-2-hydroksymetylo-propanodiol-1,3) o wartosci pH = 7. Tak przygotowana zawiesine, zawierajaca oko¬ lo 108 komórek/ml, poddaje sie dzialaniu nitrozoguanidyny w dawce, wywolujacej inaktywacje komórek w okolo 99%. Doswiadczenie prowadzi sie w temperaturze 2—4°C. Po ekspozycji zawiesine odwirowuje sie, osad zawiesza w 0,9% roztworze NaCI i wysiewa na podloze agarowe tak, aby po 48 godzinach inkubacji w temperaturze 34°C wystapil wzrost w postaci pojedynczych kolonii. Z pojedynczych kolonii, oznaczonych numerami, przygotowuje sie preparaty barwione zielenia malachitowa i obserwuje w mikroskopie wystepowanie przetrwal ni ków bakteryjnych. Koloniami, u których nie stwierdza sie przetrwal ników, szczepi sie plynne podloze spoluracyjne i inkubuje w temperaturze 36°C w ciagu 48—72 godzin. Otrzymane hodowle ogrzewa sie w lazni wodnej o temperaturze 70°C w ciagu 20 minut i nastepnie wysiewa na podloze agarowe, korzystnie na male sektory, wyznaczone na plytce Petri'ego. Te kolonie, które po ogrzaniu nie wykazuja w ogóle wzrostu lub tworza tylko nieliczne kolonie izoluje sie na agary skosne i po inkubacji 42 godzinnej w temperaturze 34°C sprawdza sie ich aktywnosc antybiotyczna wedlug schematu, podanego w przykladzie I.W wyniku selekcji, przeprowadzonej w wyzej podany sposób, wyizolowano 19 mutantów, wsród których stwierdzono 2 populacje o zwiekszonej ponad 60% zdolnosci wytwarzania bacytracyny w porównaniu ze szczepem wyjsciowym. PL
Claims (5)
- Zastrzezenia patentowe 1. Sposób otrzymywania mutantów szczepów z rodzaju Bacillus o zwiekszonej zdolnosci wytwarzania antybiotyków polipeptydowych przez dzialanie czynników mutagennych, znamienny tym, ze zawiesine drobnoustroju szczepu przetrwalnikujacego wysiewa sie po dzialaniu czynników mutagennych na podloze agarowe, inkubuje w termostacie i sposród wyroslych kolonii selekcjonuje makroskopowo, mikroskopowo oraz metoda wysiewu po uprzednim zabiciu komórek wegetatywnych, mutanty asporogenne i oligosporogenne, których aktywnosc antybiotyczna porównuje sie w znany sposób metoda fermentacji z aktywnoscia szczepu wyjsciowego.
- 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze zawiesine szczepu wyjsciowego, otrzymana w hodowli w fazie logarytmicznego wzrostu, poddaje sie dzialaniu czynników mutagennych w dawce, wywoluja¬ cej inaktywacje komórek.
- 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jako czynniki mutagenne, w odniesieniu do otrzymywania mutantów asporogennych i oligosporogennych o zwiekszonej zdolnosci wytwarzania antybiotyku, stosuje sie korzystnie promienie nadfioletowe i/lub nitrozoguanidyne.
- 4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze po inkubacji selekcjonuje sie wyrosle kolonie, charakteryzujace sie odmiennymi od szczepu wyjsciowego cechami morfologicznymi, tworzace mutanty asporogenne.
- 5. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze selekcje mutantów przeprowadza sie wsród plynnych hodowli, które po ogrzaniu w temperaturze^zabijajacej komórki wegetatywne, nie wykazuja zdolnosci wzrostowych. PL
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL17106974A PL90102B1 (pl) | 1974-05-14 | 1974-05-14 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL17106974A PL90102B1 (pl) | 1974-05-14 | 1974-05-14 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL90102B1 true PL90102B1 (pl) | 1977-01-31 |
Family
ID=19967292
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL17106974A PL90102B1 (pl) | 1974-05-14 | 1974-05-14 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL90102B1 (pl) |
-
1974
- 1974-05-14 PL PL17106974A patent/PL90102B1/pl unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hirota | The effect of acridine dyes on mating type factors in Escherichia coli | |
| NO153305B (no) | Fremgangsmaate for aa transformere sporogen bacillus subtilis rub 830 til asporogen bacillus subtilis rub 331 som er anvendelig som en vert i et vert-vektor system | |
| KR102176078B1 (ko) | 유기물 중 탄수화물과 단백질 및 섬유소에 대한 분해능을 갖는 신규 미생물 바실러스 서브틸리스 bs300 균주를 포함하여 배양하는 고체배양 방법 | |
| Groß et al. | Adding complexity to soil food webs: Myxobacteria have broad predation spectra with bacteria, yeasts and filamentous fungi in vitro | |
| Hungund et al. | Strain improvement of Gluconacetobacter xylinus NCIM 2526 for bacterial cellulose production | |
| US6162635A (en) | Enzyme-producing strain of Bacillus bacteria | |
| JPH02119780A (ja) | バチラス スリンギエンシスの形質転換 | |
| CN113801799A (zh) | 酵母菌sll12及其在制备控制枣果实采后病害的生物防治剂中的应用 | |
| O'Brien et al. | The nutritional requirements for germination and out-growth of spores and vegetative cell growth of some aerobic spore forming bacteria | |
| Gurumurthy et al. | Cyanoxanthomycin, a Bacterial Antimicrobial Compound Extracted from Thermophilic Geobacillus sp. Iso5. | |
| CN115851476B (zh) | 一株水稻根内生高地芽孢杆菌258r-7及其生物制剂与应用 | |
| Kelner | Mutation in Streptomyces flaveolus induced by X-rays and ultraviolet light | |
| PL90102B1 (pl) | ||
| US6171847B1 (en) | Enzyme-producing strain of Bacillus bacteria | |
| Gemmell et al. | The physiological characters and flagellar arrangement of motile homofermentative lactobacilli | |
| Young | Characteristics of an abortively disporic variant of Bacillus cereus | |
| Pereg | Azospirillum Cell aggregation, attachment, and plant interaction | |
| Bakli et al. | Isolation of fluorescent Pseudomonas spp. strains from rhizosphere agricultural soils and assessment of their role in plant growth and phytopathogen biocontrol | |
| Mead | A medium for the isolation of Streptococcus faecalis, sensu strictu | |
| RU2783426C1 (ru) | Штамм бактерий Bacillus subtilis BS2017 ВКПМ B-13389 " ингибитор роста фитопатогенных грибов | |
| Abbasli | Morpho-cultural and physiological characteristics of bacteria isolated from some thermal springs of the republic of azerbaijan | |
| JPH04287686A (ja) | 無胞子性菌株バシラス・サチリス ｓｍｓ２７５ | |
| Chebotar et al. | Use of reporter gus-gene to study the colonization of rice roots by Azospirillum lipoferum | |
| Ali et al. | ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF PSEUDOMONAS FLUORESCENS STRAINS FROM THE DIFFERENT REGIONS OF CHAKRATA, JAUNSAR-BAWAR, UTTARAKHAND | |
| CN116555091B (zh) | 一株耐盐性黏细菌及其应用 |